ENZIMAS
• ENZIMAS
• EFECTO DE LA TEMPERATURA Y DEL PH EN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.
ENZIMAS
• Todas las reacciones orgánicas que tienen lugar en los sistemas biológicos necesitan un catalizador.
• La mayor parte de los catalizadores biológicos son enzimas, las cuales son proteínas globulares que
aumentan la velocidad de una reacción.
• Una enzima no afecta la constante de equilibrio de una reacción y no puede ocasionar un cambio
químico desfavorable; una enzima únicamente actúa para disminuir la energía de activación para una
reacción, por lo que hace que la reacción suceda más rápidamente.
• Son comunes los aumentos de velocidad de millones de veces y las enzimas glucosidasa que
hidrolizan a los polisacáridos incrementan la velocidad de reacción por un factor de más de 10 17
• A diferencia de muchos de los catalizadores que los químicos utilizan en el laboratorio, las enzimas
usualmente son específicas en su acción .
• Con frecuencia una enzima únicamente catalizará un a sola reacción de un único compuesto, llamado sustrato
de la enzima.
• Por ejemplo, la enzima amilasa, que se encuentra en el tracto digestivo humano, sólo cataliza la hidrólisis del
almidón para producir glucosa; la celulosa y otros polisacáridos no son afectados por la amilasa.
• Otras operan en un intervalo de sustratos. Por ejemplo, la papaína, una proteína globular de 212 aminoácidos
aislada a partir del fruto de la papaya, cataliza la hidrólisis de muchos tipos de enlaces peptídicos. Esta
habilidad para hidrolizar enlaces de péptidos lo que hace que la papaína sea útil como un ablandador de carne
y como un limpiador para los lentes de contacto.
• El reactivo de una reacción que se cataliza por enzimas se llama sustrato.
La enzima se enlaza al sustrato en una región llamada sitio activo.
• Todos los pasos de enlace y de ruptura de la reacción tienen lugar el
sustrato en particular en su sitio activo.
• Las enzimas son específicas para el sustrato y catalizan la reacción.
• No todas las enzimas tienen el mismo grado específico. Algunas son
específicas para un solo compuesto y no toleran la más mínima variación
en la estructura, mientras que otras catalizan la reacción de una familia
entera de compuestos con estructuras similares.
• El carácter específico de una enzima para su sustrato es un ejemplo del
fenómeno conocido como reconocimiento molecular, o sea, la capacidad
de una molécula para reconocer a otra.
• El carácter específico de una enzima resulta de la cadena lateral de aminoácidos
(-sustituyentes) que está en el sitio activo.
• Por ejemplo, una cadena lateral de aminoácido de carga negativa puede
enlazarse con un grupo de carga positiva en el sustrato, una cadena lateral de
aminoácido con un donante de puente de hidrógeno puede enlazarse con un
receptor en el sustrato, y una cadena lateral de aminoácido hidrofóbica puede
asociarse con un grupo hidrofóbico en el sustrato.
• Las enzimas funcionan a través de una vía que comprende la formación inicial de un
complejo enzima-sustrato E · S, una conversión química multietapa de la enzima unida
al sustrato en la enzima unida al producto E · P y la liberación final del producto a partir
del complejo .
• La constante de rapidez global para la conversión del complejo E · S en los
productos E + P se llama número de recambio debido a que representa el número
de moléculas del sustrato que la enzima convierte en producto por unidad de tiempo
y es típico un valor de casi 103 por segundo aunque la anhidrasa carbónica puede
alcanzar valores arriba de 600 ,000 .
Los factores más importantes que contribuyen a la extraordinaria capacidad catalítica de
las enzimas son:
• Los grupos reactivos se unen en el sitio activo en la orientación adecuada para la
reacción.
• Ciertas cadenas laterales de aminoácidos de la enzima sirven de catalizadores. Se
colocan cerca del sustrato precisamente donde se necesitan para la síntesis.
• La cadena lateral de aminoácidos puede estabilizar los estados de transición lo que
facilita su formación.
DIAGRAMA DE ENERGÍA PARA UN PROCESO
CATALIZADO POR UNA ENZIMA
Las enzimas se clasifican en seis categorías dependiendo del tipo de reacción que
catalizan.
a. Las oxidorreductasas catalizan oxidaciones y reducciones;
b. Las transferasas catalizan la transferencia de un grupo de un sustrato a otro;
c. Las hidrolasas catalizan las reacciones de hidrólisis de ésteres, amidas y sustratos
relacionados;
d. Las liasas catalizan la eliminación o la adición de una molécula pequeña como H2O
desde o hacia un sustrato;
e. Las isomerasas catalizan isomerizaciones;
f. Las ligasas el enlace entre dos moléculas, frecuentemente acopladas con la
hidrólisis de ATP.
