INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

CEC T MIGUEL OTH N DE MENDIZ BAL

TÉCNICO LABORATORISTA CLÍNICO

CONTROL DE CALIDAD
PRACTICAS DE LABORATORIO

5° SEMESTRE

Nombre del alumno: ____________________________________________________________

Grupo: _______________________________ No. de Equipo: ___________________________

Profesores: _______________________________________________________________________

_______________________________________________________________________

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 PRÁCTICA 1
ORGANIZACIÓN Y FUNCIÓN DEL LABORATORIO DE CONTROL
DE CALIDAD.

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.

Conoce el reglamento del laboratorio así como la normatividad que rigen los laboratorios de
análisis clínicos (NOM-166-SSA-1997, NOM-087-ECOL-1995, NOM-026-STPS-1994).

INTRODUCCIÓN.

Todos los laboratorios clínicos deben disponer de un sistema para el aseguramiento de la calidad,
ya que el Control de Calidad es el Conjunto de métodos y actividades de carácter operativo
utilizadas para satisfacer el cumplimiento de los requisitos de calidad de acuerdo a la normatividad
actual. Es un Proceso regulador a través del cual medimos la calidad real de un resultado, la
comparamos con los objetivos de calidad y actuamos sobre la diferencia, además es diseñado
para detectar, medir y controlar dentro de un nivel de aceptación establecido,, significando
mantener dentro de los límites para buscar la excelencia en el trabajo y garantizar la confiabilidad
en los resultados.
El funcionamiento de los laboratorios clínicos está sustentado principalmente en las siguientes
normas:

Nombre Expedido Año Carácter

Norma Oficial Mexicana Secretaría de Salud 2002 Nacional
NOM-087-ECOL-SSA1-
2002, Protección ambiental
- Salud ambiental -
Residuos peligrosos
biológico-infecciosos -
Clasificación y
especificaciones de manejo
Norma Oficial Mexicana Secretaría de Salud 1997 Nacional
NOM-166-SSA1-1997, para
la organización y
funcionamiento de los
laboratorios clínicos.
Norma Oficial Mexicana Secretaría de Salud 1994 Nacional
NOM-077-SSA1-1994, que
establece las
especificaciones sanitarias
de los materiales de
control (en general) para
laboratorios de patología
clínica
Norma Oficial Mexicana Secretaría de Salud 1994 Nacional
NOM-078-SSA1-1994, que
establece las
especificaciones sanitarias
de los estándares de

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calibración utilizados en las
mediciones realizadas en
los laboratorios de
patología clínica
Norma Oficial Mexicana Secretaría de Salud 1994 Nacional
NOM-078-SSA1-1994, que
establece las
especificaciones sanitarias
de los estándares de
calibración utilizados en las
mediciones realizadas en
los laboratorios de
patología clínica
Norma Oficial Mexicana Secretaría de Salud 1994 Nacional
NOM-064-SSA1-1993, que
establece las
especificaciones sanitarias
de los equipos de reactivos
utilizados para diagnóstico
Norma Oficial Mexicana NOM- Secretaría de Salud 1993 Nacional
065-SSA1-1993, que
establece las especificaciones
sanitarias de los medios de
cultivo. Generalidades

El Laboratorio Clínico es uno de los servicios más importantes de ayuda diagnostica para los
pacientes. Correctamente diseñado y administrado brinda respuestas oportunas, con calidad,
precisión y exactitud en los exámenes.
En el laboratorio, una determinación puede efectuarse utilizando diversas técnicas, para las que se
requieren diferentes equipos y diferentes instalaciones. La carga de trabajo de cada laboratorio
influye también en el tipo de equipo y de instalaciones requeridas.
El reglamento del Laboratorio es un aporte al alumno, profesores y personal de apoyo, ya que
contempla normas específicas para el funcionamiento, el manejo de las instalaciones, sobre los
productos y se comparte esta responsabilidad para seguir los lineamientos que nos marca y
obtener resultados satisfactorios del trabajo en las tres etapas de Control de Calidad.

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ACTIVIDADES
1. Leer las normas oficiales indicadas y que nos rigen aproximadamente por una hora.
2. Ilustra con un mapa mental todos los conceptos que se manejan en las normas oficiales
mexicanas, recuerda que realizaran uno por equipo.

CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN,

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CUESTIONARIO DE INVESTIGACION.

1.- Menciona las normas que respaldan el reglamento de tu laboratorio clínico.

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_______________________________________________________________________________

2.- ¿Qué importancia tiene el reglamento del laboratorio clínico.

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_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

CONCLUSIONES.
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_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
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BIBLIOGRAFÍA.

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 PRÁCTICA 2

EJERCICIO DE PIPETEO.
RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.
Ejecuta las técnicas de pipeteo en el laboratorio clínico de acuerdo a la normatividad vigente.

INTRODUCCIÓN

Para que los resultados del laboratorio sean válidos, los procedimientos requieren de medidas
exactas de la muestra y de los reactivos, por lo tanto es necesario disponer de pipetas diversas,
unas para transferir cantidades de soluciones, sin importar el volumen y otras en las que se
requieren cantidades exactas, gracias al empleo de éstas con materiales de alta calidad y de los
procesos disminuyen en gran medida las variaciones debidas a causas mecánicas. La amplia
gama de pipetas permite contar siempre con los instrumentos idóneos para cada uso.

Las Pipetas son tubos de cristal o plástico abiertos por ambos lados, que se usan para transferir
cantidades precisas de líquido de un recipiente a otro. Se usan normalmente para volúmenes entre
1 y 100 mililitros.
Existen pipetas volumétricas, graduadas, Mohr, Serológica
PIPETAS VOLUMÉTRICAS

Se usan para medidas exactas, ya que están diseñadas para sólo un volumen y están
calibradas para ese volumen.
Tienen una ampolla central que determina el volumen de la pipeta. Normalmente entre 1 y 100
ml.
Se deben utilizar cuando la exactitud y reproducibilidad sean imprescindibles.

Las especificaciones impresas en una pipeta volumétrica indican:

Cuánto líquido transfiere la pipeta si se enrasa a la línea de calibración del cuello.

La temperatura a la que se ha calibrado.
Si es una pipeta TD (to deliver) o TC (to contain).

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ESPECIFICACIONES DE LA PIPETA VOLUMÉTRICA

Cuando se vacíe una pipeta volumétrica, se deja salir el líquido. Pero nunca se fuerza
soplando.
Después de vaciada, no se debe forzar soplando la salida de la pequeña cantidad de líquido
que permanece en la punta.

Las pipetas volumétricas no son pipetas de vaciado por soplado (blow-out)

PIPETAS GRADUADAS (soplando)

Las pipetas graduadas son un tubo recto de cristal o plástico con estrechamiento en uno de
sus extremos. Están calibradas en pequeñas divisiones de manera que se pueden medir
diferentes cantidades de líquido con la misma pipeta.
Normalmente se usan para medir cualquier cantidad entre 0.1ml y 25.0ml.
No son tan exactas como las volumétricas debido a que las imperfecciones de su diámetro
interno tienen mayor efecto en el volumen dispensado.

Las pipetas graduadas se dividen en:

Pipetas de MOHR y SEROLÓGICAS.
PIPETAS MOHR
La graduación en ellas siempre termina antes de la punta

PIPETAS SEROLÓGICAS La graduación en ellas llega hasta la punta.

Las especificaciones en una pipeta graduada se encuentran impresas en el cuello de la pipeta, que
indican:
El volumen máximo de líquido que se puede transferir.

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 El tamaño de las divisiones de la pipeta.
La temperatura de calibración.
Si es una pipeta TD (to deliver) o TC (to contain).

Pipetas de 5ml ; 1/10 ml, TD 20oC

Las especificaciones de una pipeta como las que se muestran indican que la pipeta está calibrada
en divisiones 1/10ml y que dispensará hasta 5ml con los márgenes de error publicados a 20ºC.

PIPETAS DE SOPLADO (BLOW OUT)

Las pipetas de soplado (blow out) son pipetas serológicas que tienen una banda esmerilada o dos
anillos alrededor del cuello.
Esto significa que después de dejar salir el líquido por gravedad, la última gota que queda en la
punta debe ser forzada a salir.
La banda esmerilada no se debe confundir con bandas más gruesas de color o con puntos
coloreados, que son un código del fabricante para indicar el máximo volumen de la pipeta.
Sólo se debe soplar una pipeta serológica si tiene una banda esmerilada o dos anillos estrechos.

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MANEJO Y TRATAMIENTO DE LAS PIPETAS

Las pipetas astilladas y rotas se deben reemplazar ya que son peligrosas y pueden afectar a la
precisión de las medidas.
NUNCA se debe pipetear con la boca.
La pipeta se debe sostener por el tercio superior y evitar tocar nada con la punta.

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Las pipetas sucias se deben desechar colocándolas en una solución de agua jabonosa. Las
pipetas para tirar se deben colocar en un recipiente de cartón. No se deben dejar las pipetas en
fregaderos. Si se trabaja con materiales radiactivos debe asegurarse desechar las pipetas en
contenedores debidamente marcados.

MANEJANDO PIPETAS ESTÉRILES

Cuando se usen pipetas estériles, hay que tener en cuenta las técnicas de esterilidad apropiadas.
Si se usa un paquete de pipetas desechables estériles, abrir solo una esquina del paquete,
empujar una pipeta a través de esta abertura y cerrar inmediatamente para evitar contaminación.

Si se usan pipetas estériles en una canasta de pipetas, colocar la canasta de lado, retirar la tapa,
sacar una pipeta y colocar la tapa inmediatamente.

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10
TRANSFERIR UN VOLUMEN PRECISO DE LÍQUIDO
Para evitar pipetear con la boca se usa una propipeta, o pipeteador, para subir el líquido a la pipeta
y así evitar hacerlo con la boca. Hay muchos tipos de propipetas manuales y
Automáticas.

Colocar la punta de la pipeta dentro del líquido. Crear presión negativa (succionar) con el
instrumento que estemos usando. El líquido subirá por el interior de la pipeta y formará una
superficie curva contra el cristal. A esta superficie se le llama menisco.

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11
Materiales utilizados: Soluciones
Pipeta de 10 cm Yodo
Pipeta de 5 cm Refresco rojo
Pipeta de 1 cm Glicerina
Pipeta Pasteur Aceite
Vaso de precipitados Azul de metileno
Matraz de Erlenmeyer Sal (sol salina)
Tubos de Ensayo
Gradilla
Probeta

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ACTIVIDADES DE LOS ALUMNOS.

