PRACTICA DE LABORATORIO.
EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS DE VEGETALES.
APRENDERE A: Realizar la extracción de ácidos nucleicos de un tejido vegetal.
FUNDAMENTACION TEORICA:
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas: en primer lugar, tiene que romperse la pared
celular y la membrana plasmática para ´poder acceder al núcleo de la célula. A continuación, debe romperse
también la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Los jabones utilizados, como el lavavajillas,
emulsionan los lípidos de las membranas celulares y las rompen. La sal evita la unión de proteínas al ADN.
Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se
encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre alcohol y el agua. Además de permitirnos
ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución
acuosa.
MATERIALES Y EQUIPOS
Una cebolla - Papel de filtro - Alcohol
Jugo concentrado de papaya - Vaso - Lavavajillas
Sal - Vaso de vidrio alto refrigerado - Cuchillo
Agua destilada - Bureta - Licuadora
PROCEDIMIENTO
A.- PROBLEMATIZACION
Extraer el ADN no es una labor complicada. Solo requiere el seguimiento de ciertos pasos básicos. Algunas
técnicas para extraer ADN se usan en la industria, sin embargo, en todas, los principios son los mismos.
En grupo, formulen una posible respuesta o hipótesis a la siguiente pregunta: ¿Cómo podemos comprobar
que todos los organismos tienen ADN en sus células?
B.- EXPERIMENTACION:
1.- Corten la zona central de la cebolla en cuadraditos.
2.- Echen agua en el vaso y añaden tres cucharadas del detergente y una de sal. Completen el contenido del
vaso con agua destilada, hasta el tope. Introduzcan en la solución los trozos de cebolla.
3.- Licuen la mezcla a máxima velocidad durante 30 segundos. Luego, hagan pasar el licuado a través del
filtro.
4.,- Llenen hasta la mitad el vaso de vidrio alto con la solución filtrada y añadan tres cucharadas del jugo
concentrado de papaya. Remuevan la solución. Luego, agreguen cuidadosamente un volumen de alcohol
equivalente al del filtrado. El alcohol debe caer por las paredes del vaso para separar las dos fases.
5.- Dejen reposar durante 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos fases. A continuación,
introduzcan la bureta y extraigan las fibras blancas.
C.- RESULTADOS
Describan lo observado en cada paso del experimento.
- Cuando licuaron la cebolla con el detergente.
- Cuando filtraron lo licuado
- Cuando añadieron el jugo de papaya
- Cuando añadieron alcohol a lo filtrado.
D.- ANALISIS DE RESULTADOS.
- ¿Qué se forma en la interfase luego de añadir alcohol? ¿Que son las fibras blancas extraídas?
- ¿Para que se ha utilizado detergente en este experimento?¡Donde actúa?
- ¿Qué sentido tiene usar jugo de papaya durante el experimento? ¿Como actúa en el proceso de extracción?
- ¿Para que se ha utilizado alcohol en este experimento?¡Como actúa en el proceso de extracción?
- ¿Se podrá extraer ácidos nucleidos de otros organismos de la misma manera? Averigüen si el método usado
en este experimento puede aplicarse para cualquier tipo de tejido.
CONCLUSIONES
Revisen la hipótesis formulada, las observaciones y el análisis realizados y redacten sus conclusiones.
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EXPERIMENTO 02: EXTRACCION DE ADN DE FRESAS
MATERIALES:
- 03 Fresas maduras - media taza de agua - 01 mortero
- 01 contenedor - 02 cucharadas detergente - 02 cucharadas de sal
- 01 filtro de papel - 1/3 de taza de alcohol - 01 varilla de vidrio
- 01 paleta de madera - 01 bolsa plástica
PROCEDIMEINTO:
1.- En media taza de agua mezclar el detergente liquido y la sal. Esta será mezcla para romper la pared
celular, la membrana nuclear de la fresa. Así el ADN de la fresa, que esta en el núcleo, podrá ser extraído en
los siguientes pasos.
2.- Triturar por completo las fresas en el mortero, de esta manera se facilita el efecto de la mezcla anterior
(mezcla de extracción). Es importante no dejar trozos grandes de la fruta sin triturar.
3.- Agregar al triturado de fresas 2 cucharadas de la mezcla de extracción, agitar suavemente con la varilla de
vidrio. Dejar reposar 10 minutos.
4.- Filtrar esta mezcla con el filtro de papel y verter el liquido resultante en el contenedor de plástico.
5.- Agregar en el contenedor el mismo volumen de alcohol. por ejemplo, si hay 100 ml de extracto de fresa,
agregar 100 ml de alcohol. No agitar ni remover.
6.- Pasados unos pocos segundos, observar la formación de una sustancia turbia blanquecina (ADN) en la
superficie del líquido. Inclinar el contenedor y recoger el ADN con la paleta de madera.