El nombre sistemático de una enzima tiene dos partes, terminando en -asa. La primera
parte identifica el sustrato de la enzima y la segunda parte identifica su clase. Por ejemplo,
la hexosa quinasa es una transferasa que cataliza la transferencia de un grupo fosfato del
ATP a una azúcar hexosa.
COENZIMAS Y VITAMINAS
• Además de su parte proteínica, la mayor parte de las enzimas también
contienen una pequeña parte no proteínica llamada cofactor. Un cofactor
puede ser un ion in orgánico, como zn2 + , o una molécula orgánica
pequeña, llamada coenzima. Una coenzima no es un catalizador pero es
un reactivo que experimenta un cambio químico durante la reacción y
requiere una etapa adicional para regresar a su estado inicial.
• Los cofactores ayudan a las enzimas a catalizar reacciones que no se
pueden catalizar exclusivamente por las cadenas laterales de aminoácidos
de la enzima.
• Las enzimas que requieren una coenzima para catalizar una reacción unen
tanto el sustrato como la coenzima en el sitio activo.
• Las coenzimas son derivados de compuestos orgánicos comúnmente conocidos como vitaminas.
• Una vitamina es una sustancia que el cuerpo no puede sintetizar, pero que es necesaria en pequeñas
cantidades para la función normal del organismo.
• El cuerpo sintetiza la coenzima a partir de las vitaminas.
• Los primeros estudios nutricionales dividieron las vitaminas en dos clases: vitaminas solubles y
vitaminas insolubles en agua.
• Las vitaminas A, D, E y K son insolubles.
• La vitamina K es la única insoluble que actualmente se sabe es precursora de una coenzima.
• Todas las vitaminas solubles en agua, excepto la vitamina C, son precursoras de coenzimas.
EFECTO DE LA TEMPERATURA Y DEL PH EN LA
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA.
• Las enzimas disminuyen la energía de activación de una
reacción, es decir, la cantidad de energía necesaria para que
ocurra una reacción. Logran esto al unirse a un sustrato y
sostenerlo tal manera que permite que la reacción ocurra
más eficientemente.
• La actividad de una enzima describe qué tan rápido ésta
cataliza la reacción que convierte un sustrato en producto.
Esta actividad depende en gran medida de las condiciones
de la reacción, que incluyen temperatura, ph, concentración
de la enzima y concentración del sustrato.
TEMPERATURA
• Las enzimas son muy sensibles a la temperatura.
• A bajas temperaturas, la mayor parte de las enzimas muestra poca actividad porque no
hay suficiente cantidad de energía para que tenga lugar la reacción catalizada.
• A temperaturas más altas, la actividad enzimática aumenta a medida que las moléculas
reactantes se mueven más rápido para generar más colisiones con las enzimas.
• La mayoría de las enzimas humanas son más activas a temperatura óptima, que es de
37°C, o temperatura corporal.
• A temperaturas superiores a 50°C, la estructura terciaria, y por ende la forma de la
mayor parte de las proteínas, se destruye, lo que causa una pérdida de actividad
enzimática. Por esta razón, el equipo en los hospitales y laboratorios se esteriliza en
autoclaves donde las temperaturas altas desnaturalizan las enzimas que existen en las
bacterias dañinas.
• Una fiebre corporal alta puede ayudar a desnaturalizar las enzimas existentes en las bacterias que causan la
infección.
• Ciertos microorganismos, conocidos como termófilos, viven en ambientes donde las temperaturas varían de
50°C a 120°C.
• Para poder sobrevivir en estas condiciones extremas, los termófilos deben tener enzimas con estructuras
terciarias que no se destruyen por dichas altas temperaturas.
• Algunas investigaciones demuestran que sus enzimas son muy similares a las enzimas ordinarias, excepto
que contienen más arginina y tirosina. Estos leves cambios permiten a las enzimas de los termófilos formar
más enlaces por puente de hidrógeno y puentes salinos que estabilizan sus estructuras terciarias a altas
temperaturas, y resisten el desdoblamiento y la pérdida de actividad enzimática.
PH
• Las enzimas son más activas a su pH óptimo, que mantiene la
estructura terciaria adecuada de la proteína.
• Si un valor de pH está arriba o abajo del pH óptimo, se alteran
las interacciones de los grupos R, lo que destruye la estructura
terciaria y el sitio activo. Como resultado, la enzima ya no puede
unirse a un sustrato de manera adecuada y no ocurren
reacciones.
• Si se revierte un pequeño cambio en el pH, una enzima puede
recuperar su estructura y actividad. Sin embargo, grandes
variaciones respecto del pH óptimo destruyen de manera
permanente la estructura de la enzima.
