RESIDENCIA BIOQUÍMICA
HOSPITAL SAN BERNARDO
MEMBRANA DE FILTRACIÓN GLOMERULAR ES UNA
BARRERA COMPUESTA DE 3 CAPAS:
•ENDOTELIO CAPILAR
FENESTRADO
1
•MEMBRANA BASAL :
cargas eléctricas
2 negativas (-)
•CÉLULAS
EPITELIALES:
3 Podocitos
ELIMINACION PRODUCTOS DE DESECHO
EQUILIBRIO HIDROELECTROLITICO:
REGULACION DEL VOLUMEN Y
COMPOSICION DE LOS LIQUIDOS
EQUILIBRIO ÁCIDO-BASE
PRESIÓN OSMÓTICA
PRESION ARTERIAL
FUNCIÓN ENDOCRINA: SÍNTESIS DE
ERITROPOYETINA, CALCITRIOL Y RENINA.
FORMACION DE LA ORINA
FILTRACION (G)
REABSORCION (T)
SECRECION (T)
CONCENTRACION
PROXIMAL
ASA DE HENLE DESCENDENTE
ASA DE HENLE ASCENDENTE
DISTAL
COLECTOR
CELULAS CUBICAS
CON BORDE EN CEPILLO
Reabsorbe del 40 y el 60 % del
ultrafiltrado glomerular.
La glucosa y los aminoácidos son
reabsorbidos prácticamente en su
totalidad.
Se reabsorbe también 60 y el 70 %
del K filtrado y el 80 % del HCO3.
En cuanto al agua y al NaCl,
reabsorción variable según las
necesidades de regulación del
volumen corporal.
CELULAS PLANAS LISAS
IMPERMEABLES A LOS SOLUTOS
Ingresa entre el 20-30% del filtrado y se reabsorbe el
15% de H20 por osmosis.
CELULAS CUBICAS LISAS
Resorbe 25% de solutos
IMPERMEABLE AL H2O
Reabsorción de NaCl por difusión pasiva y Trasporte
activo
CELULASCUBICAS CON
BORDE APICAL RUGOSO
Impermeable al H2O y a la Urea
Reabsorción facultativa de Ca por Paratohormona (PTH)
REABSORCION FACULTATIVA
DE SODIO: Estimulada por
aldosterona
ADH
REABSORCION FACULTATIVA
DE AGUA: Estimulada por
ADH (AQP2)
CELULAS CUBICAS LISAS
SE SECRETAN :
Metabolitos (sales biliares,
creatinina, acido úrico)
Tóxicos y aditivos
Fármacos (penicilina)
K+ y H+
INFECCIONES
URINARIAS
• Inflamación de la vejiga, con presencia o no de infección.
• Síntomas:
Disuria
Poliuria
Otros: fiebre, aumento de la presión, nicturia, dolor intenso en región
suprapubica.
Puede haber presencia de piuria o hematuria.
Ancianos: Confusión mental.
• Relación Mujer/ Hombre (10:1) en edad fértil:
- Uretra corta con proximidad a la vagina y el recto.
- Hormonas que potencian la adhesión bacteriana.
- Ausencia de liquido prostático y su acción antibacteriana.
- Coito.
Infección de vías urinarias superiores que afecta:
• Túbulos Renales
• Intersticio
• Pelvis renal.
Mecanismos:
Movimiento de las bacterias de TU inferior hacia los riñones
Localización de bacterias del torrente sanguíneo en los
riñones.
• Microorganismos más frecuentes →
Enterobacterias IMPORTANTE:
• Flujo continuo de orina impide el ascenso desde CILINDROS
LEUCOCITARIOS
los uréteres hacia los riñones.
PARA DIFERENCIAR
• Vaciamiento vesical incompleto → Bacterias CISTITIS DE
proliferan en la orina de la vejiga. PIELONEFRITIS.
