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CMP01 - Manual Procedimientos Parasitologia

Este manual presenta los procedimientos para realizar análisis parasitológicos de muestras fecales. Describe los objetivos, alcance, responsabilidades, definiciones, reactivos, equipos, métodos de muestreo, análisis, procesamiento de resultados y control de calidad. El objetivo principal es diagnosticar de forma estandarizada, eficiente y eficaz la presencia o ausencia de parásitos u otros hallazgos en las muestras fecales mediante técnicas confiables.
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CMP01 - Manual Procedimientos Parasitologia

Este manual presenta los procedimientos para realizar análisis parasitológicos de muestras fecales. Describe los objetivos, alcance, responsabilidades, definiciones, reactivos, equipos, métodos de muestreo, análisis, procesamiento de resultados y control de calidad. El objetivo principal es diagnosticar de forma estandarizada, eficiente y eficaz la presencia o ausencia de parásitos u otros hallazgos en las muestras fecales mediante técnicas confiables.
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MANUAL DE PROCEDIMEINTOS EN PARASITOLOGIA

2022
SERVICIO NACIONAL DE
SALUD

Laboratorio Clínico CODIGO:CMP01


VERSIÓN: Junio 2017
Hospital Regional Juan Pablo TÍTULO: MANUAL DE PROCEDIMENTOS
DE PARASITOLOGIA
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INDICE

0. INTRODUCCION
1. OBJETIVO
2. ALCANCE
3. RESPONSABILIDADES
4. SIGNIFICACIÓN CLÍNICA
5. DEFINICIONES Y TERMINOLOGIAS
5.1 Parasitología
5.2 Parasito
5.3 Protozoarios
5.4 Trofozoito
5.5 Quiste
5.6 Larva
5.7 Helmintos
5.8 Heces Fecales
5.9 Dispepsia
5.10 Coprológico
5.11 Plateminto
5.12 Huevos de Parasitos
5.13 Frotis Directo
5.14 Entero Parasito
5.15 Cyclospora Cayetanensis
5.16 Criptosporidium Parvum
5.17 Coccidios

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5.18 Isospora Belli


5.19 Áscaris Lumbricoides
5.20 Trichuris Trichiura
5.21 Uncinarias
5.22 Enterobius Vermicularis
5.23 Nematodo
5.24 Hymenolepis Nana
5.25Hymenolepis Diminuta
5.26 Proglotide
5.27 Strongyloides Stercolaris.
6. FUNDAMENTO O PRINCIPIO DE LA PRUEBA
6.1 Coproanálísis
6.2 Objetivo
6.3 Alcance
6.4 Reactivo
6.5 Procedimiento
7. DETERMINACION DE ENTOROBIUS VERMICULARIS
7.1 Objetivo
7.2 Alcance
7.3 Significación Clínica
7.4 Método
7.5 Fundamento o Principio de Prueba
7.6 Reactivo

8. REACTIVOS Y OTROS PRODUCTOS


8.1 Reactivos
8.2 Materiales de control

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8.3 Patrón o Calibrador

9. EQUIPOS Y RECURSOS UTILIZADOS

10. MUESTRA
11.1Materias Fecales (Obtención y Recolección)
11.2Conservación y Manejo

11. MODO OPERATIVO


12.1Encendido del Equipo
12.2Mantenimiento diario del Equipo
12.3Calibracion
12.4Consideraciones medio ambiente, precaución y eliminación de residuos.
12.5 Análisis o Procedimientos
12.6 Limite, detención o cuantificación y de linealidad del método.
12.7 Notas y códigos de Error
12.8 Solución de problemas

12. PROCESAMIENTO DE LOS RESULTADOS


13.1 Registro de los datos
13.2Calculo de los Resultados

13. CONTROL DE LA CALIDAD ANALITICA


14.1Control interino de la Calidad

14. VALIDACION

15. RESULTADOS ANALITICOS

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16. FORMULARIOS Y REGISTROS

17. REFERENCIAS

18. ANEXOS

0. INTRODUCCION

El estudio en el laboratorio de muestras fecales de origen humano permite obtener datos


con los cuales determinar:

 Situación del funcionalismo digestivo.


