Universidad Autónoma de Campeche
Facultad de Ciencias Químico Biológicas
Licenciatura como químico farmacéutico biólogo
Unidad de Aprendizaje: Micología
Docente: Edgar F. Mendoza Franco
“Paracoccidioidomicosis”
Alumnos: Matricula:
Brito Jheman Stephanie A. 65207
Carrillo Birkhahn Sandra S. 56696
Herrera Rodriguez Rodrigo J. 65284
Tzab Zarate Tania G. 61612
Grado: Octavo semestre Grupo: C
San Francisco de Campeche, Campeche a 27 de marzo de 2023.
1. Definición, etiología
y antecedentes
históricos.
Definición.
Micosis sistémica de curso agudo,
causada por un complejo de hongos
termo-dimórficos denominado
Paracoccidioides brasiliensis; se
caracteriza por lesiones pulmonares
primarias, casi siempre
Significa que determinadas asintomáticas, de donde se disemina
especies pueden presentarse a mucosa orofaríngea, ganglios
bajo dos tipos o aspectos linfáticos, piel y diversos órganos.
morfológicos diferentes.
Fase miceliar o levadura.
Etiologia.
Paracoccidioides brasiliensis, con base en estudios de biología molecular, se
considera que pertenece a un complejo que incluye tres especies crípticas: PS1,
PS2, PS3 y una nueva especie, Paracoccidioides lutzii (Pb01-like). Son clasificadas
en la familia Onygenacea, orden Onygenales, división Ascomycota. No se han
reportado fases teleomórficas o sexuadas.
● El primer caso reportado fue en 1908 por Lutz, quien estudió a un
Antecedentes ●
paciente con lesiones nasofaríngeas y adenopatías cervicales.
Las primeras pruebas inmunológicas se practicaron en 1916 por
históricos. Moses, quien introdujo la precipitación y fijación de complemento.
● Con respecto a México, el primer caso fue reportado en 1950 por
González-Ochoa, quien además de aclarar la patogenia de la
enfermedad, propuso que se podía iniciar a partir de los focos
pulmonares y luego diseminarse a la piel, lo cual cambió el concepto
clásico que se tenía de la vía cutánea como exclusiva.
2. Aspectos
epidemiológicos.
Distribución geográfica.
Está restringida sólo a América; se han encontrado casos desde el centro de
México hasta el sur del continente, donde confluyen los ríos Uruguay y Paraná.
El área endémica más
importante está
comprendida entre Brasil,
Colombia, Venezuela y
Argentina; en menor
proporción el resto de países
de Sudamérica.
En México se ha reportado en zonas como Veracruz, Chiapas, Puebla, Oaxaca,
Guerrero y Michoacán; los focos más al norte son los de Querétaro y San Luis
Potosí.
Fuente de infección y hábitat.
Las zonas endémicas de la enfermedad son subtropicales y tropicales, ubicadas
entre los 500 y 1500 m sobre el nivel del mar y temperatura entre los 17 a 24°C;
son regiones de abundantes bosques con árboles nativos y atravesados por ríos,
con inviernos cortos y veranos lluviosos.
Vía de entrada.
Penetra por vía respiratoria, dando un cuadro asintomático o subclínico; más tarde
se disemina a piel y otros órganos.
En raras ocasiones el hongo puede ingresar por traumatismos cutaneos, sobre
todo en mucosas (oral y anal); esto se explica porque la mayoria de enfermos son
trabajadores rurales que tienen la costumbre de masticar hojas, limpiarse los
dientes con fragmentos de vegetales, asi como llevar a cabo la limpieza anal con
ramas, hojas, etc.
Sexo y edad.
Se presenta con mayor frecuencia en hombres (relación 13:1), especialmente en
áreas endémicas, y en algunas zonas puede ser mayor la proporción, como son
regiones de Colombia, Ecuador y Argentina
El padecimiento se ha visto casi en todas las edades; tiene su mayor incidencia
entre los 30 a 60 años. Los casos en niños son escasos (3-5%), lo mismo que en
adultos jóvenes (10%).
Ocupación.
Es propia de agricultores y campesinos, personas que viven en medios rurales, en
especial los que trabajan en áreas cafetaleras, algodoneras y tabacaleras.
Raza.
Se encuentra con mayor frecuencia en los nativos y mestizos que viven en las zonas
endémicas, por ser los que están más expuestos al contacto con el hongo.
