UNAMBA-FMVZ INMUNOLOGÍA VETERINARIA
Practica 7
Pruebas cruzadas,
compatibilidad sanguínea en
perros (dog cross matching).
I. INTRODUCCIÓN.
En los perros se conocen más de una docena de grupos sanguíneos. Esos grupos han
sido llama dos antígenos eritrocitarios del perro (DEA, del inglés dog erythrocyte
antigens), tienen una nomenclatura numérica, la cual denota cual sistema de antígenos
está presente en los eritrocitos del perro. A diferencia de los primates humanos y
felinos, los perros parecen no tener anticuerpos naturales contra otros grupos
sanguíneos.
Debido a esto, es poco probable que la administra ción inicial de una transfusión
sanguínea en un perro traiga graves consecuencias debido a la misma. Sin embargo, una
vez que un perro ha recibido una transfusión, éste deberá ser revisado para comprobar la
compatibilidad sanguínea en subsecuentes transfusiones. Los anticuerpos con tra grupos
sanguíneos extraños pueden desarrollarse poco después de una transfusión inicial y la
probabilidad de una reacción de rechazo se incrementará gradualmente. Los perros con
los gru pos sanguíneos DEA 1.1 y DEA 1.2 negativos se consideran donadores
universales. El objetivo principal de una prueba de compatibilidad sanguínea
(crossmatching) es examinar incompatibilidades entre eritrocitos de un perro donador y
los anticuerpos en el plasma (o suero) de un perro receptor (compatibilidad mayor o
major crossmatch).
La compatibilidad menor (minor cross match) examina la incompatibilidad entre los
anticuerpos del plasma del animal donador y los eritrocitos del perro receptor. Cuando
una sangre que resulta ser incompatible se administra por accidente a un animal, sobre
todo felinos, pueden ocurrir varias reacciones indeseables:
II. OBJETIVO.
Realizar pruebas de compatibilidad sanguínea en perros (crossmatching) para
evaluar la compatibilidad entre donadores y receptores de sangre. El objetivo es
identificar posibles incompatibilidades que podrían provocar reacciones
adversas durante transfusiones, asegurando un tratamiento transfusional seguro y
eficaz.
III. MATERIALES
Sangre de perro donador en tubo Vacutainer con anticoagulante (tapón
lavanda).
Perillas de goma.
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Tubos de ensayo.
Sangre de perro receptor en tubo Vacutainer con anticoagulante.
SSF al 0.85%.
Centrifuga refrigerada.
Pipetas Pasteur.
Marcador indeleble.
IV. PROCEDIMIENTO
1) Colectar 2 mL de sangre de un animal receptor y de un donador en tubos
Vacutainer con anticoagulante.
2) Centrifugar las muestras de sangre a 1 000 x g/ 1 min/ 4 ºC.
3) Remover el plasma de ambos tubos con pipetas Pasteur y depositarlos en tubos
de ensayo limpios previamente identificados (donador o receptor).
4) Con los eritrocitos de cada animal hacer una suspensión al 2% en SSF (0.1 mL
de eritroci tos en 5 mL de SSF). Mezcla con cuidado la suspensión de
eritrocitos.
5) Centrifugar los tubos con los eritrocitos a 1 000 x g/ 1 min/ 4 ºC.
6) Resuspender los eritrocitos con SSF y lavarlos por centrifugación tres veces
más.
7) Resuspender los eritrocitos a la misma concentración.
8) Tomar dos gotas del plasma del perro receptor con la pipeta Pasteur y
depositarlas en un tubo de ensayo. Agregar dos gotas de la suspensión de
eritrocitos del donador (esto se cono ce como compatibilidad mayor- major
crossmatch).
9) Tomar dos gotas de los eritrocitos del perro receptor y depositarlas en un tubo de
ensayo. Agregar dos gotas del plasma del donador (esto se conoce como
compatibilidad menor minor crossmatch).
10) Incubar ambos tubos a temperatura ambiente durante 30 a 60 min.
11) Observar la reacción de cada tubo.
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VI. RESULTADOS
Observar cada tubo de ensayo para detectar signos de incompatibilidad sanguínea, como la formación
de grumos (aglutinación) en el fondo. También se examina la formación de hemólisis como indicador
de incompatibilidad. En caso de dificultad para distinguir la aglutinación de la sedimentación normal
de los eritrocitos, se coloca una gota de la reacción en un portaobjetos y se examina
microscópicamente a 40x para observar la aglutinación.
.
VII. CONCLUSIÓN
En conclusión, la observación de aglutinación y hemólisis en los tubos de
ensayo es crucial para evaluar la compatibilidad sanguínea en perros. La técnica
microscópica a 40x proporciona una evaluación más detallada cuando la
aglutinación no es clara a simple vista. Estas medidas son esenciales para
garantizar transfusiones seguras y efectivas en la práctica clínica veterinaria.
VIII. BIBLIOGRAFIA
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Clinics of North America: Small Animal Practice, 35(6), 1305-1323.
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