 Infecciones intestinales causadas por bacterias, virus y hongos.
 Infecciones por parásitos intestinales o de órganos anejos.

Los parásitos intestinales son protozoos o helmintos que en sus estados evolutivos pueden
encontrarse en las heces, secreciones, fluidos y frotis perianales de las personas infestadas.

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La importancia de contar con un Manual de Procedimiento de coproanálisis es con la


finalidad de estandarizar los procesos y por medio de esté obtener procedimiento eficaces,
eficiente y de calidad en las identificaciones de estas infecciones, la cual conllevan a
resultado oportuno que asegurar la pronta recuperación del paciente.

La identificación de protozoos intestinales parásitos del ser humano se basa en el


reconocimiento de sus estadios de quites, de trofozoítos o de ambas.

1. OBJETIVO

Diagnosticar la presencia o ausencia de una parasitosis intestinal, grasas, levaduras,


glóbulos rojos, glóbulos blancos, bacterias, fibras y sangre oculta en una muestra de
heces a investigar de una forma estandarizada, eficiente y eficaz, utilizando
herramientas confiables como la descripción de este procedimiento.

2. ALCANCE

El alcance abarca a la muestra con sus órdenes médicas, procedentes de las


consultas, emergencias y pacientes externos.

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3. RESPONSABILIDADES

Es responsabilidad de la encargada de la unidad de parasitología y toda Bioanalista


que se encuentre en esta unidad de asegurar la calidad de los resultados.

4. SIGNIFICACIÓN CLÍNICA

Este análisis se utiliza para demostrar la presencia de parasitosis intestinal en las


diferentes etapas del ciclo de vida de los parásitos intestinales como protozoarios,
helmintos, amebas y gusanos.

La presencia de cada uno de los parásitos crea sus propias enfermedades. Ej.
Presencia de quiste o trofozoítos de amebas es amebiasis, etc.

La presencia de sangre oculta es un estudio que se realiza para detectar la presencia


de sangre oculta en las heces. Esta sangre puede proceder de cualquier nivel del tubo
digestivo. La sangre oculta en heces es con frecuencia el único signo de alarma de
enfermedades colo-rectales.

5. DEFINICIONES Y TERMINOLOGIAS

5.1 Parasitología: es una rama de la biología que estudia el fenómeno del parasitismo.

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5.2 Parásito: Se aplica al organismo que vive en el interior o en la superficie de otro de


distinta especie y se alimenta de las sustancias que elabora este último, causándole un
daño.
5.3 Protozoarios: Ser unicelular.
5.4 Trofozoito: Formas metabólicamente activas que se nutren del huésped.
5.5 Quiste: Forma de resistencia de los protozoos, los cuales se rodean de una membrana
dura e impermeable (formas latentes).
5.6 Larva: Estado evolutivo de algunos seres vivos como los helmintos y los artrópodos,
en quienes aún no se han desarrollado los aparatos genitales.
5.7 Helmintos: Son unos microorganismos pluricelulares complejos que tienen forma
alargada y simetría bilateral. Su tamaño es mucho mayor que el de los parásitos
protozoarios y habitualmente son macroscópicos, con un tamaño que oscila de menos
de 1 mm a l m o más. La superficie externa de algunos helmintos se recubre de una
cutícula protectora a celular y que puede ser lisa o bien presentar crestas, espinas o
tubérculos.
5.8 Heces Fecales: Mezcla de productos de excreción y secreción que se elimina por el
intestino.
5.9 Dispepsia: Se define como cualquier dolor o molestia en la parte central del abdomen
superior.

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5.10 Coprológico: se basa en la identificación microscópica, en muestras fecales del


paciente, de los elementos parasitarios presentes en ellas.
5.11 Platelminto: Gusano o helminto de forma asentada.