Periodo de incubación.
Indeterminado. Se considera que es un padecimiento donde dicho periodo puede
ser muy largo (años); se sabe por pacientes que visitaron zonas endémicas y
manifestaron la enfermedad después de más de diez años.
Factores de predisposición.
No se requieren factores de predisposición para desarrollar la enfermedad, debido
a que el agente etiológico es un patógeno primario; sin embargo, muchos
pacientes cursan con enfermedades crónicas como tuberculosis, alcoholismo, o
bien están desnutridos
Frecuencia.
La incidencia y prevalencia de este padecimiento son difíciles de determinar,
debido a que su reporte no es obligatorio en los países donde se presenta.
3. Patogenia.
La patogenia de esta enfermedad no está bien establecida; se inicia por la
inhalación de diversas estructuras micóticas, los propágulos, los cuales están
compuestos por fragmentos de hifas con microconidios y clamidoconidios a través
de la vía respiratoria, lo que genera el primo-contacto pulmonar.
La primo-infección se presenta de
manera “silenciosa” o asintomática,
dependiendo del estado inmune del
paciente; se disemina a piel, mucosas y
ganglios linfáticos, pero también se
afectan vísceras, en especial estómago,
intestino, bazo, suprarrenales, etc.
En general, la mayoría de los pacientes que presentan la enfermedad tienen
trastornos de la inmunidad.
Por otra parte, para la transformación del hongo de su fase micelial a
levaduriforme se requiere un importante sustento de oxígeno, aunque se
puede adaptar a bajas concentraciones de éste; es igualmente necesaria la
influencia de iones de hierro y se considera que el hongo actúa como un
sideróforo.
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4. Aspectos clínicos.
Tiene diversas clasificaciones; por su comportamiento clínico y el grupo de edad al
que afecta, es factible dividirla en:
Forma aguda/subaguda. Forma crónica.
Se presenta en 5-10% de todos los casos En 90% de los casos, afecta a varones
y afecta a niños, jóvenes y adultos mayores de 30 años; su desarrollo es
menores de 30 años; se caracteriza por lento, desde meses hasta años; puede
un curso rápido que va desde algunas ser unifocal (pulmonar) o bien multifocal,
semanas a meses y afecta diversos que es lo más característico, afecta
órganos. pulmones, mucosa de tracto respiratorio
superior, orofaringe, piel, ganglios
linfáticos y glándulas suprarrenales.
Diferentes cuadros clínicos de la paracoccidioidomicosis crónica:
Paracoccidioidomicosis pulmonar.
La mayoría de los pacientes que adquieren la primo-infección cursan de manera
asintomática o subclínica, y sólo se puede comprobar mediante la respuesta a la
intradermorreacción (IDR) a la paracoccidioidina y la imagen radiológica, que
demuestra el hallazgo de infiltrados pulmonares.
Paracoccidioidomicosis mucocutánea.
Afecta por lo regular la mucosa orofaríngea (80%), la de nariz y, en forma esporádica, la
anorrectal; en casos crónicos se puede extender a faringe, laringe y tráquea. En boca se
da la clásica estomatitis moriforme, llamada así porque las lesiones toman el aspecto de
una mora.
El padecimiento se inicia de manera insidiosa, casi siempre en el paladar, donde se
presentan pequeñas exulceraciones superfi ciales, de bordes irregulares, con aspecto de
tejido de granulación, de color rojo-violáceo.
Paracoccidioidomicosis ganglionar.
Afecta los ganglios linfáticos, en especial los supraclaviculares, cervicales, axilares e
inguinales; mismos que se manifiestan con aumento de volumen, induración y son
dolorosos a la palpación; cuando el proceso se hace crónico se fistulizan, dando paso a
abscesos fríos y úlceras muy similares a los de la tuberculosis colicuativa o la
coccidioidomicosis.
Paracoccidioidomicosis visceral.
A partir del foco pulmonar y según las condiciones del paciente, la enfermedad se puede
diseminar a casi todos los órganos; en un inicio invade esófago, estómago e intestino,
donde se presentan úlceras que se manifiestan por dolor abdominal difuso, anorexia,
vómito y fiebre; conforme la infección avanza se afectan hígado, bazo, páncreas, etc.
El pronóstico en este estadio es grave y conduce rápido a la muerte.
