Cuestionario:

1. ¿Qué es un medio de cultivo, y como clasifica los diversos componentes químicos que los
constituye?

Es un sistema que permite el crecimiento de microorganismos. La composición dependerá de

la especie que se desea cultivar porque las necesidades nutricionales varían. Existen
microorganismos poco exigentes que se desarrollan en medios normales de laboratorio, y
otros muy exigentes que necesitan de sustancias como vitaminas, suero, etc.

Algunos componentes son agua, sangre, indicadores de ph, cloruro de sodio, etc.

2. ¿Proponga sistemas de clasificación de los medios de cultivo?

Tipos:

TIPO MEDIOS DE CULTIVO OBJETIVO

Agar Sangre Recuperación de bacterias y
hongos
Agar Sangre Recuperación de bacterias
incluidas Haemophilus y
Neisseria gonorrhoeae
No selectivo Agar Mueller-Hinton Medio para estudio de la
susceptibilidad bacteriana
Caldo tioglicolato Caldo enriquecido para las
bacterias anaerobias
Agar dextrosa de Sabouraud Recuperación de hongos

Agar MacConkey Selectivo para las bacterias

gramnegativas; diferencial para
las especies que fermentan la
lactosa
Agar Sal Manitol Selectivo para los estafilococos,
diferencia para Staphylococcus
aureus
Selectivos, Agar diferencial selectivo para
Diferenciales Agar Xilosa-lisina-desoxilato Salmonella y Shigella en
cultivos entéricos
Medio de Lowenstein-Jensen Selectivo para micobacterias
Agar Middlebrook Selectivo para micobacterias
CHROMagar Selectivo, diferencial para las
levaduras
Agar inhibidor de hongos filamentosos Selectivo para los hongos
filamentosos
Agar extracto de levadura con carbon vegetal Recuperación de Legionella y
tamponado (BCYE) Nocardia
Agar cistina-telurito Recuperación de
Corynebacterium diphtheriae
Caldo de cultivo Lim Recuperaci6n de Streptococcus
agalactiae
Especializados
Agar sorbitol de MacConkey Recuperaci6n de Escherichia
coli 0157
Agar Regan Lowe Recuperaci6n de Bordetella
pertussis
Agar sacarosa, sales biliares, tiosulfato y Recuperaci6n del género Vibrio
citrato
3. Revise y discuta con su docente de mesa, los siguientes términos:
✓ Agar- agar: Se utiliza como agente gelificante para dar solidez a los medios de cultivo. En
el agar bacteriológico el componente dominante es un polisacárido que se obtiene de
ciertas algas marinas y que presenta la indudable ventaja de que, a excepción
de algunos microorganismos marinos, no es utilizado como nutriente.

✓ Peptona: Son mezclas complejas de compuestos orgánicos, nitrogenados y sales

minerales, que se obtienen por digestión enzimática o química de proteínas animales o
vegetales (sojacaseína carne, etc.). Son muy ricas en pépticos y aminoácidos, pero pueden
ser deficientes en determinadas vitaminas y sales minerales

✓ Triptona: Sale de la fuente proteica de caseína, es usada como una fuente de nitrógeno
en medios de cultivo para la detección de hongos y bacterias.

✓ Microorganismo exigente: no crece en un medio general y requiere de factores de

crecimiento (amino ácidos, vitaminas, purinas y otras sustancias que no pueden
producir).

✓ Ubicuo: un microorganismo que pueden estar en cualquier lugar.

✓ Extracto de levadura: un extracto soluble en agua de un autolisado de células de

levaduras seleccionadas y es rico en vitaminas como las del complejo B, aminoácidos y
otros factores de crecimiento.

✓ Extracto de carne: se prepara a partir de musculo esquelético bovino muy bajo en grasa
y medula ósea, y es altamente nutritivo.

✓ Incubación: proceso de mantener y hacer crecer cultivos microbiológicos.

✓ Siembra: es introducir artificialmente una porción de muestra en un medio adecuado,

con el fin de iniciar un cultivo microbiano, para su desarrollo y multiplicación.

✓ Inóculo: Para referirse a los microorganismos o sus partes. Colonia: agrupación de un

conjunto de microorganismos de un mismo tipo.

✓ Colonia: es la agrupación de un conjunto de microorganismos de un mismo tipo.

✓ Cultivo Puro: contiene una sola clase de microorganismos.

✓ Cultivo axénico: se puede considerar un cultivo puro que contiene una sola clase de
macroorganismos.

✓ Cepa bacteriana: un conjunto de bacterias con las mismas características biológicas (de
la misma especie).

✓ Aislamiento Primario: utilizar distintos medios de cultivos para aislar distintos

microorganismos.

