Guía Definitiva de Microbiología General
Microbiología
Es el estudio de los microorganismos que viven en forma de células aisladas o
grupos de células, incluye a los virus, que son microscópicos, pero no son
celulares.
Microorganismos
Organismo vivo que no sea visible a simple vista.
No incluye hongos ni algas porque su organización es unicelular.
Como se Clasifican
las bacterias se clasifican en dos grandes grupos: Gram-positivas y
Gram-negativas,
Quien invento la Técnica de Tinción para las Bacterias
Fue el bacteriólogo Danés Christian Gram, las bacterias Gram-positivas se ven en
el microscopio teñidas de color azul o morado y las Gram-negativas, de color rojo
o rosado.
A quien se le atribuye el diseño del primer microscopio
Anton van Leeuwenhoek.
Microscopio óptico
Es un tipo de microscopio que produce una imagen ampliada de
una muestra,
Microscopio electrónico de barrido
Se basa en la colisión de electrones sobre la muestra para lograr la
visualización.
Microscopio de luz ultravioleta
Este microscopio no ilumina la muestra con luz visible, utiliza una longitud de onda
más corta, es capaz de detectar un mayor número de contrastes, por lo que es útil
cuando las muestras son demasiado transparentes.
Partes de un microscopio
Tubo de Observación
Cañón
Lente ocular
Revolver
lentes objetivos
Pinzas
Platina
Condensador
Brazo
Tornillo Macrométrico
Tornillo Micrométrico
Diafragma
Base
Las tinciones
son las primeras herramientas que se utilizan en el laboratorio para el diagnóstico
de las enfermedades infecciosas.
Es una reacción de intercambio de iones del colorante a lugares activos de la
superficie o intercambio de estructura de la célula.
Tipos de Tinción
Clasificación
Tinción simple
La tinción de azul de algodón lactofenol
Preserva e identifica a los componentes estructurales de los hongos.
Tinción Diferencial
La tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para
análisis bacteriológico
Tinción de Ziehl-Neelsen
Se utiliza para el diagnóstico de enfermedades crónicas como la tuberculosis o la
actinomicosis.
¿Cómo se alimentan los microorganismos?
Las bacterias se alimentan de nutrientes a través de su membrana al introducir las
sustancias químicas que se encuentran en su medio ambiente y que contienen,
principalmente, carbono y nitrógeno.
Preparación de un Frotis
Flamear el asa de siembra, tomar en condiciones asépticas, una pequeña
cantidad del cultivo bacteriano en el medio sólido y transferirlo a la gota de agua.
Remover la mezcla con el asa de siembra hasta formar una suspensión
homogénea que quede bastante extendida para facilitar el secado.
Esquema de la tinción Gram
Gram Positivo-Gram Negativo
Bacteria se fija en el porta objetos
Agregar cristal Violeta
Agregar Lugol
Agregar Alcohol cetona
Agregar Safranina
Bacterias
Tamaño: entre 0.5 y 3 micras
• Formas variadas
• Unicelulares
• Microorganismos Procariotas (no tienen núcleo)
• No tienen organelos en el citoplasma
• Su membrana es rica en peptidoglucano
Características
Flagelos y Cilios (las bacterias son móviles gracias a que en su membrana los
contienen)
• Flagelos (filamentos alargados que sobresalen de un parte de la membrana)
• Cilios (vellosidad que cubren toda la membrana, sirven para que la bacteria se
desplace)
Reproducción
Su reproducción es mediante Fisión Binaria.
• Este proceso es simple – la célula simplemente necesita crecer al doble de su
tamaño y después se divide en dos.
Morfología de las Bacterias
Las Bacterias pueden ser en forma de Cocos, Bacilos, Vibrios, Espirilos.
Clasificación
• Las Bacterias se van a clasificar de acuerdo con tres criterios principales:
• Clasificación Fenotípica
• Clasificación Genotípica
• Clasificación Analítica
Rangos de temperatura y temperatura óptica
100°C muere (No hay crecimiento del microorganismo).
75°C demasiado caliente (Empieza a morir).
50 a 20°C Zona de peligro (hay crecimiento).