• Las enzimas en la mayor parte de las células humanas tienen valores de pH óptimos a
un pH fisiológico de más o menos 7.4.
• Sin embargo, las enzimas en el estómago tienen un pH óptimo bajo porque hidrolizan
las proteínas en el pH ácido del estómago.
• Por ejemplo, la pepsina, una enzima digestiva que se encuentra en el estómago, tiene
un pH óptimo de 1.5 - 2.0. Entre comidas, el pH en el estómago es de 4 o 5, y la pepsina
muestra poca o ninguna actividad digestiva. Cuando el alimento entra al estómago, la
secreción de HCl baja el pH a aproximadamente 2, lo que activa la pepsina.
CONCENTRACIÓN DE ENZIMAS Y
SUSTRATOS
• En cualquier reacción catalizada, el sustrato debe unirse
primero con la enzima para formar el complejo enzima-
sustrato.
• Para una concentración de sustrato particular, un aumento en
la concentración enzimática aumenta la velocidad de la
reacción catalizada.
• A concentraciones enzimáticas más altas, más moléculas
están disponibles para unirse al sustrato y catalizar la
reacción.
• Mientras la concentración de sustrato sea mayor que la concentración
de la enzima, hay una relación directa entre la concentración de la
enzima y la actividad enzimática.
• En muchas reacciones catalizadas por enzimas, la concentración del
sustrato es mucho mayor que la concentración de la enzima.
• Cuando la concentración de enzima se mantiene constante, la adición
de más sustrato aumentará la velocidad de la reacción. Si la
concentración del sustrato es alta, puede saturar todas las moléculas de
la enzima.
• Entonces la velocidad de la reacción alcanza su máximo y la adición de
más sustrato no aumenta más la velocidad de la reacción
CINÉTICA ENZIMÁTICA
• La cinética enzimática se encarga de estudiar las
reacciones químicas de las enzimas desde el punto de vista
dinámico, es decir, de cómo ocurren bajo ciertas
condiciones controladas en laboratorio, por ejemplo, la
concentración de enzima, de sustrato, diferentes valores de
ph o temperatura, etc. Todo esto con la finalidad de
comprender y predecir el comportamiento de las enzimas
dentro de la célula viva o en un organismo completo.
• Cuando el sustrato se encuentra a baja concentración, la
velocidad de reacción es lenta, esto se debe a que hay
muchas moléculas de enzima que no llevan a cabo la
reacción química porque no hay sustrato disponible.
• Conforme aumenta la concentración de sustrato, también
aumenta la velocidad de la reacción, ya que al existir más
sustrato disponible hay más moléculas de la enzima que
pueden llevar a cabo la reacción química.
• Cuando el sustrato se encuentra a muy altas
concentraciones la velocidad de la reacción ya no aumenta
considerablemente, debido a que todas las moléculas de
enzima tienen sus sitios activos ocupados llevando a cabo
la reacción, por lo tanto la velocidad ya no puede ser más
rápida.
• A partir de este tipo de gráficas obtenemos tres valores que nos determinan cómo es la cinética
enzimática, son:
• La velocidad máxima nos indica el límite de velocidad
que puede alcanzar una enzima cuando se encuentra
saturada de sustrato.
• Si dividimos a la mitad esta velocidad máxima
obtenemos 1/2 de vmax, y este valor nos permite
conocer la concentración de sustrato al cual la enzima
está trabajando a la mitad de su máxima velocidad, lo
denominamos km.
• La km es un indicativo de la afinidad que la enzima
tiene por su sustrato: A valores bajos de km mayor
afinidad, y a valores altos de km tenemos una menor
afinidad de la enzima por el sustrato.
• Se denomina ecuación de Michaelis-Menten:
• Donde V representa la velocidad de la reacción, Vmax es el valor de la velocidad
máxima, [S] es la concentración de sustrato y km es la constante de Michaelis-Menten. Con
esta ecuación podemos evaluar la velocidad de reacción de una enzima, pero también
podemos predecir su comportamiento al cambiar la concentración de sustrato.
• Cuando la concentración de sustrato es baja, la
velocidad de la reacción es proporcional a la
concentración de sustrato (a mayor
concentración de sustrato, mayor velocidad de
la reacción química) y entonces decimos que la
reacción es de primer orden.
• Por otro lado, cuando la concentración de
sustrato es muy alta y la enzima se encuentra
saturada, entonces la velocidad de la reacción
ya no depende de la cantidad de sustrato,
decimos que la reacción es de orden cero. Bajo
estas condiciones, la velocidad de la reacción
sólo depende de la enzima y estamos en su
velocidad máxima.