Síntomas:
• Lumbalgia
• Disuria, poliuria y nicturia
• Fiebre alta, escalofríos, nauseas, dolor de cabeza
y malestar general.
insuficiencia renal aguda
• Síndrome clínico caracterizado por reducción de la función renal en
forma ABRUPTA, en horas o días y POTENCIALMENTE REVERSIBLE si
se corrige la causa.
Se distingue por:
VALORES DE
• ↓ FG
REFERENCIA:
• Acúmulo de productos • CREATININA:
nitrogenados no proteicos séricos 0,8-1,4 mg/dL
(urea y creatinina) • UREA: 0,20-0,45
• Con o sin oliguria acompañante g/L
• TFG: 120
mL/min
• Causas:
• Prerrenal (disminución súbita del flujo de sangre al riñón).
• Renal (enfermedad glomerular o tubular aguda).
• Postrenal (cálculos, tumores).
• SILENTE EN ETAPAS TEMPRANAS
• CURSO PROGRESIVO EN AUSENCIA DE
TTO→FALLO IRREVERSIBLE→ DIALISIS O
TRANSPLANTE
• MULTIPLES ETIOLOGIAS
• CONDICIONES (DURANTE 3 MESES)
• ↓ FG <60 ML/MIN/1,73 M2
• DAÑO RENAL
• ALBUMINURIA
• SEDIMENTO URINARIO(HEMATÍES
DISMÓRFICOS Y CILINDROS CÉREOS)
DETECCION PRECOZ ERC
PACIENTES CON FACTORES DE RIESGO
FILTRACION
ALBUMINURIA EVALUAR
GLOMERULAR
SEDIMENTO CLEARANCE DE Cr o
ALB/CREAT URIN FGe
URINARIO
1. DETECCION PRECOZ Y CLASIFICACION DAÑO RENAL (FG Y
ALBUMINURIA)
CONFIRMAR PERSISTENCIA
2. EVALUACION Y SEGUIMIENTO CLINICO
DURANTE 3 MESES
3. CONTROL DE PROGRESION (FG Y ALBUMINURIA)
1 •Etapa Pre analítica
2 •Etapa Analítica
3 •Etapa Post analítica
Etapa Pre analítica: Recolección de
Adultos muestra
• Primera orina de la mañana.
• Retención ideal toda la noche, o mínima de 3hs.
• Previa higienización.
• Chorro medio miccional.
• Dieta previa:
Hipohídrica: para evaluar la capacidad de los riñones de concentrar la orina (primera
función renal que se pierde).
Hiperproteica: para evaluar la función del riñón de acidificar la orina.
Niños
• Chorro medio miccional.
• Recolección al acecho.
Recomendaciones:
• Realizar la recolección en recipientes «estériles» de plástico
• Conservar a 4º C (si no se procesa de inmediato)
Etapa Analítica:EXÁMEN FÍSICO
Aspecto
• Límpido o ligeramente turbio (muy relacionado con la celularidad)
Causas de turbidez :
• Cristales de fosfato y de carbonato (se redisuelve al agregar ácido)
• Cristales de urato y ácido úrico (precipitan en medio ácido)
• Elementos celulares: leucocitos, bacterias, glóbulos rojos, células epiteliales
• Mucus
• Coágulos de sangre
• Pus Se informa:
•Límpido
• Contaminación: fecal, flujo menstrual
•Ligeramente turbio
• Quiluria (linfa en orina) •Turbio
• Lipiduria
Color
• Amarillo ámbar
Se debe al pigmento de metabolismo endógeno urocromo, también
contribuyen a la coloración pequeñas cantidades de urobilina y
uroeritrinas.
•Colores anormales
•Rojo: flujo menstrual, hematuria visible,
hemoglobinuria, mioglobinuria, porfirias y azúcares de
remolacha.
•Marrón amarillento/marrón verdoso: pigmentos biliares (bilirrubina),
ictericia obstructiva grave (verde oscuro), envenenamiento con fenol.
•Anaranjado: urobilina, rifampicina.
•Marrón oscuro/negro: metahemoglobina, melanina, consumo de L-dopa.
