UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN CRISTOBAL DE HUAMANGA

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA Y METALURGIA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERÍA EN INDUSTRIAS ALIMENTARIAS

PRACTICA N° 10

DETERMINACION DE VITAMINA C POR ESPECTROFOTOMETRIA

Asignatura : Análisis de Alimentos

Docente : Mg Sc. Edith Susan Pillaca Medina

Estudiante : Pérez Corzo Nicolle Milena

Fecha de Recepción : miércoles 18 de enero del 2023

Fecha de Entrega : miércoles 25 de enero del 2023

Ayacucho-Perú

2023
 RESUMEN

El objetivo de la presente practica fue cuantificar el contenido de vitamina C en el

aguaymanto. Se prepararon soluciones estándar de vitamina C para determinar mediante

este proceso la absorción y así la concentración de esta vitamina en nuestra muestra.

Para determinar el contenido de vitamina C se dio un análisis cuantitativo por

espectrofotometría, este método puede ser directo ya que el AA presenta un máximo de

absorción a 260 nm, o indirecto basado en la reacción del AA con 4-metoxi2-nitro anilina, y

el producto obtenido tiene un máximo de absorción a 570 nm. Este método es altamente

específico y presenta menos interferencias. Los resultados de este análisis indicaron que

existe una diferencia mínima en relación a los datos de las Tablas y a otras investigaciones,

nuestro estudio dio como resultado 40.71 mg vitamina C/ 100 g Alimento, analizamos

diferentes autores para poder comparar nuestros resultados, encontrando una variedad de

resultados, tomando como referencia principal la Tabla peruana de composición de

Alimentos (2017), en donde menciona que la concentración de ácido ascórbico en el

aguaymanto es de 43.30 mg de vitamina C/100 g de alimento. Es importante su

determinación pues es un nutriente esencial en la dieta humana, además de ser bien

conocido por su capacidad de reducir las reacciones de oxidación

I. OBJETIVO
Cuantificación de ácido ascórbico en un alimento

II. FUNDAMENTO TEORICO

• ACIDO ASCÓRBICO O VITAMINA C

La vitamina C es un compuesto inestable, debido a la facilidad con la que

seoxida e hidroliza. Se descompone con facilidad en el procesamiento y

conservación delos alimentos, por lo que se utiliza como indicador de la

pérdida vitamínica de unalimento durante su procesado y

almacenamiento. Por otra parte, el calor y los cationesmetálicos

degradan la vitamina C. (Muñoz Rojas & Vega Viera , 2014, pág. 4) En

humanos, la vitamina C funciona como un antioxidante y juega un rol

importante en la función inmune. Es esencial para la síntesis de

colágeno, uno de los mayores componentes del tejido conectivo y la

carnitina. Además, la vitamina C ha demostrado tener efecto antiviral y

antibacterial in vitro; juega un rol en la reacción de hidroxilación

microsomal que cataliza el metabolismo del colesterol y destoxifiicación

de xenobióticos químicos, y está involucrada en el metabolismo de

neurotransmisores (Rosales Laguna & Arias Arroyo, pág. 2) •

ESPECTROFOTOMETRIA La determinación del ácido ascórbico por el

método de espectrofotometría, se basa en la reducción del colorante 2-

6 diclorofenolindofenol, por el efecto del ácido ascórbico en solución. El

contenido de ácido ascórbico es directamente proporcional a la

capacidad de un extracto de muestra para reducir una solución estándar

de colorante determinada espectrofotométricamente. “La

espectrofotometría es el conjunto de procedimientos que utilizan la luz

para medir concentraciones químicas” (Muñoz Rojas & Vega Viera ,

 2014, pág. 6) • AGUAYMANTO Presenta una fuente importante de

compuestos nutricionales y bioactivos muy beneficiosos para el sector

salud y para la industria alimentaria en el desarrollo de alimentos

funcionales fruto muy valorado por su sabor, textura y color, y porque

posee una gran variedad de compuestos funcionales que pueden

utilizados en las industrias de productos nutraceúticos y farmacéuticos.

