MICROSCOPÍA
Microscopía
Facultad de Ciencias de la Salud
Programa de Medicina
Lab. Biología Molecular y Estructural
Biólogo, MSc. Marlon M. Ardila-Chávez
Grupo de Investigación Básica y Clínica en Ciencias de la
Salud
IMPORTANCIA DEL USO DEL MICROSCOPIO EN EL
ESTUDIO DE LOS MICROORGANISMOS
Thiomargarita namibiensis (0,2 mm de ancho), vive en el lodo de las
costas africana y consume H2S, lo cual sería tóxico para los animales
que residen en el lodo. (Heide Schulz, 1997)
Descubriendo los Microorganismos
• Antony van
Leeuwenhoek
(1632-1723)
Óptica geométrica
• Teoría de los rayos de luz: Considera que cualquier objeto
visible emite rayos rectos de luz en cada punto de él y en
todas las direcciones a su alrededor.
• Cuando los rayos inciden sobre otros cuerpos, pueden ser
absorbidos, reflejados o desviados.
• Si penetran en el ojo estimulan el sentido de la vista.
Propiedades del Microscopio
1. Poder de aumento:
• Capacidad que presenta el microscopio de aumentar, en forma
aparente el tamaño real de un objeto que se observa en él.
• Se designa con una “X” el valor del aumento
• At=(Aob)(Aoc)
Donde,
At: Aumento total
Aob: Aumento del objetivo
Aoc: Aumento del ocular
Propiedades del Microscopio
2. Poder de resolución:
• Habilidad de los lentes para separar o distinguir
objetos pequeños, que están muy cercanos entre
si.
• La longitud de onda de luz es el mayor factor en
la resolución
Entre mas corta sea la longitud de onda
mayor es la resolución
• Distancia de trabajo
— distancia entre la superficie de los lentes y la superficie del portaobjetos o
lo que se este observando
1. Microscopio óptico
Mecanismo de ajuste de la distancia interpupilar
Oculares
Cabezal
Brazo
Revólver
Carro y pinzas
Objetivos
Tornillos para mover
el carro
Platina
Tornillo macrométrico
Sistema Mecánico Diafragma
Tornillo micrométrico
Sistema óptico
Sistema de iluminación Condensador
Base
Lámpara
Lentes objetivos:
Aumento 40 / 0,65 Abertura numérica (AN)
160 / 0,17
Longitud del tubo (mm) Grosor del cubreobjetos (mm)
Más comunes:
4, 10, 40 y 100 X
Lentes
Lente superior
• Oculares
10x
Lente inferior
40 / 0.65
• Objetivos 160 / 0.17
CÁLCULO DEL
AUMENTO TOTAL
lente
El Microscopio de luz
• Tipos
• Microscopio de Campo claro
• Microscopio de Campo oscuro
• Microscopio de Contraste de fases
• Microscopio Fluorescente
• Microscopio de Contraste por interferencia diferencial
• Son microscopios compuestos
• Donde la imagen se forma por la acción de dos sistemas de
lentes (el objetivo y el ocular)
Microscopio Electrónico
Haces de electrones
son usados para
producir las imágenes
Como la longitud de los
haces de electrones es
menos que la de la Luz,
esto resulta en una
resolución mayor.
Tipos de microscopios
Microscopio óptico (o compuesto): la luz atraviesa la preparación
directamente desde una fuente de luz (lámpara, sol).
-Aumento: 36 a 2.000x
lámpara
Espejo
➢ Microscopio de campo oscuro: la luz atraviesa oblicuamente
la preparación, por lo que los objetos aparecen como puntos
luminosos sobre un fondo oscuro.
➢ Microscopio de contraste de fases: la trayectoria de la luz es
desviada mediante dispositivos especiales, produciendo
contrastes notables entre elementos de diferente densidad o
grosor en la preparación.
➢ Microscopio de fluorescencia: las preparaciones se tratan
con fluorocromos y brillan al incidirles la luz.
Microscopio Electrónico
Aumento: 100.000x o más.
- Usa un “haz de electrones” en vez de luz
- La imagen se recoge en una pantalla fluorescente.
M.O.
M.E.
CLASES DE MICROSCOPIOS
Fuente de
electrones:
Alambre de
Tungsteno
Microscopio Microscopio electrónico de
Microscopio Electrónico de
óptico/Luz barrido SEM
transmisión TEM.