INSTITUTO DE CIENCIAS Y ESTUDIOS SUPERIORES DE
TAMAULIPAS A.C.
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
QUÍMICO FARMACÉUTICO BIÓLOGO
MICROBIOLOGÍA
PRÁCTICA:
TÉCNICAS BÁSICAS PARA EL CULTIVO DE
MICROORGANISMOS
ALUMNA: ALEXANDRA YAMILETH LÓPEZ SOLÍS
DOCENTE: Q.F.B. ILIANA REYES CAREAGA
OBJETIVOS:
• Aplicara las técnicas adecuadas para la preparación del área de
trabajo y evitar contaminaciones
• Seleccionar y aplicar las técnicas de siembra adecuadas
INTRODUCCIÓN:
Para efectuar el estudio de los microorganismos, se han diseñado diversos
métodos que permiten cultivarlos bajo condicione artificiales, en los que es
posible cultivarlos bajo condiciones experimentales y manejar un solo tipo de
microorganismo. Una de las técnicas más usadas en el laboratorio de
microbiología consiste en transferir una muestra microbiológica de un
ambiente determinado a un medio de cultivo, lo que permite obtener cultivos
microbianos. A l efectuar este procedimiento, es necesario considerar que en
el área de trabajo, existen muchos otros microorganismos; debido a esto, es
necesario tomar precauciones para impedir que éstos penetren y
contaminen los cultivos en estudio. Por otra parte, para considerar no sólo el
aspecto nutricional, sino también las condiciones ambientales de su hábitat
natural, por lo que en el medio de cultivo se debe ajustar el pH y
concentración de sales y durante la incubación condiciones tales como la
temperatura, aireación la luminosidad.
La aplicación de estos procedimientos ha permitido propagar a los
microorganismos en cultivos mixtos, así como su aislamiento y la obtención de
cultivos puros, facilitando de este modo, el estudio, caracterización,
aplicación y control de los mismos. La forma de sembrarlos y cultivarlos
depende del tipo de microorganismo y propósito específico del estudio.
Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo
de éste en medios de cultivo y condiciones de laboratorio controladas. La
población de microorganismos desarrollada en un medio se denomina
cultivo. Cuando éste contiene una sola especie de microorganismo, se
denomina cultivo puro oaxénico, cuando contiene más de una especie de
microorganismos se denomina cultivo mixto. Un cultivo tipo contiene una
especie conocida de microorganismos y es conservada en el laboratorio
para realizar diversos ensayos y estudios.
MATERIAL Y REACTIVO:
• 4 cajas Petri con agar nutritivo (AN)
• 4 cajas petri con agar eosina azul de metileno (EMB)
• 4 tubos con caldo nutritivo (CN)
• 4 tubos inclinados con AN
• 4 cajas Petri con agar papa dextrosa (PDA)
• 4 tubos inclinados con (P
• Mechero Fisher con manguera
• Asas de inoculación
• Pizeta con agua destilada
• Papel de estraza
• Equipo de limpieza
• Equipo de seguridad
• Incubadora
DIAGRAMA DE FLUJO
RESULTADOS
A. Reportar en el Cuadro 2, sus resultados de siembra de las cepas en cada
medio de cultivo.
B. Describir la morfología colonial representativa de cada cultivo microbiano de
acuerdo con los criterios indicados en los cuadros 3 a 6.
C. Verificar el tipo de microorganismos que corresponden a la muestra
problema, en comparación con los cultivos puros.
Cuadro 2. Resultados de crecimiento (C) y aislamiento (A) de cepas en medios
de cultivo. (-) no hay crecimiento o no se aisló; (+) hay crecimiento, sí se aisló.