5.12 Huevos de Parásitos: Producto de la fecundación con el potencial de desarrollar un


nuevo ser.
5.13 Frotis directo: se refiere a la preparación de una suspensión de alrededor de 2 mg
de heces fresca en agua o solución fisiológica que se utiliza para la determinación de
parásitos.
5.14 Entero parasito: Parasito que tiene de habitad el tubo digestivo.
5.15 Cyclospora cayetanensis: Un protista del filo Apicomplexa que causa la
enfermedad de ciclosporosis en los seres humanos y tal vez en otros primates.
5.16 Criptosporidium parvum: Agente infeccioso protozoal una de tantas especies que
causan criptosporidosis.
5.17 Coccidios: Son parásitos protozoos (organismos unicelulares) que se multiplican en
el tracto intestinal de perros y gatos, solo detectables en análisis de material fecal,
responsables de una temida enfermedad conocida como " Coccidiosis”.

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Isospora belli: Es un protista del filo Apicomplexa que causa la enfermedad de isoporosis en
los seres humanos y otros animales.
5.19 Áscaris lumbricoides: Lombriz Intestinal.
5.20 Trichuris trichiura: Tricocéfalo.
5.21 Uncinarias: Anquilostomiasis
5.22 Enterobius vermicularis: Oxiuro (Bichos)
5.23 Nematodo: Gusano o helminto de forma cilíndrica
5.24 Hymenolepis nana: Tenia Enana.
5.25 Hymenolepis diminuta: Tenia.
5.26 Proglotide: Segmento o anillo de las tenías y que puede ser inmaduro, maduro o
grávido, según el desarrollo de sus aparatos genitales.
5.27 Strongyloides stercolaris: Anguililla Intestinal.

6. FUNDAMENTO O PRINCIPIO DE LA PRUEBA.

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6.1 COPROANÁLISIS
6.2 Objetivo
Identificar protozoos y helmintos en pacientes infectados.
6.3 Alcance
El alcance abarca a la muestra con sus órdenes médicas, procedentes de las consultas,
emergencias y pacientes externos.
6.4 Reactivo
7. Solución fisiológica (NACl al 0,85%)
8. Solución de lugol
9. Porta objeto 7.5 x 2.5 cm
10. Cubre objetos 22x22 mm
11. Aplicadores de madera frasco con desinfectante (cloro al 10%) para descartar
material.

6.5 Procedimiento
 Examen directo en solución salina fisiológica y en solución de lugol.

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 En solución fisiológica se reconocen los trofozoítos de protozoos y otros


estadios de diagnóstico de helmintos y protozoo y elementos que aparecen
en situaciones anormales.
 En solución lugol se colorean en forma temporal trofozoítos y quistes de
protozoos. Inmovilizar larvas.
 Cuando el parasito es un protozoario, las muestras se tiñen y se examinan al
microscopio, donde se pueden detectar los trofozoítos (formas
metabólicamente activas que se nutren del huésped) o, quistes (formas
latentes).Cuando el agente infeccioso es un helminto, el diagnostico se basa
en el hallazgo de huevos del gusano o de larvas en heces, micro filarias en
sangre, gusanos adultos en los tejidos subcutáneos o en el aparato digestivo.
 La preparación en fresco de yodo es útil sobre todo para colorear el
glucógeno y visualizar los núcleos en quistes y protozoos.

7. DETERMINACIÓN DE ENTEROBIUS VERMICULARIS

7.1 Objetivo

Diagnosticar la presencia o ausencia del Enterobius vermicularis en una muestra


a investigar.

7.2 Alcance

El alcance abarca a la muestra con sus órdenes médicas, procedentes de las


consultas, emergencias y pacientes externos.

7.3 Significación Clínica

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Este análisis se utiliza para demostrar la presencia del Enterobius vermicularis


una parasitosis intestinal. Esta una parasitosis cosmopolita frecuente en grupos
escolares e internados.

Este parasito suelen encontrarse en los pliegues cutáneos que rodean del ano y
que raras veces aparecen en las heces fecales.
7.4 Método: GRAHAM.
Es un método en el cual se coloca una cinta adhesiva en la región perianal del
paciente.
7.5 Fundamento o Principio de Prueba
El diagnostico de los huevos de oxiuros se puede facilitar si le agregamos 1 gota de
tolueno en presencia de solución de yodo.