(Obregón-La Rosa, Elías-Peñafiel, Contreras-López, Arias-Arroyo, &

Bracamonte-Romero, 2021, pág. 3)

Según las tablas de la norma peruana se encontro el siguiente valor para el

aguaymanto respecto a la vitamina C

 III. MATERIALES Y METODOS

3.1. Materiales

- Papel tissue

- Pipetas 1, 2, 3, 4, 5 y 10 mL

- Fiolas 100, 1000 mL

- Tubos de ensayo con tapa

3.2 Equipos

- Espectrofotómetro con sus respectivas cubetas

- Balanza

- Cocinilla

- Baño maría

3.3 Reactivos

3.3.1 Solución de ácido oxálico al 0,4%: Pesar 4 g de este ácido y llevar a volumen de 1000

mL con agua destilada.

3.3.2 Solución estándar (madre) de ácido ascórbico: Preparar una solución de 0.1% de

ácido ascórbico en una solución ácida de 0,4 % de ácido oxálico. Pesar 100 mg de ácido

ascórbico y llevar a volumen de 100 mL con una solución de ácido oxálico al 0,4 %.

3.3.3 Estándares de trabajo (ET): Tomar 1, 2, 3, 4 y 5 mL de la solución madre de ácido

ascórbico y llevar a volumen de 100 mL con una solución de ácido oxálico al 0,4 %. Estas

soluciones enumeradas del 1 al 5 contendrán 1, 2, 3, 4 y 5 mg de ácido ascórbico por 100

mL respectivamente.

3.3.4 Solución coloreada (Colorante): Pesar 12 mg de 2-6 DFIF, disolver y llevar a 1000 mL

de volumen con agua destilada. Utilizar agua destilada hirviente. Almacenar en botella de

color oscura y en refrigeración

3.4 Procedimiento

3.4.1 Preparación de la Curva estándar

a) Tomar 4 tubos de prueba y enumerarlos de I al IV y agregar lo siguiente:

I. 10 mL de agua destilada.

II. 1 mL de ácido oxálico al 0.4%.

III. 1 ml del estándar de trabajo (ET) N° 1 + 9 mL de agua.

IV. 1 mL del estándar de trabajo (ET) N° 1.

b) Ajustar a cero la absorbancia usando I y el filtro seleccionado.

c) Al tubo II añadir 9 mL del colorante y exactamente después de 15 segundos, leer la

absorbancia a 520 nm (L1).

d) Ajustar a cero la absorbancia con la solución del tubo III Análisis de Alimentos Vitamina

e) Al tubo IV añadir 9 mL del colorante y, exactamente después de 15 segundos, leer la

absorbancia (L2)

f) Repetir el paso 3

a) para cada estándar de trabajo (ET) y registrar los correspondientes valores de L1 y L2

Construir la curva estándar con las concentraciones de ácido ascórbico (mg/100 mL) en la

abscisa y en la ordenada la absorbancia, (L1-L2) para cada estándar de trabajo.

IV. RESULTADOS

Tabla 3

Soluciones estándar de vitamina C y concentración final para la determinación

de vitamina C

Solución Abs. 520 nm

estándar de mg de vit,
trabajo de vit, C/10 mL
L1 L2 L1 - L2
C (mg /100 alicuota
mL)
1 0.01 0.239 0.234 0.005
2 0.02 0.239 0.199 0.04
3 0.03 0.239 0.160 0.079
4 0.04 0.239 0.134 0.105
5 0.05 0.239 0.088 0.151

Figura 02 Curva patrón

 Curva Patrón
0.16
0.14
0.12
Absorbancia 0.1
y = 3.57x - 0.0311
0.08
R² = 0.9948
0.06
0.04
0.02
0
0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06
mg de Vit C/10ml de alicuota

Muestra de aguaymanto

Muestra + DFIF
0.00
0.077
0.064
0.063
Promedio entre los valores más cercanos
(0.064+0.063) /2 = 0.063
Calculando “y”, el cual representa la absorbancia
L1 – L2 = y
0.239-0.063= y
y = 0.176

De la formula del grafico hallamos “x” que representa el mg vit c/ 100g de

alimento.
𝑦 = 3.57𝑥 − 0.0311

0.176 + 0.0311
=𝑥
3.57
𝑥 = 0.058 𝑚𝑔 𝑑𝑒 𝑣𝑖𝑡𝐶 /10𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑎𝑙𝑖𝑐𝑢𝑜𝑡𝑎