5 a 0°C Tiene sueño
-18°C Estado de congelación-Dormido no hay crecimiento).
Metabolismo Respiratorio
Bacterias según su forma
•Cocos Esferas
•Dicocos
•Estreptococos
•Estafilococos
•Bacilos Bastón
•Estreptobacilos
•Espirilos Espiral
•Vibrios En forma de S
Componentes de la Pared Celular
Membrana externa: formada por una bicapa de fosfolípidos donde se incrustan
proteinas, lipopolisacáridos (LPS) y porinas.
Espacio periplasmático: formado por una capa delgada de un polímero de
azúcares y aminoácidos o peptidoglicano llamado mureina.
Membrana interna: que vendría a representar la membrana plasmática de la
bacteria.
La pared celular de las bacterias Gram-positivas posee dos capas, siendo la capa
de peptidoglucano mucho más ancha que en las bacterias Gram-negativas.
Rangos de pH
Acidófilos microorganismos que crecen más rápidamente en ambientes con
valores de pH inferiores a 5.
• Alcalófilos microorganismos que se desarrollan en un ambiente con pH entre 9 y
12.
• Neutrófilos microorganismos que se desarrollan en un ambiente de valores de pH
neutro, entre 6 y 8, son más comunes en la naturaleza.
¿Cómo se alimentan los microorganismos?
Las bacterias se alimentan de nutrientes a través de su membrana al introducir las
sustancias químicas que se encuentran en su medio ambiente y que contienen,
principalmente, carbono y nitrógeno.
Medios de Cultivo
Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones
adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los
microorganismos.
Este científico mejoro las técnicas de laboratorio, relacionadas con el aislamiento
bacteriano, introdujo el concepto de medio de cultivo sólido
Robert Koch
Julius Richard Pertri
Se le atribuye el diseño de la caja petri
Walter Hesse
Sustituyó la gelatina por agar–agar para preparar los medios de cultivo sólidos,
Los medios de cultivo se clasifican de manera general en 4 grupo:
Su consistencia
Su utilización
Su composición
Su origen
Según su consistencia los medios de cultivo se clasifican en:
Solidos
Líquidos
Semisólidos
Medios comunes:
Son aquellos que poseen los componentes mínimos para que pueda producirse el
crecimiento de bacterias que no necesiten requerimientos especiales.
Medios de enriquecimiento
Son aquellos que, además de las sustancias nutritivas normales, incorporan una
serie de factores indispensables para el crecimiento de microorganismos
exigentes.
Medios selectivos
Son medios utilizados para favorecer el crecimiento de ciertas bacterias
contenidas en una población polimicrobiana.
Medios diferenciales
Se utilizan para poner en evidencia características bioquímicas que ayuden a
diferenciar géneros o especies.
Medios de identificación
Son los destinados a comprobar alguna cualidad específica que puede servirnos
para reconocer la identidad de un microorganismo.
Medios de multiplicación
Sirven para obtener una gran cantidad de células a partir de un microorganismo ya
aislado. Se emplea en la obtención de vacunas, en la investigación y en la
industria.
Medios de transporte
Se usan para el transporte de muestras clínicas, de superficies vivas e inertes que
no pueden sembrarse inmediatamente.
Paletas de Agar
Unidad formadora de colonia (UFC)
Son los parámetros que debemos considerar para efectuar los cultivos
microbianos.
Las pruebas básicas de control de calidad de los medios preparados deben
incluir: medición del pH, pruebas de esterilidad, capacidad de crecimiento y
reacción, aspecto, dureza y profundidad del agar.
Promueve intencionalmente el desarrollo de microorganismos en medios de
cultivo de y condiciones de laboratorio
Cultivo Microbiano
Este tipo de cultivo contiene una sola especie de microorganismo
Cultivo Axénico
está formado por una única especie, cepa o variedad de organismo, y por lo tanto
está desprovisto de otros organismos contaminantes
Este Tipo de cultivo contiene más de una especie de microorganismo
Cultivo mixto
Son los dispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas
•Hisopo
•Pipeta
•Aguja
•Asa bacteriológica
•Espátula y gancho
¿Métodos para el conteo de microorganismo viables?