Paracoccidioidomicosis mixta.
Esta variedad clínica es la más frecuente en México, las afecciones ya mencionadas se
presentan en conjunto; por ejemplo, suele haber manifestaciones pulmonares leves
asociadas con lesiones mucocutáneas y linfáticas.
Paracoccidioidomicosis e infección por VIH.
La mayoría de los casos se presentan en la forma aguda o subaguda juvenil, y en
menor proporción en la forma crónica. En general tienen mal pronóstico; los
pacientes presentan períodos prolongados de fiebre, pérdida de peso, afección
pulmonar, linfadenopatía generalizada, hepatomegalia y esplenomegalia, así
como diferentes manifestaciones cutáneas, entre las que destacan exantema,
lesiones papulares, nódulos, úlceras y placas verrugosas, principalmente
localizadas en cara , mucosas y tronco.
5. Diagnóstico
diferencial
Diagnóstico diferencial
Paracoccidioidomicosis pulmonar:
tuberculosis, coccidioidomicosis,
histoplasmosis, blastomicosis,
neoplasias.
Paracoccidioidomicosis diseminada;
Histoplasmosis pulmonar. A) pulmonar.
Moteado fino.
Paracoccidioidomicosis mucocutánea:
leishmaniasis, esporotricosis,
coccidioidomicosis, tuberculosis,
blastomicosis, carcinoma
espinocelular, lupus vulgar, sífi lis
tardía, actinomicosis cervicofacial
Paracoccidioidomicosis. Afección a labio y
A) Afección bucal. mucosa de paladar.
Diagnóstico diferencial
Paracoccidioidomicosis ganglionar:
tuberculosis colicuativa,
coccidioidomicosis, blastomicosis,
linfomas.
Paracoccidioidomicosis ganglionar.
(Cortesía de: Saúl A, México, DF.)
Paracoccidioidomicosis visceral:
kala-azar, histoplasmosis,
Paracoccidioidomicosis
diseminada visceral
blastomicosis, enfermedad de Addison.
6. Diagnóstico de
laboratorio
Diagnóstico de laboratorio
TOMA DE MUESTRA
Las muestras recolectadas son: exudado, esputo,
lavado bronquial, líquido cefalorraquídeo y punción
de médula ósea.
En los casos
ganglionares o
viscerales son útiles
los fragmentos de
biopsia.
Lavado bronquial Punción de médula Líquido
ósea cefalorraquídeo
Diagnóstico de laboratorio
EXAMEN DIRECTO
Vista al microscopio
Se usa
Levaduras multigemantes,
KOH al 10% o solución de Lugol; compuestas por una célula
también se pueden usar blanco madre de pared delgada
de calcoflúor y técnica de (refringente), esféricas, ovales o
inmunofluorescencia. elípticas,
MIDEN
10-40 μm de diámetro y en
ocasiones hasta 60 μm, con
múltiples gemas de 2-6 μm
dispuestas a su alrededor
(desde 2 hasta más de 12)
Diagnóstico de laboratorio
De acuerdo con el número y la forma de distribución de los blastoconidios, toman diferentes
aspectos.
● Rueda de timón (varias alrededor de la madre).
● Huella de oso (2 o 3 gemas localizadas en un polo).
● Ratón Miguelito (sólo dos gemas).
Levaduras multigemantes de P. Levaduras multigemantes; B) en
Levaduras multigemantes. A) En
brasiliensis al examen directo (KOH, “rueda de timón” y esporas en
“orejas de Mickey
40X). cadena.
Diagnóstico de laboratorio
Examen directo de fase filamentosa de P.
Examen directo de fase levaduriforme de P.
brasiliensis.
brasiliensis.
Algunas ocasiones se observan cadenas de blastoconidios, mismas que deben diferenciarse de
levaduras de Lacazia loboi, o células monogemantes.
Se observa la fase parasitaria de levaduras multigemantes con seudohifas e hifas verdaderas,
es decir, dando ambas fases del hongo (parasitaria y saprofítica).
Diagnóstico de laboratorio
CULTIVO
Realización: Sabouraud, Sabouraud con
antibióticos y extracto de levadura agar a 28°C.
Otros medios: gelosa sangre y gelosa
chocolate, adicionados de extracto de levadura a
37°C (fase de levadura).
