CAPÍTULO

16
Vías de señalización
que controlan la
. , , .
expres1on gen1ca

Una tarjeta de San Valentin molecular: un dominio extracelular dimerizado

del receptor del factor de crecim iento epidérmico (rojo, amarillo y verde)
unido a dos moléculas de factor de crecimiento epidérmico (magenta).
(Cones1a de J1aha1Sh1l

as señales extracelulares pueden tener efectos tanto a corto como ción. Dado el extenso papel de la transcripción génica en la mediación

L a largo plazo sobre las células. Los efectos a corto plazo habitual-
mente son desencadenados por la modificación de proteínas o
de enzimas existentes, como vimos en el Capítulo 15. Muchas señales
de aspectos críticos del desarrollo, el metabolismo y el movimiento,
no resulta sorprendente que las mutaciones en este tipo de vías de se-
ñalización provoquen muchas enfermedades humanas, incluyendo el
e>,,'t racelulares también afectan la expresión génica y así inducen cam- cáncer, la diabetes y enfermedades inmunitarias.
bios a largo plazo en la función celular. Los cambios a largo plazo in- La transcripción de genes se ve afectada por la estructura de la
cluyen alteraciones en la división y la diferenciación celular, tal como cromatina, modificaciones epigenéticas en las histonas y otras proteí-
ocurre durante el desarrollo y la determinación del destino celular. La nas nucleares y el complemento celular de factores de transcripción
producción corporal de los eritrocitos, los linfocitos y las plaquetas en y de otras proteínas (véase el Cap. 7). Estas propiedades determinan
respuesta a las citocinas es un buen ejemplo de cambios inducidos por qué genes de la célula pueden potencialmente transcribirse en cual-
señales en la expresión génica que influyen en la proliferación y la dife- quier momento dado; pensamos en estas propiedades de las células
renciación celular. Los cambios en la expresión génica también permi- como su "memoria", determinada por su historia y la respuesta a se-
ten que las células diferenciadas respondan a su ambiente, cambiando ñales previas. Resulta importante que muchos factores de transcrip-
su forma, su metabolismo o su movimiento. En las células del sistema ción centrales se mantengan en un estado inactivo en el citosol o el
inmunitario, por ejemplo, varias hormonas activan un tipo de factor núcleo y se act iven solamente en respuesta a señales externas, lo que
de transcripción (NF-KB) que finalmente impacta sobre la expresión de este modo induce la expresión de un conjunto de genes que son
de más de 150 genes implicados en la respuesta inmunitaria a la infec- específicos para este tipo celular.

CONTENIDO
---- 16,1 Receptores que activan las tirosincinasas 16.S Vías de señalización controladas por ubicuitinación:
proteicas 723 Wnt, Hedgehog y Nf-KB 752

16,2 La vía de la Ras/MAP cinasa 734 16.6 Vías de señalización controladas por la escisión
proteica: Notch/Delta, SREBP 760
16,3 Las vías de señalización de los fosfoinosítidos 745
16.7 Integración de las respuestas celulares a múltiples
16.4 Las serina-cinasas receptoras que activan Smad 748 vías de señalización 765
 F.n este .:apitulú, explora mos la, principales vías de seiializ . . .d d de proteín as de transdu cción de la _
ación lan y activan una d1vcrs 1 ª ., . d ¡ .
q ll(.: em pican las células parn afectar la c:xprcsión de los genes.
En los
_ d
que inclure n !actores e t ra nscripc10n localiza os en e cltosol (Figsena1,
. . , . _ · ih.
cucario ntc,, har aproximadamente: una docena de recepto res
muy con- 1a D ) Alguna s c111asas rece p to ras ta rnb1en act ivan pequen ..
as prote·
se rvado, de la superfi cie celular, y estos ac tivan varios tipos ' ·
"interr uptoras " que se unen al GTP' tales como la Ras ( l-tg. 16-la tna1 a.
de vías de . 'q)_
tran sducció n de las sefialcs intracelulares muy conser vadas. Mucha . . 11n en te los siete recepto res que se expand
s de Otros receptores, pnncip a ,
estas vías co nsisten en mt'.iltiples proteínas, pequeñ as molécu present ados en el Capit ulo IS, activa n las ~rote111as G" ~e mayor en
las intra- tamaño
celulares e io nes, tales corno el Ca1 ·, que, juntos, fo rm an un _ ( ¡:· 1( _1b) Ambos tipos de prote111as que se un
a cascada que se unen a Gl P 1g. ' ·
co mpleja. Dada esta co mplejidad, la seii alizació n celular puede
pare- a GTP pueden act ivar . teí nas cinasas que a su vez fosfonl. an múltiplen
pro . .
cer un tema abru111ador para aprend er por pri111era vez; los
múltiples ,
prote111as d ia' • cluyen los facto res de transc npc1ón , Muchas víae,
na, que 111
nombr es y la abrevia tura de las molécu las que aparezcan en . . s
cada vía d e trans d ucc1'ó n d ea¡ s sen- ales tales com o las activad as por Ras, implican
, , · .
pueden , de hecho, constit uir un desafío. El tema requiere un . .
estudio a vanas cmasas en ¡as cuales un a cinasa fosfon la. y, de este modo, activa
cuidadoso; sin embargo, cuando uno se familiariza con estas . . h 1'b ) ¡
vías, com- (u ocasion almente 111 e a ac t 1·v1'dad de otra cmasa.
prende en profundidad el modo en que los mecani smos de regulac , d sen -
ión En otras v1as e ,3 ¡1·zación ad icionales, en las cuales la unión de
co nt rolan una gra n diversidad de p rocesos biológicos. . d
un l1ga n o a un re cepto r desenc adena el dese nsarnblaj e de un com
Po r si111plicidad, las vías de transdu cción de las señales pueden ·
piejo multip roteico en el citosol, libera un_ factor de transcr
ser agrupa das en va rios tipos básicos, de acuerd o con la secuen _ip~ión que
cia de luego se transloca al núcleo (Fig. 16- 1c). Fmalrn ente, en el
ultimo tipo
event os intrace lulares. En un tipo de vía de transdu cción de común , la escisió n proteol ítica de un inhibid o r o el propio
las señales receptor
muy co mún ( Fig. 16- 1a), la unió n de ligando s a un recepto li bera un factor de transcr ipción activo, que luego viaja al
r desen- núcleo (Fig.
cadena la activación de una cinasa asociada a este. Esta cinasa 16- 1d). Mientr as que cada vía de señaliz ación tiene sus propias
puede suti-
ser un a pa rte intríns eca de la proteín a recepto ra o estar estrech lezas y distinc iones, cada una de ellas puede ser agrupa da
amente en uno de
unida al receptor. Con frec uencia, estas cinasas directa mente
fosfo ri- estos tipos básicos.

(a) Cinasa (b) Cinasa (c) Disociación (d) Escisió n de

asocia da citosól ica de la subuni dad la proteín a
a recepto r proteic a

o
Exterio r

~
º1 \ / : TP 1

<t®
1

®® fJ 1

...
1
Factor de Q ,,._
00
~
transcripción ~

Otras
proteínas Q®. -8®
~ º a \
\
1
1
diana ~ \ 1

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Citoso l
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1
Núcleo ', ,,,- J¡L,
,' 1
"f

~
Activación o l~
represión del gen
4
4
Recept ores RTKs GPCRs Wnt
Y vías Recept ores TGF-~ Notch/ Delta
cAMP!PKA/CREB Hedgehog
repres entativ as
Recept ores NF-kB
de citocin as
JAK-S TAT
Ras/MAP cinasa
FIGURA 16-1 Varios receptores comunes de la superfi
cie celular y en
vías de transducción de las señales. (a) Los dominios citosólic mente inhibe) la actividad de otra i
os de muchos fosforilan múltiples dianas r . c nasa. Muchas de las ci nasas de .
receptores contienen dominios de proteincinasas o están estrechamente estas v,as
aso- células, incluyendo los factp otedrcas que pueden ser diferentes en distintas
ciados con una cinasa citosólica; por lo general, las cinasas son activada
palmente los siete que se e ~s
0
unrón de un ligando seguido de la dimerización del recepto r. Algunas
s por la t· detranK rrpoon.
· ·· • ·
(b) Otros receptores, prrncr·
cinasas directamente fosforilan y activan factores de transcripción (D)
de estas de mayor tamaño que unenx GTP ren en en la b ·
mem rana, activan las prote1na s G,
proteína s de señalización Muchos de estos receptores también activan
u otras u otras protelna s de sen·al· . . ' Ias cuales a su vez activa n ci nasas
(e) v - • específicas
ñas proteínas "interruptores"que unen GTP, tales como la Ras (fJ). Muchas
peque- desensamblaje de un comrzacron . · arras vras de señalización involucran e1
vías 1
de transcrip ción que lue P eJo multiproteico en el citosol y liberan
de transducción de las señales, como aquellas activadas por la Ras, involucr un factor
a varias ci nasas en las cuales una fosforila y de este modo activa (u ocasion
an de señalización son irrevego 'blse transloc 1·
a a interior del núcleo. (d) Algunas vra's
al- . rs, es;
un receptor lrbera un facto d en muc hos casos, la escisión proteoh· · d
r e transcripción activo. trca e

7 22 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresi

ón génica
 • , na, lJU~
11
analizaremos en este capít ulo se han conservado du- residuos específicos de tirosina en las proteínas diana, por lo general en
. ¡ 1 ,·vnlución y operan casi del mismo modo en las moscas los
f,\ !l (l • el contexto de una secuencia lineal específica de aminoácidos en la cual
l
, )' los seres humanos. La homología básica que se exhibe entre está inserta la tirosina. Luego, las proteínas diana fosforiladas pueden
cus,n10• , .. . .
i.i; proteínas en estas_v1as le per111'.t1ó a los 111vest1gadores estudiarlas activar una o más vías de señalización. Esas vías son valiosas porque
en 011 •1 variedad de sistemas expenmentales. Por ejemplo, la proteína regula n la mayoría de los aspectos de la proliferación, la diferenciación,
de sciiali7;1ción secretada Hedgehog (Hh) y su receptor se identifica- la supervivencia y el metabolismo celular.
ron inicialmente en los mutantes de Orosoplrila. Co n posterioridad, se Hay dos amplias categorías de receptores que activan las tirosinci-
donaron homólogos de estas proteínas en seres humanos y ratones, y nasas: ( 1) aquellas en las cuales la enzima tirosincinasa es parte intrín-
mostr;1ron participar en un número de eventos de señalización impor- seca de la cadena polipeptídica del receptor (codificada por el mismo
tant,'S durante la diferenciación y dieron como resultado el descubri- gen), llamados receptores tirosincinasa (RTK), y (2) aquellos, como
miento de que la activación anormal de las vías de Hh aparece en varios los receptores de citocinas, en los cuales el receptor y la cinasa son co-
tumores humanos. Estos descubrimientos ilustran la importancia de dificados por genes diferentes, si bien unidos fuertemente entre sí. Para
cswdiar las vías de señalización tanto genética (en moscas, ratones, gu- los receptores de citocinas, la cinasa fuertemente unida se conoce como
sanos, levaduras y otros organismos) como bioquímicamente. JAK ci11asn. Ambas clases de receptores activan vías de transducción de
Ninguna vía de señalización actúa de modo aislado. Muchas células la señal intracelulares semejantes y, por lo tanto, los consideraremos
responden a múltiples tipos de hormonas y otras moléculas de señali- juntos en esta sección (Fig. 16-2).
zación; algunas células de mamífero expresan - 100 tipos diferentes de Exploraremos cada una de estas importantes vías en las secciones
receptores de la superficie celular, cada uno de los cuales se une a un li- siguientes de este capítulo. En esta sección, nos fijaremos en los re-
gando distinto. Dado que muchos genes están regulados por múltiples ceptores en sí, y mostraremos de qué manera la unión de los liga ndos
factores de transcripción que a su vez se activan o están reprimidos por lleva a la activación de la cinasa. Comenza remos con los RTK y luego
diferentes vías de señalización intracelulares, la expresión de cualquiera nos centraremos en los receptores de citosi na. Después de analizar
de estos genes puede estar regulada por múltiples señales extracelula- de qué manera ambos ti pos de receptores son activados, explo rare-
res. En especial durante etapas tempranas del desarrollo, esta "conver- mos parte de las moléculas corriente abajo que están vinculadas en
sación cruzada" entre las vías de señalización y las alteraciones secuen- la activación. En la última parte de la sección, analizaremos cómo
ciales resultantes en el patrón de expresión génica finalmente pueden la señalización derivada de los RTK y los receptores de citosina se
ser tan eA'lensas que la célula adquiere un destino de desarrollo distinto. reprimen.
En este capítulo, veremos de qué manera múltiples vías de señaliza-
ción interactúan para regular aspectos cruciales del metabolismo, tales Numerosos factores que regulan la división celular
como el nivel de glucosa en sangre y la formación de células adiposas. y el metabolismo son ligandos para los receptores
ti rosincinasas
Las moléculas de señalización que activan los RTK son péptidos so-
16.1 Receptores que activan las tirosincinasas lubles o unidos a membrana u hormonas proteicas, incluyendo mu-
chas que inicialmente identificamos como factores de crecimiento para
proteicas
tipos celulares específicos. Estos ligandos de RTK incluyen muchos,
Comenzamos con un análisis de las dos grandes clases de receptores como el factor de crecimiento neural (NGF), el factor de crecimiento
que activan las tirosincinasas proteicas. Las tirosincinasas proteicas, de derivado de las plaquetas (PDGF), el factor de crecimiento de los fibro-
las cuales hay aproximadamente 90 en el genoma humano, fosforilan blastos (FGF) y el fac tor de crecimiento epidérmico (EGF), que esti-

(a) STAT Actívación de la transcripción

(bl GRB2 o Shc - Ras - MAP cinasa - Activación o represión de la transcripción

Hormona- Receptor
tirosincinasa

(el Fosfolipasa C.1 - - - Activación o represión de la transcripción

- Aumento de Ca2• -
Modificación de otras proteínas celulares
Citocina - Rece ptor _. Cinasa
de citocína JAK
(di Pl-3 cinasa - Proteincínasa B ---- Activación o represión de la transcripción
Modificación de otras proteínas celulares

Figura 16-2 Panorama general de las vías de transduc~ión. de las la Sección 16 1). (b) La urnón de un tipo de proteína adaptadora (GRB2 0 Shc)
señales desencadenadas por receptores que activan tirosmcinasas a un receptor activado conduce a la activación de la vía de la Ras/cinasa MAP
Proteicas. Ambos, los RTK y los receptores de citocinas, acnvan _mulnples vías (véase la Sección 1ü 1). (c. d) Dos vías de fosfoinosít1dos son desencadenadas
de transducción de las señales que por último regulan la transcripción de los por el reclutamiento de la fosfoli pasa C y la cínasa Pl-3 a la membrana (véase
9enes.(a) En la via más directa, empleada principalmente por los receptores la 5Pcc.,ón 16.3). Los niveles elevados d~ Ca'· y de proteincínasa Bactivada
de las citoonas un factor de transcripción STAT se une al receptor activado, modulan la actividad de los factores de transcripción como así de las proteínas
le fosforila. se ~ ueve al núcleo y activa directamente la transcripción (véase cítosólicas implicadas en las vías metabólicas o el movimiento o forma celular.

16 .1 Receptores que activan las tirosincinasas proteicas 723

 . ., d
mulan la prolife ració n y la d iferenciació n de tipos celulares específicos. La act1vac1o n e Ios RTK puede ser resumida .del siguiente . .
·modo·
.
O tros, co mo la insulina, regulan la expresió n de m últi ples genes q ue t ·mulado (sin liga ndo umdo ), la actividad de
en reposo, estad o no es 1 . , ."
controlan el metabo lismo de azúcares y lípidos en el hígado, el mús- • • , d RTK es muy bap (vease la F1°'. 16-3, paso D)
cmasa mtrmseca e un . ·
culo y las células adiposas (grasas). Muchos RTK y sus ligandos fueron · , de otras cinasas, los RTK co ntienen un domi-
Al 1gua1 que 1a mayona . .
identificado s en estudios de cánceres humanos asociados con formas · fl exi'bl d
1110 · d el labio de act1vac1ón. En estado de reposo, el
e eno mma o .
. d · -
mutantes de receptores de factores de crecimiento que estimulan la 1a b 10 e act1vac16 n no esta' •'•osforilado y asume una conformac .
ión que
proliferació n aun en ausencia del fac to r de crecimiento . La mutación bloquea 1a act1v1 · 'd d d ci·nasa En algunos receptores (p. e¡., el recep-
a e · .
"engaña" al receptor para que se com porte como si el ligando estuviese 1·
tor d e msu ma ), ev1·1a 1a uniºón del AT P. En .o tros ( p. e¡., el receptor
·
. de
presente en todas las ocasiones y, de este modo, el receptor se encuentra FGF) evita · 1a umon· , a¡ sus trato La unión al ligando causa un cambio de
• . .
constantem ente en estado activo (activo constitutivamente). Otros RTK rmac1-6 n que prom u eve la dimerizació n de los dominios extrace-
e
con1o
han sido descubiertos duran te el análisis de mutacio nes del desarrollo lulares de los RTK, lo cual hace que sus segmentos transmemb rana (y,
que conducen a bloqueos en la diferenciació n de ciertos tipos de C. por lo tanto, sus dom inios citosólicos) se acer~uen. En_tonces, la cina~a
elegans, Drosophila y ratones. de una subunidad fosforila un residuo de tirosma particular en el labio
de activación de la otra subunidad (Fig. 16-3, paso fl). ES ta fosforila-
La unión del ligando promuev e la dimeriza ción ción lleva a un cambio de conformaci ó n en el labio de activación que
de un RTK y conduce a la activació n de su cinasa desbloquea, y de este modo activa, la actividad de la c'. nasa medi~n-te la
intrínseca reducción K para que el ATP O el sustrato se fosfonlen. La act1v1dad
de cinasa au~entada resultante puede entonces fosforilar resid uos de
Todos los RTK tienen t res componentes esenciales: un do minio ex- tirosina adicionales en el domin io citosólico del receptor (Fig. 16-3,
tracelular que contiene un sitio de unión al ligando, una hélice a hi- paso 11), como así también fosforilar otras proteínas diana, lo que lleva
drofóbica única que atraviesa la membrana y un segmento citosólico a la señalización intracelular.
que incluye un dominio con actividad de tirosincinasa proteica (Fig. Aunque la d imerización es un paso necesario en la activació n de
16-3). La mayoría de los RTK son monoméricos, y un ligando que todos los RTK, pueden formarse d ímeros funcionales de muchos mo-
se une al dominio extracelula r induce la formació n de d ímeros del dos. Por ejemplo, la unión de un EGF a su RT K desencaden a un cambio
receptor. La formació n de dímeros funcionales es un paso necesario de conformación en el dom inio extracelula r del receptor de modo que
para la activació n de todos los RTK. Llamamos a este proceso de dos "pinza" el ligando. Esta acción empuja un bucle localizado entre los dos
(o más ) receptores que se unen "activació n por oligomeriza ción del dom inios de unión al EG F, y las interaccion es en tre los d os segmentos
receptor". Como veremos, esta oligomerización de los receptores de extendidos ("activados" ) de los bucles perm iten la formación de un dí-
la superficie celular es un mecanismo común para la activació n de mero funcional del receptor (Fig. 16-4). En otros casos, como el del re-
múltiples tipos de receptores. ceptor del facto r de crecimiento de los fibroblastos (FGF), cada uno de

Sitios de un ión
al ligando Ligando un ido
Ligando
..,,,,..,,,,

Exterior

Labio de
activación

Citosol Tirosincina sa
proteica poco
act iva
D fJ
Receptores tirosincinas as Dimerizació n y 11
(RTK) sin ligando unido fosforilació n del labio de Fosfor ilació n de
activación de las tirosinas residuos de t irosina
adicionales

FIGURA 16-3 Estructura general y activación de los receptores

labio de activación (B). La fosforilac·ó h
tlrosinclnas as (RTK). El dominio citosólico de los RTK contiene un sitio · del s1t10
· · catalítico 1 n ace que est
catalítico intrínseco de la proteintirosincinasa. En ausencia de ligand o (D), los
exterior de la c· . e Ia b 1
' 0 se mueva
hacia el
1nasa e 1ncrem d
del ATP y del sustrato p roteico para . ent e e este modo la capacidad
RTK en general existen como mo nómeros con cinasas de baja actividad. La . . . unirse. Enton . .
vanos residuos de t1rosina en el d . . . ces, 1a cinasa activada fosfonla
fosfot irosinas resultantes func· om,n,o c1toso· rico del recepto r (E). Las
unión de los ligandos provoca un cambio de conformación que p romueve
la formació n de un receptor dimérico funcional, que une dos cinasas de baja . 1onan como sir d fi ' .
d e transducción de la señal. ios e Jación para varias p roteínas
activid ad y entonces se fosforilan entre sí en un residuo de tirosina en el

724 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 (a) Exterior (a) Vista lateral
EGF
Dominios o
de unión
al EGF
~
Heparán
sulfato

(b)

Membrana Superficie de la membrana

(b) Vista desde arriba hacia abajo

FIGURA 16-4 Dimerización inducida por ligando del HER1, un receptor

Heparán
sulfato ,
humano para el fa ctor de crecimiento epidérmico (EGF). (a) Dibujo es- ...,_
quemático de los dominios extracelular y transmembrana del HERl, que es un
receptor tiros1nc1nasa. Al unir una molécula de EGF a un receptor monomérico,
se provoca una alteración en la estructura de un bucle entre los dos dominios
de unión al EGF. La dimerización de los dos monómeros de receptor unidos al
ligando idénticos en el plano de la membrana ocurre primariamente a través
de las interacciones entre los dos segmentos del bucle ·activados·. (b) Estructu-
ra de la proteína HER 1 dimérica unida a un factor de crecimiento transformante
a (TGF-a), un miembro de la familia EGF. Los dominios extracelulares del recep-
tor se muestran en azul; el dominio que atraviesa la membrana se muestra en Heparán
rojo como una hélice alfa, pero su estructura no se conoce en detalle. Las dos
sulfato
moléculasTGF-a más pequeñas están coloreadas en verde. Nótese la interac-
ción entre los segmentos bucles·activados· en los dos monómeros receptores.
(Parte \a] adaptada de J 5chless,nger. 2002. Cell 110.669. parte \bl 10mada de T Garret Ycol,.. 2002. Ce// FIGURA 16-5 Estructura del receptor del factor de crecimiento de los
fibroblastos (FGF), estabilizado por el heparín sulfato. Se muestran
110.7631
aquí las vistas lateral y desde arriba del complejo que comprende los do-
minios extracelulares de dos monómeros de receptores de FGF (FGFR) (en
verde y azul), dos moléculas de FGF unidas (blanco) y dos cadenas de h _
. lf , epa
ran su ato cortas (purpura), que se unen estrechamente al FGF. (a) En la vista
los dos ligandos se une simultáneamente a los dominios extracelulares
lateral, el dominio superior de un monómero recepto, (azul) se ve ubicada
de las dos subunidades del receptor. El FGF también se une estrecha-
detrás del otro (verde); el plano de la membrana plasmática se encuentra
mente al heparán sulfato, un componente polisacárido con carga nega- en la parre inferior. Un pequeño segmento del dominio extracelular cuya
tiva de algunas proteínas de la superficie celular y de la matriz extrace- estructura no se conoce se conecta al segmento helicoidal a que se extiende
lular (véase el Cap. 20); esta asociación incrementa la unión al ligando en la membrana de cada uno de los dos receptores monoméricos (que no se
Y la formación de un complejo dimérico receptor-ligando ( Fig. 16-5 ). muestra) que sobresa_len hacia abajo en la membrana. (b) En la vista superior,
las cadenas de heparan sulfato se ven entrelazándose y formando numerosos
La participación del heparán sulfato es esencial para la activación efi-
contactos con los dominios superiores de ambos monómeros del receptor.
ciente del receptor. Los ligandos para algunos RTK son diméricos y su
Estas 1nterawones promueven la unión del ligando al receptor y la dimeriza-
unión reúne dos monómeros del receptor en forma directa. Otros RTK, ción de este. !Adaptado de J Schless,nger y cols . 2000. Mol Ce// 6 743 ¡
como el receptor de insulina, forman dímeros unidos po r disulfuros
aun en ausencia de la hormona; la unión del ligando a este tipo de RTK
altera su conformación de modo tal que la cinasa del receptor se activa.
Este último ejemplo destaca que simplemente tener dos monómeros

16.1 Receptores que activan las tirosincinasas proteicas 725

 Inactivo (monómero o d ím e ro ) Dímero activo
Dímero asimétrico
EGF
Dom inios C)
e xtrace lulares
qu e une n EGF

Membrana
Segmento
yuxtamembrana
Lóbulo N
Dominio bio de
c inasa tivación
D Receptor Activador
Cola e-terminal

Sitios de autofosforilación

FIGURA 16-6 Activación del receptor de EGF por unión del EGF genera un dímero de clnasa asimétrico (fJ) de modo tal que el octivodor de
que resulta en la formación de un dímero de un dominio de cinasa cinoso se una al segmento yuxtamembrana del receptor de o nasa, lo cual
asimétrico. En el estado monomérico inactivo (D). el segmento no provoca un cambio de conformación que elimina el labio de activación del
estructurado del dominio yuxtamembrana (JM-B; en verde) se une al sitio de la cinasa en la cinasa receptora y activa su actividad enzimática. (()) La
lóbulo superior. o N. del dominio de la cinasa, lo que provoca un cambio de cinasa activa fosforila entonces los residuos de tirosina (círculos amarillos) en
conformación que ubica el labio de activación en el snio activo de la cinasa e los segmentos (-terminales del dominio citosólico del receptor. (Tomado de N Jura
inhibe de este modo la act ivación de la enzima. La d1merización del receptor y cols. 2009. Ce// 137·1293 l

de recepto r en contacto cercan o no resulta su ficiente para su activació n Los homo-oligómeros y hetero-oligómeros de los
(d eb e h aber cambios con fo rmacion ales adecuados q ue acompañen la receptores del factor de crecimiento epidérmico
d im er izació n del recepto r para con d u cir a la activació n de la tirosinci- unen miembros de la superfamilia del factor de
nasa ). Un a vez q ue un RTK está fijado e n un estad o d imérico funcional, crecimiento epidérmico
su tirosincinasa asociada se act iva.
Solo pa ra los m iembros de la fam ilia de los recepto res EGF se Cuatro recepto res tirosincin asa (RT K) pa rticipan en la señ alizació n
com p rend e la fo rma exacta en q u e la di merizació n con d uce a la acti - d e los nu merosos m iembros de la fam ilia de m o léculas de señaliza-
vació n de la cinasa, y esto fu e descu bierto mediante estudios estruc- ció n del factor de crecimiento epidérmico (EGF) . En los seres hu-
turales de los dom inios c itosólicos del recep to r en los estados activo ma nos, los cuatro miembros de la familia HER ( human epidermal
e inac tivo. Lo s d o m inios de la c inasa se separan del segm ento tran s- growth facto r recepto r) se deno tan co m o HER I, 2, 3 y 4. H ER! une
membra na po r u n segm ento denomi nado yuxtam embrana, cuyas d irec ta mente tres miembros d e la familia de los EGF: EGF, el EGF
dos partes se ven colorea das en rojo y verd e en la Figura 16-6. En q ue une heparina ( HB-EGF) y el fa c to r de c recimiento a lfa derivado
estad o inactivo, m o n o m érico, una parte d el segm ento yuxtam em b ra- d e los tumo res (TGF-a ). La unió n de cualquiera de estos ligan dos al
n a se une al ló bulo superior, o N , del dom inio de cin asa ad yacente do min io de un m o nó m ero HE RI lleva a la ho m odime rización del
de la mism a m o léc ula. Esto provoca un cam b io de co nformac ió n tal dominio extracclular de H ER I ( Fig. 16 - 7).
q ue el labio de activació n está locali zado e n el si tio activo de la cinasa O tros dos miem bros de la fa m ilia d e EGF, las neurregul inas I y
y bloquea su actividad . De este mod o, las cinasas se m antien en en 2 (N RG I y N RG2) , se unen tanto a l-l ER3 com o a HE R4; HB- EGF se
estad o "apagad o" ( Fig. 16-6, paso D ). La d im e ri zació n d el recep to r une tambi én a H ER4. Es im porta nte destacar que H ER2 no se une
gen era un d ímero de cin asa asimétrico ( Fig. 16 -6, paso R ) tal que un d irecta men te a un liga ndo, sin o qu e ex iste e n la m embran a en una
dom in io de la cinasa (de no minad o e l activa do r ) se un e al segmen to co n fo rmació n preacti vada con un segm ento en b ucl e que sobresale
yu xtam emb ran a del segundo d o mini o de la membran a ( el rece pto r ). hacia el exteri o r y los dominios q ue u nen ligandos ce rca nos ( f'i g. 1(, -
Esto cambia la co nfo rmació n del lóbulo N d el recep to r y provoca así 7.1 ). Sin emba rgo, l-l ER2 no puede fo rma r ho m o dímeros. Solo puede
q ue el labi o d e activación se mueva hacia afuera d el sitio activo de seña lizar fo: ma ndo hcteroco m plejos al unirse a los ligandos HER! ,
la cinasa y permite qu e esta func io ne ( paso D ). En u n sentido, un HERJ O Hl: R4. De eS t e m odo, facilita la señalizació n mediante los
RT K p ued e pensarse como una enzima alostérica cuyo sitio activo se miembros de la fa mili a EGF (rig. \ A- 76 ); un a umento d e H ER2 en la
en cuentra de ntro d e la célula y cuyo efecto r alostérico (el li gando ) se super fic ie celular vuelve a la célula más sens ible a la señalización por
une a un sitio regul ad o r extr acelular de la en zima . La evolución ha muchos mi em bros de la familia EGF porque la tasa a la cual los hete-
p roducido much as variacio n es de l tem a d e este simp le m ecanism o rodím erns de señalizació n se forman después de la unió n del ligando
ligando -RTK, com o está ejem p lificad o por las familias de ligand os se vera incrementada. Aun c uando H ER3 carece de un d o minio de
EFG y sus recepto res, q ue se a n aliza n m ás ade lante . ci nasa fun cio nal, p uede part icipar en la seña lizació n; d espués de unir

726 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión gé nica

 (a) A EGF A NRG1
A HB-EGF A NRG1 A NRG2
A TGF-cx A NRG2 A HB-EGF

Exterior

HER1 HER2 HER3 HER4

(b) A EGF A NRG1

A HB-EGF A NRG2
A TGF-cx A HB-EGF

Exterior

HER1 HER1 HER1 HER2 HER3 HER2 HER4 HER2

FIGURA 16-7 La fa milia H ER de receptores y sus ligandos. L',', óC-f(·, urnd o <1l li9,lf1do pu,-'t.JP forn1,lf homocllflk'ro, Jrnvc1dos unrdo, ,"ll"' , , p o r
r ur·:,:ir y. l¡ ;r ..... ·1 ,_, ., . l'IJ ~(..'f•':, 11' (.)'_i'l( r¡,j<:,:,;~ 'H[P1, J. ~ l '- r~_;f• Jí1H1 'P'Jrn•'fli O', d(•I bll( lf' (horqu1ll,11101,1<.). s,,qu,1 ,e cl,•t.illa <-'fl lc1 . ;
e l f,1-:_1•_1r rJ• ( ' (" " • • . ,J ,_¡ d <- ' rT ll"íJ ' [ (_;r )' r_,tr C,S r• ,... rrbro~ dE- ld Íór r11l1~ 11,,f) ÍO ff fld l,('t f' fOd 1f1f('f()) 'llf\ t lííl 1, 1ff R l V HfR,t Uf11litl, ,ll k t, f' 10J 1· IJ' •l<tJ
d~1:.r::,í 1,};', .-. . , , . Jt-·) · , ,J i.:-,• (Jl'..,/(•lri-,c_.i1'.l. ...rr-n ofrnod 0 rJ1fMl:f 1(d! li (_., f •fld hld flO II ¡J\)í tod u-. loe, fl)lt•mhru') d t· !.1 t.H 11 d1 J d f' f (..,f HFH.~ un
t it-'flt'

é~,;._ =Gr q . . -? _, ' '.. . .f ~ ,J r { •d h~ i (;f J, ' J( T(if fJ ( ~ r rr•( : ' 1H:f 10 o 1o ()Hl lc:i'j'., ' ) i • rjr; rrnruo rl,... t 11 1,r ,.1 ron 1H t 1:1cL\d rnur p.., l ,h,l y pu •}¡ ü1 )Pi1dli/ J ' · .H\ ,n:,J (. .JJndí 1
1 fr Jlf Jl,j( ( Hllph •J(J',( 1)!1!H H. 1
...,rrr..,l... ,' ,.J') 1 : ,, ' , ;.'. • -' ', :r'J/) ' ,e,¡ r,•..,,r.. ' ~u"' tif t í , l "1\ 5 J 1.
1
ry~ liJ!í' r:_:. U , , f : · ', ' r•, ..\ 1·,., ,

:¡i., 1:r•·.1 ..,· ~r_; r; ' ·J''. , ¡,.... , 1 .-¿,1; r~ r., ,: , •• ·, . , . • ,::: · • 1,,... !/e ' ..-: ¡,c:,<,1:.d ' 1CcrJ 1- 1110<1.1: ·-
)'JO--"l ~!~if:' na ,. 1 1.; ! ",:' • . -;•J•.. •.,,-'; . ; • • , j , ,, ·J' ,; t ·.,·-;, ,; rr..,;,1 :, ; i ... ¡ f, j

un ligando, se J i,rn:riza co n H ER2 v ,e fo,forda po r J;¡ cin a,a H ER2. 25"1, de: I<" .:3m tr,·, de n 1<1rn .i , f(I , u,rl d ,1 u •mv rc-, u lt,id u la sub recx-
Esto activa vías de tra nsducció n d~· IJ, ,enalc, ciJrricntc abJ¡o como pr<:, i(,n de l.i pru i.-,n,, 11 1-. 1{2 rn l.1> cdu l.i, tu m1Jr,il n . J.a, pacien tes
se indica más adelante. con c:,nc<:. r tk mam a (On ·,obn·n ¡,n·,i< • ,11 l·lc· fll'- J>1 ,. 1·1,n ,1 en e ¡ peo r
prrin("t,.:o, ,ncl11 )'cndn 11 11.1 ,u pcrv,vcnl ia c1con ,,da co n rt'iaciú n a las
~ La com prensió n de los HER ha ayudado a explicar por que: un .i pdC.Í<'n tc, ,i n n ta an(,rn,dr,t. Cnrno cnL,t i1a la f ,gur" 11, 7, Ja sobreex -
U fo rma pa rticul ar de cá ncer J e mama e~ tan peligrosa Y h.1 con - prc,i6n dt II H< 2 h.1c;- (]fl t l;i;, célula, tum c,rales , ean se nsibles a la
ducido a una impo rtante quimi oterapia. El cá ncer de ma ma p,iedc c,timulaci6n . del. ,crrc1mirnto ,n(lr ha¡·o,· nivt•J,, .. - ele· e ua¡q uier · m1em· b ro
implicar el crecimiento anorma l de células epiteliales de la mama . La, de la famil ia .de tac. torc;. ele uccim icntc, E·l f;
- • , 11 ,
· vc·I •
es que no cst,m · u-
células epi teliales normales expresa n un a pequ eña can tidad de la pro- larlan la pm l,fcran6n de las ctlul as w n niveles normales de HER2. El
teína HER2 sobre sus rnembrana.s plasmáticas en un pat rón específi - descuhrimicnto ck l papel de la snhreex prcsión de HER2 en ciertos
co del tejido y 110 crecen inapropiada mente. En las células tu moraks. cánceres de ma ma co ndujo a lo;. investigadores a desarrollar anticuerpos
con frecuencia errores en la replicac ió n del D NA resul tan en la tor- mo n()clonalcs específico s para la proteína H ER2. Estos han probado
l11ación de múlt iples copias de un gen dado en un cromoso ma único, ser terapias efectivas para ac¡uell os pacientes con cánceres de mama
una alteración co nocida como amplificació n génica (véase el <.ap. en las cuales está sohrccx presado el HER2, y esto ha red ucido la re-
24). La am plificació n del gen HER2 ocu rre en aproximada mente el currencia en dichos paciente~ en aproximadamente un 50%.