•Conteo en placa Petri
•Conteo por filtración
•Método del número más probable (NMP)
• Determinación por microscopio
•Método de turbidez
•Determinación en peso seco en las células
Método para el conteo de microrganismos totales
•Recuento en placa
•Método en vaciado-vertido en placa
•Metodología NMP
•Método de recuento por goteo en placa
Es una célula capaz de dividirse y formar una colonia en el medio de cultuvo
Célula viable
¿Cómo se obtienen los cultivos microbianos?
Por métodos de siembra en medios de cultivo
Método de siembra por estría en placa
Es el método más fácil y el más usado para obtener cultivos axénicos.
Describe la forma de realizar la técnica de siembra por estría en placa
Con un asa de siembra se toma una muestra de la población mixta y a
continuación se hacen estrías en zigzag con el asa, cada vez se van depositando
menos microorganismos sobre la superficie de un medio sólido
¿cuándo se utilizan las técnicas de vertido en placa y extensión en placa?
se eligen cuando se ha de seleccionar una cepa apartir de una mezcla con varios
tipos de microorganismos. Para obtener un cultivo axénico mediante este método:
Método de vertido en placa
las muestras diluidas se mezclan con agar fundido y se vierten en placa. Algunas
colonias quedarán embebidas en el agar y otras crecerán en la superficie.
Método (extensión en placa)
Las muestras diluidas se siembran directamente en la superficie de la placa de
agar, extendiéndolas con ayuda de un asa de Digralsky de cristal estéril.
Cuáles son los parámetros para una esterilización húmeda correcta
Esterilización por calor húmedo
Esterilización por vapor a presión
Son, temperatura, presión y tiempo
15 min, 15 lbs, 121°c.
ESTERILIZACION
Es el conjunto de operaciones destinadas a eliminar todas las formas viables de
microorganismos, contenidos en un objeto o sustancia.
OBJETIVOS
• Para estudiar, conservar y transportar cultivos de gérmenes puros
• Para conservación de alimentos
• acondicionamiento de materiales para cirugía.
Métodos De Esterilización
físicos, químicos y biológicos
Esterilización Por Métodos Químicos
COMPARACION
Esterilización por método Físico:
• Filtración, • Fuego directo, • Agua hirviendo, • Incineración, • Radiación Luz U V,
• Calor Seco, • Calor Húmedo, Vapor a presión
Esterilización por método Químico:
• Líquidos, • Gas, • Plasma
Métodos De Esterilizacion Quimica
Esterilización por Gas: Óxido de etileno, Glutaraldehído, Formaldehído
Agentes Químicos: Orgánicos (Alcoholes, Fenoles, Aldehídos, Ácidos orgánicos,
Detergentes, Aceites esenciales) Inorgánicos (Halogenados oxidantes • HCLO •
Yodo, Metales, Ácidos Inorgánicos).
Desinfección de bajo nivel
Elimina bacterias patógenas y algunos hongos.
Desinfección de nivel intermedio
Elimina formas simples de bacterias, hongos y virus.
Desinfección de alto nivel alto
Elimina todos los microorganismos incluyendo los virus resistentes.
Esterilización química
Métodos que implica el uso de sustancias letales esterilización por método
químico
Es una forma de destruir microorganismos por combustion
fuego directo
Agentes inorganicos para esterilizar
Ácidos inorgánicos
Metales (AgNO3)
HClO
Yodo
Agentes orgánicos para esterilizar
Alcoholes
Fenoles
Aldehídos
Ácidos orgánicos
Detergentes
Aceites esenciales
Método que emplea vapor saturado
Esterilización por vapor a presión son microorganismos específicos resistentes a
un proceso de esterilización
Esporas bacterianas
Tipo covid-19
Como se prepara la zona esteril de tu mesa de trabajo
Encendiendo 2 mecheros sobre el área que utilizaremos desinfectando el área a
utilizar.
Esterilización por vapor a presión
• La esterilización por vapor a presión se lleva a cabo en un autoclave.
Indicadores biológicos
Son indicadores que determinan la letalidad de un proceso de esterilización, es
decir, indican si un material sometido a un proceso de esterilización está
completamente libre de microorganismos vivos.