Cultivo de fase filamentosa de Paracoccidioides brasiliensis.
Coloración: glabra y de color
blanco-amarillento; luego es plegada y
aterciopelada, de color rosado, beige o
ligeramente café; el reverso es café-amarillento.
Cultivo de fase levaduriforme de
Observación: 3 a 4 semanas hasta 2 o 3 Paracoccidioides brasiliensis.
meses.
Diagnóstico de laboratorio
CULTIVO
Cultivo de fase levaduriforme de
Cultivo de fase filamentosa de Paracoccidioides brasiliensis.
Paracoccidioides brasiliensis.
Diagnóstico de laboratorio
BIOPSIA
Resalta las células multigemantes, en especial con tinciones de
Gran utilidad PAS y Grocott.
CASOS CUTANEOS CASOS PULMONARES
Epidermis. Dermis. Se presentan sobre todo
granulomas tuberculoides,
Se observa Se observa granulomas
infiltrado linfohistiocitario,
hiperplasia supurativos formados por
sin formación de verdaderos
seudoepiteliomatos células de tipo Langhans, a
granulomas.
cuerpo extraño y
a e hiperqueratosis
epitelioides, linfocitos y
en la epidermis.
microabscesos de
polimorfonucleares.
Diagnóstico de laboratorio
BIOPSIA
Biopsia. Células multigemantes en forma de
“timón de barco” (Grocott, 80X.) Biopsia. Células multigemantes en forma de
“huella de oso”. (Cortesía de Saúl A, México, A y B Levaduras multigemantes de P.
DF.) (H&E, 40X.) brasiliensis en biopsia. (Cortesía de
Robledo MA, Medellín, Colombia.)
Diagnóstico de laboratorio
Serologia
Deben apoyarse en otros datos
(exámenes directos, biopsias, IDR); por
sí solas no deben tomarse en cuenta
como defi nitivas, debido a que se han Las pruebas más empleadas son, en
observado cruces inmunológicos con estadios iniciales, la precipitación en tubo
algunos hongos (con antígeno polisacarídico de Fava); en
cambio, cuando la enfermedad es
crónica, se utilizan la inmunodifusión en
gel, la fi jación de complemento y la
contrainmunoelectroforesis (CIEF).
Métodos de reacción en cadena de la
polimerasa (PCR), tanto de muestras
patológicas como de cepas; mediante
esta técnica de gran sensibilidad se
reconoce la presencia del hongo aun en
mínimas cantidades.
Diagnóstico de laboratorio
Pruebas
Frotis Radiografías y
inmunológicas
tomografías
IDR a la paracoccidioidina
(extracto polisacarídico); es
muy útil para detectar
primo-contactos y valoración
epidemiológica, pero tiene
poco valor diagnóstico porque
genera muchos falsos positivos
Paracoccidioidomicosis diseminada;
Biopsia. Células multigemantes en A) pulmonar.
forma de “timón de barco” (Grocott,
80X.)
7. Tratamiento
● Los azoles se consideran el tratamiento
de primera elección.
[Link] de eliminación lenta:
● Sulfametoxazol-trimetoprim
● sulfametoxipiridazina
2. Azoles sistemicos.
Itraconazol: Dosis de 200-300 mg/día, Fluconazol: Dosis de 400 mg/día, y
y reducir a 100 mg/día de 6 a 8 meses; reducir a 200 mg/día de 6 a 8 meses;
Voriconazol: Dosis de 800 mg/ día.
[Link] B
Dosis de 0.25-0.75 mg/Kg/día
● Anfotericina B lipídica es
de 5 mg/kg/día.
● La anfotericina B liposomal
es de 3-5 mg/kg/día.
8. Micología
Paracoccidioides brasiliensis
Presenta un crecimiento dimórfico dependiente de
la temperatura. Crece como hongo saprófito
filamentoso en el suelo y en cultivo a 18 ºC-23 °C y
como levadura parásita en los tejidos del
hospedador y en cultivo a 37 °C.
Por biología molecular se han identificado algunas variantes distribuidas en
Sudamérica:
● PS1: presente en Brasil, Argentina, Paraguay, Perú y Venezuela
● PS2:Brasil y Venezuela.
● PS3: Restringida a Colombia
Histoplasma capsulatum y
Blastomyces dermatitidis.
Discusión del
artículo.