Actividad 1.

Observa las pipetas que se encuentran en tu mesa de trabajo, clasifícalas y elabora un cuadro en
donde registres las características y uso de cada una de ellas.

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Actividad 2.

Procedimiento:
1.- En un matraz de Erlenmeyer coloca 50ml de agua y 1 ml de lugol (para poder apreciar las
cantidades pipeteadas).
2.- Toma alícuotas de la solución madre de la siguiente manera: 0.1 ml, 0.5ml, 1ml, 5ml, 10ml.
3.- Coloca cada alícuota en cada tubo de ensaye, recuerda rotular tus tubos.
4.- Observa y anota tus resultados
5.- Repite el procedimiento anterior con cada uno de las soluciones proporcionadas por el
laboratorio.
Lo anterior se repetirá de acuerdo a los colorantes que se te proporcionan en la práctica.

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CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN.
1.- ¿Qué son las pipetas?
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2.- ¿Cuál es el uso de las pipetas?

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CUESTIONARIO DE PRÁCTICA.

1.- Escribe la clasificación de las pipetas.

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2.- ¿Cuál es el fundamento de las pipetas.

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3.- Describe brevemente la técnica de pipeteo.

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Conclusiones.

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BIBLIOGRAFÍA.

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 PRÁCTICA 3

CONTROL DE LIMPIEZA Y SECADO.

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO

Elimina desechos de material contaminado y no contaminado impregnado en el material utilizado

en el laboratorio de análisis clínicos.

INTRODUCCIÓN.
En el laboratorio existen distintos tipos de materiales: vidrio, plástico, porcelana, de acuerdo a las
exigencias del laboratorio, se tendrá que elegir en cada momento el material según el uso que le
quiera dar, todo el material debe estar limpio y libre de material orgánico contaminado y no
contaminado, ácido y otros, para tener éxito en todos los procesos que se desarrollan en el
laboratorio clínico.
El material de laboratorio que menos se usa en el laboratorio clínico es el de porcelana, solamente
se utiliza cuando se necesitan materiales que resistan altas temperaturas, estos suelen estar
vidriados en el interior para evitar que se adhieran partículas a la superficie.
El material de vidrio se caracteriza porque tiene mucha resistencia química, tiene mayor resistencia
que el plástico, es muy estable se caracteriza por su transparencia. Todo el material de vidrio no se
utiliza para todas las técnicas, en ocasiones para algunas se utilizan vidrios especiales.
La mayoría de los utilizados son vidrios borosilicatados, los cuales ofrecen gran resistencia térmica
(vidrio pírex, quimax). Cuando se emplea el material de vidrio hay que tomar algunas precauciones:
No los podemos someter a cambios bruscos de temperatura (provocan tensiones que pueden
romper el crista), hay que colocar la estufa de secado o esterilización en frío, ir calentándolo
después, y cuando acaba el tiempo de secado deje enfriar el material, no se debe aplicar fuerza
sobre llaves, tapones de vidrio. No se debe conservar solución concentradas de bases en material
de vidrio de borosilicato, porque son substancias muy cáusticas que pueden destruir la calibración
del aparato.
El Plástico puede ser de uso múltiple, p ej. Las probetas, matraces, vasos de precipitados, las
placas de Petri. El plástico ofrece algunas ventajas frente al vidrio, es resistente a la rotura, tienen
un peso bajo. Los utensilios de plástico de laboratorio son monómeros orgánicos
polimerolarizadas. Hay gran variedad de plásticos, van a tener distintas propiedades físicas y
químicas (por ejemplo, poliestireno, PVC, polipropileno). Cuando se utiliza un plástico hay que
tener en cuenta el tipo de plástico que se emplea porque algunos plásticos pueden ser atacados
por disolventes.
Existen diferentes mezclas de preparados para el lavado de material y otras soluciones, de
acuerdo a los residuos que se manejen en los laboratorios, como es:
La mezcla crómica: que es un preparado toxico, corrosivo y peligroso para el medio ambiente,
puede causar cáncer por inhalación y alteraciones genéticas hereditarias, provoca quemaduras
graves y puede causar sensibilización en la piel.
Mezcla para el lavado de preparaciones de desecho: Agua de la llave con alcohol al 96% y Xilol.
Se utiliza en substancias difíciles de eliminar.

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16
Mezcla para material de cristal nuevo: Alcohol al 96% y una parte de Ácido Clorhídrico
concentrado.
Detergente Extran alcalino.
Solución detergente Alkox.
El procedimiento para la realización de un buen lavado del material de laboratorio:
PRELAVADO.
El objetivo es brindar una protección al personal que manipulará el material durante el traslado a la
central de esterilización, durante éste proceso el personal deberá tomar las precauciones
correspondientes, utilizando métodos de barrera para su propia protección (guantes resistentes,
camisolín impermeable, protectores oculares). El prelavado se realizará con un agente líquido
tensioactivo biodegradable de uso quirúrgico, de PH neutro, no iónico y que no deje residuos. El
material debe ser enjuagado, el procedimiento debe ser en el lugar en donde fue utilizado, éste
debe llegar al servicio de esterilización en forma inmediata: libre de materia orgánica y residuos
visibles, debe estar contenido en recipientes rígidos impermeables y con tapa. El prelavado facilita
el proceso posterior de esterilización.
LAVADO.
La condición fundamental que deben observar los materiales previos a la desinfección y
esterilización es la LIMPIEZA, que producirá la eliminación de la suciedad y la disminución de la
carga microbiana inicial. El lavado se hará utilizando agentes neutros de limpieza, cepillo de cerdas
blandas, agua a temperatura entre 40oC -50oC, perfectamente sumergido.

ENJUAGADO.
Se debe enjuagar con suficiente cantidad de agua corriente, debe tener cuidado de no salpicar el
ambiente físico u otras personas.
SECADO.
Se debe realizar inmediatamente después del enjuagado para evitar la contaminación posterior y
deterioro del material. El secado manual se hará utilizando paños de tela muy absorbente o de
fibra celulosa, también se puede utilizar aire filtrado, máquinas secadoras o estufas secadoras.
NOTA: Desinfección y esterilización: el material que haya estado en contacto con productos
infecciosos tiene que desinfectarse antes de volver a ser usado, y para ello se utilizan detergentes
desinfectantes

Material de laboratorio.

Pipetas de vidrio

Pipetas de plástico

Probetas de vidrio

Probetas de plástico

Matraz

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17
Vaso de precipitados

Actividad 1
Procederás a lavar el material siguiendo el procedimiento de tu práctica.
1. Coloca el material en una tarja con agua con agente líquido tensioactivo biodegradable
durante 15 min.
2. Enjuaga a chorro de agua.
3. Lava con escobillones o fibras según el recipiente a utilizar.
4. Enjuaga el material
5. Escurre el material
6. Realiza la prueba de lavado de material libre de sosas, para lo cual colocara unas gotas de
indicador (solución colorante de naranja de metilo).
7. Si existen restos de jabón el colorante virara a color amarillo, en caso contrario
permanecerá el color del indicador.
8. Si el indicador vira repetir desde el punto 2, si no es así repetir desde el paso 4.
9. En caso de material de plástico dejarlo secar a temperatura ambiente.
10. En el caso del material de vidrio escúrrelo y colócalo en la estufa para la etapa de secado.
11. Proteger el material para uso posterior.

Actividad 2

Repetir los pasos de la actividad 1 sustituyendo el jabón por uno con alto contenido de sosa
(detergente roma).
Actividad 3.
Compara los resultados con el experimento anterior.
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Actividad 4.
Anotar tus resultados.
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Actividad 5.
Escribe un diagrama de flujo con el procedimiento para el lavado del material.

CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN.

1.- ¿Qué finalidad tiene el lavado de material en el Laboratorio Clínico?

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2.- ¿Qué diferencia existe entre lavado de material y esterilización de material?

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CUESTIONARIO DE LABORATORIO.

1.- ¿Qué barreras debes utilizar para el lavado de material en el laboratorio clínico?
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2.- ¿Por qué se recomienda que el lavado del material sea entre 40oC y 50oC?
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3.- ¿Qué procedimiento se utiliza para el secado de material de vidrio y de plástico?

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CONCLUSIONES.
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BIBLIOGRAFÍA.

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 PRÁCTICA 4
APLICACIÓN DE LA ESTADÍSTICA

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO

Aplica la estadística en el control de calidad, dentro de los laboratorios de análisis clínicos.

INTRODUCCIÓN.
Usualmente el laboratorio tiene que mantener una documentación exacta, realizar procedimientos
de calibración regularmente, así como realizar el control de calidad para cada método utilizado.
No siempre pueden garantizarse buena exactitud y buena precisión en todos los análisis a pesar
de utilizar buenas técnicas, buenos instrumentos, buenas metodologías, buenos reactivos y
buenos equipos automatizados. Sin medidas de precaución especiales no es posible siempre
detectar los problemas de los análisis de rutina, a menos que los resultados lleguen a ser
mayoritariamente erróneos, por lo que los métodos estadísticos son una parte esencial del Control
de Calidad. Uno de los mecanismos que permite visualizar un proceso, es el uso de la estadística
como herramientas de apoyo, ya que ésta facilita la apreciación de la variación de los
componentes de un proceso industrial, analítico, de investigación, etc. brindando confiabilidad al
proceso, ya que determina el grado de variación presentada.
Las medidas extras que se tomen para asegurar la validez de los resultados analíticos y detectar
los problemas en el sistema analítico son los componentes primarios de un Programa de Control
de Calidad.
En el uso de procedimientos estadísticos aplicados al control de calidad en los laboratorios clínicos
se utilizan las medidas estadísticas siguientes:

- Medidas de Tendencia Central MEDIA ARITMÉTICA ( )

Permite visualiza los valores MEDIANA (m)

Medios entre los datos obtenidos MODA (M)

- Medidas de Dispersión RANGO (R)

Permiten visualizar la variabilidad DESVIACIÓN O VARIANZA (S)

Que se presenta entre los datos DESVIACIÓN ESTANDAR (DS)

- Medidas descriptivas COEFICIENTE DE VARIACION (CV)

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21
MEDIA ARITMÉTICA (X): Es el promedio de los valores obtenidos. Se calcula sumando los datos
que se quieren promediar, dividida entre el número de datos. Se representa por una X testada. Es
la medida de tendencia central más utilizada.

