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Variantes PCR

Este documento describe diferentes tipos de PCR como la PCR anidada, PCR múltiplex, PCR de largo alcance y RT-PCR. La PCR anidada usa dos rondas de amplificación con parejas de primers diferentes para aumentar la especificidad y sensibilidad. La PCR múltiplex usa diferentes primers para amplificar múltiples regiones de ADN en una sola reacción. La PCR de largo alcance puede amplificar secuencias mayores de 5 kb usando polimerasas especiales y aditivos. La RT-PCR permite amplificar muestras

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VARIANTES PCR

Biología molecular y citogenética

1º Laboratorio Clínico y Biomédico

LA COSTERA
VARIANTES PCR
Hot start

→ comienza en caliente → evita amplificación inespecífica causada por la hibrida


[
-

la
fase de del uat [zonas A-T)
añadir pol después de da u%Í en .

Ts proteger con
esferas de cera o
grupo bloqueante ( unión termolábil )
Long range

ampliara > 5 kb
↳ pol con EKO 3
'
-

5 t aditivos
'

glicerol y DMSO) y taelong larga .

inhibe formación
estoct Zaria ADN y
Nested .

primeros .

2 amplificado inespecífico
"
1)
"

parejas

primers →

↳ 2) u
especifico → especificidad
↳ sensibilidad
puede amplif poca

cantidad
.

ADN
Multiplex
→ PCR básica con ≠ primers para ≠ dianas 15 8) → A muestra ADN
-

↳ tener en cuenta → Ta primer


↳ especificidad primos
↳ tamaño ampliara

RT- PCR

amplifica muestras ARN → síntesis ADN a → PCR convencional

amplificación Laa
-

↳ secuencia especifica →
primer antisense
" "
y
" "

serte
↳ todo cebado random
ARN →
priming Oligo DT

a64b0469ff35958ef4ab887a898bd50bdfbbe91a-5922855

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