“Aspectos diagnósticos de
la paracoccidioidomicosis”
Introducción
Introducción
La micosis endémica paracoccidioidomicosis (PCM) tiene el género Paracoccidioides como su
agente etiológico, y ocurre como una enfermedad activa en hasta el 2% de los individuos
infectados.
Cuatro linajes filogenéticos:
● S1 (especie 1 de Brasil, Venezuela, Perú, Paraguay y
Argentina),
● PS2 (especie filogenética de Brasil y Venezuela),
● PS3 (especies filogenéticas de Colombia), las tres
incluidas en el Paracoccidioides brasiliensis especies
● Pb01, ahora propuesto para ser P. lutzii.
Se han reportado algunos casos fuera del continente Paracoccidioidomicosis cutánea
americano, tanto en individuos de áreas endémicas como
en viajeros que regresan de esas regiones
Introducción
Aspectos epidemiológicos ¿Cómo se adquiere?
Enfermedad
ocupacional
Típica de agricultores y
trabajadores al aire libre
Edad y sexo
Afecta preferentemente a
hombres, principalmente Se adquiere por la inhalación de partículas
en la tercera y cuarta fúngicas transportadas por el aire después
de remover la tierra
década de la vida
Introducción
Cultivos
Forma filamentosa Forma parasitaria y de levadura
Morfologías coloniales que se presentan Las colonias de Paracoccidioides tienen
como formas que van desde una colonia un color beige amarillento y una textura
glabra coriácea, pardusca, plana con cremosa
algunos mechones de micelio aéreo hasta
una forma arrugada, plegada y flocosa, a
una aterciopelada y blanca. formas , rosa Presenta 2–30 μm o más células de
y beige. levadura, que pueden tener formas ovales
o irregulares con uno o más brotes
Se observa una variedad de conidios,
ninguno de los cuales es característico de 35–37 °C
la especie.
25–30 °C
Introducción
Análisis de laboratorio Pruebas de laboratorio
Incluyen el examen microscópico
● Técnicas serológicas que implican la
y cultivos de muestras clínicas,
detección de anticuerpos y
como biopsias de piel o pus,
antígenos
esputo, orina, sangre, líquido
● Métodos moleculares para detectar
sinovial y cefalorraquídeo, que
Paracoccidioides
pueden analizarse según los
● El ADN en muestras clínicas,
órganos o sistemas afectados.
incluidos fragmentos de tejido,
también se está estudiando en
varios laboratorios para facilitar el
diagnóstico rápido de la infección.
Diagnóstico clínico
y convencional.
● La micosis endémica paracoccidioidomicosis (PCM) tiene manifestaciones clínicas
que requieren diferenciación de la tuberculosis, la enfermedad de Hodgkin, varias
micosis sistémicas y subcutáneas y el carcinoma de células escamosas
● Las radiografías de tórax revelan infiltrados reticulonodulares difusos, más
evidentes en los lóbulos superiores. La forma aguda suele presentarse como un
aumento del tamaño de los ganglios linfáticos y lesiones cutáneas, con síntomas
digestivos y osteoarticulares. Otras manifestaciones incluyen anemia, fiebre y
pérdida de peso, y el estado general de salud de los pacientes se deteriora
rápidamente.
La investigación inicial debe incluir las siguientes pruebas inespecíficas:
radiografía de tórax, recuento de células sanguíneas, pruebas de función
hepática, urea, creatinina, sodio y potasio.
Convencional.
Se llevan a cabo algunos procedimientos antes del análisis microscópico y de cultivo.
● Las biopsias cutáneas deben enviarse para cultivo bajo solución salina fisiológica
estéril.
● En el laboratorio, las biopsias de piel deben ser trituradas con tijeras quirúrgicas.
● El pus procedente de lesiones ulceradas o de raspados cutáneos no necesita ningún
tratamiento previo, y puede analizarse tras la recogida de la muestra.
● Las muestras líquidas como el esputo, el lavado broncoalveolar y el líquido
cefalorraquídeo deben centrifugarse y el sobrenadante desecharse antes del examen
micológico.
El examen microscópico directo de las muestras suele realizarse con hidróxido de potasio
(NaOH) al 10 % o hidróxido de sodio (KOH) al 4 % para detectar múltiples células parásitas
de levadura
La diferenciación entre las levaduras Paracoccidioides brasiliensis y Blastomyces
dermatitidis no suele ser un problema porque las zonas endémicas de las enfermedades
causadas por estos hongos no se solapan para el diagnóstico de micosis importados.