MEDIANA (m): Corresponde al valor que se encuentra en el centro cuando los datos están
ordenados, divide a los datos en dos partes iguales.
Para obtener la mediana:

1. Ordenar los datos en forma creciente o decreciente.

2. El lugar central se obtendrá al dividir el número de valores entre 2
3. Si el número de valores es impar, al dividirlos entre 2 se observa que queda un número
igual de valores a la derecha y a la izquierda de un valor central, el cual será la mediana.
4. Si el número de valores es par, al dividirlos entre 2 se observa que queda igual número de
valores a derecha e izquierda, por lo que se toman los dos valores centrales, las cuales se
promedian y así se obtiene la mediana.

MODA (M): Es el valor que se repite mayor número de veces dentro de una serie de datos.

A) Si no se repite ningún valor, se dice que los datos no tienen Moda.

B) Si un solo valor se repite el mayor número de veces se dice que los datos son Unimodales
.
C) Si dos valores se repiten el mismo número de veces, se dice que los datos son Bimodales.
D) Si todos los valores se repiten el mismo número de veces, los datos serán multimodales.

Para obtener la MODA, los valores se ordenan en forma creciente o decreciente, de acuerdo ala
frecuencia con la que se presentan, para seleccionar el o los valores de mayor frecuencia.

RANGO ®: Permite observar la amplitud entre el valor mínimo y el máximo, lo cual se obtiene de
restar el valor menor al mayor.
DESVIACION O VARIANZA (S): Es la diferencia del valor obtenido menos la media aritmética (X-
X). Esta desviación es positiva o negativa según se encuentre a la derecha o izquierda de la madia
aritmética. La desviación mide el grado de dispersión de los valores respecto a la media.

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22
DESVIACIÓN ESTÁNDAR.
Es el promedio de las desviaciones en una serie de datos. Es la raíz cuadrada de la varianza. Se
representa como SD, DS, o .
Se usará la fórmula de Desviación Estándar para hacer inferencia estadística que es la siguiente:

COEFICIENTE DE VARIACIÓN (CV): Es la expresión de la variación estándar en porcentaje. El

Coeficiente de Variación indica qué porcentaje de la media aritmética representa la Desviación
Estandar.

Error absoluto: diferencia entre el resultado del laboratorio y la media.

Error relativo (%): relación porcentual entre el error absoluto y la media.

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23
Error relativo SDI: relación entre el error absoluto y la desviación estándar del grupo (su mismo
método o el global de métodos).

El % indica sólo el tamaño del error, mientras que el error relativo o SDI proporciona además una
indicación de la posición del laboratorio respecto de los demás laboratorios.
Ej: un error de +2,7 SDI tiene el mismo significado para cualquier resultado e indica que el valor
obtenido está alejado de los resultados obtenidos por la mayoría de laboratorios.
Ej: un error relativamente importante en su tamaño (p.e. -15%) y, en cambio, cercano a los
resultados de los demás laboratorios (p.e. -1,1 SDI) ocurrirá cuando la dispersión de resultados
entre laboratorios (la SD grupo) sea elevada.

Error tolerable (%): error máximo tolerable (EMT) para cada analito. En general se siguen los
c i e io del CLIA 88 (Clinical Labo a o Imp o emen Ac ).

Los cálculos se realizan solamente cuando el número de laboratorios que han remitido resultados
no aberrantes es superior a 20.
También se proporcionan sendos gráficos de Levey-Jennings en los que se muestra la evolución
del error.
Cada laboratorio remite los resultados en las unidades que normalmente utiliza, la organización de
PREVECAL unifica las unidades para obtener los datos pertinentes y, una vez realizados los
cálculos, vuelve a transformar los datos de forma que cada laboratorio recibe la información en sus
propias unidades.

MATERIAL.
Lancetas.
Torundas.
Aparato medidor de glicemia.
Dispositivo de punción.
Tiras teste.
Hojas milimétricas.

ACTIVIDADES.
Realizar determinaciones de glucosa siguiendo el siguiente procedimiento.

Página
24
1- En el dedo índice se realiza asepsia
2.- Se pincha con una lanceta para obtener una pequeña muestra de sangre
3. -Coloca la gota de sangre en la tira reactiva
4.- Se obtiene el resultado con el aparato correcto
5.- Se anotan los resultados en un cuadro similar al anterior (tu lo diseñas). Y lo anexas a tu
práctica.
6.- Se obtienen resultados de 20 muestras diferentes

Con la seria de resultados obtenidos

Calcula los resultados siguientes:
MEDIA ARITMÉTICA ( )_____________________.

MEDIANA (m)_____________________________.

MODA (M)________________________________.

RANGO (R)________________________________.

DESVIACIÓN O VARIANZA (DS)_______________.

COEFICIENTE DE VARIACIÓN (CV)_____________.

No. de determinación Nivel de Glucosa en No. de determinación Nivel de Glucosa en

mg/dl mg/dl
1.- 6.- 11.- 16.-
2.- 7.- 12.- 17.-
3.- 8.- 13.- 18.-
4.- 9.- 14.- 19.-
5.- 10.- 15.- 20.-

CÁLCULOS.

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25
CUESTIONARIO DE INVESTIGACION.
1.- ¿Cuáles son las medidas de tendencia de medidas central?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
2.- ¿Cuáles son las medidas de desviación?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

3.- ¿Qué nos indican las medidas de tendencia central?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

4.- ¿Qué nos indican las medidas de desviación?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

5.- ¿Por qué es importante la aplicación de la estadística en el Control de Calidad?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

CONCLUSIONES.

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__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA.

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 PRÁCTICA 5

VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DEL MATERIAL

VOLUMÉTRICO

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.

Verifica la calibración del material volumétrico de acuerdo a la normatividad.

INTRODUCCIÓN.
La verificación de la calibración del material volumétrico es debido a que se utiliza para mediciones
y transferencias exactas de volúmenes, todos ellos se caracterizan porque pequeñas variaciones
de volumen dan lugar a una variación grande, todo este material está calibrado para que sea
utilizado de una manera determinada y a una temperatura estándar, que normalmente es de 20ºC,
esto tiene que ser así porque el volumen que ocupa una determinada masa de un líquido varía con
la temperatura.
Existen diferentes formas, tipos y tamaños de matraces, así como de diversas calidades como los
siguientes:
Matraces cónico: Se utiliza para hervir soluciones cuando hay que reducir a un mínimo la
evaporación, son útiles para titulaciones y para empleo general.
Son de fondo plano, de cuerpo esférico aplanado en su base para facilitar su sustentación sobre la
mesa de trabajo.
Estos matraces presentan tres variantes:
1.- Boca ancha o esférica.
2.- Cuellos largos o cortos en sus anchos
3.-Tubuladas como el Kitasato.
Los Kjeidahl tienen cuerpo en forma de pera y cuello ancho muy largo. De todos ellos existen en el
mercado colecciones de tamaño entre 25 y 2000 ml y de algunos tipos reforzados hasta 10 000ml.
MATRACES REDONDOS DE FONDO PLANO. Se emplean para preparar soluciones. Suelen ser
de cristal refractario sin embargo es necesario interponer una tela de asbesto o una tela de
alambre entre ellos y la llama.
MATRACES REDONDOS DE FONDO REDONDO. Estos soportan mejor el calor directo y pueden
colocarse sobre el mechero. Para calentar solventes orgánicos o para manipulaciones muy
prolongadas, es preferible emplear matraces con cuello esmerilado, que pueden recibir los
condensadores correspondientes y permiten un cierre mucho más hermético que los tapones de
caucho o corcho.
MEDICIONES VOLUMÉTRICAS
En las mediciones volumétricas se debe ser muy cuidadoso, para disminuir los errores debido a la
formación de gotas, los aparatos no deben tener grasa. Esta se remueve con mezcla crómica.

Página
27
LECTURA DE MENISCO.
1.- En soluciones transparentes se lee en la parte inferior del menisco.
2- En las soluciones coloreadas se lee la parte superior de la columna líquida.
3.- Todas las lecturas deben hacerse colocando la visión a nivel del menisco para evitar error de
paralaje.
4.- La temperatura del líquido debe ser próxima a la temperatura de calibración, habitualmente
20oC y los límites aceptados son más o menos 10oC. Al medir Hg. Léase la parte superior del
menisco.

MATRACES AFORADOS. Son matraces piriformes de cristal de alta calidad. Tienen una señal de
calibración en la parte estrecha del cuerpo y siempre están calibrados para contener el volumen
establecido, se emplean para preparar soluciones muy exactas.

VIDRIO VOLUMÉTRICO. Se encuentra de excelente calidad en el mercado español,

manufacturado en el país de importación Pírex (Francia) o Jena (Alemania), este último en las
variedades Duran-50 G-20.
Las características principales de estos vidrios son:
1.- Notable neutralidad química.
2.- Dureza y escasa dilatación.
3.- Permite confeccionar con ellas paredes más gruesas y por lo tanto más resistentes al choque.
Las tolerancias de sus aforos se indican en los catálogos de los fabricantes o en los boletines con
que se acompaña el artículo, la temperatura de calibración debe constar en el boletín o en el
aparato.

LOS PICNOMETROS. Son matraces aforados esenciales para determinar pesos específicos, sus
capacidades suelen ser de 10, 25, o 50 ml, calibrados a 15 o 20 oC.

NORMAS GENERALES PARA LOS TRABAJOS DE CALIBRACIÓN.

Todos los aparatos volumétricos han de estar aparentemente libres de agua antes de calibrarlos.
Las buretas y las pipetas no se secan, los matraces aforados se escurren a fondo.
El agua para la calibración se agita bien, antes de usarla para permitir que alcance el equilibrio
térmico con el ambiente. Se garantiza mejor esta condición registrando la temperatura del agua a
intervalos de tiempos frecuentes y se espera hasta que no se observan nuevos cambios.
Para las calibraciones de 50 ml o inferiores, se emplea una balanza analítica. Las necesidades de
la pesada nunca exigirán más que la aproximación de las balanzas de máxima carga del tipo de
platino único. Para recoger volúmenes pequeños son apropiados los pesa filtros, o los matraces de
Erlenmeyer bien tapados.