7.6 Reactivos y otros productos


 Solución de yodo para oxiuros.
 Tolueno.
- Preparación de la solución:

 Ácido acético glacial 20 ml.


 Yoduro de potasio 0.8 gr.
 Yoduro metálico 0.4 gr.
 Solución de formol al 10%.

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9. REACTIVOS Y OTROS PRODUCTOS


9.1 Reactivos:
 Solución fisiológica (NACl al 0,85%)
 Solución de Lugol

 Porta objeto 7.5 x 2.5 cm


 Cubre objetos 22x22 mm
 Aplicadores de madera frasco con desinfectante (cloro al 10%) para descartar
material.

 Control positivo Hemopost

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 Tarjeta de Pruebas
 DS Solución de Revelado
 Solución de Yodo

 Tolueno

 Ácido Acético Glacial 20ml.


 Yoduro de Potasio 0.8 gr.

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 Yoduro Metálico 0.4 gr.


 Solución de Formol al 10%

 Tarjeta de Pruebas
 DS Solución de Revelado
9.2 Materiales de Control
Control Positivo HEMOSPOT.
9.3 Patrón o Calibrador
Los equipos deben ser revisados cada 6 meses o cuando necesiten mantenimiento.

10. EQUIPOS Y RECURSOS UTILIZADOS

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 Microscopio

 Gasa
 Aplicadores

11. MUESTRA

11.1 Materias Fecales (Obtención y recolección)


La muestra de heces debe ser recolecta en un envase de boca ancha y limpio.

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11.2 Conservación y Manejo

La muestra debe de procesarse antes de 30 minutos luego de la obtención. Si esta se


fuera a guardar debe conservarse con formol al 10%. Luego de ser procesada esta se
descartara.

12. MODO OPERATIVO


12.1 Encendido del Equipo

Encender el microscopio en la parte lateral izquierda.

12.2 Mantenimiento diario del equipo


 Quitar la cubierta protectora.

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 Limpiar el microscopio con una solución jabonosa.


 Limpiar los oculares con un clínex o gasa.

12.3 Calibración
Estos equipos deben ser revisados cada 6 meses o cuando necesiten
mantenimiento.
12.4 Consideraciones medio ambiente, precaución y eliminación de
residuos
Los envases con heces serán eliminados en funda rojas herméticamente tapados, al
igual que los aplicadores y cubre objetos utilizados. Estos residuos irán a la unidad
de incineración.

Los utensilios reutilizable que como porta objetos estos serán depositados en cloro al
10% por un periodo de 30 minutos, esta solución es descartable en la tubería.

El yodo según la ficha de seguridad del mismo (MSDS) asegura que el mismo no
ocasiona daño a la ecología por lo tanto puede ser desechado por tubería. (Para más
información ver el mismo).

12.5 Análisis o procedimientos

El hallazgo o ausencia de los parásitos mediante la técnica conllevara al reporte por


campo de los mismos.
 Rotular la tarjeta con la identificación del paciente.

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 Abrir la ventana de aplicación rotulada de la tarjeta de prueba.


 Mezcle con un aplicador de madera y unte la ventana de la tarjeta de prueba A y
B.
 Espere que la muestra se seque completamente.
 Dar la vuelta a la tarjeta de prueba.
 Abrir la ventana de resultados y agregar una gota de la solución reveladora a la
ventana RA y RB respectivamente.
 Observe el cambio de color exactamente a los dos minutos.
 Si uno de los campos tiene un color azul, la prueba es positiva para sangre
oculta.

12.6 Limite detención o cuantificación y de linealidad del método

La prueba Hemospot detecta la presencia de hemoglobina lo más bajo 5 mg/dl en heces.

12.7 Notas y código de error


 Esperar más de una hora para procesar la muestra
 Preparación muy gruesa o muy fina
 Demasiada fibra, arenilla, burbujas
 Demasiada iluminación, poca iluminación
 Solución de Lugol muy fuerte o muy diluida
 No examinar la preparación de forma sistemática
 Preparación reseca
 Informe incompleto

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 Muestra contaminada con orina


 Muestra en pañales desechables

Es un método que requiere numerosas manipulaciones de las heces.