El examen histopatológico es de gran valor para el diagnóstico de la micosis endémica
paracoccidioidomicosis. Aunque las células levaduriformes de Paracoccidioides brasiliensis
pueden observarse de forma rutinaria utilizando la tinción de hematoxilina y eosina pueden
utilizarse otras tinciones como:
● Plata Gomori metenamina (GMS),
● Ácido periódico-Schiff (PAS).
● Tinción inmunohistoquímica.
Los tejidos presentan formación de granulomas con células gigantes multinucleadas, un
infiltrado polimorfonuclear y las patognomónicas células de levadura en ciernes en forma de
"rueda de barco"
El diagnóstico definitivo de la micosis endémica paracoccidioidomicosis PCM se basa en el
aislamiento e identificación de su agente etiológico en cultivo. El aislamiento de
Paracoccidioides brasiliensis puede obtenerse tras la propagación de la clínica.
Para evitar la contaminación bacteriana, las muestras se colocan en agar dextrosa Sabouraud
de uso rutinario, suplementado con 400 mg/L de cloranfenicol, y en medios que contienen
cicloheximida, como el agar Mycosel o Mycobiotic.
Paracoccidioides brasiliensis puede crecer alrededor de la
temperatura corporal, pero no es la temperatura óptima para el
crecimiento fúngico, para aumentar las probabilidades de
aislamiento del hongo, los cultivos deben incubarse a 25-30 °C.
Después de 2 a 3 semanas de incubación, empiezan a crecer
colonias filamentosas. Sin embargo, algunas cepas requieren una
incubación prolongada para crecimiento.
Para la identificación final, la conversión a
la fase de levadura debe realizarse Si no hay crecimiento de colonias
mediante el subcultivo del hongo a 37 °C fúngicas parecidas a las de P.
brasiliensis tras un período de
en Agar Fava-Netto's (peptona proteosa 3
incubación de 6 semanas, los
g/L, peptono 10 g/L, extracto de ternera 5 cultivos pueden considerarse
g/L, NaCl 5 g/L, extracto de levadura 5 g/L, negativos.
glucosa 4 %, pH 7,2).
Serología
Las técnicas serológicas suelen ser más sencillas
que el cultivo y muy útiles en el diagnóstico y
seguimiento de pacientes con
Paracoccidioidomycosis (PCM).
Para diagnosticar la PCM se han utilizado las
siguientes pruebas serológicas:
● Inmunodifusión en gel de agar (ID).
● Precipitina en tubo.
● Fijación del complemento (CF).
● Contrainmunoelectroforesis (CIE).
● Inmunofluorescencia.
● Radioinmunoensayo.
● Inhibición pasiva de la hemaglutinación.
● Ensayos de inmunoenzimas (ELISA, MELISA, dot
blot, e inhibición-ELISA, y más recientemente, la
prueba de aglutinación de látex).
Estas preparaciones antigénicas presentan variabilidad antigénica, lo
que dificulta mucho la estandarización de las técnicas de diagnóstico en
diferentes entornos de parto.
En las pruebas serológicas se ha aplicado una gama de
preparados antigénicos derivados tanto de células de
levadura enteras como de filtrado de cultivo, en su estado
crudo y/o purificado, que resultaron en una alta reactividad
cruzada, uno de los problemas más persistentes
encontrados en el serodiagnóstico de PCM.
La producción de varias preparaciones antigénicas ha mejorado la
sensibilidad y la especificidad de las pruebas serológicas centradas en la
detección de anticuerpos.
Algunos antígenos purificados de P. brasiliensis, como
gp43, se han aplicado ampliamente en el
inmunodiagnóstico de PCM. Los pacientes afectados por
formas graves de PCM muestran altos niveles de
anticuerpos anti-gp43, que disminuyen en el transcurso
del tratamiento de la enfermedad en la mayoría de los
casos.
Más recientemente…
El uso combinado de los Estos datos indican que
antígenos rPb27 y rPb40 el uso de una
recombinantes de P. preparación
brasiliensis en un ELISA multiantigénica es una
indirecto proporcionó un estrategia eficiente para
excelente ensayo de mejorar la sensibilidad y
inmunodiagnóstico para la especificidad de un
PCM, mostrando una inmunoensayo,
sensibilidad y corroborando los datos
especificidad del 96 y sugeridos a principios de
100 %, respectivamente. la década de 2000.
