VARIANTES PCR
Biología molecular y citogenética
1º Laboratorio Clínico y Biomédico
LA COSTERA
VARIANTES PCR
Hot start
→ comienza en caliente → evita amplificación inespecífica causada por la hibrida
[
-
la
fase de del uat [zonas A-T)
añadir pol después de da u%Í en .
Ts proteger con
esferas de cera o
grupo bloqueante ( unión termolábil )
Long range
→
ampliara > 5 kb
↳ pol con EKO 3
'
-
5 t aditivos
'
glicerol y DMSO) y taelong larga .
inhibe formación
estoct Zaria ADN y
Nested .
primeros .
2 amplificado inespecífico
"
1)
"
parejas
→
primers →
↳ 2) u
especifico → especificidad
↳ sensibilidad
puede amplif poca
↳
cantidad
.
ADN
Multiplex
→ PCR básica con ≠ primers para ≠ dianas 15 8) → A muestra ADN
-
↳ tener en cuenta → Ta primer
↳ especificidad primos
↳ tamaño ampliara
RT- PCR
→
amplifica muestras ARN → síntesis ADN a → PCR convencional
↳
amplificación Laa
-
↳ secuencia especifica →
primer antisense
" "
y
" "
serte
↳ todo cebado random
ARN →
priming Oligo DT
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