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TRABAJO PRÁCTICO Nº 7

CICLO CELULAR - BIOLOGÍA TUMORAL

 Ciclo celular: Fases y períodos: G1, S, G2. Significado del período G0.
 Regulación del ciclo celular: punto de arranque, función de ciclinas, quinasas y complejos
SPF y MPF. Factores inductores externos de la proliferación celular. Función de genes
supresores de tumores y protooncogenes.
 Apoptosis: Muerte celular programada. Función. Diferencia con necrosis. Ejemplos.
Mecanismos moleculares que desencadenan la apoptosis: supresión de factores tróficos,
acción de sustancias inductoras. Papel de las caspasas.
 Alteraciones del ciclo celular: Tumor: Concepto. Características de las células tumorales.
Diferencias entre tumor maligno y benigno.
 Relación de la carcinogénesis con la mutagénesis: agentes químicos carcinogénicos.
Mutación y selección natural: su relación con el cáncer.
 Papel de los iniciadores y promotores tumorales en la génesis del cáncer.
 Relación entre los desórdenes de la diferenciación celular y el crecimiento tumoral.
 Mecanismos moleculares de la metástasis: Características de las células cancerosas que
posibilitan la metástasis Papel de los receptores para la laminina, de las cadherinas y de la
colagenasa tipo IV.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS:

Al finalizar las actividades de este trabajo práctico el alumno será capaz de:

1- Diferenciar las etapas del ciclo celular.

2- Comprender los mecanismos normales de regulación del ciclo celular y la apoptosis.
3- Conocer las características de las células tumorales y diferenciar tumor benigno de maligno.
4- Relacionar la formación de tumores con las alteraciones en el control del ciclo celular y en
la apoptosis.
5- Identificar los principales factores mutagénicos.
6- Comprender los mecanismos de formación de metástasis.

FUENTES DE INFORMACIÓN
 Introducción a la Biología Celular. Bruce Alberts. 3a. Edición (2011) Editorial
Panamericana.
 De Robertis Biología Celular y Molecular. - De Robertis (h) - Hib – 16° Edición Editorial
Promed.
 CLASES TEÓRICAS
 Actualización en temas teóricos en Biología para Médicos 2021: Regulación del Ciclo Celular
 Actualización en temas teóricos en Biología para Médicos 2021: Apoptosis
 Videos: Interpretación examen ginecológico. https://www.youtube.com/user/cyberamigotube

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TRABAJO DE LABORATORIO

ACTIVIDAD Nº 1

Los fibrocitos son células del tejido conjuntivo que ante ciertos estímulos, como por
ejemplo una herida, se transforman de células inactivas a células activas, llamadas
fibroblastos. Estas han desarrollado el retículo endoplasmático y el complejo de Golgi
necesarios para la síntesis y secreción de los componentes de la matriz extracelular.
A su vez los macrófagos circundantes, secretan FGF (Factor de Crecimiento de
Fibroblastos, de carácter polipeptídico) que ejerce un poderoso efecto mitótico sobre los
fibroblastos. De esta manera se repara el tejido conjuntivo, formado por fibroblastos y
matriz extracelular.
a) Indique sobre qué estructura de la célula actuaría el factor FGF y en qué etapa del
ciclo celular actúa el FGF
Membrana plasmática porque es de naturaleza poli peptídica y tiene receptor en
membrana.
Actúa en G1, en el punto de restricción.
b) En el siguiente esquema, coloque al lado de cada número, el nombre de los puntos
de control del ciclo celular.

3- 2do punto de control 4-. 3ero punto de

Control

2- 1er Punto de control 1- Punto de

Restricción.

c) Explique brevemente la regulación en los controles indicados con los números 1 y 2,

en el ítem b.
1- Punto de restricción: Los responsables intracelulares del paso a través de este
punto, son los complejos CDK4 y CDK6– Ciclina D, que permiten liberar al factor
de transcripción (E2F) de la proteína Rb (proteína retinoblastoma). Las CDK
tienen que fosforilar al Rb para liberar a E2F. La E2F estimula las síntesis de
otras CDK y de Ciclina E, necesarias para la progresión de la fase G1 hacia la S.
También favorecen la formación de proteínas necesarias para la síntesis de ADN;
y de él mismo.