Métodos
moleculares para el
diagnóstico de la
PMC
Métodos moleculares para la detección de PCM
Los ensayos basados en ácidos nucleicos tienen un buen potencial para complementar y mejorar la
sensibilidad y la rapidez de los métodos convencionales utilizados en el diagnóstico micológico.
PCR ( reacción en cadena de Formato clásico de PCR
la polimerasa)
USO: A pesar de su alta sensibilidad (1,1 pg de
ADN) y especificidad para detectar P. lutzii en
Basados en la amplificación de las ADN de cultivos fúngicos, este formato no era
secuencias de genes fúngicos, y el adecuado para la detección de ADN en
gen del ADN ribosómico fue el muestras de suero.
principal objetivo
PCR en tiempo real
USO: Verificar la fiabilidad de la región del
espaciador transcrito interno (ITS) para la
detección molecular de P. brasiliensis
también
Métodos moleculares para la detección de PCM
PCR semianidada Secuencia gp43
Se utilizan: Los cebadores ITS1 e
ITS4 en la primera reacción y MJ03 Los ensayos de PCR para el
e ITS1 en la segunda reacción [49] diagnóstico de la PCM se basaron
en cebadores de oligonucleótidos
Observación: presentó alta derivados de la secuencia del gen
sensibilidad y especificidad para la que codifica el antígeno gp43.
detección de P. brasiliensisen tejido.
PCR anidada
Ensayo de nucleasa utilizando
Se usó en una colección sondas fluorescentes que resultó
de muestras de aerosol ser sencillo, sensible y reproducible
como metodología paraP. brasiliensisdetección
opcional para la
detección ambiental de
Paracoccidioidesspp
Métodos moleculares para la detección de PCM
Existe la posible aplicación diagnóstica de una PCR heminestada dirigida a una
nueva molécula P. Brasiliensis. También se evaluó el marcador denominado
ceja-1.
Esta metodología fue capaz de detectar
selectivamente solo el ADN de virus virulentos.
Se demostró la viabilidad de este método en
muestras de pacientes con PCM, aunque se
debe evaluar más a fondo
La detección molecular demostró ser
el mejor método para descubrir estos
hongos en el medio ambiente en
comparación con las estrategias de
cultivo.
La filogenética
molecular y la
Paracoccidioides
brasiliensis
La filogenética molecular y la Paracoccidioides
brasiliensis
P. brasiliensis contiene varias especies crípticas diferentes, como se indica en los estudios filogenéticos
que utilizan Multi-Locus Sequence Type (MLST), análisis de microsatélites, y secuenciación intein PRP8
Divergencia genética significativa La cual ha mostrando una
distancia genética
En P. brasiliensis aislados de la significativa entre Pb01 y
Región Central de Brasil en los grupos genéticos
comparación de otros aislamientos restantes
S1, PS2 y PS3 en MLST.
Para codificar y no codificar regiones de varios
SE USO genes (CHS4, actina, ODC, URA3, CHS2, HSP70,
FKS1, hidrofobina, Kex1, catalasa A, catalasa P,
formamidasa, glioxalasa)y las secuencias ITS de
siete aislamientos nuevos y 14 conocidos de P.
brasiliensis
La filogenética molecular y la Paracoccidioides
brasiliensis
Método de concordancia genealógica de reconocimiento de especies filogenéticas (GCPSR)
Identificó un clado de 17
aislamientos genotípicamente grupo "similar a Pb01"
similares, incluido Pb01, que son
distintos del clado S1/PS2/P3
Inteína PRP8
Para reconocer P. brasiliensis aislados de los
diferentes grupos genéticos. PRP8 intes de 22P.
brasiliensis
La filogenética molecular y la Paracoccidioides
brasiliensis
El análisis de polimorfismo de un solo
nucleótido degp43, ARF, y PRP8 intein
genes es útil para distinguir entre las
cuatro especies crípticas del género
Paracoccidioides.
Amplicones de PCR anidados de la región ITS de la
mayoría de las muestras de aerosoles ambientales
presentaban un 100 % de similitud conP. lutzii,mostrando
que esta especie puede ocurrir en el sureste de Brasil
Tipificación
molecular
La capacidad de los aislados de
P. brasiliensis para invadir
tejidos se estudió en un modelo
experimental utilizando B10
susceptible. Un ratón.