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28
MATERIAL
1. Matraces aforados de 25, 100 y 250ml
2. Vasos de precipitados
3. Pipetas Pasteur
4. Balanza analítica
5. Balanza auto-gram
6. Agua destilada y alcohol
7. Franela

Calibración de material volumétrico

Consiste en determinar el volumen que realmente contiene o que puede trasvasar un instrumento
en particular. Se hace midiendo la masa de agua contenida o trasvasada a un recipiente, y usando
la densidad del agua para convertir la masa en volumen. De ese modo puede determinarse si el
material se encuentra dentro del límite de tolerancia especificado.
Todo material fue fabricado para medir o contener un volumen determinado de agua a 20ºC, por
ello durante la calibración es necesario tener en cuenta la temperatura para realizar las
correcciones pertinentes por la dilatación térmica de las soluciones y del material de vidrio.

Densidad del agua

Volumen de un gramo de agua (mL)
Temperatura Densidad A la temperatura Corregido a
(ºC) (g/mL) de trabajo 20ºC
10 0.9997026 1.0014 1.0015
11 0.9996084 1.0015 1.0016
12 0.9995004 1.0016 1.0017
13 0.9993801 1.0017 1.0018
14 0.9992474 1.0018 1.0019
15 0.9991026 1.0020 1.0020
16 0.9989460 1.0021 1.0021
17 0.9987779 1.0023 1.0023
18 0.9985986 1.0025 1.0025
19 0.9984082 1.0027 1.0027
20 0.9982071 1.0029 1.0029
21 0.9979955 1.0031 1.0031
22 0.9977735 1.0033 1.0033
23 0.9975415 1.0035 1.0035
24 0.9972995 1.0038 1.0038
25 0.9970479 1.0040 1.0040
26 0.9967867 1.0043 1.0042
27 0.9965162 1.0046 1.0045
28 0.9962365 1.0048 1.0047
29 0.9959478 1.0051 1.0050
30 0.9956502 1.0054 1.0053

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29
El vidrio pírex y otros vidrios borosilicatos se dilatan un 0.0010% por grado a temperaturas
próximas a la temperatura ambiente.

ACTIVIDADES
Verificar la calibración de matraces aforados. Utiliza las balanzas analítica y Auto-gram; el mismo
matraz debe pesarse en ambas balanzas y registrar los datos en las tablas correspondientes.

Procedimiento de calibración para matraces aforados:

A) Pesa el matraz aforado vacio y registra el peso.
B) Llena el matraz aforado con agua destilada hasta el aforo.
C) Pesa el matraz con agua destilada
D) Regresa el líquido al vaso
E) Registra la temperatura ambiente en el momento del experimento
F) Calcula el límite de tolerancia para material volumétrico empleando la siguiente formula:

Peso del recipiente con agua Peso del recipiente vacío = Volumen del matraz
Densidad del agua a temperatura ambiente

NOTA: Consulta la densidad del agua en base a la temperatura registrada en la tabla.

El límite de tolerancia.
Registro de datos obtenidos en la balanza analítica.
Peso Peso Diferencia de Temperatura Densidad del
Matraz vacio Matraz peso ambiente agua a temp.
c/agua ambiente
1

Registro de datos obtenidos de la balanza autogram.

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30
 Peso Peso Diferencia de Temperatura Densidad del
Matraz vacio Matraz peso ambiente agua a temp.
c/agua ambiente
1

Registro de datos de la verificación de volumen en matraces aforados.

Datos obtenidos de la balanza analítica
Volumen Tolerancia Volumen calculado El matraz se
registrada en el encuentra
matraz calibrado (Sí o
No)
1

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31
Datos obtenidos de la balanza auto-gram.
Volumen Tolerancia Volumen calculado El matraz se
registrada en el encuentra
matraz calibrado (Sí o
No)
1

2.- Realiza un diagrama de flujo con los pasos a seguir en la calibración de material volumétrico.

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32
CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN
1.- ¿Qué es el material volumétrico?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

2.- ¿Por qué consideras que es importante la calibración del material volumétrico?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

CUESTIONARIO DE LABORATORIO.
1.- ¿Por qué es importante considerar las tablas establecidas de la densidad del agua?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

2.- ¿Qué aspectos se consideran en la calibración del material volumétrico?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

3.- ¿Qué balanza consideras que sea la más confiable para obtener el peso de los matraces y por
qué?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

CONCLUSIONES.
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA.

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33
 PRÁCTICA 6
VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DEL
ESPECTROFOTÓMETRO

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO:

Verifica la calibración de espectrofotómetro de acuerdo a la normatividad vigente.

INTRODUCCIÓN.

Existen en la naturaleza diferentes tipos de radiaciones electromagnéticas como: rayos cósmicos,

gama, X, radiación visible, ultravioleta, infrarroja, etc. El ordenamiento secuencial de estas formas
de radiación se conoce como espectro electromagnético.

ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO

Micro
ondas
Rayos Rayos Rayos Ultravioleta Visible Infra Ondas de
radar
cósmicos
Gamma X Rojo radio

Violeta Índigo Azul Verde Amarillo Naranja Rojo

ESPECTRO VISIBLE
Las radiaciones electromagnéticas se propagan describiendo ondas y a la distancia que hay entre
las crestas o valles de dos ondas adyacentes, medidas a lo largo de la línea de propagación, se
llama longitud de onda y se representa con la letra A (lambda).

Página
34
Unidades de la longitud de onda
DENOMINACION SIMBOLO EQUIVALENCIA

Centímetro cm 1x10-2 m

Micrómetro 1x10-6 m

Milimicra m 1x10-9 m

Nanómetro nm 1x10-9 m

Ángstrom A 1X10-10 m

De la tabla anterior podemos observar que: m = nm

Y que: nm 1x10-1 A

El color de los cuerpos depende de la longitud de onda de la radiación electromagnética que

absorben selectivamente. Con base en esta absorción selectiva, tenemos luz policromática cuando
la radiación electromagnética está compuesta por dos o más longitudes de onda, o sea, dos o más
colores y, luz monocromática, cuando comprende un solo color o longitud de onda.
La medida de la absorción o emisión de la radiación electromagnética al pasar a través de una
sustancia, en función de la longitud de onda, para la cuantificación y la determinación de la
naturaleza de esa sustancia se conoce como espectrofotómetro es el aparato por medio del cual
obtenemos ésta medición. El método fotométrico, es de los más importantes en el análisis
cuantitativo y cuando se aplica en la región ultravioleta, también nos proporciona información sobre
la estructura de las moléculas.

EN UN LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS LOS ANALITOS (glucosa,creatina,hemoglobina

etc) SE PUEDEN DETERMINAR POR LAS TECNICAS ESPECTROFOTOMETRICAS SU
CONCENTRACION EN LOS FLUIDOS CORPORALES, POR LO TANTO SU DETERMINACION
SE REALIZA POR LAS SIGUIENTES METODOLOGIAS:
CURVA DE CALIBRACION
METODO DIRECTO
METODO DEL FACTOR

Se debe considerar algunas medidas que son importantes para la buena aplicación de las técnicas
espectrofotométricas, como son:

Preparación de soluciones estándar.

Selección de la longitud de onda.
Elaboración de la curva estándar de calibración.
Determinación de las concentraciones de las soluciones problemas.

Página
35
SELECCIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA:
Para seleccionar la longitud de onda que nos permita obtener lecturas de absorbancia que tengan
una alta sensibilidad analítica, se requiere elegir dentro del rango de longitudes de onda que
comprenden el espectro visible o ultravioleta, aquella donde se tiene un máximo de absorbancia
para cada solución en estudio; lo cual se obtiene efectuando un espectro de absorbancia.
Técnica para realizar el espectro de absorción:
1. Elegir la concentración del estándar de la solución en estudio (generalmente la
concentración que se utiliza es la que tiene el valor más alto del coeficiente de absorción molar).
2. Hacer lecturas de absorbancia del estándar en toda la gama de longitudes de onda que
constituyen el espectro en que se esté trabajando. Se recomienda proceder en intervalos de 25nm
hasta barrer todo el espectro. En el intervalo donde se obtenga el máximo de absorbancia, hacer
lecturas cada 5nm para ubicar la longitud de onda óptima.
3. Anotar las lecturas obtenidas para cada longitud de onda en un cuadro registro.
4. Trazar una gráfica colocando en el eje de las abscisas las longitudes de onda ( )
correspondientes al espectro visible o ultravioleta y en el eje de las ordenadas las lecturas de
absorbancia obtenidas para cada intervalo de longitud de onda considerado.
5. La longitud de onda que se elige es aquella en la que se observe el pico de máxima
absorción.

MÉTODO GRÁFICO.

ELABORACION DE LA CURVA ESTÁNDAR DE CALIBRACION.

1. Se prepara una serie de soluciones estándar de diferente concentración.

2. Se registran las lecturas de absorbancia obtenidas para cada uno de los estándares
utilizados y se relacionan con su correspondiente concentración dentro de un cuadro de registro.
3. Se procede con esta información a construir, en papel milimétrico, la curva de calibración,
colocando en el eje de las ordenadas las absorbancia y en el de las abscisas las concentraciones.

Es importante señalar que se deben establecer por escrito las condiciones de trabajo de la
preparación de la curva, como son:
- Solución de estudio.
- Modelo del espectrofotómetro.
- Longitud de onda de trabajo.
- Características de la celda utilizada (diámetro en mm).
- Tabla de registro de concentración con su correspondiente lectura de absorbancia.
- Fecha de elaboración de la curva de calibración.
- Analista que elabora la curva.

La elaboración de la curva de calibración tiene por objeto fundamental, la determinación

cuantitativa de la concentración de soluciones problema; pero además, se puede evaluar el
funcionamiento del espectrofotómetro a través de la linealidad fotométrica, se determina también
hasta que rango de concentración, para cada solución en particular, es válida la ley de Lambert
Bouger Beer.
Existen una serie de factores que hacen necesario crear una nueva curva de calibración, entre los
que destacan:

Página
36
- Modificaciones del espectrofotómetro en alguna de sus partes (lámpara, monocromador,
galvanómetro, etc.).
- Cambios en los reactivos utilizados (lotes diferentes).
- Cambios en la metodología para la obtención de la solución colorida.
- Lecturas de absorbancia con celdas de diámetro diferente.
- Cambios en el personal que lo utiliza.