Densidad
Mide la capacidad concentradora y diluyente
del riñón.
VN: 1,015 – 1,025 g/L
Depende de:
•Número y peso de partículas
•Estado de hidratación
•Volumen urinario
Métodos de determinación: Tiras reactivas y urodensitómetro
Variaciones de la densidad
• Hipostenuria: Orina de baja densidad (<1,007)
Causas:
Diabetes insípida
Pielonefritis
Glomerulonefritis
Nefritis intersticial
• Hiperestenuria: Orina de elevada densidad (>1,050)
Causas:
Isostenuria
Diabetes mellitus
Orina de densidad estable
Nefritis parenquimatosa (alrededor de 1,010)
Fiebre Causas: - Daño renal
grave: alteración de la
Proteinuria
capacidad de concentrar y
Deshidratación excesiva diluir la orina.
Volumen VN: 1200-1500 mL
Poliuria: aumento en la excreción diaria con un volumen mayor a 2,5 L
Causas
Fisiológicas Patológicas
• Aumento en la ingesta de líquido (polidipsia) •Diabetes insípida
• Consumo de diuréticos, medicamentos, •Diabetes mellitus
cafeína y alcohol
•ICR
• Baja Temperatura (frio)
Nicturia: aumento del volumen de orina excretado durante la noche (mas
de 500 mL)
Causas
• Glomerulonefritis
• Síndrome de Cushing
• Síndrome de Addison
• Embarazo
Oliguria: disminución de la excreción diaria con un volumen menor a 500
mL/24hs.
Causas Patológicas
• Pre renal: vómito, diarrea, hemorragias.
Fisiológicas • Renal: glomerulonefritis, nefritis
• Disminución en la ingesta de líquido intersticial, necrosis tubular, pielonefritis.
• Aumento en la sudoración • Post renal: obstrucción por cálculos,
coágulos, tumores.
Anuria: supresión casi completa de la formación de orina (40-50 mL/24hs)
Causas
• Verdadera: disminución renal de la formación de orina
• Falsa: se forma la orina pero no se elimina (se soluciona con cateterismo)
Disuria: se define como la difícil, dolorosa e incompleta expulsión de orina
Causas
• Cistitis
• Pielonefritis
• Cálculos renales
EXAMEN QUÍMICO
Leucocitos
Nitritos
Urobilinogeno
Proteínas
Ph
Hb
Densidad
Cuerpos cetonicos
Bilirrubina
Glucosa
Tiras reactivas
• Presentan tacos reactivos que cambian de color al
contacto con la orina revelando así la presencia de
sustancias o características de la orina.
• Las reacciones se interpretan por la comparación del
color producido sobre la almohadilla con la escala
cromática producida por el fabricante.
• Conservar a T° menores a 30°, nunca refrigerarlas.
• Tiempo de lectura: 60-120” (según indicaciones del
fabricante).
pH VN: 5,5 - 6,5
Orina ácida
Fisiológicas • Dieta rica en proteínas
• Ejercicio prolongado (aumento de ac. láctico)
Causas
• Desnutrición: aumento del catabolismo proteico
Patológicas
• Alteraciones metabólicas o respiratorias
• Cetoacidosis diabética
Orina alcalina
Fisiológicas • Dieta vegetariana
Causas
Patológicas • Infección en vías urinarias
• Alteraciones metabólicas o respiratorias
Métodos de determinación:
- Peachímetro (más preciso)
- Tiras reactivas
Proteínas VN: menor 10mg/dL
• La albumina es la principal proteína sérica hallada en una muestra de orina normal. Otras proteínas
que pueden encontrarse en baja concentración son microglobinas séricas y tubulares, y la proteína
de Tamm Horsfall, secretada a nivel tubular (AHA y TCD), que forma la matriz de los cilindros.
• Normalmente se filtran una baja cantidad de proteínas de bajo PM en el glomérulo y
son reabsorbidas a nivel tubular.
• Proteinuria clínica: valores iguales o mayores a 30 mg/dL.