16.1 Receptores que activan las tirosincinasas proteicas 72 7

 (a) EGF A NRG1
A HB-EGF ANRG1 A NRG2
ATGF-a ANRG2 A HB-EGF

Exterior

Citosol

HER1 HER2 HER3 HER4

NRG1
(b) AEGF
NRG1 A NRG2
A HB-EGF
ATGF-o A NRG2 AHB-EGF

Exterior
Citosol ATP
ATP ATP
ATP- ATP ATP ATP

-
ADP ADP ADP+ ADP
ADP ADP ADP

HER1 HER2 HER3 HER2 HER4 HER2

HER1 HER1

unido al ligando puede formar homodimeros activados unidos entre sí por

ligandos. Los seres
FIGURA 16-7 La familia HER de receptores y sus
2, 3 y 4) que unen segmentos del bucle (horquillas rojas), según se detalla en la Figura 16-4.
humanos expresan cuatro receptores tirosincinasas (HER1, Her2 forma heterodimeros con HER1, HER3 y HER4 unidos al ligando y facilita
miembros de la familia
el factor de crecimiento epidérmico (EGF) y otros la señalización por todos los miembros de la familia de EGF. HER3 tiene un
unen de modo diferencial
del EGF. (a) Como se muestra, las proteinas HER dominio de cinasa con actividad muy escasa y puede señalizar tan solo cuando
factor de crecimiento alfa derivado de
EGF, EGF que une heparina (HB-EGF), forma complejos Con HER2. (Tomado de N E. Hynes y H A. Lane, 2005, Nature Rev Cancer 5341
los tumores (TGF-0) y neurregulinas 1 y 2 (NRG1 y
NRG2). Nótese que HER2,
lerrata en Nature Rev Cancer 5:580] yA. B. Singhy R. C. Harris, 2005, Cell Signal 17[0ct.]:l183,)
directamente un ligando, existe en la membrana plasmática de
que no une
una horquilla roja. (b}) El HER1
Superficie en estado preactivado, según indica

HER2 y se fosforila por la cinasa HER2.

25% de los cánceres de mama, lo cual da como resultado la sobreex-
un ligando, se dimeriza con
señales corriente abajo como presión de la proteína HER2 en las células tumorales. Las pacientes
Esto activa vías de transducción de las
con cáncer de mama con sobreexpresión de HER2 tienen el peor
se indica más adelante.
pronóstico, incluyendo una supervivencia acortada con relación a las
pacientes sin esta anomalia. Como enfatiza la Figura 16-7,la sobreex-
de los HER ha ayudado a explicar por qué
una
L a comprensión ha con- presión de HER2 hace que las células tumorales sean sensibles a la
forma particular de cáncer de m a m a es tan peligrosa y
El cáncer de mama puede estimulación del crecimiento por bajos niveles de cualquier miembro
ducido a una importante quimioterapia.
anormal de células epiteliales de la m a m a . Las de la familia de factores de crecimiento EGE, niveles que no estimu-
implicar el
crecimiento
cantidad de la pro- larían la proliferación de las células con niveles normales de HER2. EI
élulas epiteliales normales expresan una pequeña
membranas plasmáticas en un patrón especifi- descubrimiento del papel de la sobreexpresión de HER2 en ciertos
teina HER2 sobre sus
En las células tumorales, cánceres de mama condujo a los investigadores a desarrollar anticuerpos
co del tejido
y no crecen inapropiadamente.
la replicación del DNA resultan en la for- monoclonales especificos para la proteina HER2. Estos han probado
Con frecuencia errores en
cromosoma único, ser terapias efectivas para aquellos pacientes con cánceres de mama
mación de múltiples copias de un gen dado en un
una alteración conocida como amplificación génica (véase el Cap. en las cuales está sobreexpresado el HER2, y esto ha reducido la re-

24). La amplificación del gen HER2 ocurre en aproximadamente el currencia en dichos pacientes en aproximadamente un 50%.

16.1 Receptores que activan las tirosincinasas proteicas 727

 Eritropoye tina
FIGURA 16-9 Estructura de la erltropoyetina unida a un receptor
de eritropoyetina. La eritropoyetina (Epa) contiene cuatro hélices a
largas, conservadas, plegadas en una disposición particular. El receptor de
eritropoyetina activado (EpoR) es un dímero de subunidades idénticas; el
dominio extracelular de cada monómero está construido por dos subdominios,
cada uno de los cuales contiene siete hebras ~ conservadas, plegadas de
un modo característico. Las cadenas laterales de los residuos en dos de las
hélices a de la Epa, llamadas sitio 1, contactan bucles en un monómero de
EpoR, mientras que los residuos en las otras dos hélices a Epa, sitio 2, se
unen a los mismos segmentos del bucle en un segundo monómero receptor,
y así estabilizan al receptor dimérico en una conformación específica. Las
estructuras de otras citocinas y sus receptores son similares a la Epa y a la EpoR.
(Cortesla de lucy Zhang, adaptado de R S Syed y cols , 1998, Narure 395:S 11 , y L Zhang y cols
.. 2009, Mol
Ce/133 266-274 )

Como resultado de la dimerización del receptor, las JAK asociadas

se acercan lo suficiente, de modo tal que una puede fosforilar a la otra
coo- coo- en un labio de activación de tirosina crítico (Fig. 16-1 O, paso D ). Como
ocurre con muchas otras cinasas, la fosforilación del labio de activación
Superficie de la membran a
conduce a un cambio de conformac ión que incrementa la afinidad por
el ATP del sustrato que será fosforilado , lo que incrementa así la acti-
vidad de la cinasa (Fig. i 6- 1O, paso IJ). Parte de la evidencia de este
citosólico de todos los receptores de citocina (Fig. 16-1 O). Los cuatro
mecanismo de activación proviene del estudio de un mutante JAK2 en
miembros de la familia JAK de las cinasas contienen un dominio N-
la cual la tirosina crítica es mutada a fenilanalina. El mutante JAK2 se
terminal que se une al receptor, un dominio de cinasa C-termina l, que une normalme nte a EpoR, pero no puede ser fosforilada y es catalíti-
normalmente es poco activo desde el punto de vista catalítico, y un camente inactiva. En las células eritroides, la expresión de este mutante
dominio medio que regula la actividad de cinasa por un mecanismo JAK2 en cantidades mayores que las normales bloquea por completo
desconocid o. (Las JAK se llaman de este modo porque, cuando fueron la señalización EpoR porque el mutante JAK2 se une a la mayoría de
clonadas y caracteriza das, su función se desconocía, y se llamaron así los receptores de citocina, evitando la unión y el funcionam iento de la
por su denominac ión en inglés just another kinase, lo que en español proteína JAK2 de tipo silvestre. Este tipo de mutación, conocida como
significa "simplem ente otra cinasa"). Como ocurre con los RTK, esta dominante-negativa, causa la pérdida de la función aún en las células
cinasa se activa después de la unión al ligando y la dimerización del que llevan copias del gen silvestre, porque la proteína mutante evita que
receptor (Fig. 16-1 O, paso D ). la proteína normal funcione (véase el Cap. 5).

Sitios
de unión
Liga nd0 al ligando Ligando unido

Labio de
activación
JAK Cinasa
Cltosol activo

D fJ IJ
Receptores de_citocina Dimerización y fosforilación Fosforilación de
sin ligando unido de las tirosinas del labio residuos de tirosina
de activación adicionales

FIGURA 16-1 OEstructura general y activación de los_receptores de que mantiene juntos a los dominios de la cinasa JAK asociados, que entonces
tltoclnas. El dominio citosólico de los receptores de .las otoc1nas se une en se fosforilan entre si sobre un residuo de tirosina en el labio de activación (R).
f . • · · asa d Procede así la señalización corriente abajo (IJ) de forma similar a lo que ocurre
Orrna estrecha e irreversible a una trrosincin . proteica/JAK. En ausencia e
s c·nasas JAK tienen
¡- homod1mer o, pero a 1
1 con los receptores de tirosincinasas.
igando {O), los receptores forman un mb·o de conformación
escasa actividad. La unión de tos ligandos provoca un ca 1

16.1 Receptores que activan las tirosincinasa s proteicas 729

los residuos d e fosfotirosina son superficies de (las caden as latera les de fosfo ti rosina e isoleuci n a _d e l péptid o) en una
unión para proteína s m últiples con dominios " c 1avr¡a
•· ,, d e d os p atas
, e,, e l dom in io S H 2. Los dos. aCJdos glutá micos se
.
·rnser t an a¡· us tadamcn
conserva dos , · te e n la su per fic. ie d e l dom
. rn ro SH 2 entre el en ·
ch ufe de fosfo ti rosina y el e n chu fe h1drofó b1 co q u e acepta el residuo
Un a vez que las cinasas RTK o la~ ci n asas JAK se h an activado, fosfo ri - d e isoleu cin a. Esta especificida d desem peña un papel importa nte en
la n e n p rimer lu ga r var ios residuo s de ti ros ina e n el d o minio c itosóli- la d eterminac ión de q u é proteín as de transdu cció n de la señ al se unen
co del receptor (véanse las l'i~,. 1(, ..~ y 16 - 1O) . Var ios de estos resid u os a q ué recepto res y qué vías se activan de este m odo.
de fosfo tirosina sirven luego co m o s itios de unió n pa ra las proteí nas Hay ot ros do min ios d e proteínas pequ e ñas, ad em ás de SH 2, q ue pue-
que h a n conse rvado los do m inios de unión a la fosfo ti rosi n a. Uno de d en reconocer y un irse a los péptid os q u e contienen fosfoti rosina. Un
estos domin ios de u nión a la fosfoti rosina se d en o min a do111i11io SI--12. dominio d e este ti po se lla m a do111i11io PTB ( de unión II fosfo tirosinn).
El do mi n io SH2 deriva su no m b re com p leto , do min io de /ro m ología Con frecuencia, los domi n io s PTB se e nc u entran en las llam adas pro-
Src, de su ho mo logía con una regió n de tirosinc inasa c itosó lica Src teín as 111 11 /t ianc/aje, que sirve n com o sitios d e fijació n para o tras pro-
proto típica codificada po r el gen src. (Src es un acr ó n imo por s11rco- teínas de tra nsducción de las señales. Por ejemplo, c u a ndo va rios RTK
11in, y una fo rma muta n te d e l gen celular src, e ncont rado en gallinas (p. ej., el recepto r de insulina) y los recepto res d e citocinas (p. ej., el re-
con sarcomas, como se deta lla e n e l Cap. 2•1.) Las estruct u ras trid i- ceptor de IL-4) son activados y fosfor ilados por tirosi n a, u nen una pro-
m ensiona les de los d o mi n ios SH 2 e n di ferentes p roteí nas son muy teín a d e m u ltianclaje lla mada IRS- 1 (descubierta porque es un sustrato
si m ilares, pero cad a una se un e a un a secuen cia d istinta de aminoá- del receptor de la ins ulina ) ( Fig. 16-12). El receptor activado fosforita
cidos que rod ean el residuo d e fosfoti rosina. La secuencia única d e ento nces a la p ro teína d e anclaje unida y fo rma much as fos fot irosinas
a minoácidos de cada d o m in io SH 2 d etermina los residuos específicos que a su vez sirven com o sitios d e anclaje par a p ro teín as d e señaliza-
de fosfo ti rosi n a a los c u ales se une ( Fig. 16- 11). Las variacio nes del ció n que contienen SH 2. Al mism o tiempo, a lgunas d e estas proteínas
en chu fe h idrofóbico en los d o minios SH 2 d e d iferen tes p ro teí nas d e pued en también ser fosfo riladas por el recep to r activad o y, así, estas
t ra nsducción d e la señal le p ermite un irse a fosfo tirosinas adyacen tes proteínas de multianclaje exp anden el nú mero d e vías de señalización
a d isti ntas secu e ncias, lo que d a cu enta de diferen c ias en s us socios intracelular que pued en ser activadas po r el recep to r.
de unió n. El d o minio SH2 d e la tirosinc inasa Src, po r ejemplo , se une
fue rtem ente a cu a lquier péptido que con ten ga una secu en cia núcleo
Dominios SH2 en acción: las cinasas JAK activan
c rítica d e cua tro residuos: fosfotirosin a-ácido glutámico-á cido glutá-
m ico- isole u cin a ( Fig. 16- 1 1). Estos cu atro a m inoácidos hacen ín t imo
factores de transcripción STAT
co ntacto con el sitio d e unió n a los pépt idos en el do minio Src SH 2. Para ilustrar de qué mod o la unió n d e los do minios SH 2 a residuos
La unió n se asem eja a la inserció n d e un "enchufe" de dos ra nuras de fosfotirosin a específicos induce vías de señalización específicas, aquí

Vista superior Vista frontal r-

Glu1

FIGURA 16-11 Modelo de superficie para un dominio SH2 unido a un (Glu2)-1soleuc ina (lle3) La unión se asemeJa a .
1 1nserc16 n d e dos "tapones•
abisagrados (las cadenas laterales de fosfot·,ros·aina
péptldo que contiene fosfotlroslna. El péptido unido por este dominio
SH2 de la tirosina cinasa Src (esqueleto azul con átomos de oxígeno rojos) . • e ,so 1euc,na . .do)
en un enchufe de dos entradas en el dominio SH L d en e 1pept,
se muestra en forma de palillos. El dominio SH2 se une fuertemente a glutamaro se ene n "d
2· os os res1 uos e d
. ..
d f ue tran un,dos s,t,os en la superficie del dominio
los péptidos shorr-rorger que contienen una secuencia central de cuatro 1os os enchu es. !Véase G Walcsman Yacols. 1993.Cell 72 779)
SH2 entre
residuos: fosfot,ros,na (TyrOy OPO, ·)-ác1do glutámico (Glu 1)· ácido glutámlco

730 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 RTK activado ticas únicas en su cromatina, los genes que están disponibles para se r
activados por cualquier STAT también son diferentes. Por ejemplo,
en las células de las glándulas mamarias, STAT5, el mismo STAT ac-
tivado por el receptor Epo de las células eritroides, se activa después
de la unión de la prolactina al receptor de prolactina e induce la
transcripción de los genes que codifican ciertas proteínas de la leche.
Por el contrario, cuando STATS se activa en las células progenitoras
eritroides luego de unir Epo por el receptor de Epo, induce la trans-
cripción del gen Bel-XL" El Bel-XLevita la muerte celular programa-
da, o apoptosis, de estos progenitores, permitiéndoles proliferar y
diferenciarse a eritrocitos. Aquí tenemos un caso de diferentes recep-
tores de ci tocina en diferentes células que activan la misma molécula
de señalización intermediaria, STATS, aunque conducen a la activa-
ción de genes distintos. La diversidad combinatoria permite que un
número relativamente limitado de vías de señali zación controle un
amplio grupo de actividades celulares.
Proteínas de señalización

FIGURA 16-12 Reclutamiento de proteínas de transducción de la Múltiples mecanismos reprimen la señalización

señal intracelular a la membrana celular por la unión de residuos de los RTK y los receptores de citocinas
de fosfotirosina de los receptores o de proteínas asociadas a los
receptores. Las proteínas otosólicas con dominios SH2 (púrpura) o PTB En el capítulo anterior vimos varios modos en los cuales la señalización
(morado) pueden unirse a residuos de fosfot irosina específicos en los RTK
de los receptores acoplados a la proteína G se termina. Por ejemplo, la
activados (que se muestran aqu0 o a los receptores de citocinas. En algunos
casos, estas proteínas de transducción de la señal se fosforilan entonces fosforilación de los receptores y las proteínas de señalización corriente
por tiros1nc1nasas proteicas intrínsecas o asociadas a los receptores, lo cual abajo suprime la señalización y esta supresión puede ser revertida por
incrementa su actividad. Ciertos RTK y receptores de citoc1na emplean la acción controlada de las fosfatasas. Aquí analizamos varios mecanis-
proteínas de múlt1ple anclaJe como las IRS-1 para aumentar el número de mos por los cuales está regulada la señalización de los receptores de las
proteínas de señal1zac1ón que son reclutadas y activadas. La fosforilación citocinas y los RTK.
ulterior de una IRS-1 unida al receptor por la ci nasa receptora crea sitios de
anclaje adicionales para las proteínas de señalización que contienen SH2. Endocitosis mediada por receptores Con frecuencia, el trata-
miento prolongado de las células con ligandos reduce el número de
receptores disponibles en la superficie celular, de modo tal que las
células tienen una respuesta menos intensa a la exposición de una
analizaremos mecanismos directos por los cuales las cinasas JAK y al- concentración dada de ligando de la que tuvieron antes del trata-
gunos RTK activa n de modo directo miembros de los factores de trans- miento. Esta respuesta de desensibilización ayuda a evitar una ac-
cripción de la familia STAT. Todas las proteínas STAT contienen un tividad de receptor inadecuadamente prolongada. En ausencia del
dominio de unión N-terminal al DNA, un dominio SH2 que une una o factor de crecimiento epidérmico (EGF), por ejemplo, los receptores
más fosfotirosinas específicas en un dominio citosólico del receptor de de la superficie celular HER! para este ligando tienen una vida pro-
citocina y un dominio e-terminal con un dominio de tirosina crítico. medio relativamente prolongada, de entre I O y 15 horas. Los recep-
Una vez que una STAT monomérica se ha unido al receptor a través de tores no unidos se internalizan mediante invaginaciones recubiertas
su dominio SH2, la tirosina e-terminal es fosforilada por una cinasa de clatrina en endosomas a una velocidad relativamente lenta, con
asociada a JAK ( Fig. J6- l 3a). Esta conformación asegura que, en una un promedio de uno cada 30 minutos, y, con frecuencia, vuelven con
célula en particular, solo aquellas proteínas STAT con un dominio SH2 rapidez a la membrana plasmática de modo tal que hay una reduc-
que pueda unirse a una proteína receptora particular se activarán y solo ción pequeña en el número total de receptores de la superficie. Des-
cuando ese receptor esté activado. Por ejemplo, el receptor de eritro- pués de la unión de un ligando al EGF, la velocidad de endocitosis de
poyetina activa STATS, pero no ]os STATI, 2, 3 o 4; estos son activados HER! s~ incrementa - 10 veces, y solo una fracción de los receptores
por otros receptores. Un STAT fosforilado se disocia espontáneamente 1nterna~1zados regresa a la membrana plasmática; el resto se degrada
del receptor, y dos proteínas STAT fosforiladas forman un dímero en en los hsosomas. Cada vez que un complejo HERI -EGF se interna-
el cual el dominio SH2 de cada uno se une a la fosfotirosina del otro. liz~ media~te el proceso llamado ~ndocitosis mediada por receptor
Dado que la dimerización implica cambios de conformación que expo- (vease la F1g. I,1- 29), el receptor tiene una oportunidad de 20 a 80%
nen la señal de localización nuclear (SLN), los dímeros STAT se mue- de ser degradado, dependiendo del tipo celular. La exposición de un
ven al núcleo, donde se unen a potenciadores (secuencias reguladoras fibroblasto a altos niveles de EGF durante varias horas induce varios
del DNA) específicos que controlan genes diana ( Fig. 16- 13b) y, así, ciclos de endocitosis, lo que da como resultado la degradación de ]a
mayoría de las moléculas de receptores de la superficie celular y, así,
alteran la expresión génica. .
Un STAT dado puede activar diferentes gen_es en d1fere~tes célu- una reducción de la sensibilidad de la célula al EGF. De este modo,
las dependiendo de la "memoria celular", analizada en la mtroduc- el tratamiento prolongado con una concentración dada de EGF des-
ción del capítulo. Dado que distintos tipos de genes üenen c~mpo- ensibiliza a la célula a ese nivel de hormona aunque ]a célula pueda
nentes únicos de factores de transcripción y modificaciones ep1gené- responder si el nivel de EGF se incrementa.

16.1 Receptores que activan las tirosincinasas proteicas 731

 (a) Epo FIGURA 16-13 Activación y estructura de las proteínas STAT. (a)
Fosforilación y dimerización de las proteínas STAT Pa;o D: después de la
activación de un receptor de c11ocIna (véase la F1g 1o· 1O), un factor de
transcripción STAT monomérico e inactivo se une a una fosfotirosina en el
1eceptor, lo que acerca el STAT al JAK asociado con el receptor. El JAK fosforila
entonces la tirosina e-terminal en el STAT Pasos fJ y ll los STAT fosfonlados se
d1sooan de modo espontáneo del receptor y espontáneamente se dimerizan
Dado que el homodímero STAT tiene dos interacciones fosforirosina-dominio
SH2, mientras que el complejo receptor-STAT es estabilizado por solo una
interacción de este tipo, los STAT fosforilados tienden a no volver a unirse al
receptor. Paso C: el dímero STAT se mueve al núcleo. donde puede unirse a
las secuenoas promotoras y activar la transcripción de los genes diana. (b)
D Dominio SH 2} Diagrama de cintas de la unión del dímero STATl al DNA (negro). El dímero
JAK cinasa
~ Dominio de STAT STATI forma una pinza con forma de C alrededor del DNA estabilizada por
activa
. fJ /nión al DNA interacciones reciprocas y muy específicas entre el dominio SH2 (púrpura)
de un monómero y el residuo de tirosina fosforilado (amarillo con oxigenas
rojos) en el segmento (-terminal del otro. Este sitio de unión a fosfotirosina
del dominio SH2 de cada monómero está estructuralmente acoplado al

. •,cóó} )
D1menz7
dominio de unión al DNA (magenta). lo que sugiere un papel potencial para
la interacción 5H2-fosfottrosina en la estabilización de los elementos de
interacción del DNA. (Parte lbl!omado de x Chen y cots . 1998. Ce// 93 827 )

11
En el núcleo, /
~
se une al DNA
y activa la
transcripción

(b)

Tirosina
Dominio SH2 PO,
Tirosina
PO,

Dominios de
unión al DNA

Las mutantes HER! que carecen de actividad de cinasa no sufren la tinuar señalizando desde los en d osomas u . .
01
endocitosis acelerada en presencia del ligando. Es probable que la intracelulares antes des d d . ros compart1m1entos
u egra ación com 0 l0 'd ., .
activación inducida por el ligando de la actividad de la cinasa en la las proteínas de señaliza .6 ' ev1 enc10 su unión a
c1 n, ta1es como G b 2 S .
HER! normal induzca un cambio de conformación en la cola cito- rán en la sección siguiente. r · Y os, que se analiza-
sálica y exponga un motivo de selección que facilite el reclutamiento
del receptor en las invaginaciones cubiertas de clatrina después de la
internalización del complejo ligando-receptor. A pesar del extenso
estudio de los dominios citosólicos de la mutante HERI, la identidad
Degradación lisosómica Desp , d
ceptores de la superficie celular ts . .
e la internalización, algunos re-
de modo eficiente a la supe fi . p(. e¡., el receptor de LDL) se reciclan
. r cie véase J F'
de estos "motivos de selección" es controvertida, y muy probable- c1onó más arriba, la fracción d 1 ª ig. 14-29). Como semen-
. e os receptor HER .
mente múltiples motivos funcionen para aumentar la endocitosis. seleccionados a los lisosoma d . es 1 activados que son
. s pue en vanar d 20 .
Resulta interesante que los receptores internalizados puedan con- tipos celulares. Hay varios p e a 80% en diferentes
rocesos potencia· ¡es que pueden influenciar

732 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

,I reciclado versus el d_estino de la d egradació n en los lisosomas de los
(a) Regulació n a corto plazo: desactiva ción
rece Pwres de superfioc
. . . . Uno, es la modificac
_ ión covalente
por 1a pe- de JAK2 por la fosfatasa SHP1
quei1a proteína u_b 1w'.tma_(vease el _c _ap. 3). Hay una fuerte correlació n
,nire la monoub1c u1tm ac1ón (la ad1c1ón de una única ubicuitina a una Ep o
li;ina dada de una proteína) del dominio citosólico de la HER! y la
degradación de la HER 1. La ~ono~bic uitinació n está mediada por la EpoR
enzima c-Cbl. Una E3 ub1c u1tma-hg asa (véase la Fig. 3-29), la c-Cbl
contiene un dominio de unión EGFR, que se une directame nte a ;
10 JAK2 ci nasa
receptores EGF fosforilad os, y un dominio de dedo RING, que recluta
enzimas que unen la ubicuitina y media la transferen cia al rece tor de
ubicuitina. La ub_icuitina fu~ciona como una " marca" sobre el r~ceptor
que estimula su incorpora ción desde los endosoma s a cuerpos multi-
SHP1
wsiculados (véase la Fig. 14-33 ) que finalment e son degradado s dentro activa
de los lisosomas. Estudios genéticos hechos en C. elegans hicieron pen-
sar en un papel para la c-Cbl en el tránsito de los receptores de EGF,
que establecieron que el c-Cbl regula de modo negativo la función del
receptor de EGF en el nemátodo (Let-23), probablem ente induciend o SHP1
inactiva ~
~
su degradación. De modo semejante , ratones con genes desactivad os
(krrockout) que carecen d e c-Cbl muestran hiperproli feració n d el epi- Dominios Dominio
telio de glándula mamaria, compatib le con un papel de c-Cbl como un SH2 fosfatasa
regulador negativo de la señalizaci ón de EGF.
Experimentos realizados con líneas celulares mutantes d emuestran
que la internaliza ción de los RTK desempeñ a un papel important e en
(b) Regulació n a largo plazo: bloqueo de las seña les
la regulación de las respuesta s celulares a EGF y otros factores de cre- y degradaci ón proteica por las proteínas SOCS
cimiento. Por ejemplo, una mutación en el receptor de EGF (HER 1)
que evita que sea incorpora do a las invaginac iones recubierta s lo torna
resistente a la endocitos is mediada por receptor (inducida por ligan-
do). Como resultado, esta mutación conduce a números notableme nte
superiores a lo normal de receptores de EGF en las células y, así, a una
sensibilidad incremen tada de las células a EGF como una señal mito-
génica. Células mutantes de este tipo son propensas a la transforma-
ción inducida p or EGF a células tumorales (véase el Cap. 24). De modo
interesante, los otros receptore s de la familia de EGF (HER2, HER3 Y
HER4) no sufren internaliz ación inducida por ligando, una observa-
ción que enfatiza de qué modo cada receptor evolucion ó a ser regulado ... ...
en su propio modo. Proteína d;) ......
socs T \ J~~-
' , , "" Reclutam iento
--... , , ' , de E3
Fosfotirosina-fosfatasas Estas enzimas desfosfori lantes hidrolizan
Dominio Caja ' , , Ubicuit ina-
de modo específico enlaces fosfotiros ina en proteínas diana específi- SH2 SOCS ligasa
cas. Un ejemplo excelente de cómo las enzimas fosfotirosina-_fosf~tasas
operan para suprimir la actividad de la proteincin asa de _tuosma_es
FIGURA 16-14 Dos mecanismos para terminar la transducción de
provisto por la SHPl, la fosfatasa que regula de modo negativo la_ s~n_a- la señal desde el receptor de erltropoye tlna (EpoR). {a) Regulación a
lización a partir de varios tipos de receptores de citocina. En un 1111 ~10 , corto plazo: SHPl, una fosfotirosina fosfatasa. está presente en forma inactiva
su papel fue identífica do a partir del análisis de ratones que carec1an en las células no estimuladas. La unión de un dominio SH2 en SHPl a una
de esta proteína; estos animales morían por el exceso de producció n de fosfotirosina particular en el receptor activado desenmascara su sitio catalltico
en la fosfatasa y la ubica cerca de la tirosina fosforilada en la región del labio de
eritrocitos y otros varios tipos de células de la san~re. . . JAK2. La eliminación del fosfato desde esta tirosina inactiva la JAK cinasa. (b)
La SHP 1 disminuy e la señalizac ión de las c1tocmas al umrse al
Regulación a largo plazo: las proteínas SOCS, cuya expresión es inducida por las
receptor de citocinas e inactivar la proteína JAK asociada, co'.11º se proteínas STAT en las células eritroides estimuladas por eritropoyetina, inhiben
muestra en la Figura l 6- l 4a. Además d e un dominio catalítico de o terminan permanentemente la señalización en períodos prolongados. La
ÍOsfatasa, la SHPI tiene dos dominios SH2. Cuando las células es- unión de las SOCS a los residuos de fosfotirosina en EpoR o JAK2 bloquea la
.
tán en estado de reposo n o estimula d unión de otras proteínas de señalización (izquierda). La caja SOCS también
o por una ci"tocina ' uno . de los
dominios SH 2 en SHP l se une físicamen te al sitio catalítico en ~l puede marcar proteínas como JAK2 para la degradación por la vía ubicuitina-
proteasoma (derecha) . Mecanismos similares regulan la señalización desde
. .
dom11110 de la fosfatasa y lo .macuva.
. s·111 em bargo' en. el estado est1
,
- otros receptores de citocinas. (Parte (al adaptada des Constan1,nesc u y col~. 1999. Trends
mulada este bloqueo del dominio SH2 se une a un residuo espec1~co Endocnn Merabol 10:18, parte (bl adaptada de 8 T K,le y W 5. Ale>ander. 2001 . Cell. Mol.
[1/e Ser. se:1.)
d r • d El cambio de conforma ción
e ,osfotirosi na en el receptor activa o. .
que acompaña esta unión desenmas cara el sitio catalítico de SP~ 1 y
también lo sitúa adyacente al residuo de fosfotir~s i~a en el labw de
activación del JAK asociado con su receptor, Al ehmmar este fosfato,

16.1 Receptores que activan las tirosincinasas proteicas 733

el SHPl inactiva el IAK, de m odo tal que ya no puede fosfori uce a la fosfori lación del labio de actj.
lar al . .6
· La act1vac1 n de un RTK con d . ,
recepto r O a o tros sustrat os (p. ej., STAT ) a menos que molécu . . . as
las de . ., urosmc mas que son parte .mtnnse .
ca de sus
citocin a adicionales se unan a los recepto res de la superfi cie vac16n en las protern as . cremen ta su act1v1dad catalítica
celular y . 1 áticos lo que m
se inicie así una nueva ro nd a de se1ialización. domini os c1top asm . ' . da fosfori la entonc es residuo s
. 1E , ) La crnasa acuva
(véase la F1g. , -. · ' . . 'l' 0 del recepto r y otros sustrat os
Proteí nas SOCS En un ejempl o clás ico de retroal imenta ción de tirosina en el domirn o citoso ic
nega-
tiva, entre los genes cuya transcr ipción es inducid a por proteicos.
proteín as
STAT están aquello s que codific an una clase de proteín as mucho s RTK, cuatro de los cuales
peque- • Los seres human os expresa n
·i· de recepto res del 1actor d e crec1m
e · •
iias llamad as proteí11ns SO CS, qu e termin an la señaliz ación e 1ento
de los (HERl 4) definen la iam1 ia
receptores de citocin as. Estos regulad ores negativ os actúan - d' - l'zació n desde diferen tes m1em b ros de
.

modos (F ig. 16- l ~b) . En primer lugar, el domin io SH2

de dos epidérm ico que me 'ª 1a sena 1 . ,
de varias la familia del factor d e crecim · ·ento epidér mico de molecu
i
1as de seña-
proteín as SOCS se une a la fosfotir osinas del recepto r activad . . , ¡:· l<í-? ) Uno de estos recepto res, HER2,
o y ltzac16n (vease 1a 1g. ) · no une
evita la unió n de otras proteín as de señaliz ación que contien • h d ' eros activos con monóm eros que
en SH2 hgando s; forma etero 1m se unen a
(p. ej., las STAT); así, inhibe de modo compe titivo la señaliz . d d .,
ación ligan os e 1as otras 1res proteín as HER. La sobree xpres1 on de HER2
del recep tor. Una proteín a SOCS, la SOCS-1 , tambié n se une
a una esta, ,mp
· 1·,cad
a en aproximad amente 25% de los cáncer es de mama.
fosfotirosina crítica en el labio de activac ión de la JAK2
cinasa, e · · as d
inhibe de este modo su activid ad catalíti ca. En segund o lugar,
todas
• Las c1tocm esem pen-an numer osos papele s en el desarro llo.
las proteín as SOCS contien en un domin io, llamad o la caja La eritrop oyetina , una citocin a secreta da por las células del
SOCS, riñó~,
que recluta los compo nentes de las ligasas de ubicuit ina E3 promue ve la prolife ración y diferen ciación de las cél~las progem
( véase la toras
Fig. 3- 29). Como resulta do de la unión de SOCS- 1, por ejempl eritroid es en la médula ósea (véase la Fig. 16-8 ) para increm
o, la entar el
JAK2 se poliubi cuitina ( un políme ro de ubicuit ina unido número de glóbulo s rojos madur os en la sangre .
de modo
covalente a la cadena lateral de una lisina) y luego se degrad
a en • Todos los receptores de citocin a tienen estruct uras similar
los protea somas; de este modo, apaga perman enteme nte es, y
todas las sus domini os citosólicos están estrech amente unidos a la proteín
vías de señaliz ación mediad as por JAK2 hasta que nuevas a
proteín as tirosincinasa JAK, que se activa despué s de la unión de la citocin
JAK2 puedan sintetiz arse. La observ ación de que los inhibid a y la
ores de dimeriz ación del recepto r (véase la Fig. 16-1 O).
los proteas omas prolon gan la transd ucción de la señal JAK2
da apo-
yo a este mecani smo. · Tanto en las RTK como en los recepto res de citocin as, las
secuen cias
Estudio s con células de mamífe ro en cultivo han mostra do de aminoá cidos cortas que contien en un residuo de fosfoti
que rosina
el receptor para la ho rmo na de crecim iento, que pertene ce están unidas por proteín as con domin ios SH2 o PTB conser
a la su- vados, que
perfamilia de los recepto res de las citocin as, está reprim ido se encuen tran en muchas proteín as de transdu cción de las
por otra señales.
proteína SOCS, la SOCS- 2. De modo sorpren dente, los ratones Las secuencias de aminoá cidos que rodean la tirosin a fosfori
defi - lada
cientes en SOCS-2 crecen mucho m ás que sus contrap artidas determ inan qué domini o se unirá a ella. Estas interac ciones
silves- proteín a-
tres y tienen longitu des óseas mayore s y un crecim iento propor proteín a son import antes en mucha s vias de señaliz ación (véanse
cional las
superio r de la mayor parte de sus órgano s. De este modo, las Figs. 16- J l y 16- 12).
proteí-
nas SOCS desemp eñan un papel negativo esencial en la regulac
ión
intracelular de la iniciaci ón de señales a partir de recepto res • _La ~ía JAK/STAT opera corrien te abajo desde todos los recepto
para la res de
eritrop oyetina , la hormo na de crecim iento y otras citocin as. Cltocm a y alguno s RTK. Los monóm eros STA'T
. n un1·d os a Ias 1os1ot1
e e ·
ro-
smas en los receptores están fosfori lados por JAK . d
. . asocia as a recep to-
res, luego se d1menzan y se mueven hac1·a el , 1 d d
.
. .
trascnpc1ón (véase la Fig. 16- 13 ). nuc eo, on e activan 1a

• La endocitosis de los comple ' h

CONCEPTOS CLAVE DE LA SECC IÓN 16.1 r ¡os ormon a- recepto r y su degrad ación
en 1os 1sosom as es una vía princ· l
· ·
Receptores que activa n las tirosin cinas as protei cas smas cmasas recepto ras y de receipa para reducir el númer o de tiro-
d . .
celular lo que dism · , p 1ores e citocm a sobre la superficie
' muye ast 1a sensibi lidad d 1 •1
· Dos amplias clases de receptores activan las tirosincinasas protei- rosas hormo nas peptídicas. e as ce ulas a las nume-
cas: (1) los receptores tirosincinasas (RTK), en los cuales la cinasa
es • La señalización desde los receptores d . .
una parte intrínseca del receptor, y (2) los recepto res de citocina
s, fosfotirosina fosfatasa SHPJ . e citocm as es termin ada por la
en los cuales la cinasa está unida fuertem ente al domini o citosóli
co y vanas proteín as SOCS ( véase la Fig. 16-14 ).
del receptor. La señalización de los receptores tirosincinasa y de
los
receptores de tirosina activan vías de señalización similares corrien
te
abajo (véase la Fig. 16-2).