DETERMINACION DE LA CONCENTRACION DE SOLUCIONES PROBLEMA

Para la determinación de la concentración de una solución problema, la lectura de la muestra se

mide en las mismas condiciones que las soluciones estándar.
Con la lectura obtenida se procede a localizar este valor en la escala de absorbancia en el eje de
las ordenas.
En este punto se traza una línea recta perpendicular al eje de las ordenadas y en el punto de
intersección con la curva de calibración se traza una línea perpendicular hasta la intersección con
el eje de las abscisas, o sea, la escala de concentración cuyo valor corresponderá a la
concentración problema. Esta operación se conoce como interpolación en la curva de calibración
para obtener la concentración.
Cuando el valor de la lectura de la solución problema no está comprendido entre los límites de la
curva de calibración, se hará una dilución.
Este método se utiliza cuando tenemos un mínimo de 3 estándares y necesitamos trabajar un
número muy amplio de soluciones problema.

MÉTODO DEL CÁLCULO DIRECTO.

Consiste en obtener la concentración de la solución problema por medio de la aplicación de la
fórmula:
CSt
CP= --------- x LP CP Concentración de la solución problema.

LSt CSt Concentración de la solución estándar.

LSt Lectura en absorbancia del estándar.

LP Lectura en absorbancia del problema.

El valor de la concentración del estándar (C St) nos es conocido, las lecturas de absorbancia del
estándar (LSt) y absorbancia del problema (LP) las obtenemos del espectrofotómetro.
Este método se utiliza cuando tenemos un estándar y un problema o pocos problemas.
MÉTODO DEL FACTOR.
Cuando tenemos un estándar y varios problemas por determinarles sus concentraciones, la
fórmula del método anterior se convierte en:
CP = F x LP CP Concentración dela solución problema.

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37
 F Factor = CSt / LSt

LP Lectura en absorbancia del problema.

MÉTODO DIRECTO.
Este método se realiza en los espectrofotómetros que tienen la función de concentración, donde se
calibra a la concentración del estándar, ahora se sustituye por el problema y nos da
automáticamente la lectura de concentración del problema.

Dentro de los diferentes espectrofotómetros tenemos los siguientes modelos:

ESPECTROFOTÓMETRO DE LUZ VISIBLE.

SPECTRONIC 20

(Baush and Lomb)

Este aparato relativamente simple, utiliza una lámpara de tungsteno como fuente luminosa, el
monocomador es una rejilla y la detección fotoeléctrica se logra mediante un fototubo. Las lecturas
se obtienen directamente del galvanómetro graduado en % T o A. (Transmisión o Absorbancia).

6
7

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38
1.- Botón de encendido y calibración. 5.- Botón de calibración .

2.- Compartimiento de la muestra 6.- Escala de transmitancia .

3.- Foco del piloto 7.- Escala de longitud de onda .

4.- Botón selector de longitud 8.- Escala de absorbancia____

Para cada espectrofotómetro existe un manual de uso especifico ( técnica de calibración del
aparato) para cada modelo

TÉCNICA DE CALIBRACION DEL ESPECTROFOTOMETRO SPECTRONIC 20.

1) Conecte el espectrofotómetro al circuito eléctrico.
2) Seleccione la longitud de onda con el botón selector de longitud de onda.
3) Encienda el aparato con el botón de encendido.
4) Deje calentar el aparato durante 10 o 15 minutos.
5) Con el mismo botón de encendido o de calibración al aire lleve la aguja de la escala al
valor de 0% T.
6) Llene una celda con el blanco o testigo.
7) Introduzca la celda en el compartimento de la muestra.

8) Ajuste a 100% T o a 0 de A con el botón de la izquierda.

OBTENCIÓN DE LECTURAS EN EL SPECTRONIC 20 EN ABSORBANCIA Y % TRANSMITANCIA.

1. Intercambie, en el compartimiento de la muestra, celdas con las diferentes soluciones
estándares y problemas para ir registrando las lecturas de cada una de esas soluciones.
2. Lea en la escala deseada el valor de la solución que se encuentre en el compartimiento de
la muestra. En la escala superior se lee % TRANSMITANCIA y en la escala inferior,
ABSORBANCIA.
3. Registrar la (s) lectura (s).

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39
ESPECTROFOTÓMETRO 21D

14

6
4

3 2

1.- Interruptor De encendido o apagado 8.- Botón encendido de lámpara .

2.- Control de sensibilidad de la fuente 9.- Palanca selectora de la lámpara .

3.- Control de ajuste a 100% T y cero de A 10.- Transmitancia .

4.- Compartimiento para las celdas 11.- Concentración .

5.- Pantalla de longitud de onda 12.- Inicio .

6.- Botón selector de longitud d onda 13.- Factor tecla para imprimir .

7.- Palanca para mover los espejos 14.- Pantalla digital .

Otro modelo de espectrofotómetro es el spectronis 21 D

TECNICA DE CALIBRACION DEL SPECTRONIC 21 D

1) Conecta el Espectrofotómetro al circuito eléctrico.
2) Selecciona la longitud de onda con el botón selector de longitud de onda.
3) Selecciona la posición del espejo reflector de la luz, con la palanca de espejos.
4) Selecciona la sensibilidad de la fuente luminosa (LO, M, HI).
5) Enciende el aparato con el interruptor de encendido.
6) Selecciona la lámpara con ayuda del interruptor (caja de lámparas), de Tungsteno para VIS
y de Deuterio para UV. Si elige la lámpara de Deuterio es necesario que oprima posteriormente,
durante 3 segundos, el botón rojo que se encuentra junto al interruptor para que ésta se encienda.
7) Deja calentar el aparato de 15 a 20 minutos.
8) Selecciona la función requerida: A para la absorbancia, T para la transmitancia, F para factor y
C para concentración.

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40
9) Llene la celda con la solución Blanco o Testigo.
10) Introdúcelo en el portaceldas.
11) Tapa Cuidadosamente la alcoba o compartimiento de la muestra.
12) Calibra con el botón de de A y T. (Si seleccionó A se calibrará al valor de CERO, pero si se
seleccionó T se calibrará al valor de CIEN).

OBTENCIÓN DE LECTURAS EN EL SPECTRONIC 21D UTILIZANDO LA FUNCION A

Calibre el SPECTRONIC 21D siguiendo los pasos indicados en la técnica de calibración.
Presiona la tecla Mode para colocar el cursor en la función de absorbancia A.
Retira la celda con el blanco o testigo.
Intercambia la celda con soluciones estándar y problemas.
Registra las lecturas en absorbancia.

OBTENCIÓN DE LECTURAS EN EL SPECTRONIC 21D UTILIZANDO LA FUNCION T.

Calibra el SPECTRONIC 21D siguiendo los pasos indicados en la técnica de calibración.
Presiona la tecla Mode para colocar el cursor en la función de transmitancia T.
Retira la celda con el blanco o testigo.
Intercambia la celda con soluciones estándar y problemas.
Registra las lecturas en Absorbancia.

OBTENCIÓN DE LECTURAS EN EL SPECTRONIC 21D UTILIZANDO LA FUNCION F

Calibra el SPECTRONIC 21D siguiendo los pasos indicados en la técnica de calibración
utilizando A o T.
Presiona la tecla Mode para colocar el cursor en la función de concentración C.
Retira la celda con el blanco o testigo, introduzca la celda la solución estándar.
Presiona las teclas DEC. O INC. Hasta que en la escala digital aparezca el valor
representativo de la concentración de la solución estándar.
Pasar a la posición F, por medio de la tecla Mode.
Anota la lectura.
Intercambia la celda por la solución problema.
Pasar a la función de absorbancia por medio de la tecla Mode.
Anota la lectura.
Aplica la fórmula Cp = LP x F

OBTENCION DE CONCENTRACION EN EL SPECTRONIC 21D UTILIZANDO LA FUNCION C

Calibra el SPECTRONIC 21D siguiendo los pasos indicados en la técnica de calibración
utilizando A o T.
Presiona la tecla Mode para colocar el cursor en la función de concentración C.
Retira la celda con el blanco o testigo, intercambia la celda con la solución estándar.
Presiona las teclas DEC. o INC. Hasta que en la escala digital aparezca el valor
representativo de la concentración de la solución estándar.
Intercambia la celda con la solución problema.

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 Registra la lectura de concentración en forma directa de la escala digital con sus unidades
correspondientes (las unidades serán las mismas que se están manejando para el estándar).

MATERIAL Y EQUIPO

Espectrofotómetro
Dicromato de potasio
Balanza
Matraz de Erlemeyer
Agua destilada
Papel encerado
Agitador de vidrio
Gradilla
Tubos de ensaye.

ACTIVIDADES

VERIFICACIÓN DE LA CALIBRACIÓN DE LA LONGITUD DE ONDA.

SOLUCIÓN DE COBALTO (en su defecto puedes utilizar azul de metileno, dicromato de potasio)

1.- En un matraz volumétrico de 1 litro, colocar 200 ml de agua destilada. Adicionar lentamente por
las paredes del matraz 10 ml de ácido clorhídrico concentrado. Mezclar y completar el volumen con
agua destilada hasta el aforo del matraz, esta solución será de 1% de ácido clorhídrico.

2.- En un matraz volumétrico de 1 litro, colocar de 22 a 23 gr de cloruro de cobalto. Disolver en él

ácido clorhídrico al 1% preparado en el paso anterior. Quiere decir que se deberá de completar y
aforar el volumen del matraz con esta solución al 1%.

3.- Encender el espectrofotómetro y dejar calentar por 15 minutos.

4.- Si tú tienes un Spectronic 20 D y Spectronic 21 D seleccionar la modalidad de transmitancia.

5.- Con el compartimento de muestras vacío y la cubierta cerrada ajustar con el botón de control de
0 hasta desplegar una lectura de 0% de transmitancia.

6.- Seleccionar la longitud de onda a 500 nanómetros.

7.- Insertar la cubeta de lectura con agua destilada en el compartimento de muestras y usar el
control de absorbancia/transmitancia en el medidor hasta desplegar el 100% de transmitancia.

8.- Reemplazar el agua destilada con la solución de cloruro de cobalto.

9.- Insertar esta cubeta llena con el cloruro de cobalto en el compartimento de muestras.

10.- Leer el porcentaje de transmitancia en la escala de lectura de la aguja o de la pantalla

electrónica y anotar el resultado.

11.- Repetir este procedimiento de 4 a 9 veces en dicha longitud de onda y a su vez llevarlo a cabo
en longitud de onda de 505, 510, 515 y 520.

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42
12.- El instrumento propiamente calibrado cuando se muestre un mínimo de transmitancia (un
máximo de absorbancia) que ocurre entre 505 y 515nm. Los valores específicos de transmitancia
(o absorbancia) no tendrán importancia.