El hallazgo de elevada concentración de proteínas en orina es
:
PATOGNOMONICO de ENFERMEDAD RENAL
Métodos de determinación:
• Tiras reactivas
• Método de Folin y Denis:
• Técnica del SSA
• cuantitativo
• Se informa Concentración
• Indicador-H+(Amarillo) + Proteína → Indicador(Verde-azul) + Proteína-H+
• Falsos resultados en tiras reactivas
Resultados falsos positivos:
• Presencia de desinfectantes que contengan grupos de amonio cuaternario
en frascos donde se contiene la muestra.
• Reacción no se produce en condiciones acidas.
• Orina muy pigmentada o de alta densidad.
• Resultados falsos negativos:
• Las pruebas de tirilla son sensibles a la ALBÚMINA.
• No detectan bajas concentraciones de gamma- globulinas ni de la proteína
de Bence-Jones
Sangre en Orina
Hematuria: presencia en orina de un numero anormal de GR intactos.
Hematuria NO VISIBLE (microhematuria): NO se altera el color de la orina
Hematuria VISIBLE (macrohematuria): SI se altera el color de la orina (rojizo)
Causas
Hematuria glomerular
• Asociada con proteinuria significativa, cilindros eritrocitarios y eritrocitos dismórficos
Hematuria renal (no glomerular)
• Secundaria a trastornos tubulointersticiales
Hematuria urológicas (vias bajas):
• Hemorragia vesical o uretral
Hematuria no renal: contaminación menstrual, hemorroides
Hemoglobinuria: Presencia de hemoglobina libre en orina. Es indicativo de
hemolisis intravascular significativa
Mioglobinuria:
La destrucción de las fibras musculares, libera mioglobina que rápidamente es
eliminada y excretada en orina como pigmento marrón-rojizo. Puede ser causada
por traumatismos o ejercicio intenso.
Métodos de determinación:
- Tiras reactivas
- Método de Addler (Prueba confirmatoria)
- Se informa: no contiene/contiene
Falsos positivos Falsos negativos
• Restos de detergentes • Densidad aumentada
• Sangre menstrual • ph < 5,1
• Mioglobinuria • Vitamina C o algunos fármacos
• Enzimas bacterianas (peroxidasa de [Link])
GLUCOSA
Cantidades detectables de glucosa en orina se denominaGLUCOSURIA
La concentración de glucosa en orina depende de:
Nivel de glucemia (umbral renal: 180-200 mg/dL)
Velocidad de filtración glomerular
Reabsorción tubular
Umbral renal de la glucosa
Normalmente la glucosa es filtrada por el glomérulo, pero es reabsorbida casi completamente
en el túbulo proximal. La glucosuria ocurre cuando la carga de glucosa filtrada excede la
capacidad de reabsorción del túbulo, es decir 180 mg/dL
CAUSAS
•Hiperglucemia: diabetes mellitus
•Disminución del umbral renal fisiológico (al aumentar la edad)
•Daño renal: lesión tubular
•Embarazo
•Por ingesta excesiva de hidratos de carbono
Métodos de determinación:
• Tira reactiva (glucosa oxidasa/peroxidasa)
• Método de Trinder (Prueba confirmatoria)
Se informa: No contiene / Contiene: g/L
Resultados falsos positivos: Resultados falsos negativos:
•La presencia de restos de •Las primeras tirillas daban resultados falsos
detergentes que contengan negativos por interferencia con vitamina C
peróxido de hidrógeno u otros (ácido ascórbico) en la orina.
oxidantes fuertes. •Muestras a T° ambiente por periodos
prolongados sin conservar adecuadamente.