Aplicamos regla de tres simple para hallar el contenido de alimento en

1ml de solucion
𝟑𝟓𝟎𝒎𝑳 → 𝟓𝟎𝒈
𝟏𝒎𝑳 → 𝒈 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒊𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐

𝟓𝟎𝒈 × 𝟏𝒎𝑳
𝒈 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒊𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐 =
𝟑𝟓𝟎𝒎𝑳

𝒈 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒊𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐 = 𝟎. 𝟏𝟒

Pasamos a hallar los mg de vit C en 100g de alimento, con regla de tres

simple
 (𝟎. 𝟎𝟓𝟖 𝒎𝒈 𝒅𝒆 𝒗𝒊𝒕 𝑪) 𝟏𝒎𝑳 𝟏𝟎𝒎𝒍 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒊𝒄𝒖𝒐𝒕𝒂
× ×
𝟏𝟎 𝒎𝑳 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒊𝒄𝒖𝒐𝒕𝒂 𝟎. 𝟏𝟒 𝒈 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒊𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐 𝟏𝒎𝑳
= 𝟒𝟎. 𝟕𝟏 𝒎𝒈 𝒅𝒆 𝒗𝒊𝒕 𝑪 / 𝟏𝟎𝟎𝒈 𝒅𝒆 𝒂𝒍𝒊𝒎𝒆𝒏𝒕𝒐

V. DISCUSION
Según Obregón La Rosa, et al. (2021) el contenido de vitamina C del

aguaymanto 43.00 mg,comparando con nuestro valor teórico el cual fue 40.71

mg de vit C / 100g de alimento, podemos observar que el valor obtenido en la

práctica realizada está muy lejos del valor de la tabla de composición de

alimentos del Ministerio de Salud que indica que la vitamina C en el aguaymanto

es de 43.30mg, a diferencia de Obregón La Rosa, et al. (2021) el cual obtuvo un

valor mas cercano al establecido en la tabla 2.

La vitamina C, es una vitamina hidrosoluble, que es un nutriente esencial en la

dieta humana, el cual tambien tiene una gran capacidad de reducir reacciones

de oxidación. En la practica realizada, para la determinacion se uso un reactivo

amino que reacciona con el acido ascorbico, formando un compuesto coloreado.

Luego se uso el espectrofotómetro con una longitud de onda de 540 nm para

medir la absorbancia.

Sabemos gracias a los estudios realizados que cuando mayor absorbancia sea,

mayor cantidad de vitamina C tiene el fruto. Según ello es necesario evitar o

disminuir las pérdidas del ácido ascórbico (Vitamina C) por ser el referente de

su capacidad antioxidante y su calidad nutricional establecido por Rosales

Laguna & Arias Arroyo

VI. CONCLUSION
En esta práctica se logró cuantificar el contenido de vitamina C en el

aguaymanto, por el método de la espectrofotometría de absorción, resultando

40.71 mg de vit C / 100g de alimento, el cual resulta un valor por debajo de la

norma establecida en la tabla 2, esto puede deberse a algún error en el momento

de la preparación de soluciones
VII. REFERENCIA BIBLIOGRAFICA
Muñoz Rojas , A. G., & Vega Viera , J. A. (2014). Determinación de la vitamina

c por la espectrofotometria. Nuevo Chimbote, Perú . Obtenido de

https://es.slideshare.net/vegabner/determinacin-de-la-vitamina-c-

porespectrofotometra Obregón-La Rosa, A., Elías-Peñafiel, C. C., Contreras-

López, E., Arias-Arroyo, G., & Bracamonte-Romero, M. (2021). Características

fisicoquímicas, nutricionales y morfológicas de frutas nativas. Puno, Perú.

Obtenido de http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S2313-

29572021000100017&script=sci_arttext#:~:text=De%20igual%20forma%2C%2

0R

amadan%20(2011,de%20productos%20nutrace%C3%BAticos%20y%20farma

c% C3%A9uticos. Rosales Laguna, D. D., & Arias Arroyo, G. (s.f.). VITAMINA C

Y PARÁMETROS FISICOQUÍMICOS DURANTE LA MADURACIÓN DE

Berberis lobbiana “UNTUSHA”. Huánuco, Perú . Obtenido de

http://www.scielo.org.pe/pdf/rsqp/v81n1/a08v81n1.pdf