• Los receptores tirosincinasas, que se unen a péptido s y a proteín

as
de señalización tales como los factores de crecimi ento y la insulin
a, 16.2 La vía de la Ras/MAP .
pueden existir como dímeros preformados o dimerizarse durante eas1· todos cinasa
la los recepto d .
· . res e
unión a los ligandos. La unión a los ligandos desencadena la forma
- cmas activan la vía de ¡ R t1rosin cmasas
·
Y los recepto res de cito·
ción de receptores diméricos funcionales, un paso necesario en
la proteína Ras, una protein G ª
as/MA P ·
cznasa (véase la Fig. J 6-2b). La
activación de la cinasa asociada al receptor. superf amilia de la GTP a d monom érica (peque ña) perten
ece a la
(véase la Fig. 15-7). asa e prot ,
La R . emas interru ptoras' intrace lulares
as activad a
promu eve la formac ión , en la
734 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controla n la
expresión génica
-
nie1nbrana, d e co m p lejos de transducc ió n de la se iial que con t ie ne n hidrólisis real de GTP es ca tali zada por los amino.ícidos, tanto de Ras
tres proteincinasas que act úan secuencia lm e n te. Esta cascada de ci- como de GAP. En parti c ul ar, la inserción de cadenas laterales de argi-
1111s11scu lmina en la activació n de cie rtos miembros d e la familia de la nina de una GAP al si tio ac tivo de la Ras estabiliza u n intermediario
MAP cinasa, qu e pu eden tran sloca rse al nú cleo y fosforilar muchas de la reacció n de hidró lis is.
proteínas distintas. Entre las proteínas diana para la MAP cinasa, se
encuentran los factores de transcripción que regulan la expresió n ~ Las proteínas Ras de los mamíferos ha n sido estu~iadas con gra n
de proteínas co n papeles importa ntes en el ciclo y la diferenciación U d etalle porque las proteínas Ras mutantes se asocian con muchos
celulares. Res ulta importa nte que, con frecuencia, diferentes tipos tipos de cánceres humanos. Estas proteí11as muta ntes, que se unen al
de señales extracelulares activen diferentes vías de señalizació n que GTP pero n o pueden hidrolizarlo, están permanentement e en estado
resultan en la activación de miembros distintos de la familia de la "encend ido" y contribuyen a las transformaciones oncogénicas (véase
MAP cinasa . el Cap. 24 ). La determinació n de la estructura tridimensional del com-
Dado que una mutació n activadora de un RTK, la Ras, o una pro- plejo Ras-G AP y las pruebas de las formas mu tantes de Ras explicaron
teína en la cascada de la MAP cinasa se encuentra en casi todos los la so rprendente observación de que la mayoría de las proteínas Ras ac-
tipos de tumores humanos, la vía de los RTK/Ras/ MAP cinasa ha sido tivas const itutiva mente, oncogénicas (Rasº ), contien en una mutació n
sometida a extensos estudios y se sabe mucho acerca de sus componen- en la posición 12. El reemplazo de la glicina- 12 normal con otro ami -
tes. Comenza mos nuestro análisis revisando de qué manera la Ras cicla noácido (excepto prolina) bloquea la unión normal de GAP y "fija"
entre el estado activo e inactivo. Luego, describimos d e qué manera la esencialmente a Ras en el estado activo unido a GTP. ■
Ras se activa y pasa una señal a la vía de la MAP cinasa. Finalmente,
examinam os los estudios recientes que indican que tanto las levaduras La primera indicación de que Ras opera corriente abajo desde RTK
como las células de los eucariontes superiores contienen múltiples vías en una vía de señalización común provino de experimentos en los cua-
de MAP cinasa y consideramos los modos en que las células mantienen les fib ro blastos en cultivo fueron inducidos a proliferar por el trata-
diferentes vías de MAP ci nasa separadas unas de otras mediante el uso miento con una m ezcla de dos hormonas proteicas: el factor de cre-
de proteínas plataforma. cimiento derivado de las plaquetas (PDGF) y el factor de crecimiento
epidérmico (EGF) . La microinyecció n de anticuerpos anti-Ras a estas
cél ulas bloqueó la proliferación celular. Por el contrario, la inyección
La Ras, una proteína interruptora GTPasa, de Rasº, un mutante activo constitutivamente de la proteína Ras que
hidroliza GTP de modo muy ineficiente y así persiste en estado acti-
opera corriente abajo de la mayoría de los
vo, provocó la proliferación de las células en ausencia de sus facto res
receptores RTK y citocinas de crecimiento. Estos hallazgos son compatibles con estudios que em-
Al igual que las subunidades Gª en las proteínas G triméricas anali - plean el m étodo de ensayo de tracción d etallado en la Figu ra 15- 14 , que
zadas en el Capi tu lo 15, la proteína G monomérica conocida como muestra que la adición de FGF a los fibroblastos conduce a un rápido
Ras alterna en un estado "encendido" con el GTP unido y un estado incremento en la proporción de Ras presente en la fo rma activa unida
inactivo "apagado " con el GDP unido (véase la Fig. 15-6 para la re- a GTP. Sin embargo, como veremos, un RTK activado (o un receptor
visión de este con cepto). A diferencia de las proteínas G triméricas, de citocina) no puede activar de modo directo la Ras. En lugar de ello,
la Ras no está d irectamente unida a los receptores de la superficie otras proteínas deben ser reclutadas primero al receptor activado y ser-
celular. La Ras ( - 170 aminoácidos ) es más pequeña que las proteínas vir como adaptadores.
G. (- 300 am inoácidos), pero los dominios que unen GTP de las dos
proteín as tien en una estructura similar (véase la r-ig. I 5-7 para revi-
sar la estructura de la Ras). Los estudios bioquímicos y estructurales Estudios genéticos en Drosophila identificaron
muestran que la G" tambi én contien e un d o minio de la proteína que proteínas transductoras de la señal clave en la vía
activa la GTPasa (GAP) que incrementa la velocidad intrínseca de de la Ras/MAP cinasa
hidrólisis d e GT P por la G . Dado que este dominio no está presente
en la Ras, tiene una velocid~ d intrínseca mente más lent a de hidró lisis Nuestro conocim ie nto d e las prolt'in,1s implicadas l'n la ví,t de la
de GTP. As í. el tiempo de vida promedio del GTP unido a la Ras es de Ras/ MAP c inasa provienen princi palrn t·ntc ck )()s a n ;i lisis gC'nét i-
aproximadament e I minuto, mu cho más la rgo que el riempo dt' vida cos de moscas dt' la frut a mutan tes ( Drosophí/a ) y de gusa nos (C.
promedio del complejo Gu·GTP.
ele>:ans) q ue fueron bloq ueados C'll i-1,1pas part icu larl's de la dife-
La actividad de la proteína Ras eslá regulada por varios facto res. La re nc iació n. Para il ustrar t.'! pod.-r de l's lC· en foque experim en tal.
activación d e la Ras está acelerada por el factor de intercambio de J:Ua - considc:ramos el desarro llo de un ripo p.1rt icular dC' ct'lula t·n el ojo
compuesto d e la nrosopi,i/n.
nina nucleótido (GEF), que se une al complejo Ras·G DP y provoca la
disociación del GDP unido (véase la Fig. 15 -6 ). Dado que el GTP éSl:I El ojo co mpuesto ck l., mosca cst,\ formado por m ás de 800 ojos
presente en las células a con centrac ión más alta que el GDP, se 11ne individua les lla mados {lmatidíos (! 1¡:. 16- l.'>J ). Cada o ma tidio con-
espontáneamente a las m oléculas d e Ra s "vacías''. lo c ual libera el GEF siste de 22 cé lulas. ocho dC' las males son neuronas fotosensibles
y la formac ión de RAS·GTP. La hidró lisis posterior del GTP unido a llamadas rctí1111/11s, o células R. d e-s ign adas R 1-RS (Fig. 16- 1Sb ). Un
GDP d esactiva la Ras. Puesto que la actividad intrínseca de GTPasa RTK lla mado Sn,rnless ( Scv) regula específica mente el desarrollo de
del Ras·GTP es baja comparada con la de G -GTP. el Ras·GTP requie-
0
la célula R7 y no resulta esencial para ninguna otra funció n conocida.
re el auxilio de otra proteína, una proteína activadora de la GTPasa En moscas con un gen scvrnlcss (srv) muta nte, la célula R7 de cada
(GAP) para desactivarla. La unión de una G AP al Ras·GTP acelera omatidio no se forma (r-1¡::. 16- 1Sc, abajo ). Dado que el fotorreceptor
la actividad de GTPasa intrínseca de la Ras en más de 100 veces; la R7 es necesa rio solo para que las moscas vean en la luz ultravioleta,

16.2 La vla de la Ras/ MAP cinasa 73 5

 "l

(a) (bl
- ----

R7
Tip.estr e '(iJ AJ
!
R6
R6 /
R5 .P- 7
d- R1

Axones RB
/ t
R2
R4 R2
R3

Hacia la
Mutante

al cerebro superficie
del ojo

FIGURA 16-1 5 El ojo compuesto de la Drosophila melanogaster. (a) las mutantes sevenless vistas por una técnica especial que puede distinguir los
Fotomicrografía electrónica de barrido que muestra los omatidios individuales fotorreceptores de un omatidio. El plano de corte está indicado por las flechas
que componen el o¡o de la mosca de la fruta. (b) Corte longitudinal y vistas azules en (b). y la célula R8 está fuera del plano de estas 1magenes. Lo_s siete
de los cortes de un omatidio individual. Cada una de estas estructuras fotorreceptore s de este plano se ven fácilmente en el omat1d1o_t1po silvestre
tubulares contiene ocho fotorreceptores. designados R1-RB, que son células (porte iupenor), mientras que solo seis son visibles en el omat1d10 m~tante
largas, cilíndricas, fotosensibles. R1-R6 (en amarillo) se extienden en toda la (porte inferior) . Las moscas con la mutación i evenlesi carecen de la celula R7 en
profundidad de la retina, mientras que R7 (pardo) está localizada hacia la sus ojos. (Parte (al tomada de E Hafen y K. Basler. 1991. Developmenr l (suppl.}-123; parte lb) adaptada
superficie del ojo, y RB (azul), hacia la parte posterior, en la zona de la salida de de R Re,nke y s L. z,pursky, 1988. Ce// 55.321. parte (e) cortesla de U Baner¡ee J
los axones. (c) Comparación de los ojos de las moscas de la fruta silvestres y de

las mutantes que carecen de las células R7 pero por lo demás son nor- A fin de identificar las proteínas que transducen las señales in-
males se aíslan fácilmente. Por lo tanto, las células R7 de las moscas tracelulares en la vía RTK Sev, los investigadores produjeron moscas
son un sistema genético ideal para estudiar el desarrollo celular. mutantes que expresaban una proteína Sev sensible a la tempera-
Durante el desarrollo de cada omatidio, una proteína llamada Boss tura. Cuando estas moscas se mantuvieron a una temperatura per-
(Bride of Sevenless) se expresa sobre la superficie de la célula R8. Esta misiva, todos los omatidios co ntuvieron las células R7; cuando se
proteína unida a la membrana es el ligando de RTK de Sev sobre la su- mantuvieron a temperatura no permisiva, ninguna de las células R7
perficie de la célula precursora R7 vecina, y la señala para que se desa- se desarrolló. Sin embargo, a una temperatura intermedia particular
rrolle en una neurona fotosensible (Fig. l 6- l 6a). En las moscas mutan- fue funcional una cantidad de RTK Sev suficiente para mediar el
tes que no expresan una proteína Boss o Sev RTK funcional, la interac- desarrollo de R7 normal. Los investigadores razonaron que a esta
ción entre las proteínas Boss y Sev no puede ocurrir y no se desarrollan temperatura intermedia la vía de señalización estaría defectuosa (y
células R7 (Fig. 16- 16b); este es el origen del nombre "Sevenless" (que
así, no se desarrollaría n células R7) si el nivel de otra proteína in-
en español quiere decir "sin siete") para el RTK de las células R7.
volucrada en la vía se redujera, disminuyendo de este modo la acti-

(a) Tipo silvestre

(b) Mutante individual (e) Mutante doble
(sev- ) (sev-; Rasº)
RS)
\ Célula

y y
o act;vt)
FIGURA EXPERIMENTAL 16-16 Los estudios genéticos revelan que la
o / Boss
Ras
activación de Ras Induce el desarrollo de los fotorreceptores R7 en el Sev
ojo de la Drosophlla. (a) Durante el desarrollo larvario de las moscas de tipo
silvestre, la célula RBen cada omatidio en desarrollo expresa una proteína de
la superficie celular llamada Boss, que se une al Sev RTI< de la superficie de su
célula precursora vecina R7. Esta interacción induce cambios en la expresión
génica que resultan en la diferenciación de la célula precursora en una neurona
funcional R7. (b) En los embriones de las moscas con una mutación en el gen Precursor R7

l
sevenless (sev}, las células precursoras R7 no se pueden unir a Boss y, por lo
tanto, no se diferencian normalmente a células R7. En lugar de ello. la célula

l
11od"odóo Sin
precursora entra en una vía de desarrollo alternativa y por último se transforma inducción
en un cono. (c) Las larvas que son mutantes dobles (sev; Ros°} expresan Ras en
forma activa constitutivamente (Rasº) en la célula precursora R7, lo cual induce
la diferenciación de las células precursoras R7 en ausencia de la señal mediada

0
por Boss. Este hallazgo muestra que la Ras activada es suficiente para mediar
la inducción de una célula R7. (Wase M. ASlmonycols. 1991,Ce//67:701.yM.E.Fomnlycols.
1992, Nature 355:559 J

736 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 FIGURA 16-17 La activación de Ras después de la unión al ligando
de los receptores de tirosincinasa (RTK) o receptores de citocina. Los
Monómeros receptores para el factor de crecimiento epidérmico (EGF) y muchos otros
de EGF factores de crecimiento son RTK. La proteína adaptadora citosólica GRB2 se
une a una fosfotirosina especifica en un receptor activado, unido al ligando y
Exterior a la proteína Sos citosólica, >' la lleva cerca de la membrana plasmática y de su
sustrato, el Ras-GDP inactivo. La actividad del factor de intercambio de guanina
Citosol nucleótido (GEF) de la Sos promueve entonces la formación del Ras-GTP activo.
Nótese que el Ras queda unido a la superficie c1tosólica de la membrana
Ras inactiva plasmática por un ancla hidrofóbica de farnesilo (véase la Fig 1O 19). fVease J

l
Schlesslnge,. 2000, Ce/1 103.2II . y M A s,mon, 2000. Ce!/ 103·13 J

La unión de la hormona provoca D

la dimerización del receptor, la
activación de la cinasa y la fosforilación vidad de toda la vía por debajo del nivel necesario para formar una
de los residuos de tirosina del receptor célula R7. Una mutación reces iva que afectara una proteína de este
citosólico tipo tendría este efecto porque en los organismos diploides, como
una Drosophila, un heterocigoto que contuviera un alelo silvestre y
uno mutante de un gen, produciría la mitad de la cantidad normal
del producto génico; así, aun si la mutación recesiva est uviese en un
gen esencial, el organismo sería habitualm en te viable. Sin embargo,
una mosca que llevase una mutación sensible a la temperatura en
el gen sev y una segunda mutación que afectara o tra proteína en la

8 vía de señalización, se esperaría que careciera de las células R7 a

temperatura intermedia.
Empleando este m étodo de detección, los investigadores identi-
ficaron tres genes que codificaban para proteínas importantes en la

La unión de GRB2 y de Sos acopla

el receptor a la Ras inactiva
fJ l vía Sev: una proteína adaptadora SH2 que exhibía 64% de identidad
en la secuencia de aminoácidos con el GRB2 humano (proteína de
unión al receptor del factor de crecimiento 2), un factor de intercam-
bio de guanina nucleótido llamado Sos (Son of Sevenless) que exhibía
un 45% de identidad con su contrapartida en el ratón, y una pro-
teína Ras que exhibía 80% de identidad con sus contrapartidas en
los mamíferos. Posteriormente, se encontró que estas tres proteínas
operaban en otras vías de señalización iniciadas por la unión de los
ligandos a diferentes RTK y que se usaban en distintos momentos y
lugares en la mosca en desarrollo.
En estudios posteriores, los investigadores introdujeron un gen
rasD mutante en embriones de moscas que llevaban la mutación se-
venless. Como se notó antes, el gen rasD codifica una proteína Ras
constitutivamente activa que está presente en la forma activa que une
GTP aun en a usencia de la señal hormonal. Aunque no se expresaba
RTK Sev funcional en estas mutantes dobles (se-; rasD), las células R7
GDP +i lJ La Sos promueve la disociación
del GDP desde Ras; el GTP se une se formaban normalmente, lo cual indicaba que la presencia de una
y la Ras activa se disocia desde Sos proteína Ras activada es suficiente para la inducción del desarrollo
GTP i
de una célula R7 (Fig. l 6- l 6c ). Este hallazgo, compatible con los re-
sultados de los fibroblastos en cultivos descritos previamente, avala
la conclusión de que la activación de Ras es un paso principal en la
señalización intracelular por la mayoría de todos los receptores de
citocinas y RTK, si bien no por todos ellos.

Los receptores tirosincinasas y las JAK cinasas están

vinculados a Ras por proteínas adaptadoras

Para que los receptores de citocinas y los RTK activen Ras, dos pro-
teínas citosólicas (GRB2 y Sos) primero deben ser reclutadas para
proveer un vínculo entre el receptor y la Ras (Fig. 16- 17 ). La GRB2
Señalización
es una proteína adaptadora, lo cual significa que no tiene ac tividad

16.2 La vía de la Ras/MAP cinasa 737

 . . . ·d
enzimática y sirve co mo un vín culo o plataforma entre otras dos s1m11ar: ciert os res1 L105 proporcionan un motivo estructural clave
neccsa n o para 1a un 1·6 n y los res iduo s vecin os confiere n espec ific,··
•
proteínas (en este caso, entre el receptor activado y la Sos). La Sos
es una proteína de intercambio de guanina nucl eótido (GEF) qu e dad a esta unión.
ca taliza la conversión de una Ras unida a GDP in activa a una fo rm a
activa unida a GTP.
La GRB2 es capaz de servi r como proteína adaptadora por su do- La unión de Sos a la Ras inactiva provoca un cambio
minio SH2, que se une a un residuo de fosfotirosina específico en el de conformación que desencadena el intercambio
RTK (o receptor de tirosina) activado. Además de su dominio SH2, la
de GTP por GDP
proteína GRB2 adaptadora contiene dos dominios SHJ que se unen a
Sos, el factor de intercambio de guanina nucleótido ( ri g. 16 - 17) . AJ Después de la activación de un RTK (p. ej., el recep tor de EGF), un
igual que los dominios SH2 y PTB que unen fosfotirosina, los dom i- complejo que contiene al receptor activado, GRB2, y Sos se forma so-
nios SH3 están presentes en gran cantidad de proteínas implicadas en bre la cara citosólica de la membrana plasmática (véase la Fig. 16-1 7).
la señali zación intracelular. Aunque las estructuras tridimensionales La fo rmación del complejo depende de la habilidad del GRB2 de unir
de varios dominios SH3 son similares, sus secuencias específicas d e simultáneamente aJ receptor y a Sos. Así, la activación del receptor
aminoácidos varían. Los dominios SH3 de GRB2 se unen selectiva - conduce a la relocalización del Sos desde el citosol a la membrana,
mente a secuencias ricas en prolina de Sos; diferentes dominios de lo que lleva al Sos cerca de su sustrato, es decir, Ras·GDP que ya está
SH3 en otras proteínas se unen a secuencias ricas en prolina distintas unido a la membrana plasmática por m edio d e un lípido asociado
de las presentes en Sos. de modo covalente. La unión del Sos al Ras ·GDP lleva a cambios de
Los residuos de prolina desempeñan dos papeles en la inte- conformación en los segmentos Interruptor I e Interruptor II de la
racción entre un dominio SH3 en una proteína adaptadora (p. ej., Ras, lo cual abre así el bolsilJo de unión p ara GDP de m odo que pueda
GRB2) y una secuencia rica en prolina en otra proteína (p. ej., Sos). difundir hacia el exterior ( í- ig. 16 - 19). En otras palabras, Sos funciona
En primer lugar, la secuencia rica en prolina asume una confor- como el GEF para Ras. Luego, el GTP se une al Ras y lo activa. A su
maci ón extendida que permite extensos contactos con el dominio vez, la unión de GTP a la Ras induce una conformación específica de
SH3 y facilita de este modo la interacción. En segundo lugar, un Interruptor I e Interruptor II que permite que la Ras·GTP active a la
subconjunto de estas prolinas encaja en "bolsillos" de unión sobre siguiente proteína en la vía de la Ras cinasa/MAP.
la superficie del dominio de la SH3 ( Fig. 16 - 18) . Varios residuos
diferentes de la prolina interactúan también con el dominio SH3 y
son responsables de d eterminar la especificidad de la unión. Así, la Las señales pasan de la Ras activada a una cascada
unión de proteínas a los dominios SH3 y a SH2 sigue una estrategia de proteincinasas y termina con la MAP cinasa

Los estudios bioquímicos y genéticos en las levaduras, C. elegans,

Drosophi/a y mamíferos han revelado que corriente abajo de Ras h ay
una cascada muy conservada de tres proteincinasas que culmina en
la MAP cinasa. Si bien la activación de la cascada de cinasa no da
los mismos resultados biológicos en todas las células, un co njunto
común de cinasas que actúan de modo secuencial define la vía de
la Ras/MAP cinasa, según se reseña en la í-igura 16 - 20. La Ras se
activa por el intercambio de GTP por GDP (paso D ). El Ras·GTP
activo se une al dominio N-terminal regulador de Raf, una cinasa
de serina/treonina (no tirosina), y la activa (paso D ). En las células
no estimuladas, la Raf se fosforila y se une en un estado inactivo a
la proteína que une fosfoserina 14-3-3. La hidró lisis de Ras·GTP a
Ras·GDP lib~ra Raf activa desd e su complejo con 14-3-3 (p aso 11) y
la Raf post~no rmente ~osforila y, por lo tanto, activa la MEK (paso
11). (Una_cmas~ proteica de especificidad doble, la MEK, fosforila
sus protemas diana tanto sobre los residuo d · ·
. s e tuosma co m o sen·-
n_a/treonma )._ La MEK activa fosforila y activa en tonces a la MAP
cmasa, otra cmasa de_serina/treonina con ocida también como ERK
(paso 11). La MAP cm asa fosforila muchas prot ,
emas dº1stmtas,
. .m-
cluyendo los factores d e transcripció .
Dominio SH3 1
n nuc ear que medrnn las res-
puestas celulares (paso l'll).
Varios tipos de experimentos han d d
FIGURA 16-18 Modelo superficial de un dominio de SH3 unido a un . emostra o que Raf MEK y
MAP cmasas se encuentran corriente b . d '
péptldo diana. El péptido diana corto, rico en prolinas, se muestra como . a ªJº e 1a Ras y h an revelado
e1ord en secuencial de estas protei'na ,
un modelo espacial. En este péptido diana, dos prolinas (Pro4 y Pro 7, en azul s en 1a v1a Por e¡·em I t ' s
Raf mutantes que carecen del do . . . p o, pro ema
oscuro) encajan en bolsillos de unión sobre la superficie del dominio SH3. Las · • . mmio regulador N - terminal son ac-
interacciones que involucran una arginina (Arg 1, rojo), otras dos prolinas (azul tivas constitutivamente e inducen ,
a proliferar en ause · d . a 1as
. ce1u 1as en cu111vo
· · t es
claro) y otros residuos en el péptido diana (verde) determinan la especificidad qmescen
ncia e est1mulac16n por fac d . .
de la unión. [Tomadode H. Yu ycols. 1994. Ce/1 76933.) En un inicio , estas p t , R tores e crec1m1ento.
ro emas af m t . .
u antes se identificaron en las célu-

738 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 1 (a) Ras·GDP (b) Ras-Sos (c) Ras-GTP

■ Interruptor 1
■ Interruptor 11 1

Fosfatos Fosfato
GTP ex,~ GTP y
p
---

FIGURA 16-19 Estructuras de Ras unidas a GDP, proteína Sos y GTP. (guanina); la unión posterior de los fosfatos del GTP completa la interacción.
(a) En Ras-GDP. los segmentos Interruptor 1 (verde) e Interruptor 11 (azul) no El cambio de conformación resultante en los segmentos Interruptor I e
interactúan directamente con GDP. (b) Una hélice ex (pardo) de Sos se une a Interruptor II de la Ras que permiten que tanto el fosfato GTP g desplace al
ambas regiones interruptoras de Ras-GDP. lo que conduce a un cambio de Sos y promueve la interacción del Ras-GTP con sus efectores (que se analizará
conformación masivo en Ras. En efecto, Sos abre Ras y desplaza la región posteriormente). Véase la F1gu1<1 15-8 para otro análisis de Ras•GDP y Ras•GTP.
Interruptor 1, lo que permite así que GDP difunda hacia el exterior. (c) Se cree (Adaptado de P A Bonac<-S¡odln y J Kurlyan, 1998, Narure 394:3-41 )
que GTP se une al complejo Ras-Sos en primer lugar a través de su base

Ras activada por La Ras activa La hidrólisis de GTP

intercambio de recluta, une lleva a la disociación
Exterior GTD por GTP y activa Raf de Ras desde Raf

Q ~
~D ( ~
GDP GTP ;
-D
El
\'
P¡
c;S p

Ras inacti va Ras activa

Citosol
Raf inactiva
ctiva
Dominio ~
regulador . .,o
- - D omin_ MEK
N -terminal de la c,_nasa
C-terminal
MEK
14-3-3---

FIGURA 16-20 La vla Ras/cinasa MAP. En las células no esr:muladas,

la mayor parte de Ras esra en su forma 1nactI·,a con GDP un,d,:;, la unión
IIMEK
activa
MAPK ~
q
de un ligando a S'J RT"K o recF?pto r de c•1oc1na cor~ducl? ó 1;, fc rrnac,ón <H
complejo activo Ras-GTP (paso O; véas':' tamb,~•n la · ' J '· ' El Pa~ actu iido
desencadena la cascada de ci nasa crJ((lente .:ib,JJO ilustrad;¡ 1:r, lo~ r,,i~<,s D-m
I
. que culmina con la activación de la c,n¿~a ~,•;.P (M/I PI" En I~~ cr:I J as, ,o MAP ci nasa
es,imuladas. la un1on de un dímero de la orot<',PJ 1/. -3-; a la r.,¿ l." ,-, tal:, l,za
en su conformación Inacuva 11a proteína J .J. 3 3 se une a los revj,J()~ d~
fosfose11na en un número de pro te1nas de señal,zac,ón ,mponantPS •
Cada monómero 14-3-3 se une a un resid•JO d•? fosfosPr1nJ ""' R.,f. unr: ,, 1;, La MAP ci nasa act iva se transloca
al núcleo; activa muchos factores
fosfosenna-259 en el dominio N-terminal, y el otro a !a fcsfo~ePnd-62 i Pn el
de transcripción
dominio de la cinasa La interacción del dom1nI0 regulador flaf tJ-terr:"1r,,;, ·cr
Ras-GTP resulta en la desfosforilación de una de la~ sc>nnas 0 1,e u-,er, Ra· " 14 ·.1·
3, la fosforilación de los otros residuos y la arnvación de la acw1dad de c,na~?.
Raf. Después de que el Ras-GDP inactivo se d1soC1a de Raf. pre~um,bleMente
puede ser reactivado por señales provenienrPs de los recer,rores an1vados y
recluta asi moléculas adicionales de Raf a la membrana '"':,'k F , .,,.,e'• , , º"~'-
lC".:1. ·"º" lr•f>'""P Peq~ 41 21$ 1 J t-vru--'"' Yccr~ 200 ¡ q~Cf'"'~°'C..J Hr,,.•'"lC/•eR,~• 56 '. ~ i '/ ., r:
X"'ri:.r:e, y col!> }000 B,orherr, • 351 15' l

16.2 La vía de la Ras/MAP cinasa 739

 MAP cinasa resulta
las tumo rales; al igual que la proteína R.1s" activa co nstitutiva mente, La fosforilación de 1a ..
,._. dice que estas proteínas Raf mutantes están codificad as por onco-
b ·o de confor macion que
gcncs cuyas proteínas codificad as promueven la transfo rmación de en un cam 1 • • talítica
incrementa su activid ad ca .
las células en las cuales se expresa n (véase el <·ap. 2.J ). Por el co ntrario,
las células de mamífero en cultivo que expresa n una pro teí na Raf mu - y promueve 1a d 1·merización de la cmasa
tante no fun cional no pueden ser estimuladas para proliferar sin co n- . . , ·cos )' cristalográficos de rayos X han proporciona-
Estu d 1Os 6 wq u1m1
trol por una pro teína Ras" activa co nstitutiva mente. Este hallazgo es- d del modo en que la 1os1orte e ·¡ '6 .
ac t n activa la
do un panoram a deta 11 a O . .
tableció un vínculo ent re las proteínas Ras y Raf y demostró que Raf . cinasas JAK y los receptor es t1ros111cinasa
MAP cmasa. Como en 1as . .
se encuentr a corrie nte abajo de Ras en la vía de se iializació n. Estudi os .. ,. e ma inac ti va no fosfonla da de la MAP crnasa'
el s1t1O catalittco en 1a ,o r . . .
de unión in vit ro mostraron adicionalmente que la proteína Ras·GTP está bloq uea d o po r un I ra m o de am inoácid os, .
el labio de activación
purificada se une directamente al dominio regul ador N-terminal de .. ·, de M EK a la MAP ctnasa desestab1.hza
( 1-ig. 16-21~ ). La u mon
.
la es-
. .
la Raf y activa su actividad ca talítica. . ¡
tru ctu ra d e1 1ab tO, o que da como resultad o la expos1c1 6n de una
· • .
El hecho de que la MAP cinasa se activa en respuesta a la acti - t1ros111a- t
185 en err ada en la conform ación inactiva. Después de la
vación de Ras fue demostra do en células cultivadas quiescentes que fosfo rilac ión de esta tirosi na crítica, la M EK fosfori ta la treoni na-1 83
expresa ban un a pro teína Rasº constitut ivamente activa. En estas cé- vecina ( J'ig. 16-21 b).
lulas, la MAP cinasa activada es generada en ausencia de estimulación Tanto '1a tirosina fosfo rilada co mo el residuo de treonina fosfo-
por hormonas promoto ras del crecimiento. Más importan te, los foto - rilada en la MAP cinasa interactú a n con am inoácido s adicionales;
rreceptores R7 se desarrollan normalmente en el ojo en desarrollo de por lo tant o, esto resulta en una co nformac ión alterada a la región
mutantes de Drosophila que carecen de proteína Ras o Raf funcional del labio, lo que a su vez permite la unión de ATP al sitio catalítico ,
pero expresan una MAP cinasa activa constitut ivamente. Este hallaz- el cual, como en todas las cin asas, se encuent ra en el surco entre los
go indica que la act ivación de la MAP cinasa es suficiente para trans- dominio s superior e inferior de la cinasa. El residuo de fosfotiro-
mitir un a señal de proliferación o de diferenciación normalm ente sina (pTI 85) también desempe ña en este caso un papel central en
iniciada por un liga ndo que se un e a un receptor de tirosincinasa la unión de proteína s sustrato -específicas a la superfic ie de la MAP
como el Sevenless (véase la Fig. 16- 16). Sin embargo, estudios bioquí-
micos demostr aro n que la Raf no puede fosfo rilar de forma directa la
MA P ci nasa o activarla de otro modo.
El vínculo final en la cascada de ci nasas activadas por Ras·GTP
surgió de estudios en los cuales los científicos fracciona ron extrac-
tos de células cultivad as en busca de la actividad de cinasa que po- Sitio catalític o de la cinasa:
inactivo Activo
dría fosfo rilar a la MAP cinasa y que estaba presente solo en las
células est imul adas con fac tores de crecimie nto, no en células no
estim uladas. Este trabajo co ndujo a la identificación de MEK, una
cinasa que fosfo rila de forma específica una treonina y un residuo
de tirosina en el labio de activación de la MAP cinasa y que, por lo
tanto, activa su acción catalítica. (El acrónim o MEK proviene de
MAP y ERK cinasa). Estudios posterior es demostr aron que MEK se
une al dom ini o catalítico C-termin al de una Raf y es fosforilada por
la cinasa serina/t reonina de Raf; esta fosforilación activa la acción
catalítica de la MEK.
Así, la activación de la Ras induce una cascada de cinasas, que in-
cluye Raf, MEK y MAP cinasa: RTK ➔ Ras-Raf ➔ MEK-MAP cinasa
activados. Aunque aquí no pondrem os énfasis en esto, la complejidad
de esta vía se incremen ta por las múltiples isoformas de cada uno de sus
componentes. En los seres humanos , hay tres Ras, tres Raf, dos MEK y
dos proteínas Erk; cada una de estas se superpon en, pero tienen fun -

~
ciones no redundantes.

ii 6- -;:~:~:.~.
Las mutaciones activadoras del gen B-Raf ocurren en más del
40% de los melanomas, un cáncer de piel que con frecuencia es
provocado por la exposición a la radiación solar ultravioleta. De estos
'
FIGURA 16-21 Estructuras del . ---------
melanomas, una mutación particular, una sustitución de valina por
ácido glutámico en la posición 600, da cuenta de más del 90% de ellos. y de la for'."a activa fosforlla d:. ~:na~a MAP Inactiva , no fosforllada
de act1vac1on está en una co f )_E la MAP c1nasa inactiva, el labio
Esta mutante B-Raf estimula la señalización MEK-ERK en las células de 1 .
ª cinasa. (b) La fosforilación orrnac1on tal que bloquea el sitio activo
~n ausencia de factores de crecimiento, y los transgenes mutantes B-Raf treonina-183 m83) cond n por la MEK. de la tirosina-185 (Yl 85) yla
mducen melano_mas en los ratones. Recientemente, inhibidores muy el lab·10 d ·
e act1vac1ón. Esteuce ª un
carnb· cambio. d e conformación pronunci ado en
potentes Yselecti~os de la cinasa B-Rafhan entrado en la práctica clíni- ª sus sustratos (ATP y sus proteín~ºs ~~/Ctlvación promueve tanto la unión
ca y están produciendo excelente s respuestas en pacientes con el mela- de la cmasa MAP. Un rnecanisrn na)ª la cinasa corno la dimerización
1 ·
noma B-Raf mutante. ■ as cinasas JAK y la actividad intOdepe
. 11 d '
iente de fosforilación similar activa
Canagara1ahyco1, .1997_ce11 to:as9¡ rinseca de cinasa de los RTK. (Tomado deB J

740 CAPITULO 16 • Vfas de señalización que controlan la expresión génica

cinasa. La fos forilación promueve no solo la actividad catalítica de que las células avancen a través del ciclo celular. La mayor parte de
la MAP cinasa, sino también su dimerización. La forma dimérica de los RTK que unen factores de crecimiento emplean la vía de la MAP
la MAP cinasa es translocada al núcleo, donde regula la actividad de cinasa para activar genes que codifican proteínas como c-Fos, que a
muchos factores de transcripción nucleares. su vez impulsan la célula a través del ciclo celular.
El mediador que regula al gen e-fas contiene un elemento de res-
puesta del suero (ERS), llamado de este modo porque es activado
La MAP cinasa regula la actividad de muchos por muchos factores de crecimiento del suero. Este impulsor com-
plejo contiene secuencias de DNA que unen múltiples factores de
factores de transcripción que controlan los genes
transcripción. Como se ilustra en la Figura 16-22, la MAP cinasa
de respuesta temprana
dimérica activada (fosforilada) induce la transcripción del gen e-
La adición de un factor de crecimiento (p. ej. , EGF o PDGF) a cé- fa s por activación directa de un factor de transcripción, el factor
lulas de mamífero en cultivo quiescentes (que no están en creci- complejo ternario (FCD , y la activación indirecta de otro factor de
miento ) causa un rápido incremento en la expresión de hasta 100 respuesta del suero (FRS) . En el citosol, la MAP cinasa fosforila Y
genes distintos. Estos se llaman genes de respuesta temprana porque activa una cinasa llamada p90R 5K, que se transloca al núcleo donde
se inducen mucho antes de que las células ingresen en la fase S y fosforila una serina específica del FRS. Después de la translocación
repliquen su DNA (véase el Cap. 20). Un gen de respuesta tempra- al núcleo, la MAP cinasa directamente fosforila serinas específi-
na importante codifica el factor de transcripción c-Fos. Junto con cas del FCT. La asociación del FCT fosforilado con dos moléculas
otros factores de transcripción, como el c-Jun, el c-Fos induce la de FRS fosforiladas forma un factor trimérico activo que activa la
expresión de muchos genes que codifican proteínas necesarias para transcripción génica.