Cuerpos cetónicos
• Defecto en el metabolismo de
Hidratos de Carbono
• Defecto en la absorción Aumento el metabolismo de los ácidos Aparición de cuerpos
• Ingesta insuficiente grasos cetónicos en sangre
• Ayuno prolongado
• Sindrome de Fanconi Excretados en la orina
• Cetonuria:
Diabetes, vomitos, dietas pobres en HDC, ejercicio intenso
• Métodos de determinación:
Falsos positivos: lecturas mal
Tiras reactivas cronometradas
Método de Imbert (Prueba confirmatoria) Falsos negativos: volatilización
de acetona y degradación
Se informa: Contiene / No contiene bacteriana de acido
acetoacetico en muestras mal
conservadas.
Bilirrubina
La Bilirrubina Directa (BD) no está unida a proteínas por lo tanto puede filtrarse y excretarse
en orina, pero normalmente no existen cantidades detectables de BD en orina por los
métodos habituales. Su aparición en orina indica obstrucción del colédoco o lesión en tejido
hepático (hepatitis, cirrosis).
Urobilinógeno: es incoloro, pero sus productos de oxidación, las urobilinas, le confieren el
color amarillo a la orina normal (tiene variación diurna)
Causas de aumento
• Hepatopatías
• Hemólisis (urobilinógeno aumenta – no contiene bilirrubina)
Causas de disminución
• Obstrucción del flujo de biliar al intestino (ictericia obstructiva)
• Antibióticos: disminuyen la flora intestinal, por lo tanto disminuye la formación de
urobilinógeno
EXAMEN MICROSCÓPICO: SEDIMENTO URINARIO
Procesar dentro de las 2 hs. de recogida la muestra (las células y los cilindros
comienzan a lisarse).
1. Homogeneizar
2. Tomar 10 ml de la muestra
3. Centrifugar (5 minutos, 2.500 r.p.m)
4. Con el sobrenadante realizamos examen químico
5. Resuspendemos el pellet
6. Tomar 20 l
7. Colocar entre porta y cubre objetos
8. Observación en microscopio:
100x (celularidad) – 400x (recuento de cristales, cilindro, mucus, etc.)
CANTIDAD DE PLASMA ULTRAFILTRADO A TRAVES DEL
GLOMERULO POR UNIDAD DE TIEMPO (mL/min)
SE PUEDE MEDIR INDIRECTAMENTE POR ESTIMACION DEL
ACLARAMIENTO EN ORINA DE UNA SUSTANCIA LIGADA AL
PLASMA
NO LIGADA A PROTEINAS
NO PRESENTE ELIMINACION EXTRARRENAL
SUSTANCIA IDEAL
SE FILTRA LIBREMENTE
NO SE SECRETA NI REABSORBE
PRODUCCION ENDOGENA→DERIVA DEL METABOLISMO
DE CREATINA EN MUSCULO
FILTRA LIBREMENTE POR EL GLOMERULO
SECRETADA A NIVEL TUBULAR EN ↓CANT Y NO SE
RESORBE
SE MODIFICA POR LA VARIABILIDAD BIOLOGICA
INTERINDIVIDUAL (EDAD,SEXO,RAZA,ESTADO
NUTRICIONAL)
MUESTRA VR
SUERO 0.8-1.4 mg/dL
ORINA 0.5-2.0 g/24h
VOLUMEN DE PLASMA LIBRE DE UNA SUSTANCIA EN UNA
UNIDAD DE TIEMPO (24hs)
MARCADORES PROPUESTOS
ENDOGENOS → Creatinina
EXOGENOS → Inulina
VR del CLEARENDE DE CREATININA:
M: 90-120 ml/min/1,73m2
H: 90-130 ml/min/1,73m2
RESULTADOS MUY VARIABLES
RECOLECCION ORINA 24 HS
SOBREESTIMACION DE TFG CUANDO CREATININA PLASMATICA
AUMENTADA
MDRD-4 Y CKD-EPI
SE PUEDE ESTIMAR LA FG MEDIANTE ECUACIONES
OBTENIDAS POR ESTUDIOS
INCLUYE 4 VARIABLES:
• CREATININA PLASMÁTICA,
• EDAD (18 AÑOS O MAYOR),
• SEXO
• RAZA (AFROAMERICANA O NO).