✓ Subcultivo: Resiembra de células de un cultivo primario y obtención de cultivos

 secundarios.
4. Establezca diferencias y cite ejemplos entre medios de cultivos:

Nutritivos Enriquecidos Enriquecimiento Selectivos Diferenciales

son aquellos que Durante el cultivo de Son aquellos que Son aquellos diseñados
poseen los ciertos permiten el para distinguir unos
componentes mínimos microorganismos crecimiento de un tipo microorganismos de
para que pueda patógenos, éstos determinado de otros a partir de una
producirse el requieren un medio con microorganismos, población mixta, por la
crecimiento de complementos que le inhibiendo el desarrollo apariencia distinta que
bacterias que no permitan crecer. Estos de los demás. Algunos toman sus colonias.
necesiten complementos pueden de estos medios Estos medios de
requerimientos ser muy variados, contienen cultivo ponen de
especiales. El medio como ejemplo un agente selectivo manifiesto propiedades
más conocido de este tenemos, sangre como antibióticos, que un determinado
grupo es el agar desfibrinada, suero, productos químicos, tipo de
nutritivo o agar común, líquidos de ascitis, colorantes. microorganismo posee.
que resulta de la adición huevo, glicerol, etc. Entre los agentes Por ejemplo, el agar
de agar al caldo Agar sangre, agar selectivos podemos sangre es un medio
nutritivo chocolate, etc. citar el cloruro de nutritivo enriquecido y
sodio, que en es
concentración a la vez un medio
elevada inhibe la diferencial, ya que
mayoría de los permite reconocer
microorganismos, aquellos
excepto los microorganismos
microorganismos capaces de producir
halotolerantes como hemólisis.
son los estafilococos,
Sintéticos o Definidos Complejos o Indefinidos Mixtos De transporte Conservación

Son medios que Estos contienen todos se encuentran presentes aseguran la viabilidad permiten mantener la
contienen los distintos los nutrientes desde un inicio más de de la bacteria viabilidad de las
nutrientes en forma de necesarios para el una especie/raza de desde el momento de bacterias, conservando
productos crecimiento de microbio y por cultivo la toma de la muestra sus características
químicos puros (pero no muchos tipos de secuencial a que serán hasta su llegada y fisiológicas,
extrapuros) y en microorganismos, pero añadidas a lo largo de la procesamiento en el morfológicas,
concentraciones no se conocen todos fermentación. laboratorio. Carecen de tintoriales, etc. Los
conocidas. Así, un los componentes que un nutriente mínimo hay para tiempos cortos
medio definido forman indispensable, evitando y tiempos más
permita el desarrollo de parte de ellos ni las así el crecimiento de prolongados, aunque
un microorganismo concentraciones las bacterias. Como para mantener y
heterótrofo y “poco exactas de cada uno de ejemplo tenemos el garantizar
exigente”, como por ellos. Muchos de sus medio de Stuart, Ames. todas las características
ejemplo E. coli, el que componentes proceden bacterianas se deben
debe contener sales de la degradación conservar liofilizadas o
inorgánicas y fuentes parcial de tejidos o congeladas a -70°C o
de carbono y productos animales, en nitrógeno a -120°C. .
nitrógeno: vegetales
o de microorganismos
que son fuente de
aminoácidos, azúcares,
lípidos, vitaminas y
minerales.
5. Que precauciones deberá tener en cuenta antes de preparar un medio de cultivo.
a. Identificación del agente biológico El material proporcionado es de uso exclusivo de
laboratorio y viene identificado con el nombre científico de la cepa, el número de
catálogo de la colección y la forma de presentación (liófilo, cultivo activo u otras).
b. Identificación de la peligrosidad: evaluación de riesgos y nivel de contención en el
laboratorio • Cada microorganismo suministrado está clasificado de acuerdo con la
legislación española o con los datos de que la CECT dispone del microorganismo en
cuestión. La CECT sólo suministra cepas pertenecientes a grupos de riesgo hasta 3*.
Cualquier microorganismo, independientemente del grupo de riesgo al que
pertenezca, puede ser patógeno en determinadas condiciones. • El trabajo con
microorganismos de grupo de riesgo 2 o superior y con aquellos manipulados
genéticamente requiere unos niveles de contención establecidos a nivel nacional, que
son responsabilidad del receptor.
c. Primeros auxilios En caso de contacto, lavar bien la piel contaminada con jabón
antiséptico y agua abundante. Si se sospecha la contaminación de heridas, o se ha
producido una ingestión o inhalación fortuita, se deberá buscar inmediatamente
atención médica, y se informará al facultativo del nombre del microorganismo.
d. Medidas en caso de vertido o derrame del contenido del envase suministrado.
Precauciones ambientales • Descontaminar/esterilizar/autoclavar todo el material
que haya podido estar en contacto con el cultivo microbiano. • Mantener los cultivos
alejados de desagües, agua superficial o subterránea y suelo. • Si se rompe
accidentalmente el liófilo/envase que contiene los microorganismos, empapar el área
contaminada con un desinfectante apropiado. Los fragmentos de vidrio han de ser
eliminados con pinzas, para evitar cortes accidentales.
6. Elabore una escala de grupos biológicos, desde los más resistentes a desinfectantes hasta
los más sensibles.

Factores que influyen en la acción de los desinfectantes:

-La naturaleza de los microorganismos: por orden de mayor a menor resistencia encontramos
los priones, ooquistes de coccidios, esporas, micobacterias, quistes de protozoos, virus sin
envuelta lipídica, trofozoitos, bacterias GRAM negativas, hongos, bacterias GRAM positivas y
virus con envuelta lipídica. Esto se representa en la siguiente figura, que es el esquema de
Spaulding.
7. Según su nivel de acción de los desinfectantes, completar el siguiente cuadro:
8. Según los mecanismos de acción de desinfectantes, complete el siguiente cuadro
9. Efectúe una propuesta de clasificación de los sistemas de esterilización