12.8 Solución de problemas

 Procesar la muestra en un periodo de una hora.


 Preparar las muestra según lo indica el procedimiento
 Asegurar la calidad del Lugol
 Solicitar una muestra fresca y en el medio necesario.
 Completar el informe

13. PROCESAMIENTOS DE LOS RESULTADOS

13.1 Registro de los datos


Los resultados obtenidos por observación de los sedimentos son transcritos a los mapas
de trabajo y luego introducidos manualmente en al sistema operativo Labplus, el cual se
encarga de guardar los resultados por el tiempo establecido en el manual del SGC.

Luego de realizar el informe de los resultados estos se escriben en el libro de reporte.


(Estos resultados serán conservados como lo indica la Norma de calidad 2011, por un
periodo de 2 años).

13.2 Cálculo de los resultados

ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:


CARGO O INSTANCIA: Encargada CARGO O ESTANCIA: Encargada CARGO O ESTANCIA: Encargado
Unidad de Parasitología de Gestión de Calidad Servicios del Laboratorio

FECHA: 21/Junio/2022 FECHA: 21/Junio/2022 FECHA: 21/Junio/2022


FIRMA: __________________ FIRMA: __________________ FIRMA: __________________
SERVICIO NACIONAL DE
SALUD

Laboratorio Clínico CODIGO:CMP01


VERSIÓN: Junio 2017
Hospital Regional Juan Pablo TÍTULO: MANUAL DE PROCEDIMENTOS
DE PARASITOLOGIA
Pina Página 21 de 23

 La no coloración azul indica la usencia de sangre oculta en heces.


 Algún rastro de coloración indica la presencia de aproximadamente 5 mg/dl de
sangre oculta en heces.
 Una fuerte coloración azul indica la presencia significativa de más de 5 mg/dl de
sangre oculta en heces.

Ya finalizado la identificación de los parásitos o la ausencia se procede al reporte y


validación del mismo. Se confirma que el hallazgo corresponda al paciente.

14. CONTROL DE LA CALIDAD ANALÍTICA


Para asegurar la calidad se debe de verificar que la solución salina este limpia, sin
contaminación de bacterias, hongos o protozoos de vida libre y que la solución de
Lugol tenga la concentración adecuada y la conservación.

14.1 Control interno de la calidad


El control positivo del kit debe ser montado una vez al día para validar el fundamento
de las tarjetas de la prueba y los reactivos.

15. VALIDACION
No se observan elementos parasitarios en esta muestra.

16. RESULTADOS ANALITICOS

16.1 Rangos de valores a informar

ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:


CARGO O INSTANCIA: Encargada CARGO O ESTANCIA: Encargada CARGO O ESTANCIA: Encargado
Unidad de Parasitología de Gestión de Calidad Servicios del Laboratorio

FECHA: 21/Junio/2022 FECHA: 21/Junio/2022 FECHA: 21/Junio/2022


FIRMA: __________________ FIRMA: __________________ FIRMA: __________________
SERVICIO NACIONAL DE
SALUD

Laboratorio Clínico CODIGO:CMP01


VERSIÓN: Junio 2017
Hospital Regional Juan Pablo TÍTULO: MANUAL DE PROCEDIMENTOS
DE PARASITOLOGIA
Pina Página 22 de 23

Sangre oculta negativa.

17. FORMULARIOS Y REGISTROS

 Registro de mantenimientos equipos.


 Formulario de reporte de la unidad

18. REFERENCIAS

 Manual de Normas y Procedimientos en Parasitología, septiembre del 2001.


 Atlas de parasitología 5ta. Edición. Williams Rojas.

19. ANEXOS

Laminas para el Diagnostico de Parásitos Intestinales

ELABORADO POR: REVISADO POR: APROBADO POR:


CARGO O INSTANCIA: Encargada CARGO O ESTANCIA: Encargada CARGO O ESTANCIA: Encargado
Unidad de Parasitología de Gestión de Calidad Servicios del Laboratorio

FECHA: 21/Junio/2022 FECHA: 21/Junio/2022 FECHA: 21/Junio/2022


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