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2- Primer punto de control: El primer punto de control se encuentra después del

punto de restricción dentro de G1. Participan en este punto el complejo cdk2-ciclina E,
que también se encarga de mantener inactiva a la proteína Rb y de favorecer el trabajo
de E2F para que estén listas las enzimas necesarias para iniciar la síntesis de ADN en la
fase S.
Los encargados de la inhibición en este punto de control son la P53 y la P21. Si existe
un error en el ADN distintas enzimas se activan, éstas ayudan a separar la P53 de su
marcador, y frente a una mayor concentración de P53 se estimula la síntesis de P21 que
se une a cdk2 y ciclina E, inhibiendo la acción del complejo. La célula entonces no puede
entrar a S.

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d) Los complejos cdk1- ciclina A y ciclina B permiten el paso a través de qué punto de
control? Explique brevemente como se controla el mismo.

2° Punto de control
El segundo punto de control se encuentra al final de G2. Los complejos cdk1- ciclina A
y ciclina B permiten el paso a través de este punto. En conjunto la actividad de estos
dos complejos se denomina Factor Promotor de la Mitosis (MPF).
Los complejos cdk1-ciclina A y cdk1-ciclina B, se encargan de inducir el ensamblaje del
huso mitótico y en parte de asegurarse de que los cromosomas se unan a éste.
También, de iniciar la condensación del material genético; y de desensamblar la
envoltura nuclear fosforilando las láminas nucleares.
En este punto actúa también la P53 que como ya vimos detecta alteraciones en el ADN y
desencadena la activación de la P21, encargada de la inhibición de cualquier complejo.

ACTIVIDAD Nº 2

A continuación, relatamos diferentes situaciones, analícelas y responda:

1-. Los padres de Rubén, un niño de 2 años, consultan preocupados al pediatra porque
observaron un color blanquecino en la pupila del ojo izquierdo (leucocoria) de su hijo. En
el interrogatorio del médico, la mamá, recuerda que una hermana de su padre había
tenido un tumor en los ojos. El oftalmólogo, luego de realizar los estudios
correspondientes, diagnostica Retinoblastoma (tumor de retina), causado por la mutación
de un gen supresor de tumores (gen rb).

a) Indique la función de este tipo de genes en el organismo.

Inhiben la proliferación de células con el ADN dañado (inhibe la replicación del

ADN).
Rb: inhibe los genes que codifican las proteínas necesarias para la replicación.

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b) ¿Los genes supresores de tumores mutados se manifiestan de manera recesiva o

dominante? (Marque con una cruz la opción correcta). Justifique.

X Recesivo
Dominante
Gen Normal : dominante Gen Mutado : recesivo. Si hay una copia buena (gen normal)
es suficiente para permitir que ocurra la mitosis.
Se necesitan las dos copias del gen mutado (homocigota recesivo) para que el control
del ciclo celular no ocurra correctamente.
c) ¿Qué otro gen supresor de tumores conoce?
Gen p53: bloquea la actividad de:
1) complejo CDK2-ciclina E: impide el pasaje de G1 a S (primer control)
2) complejo MPF-(CDK1+ ciclinas A y B) a través de la P21 (segundo control)
e) Indique a qué nivel del ciclo celular actúa el gen mencionado en el ítem c, para inhibir
la división de una célula con el ADN dañado.

Al final de G1 (antes de pasar a S).

Al final de G2 (antes de pasar a M).
f) Explique mediante qué proceso biológico un gen supresor de tumores elimina una
célula con ADN dañado y las consecuencias de una mutación en este gen.

Inducción de la apoptosis, una mutación de ese gen ocasionaría la proliferación

descontrolada (tumores).