El análisis se realizó de acuerdo
con la gravedad de las lesiones,
incluyendo el número y tamaño
del granuloma, y el número y
diseminación de hongos a
diferentes órganos.
Se evaluó un sistema de marcadores de
microsatélites basado en PCR y secuenciación…
…que es fácil de realizar, estable, adaptable a un
gran número de aislados y lo suficientemente
discriminatorio como para ser utilizado como un
sistema de tipificación en la identificación de las
tres especies filogenéticas propuestas de P.
brasiliensis.
Esta técnica demostró ser una
herramienta inequívoca para la
discriminación de cepas entre
dos (S1 y PS2) de las especies
crípticas.
Posteriormente, se realizó genotipado en diez muestras de
tejido incrustado en parafina Paracoccidioides mediante
una PCR anidada basada en el polimorfismo del gen que
codifica el gp43 y proporcionó una buena correlación de los
hallazgos histopatológicos con los genotipos.
Conclusiones
La Paracoccidioidomicosis es el resultado de la infección por
Paracoccidioides spp., y continúa causando morbilidad y mortalidad
significativas, especialmente en algunas regiones específicas del mundo.
Los métodos descritos para el
El diagnóstico de PCM se logra Los resultados obtenidos de un
diagnóstico de PCM tienen sus
clásicamente mediante una panel de pruebas diagnósticas
fortalezas y debilidades y
correlación de datos clínicos, serológicas juegan un papel
requieren un análisis crítico por
epidemiológicos y de importante en el diagnóstico de
parte de microbiólogos y
laboratorio. PCM.
clínicos.
Se han logrado avances Las metodologías
considerables en el Sin embargo, no todas
moleculares también han
diagnóstico no basado en las pruebas descritas
demostrado varias
cultivos de esta micosis están disponibles
cuestiones biológicas
sistémica con el universalmente, lo que
importantes relacionadas
desarrollo de una complica la capacidad de
con la especiación, el
variedad de métodos diagnosticar y tratar a las
modo de reproducción y
para la detección de personas con PCM.
la población genética.
anticuerpos, antígenos y
ácidos nucleicos.
Preguntas
1. ¿Cuál es la zona endémica más importante de paracoccidioidomicosis?
2. ¿En qué partes de México se han reportado casos de paracoccidioidomicosis?
3. ¿De qué ocupación son la mayoría de personas que padecen
paracoccidioidomicosis?
4. ¿Cómo se divide la clasificación de la enfermedad padecimientos de
paracoccidioidomicosis?
5. ¿Cuál es el tipo de paracoccidioidomicosis más frecuente en México?
6. Menciona el tratamiento de primera elección de la PCM
7. ¿Cual es la nueva especie encontrada de paraccoccidioides?
8. ¿Qué tipo de paracoccidioidomicosis se aprecia en la imagen de referencia?
9. ¿Qué se observa en el microscopio en el examen directo?
10. De acuerdo con el número y la forma de distribución de los blastoconidios
¿Cuáles son las formas observadas?
Respuestas
1. Está comprendida entre Brasil, Colombia, Venezuela y Argentina.
2. Veracruz, Chiapas, Puebla, Oaxaca, Guerrero y Michoacán.
3. Propia de agricultores y campesinos.
4. Forma aguda/subaguda (5-10%) y forma crónica (90%).
5. Mixta.
6. Azoles o el Itraconazol.
7. Paracoccidioides lutzii.
8. Paracoccidioidomicosis mucocutánea.
9. Levaduras multigemantes, compuestas por una célula madre de pared
delgada (refringente), esféricas, ovales o elípticas.
10. Rueda de timón (varias alrededor de la madre), Huella de oso (2 o 3
gemas localizadas en un polo) y Ratón Miguelito (sólo dos gemas).
REFERENCIAS
● Bonifaz. A. (2012). Micología médica básica. (4ª ed.). Editorial
McGraw Hill. China.
● Zancope, M, Pizzini, V, de Medeiro, M., do Valle, F, & Almeida-, R.
(2014). Aspectos diagnósticos de la paracoccidioidomicosis.
Informes Actuales de Medicina Tropical , 1 (2), 111-118.