MAP cinasa dimérica, activa

D
Citosol
fJ

JP

~
DP

0
h
lil
)m Transcripción

~ Secuencia codiflcante ~ " -

Secuencia codificante
L_:~~-__i.~=-= ~---~~"- Gen c-fos
Gen c-fos
Gen inactivo

ri1: el TCF y el SRF fosforilados actúan Juntos para estimular la transcripción de

FIGURA 16-22 Inducción de la transcripción de los genes por la cinasa los genes (p. eJ., c-fos) que contienen una secuencia ERS en su promotor. Véase
MAP. Pasos 11-11: en el citosol, la cinasa MAP fosforila y activa la o nasa p90oSY, el texto para detalles. 1Véase P ,Vara,s y COIS 1993, Ce// 73381. y V M R,vera y cols.. 1993, Mol Cell
que luego se mueve al núcleo y fosforila el factor de rranscr1poón SRF. Pasos lll
B,ol 13 6260 1
yft después de la translocación al núcleo. la cinasa MAP fosforlla directamente
el factor ae transcripción TCF que ya está unido al promotor del gen c-fos. Paso

16.2 La vía de la Ras/ MAP cinasa 741

 Facto r a Los rece ptor es acop 1ª d os a la .prot eína G
"-. • • • •
■ ■

• Facto r a tran smit en señales a la MAP cma sa

-~. .- ©
■
✓ , d pare amie nto de las leva dura s
■ en 1as v,as e a
• ■
o . ■
■ Aunq ue en 1os anim
. .
. les m u lt icelul ares la MAP ci n asa co n frecue
a . .
nas, la señ 1n-
• • • • / 11 ■
■ c1a
.
es act 1vada
.
po r 1 os
RTK O recep tores de las otoci
.
.
a 1-
/ zac1ó n prove nient e d e o tros recep to res p uede ac tiva r la MAP cina
Recep tor • __ _ sa
en d iferen tes células euca riótic as (véas e la
del fa ctor o. •
Recep tor del fa ctor a _h g. 1:,- 3-1). A modo de
•¡ .ó
1 u strnc1 n, co ns1•d eremes la, vía de apare a mi en to en S. cerel'isiae un
. b' tudia do de una casca da de MAP cm . ,
eJemp 1o 1en es asa ligada a los
recep to res acop 1a d o S ,a la pro teí na G (G PCR ), en este caso, para dos

.... ...~ -
Í - • li,ac ión po, femm ooas
fero mo nas peptí d icas secre tadas , los facto resª
Y_ a. .

~ ···••w
Las célul as de levad ura h aploi des son o b
ien del tipo de apa-
. t
rea m1en o a o b"ien v. ,., y secre ta n seña les pro teicas con ocidas como
fero mona s, que induc en el apare a m ie n to entre
las célula s de leva-
d uras haplo ide del tipo d e a parea m iento opue
s to, a o a. Una célula
• ■ • • •
haplo i de a secre ta el facto r de apa ream iento
la super ficie cel ula r para el fac tor a ; una
a y t ien e recep tores de
célula a secre ta el factor

l
Deten ción de l ciclo cel ula r del m ism o no mb re y ti en e recep tores d e super
ficie p ara el factor a
Morf ogéne sis (véase la Fig. 16- 23 ). Así, cada t ipo de célula
recon oce el fa ctor de
(form ac ió n de shmo o) apare a mien to prod ucido por el tipo o puest
o. La activ ació n de la vía
de la M AP ci nasa por los recep tores a o a induc
e la trans cripción de
genes que inhib en la progr esió n del ciclo ce
lular y o tros que capaci -
tan a las célul as del tipo de apare amie nto opu
esto para fusion arse y
+ Nutri entes fi nalme n te fo rma r una cél u la dip loide .

l
Fusió n celu lar
La u nión del ligan do a c ualqu iera d e los d
na de las levad u ras desen cad en a el in te rca
en la subu n idad G y la disoc iac ió n d e G
0
Este proce so de act ivació n es idén tico al
0
os G PC R de feromo-
m b io d e GT P por GDP
·GT P d el com plejo GPi

~
d e l GPC R a naliza do en
el capítu lo previ o (véas e la Fig. 15 - 17). En
much as vías inicia das
po r GPCR en los m am íferos , el G activ o tran

l
0
sduce la señ al. Por el
contr ario, est ud ios en m uta ntes y b ioqu ím
icos h an m ostrad o que
Fosió n " """ ' el co mple jo GPr d isocia do med ia todas las
resp u estas fis iológi cas
induc idas po r la activa ció n d e los recep tores
d e ferom onas en la
levad ura ( Fig. 16-24 a) . Por ejem plo, en las
~
~ Cé lula diplo ide de G 0 d isocia d a, la sub unida d GPY siemp re
lev adu ras que carecen
está libre. Estas células
pue_d en apare arse en ausen c ia d e los fac to
res d e ap a ream iento; es
decir, la respu esta de a pa ream iento está con
stitu tivam ente activa.
+ n utri ent1 / ~nutri entes Sin emba rgo, en las célula s d efect u osas para
la s ub un idad G o G,
la vía de apare am iento no p uede ser induc ida
Cre cim iento mitót ico Meio sis en ab so luto. Si ~na G:
fuese el trans . ducto
. r• en est as c él u Ias m ut a ntes
se esp eran, a que la v1a ·
fuese co nst1tut1vam ente activa .
En las vías d e apa rea m ·
ie nto d e 1as leva duras la G fun c10na .
Espo rulac ión desen caden
. ando una casca d d -
a e cm asas an á loga a la ' q uePseY encue
n-

00 tra corn , ent e abajo respe c to d e R as; ca d a prote ín

espec ifico para la leva dura
.
a t ien e un no mbre
• pero com pa r te secu encia s y es de es-

00 truct
. ura y fu nció n a ná log ª a 1a prote 111a
d 1ente qu e se m uestr a en la F.
casca d a se d escu bn ero n • . l
tan tes
.
, de m a m ífero correspon·
- igu ra 16- 20. Los com po nente s de esta
p rm cipa m ente a travé s d el a n álisis de mu-
q ue p oseen recep t o res f .
FIGUR A 16-23 Apare amien to de células de so n est ériles ( St ) d •
levaduras haplo ides unc10 n ales a Y a y p roteín as G, pero
inducido por feromonas. Las células a produ Las intera ccion e f' . e o e ,ectu osos en I
cen el factor de apareamient o as respu estas de ap aream1en · t
o.
a y el receptor del factor a: las células a produ cen el
factor a y el receptor a travé s de ex s . 1s1cas ent re lo s co mpo
del factor a . Ambos son receptores acoplados a la p enme n entes fuero n evalu a d as
proteína G. La unión de d e célul as de le d n tos de · .
los factores de apareamiento a sus receptores afines mm u nopr ec1pi tació n con extractos
sobre las células del estos estud ios lo . va u ras y otros t' d
tipo opuesto conduce a la activa ción génica, lo que
da como resulta do el
, ipos e estud i os. Sobr e la b ase de
apareamiento y la producción de células diploid es. qu e se mues tra, ens c1ent1 F.
fi cos h a
n p ro puest o la casca d a d e c1nasa .
En presencia de suficientes s
nutrientes, estas células crecerán como diplo1des. Sin
suficie ntes nutrientes, las m em bra na a travé s Ida I igulra l 6- 24a. La G~)i
b re, q u e est á unida la
célula s pasarán por meios1s y forma rán cuatro espora prote ína SteS y e en ace 11· 1, d · '
s haploides. 18
, 1a rec1uta y P ico. a la subu nidad y, se une a
' ª sus c m asas unida s a la m em b rana
742 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica
@ ARCHIVOS DE AUDIO (INGLÉS): Proteínas platafo rma en las cascadas de MAP cinasas de las levaduras

(a) Factor de apa ream iento (b) Vía o smorreguladora

Exterior
Activación por alta
Factores fuerza osmótica

□~ !
apareamiento
1 Receptor Activación

~~• p,otelna G

1 Cdc24
~v-
p MEKK
Citosol

P MEK

Ste5 Pbs2

p MAPK

~ Otras
~ dianas
•e >e :, rt:::::a

Factores

Transcripción

Genes de osmorrespuesta

FIGURA 16-24 Cascadas de cinasas MAP en las levaduras en las transcripción Ste 12, lo cual permite su unión al DNA e inicia la transcripción
vías de apareamiento y osmorreguladora. En las levaduras, diferentes de los genes que inhiben la progresión del ciclo celular y otros que permiten
receptores activa n distintas vías de cinasas MAP, dos de las cuales están que las células de tipo de apareamiento opuesto se fusionen y finalmente
esquematizadas aquí. Las dos MEK esquematizadas, al igual que todas las formen una célula diploide. (b) Vía osmorreguladora: dos proteínas de la
MEK. son cinasas de especificidad doble treonina/ tirosina; todas las otras membrana plasmática, Sho 1 y Msb 1. se activan de modo desconocido por
son cinasas serina/treonina. (a) Vía de apareamiento: los receptores para los la exposición de las levaduras a medios de alta fuerza osmótica. La Shol
factores de apareamiento de las levaduras a y a están acoplados a las mismas activada recluta la proteína andamio Pbs2. que contiene un dominio MEK,
proteínas G triméricas. Después de la unión al ligando y de la disociación de a la membrana plasmática. De modo similar a la vía de apareamiento en la
las subunidades de la proteína G. la subunidad Gll'r unida a la membrana liga membrana plasmática, el complejo Sho 1Msb I también activa la Cdc42, que
el andamio SteS a la membrana plasmática. GP, también activa la Cdc24, un a su vez activa la cinasa residente Ste20. La Ste20, a su vez, fosfori la y activa la
GEF para la proteína Cdc42 de tipo Ras; a su vez. el GTP-unido a Cdc42 activo Stel 1, e inicia una cascada de cinasa que activa la Hog 1, una cinasa MAP En
se une y activa la cinasa Ste20 residente. Ste20 entonces se fosforila y activa el citosol, la Hog l fosforila dianas proteicas específicas, incluyendo los canales
a Ste 11 , que es análoga a la Raf y a ot ra cinasa MEK de los mamíferos, las iónicos; después de la translocación al núcleo. la Hog 1 fosforila varios factores
proteínas MEKK. Ste20 sirve así corno una cinasa MAPKKK. La Stel 1 inicia una de transcripción y enzi_mas que modifican la cromatina. La Hog 1 también
cascada de cinasas en las cuales el componente final, Fus3, es funcionalmente promueve la elong_aoon transcripcional. En conjunto, las nuevas proteínas
equivalente a la cinasa MAP (MAPK) de los eucariontes superiores. Al igual sintetizadas y modificadas sostienen la supervivencia en medios de fuerza
que otras cinasas MAP, la Fus3 activada entonces se transloca al núcleo. Allí osmótica elevada. (Tomado de N. Dard y M Peter, 2006, BroEssoys 28.146, y R. Chen y J. Thorner,
fosforila dos proteínas, la Dig 1 y la Dig2, y alivia su inhibición en el factor de 2007. 810Chim 8,ophy< Acto 1773·13 J J.)

16.2 La vía de la Ras/MAP cinasa 74 3

plasmática. La SteS no tiene una función ca talítica obvia y actúa Una vez reconoc1•d os los di stintos componentes
. .
compartidos en
. . d l· MAP cinasa, los 111ves t1gadores se pregun.
como una plataforma para el ensamblaje de otros componentes de las diferentes v1as e .i
,
la cascada (Stel 1, Ste7 y Fus3). La G~r también ac tiva cdc24, un laron d e que manera se logra la especificidad . .
de las respuestas ce-
GEF para la proteina tipo Ras cdc42; a su vez, el GTP·cdc42 activa - • lares Los estud10s realizados con levaduras
lulares a sena 1es part1cu · ,
la protelna cinasa Ste20. La Ste20 fosforita y activa la Ste 11, una . ·d ·as iniciales de que las protemas plataforma
proporcio naron ev1 eno .
cinasa de serina/treonina análoga a la Raf y otras proteínas MEKK espec1' fi1cas d e 1a via
, pe rmitían qu e las c111asas transductoras de la
' ,
de mamíferos. La Ste 11 activada fosforita luego a la Ste7, una M EK - 1 d ,
sena e una via e n parti·cular interactuaran entre s1, pero no con
de especificidad doble que entonces fosforita y activa a la Fus3, una ·
cmasas d e otras vias.
, Por eJ·emplo, la proteína plataforma SteS esta-
cinasa de serina/treonina equivalente a la MAP cinasa. Después de ·1·
b 1 iza un gran comp leJ·o que incluye a las cinasas de la vía de apa-
la translocación al núcleo, la Fus3 fosforila dos proteínas, la Digl rcamiento; de modo similar, la plataforma Pbs2 se emplea para la
y la Dig2, y alivia su inhibición del factor de transcripción Ste 12. cascada de cinasas en la vía osmorregulador a (véase la Fig. 16-2 4).
A su vez, el Ste 12 activado induce la expresión de proteínas impli- En cada vía en la que participa la Ste 11, esta se encuentra restringida
cadas en las respuestas celulares específicas del apareamiento. La dentro de un gran complejo que se forma en respuesta a una señal
Fus3 también afecta la expresión génica a través de la fosforilación cxtracelular específica, y la señalización corriente abajo desde Ste 11
de otras proteínas. está restringida al complejo en el cual se localiza. Como resultado,
la exposición de las levaduras a los factores de aparcamiento induce
la activación de una MAP cinasa única, la Fus3, mientras que la ex-
Las proteínas plataforma separan múltiples vías posición a la elevada osmolaridad induce la activación de una MAP
de las cinasas MAP en las células eucarióticas cinasa distinta, la Hogl.
Las plataformas para las vías de cinasas MAP están bien documen-
Tanto las levaduras como las células eucarióticas superiores contie- tadas en las levaduras, moscas y gusanos, pero la presencia en células de
nen una vía de señalización Ras/MAP cinasa que se activa por seña- mamífero ha sido difícil de demostrar. Quizás la proteína plataforma
les proteicas extracelulares y culmina en la fosforilación de factores mejor documentada en los metazoarios es la Ksr ( por su denominación
de transcripción y otras proteínas de señalización por acción de la en inglés, kinase supressor of Ras o supresor de la cinasa de Ras), que
MAP cinasa que, en conjunto, desencadenan cambios especificos en une tanto a MEK como a la cinasa de MAP. En la Drosophila, la pérdi-
la conducta celular. Es importante que todos los eucariontes po- da del homólogo de Ksr bloquea la señalización por una proteína Ras
sean múltiples vías muy conservadas de cinasas MAP activadas por activa constitutivamente, lo cual sugiere una función positiva para la
diferentes señales extracelulares y que activan diferentes protei.nas Ksr en la vía de la Ras/MAP cinasa en las células de la mosca. Si bien los
MAP cinasa que fosforilan diferentes factores de transcripción; es- ratones knockoutque carecen de Ksr son fenotípicamente normales, la
tos, a su vez, desencadenan diferentes cambios en la diferenciación activación de la MAP cinasa por los factores de crecimiento o las citoci-
o función celular. Las cinasas MAP de los mamíferos incluyen las nas es menor que lo normal en varios tipos celulares de estos animales.
cinasas ]un N - terminales (JNK) y las cinasas p38, que se activan por Este hallazgo sugiere que la Ksr funciona como una plataforma que
vías de señalización en respuesta a varios tipos de estrés y fosforilan aumenta pero no es esencial para la señalización de la Ras/MAP cinasa
distintos factores de transcripción y otros tipos de proteínas de se- en las células de mamífero. Así, la especificidad de la señal de diferentes
ñalización que afectan la división celular. cinasas MAP en las células animales puede surgir a partir de su asocia-
Los estudios bioquímicos y genéticos en curso en ratones y Dro- ción con varias proteinas del tipo plataforma, pero se requiere mucha
sophila tienen como objetivo determinar qué cinasas MAP median investigación adicional para probar esta posibilidad.
qué tipo de respuestas en cuáles señales en los eucariontes superio-
res. Esto ya ha sido completado en gran medida para el organismo
S. cerevisiae, que es el más simple. Cada una de las seis cinasas MAP
codificadas en el genoma de la S. cerevisiae ha sido asignada por
análisis genético a vías de señalización desencadenadas por varias
señales extracelulares, como feromonas, alta osmolaridad, falta de CONCEPTOS CLAVE DE LA SECCIÓN
alimento, choque hipotónico y carencia de carbono/nitróge no. Una 16 _2
segunda cascada de MAP cinasa de las levaduras, conocida como la La vía de la Ras/ MAP cinasa
vía osmorreguladora, se muestra en la Figu ra l 6 -24b. Cada MAP
• La Ras es una proteina interruptora GTPas . t 11 ,
cinasa de la levadura media respuestas celulares muy especificas, se- · b • a m race .u ar que actua
cornente a a¡o desde la mayoría de los RTK ,
gún lo ejemplifica la Fus3 en la vía de apareamiento y la Hogl en la cinas AJ igual q I G
.
Ra ,
ue ª , Ia s cicla ent
Y1os receptores de cito-
via osmorreguladora. ti
GDP y otra activa unid~ a GTP El . re una orma inactiva unida a
Surge una complicación porque, en ambos, levaduras y euca- d d · ciclado de la Ras requiere el auxilio
riontes superiores, diferentes cascadas de MAP cinasa comparten e os prote1nas: un factor de interca bº d
(GEF) y una proteína f d m 10 e guanina nucleótido
algunos componentes. Por ejemplo, la Stel l MEKK funciona en tres ac iva ora de la GTPasa (GAP).
vías de señalización de las levaduras: la vía de apareamiento, la vfa de · Los RTK están vinculadas indire t
osmorregulación y la vfa de crecimiento de los filamentos, que es in- Proteinas·· GRB2 , una proteina adaptad
c amente a la Ras a través de dos
ducida por la inanición. Sin embargo, cada vfa activa una MAP cina- GEF (véase la Fig. 16 _17) _ ora, Y Sos, que tiene actividad
sa distinta. De modo similar, en las células de mamífero las protei.nas
• El dominio SH2 de la GRB 2 s
de transducción de la señal comunes corriente arriba participan en
activadas, mientras que sus <losed:ne .ª ~na fosfotirosina en las RTK
la activación de múltiples cinasas JNK.
mmios SH3 se unen a Sos, y la lle-

7 44 CAPtTulO 16 • Vlas de señalización que controlan la expresión génica

 La fosfolipasa C. es activada por algunos RTK
van así a la proximidad del Ras·GDP unido a la membrana y activan 1

su actividad de intercambio de nucleótido.

y receptores de citocina

• La unión de Sos a la Ras inactiva provoca un cambio de conforma- Como analizamos en el (.J llÍI ulo 1:; , la cstimu lac i6 n hormo nal de
ción grande que permite la liberación de GDP y la unión de GTP, lo algunos receptores acoplados a la proteína G lleva a la activaci6n de
que forma Ras activa (véase la Fig. 16- 19). la fosfolipasa C (PLC). Esta enzima asociada a la m embrana luego
escinde al fosfatidilinositol 4,5 -bifosfato (l'IP 2) para generar do~ se-
• La Ras activada desencadena una cascada de cinasa en la cual la Raf, gundos mensajeros importantes: 1,2-diacilgl iccrol ( DAG ) e inositol
MEK y la MAP cinasa se fosforilan secuencialmente y, de este modo, 1,4,5-trifosfato (IP,). La señ alizació n a través de la vía f P/DAG lleva
se activan. Luego, la MAP cinasa activada se transloca al núcleo (véase a un incremento en el Ca 2 ' citosól ico y a la activación de la proteinci-
la Fig. 16-20 ).
nasa C (véase la Fig. 15-36).
· La activación de la MAP cinasa después de la estimulación de un Aunque no lo mencionamos durante nuestro análisis de la fosfoli-
receptor del factor de crecimiento conduce a la fosforilación y activa- pasa C en el Capítulo IS, es específicamente la isoforma ~ de esta enzi-
ción de dos factores de transcripción, que se asocian en un complejo ma (PLCP) la que es activada por acción de las GPCR. Muchos RTK y
trimérico que promueve la transcripción de varios genes de respuesta receptores de citocinas también in ician la vía IP/ DAG activando o tra
temprana (véase la Fig. 16-22 ). isoforma de la fosfolipasa C, la isoforma y ( PLC.,), una isoforma que
contiene dominios SH2. Los dominios SH2 de la PLC·, se unen a fosfo-
· Diferentes señales extracelulares inducen la activación de distintas tirosinas específicas sobre los receptores activados, y posicionan así la
vías de MAP cinasa, que regulan diversos procesos extracelulares al enzima en la cercanía de su sustrato unido a la membrana, el fosfatidíl
fosforilar diferentes conjuntos de factores de transcripción. inositol 4,5-bifosfato (PIP,). Además, la actividad de cinasa asociada
· Los componentes de la cinasa de cada cascada de MAP cinasa se con la activación del receptor fosforila los residuos de tírosina en la
ensamblan en un complejo grande, específico de la vía, estabilizado PLC unida, lo que aumenta su actividad de hidrolasa. De esta manera,
por una proteína plataforma (véase la Fig. 16-24). Esto asegura que los RTK activados y los receptores de citocina promueven la actividad
la activación de una vía de MAP cinasa por una señal extracelular de PLCYde dos modos: localizando la enzima en la membrana y fosfo-
particular no conduzca a la activación de otras vías que contengan rilándola. Como se vio en el Capitu lo 15, la vía de la IP3/DAG iniciada
componentes compartidos. por la PLC tiene múltiples efectos fisiológicos.

El reclutamiento de la Pl-3 cinasa a los receptores

activados conduce a la síntesis
de tres fosfatidilinositoles fosforilados

16.3 Las vías de señalización de los Además de la vía IP/ DAG, muchos RTK y receptores de cítocina acti-
vados inician otra vía de fosfoinosítidos al reclutar la enzima fosfatidi-
fosfoinosítidos linositol-3 (PI-3) cinasa a la membrana. La Pl-3 cinasa es reclutada a la
En secciones previas, hemos visto de qué modo la transducción de membrana plasmática por la unión de su dominio SH2 a las fosfoti-
la señal desde los receptores tirosincinasas (RTK) y los receptores rosinas del dominio citosólico de muchos RTK activados y receptores
de citocinas se inicia con la formación de complejos multiprotei- de citocinas. Este reclutamiento ubica al dominio catalítico de la Pl-3
cos asociados con la membrana plasmática ( véanse las Figs. 16- 12 y cinasa cerca de sus sustratos fosfoinosítidos sobre la cara citosólica de
16- 13) y de qué manera estos complejos inician la vía de Ras/MAP la membrana plasmática. A diferencia de las cinasas encontradas pre-
cinasa. Aquí, analizaremos cómo estos mismos receptores inician las viamente que fosforilan proteínas, la PI-3 cinasa añade un fosfato al
vías de señalización que involucran como intermediarios fosfolípi- carbono 3' del fosfatidilinositol del lípido, lo que lleva a la formación
dos fosforilados especiales, derivados del fosfatidil inositol. Como de dos 3-fosfatos fosfatidilinosítol separados: el PI 3, 4-bifosfato O p¡
analizamos en el Capítulo I 5, estos lípidos unidos a la membrana 3,4,5-trifosfato (Fig. 16-25). Al actuar como sitios de anclaje para varias
se conocen colectivamente como fosfoinosítidos. Estas vías de se- proteínas de transducción de las señales, estos productos del PI 3-fos-
ñalización de fosfoinosítidos incluyen varias enzimas que sintetizan fato unidos a la membrana de las reacciones de la Pl-3 cinasa a su vez
diferentes fosfoinosítidos y proteínas, con dominios que pueden transducen señales corriente abajo en varias vías importantes.
unirse a estas moléculas y, por lo tanto, son reclutadas a la superficie En algunas células, esta vía de la PI-3 cinasa puede desencadenar
citosólica de la membrana plasmática. Además de los efectos a corto divisiones celulares y evitar la muerte celular programada (apoptosis),
plazo sobre el metabolismo celular que encontramos en el Capítulo y asegura de este modo la supervivencia celular. En otras células, esta
15, estas vías de los fosfoinosítidos tienen efectos a largo plazo so- vía induce cambios específicos en el metabolismo celular.
bre el patrón de expresión génica. Aquí veremos que las vías de los La Pl -3 cínasa fue identificada inicialmente en estudios en el vi-
fosfoinositidos finalizan con una variedad de cinasas, que incluyen rus de polioma, un virus de DNA que transforma ciertas células de
la proteincinasa c (PKC) y la proteincinasa B (PKB), que desem- mamífero para que crezcan de modo descontrolado. La transforma-
peñan papeles centrales en el crecimiento y el metabolismo celular. ción requiere varias oncoproteínas codificadas por el virus, inclu-
Como ejemplo, más adelante en el capítulo, veremos de qué manera yendo una denominada "T del medio". En un intento para descubrir
la activación por insulina de la PKB desempeña un papel central en cómo funciona la proteína T del medio, los investigadores descu-
estimular la importación de glucosa al músculo. brieron una proteincinasa Pl-3 en preparados parcialmente purifica-

1 16.3 Las vías de señalización de los fosfoinositidos 74 S

 FIGURA 16-2S Generación de fosfatidilinositol 3-fosfatos. La enzima
fosfatidilinositol-3 cinasa (PI-3 cinasa) es recluta da a la membrana por
IV
muchos receptore s tirosinci nasas activados (RTK) y receptores de citocinas. .!::!
El 3-fosfato añadido por esta enzima, para producir PI 3, 4-bi fosfato o PI 3, :oC/1
4, 5-trifosfa to, es un sitio de unión pa ra varias proteínas de tran sducción de
las señales, como el dominio PH de la proteincinasa B. PI 4, 5-bifosfato es
.
0
·¡:¡
IV
L.
también el sustrato pa ra la fosfolipasa C (véase la Fig. 15-35). (Véase L. Rarneh y ai
Cantley, 1999. J. Biol. Chem. 274:8347.J
E
IV
~

C=O C=:::o
C=O C=O 1 ,-
- ·--,~

º o
1· ----

ATP ADP
º
\
o
1
CH 2 CH-CH
~ ►
1
CH-CH- CH 2
\
\_ 1
o
2
dos de la T del medio, lo que sugiere una interacción específica entre 1 2
Pl-5 cinasa
o 1
ambas. Luego se propusie ron determin ar de qué manera la PI-3 ci- 1
-o-P=O
nasa podría afectar el comportam iento celular. -o-P=O OH 1
0
.. 1 o
Cuando una versión inactiva, dominan te negativa de la PI-3 cina- "iñ o
0
sa se expresaba en las células transform adas por el virus del polioma, E
esta inhibía la proliferación celular descontrolada, característica de las
células transform adas por el virus. Este hallazgo sugirió que la cinasa
normal es importante en cierta vía de señalización esencial para la pro- PI 4,5-bifosfato
PI 4-fosfato
liferación celular o para evitar la apoptosis. Estudios posteriores mos- (PIP2)
(PIPJ
traron que las PI-3 cinasas participan en muchas vías de señalización

t
relacionadas con el crecimien to celular y la apoptosis . De los nueve ho-

t
ATP
ATP
mólogos de la PI-3 cinasa codificados por el genoma humano, el mejor Pl-3 ci nasa
Pl-3 cinasa
caracterizado contiene una subunidad p 110 con actividad catalítica y
ADP
una subunida d p85 con un dominio SH2 que une fosfotirosina. ADP

La acumu lación de fosfato s Pl-3 e n la membrana

plasmá tica conduc e a la activación de varias cinasas
Muchas proteinc inasas se activan al unir fosfatidil inositol 3-fos-
fatos en la mem brana pl asmá tica . A su vez, estas cinasas afectan
la activi dad de muchas proteínas celulares. Una cinasa importan te
que se une a los PI -3 fos fatos es la proteinc inasa B (PKB), una ci-
nasa serina/tr eonina que ta mb ién es denomin ada Akt. Además de
C=O C=O C=O C=0
su dominio cinasa, la proteinci nasa B también contiene un domin io 1 1 1 · 1
PH, un dominio proteico conserva do, presen te en una amplia va- o o o o
\ 1 ATP ADP \ 1
riedad de proteína s de señalización que se un e con alta afinidad a CH-CH- CH CH-CH- CH
los 3-fosfatos, tanto del PI 3,4 -bi fos fa to como al PI 3,4,5-trif osfato.
1 2 2 \ ¿ . 1 2 2
o Pl-5 cinasa o
Dado que estos inositol fosfatos están presen tes en la cara citosólica 1
-o-P=O
1
OH -o-P=O
de la membran a p lasm ática, la unión recluta la proteína completa 1 1
o 6 o
hacia la membra na celular. En las cél ulas no estimuladas, en reposo,
el nivel de estos fosfoi nosítidos ( conocidos colectivamente com o PI
3-fosfatos) es bajo, y la proteinci nasa B está presente en el citosol en
forma inactiva ( Fig. J 6-26). Después de la estim ulación hormona l y
del incremen to resultant e en los PI 3-fosfa tos, la p ro teincinasa B se
PI 3,4-bifosfat o PI 3,4,5-trifosfato
acopla a estas molécula s unidas a la mem bra na vía su dominio PH
y se localiza en la membran a plasmátic a. La unión de la protein ci-
nasa B a los PI 3-fosfatos no solo recluta la en zima a la mem bra n a
plasmática, sino que libera la inhibició n del sitio catalítico por el
do min io PH. Sin embargo , la máxima activació n de la protein ci-
·
de treon ina en su labio d e activació . •
nasa B depende del reclutam iento de otras dos cin asas, llamadas . n (otro ejemplo más de la acuva-
i1 · , d
c1ón de la cinasa por ior acwn) . La fosforila ción de una segun ª
PDKI y PDK2. fos e
. ,
La PDKI es reclutada a la membran a plasm ática p or la unión serm a, no en el segm e n t d e¡ ¡a b JO, '
°por la PDK2 es necesana para
. . d
de su propio dominio PH a los PI 3-fosfatos. Tanto la proteinci n asa la act1V1dad máxima d e ¡a proteinc · •
_ . masa B ( Fig. J 6-26). De mo 0
- • 20)
B como la PDK I asociadas a la membran a difunden al azar en el s1mtlar a la regulació n d e ¡a actlYldad
. ., de Raf (véase la Fig. !6- '
plano de esta, fin almente acercándose lo suficiente, de modo tal que la hberac10n de un do · , mh • . ,
minio 1b1dor y Ja fosforila ción por otras
.
la PDK I puede fosforilar la proteinci nasa B sobre un residuo crítico cmasas regulan la actividad d e Ja protem • .
cmasa B.

746 CAPÍTULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 Exterior PI 3,4-bifosfato
FIGURA 16-26 Reclutamiento y activación
de la proteincinasa B (PKB) en las vías de
la Pl-3 cinasa. En las célu las no estimuladas
Citosol (O), la PKBestá en el citosol con su dominio PH
Pl-3 cinasa un ido al dominio catalítico de la cinasa, lo que
PI 4-fosfato inhibe su actividad. La estimulación hormonal
conduce a la activación de la Pl-3 cinasa y
la formación posterior de fosfatidi linositol
(PI) 3-fosfatos (véase la Frg. 16-25). El grupo
Dom ini o PH 3-fosfato sirve como sitio de anclaje sobre la
Dominio Labio de membrana plasmática para el dominio PH de
c in asa activación la PKB (t)) y otra cinasa, la PDKl . La activación
PKB pa,c;almente e ~ PDK1 completa de la PKB requiere la fosforilac ión
ta nto en el la bio de activación por la PDKl
PKB in activo

D PKB inactivo en e l citosol

fl Fo,~:::: de PK:o:::¿•mente ,9 . como en el (-terminal por una segunda cinasa,
la PDK2 (IJ). (Adaptado de A. Toker y A. Newton, 2000. Ce//

de célul as no estimuladas PI 3-fosfatos,

reclutamiento
completamente
activo
V PDK2
103:185; y S. Sarbassov y cols .• 2005, Curr. Op,n Cell Biol. 17:596.)

y activación
parcial de PKB

La proteincinasa B activada induce muchas La vía de la cinasa Pl -3 está regulada

respuestas celulares negativamente por la fosfatasa PTEN
Una vez que se ha activado totalmente, la proteincinasa B puede diso- Como casi todos los eventos de señalización intracelulares, la fosfori-
ciarse de la membrana plasmática y fosforilar sus numerosas proteínas lación por la PI-3 cinasa es reversible. La fosfatasa relevante, llamada
dian a a través de la célula, lo cual tiene un amplio espectro de efectos fosfatasa PTEN, tiene una especificidad inusualmente amplia. Si bien la
sobre la conducta celular. La activación de la PKB toma solo de 5 a 10 PTEN puede quitar los grupos fosfato unidos a los residuos de serina,
min utos, aunq ue sus efectos pueden durar hasta varias horas. treonina y tirosina de las proteínas, se piensa que su capacidad para
En m uch as células, la proteincinasa B activada directamente fosfo- quitar el 3-fosfato del PI 3,4,5-trifosfato es su principal función en las
rila e inactiva proteínas proapoptóticas como la Bad, un efecto a corto células. La sobreexpresión de la PTEN en las células de mamífero en
plazo que ev ita la activación de una vía apoptótica que conduce a la cultivo promueve la apoptosis al reducir el nivel de PI 3,4,5-trifosfato y
muerte celular (véase la Fig. 21 -38). La proteincinasa B activada pro- así la activación y el efecto antiapoptótico de la proteincinasa B.
mueve también la su pervivencia d e muchas células cultivadas al fosfo-
rila r el facto r de tra nscripción Forkhead FOXO3a en múltiples residuos ~ El gen PTEN está delecionado en múltiples tipos de cánceres hu-
de serina/treo nina, y reduce así su capacidad de inducir la expresión de U manos avanzados. La pérdida resultante de la proteína PTEN
varios genes proapoptóticos. contribuye al crecimiento descontrolado de las células. De hecho, las
En ausencia de fa ctores de crecimiento, FOXO3a está desfosforila- células que carecen de PTEN tienen niveles elevados de PI 3,4,5-tri-
do y se localiza principalmente en el núcleo, donde activa la transcrip- fosfato y actividad PKB. Dado que la proteincinasa B ejerce efecto anti-
ción de varios genes q ue codifican proteínas proapoptóticas. Cuando apoptótico, la pérdida de PTEN reduce indirectamente la muerte celu-
los factores de crecim iento se añaden a las células, la proteincinasa B se lar programada, que es el destino normal de muchas células. En ciertas
activa y fosfo rita a FOXO3a. Esto permite que la proteína citosólica que células, como las células madre neuronales, la ausencia de PTEN no
se une a fos fos erina , 14-3-3, se una a FOXO3a y, de este modo, la se- solo evita la apoptosis, sino que conduce a la estimulación del avance
cuestre en el citosol. (Recuerd e que 14-3 -3 también retiene la proteína del ciclo celular y a un incremento de la velocidad de la proliferación
Raf fosfor ilada en un estado inactivo en el citosol; véase la Fi g. 16-20). celular. Los ratones knockout que carecen de PTEN tienen grandes ce-
Una muta nte de FOXO3a en la cual los tres residuos diana de la serina rebros, con un número excesivo de neuronas, lo cual atestigua la im-
para la proteincinasa B están mutados a alaninas es "activa ~o~stituti- portancia de las PTEN en el control del desarrollo no rmal. ■
vam ente" e inicia la apo ptosis aun en presencia de la protemcmasa B
activada. Este hallazgo demuestra la importancia de la FOX03a y d:
la
protei nci nasa B en el control de la apoptosis de las células en cultivo.
La desregulación de la proteincinasa B está implicada en la patogenia CONCEPTOS CLAVE DE LA SECCIÓN 16.3
del cáncer y la diabetes , y en la Sección 16. 7 veremos de qué manera la Las vías de señalización de los fo sfoin osítidos
proteincinasa B activad a co rr ien te abajo de los RTK de insulina pro-
mueve la captación de gl ucosa y su almacenamiento en el músculo Yen • Mucho s RTK y recepto res de cito cin as p ueden in icia r la vía de
el hígado. f:ste es otro ejem plo de u na vía de señalización que control a señalizac ió n IP3/DAG al ac ti va r la fosfoli pasa CY ( PLC) , una iso -
difere ntes func iones celulares en célul as d istin tas.