OBVIANDO LA NECESIDAD DE UNA MUESTRA DE
ORINA DE 24 HS
PRESENCIA DE PROTEINAS EN ORINA POR ENCIMA DEL VALOR
NORMAL
ES PATOGNOMONICO DE DAÑO RENAL
MARCADOR TARDIO
DETERMINACION CUALITATIVA → TIRAS REACTIVAS
DETERMINACION CUANTATIVA → METODO DE FOLIN Y DENIS
MUESTRA: ORINA DE 24 HS →VR: HASTA 150 mg/24 HS
MUESTRA AISLADA(NIÑOS)→ Relación Proteínas urinarias
Creatinina urinaria
VR: HASTA 100 mg/24 HS
Colorante Azul de Bromotetrafenol tamponado a pH 3,0
Las proteínas de la muestra producen un cambio de color de
intensidad variable en función a su concentración
Desventajas:
-Sensibles a proteínas como : Albumina
-Incapacidad para detectar concentraciones menores a 300 mg/l
-Falsos + en orinas alcalinas
-Falsos – en orinas diluidas o aumento de proteínas diferentes a la
albumina
Fundamento:
Reacción turbidimetrica por desnaturalización de las proteínas
con el acido sulfosalisilico al 3%.
Turbidez proporcional a la concentración de proteínas de la
muestra.
No realizar ejercicio físico intenso 24 horas antes de la
recolección de la muestra.
MUJERES recoger orina con tampón vaginal y fuera del
periodo de menstruación.
Se debe mantener una ingesta de liquido normal (1,5-2,0
L/dia).
No debe tener o haber tenido fiebre los días previos.
No ingerir alimentos en las dos hs previas a la recolección de
orina.
Evitar situaciones de stress.
CONSERVACION DE MUESTRA → T ambiente???
MARCADOR SENSIBLE Y PRECOZ DE DAÑO GLOMERULAR,
POSIBLEMENTE REVERSIBLE
ELEVACION SUBCLINICA Y PERSISTENTE EN ORINA (30-300 mg/24
HS)
MUESTRAS DE ORINA:
24 HS
1° ORINA DE LA MAÑANA HACER RELACION ALB/CREAT
TECNICAS DE DETECCION
CUALITATIVAS → TIRAS REACTIVAS
CUANTITATIVAS → INMUNOTURBIDIMETRIA
DIABETICOS
HIPERTENSOS
ENFERMEDADCARDIOVASCULAR
ANTESCEDENTES DE ERC
OTROS FACTORES DE RIESGO
CARDIOVASCULAR
Albumina reacciona con el anticuerpo
especifico formando inmunocomplejos
insolubles.
La turbidez es proporcional a la
concentración de albumina en la muestra y
puede ser medida espectofotometricamente.
Elpaciente debe vaciar completamente la vejiga a una hora
determinada:
EJ: DIA 1 8:00 AM → ESTA MUESTRA SE ELIMINA
Debe recolectar todas las micciones hasta la misma hora que
comenzó el dia anterior
EJ: DIA 2 8:00 AM → ESTA MUESTRA SE RECOGE
Generalmente se solicita en niños o en ancianos sin control
de esfínteres
La primera orina de la mañana en un recipiente limpio, de
preferencia plástico, de boca ancha y con tapa a rosca.
Técnica “Chorro medio”
Recolección previa higiene.
EVALUACION CUALITATIVA DE LA
COMPOSICION DE PROTEINAS EN LA
ORINA
COMPLEMENTA EL EXAMEN CUANTITATIVO
PERMITE IDENTIFICAR EL TIPO DE
PROTEINURIA
AYUDA AL DIAGNOSTICO DE LA
ENFERMEDAD RENAL, TRATAMIENTO Y
POSTERIOR SEGUIMIENTO
Tomar
Dosar
Orina de 24 hs alícuota y
proteínas
centrifugar
Interpretación
Realizar la Concentrar
cualitativa del
electroforesis hasta 5-7 gr
patrón