13.- Registra en tu manual de prácticas cada una de estas lecturas y discútelas con tus
compañeros.

NO. DE
500 505 510 515 520
LECTURA

TRABAJO PRÁCTICO

1. Compara los aparatos que se te proporcionan con los esquemas de la práctica, e identifica
las partes externas de cada uno, escribiendo los nombres en los esquemas correspondientes.

2. Realiza un diagrama de flujo con los pasos para la calibración del Espectrofotómetro que
utilizaste.

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43
CUESTIONARIO DE INVESTIGACION.

1.- Define ¿qué es Calibración?

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2.- ¿Qué son los sueros control?

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3.- ¿Qué importancia clínica tienen los sueros control.

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44
CONCLUSIONES.

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BIBLIOGRAFÍA.

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 PRÁCTICA 7

PREPARACIÓN DE SUEROS CONTROL

INTRODUCCIÓN

Lo ideal es utilizar un suero comercial con elevada confiabilidad, de valores conocidos para cada
analito y método de medición. En nuestro medio, es posible acceder a sueros comerciales que
presentan valores obtenidos por métodos de referencia, o por métodos de rutina, en laboratorios
de referencia. Esta opción tiene la desventaja de agregar un costo adicional al laboratorio, aunque
no resultan elevados.
Otra opción mas económica es preparar un pool de sueros partir de las muestras que obtenemos
todos los días.
Los sueros control normal y patológicos valorados son sueros controles liofilizados preparados a
partir de suero humano; la concentración de sus componentes se ha ajustado por adición, en caso
necesario de productos químicos y bioquímicos de elevada pureza. Antes de liofilizar se procede a
una filtración esterilizante, para minimizar el riesgo de contaminaciones microbianas
Los valores de los diversos componentes se obtienen a partir de múltiples determinaciones,
llevadas a cabo por diferentes laboratorios, según un único protocolo de actuación. Los límites de
ensayo (rango), indican las desviaciones del valor medio que pueden obtenerse de las distintas
condiciones de trabajo de cada laboratorio.
Los sueros control normal y patológico han sido diseñados para brindar un fundamento apropiado
para el control de calidad (imprecisión, inexactitud) en el laboratorio de Química Clínica, para
determinar la exactitud y precisión de las técnicas analíticas , tanto manuales como automáticas,
se aconseja emplear suero normal y uno que cubra sueros patológicos.

MATERIAL
Pool de Sueros.
Matraz Erlenmeyer.
Pipetas volumétricas, pasteur.
Vaso de precipitados.
Tubo eppendorf

ACTIVIDADES
La preparación de sueros control es parte del Control de Calidad Interno.
Para preparar en Pool de Sueros:
1- Guardar diariamente entre 2 y 8 ºC, los sueros sobrantes.

Página
46
2- Lavar muy bien y enjuagar con agua destilada, un erlenmeyer de 250 ml.
3- Calcular el volumen necesario para tener sueros por 4 meses.
4- Diariamente, descargar los sueros de días anteriores en este erlenmeyer hasta obtener el
volumen que necesitamos (casi dos veces el vol. calculado). Mantener este erlenmeyer en
congelador a 20 ºC.

No incluír sueros hemolizados, lipémicos, ictéricos, y de pacientes positivos para HIV, HVB,
y de pacientes internados, colocando el Erlenmeyer a temperatura ambiente, homogeneizar muy
bien por rotación suave durante 3 minutos. Puede utilizarse un agitador vortex. Filtrar con gasa
cuádruple, a un vaso de precipitados limpio, seco y estéril.
5.- Distribuir en alícuotas, en conos tipo ependorf, con tapa hermética. El volumen a alícuota = vol.
calculado + 100 ul.

6.- Rotular fecha de preparación, y congelar la gradilla con los conos.

El límite de 4 meses se debe al deterioro que se ha observado en la actividad de algunas de las

enzimas que cuantificamos.
Considerar el pool de sueros como potencialmente contagioso, como cualquier muestra que
ingresa al laboratorio.
Una vez que disponemos de alícuotas de un mismo suero por al menos por 4 meses, podemos
iniciar los procedimientos de Control de Calidad Interno

CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN

1.- ¿Qué son los sueros control?

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2.- ¿Cuál es su función de los sueros control en el Laboratorio Clínico?

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3.- ¿Cómo aplicas el Control de Calidad en la preparación de sueros control?

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CONCLUSIONES.

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BIBLIOGRAFÍA.

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48
 PRÁCTICA 8

ASIGNACIÓN DE VALORES A LOS SUEROS CONTROL

INTRODUCCIÓN

FUNDAMENTO DEL MÉTODO.

La determinación de glucosa se efectúa mediante el método de Trinder según las siguientes reacciones:

GLUCOSA + CO2 + H2O GOD

H2O2 + GLUCONATO

2H2O2 + FENOL + 4-AF POD

QUINONA + 4H20

REACTIVO CARACTERÍSTICA
1
Fenol 3 mmol/L
Solución amortiguadora TRIS pH 7.5
92 mmol/L
2
Glucosa oxidasa 15,000 U/L
Peroxidasa 1,000 U/L
4- aminofenazona 2.6 mmol/L
Solución Estándar
Glucosa 100 mmol/L

ESTABILIDAD Y PREPARACIÓN DEL REACTIVO

Disolver la enzima del R2 en el contenido R1. Esta solución monoreactiva es estable un mes de 2 8 °C ó 7
días a temperatura ambiente al abrigo de la luz.

MUESTRAS
Suero, plasma o LCR
La glucosa en suero o plasma, es estable al menos 3 días de 2 8 °C.

TÉCNICA
Longi d de onda 505 nm
Tempe a a ..30 37 °C
C be a ....1 cm pa o de l
Aj e del ce o f en e al blanco del eac i o

Blanco Estándar Muestra

Estándar ------ 10 L ------
Muestra ------ ------ 10 L
Reactivo 1.0 mL 1.0 mL 1.0 mL
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente.
Coloración estable 30 minutos a temperatura ambiente.

CÁLCULO

Página
49
 D.O. MUESTRA
mg/dL GLUCOSA = X CONC. DEL ESTANDAR
D.O. ESTANDAR

mg/dL x 0.0555 = mmol/L

Conc. Estándar : 100 mg/dL

LINEALIDAD

El método es lineal hasta valores de 500 mg/dL

Si la concentración de glucosa es superior a 500 mg/dL, diluir la muestra de 1:2 con solución salina y
multiplicar el resultado por dos.

VALORES DE REFERENCIA

De 55 a 110 mg/dL 3.05 6.11 mmol/L

NOTAS
Los anticoagulantes de uso corriente como el EDTA, oxalato, heparina o fluoruro, no afectan los resultados.
No se han observado interferencias por hemoglobina (4 g/L), bilirrubina (20 mg/L), creatinina (100 mg/L) y
galactosa (1 g/L). La hemólisis hasta 0.3 g/dL de hemoglobina no interfiere.

MATERIAL
Pool de Sueros.
Matraz Erlenmeyer.
Pipetas pasteur, volumétricas y semiautomáticas.
Vaso de precipitados.
Espectrofotómetro.
Kit para la cuantificación de glucosa.
Gradilla
Tubos de ensaye

ACTIVIDADES
1. Con el pool de sueros obtenido en la práctica anterior, de manera individual cuantifica la
concentración de glucosa, utilizando el método descrito anteriormente.
2. Con los resultados obtenidos aplica la estadística descriptiva, calculando las medidas de
tendencia central.
3. Consensa de manera grupal los resultados y asigna la concentración de glucosa al pool de
suero.

RESULTADOS

D.O. del Estándar: ________________________

D.O. de la muestra: ________________________

Página
50
CÁLCULOS
D.O. MUESTRA
mg/dL GLUCOSA = X CONC. DEL ESTANDAR
D.O. ESTANDAR

CONCENTRACIÓN CONCENTRACIÓN
mg/dL mg/dL
1 11
2 12
3 13
4 14
5 15
6 16
7 17
8 18
9 19
10 20

MEDIA ARITMÉTICA ( )_____________________.

MEDIANA (m)_____________________________.

MODA (M)________________________________.

CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN

1. ¿Cuál es la utilidad del pool de sueros en el Control de Calidad Interno en un Laboratorio?

____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________

2. ¿Cuáles son los valores de referencia para la Glucosa?

____________________________________________________________________________

3. ¿Cómo realizarías un pool de sueros con valores fuera de rango de referencia?

____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________
____________________________________________________________________________

Página
51
CONCLUSIONES.

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA.

Página
52
 PRÁCTICA 9
CAMPANA DE GAUSS

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.

Construye una gráfica de Gauss de un analito encontrado en el organismo.

INTRODUCCIÓN

La Campana de Gauss es un modelo de distribución de probabilidad descrito por matemático y

físico alemán Carl Friederich Gauss (1777-1855).
Esta curva también conocida como distribución normal es una función de probabilidad continua y
simétrica, cuyo máximo es la media y tiene dos puntos de inflexión situados en ambos lados. Esta
gráfica representa el comportamiento de los valores de una población o universo de eventos cuyas
variaciones solo están influenciadas por fenómenos aleatorios en control de calidad.
Dentro del manejo de datos en el laboratorio de análisis clínicos, así como de diversas variables
biológicas se deben conocer las medidas de tendencia central y las mediciones de dispersión.
Las medidas de tendencia central son muy útiles al describir grupos de observaciones. Con
frecuencia se desea describir el grupo con un solo número. Para tal fin no se usará el valor más
elevado ni el valor más pequeño como único representante, ya que solo representan los extremos,
entonces sería más adecuado buscar un valor central. Las medidas que describen un valor típico
en un grupo de observaciones suelen llamarse medidas de tendencia central. Estas son: media,
mediana y moda.
La media aritmética de una muestra se estima mediante la suma de todas las observaciones,
dividida por el tamaño de la muestra. La media aritmética mide el tamaño promedio de los valores
considerados y por eso es referida comúnmente como el promedio. La mediana es definida como
la observación equidistante de los extremos y la moda es la observación que aparece con mayor
frecuencia sin embargo, analizar solo las medidas de tendencia central no es suficiente. La media
de un conjunto de observaciones proporciona información acerca del centro de la distribución, pero
no dice nada de su grado de dispersión. Por ello se deben evaluar también las medidas de
dispersión como: la varianza, la desviación estándar y el coeficiente de variación.
Es evidente que mientras más dispersión haya, los datos se encuentran más lejanos del promedio.
La primera medida de dispersión que analizaremos es la varianza y ésta se calcula de la siguiente
forma: sumando los cuadrados de las diferencias de cada uno de los valores de las observaciones
menos el valor de la media y todo ello dividido entre el número de valores menos 1. Representado
en la siguiente fórmula donde S2 es la varianza Xn el valor de las observaciones y X es el valor
de la media.
Fórmula

Finalmente en esta práctica requieres conocer la desviación estándar (S) que se define
simplemente como la raíz cuadrada positiva de la varianza.