16.3 Las vías de señalización de los fosfo inosítidos 74 7

 _ les extensos en la regul ac ión del desarr 11
das que desempenan pape . oo
for m a d iferente de PLC que la activada por los receptores acopla - . b d com o en vertebrados. El m iembro fu ndad '
tanto en mverte ra os . . or
dos a la proteína G. . . TGF-A humana, el TG F-f31 , fu e identificado sob
d e Ia super fami11a 1-' . f . . re
.d d para induor un enot1po ma 11gno en va .
• Los RTK activados y los receptores de citocinas también pueden la base de su capac1 a . . . r1as
de mamífero, de etapa m1cial , en culi·
iniciar otra vía de fosfoinosítido al unirse a una PI-3 cinasa, lo que líneas celulares canceras as IVo
" . • t transformante"); en este caso, el TGF-~¡ pr
permite así que la enzima acceda a sus sustratos fosfoinosítidos unidos ( factor de creom1en o . . . o.
. , . di·seminación e invasión de tumores primarios
a la membrana, que luego se fosforilan en la posición 3 (PI 3-fosfatos; movió metastas1s, 1a . . ,
. , C pítulo 24. Sin embargo, la prmc1pal func ió
véase la Fig. 16-26). que se analizara en e1 a , n
. r d TGF-A TGF-f31 , 2, 3 en la mayona de las cé
de las tres 1so1ormas e ..,, . .
• El dominio PH de varias proteínas se une a los PI 3-fosfatos y forma ,r normales (no cancerosas ) es prevenir fuertemente
1ulas d e mam11ero , . .
complejos de señalización asociados con la cara citosólica de la mem- ·r . · <lucir la síntesis de protemas que mh1ben el ciclo
su pro l 11erao 6 n a1m , . .
brana plasmática. p_A se produce en muchas celulas del organismo e mhi-
1 1
ce u ar. El TG .., ( - ¡- · ó
be el crecimiento tanto de las células secretoras sena _1zac1 n autocri-
• La proteincinasa B (PKB) se activa parcialmente al unirse a los PI
na) como de las células vecinas (señalización paracnna). La pérdida
3-fosfatos con su dominio PH . La activación completa de la PKB
GF A de cualquier proteína de transducción de
requiere la fosforilación por otra cinasa, PDKl , que también es reclu- d e Ios recep t ores T -.., O . . . ..
la señal intracelular en la vía TGF-f3 libera células de la mhib1c1ón
tada a la membrana mediante la unión de los PI 3-fosfatos y por una
segunda cinasa, la PDK2 (véase la Fig. 16-26). del crecimiento y ocurre con frecuencia en el desar~ollo temprano de
los tumores humanos. Las proteínas TGF-f3 también promueven la
• La proteincinasa B activada promueve la supervivencia de muchas expresión de moléculas de adhesión celular y moléculas de la matriz
células al fosfor ilar directamente e inactivar varias proteínas proapop- extracelular, que desempeñan papeles importantes en la organización
tóticas y fosfo rilar e inactivar el factor de transcripción FOXO3a, que de los tejidos (véase el Cap. 20 ). Un homólogo del TGF-f3 en la Dro-
de otro modo induce la síntesis de proteínas proapoptóticas. sophila, llamada proteína Dpp, participa en el patrón dorsal-ventral
· La señalización por medio de la vía de la PI-3 cinasa es terminada en los embriones de la mosca. Otros miembros mamíferos de la su-
por la fosfatasa PTEN, que hidroliza al 3- fosfato en los PI 3-fosfatos. perfamilia TGF-f3, las activinas y las inhibinas, afectan el desarrollo
La pérdida de PTEN , una situación común en los tumores humanos, temprano del aparato genital.
promueve la supe rvivencia y proliferación celular. Otro miembro de esta superfamilia, la proteína morfogénica del
hueso (BMP), fue inicialmente identificada por su capacidad para
inducir la formación de hueso en células en cultivo. Llamada en la
actualidad BMP7, se usa en la práctica clínica para fortalecer los
huesos después de las fracturas graves. De las numerosas proteínas
BMP reconocidas posteriormente, muchas inducen pasos clave en el
16.4 Las se rina-cinasas receptoras desarrollo, que incluyen la formación del mesodermo y las primeras
células formadoras de sangre. La mayoría no tienen relación alguna
que activan Smad con los huesos .
Hemos visto cuántos receptores activan cinasas que fosforilan proteí- Gran parte de los tipos celulares animales producen y secretan
nas diana en resid uos de tirosi na y activan un conjunto conservado miembros de la superfamilia TGF-f3 en una forma inactiva que se al-
de vías de transd ucción de las señales. También hemos visto de qué macena ca~i unida a moléculas de la superficie celular especializadas o
modo las ci nasas citosólicas que fosforilan proteínas diana sobre serina en la matnz extracelular. La liberación de la forma activa desde la ma-
o treo nina se activan y funcion an en vías de señalización; estas incluyen triz por digestión de proteasas o inactivación de un inhibidor conduce
los miembros de las fa milias PKA , PKB, PKC, como también las cinasas a la rá~ida activación de las moléculas de señalización ya en el lugar (un
MAP. En esta sección , analizamos una fam ilia conservada evolutiva- r~sgo importante de muchas vías de señalización ). La forma monomé-
mente de serinas cinasas receptoras (la superfarnilia de los receptores .., con t 1ene
nca. de los factores de crecimiento TGF - A " tres en1a ces d"1su [fu -
TG F-f3) y la gran fa milia conservada de moléculas de señalización (la ro mtramoleculares conservados · Una ci'st ema · 1en e¡ centro de
, a ct·1C10na
supe rfa m ilia TG F-f3 ) que se une a ellas. Estos receptores se fosforilan cada m~nómero vi~cula los monómeros de TGF-f3 a ho mod ímeros y a
y así desen cadenan la activació n de una clase conservada de factores heterod1meros funcionales (Fig. 16 _27 )_
de transcripció n (los Smad) que regulan varias vías de crecimiento y
difere nciación. En células no estimuladas, los Smad se encuentran en
el citosol , pero cuando se activan se mueven al n úcleo para regular la Tres _p~oteínas receptoras separadas TGF-~
transcripción . La vía TGF-f3 tiene efectos muy diversos en dife rentes part1c1pan en la unión de la TGF -tJ
A •
tipos de células porque distin tos miembros de la superfamili a TGF-f3
•, y activan
la transducc1on de la señal
act ivan diversos m iembros de la famil ia de receptores TGF-f3, que acti -
van diferentes miembros de la clase Smad de factores de transcripción. Los investigadores identificaron , .d f
· h "b ·d ra pi amente la TG F-f31 com o un ac-
Ade más, como hem os visto con otros factores de transcripción activa- t or m 1 1 or eIave del crecim ·
. iento, pero para com p render la forrn a
dos por receptores, como los STAT, la misma pro teína Smad activada se en que operab a, debiero n ene ,
L , · d , ontrar 1os receptores a los cuales se unia.
unirá con d iferentes factores de transcripción en distintos tipos celula- a 1og1ca e como realizaron su b, d
f b" , . usque a es representat iva de los en-
res y así activará diferentes conj untos de genes en estas células. oques 10qu1m1cos típicos em I d
, ¡ s •, P ea os para identifi ca r los receptores
La superfami li a del factor de crecimiento transformante f3 (TGF-f3 ) (vease a ecc1on 15 .2). Primero 1 . . · .
¡f d • . ' os invest igado res hic ieron reaccionar
incl uye un n úmero de moléculas de señalización extracelular vincula - e actor e crec1m1ento purifi d O . . ''l ) 1
ca co n el rad1 01s6topo yodo- J 25 ( ·

7 48 CAPITUtO 16 • Vías de señali za ción que controlan la expresión génica

TGF-~ dimérico, mad uro Drosophila. Estos facto res de transcripción de la Drosophila y las pro-
teín as relacionadas en los verteb rados se denominan ahora Smad. Tres
tipos de proteínas Smad funcionan en la via de señalización TGF-~:
las R-Smad (Smad reguladas por receptor; Smad 2 y 3), las co-Smad
(Smad4) y las I-Smad (Smad inhibidoras).
Como se ilustró en la Figura 16-28, una R-Smad (Smad2 o Smad3 )
contiene dos dominios, llamados MH 1 y MH2, separados por una
región vinculante flexible . El dominio N-terminal MH 1 contiene un
segmento específico de unión al DNA y también un dominio llama-
do la señal de localizaci6n nuclear (SLN). Los dominios SLN están
presentes en virtualmente todos los factores de transcripción que se
encuentran en el citosol y son necesarios para su transporte al núcleo
(véase el Ca p. 13). Sin embargo, cuando los R-Smad se encuentran en
FIGURA 16-27 Estructura de la superfamilia TGF-~ de moléculas de su estado inactivo no fosforilado, el dominio SLN está enmascarado
señalización. En este diagrama de cintas del dímero TGF -~ maduro, las dos y los dominios MHl y MH2 se asocian de modo tal que no pueden
subunidades aparecen en verde y azul. Los residuos de cisteina ligados por unirse al DNA o a una co-Smad. La fosforilación de tres residuos de
disulfuros (ama ril lo y roJo) se muestra n en formas de esfera s y palillos. Los tres
serina cerca del extremo C-terminal de un R-Smad por receptores
enlaces intracatena rios disu lfuro (rojo) de cada monómero forma n un dominio
activados tipo I TGF-P separa los dominios, lo que permite la unión
de cistina-nudo, que es resistente a la degradación. (Tomado des Daop,n yco l,. 1992 .
soence 257 369 ) de una importina (véase la Fig. 13-36) al SLN, lo cual posibilita el
ingreso del Smad al núcleo.
Simultáneamente, dos de las serinas fosforiladas de cada Smad3
que fueron añadidas por el receptor cinasa RI se unen a los sitios de
unión de fosfoserina de los dominios MH2 en un Smad3 y un Smad4,
en condiciones tales que el yodo fo rmara enlaces covalentes con los y forman un complejo estable que contiene dos moléculas de Smad3
residuos de tirosina expuestos (m arcándolos efectivamente con una (o Smad2) y una molécula de un co-Smad (Smad4). La importina
etiqueta radiactiva ). La proteína 125 1- TGF-P se incubó con células en unida entonces media la translocación del complejo heterodimérico
cultivo, y la mezcla de incubación luego se trató con un agente químico R-Smad/co-Smad al núcleo. Después de que la importina se disocia
que hacía enlaces cruzados covalentes entre el TGF-P y sus receptores den tro del núcleo, el complejo Smad3/Smad4 (o Smad2/Smad4) se
de la superficie celular. La pu rificación de los complejos 1251 marcado une a otros factores de transcripción para activar la transcripción de
TGF-P-receptor reveló tres polipéptidos distintos con pesos molecula- genes diana específicos.
res de 55, 85 y 280 kDa, deno m inados receptores TGF-P tipos RI, RII y Dentro del núcleo, los R-Smad están siendo desfosforilados con-
RIJI, respectivamente. tinuamente por una fosfatasa nuclear, lo cual resulta en la disociación
La Figura 16 -28 (pasos D y D) m uest ra la relación y función del complejo R-Smad/co -Smad y la exportación de estos Smad des-
de las tres prote ínas recep toras TG F-P. La m ás abundante, RIII , de el núcleo. Dado este transporte nucleocitoplasmático continuo de
tamb ién llam ada P-gluca no, es un proteoglucano de la superficie Smad, la concentración de los Smad activos dentro del núcleo refleja
celular. Un p ro teo glucano consiste en una proteína unida a cadenas aproximadamente los niveles de los receptores TGF-P activados de la
de glucosaminoglucano (GAG) tales com o el sulfato de heparina superficie celular.
y el condroi tina sulfato (véase la Fi g. 20 -31 ). La RIII , una proteí - Virtualmente, todas las células de mamífero secretan al menos
na transme mbra na, se une a las m o léc ul as de TGF-P madura y las una isoforma de TGF-P, y la mayoría tiene receptores de TGF-P so-
concentra cerca de la superficie celular, lo que faci lita su un ión a los bre su superficie. Sin embargo, dado que diferentes tipos de célu -
receptores RII. Los receptores t ipo I y tipo II son proteínas tran s- las contienen distintos conjuntos de factores de transcripción a los
membrana di méricas con serina/treon ina cinasas como par te de sus cuales pueden unirse los Smad activados, las respuestas celulares
dominios citos ólicos. La RII exh ibe actividad de cinasa constitutiva; inducidas por los TGF-P varían entre los tipos celulares. Por ejem -
es decir, es acti va au n cuando no esté unida a TGF-P . La unió n a plo, en las células epiteliales y los fibroblastos , los TGF-P inducen la
TGF-p ind uce la form ación de complejos que co ntienen dos copias expresión de proteínas de la matriz extracelular (p. ej ., fibronect inas
cada uno de RI y RII , o tro ejemplo de oligomerización inducida y colágenos; véase el Cap. 20 ) y proteínas que inhiben las proteasas
por el ligando de los receptores d e la superficie celular. Luego, una séricas, que de otro modo degradarían estas proteínas d e la m atriz
extracelular. Esta inhibició n estabiliza la matriz y perm ite que las
subunidad RII fosforila los residuos de ser ina y treo nina en una
células formen tejidos estables. Las proteí nas inhib idoras incluyen
secuencia muy conservada de la sub unidad Rl adyacente a la. cara
el inhibidor del activador del plasminógeno 1 (PAI-1 ). La transcrip-
citosól ica de la membrana p las m át ica, lo cual pone en fu nc10na-
ción de gen PAI-1 requiere la form ación de u n complejo del factor
miento la actividad de la cinasa RI.
de transcripción TFE3 con el co mplejo R-Sm ad/co -Smad (Smad 3/
Smad4) y la unión de todas estas proteínas a secuencias específicas
dentro de la regió n reguladora del gen PA I-1 ( Fi g. 16 -2 8, abajo).
Los rece ptores TGF-~ activados fosforilan
Al asociarse con otros fa cto res de tran scripción, un complejo R-
los fa ctores de transcripción Smad Smad/co-Sm ad promueve la expresión de genes que codifican otras
proteín as como p l 5, que detiene el ciclo celular en la etapa G Y así
Los invest igado res iden ti fic aron factore s de transcripción corrien te
1

bloquea la proliferación (véase el Cap. 19 ).

abajo desde los recepto res TGF- P a partir de estudios de mutantes de

16.4 Las serina-ci nasas receptoras que activan Smad 749

 ~
- N~F~O~C~A~L~IZ~A~D~A~:V~í~a~d!e..:s.:.en-a~l~iz~a~ci~ó~n
~ A~N~IM~A~C~IO~
- -~f> _:d~e~IT~G~F:-~b.:_ et~a~ ------ ------ ----.. .__

Exterior
FIGURA 16-28 Vía de señalización de TGF-P/
TG F-P
Smad. Paso m en algunas cél ulas, el TGF·P se une RII
al receptor TGF-P tipo /11(de R/1I), que incrementa la RI
RIII
concen tración de TGF-P cerca de la superficie cel ular
y también presenta TGF·P al receptor tipo 11 (R/1). Paso
ml: en otra s células, el TGF-P se une directamen te a
R/1, una cinasa constitutivamente fosforilada y activa. fJ
Pa so H el R/1 unido al ligando recl uta y fosforil a el
segmen to yuxtarnernbra na del receptor tipo 1(RI),
que no se une en forma directa al TGF-p. Este libera la
inhibición de la actividad cinasa RI, que de otro modo
es impuesta por el segmento de RI entre la membrana
y su dominio de cinasa. Paso ll el RI activado entonces
fosforila 5rnad2 o 5rnad3 (que se muestra aqu í corno
Citosol
5rnad2/3), lo cual provoca un cambio de conformación
que desenmascara su señal de localización nuclea r MH2
(SLN). Paso D: dos moléculas fosfori ladas de 5mad 2/3 ~ mad2/3-P
se unen a una molécula de co-Srn ad (Srnad4), que no Smad2/3 ~
está fosforilada, y con una importina, y así forman un MH 1
complejo citosólico grande. Pasos~ y 0: después de
Smad4
que todo el complejo se transloca al núcleo, el Ran -GTP ~
provoca la disociación de la importina, corno se ana lizó
en el Capítulo 13. Paso ll un factor de transcripción
D e 1mp-p
nuclear {p. ej., TFE3) se asocia entonces con el complejo
Smad2/3/ Smad4 y fo rm a un complejo de activación
que une en forma cooperativa en una geometría
precisa a una secuencia reguladora de un gen diana.
Pa so D: este com plejo recluta entonces coactivadore s
de la transcripción e induce la tran scripción de los
genes (véase el Cap 7). Srnad2/3 se desfosforila por
una fosfata sa nuclear (paso ~ y se recicla a travé s de
un poro nuclear al citosol (paso iiil), don de puede
ser reactivado por otro complejo receptor TGF-p. Se

~
muestra en la parte inferior el complejo de activación
pa ra el gen que codifica el inh ibidor del activador del
plasrn inógeno (PAi· l ) y complejos de tran scripción
~ Nucleo
similares activan la expresión de genes que codilican
otra s proteínas de la matriz extracelula r, como la
libronec tina. (Véase A Mou11akas y C H Held,n. 2009. Oevelopmeni (?' ¡ m
136 3699, y D Clarke y X L,u. 2008, Trends Ce// 810/ 18 430)
Fosfata sa Smad4

Sm ad2/3 ~
__g__ Coactivado res

P TFE3 ~

Las proteínas BMP, que tambi én pertenecen a la superfamilia TGF- ~ La pérdid a de l a señal iza . ,
p, se unen a un conj unto di ferent e de recep tores que son similares a las U 1 d
e ave en e1 esarrollo tem
cion por TGF-~ d esempeña un papel
mores huma . prano de muchos cán cer es. D iversos tu·
proteí nas TG F-P, R1 y Rll y los activan, pero fosforilan otras R-Smad. nos contienen una . . .
receptores TGfJl. , m u tación m act1vadora, ya sea en los
Dos de estas Sm ad fosfo rilada s forman un complejo trimérico con ,., o en 1as protema S d .
hibición del cree · · s m a , Y así son resi stentes a la 1n·
Smad4, y este complejo Smad activa diferentes resp uestas de transcri p - 1m1ento por TGF A ( ,
ción que aqu ellas ind ucidas por el receptor TGF-p. la mayoría de los c ' h -,., vease la hg. 2'1- 24). Por ej emplo,
anceres um an d ,
os e p ancrea s con t i en en un a dclcc·

750 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 Desacetilación
encontró que se unían a la co-Smad (Smad4 ) y que fosfo ri!aban a las
de las histonas
R-Smad (Smad3) después de ser estimuladas por TGF- p. SnoN y Ski
no evitan la formación del complejo R-Smad/co-Smad ni afectan la
capacidad de un complejo Smad de unirse a las regiones de control del
DNA. En realidad, bloquean la activación de la transcripción al unirse
a un complejo Smad, en parte induciendo la desacetilación de las his-
tonas en segmentos de cromatina adyacentes. Esto vuelve a las células
resistentes a los efectos inhibidores del crecimiento del TGF-P (Fig.
Transcripción 16-29 ). Resulta interesante que la estimulación por TGF-P provoq ue
la rápida degradación de Ski y SnoN, pero después de unas pocas horas
la expresión de SnoN se induce fuertemente por la unión del complejo
Smad2/Smad4 al promotor del gen de SnoN. Se piensa que los niveles
FIGURA 16-29 Modelo de regulación en menos de la función activadora aumentados de estas proteínas disminuyen los efectos de señalización
de la transcripción de Smad mediada por Ski. Ski re prime la función a largo plazo debido a la exposición continua al TGF-p. Este es otro
de Smad al unirse di recta mente a Smad4. Dado que el dominio de unión a ejemplo de retroalimentación negativa en el que un gen inducido por
Ski en Smad4 se superpone de mod o sig nificativo con el dominio MH2 de la señalización de TGF-P, en este caso SnoN, inhibe la señalización adi-
Srn ad4 necesario para la unión de la cola fosforilada de Smad3, la unión de Ski
cional por TGF-p.
interrumpe las interacciones normales entre Smad3 y Smad4 necesarias para
Entre las otras proteínas inducidas después de la estimulación de
la activación de la transcripción. Además, Ski recluta la proteína N-CoR, que se
une directam ente a mSin3A; a su vez, mSin3A interactúa con la desacetilasa
TGF-P, se encuentran las I-Smad, en especial Smad7, la cual bloquea la
de las histonas (HDAC), una enzima que promueve la desacetilación de las capacidad de los receptores activados tipo l (RI) de fosforilar las pro-
histonas o sus promotores cercanos, lo que reprime la expresión génica (véase teínas R-Smad y también puede marcar los receptores TGF-P para su
el Cap 7). Como res ultado de ambos procesos, la activación de la transcripción degradación. De este modo Smad7, al igual que Ski y SnoN, participa en
inducida porTGF -b y mediada por los compl ejos Smad se apaga. La proteína un bucle de retroalimentación negativa: su inducción inhibe la señaliza-
SnoN relacionada funciona de modo similar a Ski reprimiendo la señalización ción intracelular por la exposición prolongada a la hormona estimulante.
por TGF-~. (Véase J. Deheun,ck y K_ Luo, 2009, Ce// Res. 19:47.)

ion en el gen que codifica Smad4 y, de este modo, no pueden inducir los
CONCEPTOS CLAVE DE LA SECCIÓN 16.4
inhibidores del ciclo celular en respuesta a TGF-P. De hecho, en un
principio Smad4 fue llamada DPC (por su nombre en inglés deleted in las serina-cinasas receptoras que activan Smad
pancreatic cancer, o su traducción: "delecionada en el cáncer pancreáti-
co"). El retinoblastoma, el cáncer de colon y gástrico, el hepatoma y · La superfamilia del factor de crecimiento transformante p (TGF-
algunos tu mores malignos de células T y B tampoco responden a la P) incluye un número de moléculas de señalización extracelular
inhibición del crecimiento por TGF-p. Esta falta de respuesta se cor- relacionadas que desempeñan papeles extendidos en la regulación del
desarrollo.
relaciona con la pérdida de los receptores TGF-P tipo lo tipo 11 a TGF-
p;la respuesta a TGF-P puede ser restablecida por la expresión recom- · Los monómeros TGF-P se almacenan en una forma inactiva en la
binante de la proteína "perdida". Por lo general, las mutaciones en superficie celular o en la matriz extracelular; la liberación de los mo-
Smad2 tambié n ocurren en varios tipos de tumores humanos. ■ nómeros activos (p. ej. , por la digestión mediante proteasas) conduce
a la formación de homodímeros y heterodímeros funcionales.

• Los receptores TGF-P consisten en tres tipos (RI, RII, RIII ). La unión
l os bucles de retroalimentación negativa regulan de los miembros de la superfamilia TGF-P al receptor RII cinasa
la señalización TGF-~/Smad permite que RII fosforile el dominio citosólico del receptor RI y active
su capacidad intrínseca de cinasa de serina/treonina. Rl fosforila en-
En la mayoría de las vías de señalización, la respuesta a un fac_tor de
tonces a un R-Smad, lo que expone una señal de localización nuclear
crecimiento u otra molécula de señalización disminuye con el tiempo
(véase la Fig. 16-28 ).
(desensibilización ). Esta respuesta es adaptativa, y evita la sobrerreac-
ción y hace posible un control de regulación fina de las respuestas ce- • Después de que los R-Smad fosforilados se unen a un co-Smad,
lulares. Varias proteínas intracelulares reprimen las vía_s T~F-P/Smad, el complejo resultante se transloca al núcleo, donde interactúa con
incluidas dos proteínas citosólicas llamadas SnoN y ~k1 ( :kt
es el acró- varios factores de transcripción para inducir la expresión de los genes
diana (véase la Fig. 16-28 ).
nimo que proviene de "Sloan-Kettering Cancer Jnst1tute ). ~stas pro-
teínas fueron identificadas originalmente como oncoprotemas, que
• Las oncoproteínas (p. ej ., Ski y SnoN) y las 1-Smad (p. ej., Smad7) actúan
causan cáncer dado que la expresión de Ski o de SnoN está elevada en
como reguladores negativos de la señalización por TGF-P (Fig. 16-29) al
muchos cánceres incluidos los melanomas y ciertos cánceres de mama.
inhibir la transcripción mediada por el complejo Smad2/3/Smad4.
Cuando se encu:ntran sobreexpresadas en fibroblastos en cultivo pri-
mario, Ski O SnoN provocan una proliferación anormal de c~lulas, y • Por lo general, la señalización por TGF-P inhibe la proliferación
la represión de Ski en los cánceres de páncreas reduce el crec1m1ento celular. La pérdida de varios componentes de la vía de señalización
tu moral. Hasta años después no se comprendió el modo en que SnoN contribuye a la proliferación celular anormal y la malignidad.
y Ski desencadena n la proliferación anormal de las células, cuando se

16.4 Las serina -c inasas receptoras que activan Srnad 7 51

 . que esta sobreexp resión era p rovocada Por
16.5 Vías de señalización control adas por poste rio res mostraro n . d 1a
. .ó d I ma del virus del tumor mam ario e ratón (MMl'V )
mse rc, n e geno
ubicui t inación: Wnt, Hedge hog y NF-KB Por lo tanto, el gen W nt- 1 es un protooncogén
cerca d eI gen W n t- 1· . . d '
Todas las vías de señ alización ana lizadas hasta el momento son re- un gen ce 1u1ar norma 1 cuya expresió n madecu a a prom ueve el ini cio .
, C
versibles y, por lo tan to, pueden ser apagadas con relativa rapidez si del cancer (véase e1 ap. 24 ) · La palabra Wnt .
es la am algama de sin 1
a as
la señal extracelular es eliminad a . En esta sección, analizam os varias . .
( en e1 mg1és, wmg ess ,
¡ ) el gen correspo n d iente en la m osca, con int p
or
vías irreversibles o sol o lentamen te reversibles en las cuales un com- el sitio de integraci. ón d e¡ re trovirus en los rato n es.
pon ente crítico (ya sea un fa ctor de transcrip ción o un inhibido r . . , de la vía W nt controla nu m erosos eventos críticos
La act1vac1on
de un factor de transc ripción) se ubicuitin a y luego se escinde por esarrollo del cerebro, el p atró n de los miern
d eI d esarro 11 o, como el d _ . . -
, .
proteólis is. En primer lugar, analizam os la señalizac ión por los Wnt bros y la organoge nes1s. Un papel central de la senahzac16n de Wnt
y Hedgehog, dos famili as evolutiva mente conserva das de proteínas en la formac ión de los huesos fue revelado por el h allazgo de que las
de señalización que desempe ñan papeles centrales en muchas vías de . .
mutac10nes mac t 1va . doras de la vía de los compon entes Wnt afecta la
desarrollo y, con frecuencia, inducen la expresión de genes necesarios densidad ósea de los seres humano s. Se sabe ahora qu~ la señalizaci ón
para que una célula adquiera una nueva identidad o destino. Si bien de Wnt controla la formació n de los osteobla stos (~elulas formado.
las vías de señalizac ión W nt y Hedgeho g emplean diferente s conjun- ras de hueso) . Adiciona lmente, las señales Wnt son importan tes para
tos de receptore s y proteínas de señalizac ión, comparte n similitud es, controlar las células madre (véase el Cap . 2 l ) Y en muchos otros as-
razón po r la cual las agrupam os:
pectos del desarroll o. _ . .
Debido a la conserva ción de la v ía de senahzac 1ón Wnt en la
• Wnt y Hedgeho g se unen a receptores que son similares en su estruc-
evolució n de los metazoo s , los estudios genético s en Drosophila y
tura a siete receptore s acoplado s a la proteína G que se expanden pero
C. elegans, estudios de los protoon cogenes de ratón y los genes su-
no activan las proteínas G.
presores de tumores y los estudios de los compon entes de la unión
• En el estado de reposo, los factores de transcrip ción clave de ambas celular han contribu ido, en conjunto , a identific ar varios compo-
vías se ubicuitin an y son marcados para la escisión proteolítica, lo cual nentes de la vía. Las proteína s Wnt son secretad as al medio extra-
los to rna inactivos. celular por molécula s de señaliza ción, que son modifica das por la
adición de un grupo palmitat o cerca de su extremo N-termin al. Se
• La activación de cada vía implica el desensamblaje de complejos pro- cree que este grupo hidrofób ico une las proteína s Wnt a la mem-
teicos citosólicos grandes, la inhibició n de la ubicuitin ación y la liber- brana plasmáti ca de las células que secretan esta proteína y limitan
ación del factor de transcrip ción activo. así su espectro de acción a las células adyacen tes. Las proteínas Wnt
actúan a través de dos proteína s receptor as de la superfic ie celular:
• Las cinasas que incluyen la cinasa 3 de la sintasa de glucógeno (GSK3)
Frizzled (Fz), que contien e siete hélices ex que atrav iesan la mem-
desempe ñan papeles centrales en ambas vías de señalización.
brana y se une directam ente a Wnt , y un correcep tor designad o
Examina mos luego la vía de NF-kB, una tercera vía de señaliza- LRP, que parece asociarse a Frizzled en una forma dependie nte
de
ción controla da por la ubicuitin ación. En este caso, un inhibido r de la señal Wnt (véase la Fig. 20-30 ) . Las mutacio nes en los genes que
un fa ctor d e transc ripción , más que el propio factor de transcrip - codifican para las proteína s Wnt, Frizzled o LRP (llamada Arrow
ción , es desactiva do por la ubicuitin ación . En el estado de reposo, un en Drosophila ) tienen , todas, efectos similare s en el desarroll o de
facto r de t ra nscripció n clave, llamado NF-kB , es secuestra do en el los embrion es.
citosol unido a u n inh ibidor. Varias condicio nes que inducen estrés De acuerdo con un modelo t
. ac ua1 d e 1a via , Wnt, .
el ¡ugador central
provocan la ub icuitin ación y la degradac ión inmediat a del inhibido r, en la transduc ción de la s - 1 ·
ena mtrace1u 1ar Wnt es llamado P-ca tenina
lo que permite que las células responda n de inmediat o y vigorosa- en los vertebrad os y Ar d ºll
, . ma 1 0 en 1a Drosophila. Esta proteína con
mult1ples talentos funciona t t
mente activand o la transcrip ció n génica. Al aprender el modo en que
la vía NF-kB es activada por una clase de receptore s de superfici e,
,
como protema de unión ent
. ° .
an como act1vado r de la transcrip ción
.
la Fig 20- 13) E . re e1 c1toesqu eleto y la membra na (véase
vemos también una fun ción muy d istinta de la poliubicu itinación : la · • n ausencia de un -
for mación de una plataform a para ensambla r un complejo de trans-
está unida a las m , d
1ecu 1as e adhesió ª sena1 W nt, la ~-catenin a que no
o 1 1 d
ducción de la señal clave.
citoesque leto lo t , n ce u ar e las membra nas o de1
es a a un compl . b
ma Axina y cont" , e¡o asado en la proteína platafor-
1ene 1a protema pol" . )
llamada así porque s , d "d iposis coli ad en omatosa (APC ,
u per l a puede d
lorrectal. En el estad d ar como res ul tado cáncer co-
La señalización Wnt desenc adena la liberac ión o e reposo dos . .
cinasa 1 ( CKl ) y la GSK e '. cmasas d el co mplejo, la caseina·
de un factor de transcripción desde un comple jo , . 3 , iosfonla n de m d
en mult1ple s residuo d . . R .
o o secuenci al la ¡..,-catenin a
proteico citosólico s e senna y t •
fosforilad os sirven co . . reonm a . Algunos de estos residuos
. mo s1t1os d e un I·6 . ..
l1gasa, denomin ada TrCP n para la proteína ub 1cu1t1 na·
Los compone ntes de las vías de señalización W nt y Hedgeho g fueron • Luego la
d amente es degradad '
R .
¡.., -catenm a se ub1C . . . á ·
u 1ttna y r pi-
dilucidad os principal mente mediante análisis genético de las mutan- a por el protea
acerca de la ubicuitin .ó . ,
tes de desarrollo en la Drosophila, pero también son operativo s en los , soma 26S (F1g . l 6 -30a; para mas
ac1 n, veanse las F"
seres humanos. Se piensa que las mutacion es en estas vías desencad e- La vía completa p igs. 3- 29 y 3-34 ).
d egradació n de la R _ or I.a cual la sena - ¡·
1zación d e W nt bl oquea ¡a
nan varios tipos de cánceres humanos. De hecho, eJ primer gen W nt de 1-' catenma aún
sabemos que la unió d W . .
vertebrad os descubier to, el gen Wnt-1 de ratón, fue noticia porque se no se h a 1dent1fic ad o. Sin embargo,
·
fos fo nlació n e nt tant 0 p
encontra ba sobreexpresado en ciertos cánceres de mama Los trabajos
d I
n del d o • . .
m m 10 cttosó lic O d L
ª z com o a LRP cond uce a la
e a GSK3 o de la CK l" b ,
I 1 res. Esto p e RP, prob abl em ente a traves
er . .
mite que la Ax in a se u na al do·
7 52 CAPÍTULO 16 • Vías de señalizaci ón que cont rol an la expresión génica
 a -Wnt
(b) +Wnt
Fri zzled (Fz) FIGURA 16-30 Vía de señalización Wnt. (a) En
Exterior au sencia de Wnt, el factor de transcripción TCF se une
a los promotores o moderadores de los genes diana

Cí'tDSOI
1
~ pero su asociación con los re presores de la transcrip~ión,
como Groucho (Gro), inhibe la activación génica. La
P-catenina se encuentra en un complejo con la Axina
(una proteína andamio), el CPA y las cinasas CK1 y
GSK3, que secuencialmente fosforilan la P-catenina. La
formación mediada por Axina de este complejo faci lita
la fosforilación de la P-catenina por la GSK3 en un
factor estimado de 20 000. La ubicuitina ligasa E3 TrCP
@) luego se une a dos de estos residuos fosforilad os de la

_ ___,@
GSK3 ]
P-catenina, lo que lleva a la ubicuitinación de esta y a su
degradación en los proteasomas. (b) La unión de Wnt a su
receptor Frizzled (Fz) y al correceptor LRP desencadena la
fosforilación del LRP por GSK3 y otra cina sa, y perm ite la
unión ulterior de la Axina. Esto rompe el complejo Axina-
CPA-CK1-GSK3-P-catenina, y evita la fosforilación de la
ligasa '
e:;:::::::, e >e P-catenina por CKl y la GSK3 y lleva a la acumulación de
e;::::, e::::, i e::::::, e:::::::::, la P-catenina en la célula. Después de la translocación
Núcleo al núcleo, la P-catenina se une a TCF para desplazar el
LGS : represor Gro y recluta Pygo, LGS y otras proteínas para
Py 't
activar la expresión génica. (Tomado de R. van Amerongen y R.
Nusse, 2009, Developmenr 136:3205; F. Staal y J. Sen, 2008, Eur. J. lmmunol.
38:1788; y E. Verheyen y C. Gonardi, 2010, Dev. Dyn. 23934. Véase ta mbién la
página web de Wnt: www.stanford.edu/ nussselab/cgi-bin/wnt/.)