Medio Bacterias Gram Bacterias Gram Levaduras Muestra
de positivas negativas problema
cultivo
C A C A C A C A
AN - - - - + + + +
PDA + - - + + + + +
EMB - - - - - - + +
Cuadro 3. Morfología colonial de cultivos microbianos en AN
Gram + Gram - Levaduras Muestra
problema
Forma Redondeado - - Redondeado
Color Blanco - - Blanco
traslúcido traslúcido
Borde Plano - - -
Elevación - - - Puntiforme
Aspecto: Opaco - - Opaco
opaco
brillante
Consistencia: Suave - - elástica
dura, suave,
elástica
Cuadro 4. Morfología colonial de cultivos microbianos en Agar EMB
Gram + Gram - Levaduras Muestra
problema
Forma CIRCULAR CIRCULAR - PUNTIFORME
Color MORADO METALICO - -
Borde ONDULADO ONDULADA - -
Elevación CONVEXA CONVEXA - PLANA
Aspecto: OPACO BRILLANTE - -
opaco
brillante
Consistencia: DURA DURA - -
dura, suave,
elástica
Cuadro 5x. Morfología colonial de cultivos microbianos en PDA
Gram + Gram - Levaduras Muestra
problema
Forma - - Filamentado Filamentado
Color - - Oscuro Traslúcido
Borde - - Acuminado Acuminado
Elevación - - Circular Filamentosa
Aspecto: - - Opaco Opaco
opaco
brillante
Consistencia: - - Suave suave
dura, suave,
elástica
Cuadro 6. Descripción de cultivos en tubos con CN, AN y PDA
Gram + Gram - Muestra problema
Cultivos en tubo - - Muestra líquida
CN
Forma de película: - - No
Si No
Opacidad: ligero
Ligero
(L) media (M) nula
(N)
Sedimento: viscoso
compacto (C ),
grumoso (G)
viscoso (V)
Cultivos en - - Cultivo de
tubos inclinados bacteria
AN - -
Color de la - - Amarillento
colonia: traslúcido
Color del medio: - - Amarillo
PDA - - -
Color de la - - Verdoso
colonia:
Color del medio: - - -
Cuestionario
1. ¿Por qué se considera que un cultivo puro supone condiciones no naturales?
¿Qué reflexiones haría sobre los resultados obtenidos en laboratorio con este
tipo de cultivo?
Por que solo se trata de un microorganismo el que posé y por lo tanto en un
ambiente común esto no podría darse o no sería posible ya que puede ser
contaminado por el exterior y alterar el resultado, así que los resultados en este
tipo de cultivo en el laboratorio considero que son necesarios para poder
estudiarlo y visualizarlo exclusivamente a este.
2. ¿Cuáles son las ventajas y desventajas de la técnica de estría cruzada?
Proponga otras técnicas de aislamiento en medios sólidos que se aplican en
microbiología.
Ventajas:
Es una técnica rápida de utilizar
Es un buen método cualitativo
Desventajas:
No es eficiente para realizar un conteo adecuado de colonias aisladas
Otras técnicas: Por picadura o punción, siembra o dilución.
3. ¿Para qué se inocularon tubos con medios líquidos y tubos con medios sólidos
por estría?
Es necesario fundir el medio para homogeneizar el agar, además una porción
de muestra (inóculo) en un medio adecuado, con el fin de iniciar un cultivo
microbiano.
4. Investigue la composición química de los medios AN, EMB y PDA. Explique qué
tipo de medios son con base en composición y uso.
AN
El agar-agar es un polisacarido de galactosa y galactomanano que se obtiene
de las algas rojas (Echema, Gelidium, Gracilaria). Contiene un 70% de agarosa
y un 30% de agaropectina. El agar-agar es el agente solidificante más utilizado.
EMB
contiene colorantes de azul de metileno y eosina Y, que inhiben las bacterias
gram-positivas en cierto grado. Los colorantes también actúan como
indicadores diferenciales en respuesta a la fermentación de la lactosa o la
sacarosa por parte de los microorganismos.
PDA
Este medio preparado en el laboratorio se compone de 250 g de trozos de papa
con cascaras, 20 g de dextrosa y 20 g de agar agar, todo esto para 1 1 de agua
destilada.
CONCLUSION
El estudio de los microorganismos desde el área clínica es muy importante
pues gracias a este se pueden detectar cuales son los causantes de ciertas
afecciones en el organismo y así mismo crear métodos de prevención de las
mismas ya sea mediante vacunas y/o antibióticos.
BIBLIOGRAFÍA
"TÉ
CNICAS BÕSICAS PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS: SIEMBRA Y
ESTUDIO DE BACTERIAS? (s. f.). Equipos y laboratorio de Colombia. Recuperado 30 de
octubre de 2022, de https://www.equiposylaboratorio.com/portal/articulo-
ampliado/tEcnicas-bAsicas-para-el-cultivo-de-microorganismos:-siembra-y-estudio-de-
bacterias
ANEXOS
Nombre Obervaciones imagen
1. - Pequeños brotes color transparente
2. Escherichia Coli
Colonias brillantes y pequeños puntos
3.Estreptococcos agalactie Estrías color verdoso y pequeñas
formaciones circulares traslúcidas
4.Candida albicans Muy separadas y pequeñas
5. Muestra problea Muestra problema con bacteria color
blanco, de apariencia lechosa
derretida