ACTIVIDAD Nº 3

Isabel, una activa empleada de comercio de 38 años, asiste a su CAPS debido a que se
siente decaída, padece resfriados a repetición, y está adelgazando mucho.
Los resultados de los análisis pedidos por el médico revelan una Leucemia Mieloide
Crónica, causada por la mutación de un protooncogen.

a) Indique que proteínas codifican estos genes y el efecto en el organismo de una

mutación en los mismos

Protooncogen: son genes normales que codifican proteínas que inducen proliferación
normal de las células. Ej: factores de crecimiento, receptores de factores de crecimiento
Oncogen: gen mutado, se transcriben desmesuradamente y producen exceso de
proteínas o proteínas aberrantes que inducen la proliferación descontrolada.
b) Marque con una cruz el genotipo más probable de Isabel al enfermar. Justifique.

X Heterocigoto para la mutación Protooncogen : recesivo

Homocigoto para la mutación
Oncogen: dominante

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c) En la terapia oncogénica se utilizan fármacos que actúan en distintas fases del ciclo
celular. Conociendo la actividad que bloquea el fármaco utilizado, deduzca en qué fase
del ciclo celular ejerce su acción:

Fármaco Acción Fase del

ciclo celular
Vincristina – Vinblastina Se asocia con la tubulina impidiendo su
polimerización M

Pentotastina Inhibe la síntesis de bases nitrogenadas

G1

d) Los efectos adversos de las dosis efectivas de estos fármacos, afectan también a las
células normales del organismo. De la siguiente lista marque aquellas que considera se
verán más afectadas por estos medicamentos. Justifique su elección.

Enterocitos Osteocitos Precursores sanguíneos X

Células basales precursoras de los enterocitos X
Células del folículo piloso X Células musculares

Son células que se renuevan constantemente

ACTIVIDAD Nº 4

Las células cancerosas presentan alteraciones en su membrana plasmática capaces de

desencadenar una respuesta inmune que genera su destrucción. Uno de estos mecanis-
mos es la producción de TNF- por parte de los linfocitos T.

a) Indique cómo se denomina el proceso de destrucción de la célula y explique

brevemente el mecanismo que actúa en este caso.
Apoptosis: vía extrínseca.
TNF alfa: se une al receptor de membrana TNF R y desencadena la activación de las
caspasas, lo que determina muerte de células cancerosas.
b) Formule una hipótesis mediante las cuales las células cancerosas pueden evadir el
mecanismo mencionado en el párrafo.

- Mutaciones que inactivan al receptor TNF-R.

- Mutaciones de los genes que codifican las enzimas activadoras de las caspasas.
c) Mencione dos características importantes de las células cancerosas.
1- Mutaciones heredables o cambios epigenéticos heredables.
2-Reproducción descontrolada (escapan a controles del ciclo celular).
3-Invaden otros tejidos.
4- Capacidad de angiogénesis.
d) Deduzca qué propiedades debe adquirir una célula tumoral para poder invadir otros
tejidos.

- Pérdida de actividad de cadherinas.

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- Menos integrinas que se unen a la MEC (migran más fácil).

- Más receptores de lamininas.
- Más actividad de colagenasa.
e) Explique la diferencia entre la acción de los factores iniciadores y los factores
promotores en la producción de cáncer. Cite ejemplos de ambos.

Iniciadores: producen mutaciones, ej. Rayos UV, humo del tabaco, plomo de las
naftas.
Promotores: estimulan la proliferación de las células. Actúan después de los
iniciadores.

ACTIVIDAD Nº 5

a) Las mitocondrias son la principal fuente de radicales libres, que cuando se producen
en exceso son muy tóxicos y dañan el ADN. La evolución biológica dotó a estos
organelos de un mecanismo para eliminar las células en las que hay sobreproducción
de oxidantes. La muerte o supervivencia de la célula va a depender del equilibrio
entre los miembros de la familia de proteínas de la membrana mitocondrial externa
Bax/Bcl2 que regulan la formación de poros en la membrana mitocondrial y la
liberación de citocromo C al citosol.

El siguiente esquema representa los componentes mitocondriales que participan en

la apoptosis.

SOR: Radical Superóxido

Luego de observarlo, indique en el recuadro las siglas correspondientes a las

proteínas proapoptótica y antiapoptótica.