Represión Activación

minio citosól ico del correceptor de LRP. Este cambio en la localiza- Para señalizar, la Wnt también debe unirse a los proteoglucanos
ción de la Axin a interrumpe las interacciones que estabilizan el com- de la superficie celular. La evidencia sobre la participación de los
plejo citosólico que con tiene Axina, GSK3, CKl y P-catenina y así proteoglucanos en la señalización por Wnt proviene de las mutantes
evi ta la fos for ilac ión de esta últ ima por CKl y GSK3. A su vez, esto Drosophila sugarless (sgl), que carecen de una enzima clave necesaria
evi ta la ubicuitin ación y la degradación posterior de la P-catenina para sintetizar los GAG heparina y condroitina sulfato. Estas mu-
y la estabi liza e n el citosol ( Fig. 16-30b). Dicho proceso requiere de tantes tienen niveles muy deprimidos de Wingless (la proteína Wnt
la proteína Di shevelled (Dsh), que se une al dominio citosólico del de la mosca) y exhiben otros fenotipos asociados con defectos en la
receptor Fr izzled . La P-catenina liberada se transloca al núcleo, don- señalización Wnt. Se desconoce el modo en que los proteoglucanos
de se asoci a co n un factor de transcripción (TCF) y funciona como facilitan la señalización por Wnt, pero quizás la unión de estas ca-
un co ac tivad or para in duci r la expresión de genes diana particulares denas de glucosaminoglucanos específicas sea necesaria para que se
que, con fre cu en cia, incluyen a los que promueven la proliferación una a su receptor Fz o al correceptor LRP. Este mecanismo sería aná-
celular. ( Recuerde que TC F también funciona en la vía de la cinasa logo a la unión del factor de crecimiento de los fibroblastos (FGF) al
heparán sulfato, que incrementa la unión del FGF a su tirosincinasa
.\1AP; véase la J-ig. 16 -22 ). , .
La act ivación inapropiada de la vía W nt es caractenst1ca de ~u- receptor (véase la Fig. 16-5).
chos cánce res humanos. En diversos tu mores, el nivel de P-catenma
libre es anormalmente elevado, y esta observación proveyó una de La señalización Hedgehog alivia la represión
1as pnmeras pistas de que ¡a ,-,-catenma
· · A · uede activar muchos genes de los genes diana
P
. . L
pro motores del crec1 m 1ento. as mu acio t · nes inactivadoras en los ge-
. .
La vía Hedhehog (Hh) es similar a la Wnt por el hecho de que dos
ne, que codifican APC y Axin a se encuentran en múlt_1~les tipos de
. h . e las mutaciones en los s1t10s de fosfo- proteínas de membrana, una con siete segmentos que se expanden
can cC:res umanos, a1 1gua 1 qu . d
. . GSK 3 O CKl. estas mutaoones re ucen en la membrana, son necesarias para recibir y transduc ir una señal.
rilac1ón de la P-catenina para ' La vía Hh también involucra el desensamblaj e de un com plejo in-
la fo rmación del comple¡o otoso
. . ·¡· (F' 16 30a) reducen la degra-
1co ig. - ' . , . tracelular que contiene un factor de transcripción , al igual que la
. . t ctive la expresión gemca
d.a c16n de P-catenina y permi ten que es a a
vía Wnt. A diferencia de la Wnt , la proteína Hh sufre un procesa-
en ausen cia de la señal Wnt norm al. miento postraduccional característico, que se describe más abajo.
. W
1:.ntrc lo~ genes diana de nt se en c u entran muchos que contro- La señalización Hh también difiere de la seña li zació n de Wnt por-
. ., W 1 1
la n tambi én la 5eñali zac1on por nt, 0 cua indica un alto grado ..
de
que sus dos receptores de membrana se mueven entre la membrana
. . , L 1·mportancia de la estabilidad de
regul aci6n po r retroal1mentac10n. a plasmática y las vesícul as intracelulares y, en los mam íferos, la se-
. . . ifi que las señales Wnt afectan un
la fi -caten ina y su localizac1ón sign ca . . ñalización Hh está restringida al cilio prim ario que sobresa le desde
·t de A-catemna de la ce 1u1a: 1a
er¡u ilibrío crít ico entre los tres d ep 6 SI O5 1-' , la superficie celular.
. . . 1 to el citosol y el n ucleo.
Jnlcrfa,c mcmb rana-otoesque e ,

16.5 Vías de señalización controladas por ubicuitinación: Wnt, Hedgehog Y NF-KB

753
 Si bien la Hedgehog es una proteína secretada , se mueve solamen - Precursor Hh 471

te una corta dista ncia desde un a célu la de señalización del orden de

1 a 20 células y es unida por receptor es de las células que la reciben.
N{~)- -2-0 k
- D_a~ ==)[= ===~4~5~kD~a= == ==(C

~ ~~
Así, las señales Hh, al igual que las Wnt, tienen efectos bastante loca-
lizados. A medida que la Hh difu nde aumentando la distancia de las
células que la secretan , su concentración disminuye y diferentes con-

e:!
centraciones de Hh inducen distintos destinos en las células diana:
las que reciben una gran cantidad de Hh encienden ciertos genes y
forman ciertas estructuras; las que reciben una cantidad más peque-
ña encienden genes distintos y así forman estructuras diferentes. Las
señales que inducen diferentes destinos celulares dependiendo de su
Formac ión tioéster
concentración en las células efectoras se conocen como morfógenos.

/s ~
Durante el desarrollo, la producción de Hedgehog y otros morfóge- Autoescisión
nos está estrecha mente regulada en tiempo y espacio.

Procesamiento de la proteína precursora Hh La Hedgehog se for- ()(?

~:," \
ma a partir de una proteína precursora con una actividad autopro-
teolítica que permite que la proteína se corte a sí misma por la mitad.
La escisión produce un fragmento N-terminal, que posteriormente
se secreta para señalizar para otras células, y un fragmento C-termi-
nal, que se degrada. Corno se muestra en la Figura 16-3 1, la escisión
del precursor está acompañada por la adición covalente del lípido
colesterol al nuevo carbox.i terminal del fragmento N-terminal. El o ------- o
dominio C-terminal del precursor, que cataliza estas reacciones, se
)" f ) ~
encuentra en otras proteínas y puede promover mecanismos auto-
proteolíticos similares.
CH,t~:~::il, o Hh fijada ~o
Una segunda modificación a la Hedgehog, la adición de un grupo
palmitoílo al N-terminal, torna a la proteína aún más hidrofóbica.
En conjunto, los dos grupos hidrofóbicos unidos pueden hacer que
la Hedhehog secretada es una de forma no específica y reversible a las
FIGURA 16-31 Procesamiento de la proteína precursora Hedgeho
membranas plasmáticas y limitan y cambian su difusión y su acción g
(Hh). Las células sintetizan un precursor de 45 kDa Hh, que sufre
ataque
en los tejidos. La restricción espacial desempeña un papel crucial en nucleofílico por la cadena lateral tiol de la cisteína 258 (Cys-258) del carbono
la restricción de los efectos de poderosas señales como la Hh. Recuer- del carbonilo del residuo adyacente de glicina 257 (Gly-257), que forma
un
de que los grupos palrnitoílo también se añaden a las proteínas Wnt intermediario tioéster de alta energía. Una actividad enzimática del dominio
y probablemente también hagan que la Wnt se una reversiblemente a (-terminal cataliza luego la formación de un enlace éster entre el grupo
hidroxilo ~-3 del colesterol y la glicina 257, lo que escinde el precurso r
las células, lo cual restringe la señalización Wnt a las células adyacen- en dos
fragmentos. El fragmento de señalización N-terminal (azul) retiene el colesterol
tes a la célula que emitió la señal. y también se modifica por la adición de un grupo palmitoílo en el N-termin
al.
Se piensa que este procesamiento ocurre principalmente dentro de la
célula.
La vía Hh e n la Drosophíla Estudios genéticos en la Drosophila indi- Las dos anclas hidrofó bicas pueden fijar la proteína secretada, procesad
a, Hh a
can que dos proteína s de la membrana, Smoothened (Smo ) y Patched la membran a plasmátic a. (Adaptado de J. A. Porte, y cols., 1996, Science 274:255.)
(Ptc), son necesarias para recibir y transducir una señal Hedgehog
al interior de la cél ula. La Smoothened tiene siete hélices a que se
extienden en la membra na y está relac ionada en sus secuencias con
el receptor Fz de Wnt. Se predice que Patched contiene 12 hélices teína Hedgehog. Así, Patched parece antagon izar las acciones de
a transmembrana y es en gran medida similar en su estructura a la Hedgehog y viceversa. Estos hallazgos sugieren que , en ausencia
proteína Niemann-Pick C 1 (NPC I ), un miembro de la superfamilia de Hedgehog, Patched reprime los genes diana al inhibir una vía
ABC de proteína s de la membrana (véase el Cuadro 11-3 ). de _señalización necesaria para la activación génica. La observación
La Figura 16-2 muestra un modelo actual de la vía de Hedgehog ad1c1onal de que Smoothened es necesari a para la transcripción de
( Hh ) en la Drosophila. Inicialmente, la evidencia que apoya este los_ genes diana en los mutante s que carecen de funci ón patched
modelo provino de estudios hechos en embriones de la mosca con ubica a Smoothened corriente abajo de Patch ed en la vía Hh . La
mutac iones con pérdida de la función en los genes hedgehog (hh) evidencia indica que Hedhehog se un e directamente a Patched y
o sm oothened (sm o). Ambos tipos de embriones mutantes tienen
evita que este bloquee la acción de Smo othened , lo cua l activa la
fe notipos de desarrollo muy similares. Más aún , tanto los genes transcripción de los genes dian a.
hh co mo smo son necesarios para activar la transcripción de los
En ausencia de Hedgeh og, Patched está enriquecido en la mem -
mismo s genes diana (p. ej., patched y wingless ) durante el desarro-
brana plasmática, pero Smoothened lo está en las membran as que
llo embrionario. Por el contrario, las mutaciones con pérdida de
cubren las vesícula s internas. El complejo de proteínas citosó licas
la func ión en el gen patched (ptc) producen un fenotipo bastante
~n la ví a de la Hh consiste en varias proteínas ( f- ig. J 6-32a ), que
di stinto, sim ilar al efecto de inu ndación del embrión con la pro-
incluyen Fused (F u), una cinasa serina-treonina ; Cost al-2 (Cos2) ,

7 54 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión gén

ica
r

(b) +Hh

Smo se mueve a 1~
membrana plasmátic¡I
~
! ~
V
Vesícula

(©
c:=::::, j e
•.-· e::::::::, ~
Núcleo

FIGURA 16-32 La señalización Hedgehog en las moscas. (a) En ausencia Hh se une a la Ptc y provoca que cierta Ptc se mueva a los compar tim ientos
de la hedgeh og (Hh), la p ro teína pa tched (Ptc) inhibe la proteína smoothened internos (no se muestra) y alivia la inhibición de la Smo. Entonces, Sm o se
(Smo), presente p rinci palmen te en la mem b rana de ve sículas interna s. Un mueve a la membrana plasmática, se fosfor ila, se une a la Cos-2 y se estabiliza a
com plejo q ue co ntien e Fused (Fu), una ci nasa; otras ci nasa s; Costal-2 (Cos-2), pa rtir de la degradación. Tanto Fu co mo Cos-2 se fosforllan extensamente y, lo
una proteína motora relacionada con la cinecina; y Cubitis interruptus (Ci), un que resulta m ás im porta nte, el co mpl ejo Fu -Cos 2-Ci se disocia. Esto co nduce
factor de tran scri pció n que se une al dedo de zinc, se une a lo s microtúbu los. a la estabil ización de una Ci, Ci* mod ificada alternada en toda su longitud que
Ci se fosfori la en una serie de pasos que invo lucran la proteinci nasa A (PKA), desplaza al represo r Ci75 del promotor de los genes diana, recl uta la p roteína
la si ntasa-ci nasa 3 g lucóg eno (GSK3) y la ca seína-cinasa 1 (CK l ). Luego, la Ci activa do ra de unión a CREB (CBP) e induce la expresión de los genes d iana. Se
fos fo rilada se escinde p rot eol íti camente por acción de la vía de la ubicuitina- desconocen los com parti mientos exactos de la membrana en los cuales Ptc
proteasoma, y es to genera el fragme nto Ci7 5, q ue funciona como un represor y Smo responden a Hh y su fu nción. (Tom ado des Goe tz y K. Anderson, 20 10. Nature Rev.
de la tra nscripció n de los genes que res ponden a Hh. Su(Fu) tambi én pu ede Genet. 11 :331.)
asoc iarse a lo largo de tod a la Ci para evitar su tra nslocación al núcleo. (b)

una proteína del ti p o de la cinesina asociada a los microtúbulos; y transcripción , proteína que une CREB (CBP), lo que promueve la
Cubiti s in terru pt us (Ci ), un fac tor de transcripción . Este complejo expresión de los genes diana.
se une a los m icrot úbulos del citosol. La fosforilación de Ci por al
menos tres cinasas p rovoca la unión de un componente de un com- Reg ulación de la seña lizaci ón Hh El control por retro alim entació n
plejo ubicuitin a ligasa que, a su vez, dirige la ubicuitinación de Ci de la vía Hh es importante porque la señalización Hh sin res tri cc io -
y su di reccionamiento a los proteasomas allí. La Ci es sometida a nes puede provocar el sobrecrecimiento canceroso o la forma ció n de
escis ión proteolítica; el fragm ento de Ci res ultante, designa~o Ci7 l , los tipos celulares erróneos. En Drosophi /a, un o de los genes ind uci -
se transloca al núcleo y reprime la expresión de los genes diana Hh . dos por la señal Hh es patched. El incremento ulter ior en la expresió n
Desp ués de la unión de Hedgehog al receptor Patche,d, am~as de Patched antagoniza la señal Hh en gran medida po r la reducción
proteínas se mueven desde la superficie celular a las ves1culas m- del depósito de la proteína Smoothened activa. Así, el sistema es tá
ternas, mien t ras que Smoothened lo hace desde las vesículas inter- amortiguado: si durante el desa rrollo se genera demasi ado Hh , se
nas a la m em bran a plasmática; la unión de Hedgehog a Patched compensará con un incremento consecuente de Patched; si se prod u-
también inhibe su capacidad de inhibir Smoothene_d (F1g. 16- 32_a). ce muy poca señ al Hh , la cantidad de Patch ed disminuye.
Esto desencade na varias respuestas celulares, que mcluyen un m-
cremento en la fosfor ilació n de Fu y Cos2 . Es importante conside -
rar que el complejo de Fu, Cos 2 y C i se disocia de los microtúbulos, La señalización de Hedgehog en los vertebrados
y Cos2 se asoc ia con la cola C -termi nal de Smoothened . La ruptura involucra a los cilios primarios
resultan te del co mplejo Fus , Cos 2 y Ci p rovoca una reducci ó n tan-
to en la fos for ilac ió n como en la escisió n de Ci. Como resultado, La vía de señalizaci ó n Hh de los ver te brados co mpa rte mu chas c;i rni: -
se genera un a form a modific ada de Ci en to da su lon git ud, llam a- terísticas con la vía en Drosophila, pero tambi én hay algun:1s d ift: rl'll -
da Ci•, y se transloca al núcleo , donde se un e al co ac tivado r de la cias sorprendentes. En pri mer lu gar, los ge no mas de los mamífe ros

16.5 Vías de señali zaci ó n con trolad as po r ublcuítín acíón : Wnt, Hedgeh og Y NF-...-B 755
 •a de las célu las ti enen un cj¡1·
. b· la mayo ri o
con tienen tres genes hh diferent es y dos genes ptc, que se expresa n el Ca p. 18 ). Sin em argo:. . ria ( Fig. 16-33 ). Co mo apre nde.
. 11 d c,/10 prima
diferencialmente en varios tejidos. En seg undo lugar, los mamíferos inmóvi l único ama O . • e exti enden y se mantien en po
l 8 los c111Os s r
expresan tres factores de transcripción Gli que se dividen los papeles remos en el Ca pítu 1O , ' y part1c ,
u
las a ¡0 largo de un haz de m·1·
de la única proteí na Ci de la Drosophila. Todos los demás co mponen- el transporte de proteu~as roteínas de tra nspor te intraflage.
tes de la via Hh también es tán co nservados. crotúbulos centrales; d iferente:~íc ulas desd e la base del cili o hasta
El aspecto más fa sci nante de la vía Hh de los mam íferos es la lar (TIF ) mu even prote in as y p Pa rte de la evidenc ia inicial de
. - o pu esta .
importa ncia recién reco nocid a del ci lio prim ar io. Los cilios so n las su punta en la d ¡recc i611 _ . ció n Hh prov in o de un a detec.
T n la sena1iza
estruct uras de membrana largas que so bresa len desde la superfic ie un papel de los ci 105 e . nes qu e alte rara n el desarrollo
. b de mutac 10
celular. Los papeles de los abundantes cilios de la tráqu ea en mov i- ción sistemática en usca d O sim ilar a lo obse rvado en los
lizar materiales a lo largo de la superficie de esta y de los fla gelos en ¡ míferos de mo . .
temp ra no en os ma h ad a· es tos feno ti pos mcluyeron
el movimiento de los espermatozoides so n bie n conocidos (véase embrio nes co n seña lizac ión H ªI ter ·

Cilio prim a rio

(a) -Hh Cilio primario (b) + Hh

~ (suFU)
Moto r
Smo Kt de d ine ína

Smose muev~
a la mem bra na
plas mática

Exterior

Citosol Haces de
microtúbulos
Cinasa

Vesícu la
Cuerpo basal 5
'\! /
(+) (+ )

Núcleo Núcleo

FIGURA 16-33 La señalización Hedhehog en los vertebrados. La de Ci), SuFu Y las cinasas. _KIF7 evita el enriquecimiento de Gli dent ro del cilio
señalización Hedgehog (Hh) ocurre en los cilios primarios, pero de cualquier y pro~ueve el procesamiento proteolitico de Gli al represor de esta Gl1R. (b)
modo el proceso genera l es si milar al de las moscas. (a) En ausencia de Hh, La union de Hh desencadena el movimiento d 5 .
. . e moa 1a membrana del cil io
Patched se localiza en la membrana de los cilios y, de un modo desconocido, y el mov1m1ento de la proteína motora KIF 7 h . •
.. . asta e extremo del m1c1otu bu lo
1
bloquea la entrada de Smoothened a ellos; Smo está presente principalmente cil iar, donde GIi se acum ula y se act iva por • .
. . un mecanismo aun desconondo
en la membrana de las vesícu las internas. La ci nesina KIF7 (el homólogo de
.
e,
Luego, la Gl1activada transportada hac·a 1
• f .
1 a parte 1n erior del cil io y ~P libera
Cos-2) se une a los microrúbulos de la base de los cilios, donde puede formar al c1tosol. (ro madode s Goetz y K Ande,son 7010 N
· • 01ureR1•v Gmer 11 Jl l)
un compleJo con el factor de transcri pción Gli (el homólogo en los vel'(ebrados

7 56 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 1a Pérdida de ciertos tipos ,de células de l tubo neura' l que req ui.ere n
os niveles de una prote111 a Hh . Mucha s de es tas t . N F-Kl3 ( un acró nim o que prov iene de l desc ri plor "moderado r
ale mu ac1ones se de l factor nuclear de la cad ena ligera ka ppa <le las célul as B acl iva-
encontraban en los genes qu e co dificaba n las proteí nas TJF
1 1 'I' , 1o qu e das" o su denominac ión en inglés nuclear-fac tor ka ppa -light -chain
indica un p_a~e para _os c1 ios (o flagelos) en la se fi alización Hh.
El análisi s postenor mostró que en ausencia d - . . en hancer of activated B cells) se ac tiva rápida menle en las célul as
. ' e sena 11zac1ón del sistema inmunitar io de mamíferos en respuesta a la in fecció n
h
H , la Ptc se localiza en la membrana del ci lio pr· ·
. im an o, y 1a Smo, bacteriana y viral, la inflam ació n y un núm ero de otras sil uac iones
en las vesícu las 111ternas cerca nas a la base del cilio ( !~·
. . 1g. 16 -33a ). estresa ntes, como la radi ación ioni zante. La vía NP- KB se acli va en
Después. de la ad1c1ón de Hh, Smo se localiza en Ia mem b rana del
algunas célul as del sistema inmunitario cuando los co mponenles de
cilio, m1e~tr_as que Ptc sale d_e la memb ra na del cilio (Fig. 16_33 b).
la pared celular bacteriana o fúngica se unen a ci ertos recep tores del
Este mov1m1ento de la Smo invol ucra la fos forilaci'ó d I d . .
. n e om11110 tipo Toll de la superfici e celul ar (véase la Fig. 23 -2 3). Esta vía tambié n
citosólico C-termma! del rece_p tor po r la ci nasa del receptor ~-adre-
!ª
nérgico (BARK), misma enzi ma qu e modifica a los receptores aco -
es activada por las llam adas citocinas inflamatorias, como el fa ctor de
necrosis tumoral a (TNFa) y la interleucína J (IL-1 ), que son libera-
plados a la protema, G. Luego, la ~-a rresti na se une a Sm o y,a suvez,
das por casi todas las células como respuesta a la infección . En tod os
recluta la protema motora de los mic ro túbulos Ki'f3A , q ue se une a
los casos, la unión de un ligando a su receptor induce el ensambl aje
los microtúbulos del cen tro del cilio y mueve la Smo hacia la parte
de un complejo rnultiproteico en el citosol, cerca de la membrana
superior de la membra na del cilio. Al mismo tiempo, la degradación
pl asmática, que desencadena una vía de señalización que da como
de la Gli a un frag mento del re presor está bloqueada , y la proteína res ultado la activación del factor de transcripción NF-KB.
motora K'.f7 mueve la Gli_ a la punta del cilio. Allí , es activada por Originalmente, el NF-KB fu e descubierto sobre la base de la ac-
Smo mediante un mecam sm o que aún se desconoce, y luego otra tivación transcripcional del gen que codifica la cadena ligera de los
proteína motora , una dineína , mu eve la Gli activada hasta la base anticuerpos (inrnunoglobulinas) de las células B. Ahora se cree que
del cilio ( Fig. 16-31 b ). Al igual que en las moscas, este factor de es el regulador maestro de la transcripción del sistema inmunitario
transcripción activo lu ego se mueve al núcleo, donde puede activar de los mamíferos. Si bien las moscas no sintetizan anticuerpos, los
la expresión de mú ltiples gen es diana. homólogos de NF-KB de la Drosophila inducen la síntesis de un gran
No queda claro por qué durante la evolución de los vertebrados número de péptidos antimicrobianos secretados en respuesta a la in-
los cilios primarios se volvieron necesarios para la señalización Hh , fección bacteriana y viral. Este fenómeno indica que el sistema regu-
dado que el mismo resulta do (la conversión de un factor de transcrip- lador NF-KB ha sido conservado durante la evolución y tiene más de
ción desde un re presor a un activador de la expresión génica) ocurre quinientos millones de años.
corrien te abajo de la señalizació n Hh , tanto en los sistemas mamífe- Estudios bioquímicos de las células de mamíferos y estudios
ros como invertebrados. genéticos realizados en moscas proporcionaron evidencias imp or-
tantes acerca de la función de la vía NF-KB. Las dos subunidad es
~ La inac tivación inadecuada de la señal'.zación Hh es la causa de del NF-KB heterodirnérico (p65 y pS0) comparten una región de
U varios tipos de tum ores humanos, que mcluyen los meduloblas- homología en su N-terminal necesaria para su dimerización y la
tomas (t umores de ce rebelo) y los rabdom iosarcomas (tumores mus- unión al DNA. En células que no están siendo sometidas al estrés o
culares). Los cili os pri marios so n ese nciales para esta señalización respondiendo a signos de infección , la unión directa a un inhibidor
anormal de Hh y los fárma cos que inhiben la funci ón de los cilios llamado 1-KBa secuestra NF-KB en estado inactivo en el citosol.
prim arios están siendo pro bados en modelos animales de estos cán- Una única molécula de 1-KBa se une a los dominios aparea dos N-
ceres. Por ejem plo, la expres ión de una fo rm a mutante activada de ter minales del heterodímero p50 -p65 y enm ascara así sus se ñales
Smoothened en el cerebro del ratón pos natal causa rá medulobl asto- de localización nuclear ( Fi g. J 6-34a ). Un co mplejo de tres proteí -
mas, pero estos tumores no se ocasionará n si en sirnu_l'.á neo se in ac- na s, llam ado I-KB cinasa, opera inmediatamente corriente arriba
tiva un gen qu e codifica un a proteína ese ncial de los cilios. ■ de NF-KB y es responsable de liberarla del secu estro. La subun idad
de la cinasa ~ de 1-KB cinasa es el punto de convergenc ia de todas
las otras señales extracelulares que activan la NF-KB mencio nada
más arriba . En el lapso de minutos despu és de la estimulac ión de
La degradación de una proteína inhibidora activa
la célula por un agente infeccioso o una citocina inflamator ia, la
el factor de transcripción NF-KB subunid ad ~del a cin asa IK K se activa por la fosfor il aci ó n y lue go
, W Hedgehog un factor de trans- fo sforila los dos residuos de se rin a N-terminales de la 1-K Ba (Fig.
En el estado en reposo de las v,as nt Y ' . ,. . l 6-34a, pasos D y D) . Una ubicui tin a-ligasa E3 lu ego se un e a
·do a deg radación proteo 1itica,
cripción cl ave se ubicuitina y es sorne t1 . . esta s fo sfoserin as y poliubicuitina 1-KBa, lo que desencad ena su
. . . ¡· el bloqueo de la ub1cu1-
la activación de la vía de señali zación irnp ica d . deg radació n inm ediata por un pro teaso ma (pasos D y D ). En las
· ción en su esta o activo.
tinación y la liberació n del factor d e transcnp e
célul as qu e expresan for mas mutantes de 1-KBa en las cuales es-
1estado de reposo, eI 1actor
La vía NF-K.B opera de modo op uesto: en e 'd . h' tas dos serin as han sido camb iadas a alanin a y, por lo tanto, no
·d el citosol u111 o a un 111 1-
de transcripc ión NF-KB queda retem O en ' b' . . pueden fosfor il arse, NF-KB está permanentemente in ac tiva , lo _qu e
. -a1· ión involucra la u 1cU1 tma-
b1dor; la activación de la vía de se n izac d dem uestra que la fosfo rilació n de 1-KBa es esencial para la acti va -
. h'b'dor lo que desenca ena 1a
ción seguida de la degradación de1 ll1 1 1 ' . . ción de la vía.
. . . . Este meca msmo permite
liberación del factor de transcnpoó n acuvo. , . La degrad ación de 1-KBa ex pone las seña les de loca lización nu-
. d d de señales de estres y activen
que las cé lu las respondan a una vane ª . d 1 cl ea r de NF-KB que, a su vez, se trans locan al núcl eo Y ac ti van la
de modo inmed iato y vigoroso 1a transcr
ipción génica. Los pasos e a
d
vía NF-K.B fueron revelados en es tudios tanto de cé luIas e mam1 e
·i ro transcripci ón de un a multi tud de ge nes di ana (¡:jg. ló -3'1 pasos
n A pesa r de su act1vac
ª,
. 1.ón po r 1a proteól'1s1·s, )a sciializac1
D y 1:,1). · ón
co mo en Drosophila.

16.5 Vlas de señalización controladas por ubicuitinación: Wnt, Hedgehog Y NF-KB

757
a) Bacterias
Receptor TNF-a IL-1 y hongos
Radiación de TNF-a
ionizante Receptor de IL-1
Receptor
tipo Toll
Infección
por virus Exterior

Citosol

Ubicuitina ligada
p50 3 a poli-K48
2 (-KBa
p65p50
IKKB sa
IKKa -xBa -xBa O
Cinasa NF-KB
-KB secuestrado
NF-KB libre
Degradación
Núcleo 5 p65 50 proteasomica
de I-xBa
Induce la 6
transcripción p65
especifica p50 Señales
de localización
nuclear

Enzimas
Proteinass
de adhesión -KBa Citocinas
inflamatorias Quimocinas

IL-1B

Receptor de IL-1 Receptor de IL-1

FIGURA 16-34 Activación de la vía de señalización de NF-KB. (a) En las

células en reposo, el factor NF-xB dimérico de transcripción, compuesto por
las subunidades p50 y p65, es secuestrado en el citosol unido al inhibidor
-KBa. Paso la activación de la cinasa trimérica l-KB es estimulada por
muchos agentes, que incluyen la infección viral, la radiación ionizante,
la unión de las citocinas proinflamatorias TNFa o lL-1 a sus receptores
respectivos o la activación de cualquiera de los receptores tipo loll por
MyD88 MyD88 componentes de las bacterias o los hongos invasores. Paso 2 la subunidad
IRAKRAK Bde la cinasa |-KB luego fosforila el inhibidor -KBa, que entonces se une a
(TRAF6)(TRAF6 una ubicuitina-ligasa E3. Pasos B y la poliubicuitinación ligada a lisina 48
de -kBa posterior la marca para su
Cadenas de poli-K63 degradación por proteasomas. Paso 5t la
eliminación de -KBa desenmascara las señales de localización nuclear (SLN)
unidas a ubicuitina
en ambas subunidades de
NF-KB, lo que permite su translocación al nucleo.
TAK1 TAK Paso 6 en el núcleo, NF-KB activa la
transcripción de numerosos genes
diana, incluido el que codiica l-KBa, que actúa
para terminar la señalizacion
y los genes que codifican varias citocinas
inflamatorias. (6) La unión de
KKB
IKKa
IKKB
IKKaO
la interleucina-18 (L-1ß) a los
receptores de IL-1 (IL-1R) desencadenala
oligomerización del receptor y el reclutamiento de varias proteinas al
dominio citosólico del receptor
que incluye TRAF6 y la E3 ubicuitina-ligasa,
que cataliza la sintesis de largas cadenas de
lisina-63 ligada a poliubicuitin
ligadas a TRAF6 y otras proteínas del complejo. Las cadenas de poliubicuitind
pb funcionan como un andamio
para el reclutamiento de la
la subunidad NEMO del cinasa TAK1y
xBa complejo trimérico -k8 cinasa. La TAKI luego se
autofosforila y la subunidad ß de la -kB cinasa activa
su actividad de cinasd
yle permite fostorilar à -kBa. (Parte la) tomado de R.
Khush cols. 2001, Trends
22260 y J-L Luo y cols, 2005, J Clin. Invest. 1152625,
y
Immuno
Rev. Biochem. 78:769)
parte [b] tomada de B. Skaug y cols, 2009,

758 CAPTULO 16 Vias de señalización quecontrolan la expresión génica

 Nf-KB fi nalmente se apaga por un bucle de retroa lim entación ne- de ca den a de poli ub ic uitina parti cipan de mo do muy diferente en
oat ivo, dado que uno de los genes cuya transcripció n es inmed iata- la tra nsm isió n de la señal lL-1 a la act ivaci ón de los fa ctores de
~ente inducida por NF-KB codifica I-KBa. Los niveles resultan tes tra nscripci ón NF -KB .
aumentados de la proteína I-KBa se un en a la NF-KB del núcleo y
la regresan al citosol.
En muchas células del sistema inmunitario, la NF-KB estimula la
transcripción de más de 150 genes, incluidos los que codifican cito- CONCEPTOS CLAVE DE LA SECCIÓN 16.5
cinas y quimocinas; estos últimos atraen a otras células del sistema
inmunitario y a los fi broblastos a lo s sitios de la infección. La NF-KB
Vías de señalización controladas por la
también promueve la expresión de proteínas receptores que permi- ubicuitinación: Wnt, Hedgehog y NF-KB
ten que los neutrófilos ( un tipo de linfocito ) migren desde la sangre • Muchas vías de señalización implican la ubicuitinación y proteólisis
al tejido subyacente (véase la Fig. 20-39). Adem ás, la NF-KB estimula de la proteína diana y, de este modo, son irreversibles o solo
la expresión de iNOS, la isoforma inducible de la enzima que pro-
lentamente reversibles. Las proteínas diana pueden ser un fac tor de
duce óxido nítrico, tóxico para las bacterias, como así la expresión
transcripción o un inhibidor de un factor de transcripción .
de varias proteínas antiapoptóticas que evitan la muerte celular. Así,
este fac tor de transcripción simple coordina la defensa del organis- • Wnt controla numerosos eventos críticos del desarrollo, como el
mo y la activa de modo directo, y responde a los patógenos y al estrés desarrollo cerebral, la formación de miembros y la organogénesis.
o, in directamente, a las moléculas de señalización liberadas desde Hedgehog funciona como un morfógeno durante el desarrollo. Las
otros tejidos y células infectados o dañ ados. mutaciones activadoras de ambas vías pueden provocar cán cer.

• Tanto Hedgehog como Wnt son proteínas secretadas que contienen

Las cadenas de poliubicuitina sirven como anclas lipídicas que las fijan a las membranas celulares y reducen así
su espectro de señalización.
plataformas que vi nculan los receptores a proteínas
corriente abajo en la vía del NF-KB • Las señales de Wnt actúan a través de dos proteínas de superficie
celular, el receptor Frizzled y el correceptor LRP, y un complejo
Hemos visto que la sub un idad b cinasa de 1-KB es el punto de con -
intracelular que contiene P-catenina (véase la Fig. 16-30 ). La unión
vergencia para las señales ext racelul ares transmitidas a través de
de Wnt promueve la estabilidad y localización nuclear de P-catenina
múltiples recep to res, q ue incluyen Toll e IL-1. Dado que los domi-
que, de modo directo o indirecto, promueve la activación del factor
nios citosólicos de Toll e IL-1 no ti enen actividad enzimática, du-
de transcripción TCF.
rante m uchos años fue un misteri o el modo en que la activación de
estos receptores llevaba a la ac tivación y fosforilación de la subu- • La señal Hedgehog actúa también a través de dos proteínas de
nidad p de la cin as a de 1- KB . Investigaciones iniciales demostraron la superficie celular, Smoothened y Patched, y de un complejo
qu e la presencia d e IL- 1 conducía a la oligomerización del receptor intracelular que contiene el factor de transcripción Cubitis
de IL-1 y a la un ión de varias proteí nas a su dominio citosólico, interruptus (Ci) (véase la Fi g. 16- 32). Una forma activadora de Ci
incl uida la TRAF 6, una E3 ub ic uitina-ligasa que sintetiza cadenas se genera en presencia de Hedgehog; un fragmento represor Ci se
de poliub icuit ina. D ad o que entonces se pen saba que toda la po- genera en ausencia de Hedgehog. Tanto Patched como Smoothened
liu bicu iti nació n señali zab a la degrad ació n por proteasomas, los cambian su localización subcelular en respuesta a Hedgehog unido
investig adores busca ron proteínas diana ubicu itinadas que se _des- a Patched .
truyeran con rap idez . Al no encontrarlas, buscaro n otros posibles
papeles pa ra la po liubicuitina y pronto encon traro~ ~u_e , depen - • La señalización de Hh en los vertebrados requiere el transp orte en
diendo de la ligasa d e ubicuitin a E3 específica, la ub1cu1tma form a los cilios primarios e intraflagelar de proteínas. Patched se localiza en
múltip les tipos d e polímeros que tienen dife rentes estructuras Y la membrana de los cilios en ausencia de Hh , y Smo se mueve h acia
los cilios cuando hay Hh presente (véase la Fig. 16-33 ).
fu nciones biológic as . .
La E3 ub iqu iti n a-ligasa que modifica I-KBCX h ga el extrem? car-
• El factor de transcripción NF-KB regula muchos genes que permiten
boxilo de una ub icuitina a la lisin a 48 (K48 ) de ot ra; eSt a poh-K 48
a las células responder a la infección y a la inflamación.
ubicu itina direcc iona la pro teín a u n id a al pro teasoma_(Fig. _16 -
36a). Por el co ntra rio, la E3 ligasa T RAF6 une el carboxi~ter mmal • En las células no estimuladas, NF-KB se localiza en el citosol, un ida a
de una ubicuitina a la lisina 63 (K63 ) de otra (véase la Fig. 3 - 34 ). la proteína inhibidora 1-KBa . En respuesta a muchos tipos de señales
la cadena de poli - K63 resultante no direcciona las pro teínas para extracelulares, la ubicuitinación dependiente de la fosfori lació n y la
la degra dación· en lugar de ello, estas caden as de ubicuit ina actúan degradación de I-KBa en los proteasomas libera NF -KB activa que se
con un dominio poli- K63 de
como plataform ' as q ue u nen , transloca al n úcleo (véase la Fig. l 6-34a ).
protemas
unión a ubicuitin a. Una de estas es la proteinc in asa TAKI, que se
acti va al unirse a la cadena de poliubicuitina; otra es la sub unidad • Las caden as de poli ubi cuit ina li gadas al receptor IL- 1 acti vado
NEMO de la cinasa I- KB. Así, Ja unión a la poli -K63 ubic uitin a forman una plataform a que lleva la cinasa TAKl cerca de su sust rato,
lle va a la cin asa y a su d ian a, la subunidad p cinasa de la 1-KB, a una subunidad de la cinasa I-KB, y así perm ite que las señales se
la proximidad de modo tal q ue Ja TAK I puede fos fo rilar y activa r transm itan desde el receptor a compo nentes co rriente abajo de la vía
· ' · nte aba¡o · (F.1g. 16 - 36b ) · Com o se notó previa NF-KB (véase la Fig. l 6-34b).
es ta cinasa corne . -
mente , esta cinasa en tonce s fosfor ila I-KBCX. Así, dife ren tes tipos