Página
53
Fórmula
Hasta aquí te hemos presentado los conocimientos previos para comprender la representación
gráfica denominada curva normal de error, también denominada curva o campana de Gauss.
La curva normal es una distribución continua de frecuencia de rango infinito, como la que se
obtiene cuando se persigue un objeto sometido a desviación por error. Su importancia y su gráfica
asociada se deben a la enorme frecuencia con que aparece en todo tipo de situaciones. El gráfico
representa la distribución de los errores; la media o promedio es el objetivo, y la desviación típica
indica la dispersión de los errores (la raíz cuadrada de la varianza).
La distribución de muchas variables, como los caracteres morfológicos de individuos: altura, peso,
caracteres fisiológicos, sociológicos, psicológicos o físicos; en general cualquier característica que
se obtenga como suma de muchos factores, sigue la curva normal.
Por lo tanto la curva normal es un modelo que nos permite conocer los patrones de distribución de
innumerables fenómenos que implican variables continuas.
En el siguiente gráfico se encuentra representada una curva de Gauss. En la cual se aprecia que el
punto máximo de la curva coincide con el valor de la media (m), También representada con la letra
u, la desviación estándar esta representada a ambos lados de la curva por la letra d en el gráfico o
bién por la letra o

Los valores que se encuentran en este rango son los valores rechazados en los
análisis clínicos.

Los valores que se encuentran en este rango son los valores que entran en rango
para ser aceptados, en los análisis clínicos.

Los valores que se encuentran en este rango son los valores que
son aceptados, en los análisis clínicos.

Página
54
MATERIALES.
Lancetas.
Torundas.
Glucómetro.
Sistema vacutainer.
Glucotest.
Hojas milimétricas.
Resultados obtenidos de las prácticas anteriores y/o datos obtenidos en clínica clínica.

ACTIVIDADES.
Realice una determinación de glucosa siguiendo la metodología de la práctica,
Con la seria de resultados obtenidos
Calcula los resultados siguientes:
MEDIA ARITMÉTICA (X)_____________________.

MEDIANA (m)_____________________________.

MODA (M)________________________________.

RANGO ®________________________________.

DESVIACIÓN O VARIANZA (DS)_______________.

COEFICIENTE DE VARIACIÓN (CV)_____________.

No. de determinación Nivel de Glucosa en No. de determinación Nivel de Glucosa en

mg/dl mg/dl
1.- 6.- 11.- 16.-
2.- 7.- 12.- 17.-
3.- 8.- 13.- 18.-
4.- 9.- 14.- 19.-
5.- 10.- 15.- 20.-

Y de la siguiente tabla, grafique la campana de Gauss.

1.-De la siguiente tabla de datos calcula la media, mediana y moda así como la varianza y
desviación estándar.
Tabla 1. Valores de glucosa en sangre.
No. Glucosa(mg/dl) No. Glucosa(mg/dl)
1 98 11 109
2 64 12 60
3 57 13 77

Página
55
4 87 14 53
5 63 15 91
6 111 16 49
7 101 17 102
8 93 18 98
9 88 19 100
10 79 20 71

Media_____________
Mediana______________
Moda_________________

Cálculos.

En base a los datos obtenidos ahora calcula la varianza y la desviación estándar.

Varianza________________
Desviación estándar________________
Cálculos

Realiza la representación esquemática de la curva de distribución normal en una hoja milimétrica.

Actividad 2. Con los datos obtenidos en la de la prácticas anteriores realizar la obtención de datos
estadísticos y la curva de distribución normal, como la actividad 1.

Página
56
Cuestionario de investigación
1.- Explica ¿por qué son importantes las medidas de tendencia central.
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

2.- Explica ¿qué datos nos proporciona una gráfica de Gauss.

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

CONCLUSIONES
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA

Página
57
 PRÁCTICA 10
GRÁFICA DE LEVEY Y JENNINGS

RESULTADO DE APRENDIZAJE OBTENIDO

Realiza una gráfica de Levey y Jennings, determinando la variabilidad de un proceso, de un analito
encontrado en el organismo

INTRODUCCIÓN
El término control de la calidad se comenzó a utilizar en el ámbito de la producción industrial a
finales de los años 20, con el objeto de comprobar la constancia de la calidad de un producto en su
línea de producción. Los primeros planteamientos de la necesidad de controlar la calidad en el
laboratorio clínico no aparecen hasta la década de los 40, y en 1950, Levey y Jennings4 introducen
la idea de analizar un material de control conjuntamente con cada serie de muestras de pacientes y
expresar los resultados mediante gráficos de control. El primitivo concepto de control de la calidad
estaba limitado a la fase analítica, considerada como la única fuente de errores, sin embargo, con
el tiempo, se hizo evidente que los problemas pueden presentarse desde la preparación del
paciente y obtención de la muestra, pasando a través del procesamiento técnico, hasta la entrega
del resultado final al médico que solicitó el estudio, por lo que actualmente se usa preferentemente
el término de garantía de la calidad, como sinónimo de un concepto más amplio que abarca todo el
proceso de la actividad relacionada con el laboratorio clínico, desde que se genera la petición
analítica hasta que el resultado llega a manos del solicitante.
En algunos países, los sistemas de acreditación de los laboratorios se han establecido en forma de
inspección o auditoría de la organización de toda la actividad del laboratorio y los programas de
control de la calidad son obligatorios para aquellos que deseen ser acreditados.
La gráfica de Levey-Jennings, Gráfica de pared o Gráfica de Control diario; es una herramienta
estadística de comparación y acción en el trabajo. Se usa para saber la variabilidad de un proceso,
se debe a causas aleatorias (extraordinarias ) o bién a causas comunes asignables al método.
La gráfica de control diario es una representación de datos con límites de control determinados
estadísticamente, llamados: Límite de control superior (LCS) y Límite de Control Inferior (LCI)
colocados equidistantemente respecto a la línea que indica la media o promedio de los datos.
Para elaborar ésta gráfica se realiza el registro diario de suero control, el cual debe ser analizado
de 20 a 30 veces por el mayor número de técnicos posible; se acumulan los resultados y se
realizan análisis estadísticos para cada uno, como se indica:

Determina la media aritmética.

Desecha los valores que se hallen fuera de más, menos 3SD
Recalcular la media y la desviación estándar.
Calcula la media más 2SD y la media menos 2SD.
Asignar el intervalo aceptable, que es igual al de la media + 2SD y la media - 2 SD.

Una vez establecidos los parámetros estadísticos, se prepara la gráfica de Control de Calidad, con
los días en el eje de la X y la concentración del constituyente , en el eje de la Y en las unidades
apropiadas (mg/dl, UI/L o mEq/L).

Página
58
Se dibuja para la media una línea paralela al eje de las X. Se dibujan líneas rojas para la media
más 2 SD y la media menos 2SD. Se dibuja una línea roja para la media más 3SD y la media
menos 3SD.

Debe prepararse una gráfica de control cada mes, para cada prueba analítica realizada en el
laboratorio.

Las leyes de Westgard son diseñadas para detectar error aleatorio, error sistemático y analiza las
desviaciones estándar de la grafica de Levey y Jennings, pudiendo indicar un sesgo en el sistema.

Los laboratorios usan comúnmente seis reglas en varias combinaciones. Las combinaciones de
reglas son seleccionadas por los laboratorios y se basan en el número de niveles de control
corridos con cada corrida analítica. El objetivo general es obtener una alta probabilidad de
detectar el error.

REGLA 1 2SD Esta es la regla de advertencia. Si una medición de control excede la media ±2SD,
entonces el técnico debe considerar otros controles en la corrida antes de aceptar la corrida y
reportar, permite identificar errores aleatorios o inicios de errores sistemáticos.

REGLA 1 3SD Esta regla detecta el error sistemático. La corrida es considerada fuera de control
cuando un valor control excede la media Debe aplicarse dentro de las corridas ± 3S D Esta regla se
aplica únicamente dentro de la corrida.

REGLA 2 2SD Esta regla detecta el error sistemático. Debe aplicarse dentro de las corridas se
infringe cuando dos valores consecutivos del control exceden el mismo limite (media ± 2SD).

REGLA R 4SD Esta es una regla rango y detecta el error aleatorio, es aplicada solamente dentro de
la corrida, es violada esta regla cuando la diferencia de la desviación estándar entre dos valores
control consecutivos exceden de ±4SD.

REGLA 4 1SD Esta regla detecta el error sistemático, es violada en control intra ensayo cuando os
últimos cuatro valores control del mismo nivel de control exceden el límite media ±1SD.Esta regla
no requiere rechazo de la corrida. Pero puede ser indicador para realizar el mantenimiento del
instrumento o calibración del instrumento / equipo.

REGLA 10X Esta regla detecta el error sistemático y se aplica tanto a los controles de intra e inter
ensayo. La regla es violada de controles inter ensayo cuando los últimos 10 valores consecutivos,
sin importar el nivel, están todos en el mismo lado de la media. Esta regla no requiere de rechazo
de la corrida. Pero puede ser un indicador para realizar el mantenimiento.

Página
59
M_________________
m_________________
M_________________
R_________________
DS________________
CV_______________

MATERIALES

Lancetas.
Torundas.
Glucómetro.
Glucotest.
Sistema vacutainer.
Hojas milimétricas.

ACTIVIDADES

1.-Repite y realiza la metodología de la practica 9 y verifica con las leyes de Westgard.

2.-Registra tus datos en el siguiente cuadro.

No. de determinación Nivel de No.de determinación Nivel de

1 11
2 12
3 13
4 14
5 15
6 16
7 17
8 18
9 19
10 20

3.- Calcula los resultados siguientes:

MEDIA ARITMÉTICA (X)_____________________.

MEDIANA (m)_____________________________.

MODA (M)________________________________.

RANGO (R)________________________________.

DESVIACIÓN O VARIANZA (DS)_______________.