Bax: al activarse inactiva a la Bcl2 permitiendo los cambios

bioquímicos y morfológicos propios de la apoptosis.
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Proteína proapoptótica :

Proteína antiapoptótica :
Bcl2: al activarse evita la activación de las caspasas evitando la
apoptosis y permitiendo la supervivencia de la célula.

b) En el desarrollo embrionario el número de neuronas producidas por el organismo

supera la cantidad limitada de factor de supervivencia (factor trófico) liberado por las
células efectoras. Las neuronas que reciben insuficiente cantidad de factor de
supervivencia mueren por apoptosis. Mencione que vía se desencadena en este
caso, indicando que proteína se activa y cuál se inhibe.

VIA INTRÍNSECA: se activa la Bax inhibiendo a la Bcl2. De esta manera se permite

la liberación del citocromo C, el cual activa en forma sucesiva a diversas caspasas
y endonucleasas, desencadenándose los cambios bioquímicos y morfológicos
propios de la apoptosis.

c) A continuación, se enumeran acontecimientos iniciados por las proteínas Bcl2 y Bad.

Complete el cuadro sinóptico indicando el orden en que se producen

1. Ausencia de formación de poros.

2. Liberación del citocromo c
3. Muerte celular
4. Supervivencia celular
5. Formación de poros en la membrana mitocondrial
6. Activación de caspasas

Proteínas Proteínas
proapoptóticas: antiapoptóticas
Bax : Bcl2:

1-4
5-2-6-3

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d) Indique cuál es la causa que inició la apoptosis en el ejemplo del ítem a y cuál en
el ejemplo del ítem b, señalando qué vía se desencadena en cada caso.

Ejemplo a: Mutaciones de la molécula de ADN, por acción de los radicales libres.

Ejemplo b: Ausencia de factores de supervivencia.

En ambos casos se desencadena la vía intrínseca o vía mitocondrial.

ACTIVIDAD Nº 6

a) “Fernanda, al cumplir los 30 años decide visitar a su ginecólogo como lo hace

anualmente. Este le realiza un estudio citológico de cuello uterino (Papanicolaou:
PAP).”
Esquematice en el espacio asignado lo que observa en el preparado de la paciente.

40x

b) “Luego de 5 años, Fernanda concurre a su control anual ginecológico por presentar

sinusorragia (pérdida de sangre durante las relaciones sexuales) y, flujo sanguinolento,
durante todo el ciclo menstrual.”
Se le realiza un PAP donde se identifica una displasia (lesión intra-epitelial escamosa).
Esquematice en el espacio asignado lo que observa, el patólogo, en el preparado de la
paciente.

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40x

c) Mencione las diferencias entre los preparados observados en los ítems a y b.

-Núcleos de diferentes tamaños, relación N / C mayor 5 /10, células redondeadas,

medianas a pequeñas y en cúmulos, muchos PMN y hematíes.
- Células normales, núcleo picnótico, relación N / C= 1/10, células poliédricas, grandes y
aisladas, pocos PMN y hematíes.

ACTIVIDAD Nº 7

“Fernanda no cumplió con el tratamiento propuesto y comienza con ginecorragia

intermitente (pérdida de sangre por genitales externos), flujo sanguinolento maloliente y
dolor abdominal.”
Se le realiza un PAP, cuyo resultado indica que podría tratarse de un carcinoma

a) Esquematice en el espacio asignado lo que observaría el patólogo, en el

preparado de la paciente.

40x

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b) Una biopsia de cuello uterino permitió diagnosticar un carcinoma “in situ”.

Esquematice lo que observa:

40x

c) Marque con una cruz cuáles de las siguientes características observó el patólogo para
su diagnóstico y con un cero las que no correspondan:

……O…..Las células más superficiales muestran signos de diferenciación, aunque es

incompleta.

…X…… Lámina basal conservada.

…X…….Las células de todas las capas están proliferando y están indiferenciadas.

…O….Las células indiferenciadas ingresan hacia el tejido subyacente.

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