16.5 Vías de señalización co ntrolad as por ubicuit inación : Wnt, Hedgehog Y NF -KB 759
 . . d de p rote ín as también se utiliza en algun a
La esc 1s16 n regu 1a a . , .. s
16.6 Vías de seña lizaci ón controladas por la . . . acelular. As í, co nclu imos nuest ro anahsis des-
vías de scñalizac 16 n 111 1r
escisión prot eica: Notc h/Delta, SRE BP . . . ¡ s· la esc isión d e u n precu rso r de un facto
cr1b1endo una de estas va · . r
. . d d , la me mbrana, en particular dentro de la
En esta secc ión, co nsidera mos las vías de se i'tal ización activadas por de transcripción ent ro e . .
. cspu cs ta a ba¡os niveles de colesterol. Esta
la escisión proteica en un espacio ex tracelular (co n frecuencia, en la me mb rana de l Go 1g1, en r · . . ..
, . el manten1 m 1en to d el adecuado equilibrio
superfic ie de la célula ), en genera l por m ie mbros de la fa milia de la v1a resul ta esenc ia1 pa ra .
, e , 'dos para la con stru cció n de las membranas
metaloproteasn de la 111ntriz (MMP ). Por ejemplo, en la vía Notch/Del- de coleste rol y 1os10 11p1
ta, la esc isi ón de MMP de la parte extracelular de receptor Notch es celulares (véase el Ca p. 10 ) .
seguida de su escisión de ntro de la membrana plasmática por una
pro teasa di st inta , con liberación del dominio citosólico que funciona
como fac tor de transcripción. Esta vía determina los destinos de mu - Con la unión de Delta, el receptor Notch se escinde
chos tipos de células du ran te el desarrollo. y libera un factor de transcripción componente
Previame nte en este capítulo, vimos que múltiples factores de cre-
·do como Notch como su ligan do Delta son
cimiento em iten señales a través de receptores tirosincinasa. Muchos Tanto e1 receptor conoc1
, b que se expanden y se encuentran sobre la su-
de estos fa cto res de crecimiento, incluidos los miembros de la fami - protemas transmem rana . .
lia del fa ctor de crecimiento epidérmico (EGF), se sintetizan como · 1 1 N h también tiene otros hgandos, pero los mecanis-
per fi c1e ce u ar. o I c .
precursores que atraviesan la membrana y pueden emitir señales a mos moleculares de activación son los mismos con cada uno de ellos.
células adyacentes al unirse a receptores EGF sobre sus superficies. El Delta de una célula se une a Notch de una célula adyacente (pero no
Sin embargo, la escisión de estas proteínas por metaloproteasas de la de la misma célula) y lo activa, de modo tal que sufre dos eventos de
matriz libera los factores de crecimiento activos al medio extracelular, escisión; estos resultan en la liberación del dominio citosólico de Notch
lo que les permite emitir señales a las células mucho más distantes y que funciona como un factor de transcripción.
au n a las células que los han liberado (señalización autocrina) . Dado La Notch se sintetiza como una proteína monomérica de la mem-
que este proceso implica una forma de escisión proteolítica similar brana en el retículo endoplasmático. En el complejo de Golgi, sufre
a lo que ocurre en la vía Notch/Delta, también la consideraremos una escisión proteolítica que genera una subunidad extracelular y una
aquí. La activación y liberación de factores de crecimiento por esci- subunidad citosólica transmembrana; ambas permanecen asociadas de
sión proteica está alterada en muchos cánceres y podría conducir a un manera no covalente entre sí. Después de la unión de Delta, la proteína
agrandamiento, con frecuencia fatal, del corazón. La escisión inade- Notch sobre la célula que responde sufre dos escisiones proteolíticas
cuada de MMP, otra proteína que se expande en la membrana, ha sido adicionales (Fig. 16-35). La primera es catalizada por ADAM 10, una
implicada en la patología de la enfermedad de Alzheimer. metaloproteasa de la matriz. (El nombre ADAM proviene de a disin-

CÉLULA DE SEÑALIZACIÓN

Citosol

FIGURA 16-35 Vía de señali zación Notch/

Delta. En ausencia de Delta, la subu nidad Repeticiones EGF
extracelular de Notch en una célu la que Dominio
responde está asociada de modo no covalente de unión
Dominio a Delta
con su subunidad citosólica transmembrana. de unión
Cuando Notch se une a su ligando Delta a Notch
en una célula de señalización adyacente
(paso D), Notch es inicialmente escindida
por la metaloproteasa de la matriz ADAM
1O, que está unida a la membrana, y libera
el se gmento extracelula r de Notch (paso f)) . DAM 10
D
Luego la subunidad de nicastrina del complejo Espacio /
de cua tro proteínas secretasa-y se une al extracelular
tocón generado por ADAM 1Oy la proteasa
supuesta, presenilina 1, cataliza una escisión
intramembra na que libera el seg mento Cytosol
IJ
citosólico de Notc h (paso U). Después de la
translocación al núcleo, este segmento Notch

lIJ
interactúa con varios factores de tran sc ripción
para afecta r la expresión de los genes que, a su Presenilina 1
vez, iníl uyen en la determinaci ón del destino Al núcleo;
cel ular dura nte el desarrollo (paso[)). !Véase M
CÉLULA RESPONDEDORA activación de
5 Brown y cols., 2000, Cel/ 100:39I y D. Sealsy S. Courtneidge, los factores
2003. Genes Oev 17.7 ) de transcripción

760 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 tegrin and metalJoprotease, lo que en español significa una desintegr i-
tin to. Como ejemplo de cómo ocurre esto en la Drosophila, el segmento
na y una metaloproteasa; una desintegri na es un dominio de proteína
intracelular liberado de Notch form a un co mplejo con una proteín a
conservado que une integrinas y rompe las interacciones célula-matriz;
que se une al DNA, llamada supresora de la ausencia de pelo (Sup-
véase el Cap. 20). La segunda escisió n ocurre dentro de la región hid ro -
presor of Hairless) o Su (H ). Este complejo estim ula la transcripción
fób ica que _se extiende en la m embrana de Notch y está catalizada po r
de muchos genes cuyo efecto ne to es infl uenciar la determinación del
un compleJO transm embrana de cuatro proteínas llam ado secretasa- . destino celular durante el desarrollo. Una de las p ro teínas aumentadas
Esta escisión libera el segmento citosólico de Notch q ue de inmediat~ de este modo es la propia Notch, y la producción de Delta se reduce en
se transloca al núcleo, donde afecta la t ranscripció n de varios genes consecuencia. Así, una célula que debe tener un poco más de Notch
diana. Aún no se comprende bien de qué manera la hidrólisis del enlace que sus vecinas será estimulada para producir aún m ás Notch y me nos
peptídico p uede ocurrir den tro del ambiente hidrofóbico del interior Delta y para asumir un destino en el desarrollo distinto del de las célu-
de la membrana. Esta proteólisis intramembrana regulada (RIP) induci- las adyacentes ricas en Delta. De este m odo, la regulación recíproca de
da por la señal se emplea en una variedad de sistem as de señalización, receptor y ligando es una característica esencial de la interacció n entre
que incluye n la respuesta de las células al bajo colesterol (véase más las células inicialmente equivalen tes que hace que adopten dife rentes
adelante ) y a la presencia de proteínas no plegadas en el retículo endo- destinos celulares.
plasmático (véase el Cap. 13).
El co m plej o de secretasa-y con tiene una proteína llamada prese-
nilina 1 y otras t res sub unid ades esenciales, aph-1 , pen-2 y nicastrina. Las metaloproteasas de la matriz catalizan la
La presenilina 1 (PS 1) fue id entificada inicialmente como el producto
escisión de muchas proteínas de señalización desde
de un gen que por lo gen eral se encue ntra mutado en pacientes con
una fo rma autosómica d o m in an te d e la enfermedad de Alzheimer.
la superficie celular
Los estudios realizados en células que carecen de nicastrina mostra- Muchas moléculas de señalización son sintetizadas como proteínas
ron que la secretasa-y pued e escindir proteínas solo que han sido pri - transmembran a cuyo dominio señal se extiende dentro del espacio
mero hidrolizadas por ADAM u otra metaloproteasa de la matriz. La extracelular. Estas proteínas de señalización, como la Delta descrita
nicastrina se u ne al tocó n extracelular N-terminal de la proteína de más arriba, con frecuencia tienen actividad biológica, pero solo pue-
memb rana generad o po r la primera proteasa (véase la Fig. 16-35). Sin den emitir señales al unirse a receptores de células adyacentes. Sin
este tocó n, la nicast rina, y así el complejo de la secretasa-y completo, embargo, muchos factores de crecimiento y otras proteínas señal son
no puede in te ract ua r con su proteín a diana. Más adelante, examina- sintetizados como precursores transmembrana cuya escisión libera la
mos el papel de las p roteínas ADAM y la secretasa-y en el desarrollo molécula soluble de señalización activa al espacio ext racelular. Con
de la en ferm edad de Alzheimer. frecuencia, esta escisión es llevada a cabo por metaloproteasas de la
La localizació n de Notch y Delta en células distintas, adyacentes, matriz (MMP), que son enzimas que contienen metal y escinden los
es esencial porque participan en un proceso de diferenciación celular segmentos extracelulares de proteínas diana cercanas a la superficie
muy conservado e im po rtante ta nto en invertebrados como en verte- exte rn a de la membrana plasmática. El genoma humano codifica 19
brados, llamado inhibición lateral. En este proceso, células adyacentes metaloproteasas de la famil ia ADAM, y muchas están involucradas
e in icialm en te eq uivalentes en el desarrollo asumen d estinos totalmen- en la escisión de los precursores de proteínas de señalizació n justo
te distintos. En efecto, una célula en un grupo de células equivalentes po r fuera de su segm ento transmembrana. Esta proteólisis m ediada
instruye a las otras que se encuentra n alrededor a elegir un destino d is- por ADAM d e tales p recursores es sim ilar a la escisión de Notch por

APP
Espacio
extracelular Secretasa-a.
Prese nilina 1 (ADAM 10,
ADAM 17)

12 ªª
14a a~

Citosol
d
, , d I APP y la enfermedad de Ab,,, que es pontáneamente for ma oligómeros y luego, las placas amd o1des
FIGURA 16-36 Escisión proteohtica e ª . de mayor ta maño presentes en el cerebro de los pacientes con enfermedad
• • c encial por la secretasa-a
Alzheimer (Izquierda ) La escisió n pro teo 1itica se u . .d de de Alzheime r. En ambas vía s. el seg men to citosólico de la APP se libera en el
(ADAM 1O~ ADAM 17) (O) y secretasa-y (fl) produce un pept_1. o 26
1 citosol, pero su función es desconocida . !Véase s L,chte nthale, y e Haass 2004 1 Cl•n 1nie 11
brana (Derecha) Esm1on en e
ami noácidos inocuo inserto en la rnern · d de la escisión dentro 113 1384, yV W, lquet y 8 De Strooper 2004. ( urr Op,n Neurob,ol 14 S82 lnset O ISWPhOIOt; ke l
1
dominio extracelular por una secretasa-P !O)es:;r~ etpéptido de 42 re siduos
dt: la memb rana por la secretasa-y (fl) qu 9

16.6 Vías de señ al izació n controladas por la escisió n proteica: Notch /Delta, SREBP 761
 . . .. . . . . ·rc1,1sn-13 gen era el pépt ido pu lo lógico_Ab~i. que
,_., .,. 1 ,¡ u e ,·I s , ·,.11 1e 1110 ,·xlrn,:,· lu- vf:1 1n1 L·1:1d:1 ¡Hll 1,, Sl l . . . y luc•• o las plu cas am iloidcs d,
ADAM lo ( v éilSC I~ l ·..1~ . I /1 , ,e¡
. ,
l. ) , l:,'\... 11 0 C"
. . ·nl t' oli gon1 c1 os o e
.b d · · •. . 1 ¡ , s ,,·1 .111·7·11.: i6n . l.1 1 :11.: 1ivid,1d dl' /\ l>AM ,
f au
1
lo nnu ,·s po nt 1\1 eum c , . e n e 1 u~ 1c _ . ·b ,.<1 de los 1,acicnl cs con enf'c r11 k .
1ar lI era o tie ne ac 11 v1< t, . , • • (
St' l),il i~a..: ión ii Cli vas. de h1.• eslar mn yo r tnm¡11~0 prese n ~s
y as ¡ 1a lI.benici.6 11 de 1as. pr) < i,.,,n
~ •·is· d<: •
qu 1.: da cloro .có mu ctor ce nt n l en la enfe rmedad
est rec 11a mcnte regu 1ad .,1 poi· f ••1 .::élul-1· • fJl'i'O :1.!'.111 11 0 dad de Al zhci 111cr.
, J • • • • , 11 0 cida co mo un ª '
· . ,
,. ·
.,
oc urre esto. Una in 1erru, L 0 11 ~ · ,·n los 111ecan 1 sn10s de la reg ul nc 1ó11 de l.n 1 1A fue ll.t.:l " I' ··s genéti cos del pcqu ef'lo porcentaje de
. , 1.. 1v'·s dl'un :11s1
·de ,ond ucir n la proli!'ern ción anorm al de e1e A11 'l 1e1111cr ll • e (' . .. ..,s de la enferm edad. Muchos tenfan
1as pro 1easas ADAM Pu L • ... cd ··ntes ami 11•11~-
las células. pacumt es con antcc tc•111·1 PPA, Y ,es . . lt ó in trigante qu e estas mutacio-
. ¡ · u
mut acio nes en " P10 c ' 1
. 1, 1 . si tios de corte de la secretasa-
.. . · . .. . , • 1padns alrecleco1ccosJ( Ot ros casos de enfe rmedad
~ Ejempl os d e importa nc'.a m~d~c;1 de la esc isión r_e~ulada ~te l?s ncs es t uv1c1 ,111 •181l . .
, j:1 l111•ura 1 )- l .
e
. . prec ursores de la s pro temas se na! so n los m1emb1 os de la f,111111 - ex, po y que se inu~s.tran en ' .; 11 mutaciones con pérdi da de sentido
ia EGF, que inclu yen EG F, HB -EGF, TGF-cx, NRG I y NRG2 (véase la ele Al zheim er fo miliar involu c'.' , d d , 1 secretasa-y qu e incrementa la
·¡· 1 n·1 subun1d,1 e ª
Fig. 16 -7). La ac tivid ad au mentada de un ADAM o m:.\s qu e se obser- en 1a presen1 11m , u ' Ab lo que co n. el. uce ,,1 la fo rm ación de JJlacas y'
form ación del péptt o ,12' 'd
va en muchos cánceres puede pro mover el desa rrollo can ce rígeno de
, . 1 ·te de las neuronas.
dos modos. En pri mer lugar, la actividad aum entada de ADAM puede por ul t11110, a a mu e, .
l.
so que os 111 .11
· 1 ·bidores químicos de la
con ducir a altos niveles de fa ctores de crecimiento de la familia de En ciena época se P1opu tratamiento
'd ¡ ¡
I ea para a enrer-
e

EGF, que estimul an a las célul as sec reto ras (se1ializn ción autoc rina ) o . 'd d d [· ·ecretasa-y se r¡an el d ¡ . rarse tuvieron muchos
ac t1v1 a e ª ~
l- 1 1·mer pero como po r a espe
a las cél ulas adyacentes (señali zación para crina ) a proliferar inadec- medad eIe A z 1 e '
·do a la ,n 11 1c1 n co11comitante
. ¡ 'b ' ·ó de la
uadam ente. En segundo lu ga r, al des truir los componentes de la ma- efectos col aterales graves deb 1 ' ' b L
a
·
reciente-
. tei nas transmem rana.
triz extracelul ar, se piensa que la actividad incrementada de ADAM escisión de Notch Y d e otras P10 •' de la secretasa-y (GSAJJ) ·mere-
· / . .
faci lita las metástasis, el movimi ento de las células tumorales a otras mente descubierta proteína activa , ora
menta de modo notable y selectivo la producción de la_ Ab42 amtlol idea
localizaciones corporales. interacc10nes con a se-
. qu e involucra sus
Las proteasas ADAM también son un factor importante en las car- a través d e un mecamsm 0
cretasa-y y su sustrato, el fragmento carboxi-termina l_ ~PA generado
diopatías. Como aprendimos en el capítulo anterior, la estimulación
por epinefrina (adrenalina) de los receptores P-adrenérgicos en el por 1a secretasa- ¡.,. A D d que GSAP no. afecta
a o , la. esc1S1ón de Notch
efectuada por la secretasa-y, las sustancias qu1m1cas que se unen se-
músculo cardíaco provoca la glucogenólisis y un incremento en la fre-
lectivamente a GRASP e inhiben sus intera cciones con la secretasa-y
cuencia de la contracción muscular. Sin embargo, el tratamiento pro-
0 su sustrato, el fragm ento carboxi-termin al PPA resulta una terapia
longado en las células de músculo cardíaco con epinefrina conduce a la
activación de la ADAM 9 por un mecanismo desconocido. Esta metalo- promisoria para el Alzheimer. ■
proteasa de la matriz escinde al precursor transmembrana de HB -EGF.
Entonces, el HB-EGF liberado se une a los receptores EGF sobre las cé-
lulas de músculo cardíaco señalizadas y estimula su crecimiento inade- La proteólisis intramembra na regulada de la SREBP
cu ado. Esta proliferación excesiva puede llevar a un corazón agrandado libera un factor de transcripción que actúa para
pero debilitado ( una afección conocida como hipertrofia cardíaca, que mantener los niveles de fosfolípidos y colesterol
puede provocar la muerte prema tura ). ■
Si bien este capitulo está enfocado en las vías de señalización inicia-
das por moléculas extracelulares (p. ej., fa ctores de crecimiento ), en
La escisión inadecuada de la proteína precursora ocasiones las vías de señalización intracelular que registran los niveles
de moléculas internas y responden de acuerdo con ellos comparten
amiloide puede llevar a la enfermedad de
principios de la regulación molecular e incluso mecanismos con las
Alzhei mer vías inic iadas desde el exterior de la célula. Uno de tal es casos es el
~ La en fermedad de Al zhei mer es otra afección provocada por la control de los lípidos de la membrana celular. Una célula enfrenta-
1111 act ivid ad inadecuada de las metaloproteasas de la matriz. Un ría una crisis rápidamente si no tuviese sufici entes fosfolípido s para
camb io patológico centra l asociado con la enfe rmedad de Alzheimer fa bricar cantidades adecuad as de membran a o si tuviese demasiado
es la acumu la ción cerebral de las placas am iloides que contiene colesterol, de modo que se form aran grandes cristales que dañaran
agregados de un péptido pequeño (q ue contiene 42 residuos) llama- las estructuras ce lulares. Las células detec tan las cantidades relativas
do Ab_,2• Este péptido deri va por escisión proteolítica de la proteína de colesterol y fo sfolípido s de sus membranas; responden ajustando
precursora am iloide (PPA ), un a proteína de la superficie celular tran s- las tasas de biosíntes is de colestero l e impo rtan de m odo tal que el
mem brana de fu nción aún misteriosa expresada por las neuronas. cociente colesterol: fos folípid os se mantenga dentro de un ran go de-
Al igual que la pro teína Notch, la PPA sufre un a escisión extrace- sea ble estrech o. La proteóli sis regulada den tro de la membrana, que
lular y una esc isión intramembrana (Fig. 16-36 ). En pr imer luga r, el ocurre en la vía Notch, tambi én desempeña un papel im portante en
do mi nio extracel ular es escindido en uno o dos siti os en el domin io es ta respu esta celular a los niveles de colestero l alterados.
extracelular: por ADAM 10 (con frecuen cia llamada colec tivamente Co mo ap re ndimos en el Ca pít u lo 14 , la lipoproteín a de bajo
secretasa-a) o por otra pro teasa de la matriz llamada secretasa-~ . En densid ad (LDL) es rica en co lesterol y fun cion a transp ort ando este
cada caso, la secretasa -y cataliza luego una segunda escisi ón en un lípido a t ra vés del apara to circ ul ato rio ac uoso (véase la Fig. 1,1-27 ).
sitio único intra membrana y libera el mismo dominio citosólico PPA Ta nto la vía biosintética del colestero l ( véase la Fi g. J 0 -2 (1 ) com o
pero diferentes péptidos pequeños, dependiendo de cuál sitio cel ular los niveles de receptores celulares de la LDL qu e med ia n la capta -
fue cortado inic ialmente. La vía iniciada por la secretasa-a genera un ci ón de LDL a la célul a están regul ados en men os cua ndo los niveles
péptido de 26 res iduos que en apariencia no daña. Por el con trario, la de colesterol ce lu lar so n los adecuados. Dado que la LDL se imp or -

762 CAPITULO 16 • Vías de seña lización que controla n la expresión génica

 t,i .i 1.,~ tl·lu l,t~ vio l' i1d1, ri lo., b 111cdi:ida por recep tor (véase la l·i¡.;. L i (in 16.2). La in teracción de los factores de transcripción dependientes

11 111). un d1·., lcnw l'll l'I nt'1111rro de rccl· ptorc~ de Ll)L co nd uce a del colesterol llamados proteínas d.e unión a SRE (SREBP) con estos
¡,, ¡,ni• ort.11 i611 u: lulur dis1ni11u ida de coles tero l. Ta nto la biosfnte - elementos de respuesta modula la expresión de los genes diana. ¿De
.,is dt• rolrstrrol como su imponoc ión cs tán reg uladas a nivel de la qu é manera estas células detectan cuán to colesterol tien en )' cómo esta
tr,, ns,·ripción ¡.(énii.:a . l'or ejemplo, cuand o las células en cu lti vo de "señal" se usa para cont rolar el nivel de las SREBP en el núcleo )' en la
tdi do en c1·c~i 111ien to qu e req uie ren nu eva membra na para la divi- expresión de los genes? La vía mediada por l.as SREBP comienza en las
si6n s11 strnida se incuban con uno fue nte extern a de colesterol, por membranas del retículo endopl.asmático (RE) e incl ure al menos otras
~jrniplo l.1 1.1 >1 . :ii'tnc.lidn al medi o de cultivo, el nive l de ac tividad de dos proteínas además de las SREBP.
In 11MC -Co/\ rccluc t:1s0, la enzi ma que co ntrola la velocidad en la Cuando las cél ulas tienen concentraciones adecuadas de coles-
hiosí nt1:sb de coles terol, se su prime, mie ntras que la ac tividad de la terol , las SREBP se encuen tran en la membrana del RE fo rmando
n(il:wlcs tcrol aci l trnnsfernsa (/\CKf) , qu e co nvierte el colesterol a un complejo con la SCAP (la proteína que activa la escisión de la
¡,1 forma de almoce nnmic nto es terificada , aumenta. Asf, la energía no SREBP ), la insig-1 (o su homóloga cercana, la insig-2 ) )' quizás otras
Sl' di:sperdicirt, y es to hace innecesa rio colesterol adicio nal y se log ra proteínas (Fíg. J6-37a). La SREB P tiene tres dominios distin tos: un
la homcostasis de l co les tero l. domi nio ci tosólíco N-terminal, que contiene un motivo de un ión
Los genes cuy;i expresi ón está controlada por el nivel de esteroles, al DNA básico hélice-bucle-hélice (bHLH ) (véase la Fig. 7- 29) que
tall!s como el colesterol, con frec uencia co ntienen un o o más elemenl'Os fu nciona como un facto r de transcripción cuando se lo escinde del
rcg11lrulores de esteroles (SRE), o de diez pa res de bases o hemisitios SRE resto de la SREBP; un dominio central de anclaje a la membrana que
en sus promotores. ( Es tos SRE difi eren de los elementos respondedo- con tiene dos hélices a. transmembrana y un dominio regulador ci-
res del suero, de su nomb re en inglés seru m responder elemen ts, que tosólico (-terminal, que interactúa con el dominio regulador de la
controlan muchos ge nes de respues ta temprana analizados en la Sec- SREBP. La SCAP tiene ocho hélices a transmembrana )' un dominio

(a ) Colesterol alto (b) Colesterol bajo ----+

Al
'
HO
, '¿
) () '

, H
Colesterol
Jé'~~ núcleo

HO 'f¡ S' Bmtacóón '

r ' ~ ( 'Qr\\.r'
SREB P
de la
vesícula
~ !lfilii-. -¡:KHS
.,
~
1
A~ ,. ?

Transporte
SCAP vesicular

..._,

' Sec24
~- ~

lnsig-1(2)

í
¡ •
(

'i .)

~~~
. r
HO ~:: -~1 OH
Luz del RE
-r.~
- ~ J
.
C1tosol
Luz del RE ¿:::_z...,- Cit osol

· " de la SCAP que detecta esterol, lo cual desencadena un cambio de conforr11ac1 6'1
FIGURA 16-37 Control sensible al colesterol de la act1vacion ..
controlado por la awon inverso que disocia el SCAP de insig -1 (2) y capacita a SCAP para que se una
SREBP. El depósito intracelular de colestero ~s
1
bra na loca lizadas a Sec24, una subu nidad del complejo COPII (véase la F1g 14-8). Es to inici a el
combinada de insig- 1(2) y SCAP. ambas prote1nas transmem b 2 6 de movimien to del complejo SCAP-SREBP al complejo de Golgi por tran sporte
den en la mem ra na ·
en la membra na del RE La s hélices que se expan vesicu lar. En el Golgi, la escisión secuencial de SREBP por las proteasa s del sitio
· domin io que une estero 1es Y
SCAP (anaran1ad a con lineas negra s) form an un . de colesterol 1 y del sitio 2 (S 1P. S2P) libera el dominio N-term inal bH LH de la SREBP Después
P (a) Cua ndo 1os n1ve1es
un segmento C-terrn1nal se une a la SREB · . d de que este dominio liberado, llamado SREBP nuclear (nSREBP), se transloca al
,on elevados tal como cua ndo el colestero 1d eI RE excede 5 por ciento e núcleo, controla la transcripción de los genes que cont ienen elementos que
· d e detecta colestero 1en e1
los lip1do, totales del RE. este se une al om 11110 qu
·
. d ·n·o regu lan los esteroles (SRE) en los promotore s !Adapt ado de A Aadhakrishnan c006. e,
f oón que permite que e1 om1 1
'>CAP y desencadena un cambio de con orma le SCAP-SREBP en la Merab. 8 451 y M Brown y J Golds1e,n. 2009. J L,p,d Res SO SIS l
O
N IPrm,nal de SCAP se una a insi g- 1(2). Y ancla el comp J d. . del domin io
rr,,,mbr~na dPI RE (b) A ba¡os niveles de colesterol. es te se ,socia

16.6 Vía s de señalización controlada s por la escisión proteica: Notch/ Delta, SREB P 763
 . de ateroescl erosis, la causa principal de los
Dado que el nesgo . .
nte proporc1 0nal a los mveles plasmático s
· · , · d l d
c1toso l11;0 C-term111al gran e regu a or.
mem b rnna d e Ia SCAP 1,0
Cin co de las hélices o: .trans
r. rman un do minio que
·
detecta esterol
.
similar
-
íi .
infa rtos , es d1 rectarne
de coles tero 1 LD
.
L (el llamado colestero l malo ) e mversam ente propor-
. • cen t ra¡ d e sa¡u d pu, bl ica ' h
CoA reductasa ( Fig. 16-3 7a; véase la Secc ión DL un obJet1vo
,11 presen te en Ia HMG - cional al del colestero 1 dH los' niveles de colestero l LDL y elevar los dea
ltl..l ). Cuando el domi nio que detecta es terol de la SCAP se un ~ al_co- sido lograr el descenso e xitosos para controla r el coC1ente •
, , LDL:HDL
lcsterol, la proteína también se une a la insig-1 (2). Cuando la 111s1g- l HDL. Los farmacos mas e .
rovocan reducc10 nes en la LDL plasmátic a
(2) está fuerte mente un ida al compl ejo SCAP-colesterol, bloquea la .
son las estatmas , que P pítulo 10, estos farmaco , ·
unió n de la SCAP a la subunida d de la proteína de cubierta Sec24 de . e
e1 ª
s
.
se
.
unen a la HMG-
Como analizam os en
las vesícula s COPII, y evita así la incorpor ación del complejo SCAP- . h 'b de modo directo su act1v1dad; por lo tanto '
CoA reductasa e m I en .
SREBP a las vesíc ulas de transpor te del RE al Golgi (véase el Ca p. 14). . , • d colestero l y de los depósito s de. colesterol .
reducen la b1osmtes1s e
Esto ocurre cuan do las concentr aciones de colestero l en la membra na , . . . d la SREBP en respuest a a este vac1am1ento de
hepat1co . La act1vac1 6 n e .
del RE exceden el So/o de los lípidos totales de la membra na del RE. mento de la síntesis de la HMG-C oA reduc-
colestero 1 promuev e el au . . . ,
Así, la unión dependie nte de colestero l de la insig al complejo SCAP- Aquí es de máxuna importa ncia el numero
tasa y del receptor d e LDL • ,
colesterol-SREBP atrapa ese complejo en el RE. de receptor es hepático s de LDL, que media la
resu l tante aumen t a do
El colesterol un ido a la SCAP se libera cuando los niveles de co- · ·, mentada de colestero l LDL desde la sangre y así el
1mportac10n au
lesterol celular caen por debajo del 5% de los lípidos del RE, un valor descenso de nivel de colestero l LDL en la circulac ión. Por lo tanto, las
que refleja los niveles de colesterol celular totales. En consecue ncia, estatinas pueden inhibir la ateroesc lerosis Y lo~ i~fart~s por mecanis-
la insig- 1 (2 ) ya no se une a la SCAP libre de colesterol y el complejo mos independ ientes de su inhibició n sobre la b10smtes1s del colesterol ,
SCAP-SREBP se mueve desde el RE al aparato de Golgi a través de las
pero estos mecanism os no se compren den bien. ■
vesíc ula s COPII (Fig. 16-37b). En el Golgi, la SREBP es escindida de
modo secuencial en dos sitios por dos proteasas unidas a la membra-
na, la SI P y 52P; esta última es un ejemplo adicional de proteólis is re-
gulada dentro de la membra na. La segunda escisión en el sitio 2 libe-
ra el dominio N -termina l que contiene bHLH al interior del citosol. CONCEPTOS CLAVE DE LA SECCI ÓN 16.6
Este fragment o, llamado nSREBP (SREBP nuclear), se transloca rápi-
damente al núcleo. Allí, activa genes de transcrip ción que contiene
Vías de señaliz ación contro ladas por la escisión
elemento s reguladores de los esteroles (SRE) en sus promoto res, como proteica: Notch/ Delta, SREBP
aq uellos que codifica n el receptor de LDL y la HMG -CoA reductasa . • Muchos factores de crecimie nto importa ntes y otras proteína s de se-
Así, una dismi nución del colesterol celular por la activació n de la vía
ñalización, como los EGF, son sintetiza dos como proteína s transmem -
insig- 1 (2)/SCAP /SREBP desencad ena la expresión de los genes que
brana; la escisión regulada de los precurso res cerca de la membra na
cod ifican proteínas que, a la vez, importan colesterol a la célula ( el
plasmátic a por miembro s de la familia de las metalop roteasas de la
recepto r LDL) y si ntetizan colesterol a partir de pequeñas molécula s
matriz (MMP) libera la molécula activa al espacio extracelu lar para
p recu rsoras (H MG -CoA reductasa ).
emitir señales a células distantes .
Después de la escisión de la SREBP en el Golgi, en aparienci a la
SCAP se recicl a al RE, donde puede interactu ar con la insig-1 (2) y • Al unirse a su ligando Delta sobre la superfic ie de una célula adya-
otra molécula de SREBP intacta. El alto nivel de transcrip ción de ge- ce~te, la proteína receptora Notch sufre dos escisione s proteolít icas
nes controlad os por los SRE req uiere la generac ión en curso de nue- (vease la Fig. ! 6-35 ). Luego, el segment o citosólic o Notch liberado se
vos nSRE BP porque se degrada n bastante rápido por la vía proteasó - t · ·, ·
transloca al núcleo. y.modula¡ a ranscnpc 1on de los genes diana críti-
mica mediada por ubicuitin a (véase el Cap. 3). La rápida generaci ón cos en la determm ac1ón del destino celular durante el desarroll o.
y degradac ión de l nSREBP ayuda a las células a responde r velozmen te
. La escisión de. .los precurso res unidos a la memb rana d e l os m1.em -
a los cambi os en los niveles de colesterol intracelular. _ . .
b ros d e 1a familia EGF de mol ' 1 d e senahzac 16n es catalizad a por
En ciertas circunsta ncias (p. ej ., durante el crecimie nto celular) , ecu as
1as meta 1oproteasa s ADAM La .. , .
las células necesitan un suminist ro aumenta do de todos los lípidos · escision madecua da de estos precurso-
res pue d e resultar en la prolifera .6 1
esenciales de la membra na y de sus ácidos grasos precurso res (re- te llevar al cánc I h . ci n ce ular anormal y, potencia lmen-
gulación coordina da) . Pero en ocasione s las células necesitan una ' er, a ipertrofi a cardíaca y otras enferme dades.
cantidad mayor de algunos lípidos como el colestero l para sintetiza r • La secretasa-g, que cataliza la r . . .
ho rmonas esteroides que otros como los fosfolípidos (regulaci ón de Notch partici·pa t b ' , P oteólJSJs mtrame mbrana reg ulada
' am 1en en la · ·
diferencial ). ¿Cómo se logra esta producci ón diferencial? Los ma- amiloide (PPA) en é 'd esC1si6 n de la proteína precurso ra
un p ph o que for ma P 1acas caracterí sticas de la
míferos expresan tres isoforma s conocida s de SREBP: la SREBP-l a, enfermed ad de Alzh . ( ,
e1mer vease la Fig. 16 -36 ).
la SR~BP-1 c, que son generada s de RNA cortados y empalma dos al-
ternativa mente, producid os a partir del mismo gen, y la SREBP-2 • En la vía insig-1(2 )/SCAP/ SRE
' nSREBP es liberado desd BP, el factor de transcrip ción activo
' ·
codificada po r un gen d 1st111to. En conjunto , estos factores de trans - I
que tramemb rana cuand e ª m embrana del Golgi por proteólisis in -
cripció n regulados por RIP controla n la expresió n de proteína s o e I co1esterol ce! u 1ar es b ª Jº
. , . 7)
Luego estimula 1 . ( vease la f 1g. 16-3 ·
~e~ulan la di sponibilidad no solo del colesterol, sino también de los ' a exp resión de lo .
funciona n en la biosí t . d s genes que codifican proteínas que
ac ,d,os grasos, los triglicéridos y fosfolípidos sintetiza dos a partir de n es1s el coleste 1 ( p . eJ.., H MG -CoA reductasa )
Y la importac ión celul d ro
los ac1 d?s grasos. En las células de mamífero , la SREBP-1 a y la SRE- ·
ar e colestero l ( p . eJ., d 1
. , .d os
d e 1os ac1 colesterol es alto la SREBP receptor LDL). Cuan o e
BP-1 c eJerce n un a mayor influencia en el met a b o 11smo ' queda reten'd 1 a en 1a membra na del RE)' ·
e
grasos que sobre ·
el metaboli smo del colest ero 1, y 1o mverso resu 1ta 1orma un complejo c . .
· on ms1g-l (2) y SCA P.
ci erto pa ra 1a SREBP-2 .

764 CAPITULO 16 • Vías de señaliza ció n que controlan la expresión génica

 celulares
16.1 1ntegración de las respuestas
Glu cooo Voolc ulrrn dr, u1,¡,rrJ1,lt, ,,
a múltiples vías de señalización j GLUT2
quo con ll<,non lr11a1 ll11 11

En esta sección, c~nsidera mos el modo en que interactúa n múltip le~

'as de transducción
., de las señales. Nos en focamos no so ¡o en un
Vl Glu cooa
de los contro lados por múlti ples vías de be na- •
S
istema de la mmada . r ADP
lización (la regu 1ación de las necesi dades del organismo por 1os me- llJ
, .
tabolitos glucosa y ac1dos grasos) , En prim er térmi'no , con s1'd eram os ª !'--•A!I' Cólulp fJ <Jol lsloto ~ -
varias respu~stas celulares centrales a las varí aciones en la dem anda Plruvato
s en e1 contra 1 d e ppncreótlco ) _
. clave gl.ucosa. Luego, nos enfoca mo ,
del metabol1to
c0 2,

=.
la producción de un t1~0 de célula en el organismo adul to qu e in - ,, 40 mV
crementa su masa y numero casi ili mitadamente , célu¡a ad'1posa
la
0 almacenadora de grasa, Las respuestas celulares a los ca mbios de
otros nutrientes y al oxígeno que
alteraciones de la expresión gé nica
se refleJ·a
están
n en
cubiertas
gra
en
n med'd I a en 1as
, 1o 7 .
el ('~ap1tu
r
K' Canales de Ca 21
senslbles o voltajo
Canales de K~
se nsibl es a ATP
La insulina y el glucagón trabajan juntos para
mantener un nivel estable de glucosa en la sangre FIGURA 16-38 Secreción de Insulina en respuesta a un aumento en la
glucosa sangufnea. Lc1 cnirada de la gluco~a a 1,,s d•lul<J'> p,,nur·.'J 1lc,,~11 r·<,1.',
Duran te la vida diaria norm al, el mantenimient o de las concentracio- mediada por el I rnnsponador de glucosa GLU I') (1 ). Dado qur· I,, K pr1r,, 1.,
nes normales de glucosa en la sangre depende del equi lib rio entre dos glucosa del GLUT2 es ~ 20 mM, un Incremento C'n la glucosa cx tro~~lul,.r cJc·•,rJr ·
hormonas peptídicas, la insulina y el glucagón, que son sintetizadas en 5 rnM, caracrerlstlco drl estado de ayuno, provorrJ un r1urnr•íl ló riropr,rclon,,1
diferentes células de los islotes pancreáticos y provocan distin tas res- en la velocidad de en trada de glucosa (véase la 11<¡. 11 ~). l a rnrwer~lór, d!é'
glucosa a plruva10 está asfacelerada, lo qur: d;i corno resultado un lncrc·rnc•1,10
puestas celulares. La insulina, que contien e dos cadenas polipeptídicas en la concentración de /ITP en el cltosol (7.) . La unión dr /11 r ;, lo~C<Jll.,lr•; dr·
vinculadas por puentes disulfuro, es sintetizada por las células p de los K' sensibles a /ITP cierra es tos canales (3), y reduce de es te' modo c·I cílujo
islotes (véanse las Fi gs, 14-23 y 14-24); el glucagón, un pépt ido mono- de Iones K' desde la célula. La pequeña despolarlwclón resul1an1<' dr· l. 1
mérico, es producido por las células de los islotes a. La insulin a redu ce rnernbrana plasmática (4) desencadena lr1 apertura de IO!, ca nulc·~ de ( d''
el nivel de glucosa en sangre, mien tras qu e el glucagón incrementa la sensibles al voltaje (5). El lníl ujo de Iones Ca'' lncrernema la rnnw ntrdr lón
gl ucosa sanguínea. La disponibilidad de glucosa en sangre está regul ada de Ca" en el cl tosol, lo que desencadena la íuslón dr• vcsfculrJs dC' sccrr <Ión
que con1 ienen Insuli na con la rncmbranr1 plasmá llra y l<J •,rcrcrló1, dr e,,¡,,
durante períodos de ab undancia (después de una in gesta) o de escasez hormona (6). (M.ip1,,dode J r1 HrnqtJln, 1r>rx,./J/n/Jf'/• •1 49 11~11
(después del ayu no), lo que ajusta las concentraciones de in sulin a y
glucagón en la sangre.
Después de una comida, cuando la gl ucosa san guínea aum enta por
encima de su ni vel normal de 5 mM, las células Pdel páncreas respon-
den al au mento de la glu cosa (y de los aminoácidos) libe rando in sulin a na res ulta en la activac ión neta a corto plaw de la glucógeno sin tflsn y la
sín tesis de glucógeno. La insulina ac túa tambié n sobre los hepatocitos
a la sangre ( · J (, -3 8). La insulina liberada ci rcula en la sa ngre y se
(células del higad o) para in hibir la sín tesis de glucosa a parti r de mo lé-
une a los receptores de insulina presentes en muchos tipos diferentes
cu las más pequeñas, ta les como el lactato y el aceta to, y para aum en tar
de células, incl uidas las células musc ulares y los adipocitos. El recepto r
la sí ntesis de glucógeno a partir de la glu cosa. Mu chos de estos efecto~
de insulin a, recep tor tirosi ncinasa, acti va varias vías de transducción de
se man ifiestan a nivel de la transcripción gén ica , dado que In señn liza -
las señales, que incl uyen la que conduce a la activació n de la protei nci -
ción po r insu lina reduce la expresión de los genes cuyas en zimas codi -
nasa B (PKB; véase la Fig. 16-26), En este caso, las princi pales acciones
ficadas simula n la síntesis de glucosa a partir ele metabolit os pequc,, o~.
de estas vías de señalización se manifiestan en minutos. La PKB ac tiva
como el ác ido pirúvico. El efecto neto de tod as estns acciones es h,H.er
fosforila una proteí na diana especifica que entonces desencadena la rá-
descender nuevamente la glucosa en sangre a las con ccntracionc~ de
pida fusión de vesículas in tracelulares que contienen el transportador
ayuno de alrededor de 5 mM , a la vez que se almacena el exceso de glu
de glucosa GLUT4 con la membrana plasmáti ca ( Fig. 16-39). El incre-
cosa intracelular en forma de glucógeno para su uso futuro.
mento de I o veces, inmediato, que resulta en el número de moléculas
A medida que el nive l de glucosa sanguineo cae , la sccrrciún de
GLUT4 de la superficie cel ular incrementa el inílujo de glucosa propor-
insulina y los nive les en sa ngre tambi én lo hacen, y lo~ rtct pton.: \ de
cionalmente y dismin uye la glu cemia. in sulina ya no se activan de modo tan intenso. En lm mú,<..ulo, , l.1
La estim ulación por insulina de las célu las musculares aumenta en
res pu es ta es que la GLUT4 de la superficie cc lul.,r ~e int nn~!ila po r
el lapso de minutos la conversión de glucosa a glucógeno, Yla PKB, ac- cndoc itosi~ y di sminuye el nivel de CLUT4 de In su pcrfilic u.: lul.11 y,
tivada corriente abaj o del receptor de insulin a, nu evamente desempeña asi, la importaci ón de glu cma . Si el nivel de glucma ~a11g11fnl·,1 ,,ic·
un papel cruc ial. La PKB acti va fo sfo rila la glucóge no sin tasa cinasa J por debajo de aproximadamente 5 mM , por ejemplo por .1L1ivid.1<I
íCSK3, la mis ma enzim a que fu ncio na en las vías Wnt Y Hh) . A~nquc musc ula r repentina , la ~ec rec i()n J e insulina reduc id. , de,dc l., ~,('
la CSK de la~ célu las no estimu ladas por insu lin a puede fosfo ril ar la lulas pancreáti ca~~ ind uce a la~ célula~ panc rd l ic " a n inrn:111e11l ,11
glucógeno sinta~a e inhi bir de e~te modo su acti vidad, en el múscu lo ~u ~ccrcción de glucagón a la sa ngre. C:0111 0 ocu rre ¡,on el 1Tu·p1 1
11

tratad o con im ulina la G'lK 3 fo ~forilada por la PKB no puede fosfo ril ar de ad rena lin a, el recep tor de glu ca f(6n, prc~r·11tt· pri irn11ÍJ111 r 111c en
la glucógeno sinta~a; así, la activación de la PK B e~tim ulada por insuli -

16.7 lntPgraclón de las respuestas celulares a múltiple~ vf;n dP ~rr\a ll1aclón 765
 (a)

Basal Estimulada
por ins ulina

Ma rca de epít opo

sec uestrada dent ro
de la cé lula

Imá genes resultantes

verde : GLUT4 tota l,
GLUT4 GLUT4 rojo : GLUT4 de
(b) total de supe rficie superficie

Cont rol

Trat ada s
con insuli na

FIGURA EXPERIMENTAL 16-39 La esti mulación de insulina de las o tratados con insul ina (abajo), se hicieron reaccionar con un anticuerpo
células grasas induce la translocación de GLUT4 desde las vesículas íluorescente rojo an tiepítopo, luego se fijaron y se vi eron con microscopia de
intracelulares a la membrana plasmática. (a) Esquematización del íluorescencia confocal. En au sencia de insulina, vi rtualmente toda la GLUT4
experimento: células adiposas en cultivo fueron diseñadas por ingeniería está en las membrana s intracelulares y no se encuentra conectada con la
genética para expresar una proteína quimérica cuyo extremo N-terminal membrana plasmática; hay poca tinción su perficial. La insulina desencadena la
correspondiera a la secuencia de GLUT4, seguido de la secuencia completa fusión de las membranas que contienen GLUT4 con la mem brana plasmática.
de la PFV; insertada en un bucle extracelular de GLUT4 entre las hélices 1 y movilizando la GLUT4 a la superficie celular y permi tiéndole que transporte
2 se encuentra un epítopo "myc" reconocido por un anticuerpo monoclonal glucosa desde la sa ngre a la célula. Las cél ulas musculares también contienen
antiepítopo que íluoresce en el rojo, añadido al exterior de la célula. As í, la transportadores de GLUT4 que responden a la insu lina. Las ílechas resaltan
íluorescencia verde controla la canti dad celular total de GLUT4, mientras la ,GLUT4 presente en la membrana plasmática; N indica la posición de los
que la roja mide solo la GLUT4 de superficie. (b) Los ad ipocitos cultivados nucleos. (Cortesía de J. Bogan; véase C. Yu y cols , 2007, J. e,ol. Chem 282:77! 0 ¡
que expresan esta proteína GLUT4 recombinante fueron no trata dos (arriba)

los hepatocitos, está acoplado a la proteína G0 5, cuya proteína efec- convierten la glucosa !-fosfato a glucosa, que se libera a la sangre )'
tora es la adenilciclasa . La estimulación por glucagón de las células eleva nuevamente la gl ucosa sa nguínea a su nivel de ayuno normal.
hepáti cas induce un incremento en el cAM P, lo qu e conduce a la
activación de la protei ncinasa A, que inhibe la síntesis de glucógeno
y promueve la glucogenólisis, lo cual lleva a la form ac ió n de glu -
i~j Desafortunadamente, estos sistemas de control poderosos e in-
tn cados en ocasiones fallan y provocan enfermedades graves
cosa !-fosfato (véanse las Figs. 15 -3la y 15 -38b). Los hepa tocitos que incluso ponen en peligro la vida. La diabetes mellitus resulta de

766 CAPITULO 16 • Vías de seña liza ci ón que controlan la expresión génica

 dcticien cia en la canti dad de insulina li berada desde el páncreas la diferenciació n de los adi pocitos. Como ev idenc ia de ello, la expresión
un,1 _ e·n . l crecientes . d e g1ucosa en sang re (t ipo J) de del PPARy recombin an te en muchas líneas de fi broblastos es suficiente
nive es
,·n rc,pu , , J .los
0
. ,
.1 ·minucJOn en la capacidad de las celul as m usculares y grasas para desencade nar su diferencia ción a ad ipocitos. Por el contrario, el
unJ J ' • • • •
silenciam iento ( knocking do w n ) del gen pa ra PPARy en preadipocitos
ondera la insulina (tipo II ). En ambos tipos, la regulación de
de res P . .
oJ ucemia es deficitaria , lo que con duce a co ncentraci ones de glu- evita po r completo su diferencia ción a adipoci tos. La mayor parte de
lJ' . 1 d (h '
,osa sanguínea per~istent emente e eva as 1pergluce mia ) y otras las hormonas que promueve n la adipogéne sis, tales com o la ins ulina,
, ompl icaciones posi~l es s1 no se la tra ta. La diabetes tipo I es causada lo hacen al menos parcialme nte activando la expresión del PPARy. A
or un proceso autornm un e que destruye las células 13 productor as su vez, este se une a los promotor es de la mayoría de los genes espe-
~<' insulina en el páncreas. También llamada diabetes insulinod
epen - cíficos de los adipocitos e induce su expresión , incluyend o a aquellos
diente, esta fo rma de enfermed ad en general responde al tratamien to que codifican proteínas necesarias en la vía de señalizaci ón de la in-
con insulina . La mayo ría de los estado unidenses con diabetes melli - sulina, como el receptor de esta hormona y GLUT4. Al igual que otros
tus tienen la forma tipo II , o diabetes no insulinod ependien te. Mien- miembros de la superfamilia de los receptores nucleares , tales como
tras que la causa subyacen te de esta fo rm a de la enfermed ad no se los receptores de hormonas esteroides (véase el Ca p. 7), q ue se activan
comprende bien, la ob esidad se co rrelaciona co n un enorme incre- cuando se unen a su ligando, se piensa que el PPARg también se une
mento en la incidencia de diabetes. Se cree que la identifica ción adi- a un ligando, probablem ente un derivado oxidado de un ácido graso.
cional de las vías de señalización q ue cont rolan el metabolis mo en- Otro factor de transcripc ión, el C/EBPa, es inducido durante la
ergético proporcio na rá m ayor conocim iento acerca de la fisiopa- diferenciación de los adipocitos y también induce en forma directa
rología de la diabetes y se espera q ue conduzca a nuevos métodos muchos de sus genes. Es important e que el C/EBPa induzca la expre-
para prevenirla y trata rla. ■ sión del gen de PPARy y que este induzca la expresión del C/EBPa, ya
que esto lleva a un rápido incremen to de ambas proteínas dura n te los
primeros dos días de la diferenciación. El PPARy, junto con el C/EBPa,
induce la expresión de todos los genes requerido s para la diferencia ción
Múltiples vías d e tra nsducc ión de las señales
de los preadipocitos a células grasas maduras.
interactúan para regular la diferen ciación de los
Muchas proteínas de señalización, como Wnt y TGF-¡3, se oponen
adipocitos a través d el PPARy, el regulad or maestro a la acción de la insulina y evitan la diferenciación de los preadipoc itos
de la transcri pción a adipocitos. Como muestra la Figura 16-40, los factores de transcrip-
Los adipocitos blancos, comúnme nte llamados "células grasas'; son los ción activados por receptores para estas hormonas evitan la expresión
principales depósitos para almacena r las grasas; los adipocitos maduros del gen de PPARy, lo que bloquea en parte la capacidad del C/EBPa de
tienen unos pocos glóbulos de triglicérid os que ocupan la mayor parte inducir la expresión del gen PPARy. Así, múltiples señales extracelul a-
de la célula. Los adipocitos son también células endocrina s y secretan res actúan de modo concertad o para regular la adipogéne sis, y las vías
varias proteínas de señalización q ue afectan las funciones metabólicas de transducc ión de la señal activadas por ellas se intercepta n en la re-
del músculo, el hígado y otros órganos. Los adipocitos son el único tipo gulación de la expresión de un gen "maestro" clave que codifica PPARy.
cel ular en el o rga nismo qu e p uede in crementar tanto en número como
en tamaño cas i de modo ilim itado. Los lectores de cada país no nece-
sitan recordar que la obesi dad - la so breabund ancia de adipocito s- es
un problema de salud pública creciente y un factor de riesgo central no
solo para la diabetes, sino también para las enfermed ades cardiovascu- CONCEPTOS CLAVE DE LA SECCIÓN 16.7
Iares como los infartos y los accidentes cerebrovasculares y cierto tipo
de cánceres. Por Jo tanto, se están destinand o esfuerzos importantes Integrac ión de las respues tas celulares a múltipl e s
para comprend er los fa ctores que regulan la fo rmación de las células vías de señaliza ción
grasas con la esperanza de desarrolla r fá rmacos que puedan lentificar · Un increment o en la glucosa sanguínea estimula la liberación de
0 revertir este proceso. insulina desde las células pancreáticas 13 (véase la Fig. 16-38 ). La unió n
Como analizarem os en el Capítulo 21 , varios tipos de células ma- posterior de insulina a su receptor en las células musculares y los ad i-
dre residen en los verte brados y se emplean para generar tipos especí- pocitos conduce a la activación de la proteincin asa B, que promueve
ficos de células diferencia das . La célula m adre mesenqui matosa reside la captación de glucosa y la síntesis de glucógeno, lo que resulta en un
en la médula ósea y en otros órganos y origina células progenito ras que, descenso de la glucemia (véase la Fig. 16-39 ).
a su vez, pueden formar adipocito s, células productoras de cartílago
u osteoblastos formado res de hueso. El progeni tor de los adipocitos, • Un descenso de la glucemia estimula la liberación de glucagó n desde
llamado preadipocito, ha perdido el potencial de diferenciarse a otros las células pancreáticas a . La unión de glucagó n a su receptor acopla-
tipos celulares. Cuando se ¡0 trata con hormo nas específicas, los prea- do a proteínas G en las células del hígado pro mueve la glucogenó lisis
dipocicos se diferencia n de modo terminal; adquieren pro teínas qu e por la cascada de cinasa desencade nada por cAMP (simila r a la esti -
son necesarias para el transporte y síntesis de lípidos, la respuesta a la mulación por adrenalina en condicion es de estrés) y un incremen to
d' · " · en la gl ucemia (véanse las Figs. l 5-3 1a y 15-38b ).
. u}'líla y la secreción de proteínas específicas de los a 1poc1tos. vanas
ins
·e
lineas de preadipocitos en cul tivo p ueden d11erenoa ' ·
· rse a ad 1poc1tos y
enzimas • El PPARy, un miem bro de la superfam ilia de receptores nucleares,
t'Xpresar mRNA y proteínas específico s de estos, tales como las
es el regulador transcripc io nal maestro de la di ferenciació n de los
necesarias para la síntesis de triglicérid os. adipocitos.
El factor de transcripc ión PPAR'y, un miembro de la superfarni lia
de re ceptores nucleares, es el regulador maestro d e 1a transcnpc , en
. 1.on

16.7 Integración de las respuestas celu lares a múlti ples vías de seña lización 767
 (c) Inh ibe la ind ~cción
(a) Promueve la inducción (b) Inhibe la inducción
de los genes adiposos
de los genes adi posos de los genes adiposos
() TGF-~

receptor

.i ~ 1
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§ cinasa ~ ¡
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regu a~o~ras
' - - - - + \_
-~
¿::;,
~
Inducción de los
':~ genes ad iposos
S~ u::Cias~
regu a oras ~

~--------
FIGURA 16-40 Múltiples vias de la transducción de las señales activación de la proteincinasa B (PKB) corriente abajo del receptor IGFl de
interactúan para regular la diferenciación de los adipocitos. El tirosina-cinasa e IRSl conduce a la represión de la expresión de Necdin; Necdin,
factor de tran scripción PPARy (óvalo púrpura) es el regulador maestro por modulación de otros factores de transcripción, de otro modo reprimiría
de la diferenciación de los adipocitos; junto con el C/EBPa, induce la la expresión del gen PPARy. La PKB también fosforila, y de este modo inactiva,
expresión de todos los genes necesarios para la diferenciación de los al factor de transcripción GATA2, que cuando está desfosforilado se une a la
preadipocitos a las células grasas maduras. Tanto PPARy como C/EBPa son proteína C/EBPa y evita que active la expresión del gen PPARg. Al inhibir dos
inducidos temprana mente en la adipogénesis; cada uno de ellos aumenta represores del gen PPARg, la insulina estimu la así la expresión de PPARg. (b)
la transcripción del gen del otro (una flecha al fina l de una línea significa Wnt y TGF-~ inhiben la adipogénesis al reducir la expresión del gen PPARg.
aumento de la expresión de los genes diana), lo que lleva a un rápido La señalización de Wnt desencadena la liberación de b-catenina desde un
incremento de la expresión de ambas proteínas durante los primeros dos días co_mplejo citoplasmático y la ~-catenina libre une el factor de transcripción TCF
de la diferenciación. Las señales provenientes de hormonas, como la insulina, (vease la F1g. 16-30). El TCF activo bloquea la expresión de los genes de PPARy
y factores de crecimiento, como Wnt y TGF-~. que activan o reprimen la Y C/EBPa probablemente uniéndose a sus secuencias regu ladoras. (c) Smad3,
adipogénesis, están integradas en el núcleo por los factores de tran scripción activado por la fosforilación después de la unión de TGF-~ a los receptores
que regulan (directa o indirectamente) la expresión de los genes de PPARy y tipos I y 11 de TGF-~ se une a la proteína CJEBPa y evita que active la expresión
C/EBPa. Una Tal final de una línea indica inhibición de la expresión del gen del gen PPARg. (Tomado de E. Rosen YO. MacDougald, 2006, Narure Rev. Mol. Celf. 810/. 7 885l
diana. (a) La insulina activa la adipogénesis por varias vías que conducen a la
activación de la expresión de PPARy, dos de las cuales se muestran aquí. La

· Las hormonas extracelulares como la insulina, que promueven la Perspectivas para el futuro
diferenciación de los adipocitos, inducen vías de transducción de las
seiiales que llevan a la producción aumentada del PPARy. Por el con- La confluencia de la genética, la bioquímica y la bio logía estructu·
trario, las proteínas de señalización tales como la Wn t y el TGF-~, que ral nos ha proporcionado un panorama cada vez más deta llado del
evitan la diferenciación de los preadipocitos, activan vías de señaliza- modo en q~e las señales son transm itidas desd e la superficie celula r
ción que evitan la expresión del gen PPARy (véase la Fig. 16-40). y transd~c1das a cambios en la conducta de las células. La multi -
tud de diferentes señales extracelulares, receptores para ell as y vías

768 CAPITULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 .
1ntra celula res de transducc ión de las señales cae n en un número
lativarnente peq ueño de clases y un logro central es comprender Palabras clave
re ué manera vías de señalizació n si milares co n frecuencia reg ul an
deq d. .
procesos celu!ar.es muy 1stintos. Por ~je mpl o, STAT5 activa con -
cascada de cinasa 735 protei na adaptadora 737
·uoios muy distintos de genes en las celulas precursoras eritroides
cilio primario 756 proteí na Ras 734
~espués de la estim ulación del receptor de la eritropoyetina que en
citocinas 721 proteínas plataforma 744
las células ep iteliales de las mamas después de la estimulación de la
constitutiva 749 Proteínas que unen
rolacti na. Supuestamente, la STAT5 se une a diferentes grupos de
p . .• diabetes mellitus 767 SRE (SREBP) 763
factores de transcnpc1on en estos y en otros tipos celulares, pero
dominio PTB (de unión a la proteincinasa B (PKB) 746
la naturaleza de estas proteínas y el modo en que colaboran para
fosfotirosina) 730 proteólisis intramembrana
induc ir patron es de expresión génica específicos de las células aún
dominios SH2 730 regulada (RIP) 761
no se ha descu biert o.
eritropoyetina (Epo) 728 receptores tirosincinasas
Por el contrario, con frecuencia la activación del mismo compo-
factor de crecimiento (RTK)723
nen te de transducción de las señales en la misma célula a través de
transformante P {TGF-P) 748 señal de localización
receptores distintos genera diferentes respuestas celulares. Un punto
familia de metaloproteasa nuclear (SLN) 749
de vista que se sostiene usualmente es que la duración de la activación
de la matriz (MMP) 760 Smad 749
de la MAP cinasa Y de otras vías de señalización afecta el patrón de
familia HER 726 vía de la cinasa Pl-3 745
expresión génica. Sin embargo, el modo en que esta especificidad está
fosfatasa PTEN 747 vía Hedgehog (Hh) 753
determinada si gue siendo una pregunta sobresaliente en el tema de
fosfoinosítidos 745 vía insig-1 (2)/SCAP/SREBP 764
transducción de las señales. Los estudios genéticos y moleculares en insulina 765 vía JAK/STAT 734
moscas, gusanos y ratones contribuirán a nuestra comprensión acer- labio de activación 724 vía NF-KB 752
ca de la interrelación entre los componentes de las distintas vías y los MAP cinasa 735 vía Notch/Delta 760
principi os regul adores subyacentes que controlan la especificidad en PPARy767 vía Wnt 752
los organismos m ulticelulares. presenilina 1 761
Los investigadores han determinado las estructuras tridimensio-
nales de varias pro teínas d e señalización durante los recientes años, lo
que permitió análisis más detallados de varias vías de transducción de
la señal. Por ejemplo, las est ructuras moleculares de diferentes cinasas
exhiben similitudes sorprendentes y variaciones de importancia que Revisión de los conceptos
les imparten característ icas de regulación novedosas. La actividad de l. Nombre tres características comunes a la activación de los receptores
varias cinasas, com o la Raf y la proteincinasa B (PKB), está controla- de citocina y los receptores tirosincinasa. Nombre una diferencia res-
da por dominios inh ibitorios, así como por otras múltiples fosforila- pecto de la actividad enzimática de estos receptores.
ciones catalizadas por ot ras varias ci nasas. Nuestra comprensión del
2. La eritropoyetina (Epo) es una hormona producida naturalmente en
modo en que la actividad de estas y otras cinasas están reguladas con el organismo en respuesta a bajos niveles de 0 en sangre. Los eventos
2
precisión pa ra sat isfacer las necesidades celulares requerirá estudios intracelulares que ocurren en respuesta a la unión de Epo a su recep-
adicionales estructu rales y de biología celular. tor de la superficie celular están bien caracterizados. ¿Qué molécula
Las anomalías en la transd ucci ón de las señales son la base de se transloca desde el citosol al núcleo después de que (a) JAK2 activa
muchas enfe rmed ades distintas, incluyendo la mayoría de los cán- STAT5 y (b) GRB2 se une al receptor de Epo? ¿Por qué algunos atletas
ceres y di versas afecciones inflamatorias . El conocimiento detalla- de resistencia empleaban Epo para aumentar su desempeño ("dopaje
do de las vías de señ al ización implicadas y de la estructura de sus con sangre") hasta que fue prohibido en muchos deportes?
compon en tes p ro teicos continuará proporcionando pistas mole-
3. Explique por qué la expresión de una mutante dominante negativa
culares importantes para el d iseño de tratamientos específicos. A
de JAK bloquea la vía de señalización de eritropoyetina (Epo) -citocina.
pesa r de la relación est ructural cercana entre diferentes moléculas
4. Aunque GRB2 carece de actividad enzimática intrínseca, es un com -
de señalización (p. ej., ci n asas), estudios recientes su~iere~ q~e los
· h. · · ponente esencial de la vía de señalización del factor de crecimiento epi-
ID 1b1dores select ivos para su b c Iases esp ec'1ficas podnan d1senarse.
. · 1ia · 1, e1 receptor EGF ha sufrido dérmico (EGF) que activa la MAP cinasa. ¿Cuál es la función de GRB2?
En muchos tumores de ongen ep1te
. ¿Qué papel juegan los dominios SH2 y SH3 en la función de la GRB2?
una mut ac ión específica que aumenta su a ctivi d ad · Resulta nota -
. Muchas otras proteínas de señalización poseen domin ios SH2, ¿qué de-
61 e que un fárm aco consistente en una mo lécula pequeña (Iressa)
termina la especificidad de las interacciones SH2 con otras moléculas?
in hiba la actividad cin asa del receptor EG F mutante pero carezca
de efecto sobre el receptor EGF norma I 0 sobre otros receptores. 5. Una vez que una vía de señalización ac tivada ha generado los cam -
=• -·1, este fár maco hace ma. s lento e 1 crec1m · 1·e nto de los cánceres solo bios adecuados en la expresión del gen diana, la vía debe inactivarse.
. . . t . ular De otro modo, podrían resultar consecuencias patológicas, como se
en pacie ntes con esta mu tac1on par ic · De modo semejante , los
•
ant1cue rpos mo noclon ales o 1os recep t ore s decoy (proteínas solu- ejemplificó por la señalización persistente iniciada por el factor de
.
61 es que co ntienen . . d e um·ó n al ligando de un receptor crecimiento en muchos cánceres. Muchas vías de seña lización poseen
el dominio . .
y, de este modo, secuestran al ligando ) que evitan que las otocinas una retroalimentación negativa intrínseca mediante la cual un evento
proiníl amator ias como la IL-1 y el TNF-a se unan a sus receptores corriente abajo en una vía apaga un evento corriente arriba. Describa la
cogn ados est án empleándose ahora para tratar va rias en fe rmedades retroalimentación negativa que regule en menos señales inducidas por
(a) eritropoyeti na y (b) TGF-p.
infl am ator ias co m o la artritis.

Revisión de los conceptos 769

 6. Una mutación en la proteína Ras la hace constitutivamente activa fá rmaco úti l para tratar la enfer medad de. Alzheimer?
, ¿Qué Posib¡ es
e d ·os de este fá rmaco corn p l1canan su uso.1
(Rasº). ¿Qué es la activación constitutiva? ¿De qué manera la Ras cons- e1ectos sec un an ·
titutivamente activa promueve el cáncer? ¿Qué tipo de mutación to rna-
ría a las siguientes proteínas constitutivamente activas: (a) Smad3, (b)
MAP cinasa y (c) NF-ICB?
7. La enzima Stel l participa en varias vías de señalización de la MAP Análisis de los datos
cinasa en la levadura en brotación S. cerevisiae. ¿Cuál es el sustrato para
Stel 1 en la vía de señalización del factor de apareamiento? Cuando una l. G. Johnson y cols. han analizado la cascada de la MAP cinasa en la
levadura es estimulada por un facto r de apareamiento, ¿qué evita la in- . • 1a MEKK2 en las célul as de los mamíferos. Por una de-
cu al par t1c1pa
ducción de los osmolitos requeridos para la supervivencia en un medio tección sistemática hecha en un híbrido de dos levaduras (véase el Cap.
de alta fuerza osmótica dado que Stel l participa también en la vía de la 7), se encontró que la MEKK2 se uneª MEKS, que puede fosforilar una
MAP cinasa iniciada por alta osmolaridad? MAP cinasa. Para dilucidar la vía de señalización transducida por la
MEKK2 in vivo, se llevaron a cabo los siguientes estudios en las células
8. D~scr!ba los eventos necesarios para la activación completa de la
prote'.nc'.nasa B. Nombre dos efectos de la insulina mediados por la embrionarias de riñón humano (HEK293) en cultivo.
protemcmasa B en las células musculares. a. Las células HEK293 se transfectaron con un plásmido recombi-
9. Describa la función de la fosfatasa PTEN en la vía de señalización de
nante que codificaba MEKK2 marcado junto con un plásmido que co-
la cinasa PI-3. ¿Por qué una mutación con pérdida de Ja función en la dificaba MEKS O un vector control que no codificaba para una proteína
PTEN es promotora del cáncer? Prediga el efecto de la PTEN constitu- (falso). El MEKS recombinante se precipitó desde el extracto celular
tivamente activa en el crecimiento y supervivencia celular. por absorción mediante un anticuerpo específico. Luego, el material
inmunoprecipitado se resolvió mediante electroforesis en gel de polia-
10. La unión de la TGF-13 a sus receptores puede provocar una variedad
crilamida, se transfirió a una membrana y se lo examinó por Western
de re~pu~s~as en diferentes tipos celulares. Por ejemplo, la TGF-13 indu-
blotting con un anticuerpo que reconocía el MEKK2 marcado. Los re-
ce al inhib1dor del activador del plasminógeno en las células epiteliales
sultados se muestran en la parte (a) de la figura que está más abajo.
Ya inmunoglobulinas específicas de las células B. En ambos tipos celu-
¿Qué información acerca de la cascada MAP cinasa podemos aprender
lares, la Smad3 se activa. Dada la conservación de las vías de señaliza-
acerca de este experimento? ¿Los datos de la parte (a) de la figura prue-
ción, ¿qué da cuenta de la diversidad de la respuesta a TGF-13 en varios
tipos celulares? ban que MEKK2 activa el MEKS o viceversa?

11. ¿Cómo la señal generada por la unión del TGF-13 a los receptores de
la superficie celular se transmite al núcleo, donde ocurren los cambios
en la expresión del gen diana? ¿Qué actividad del núcleo asegura que
la concentración de las Smad activas refleja cercanamente el nivel de <.;?>'"'º ~<.;,,~<o
(al ~ - - - - -
receptores TGF-13 activados en la superficie celular?
12. La proteína de señalización extracelular Hedgehog puede perma-
~ 1-+- MEKK2
'
necer anclada a las membranas celulares. ¿Qué modificaciones a la
Hedgehog permiten que esté unida a la membrana? ¿Por qué esta pro-
piedad es útil?
13. Explique por qué las mutaciones con pérdida de la función de hed- X,~<o
gehog y smoothened dan el mismo fenotipo, pero la mutación patched (b) ~
con pérdida de la fun ción da el fenotipo opuesto en las moscas.
14. La mayoría de las células de mamífero tienen un cilio inmóvil único
1 ~ ~ !~ ERK5 fosforiladas

llamado cilio primario, en el cual las proteínas motoras de los micro-

- - ---=--- - - -~~
~l~ :~ ERK5
túbulos (que se tratan con más detalle en el Cap. 18) del transporte
intraflagelar (TIF) mueven elementos de la vía de señalización Hedge- h. ERKS es una MAP cinas a que previamente . mostró que se acti-
hog (Hh) . ¿Qué partes de la vía de señalización Hh interrumpirían las vab a cuan d o . era fosforilada
. por
MEK
5. Cuando ERKS se fosforila por
MEKS , su migración en el gel d
mutaciones en las proteínas motoras KiOA y Kif7 y dineína del TIP? e po1·1acr amida se retarda En otro ex-
. . .
il .
IS. ¿Por qué se considera que la vía de señalización que activa NF-KB perimento ad1c1onal, las células HEK2g 3 fu
' s....,;d difi b eron transfectadas con un
considerada es relativamente irreversible en comparación con las vías Pla u.u o que co ca a la ERKs .
b MEKS MEKK2 Junto con los plásmidos que codifica-
de señalización de las citocinas o los RTK? Sin embargo, la vía NF-KB an '. 'MEKK2 YMEKS o MEKK2 y MEKSAA. MEKSAA
debe ser regulada en menos finalmente. ¿Cómo se apaga la vía de seña- es una versión mutante inact · d 1
. iva e MEKS que opera como dominante
lización NF-KB? negativa. La expresión de MEKSAA
- aliza . , en las células HEK293 evita la se-
n CIOn a través de la MEKS d
16. Describa dos funciones para la poliubicuitinación en la vía de se- e d en ógena activa. Los lisados de las célu-
1as t rans1ecta as se analizar W
ñalización NF-KB. on por estero blotting con un anticuerpo
contra Ia ERKS recomb · t A .
17. ¿Qué característica de Delta asegura que solo las células vecinas re- man e. partir de los datos obtenidos en la
Part e (b) d e la fi gura ·q ' d
ciban señales? MEKK . . ' ¿ ue po emos concluir acerca del papel de la
2 en 1a activación de ERKS? ·D , .
, · l e que manera los datos obtenidos
18. ¿Qué reacción bioquímica es catalizada por la secretasa-y? ¿Por qué cuan d o 1as ce1u1as se c0 t e
. . ransiectan con ERKS, MEKK2 MEKSAA ayu -
se propuso que un inhibidor químico de su actividad debería ser un dan a dilucidar el orden de la . . Y
s participantes de esta cascada de ci nasas?

770 CAPÍTULO 16 • Vías de señalización que controlan la expresión génica

 rateinas plataforma pueden segregar diferentes MAPK que se-
2. Las p r o t e i n a s
fluorescencia. La velocidad de apagamiento de la fluorescencia (pér-
ias que comparten componentes en común. En la vía de apa-
dida de esta) correspondela actividad de la cinasa Kssl o Fus3. Los
a

reamiento de las levaduras, las MEK (MAPKK) Ste7 fosforila y activa resultados de la fosforilación de Ste7 y, por
lo tanto, la activación de

Pus3
PK, mientras que.Ste7 fosforila y activa la Kssl MAPK en el Kssl y Fus3 en presencia y ausencia de Ste5 se muestran más abajo:
la
de inanición. El factor de apareamiento se activa por la activa-
Curvas de apagamiento:
Nna proteina G del receptor del factor de apareamiento; la Ga, 1. Fus3 o Kssl sola (control)
reclutala proteina plataforma Ste5, y la Stel 1, Ste? y Fus3 componen- 2. Fus3 o Kssl + Ste7
Cascada
d e la c
de cinasa. La mutación de los sitios de unión de Ste5 3. Fus3 o Kss1 + Ste7 + Ste5
tes

para
Stell y Ste7 rompe la respuesta de apareamiento, demostrando
mente la importancia de Ste5 para una unión de las cinasas. La la Fus3 y la Kssl
claran Ste5 se necesita para la actividad de Ste7? ;Ste7 activa
o de la
tación del sitio
mulac.
de unión de Fus3 en Ste5 dio una respuesta más de modo equivalente? Qué nos dice el efecto de la presencia
Ste7 y de la
complicada, lo que sugiere que stes-Fusa es una interacción que puede ausencia de Ste5 en el ensayo acerca de la fosforilación de

implicar más que simplemente una fjación. Esta posibilidad fue inves- activación de Fus3 y Kssl?
igada con las proteínas de las levaduras expresadas como proteínas re- b. Las secuencias proteicas de Fus3 y Kssl son 55% idénticas, pero
igada
ombinantes en las bacterias o insectos y luego purificadas (véase Good dominio
on cada una tiene un bucle de inserción MAPK único cerca del
2009, Cell 136:1085-1097). de activación que es fosforilado por Ste7. La mutación de un
residuo
y cols.,
Fus3 el reemplazo del bucle de
a. Un ensayo de apagamiento de la fluorescencia fue empleado para de isoleucina en el bucle de inserción o

de Kssl dan como resultado

medir la actividad de las MAP cinasasFus3 y Kssl, empleando un pép- inserción Fus3 con la región equivalente
tido sustrato que podía ser fosforilado por ambas cinasas. El péptido curvas similares a la curva 2 de sugiere esto acerca de la Fus3
Kss l.;Qué
fosforilado se une a galio acoplado a cuentas fluorescentes y apaga esta sustratos para Ste7 y el papel de Ste5 en la estimulación
y la Kssl como

de la fosforilación por Ste7 de Fus3

Activación con Fus3

40000
Fus3 solamente
1,2
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Fus3 +Ste7
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772 CAPITULO 16 Vias de señalización que controlan la expresión génica