Página
60
COEFICIENTE DE VARIACIÓN (CV)_____________.

4.-Realiza tu Gráfica de Levey Jennings en una hoja milimétrica. Se anexa a la práctica.

Cuestionario de Investigación.

1.- ¿Qué otro nombre recibe la gráfica de Levey Jennings?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

2. Mencione los criterios que se consideran en una gráfica de Levey Jennings, para determinar la
variabilidad de los resultados.

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________ _

CONCLUSIONES

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA

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61
 PRÁCTICA 11

INTERPRETACIÓN DE GRÁFICA DE SUMAS ACUMULADAS

RESULTADO DE APRENDIZAJE OBTENIDO
Realiza una gráfica de Sumas acumuladas CUSUM determinando la variabilidad de un proceso, de
un analito encontrado en el organismo.

INTRODUCCIÓN

Existen otros métodos de control estadístico a parte de Levey y Jennings en el laboratorio de

análisis clínicos:

Suma Acumulada (CUSUM)

Anión Gap

Índice de Desviación Estándar (SDI)

Prueba de precisión de Muestras de Pacientes

Método de Levey y Jennings modificado por el Dr. Hailline.

Suma Acumulada (CUSUM)

Es una técnica amplificadora de tendencias. Se recomienda hacer CUSUM cuando en levey

Jennings los valores se empiezan a salir de X ± 1SD. Se debe contar con un valor constante de la
muestra de precisión (media aritmética o K).

Diariamente se sigue procesando la muestra de referencia, de control o precisión y al valor que

nos dé ( X1 ) se le resta el valor de K y el resultado es S1 y se gráfica sobre o bajo la línea media de
la carta control de CUSUM ( eje de las X días y en el eje de las Y es S1,S2, S3 Sn) y así
sucesivamente se ob ienen lo alo e dia io Sn ili ando la ig ien e fó m la

S1 = X1 K

S2 = X1 K + (X2 K)

S2 =S1 + (X2 K)

S3 =S2 +(X3-K)

Sn = Sn -1 + (Xn K)

Página
62
Anión Gap

Una herramienta frecuentemente desatendida, usada para verificar el desempeño de analizadores

de electrodos es el cálculo Anión gap que es definido como:

Na (CO2 +Cl ) = de 5 a 14

Esta simple fórmula puede aplicarse a datos de electrolitos a intervalos específicos (tiempo,
corridas o pruebas) para dar seguimiento a un posible error analítico. Si varias muestras fallan en
este simple escrutinio durante un día o corrida, entonces todos los resultados de los pacientes
deben ser revisados por un posible error analítico.

Índice de Desviación Estándar (SDI)

A pesar que el SDI es una estadística usualmente generada por participación en una programa
externo de Control de Calidad o Programa de aprovechamiento, también puede ser usado como
una herramienta para dar seguimiento al desempeño del control de calidad interno.

Prueba de precisión de Muestras de Pacientes

A pesar que el propósito de los controles es validar las corridas analíticas, también identifican
problemas potenciales con el sistema analito que incluyen el instrumento o equipo, técnico,
equipamiento y reactivos. El laboratorio selecciona una muestra de paciente anormal o normal
para repetir en la siguiente corrida analítica o día siguiente.

MATERIALES

Lancetas.
Torundas.
Glucómetro.
Dispositivo para punción vacutainer.
Glucotest.
Hojas milimétricas.

ACTIVIDADES

1.-Repite y realiza la metodología de la practica 9 ( o bien puedes trabajar los datos de Química
clínica)
2.-Registra tus datos en el siguiente cuadro.

Página
63
3.-Realiza la gráfica de Sumas acumuladas CUSUM.

No. de determinación Nivel de No.de determinación Nivel de

1 11
2 12
3 13
4 14
5 15
6 16
7 17
8 18
9 19
10 20

3.- Calcula los resultados siguientes:

MEDIA ARITMÉTICA (X)_____________________.

MEDIANA (m)_____________________________.

MODA (M)________________________________.

RANGO (R)________________________________.

DESVIACIÓN O VARIANZA (DS)_______________.

COEFICIENTE DE VARIACIÓN (CV)_____________.

4.-Realiza tu Gráfica de Levey Jennings en una hoja milimétrica. Se anexa a la práctica.

S1 = X1 K

S2 = X1 K + (X2 K)

S2 =S1 + (X2 K)

S3 =S2 +(X3-K)

Sn = Sn -1 + (Xn K)

Donde:

X1 = Valores obtenidos de la cuantificación del analito en cuestión.

K = Media aritmética

S1 = Valores calculados
Rec e da q e en el eje de la X se grafican los d a en el eje Y los valores calculados S

Página
64
Cuestionario de Investigación.

1.- ¿Qué otros métodos existen para el control de calidad en el laboratorio clínico?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

2. Mencione los criterios que se consideran en una gráfica de Sumas acumuladas, para determinar
la variabilidad de los resultados.

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________ _

3.- ¿Qué información obtienes a través de la gráfica de Sumas acumuladas CUSUM?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________ _

CONCLUSIONES

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA

Página
65
 PRÁCTICA 12

INTERPRETACIÓN DE GRÁFICAS: LEVEY JENNINGS, GAUSS Y

SUMAS ACUMULADAS

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.

Identifica errores en procesos analíticos en las representaciones gráficas.

INTRODUCCIÓN

A los pocos días de estar usando las gráficas de control , ya se observa la distribución de los
valores obtenidos para el suero control y se puede comprobar si están dentro de los límites
aceptables o si hay desviaciones notables por encima o por debajo del valor medio aceptable, en
general la Gráfica de Control Diario da una voz de alarma si algo marcha mal, lo que permite tomar
las medidas necesarias antes de que realmente se esté trabajando fuera de control.

Interpretación de los resultados.

Los valores de los sueros control deberán caer a ambos lados de la línea media dentro de las
líneas rojas y distribuirse según las siguientes reglas:
1. Los resultados analíticos de los sueros control deberán caer el 95% de las veces dentro de las
líneas de la media más 2 SD y la media menos 2SD, o en el límite.
2. Los valores deberán distribuirse casi uniformemente a ambos lados de la línea media. No es
posible que haya más de cinco determinaciones consecutivas a un mismo lado de la línea
media, a menos que haya algún error.
3. No debe haber un incremento o disminución gradual en los valores control para más de cinco
análisis consecutivos.
4. Los valores consecutivos no deberán caer fuera de los límites de la media más, menos 2SD.
5. Ningún valor deberá caer fuera de la doble línea roja, esto es, la media más, menos 3 SD.
Cuando el sistema analítico está funcionando correctamente, los resultados analíticos de los
sueros control responden a las reglas estadísticas anteriores. Cuando los resultados violan estas
reglas, se dice que el análisis está fuera de control.
La GRÁFICA DE LEVEY- JENNINGS nos indica Tendencias, Desplazamientos y Desvíos. Las
tendencias se caracterizan por una distribución más o menos uniforme de los resultados hacia
ambos lados de la línea media, dentro de los límites aceptables. Pueden también observarse
desplazamientos progresivos de los valores a ambos lados de la media, dentro de los límites
aceptables que obedecen, por ejemplo, a cambio de reactivos u otros factores que afectan el
análisis más o menos constante. Los desvíos o desviaciones se caracterizan por un salto repentino
en los valores promedio; cuando éstos ocurren por arriba o por debajo de la media se deben a
causas como: mala calibración del procedimiento, pipetas descalabradas o temperaturas
diferentes, que de no corregirse, finalmente darán valores fuera de los límites de precisión.
La relación de la Gráfica de Levey-Jennings y la gráfica de distribución normal o Campana de
Gauss se establece: Cuando en la curva dibujamos la escala de la desviación estándar, tanto en
sentido positivo como en sentido negativo a partir de la media, se demuestra que el 68% del área

Página
66
de la curva está comprendida entre la media más, menos 1SD; el 95% del área entre más, menos
2SD; y el 99.7% del área entre más, menos 3SD.
Esta Distribución es la clave del control de calidad en los laboratorios clínicos, ya que establece
que los valores analíticos que caigan fuera de más, menos 2SD de la media son inaceptables.

MATERIAL.
Gráficas
Papel milimétrico.
Resultados de la práctica anterior

ACTIVIDADES

Con los datos obtenidos realice la grafica de Levey Jenngs indicando las variables del análisis
realizado.
Comente cada una de la posible causa de la variación de los resultados ya sea que estén dentro
de control o fuera de control.

CUESTIONARIO DE INVESTIGACION.
1.- ¿Cual es la aportación de Levey-Jennings al control de calidad en el Laboratorio Clínico?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

2.- ¿A partir de qué medidas estadísticas se inicia la preparación de la gráfica de pared?

_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
3.- ¿A qué corresponden los límites de control superior e inferior en la Gráfica de Control diario?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
4.- ¿Qué utilidad práctica tiene en el Laboratorio Clínico la realización de la Gráfica de Control
Diario?
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_______________________________________________________________________________
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Página
67
5.- ¿Qué otro nombre recibe la Gráfica de Levey- Jennings?
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

CONCLUSIONES.
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

BIBLIOGRAFÍA

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68
 PRÁCTICA 13
CONTROL DE CALIDAD EN LA ELABORACIÓN DE MEDIOS DE
CULTIVO

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.

Aplica el Control de Calidad en la preparación de Medios de Cultivo

FUNDAMENTACIÓN.
Actualmente los medios de cultivo para microorganismos se preparan a partir de productos
deshidratados, suplementados con aditivos de procedencia comercial, por lo que estos deben de
ser fabricados bajo normas de preparación y Control de Calidad.
INTRODUCCIÓN.
El medio de cultivo es un sustrato nutritivo en el que se pueden recuperar, multiplicar y aislar los
microorganismos, así como efectuar pruebas de susceptibilidad. Hay diversos criterios de
clasificación de los medios de cultivo, uno de ellos es por su consistencia (líquidos, semisólidos y
sólidos). O bien según su uso dentro de los cuales hay medios selectivos, enriquecidos,
diferenciales, para anaerobios, para medir potencia de antibióticos, especiales para siembra de
hongos y levaduras o bien de protozoarios.
Las normas generales de preparación de medios de cultivo son:
Guardar los medios de cultivo a una temperatura menor de 25oC, que no exista humedad y
no les de directamente la luz solar.
Evitar la cercanía de aparatos emisores de calor (estufas, hornos, autoclaves) y de
humedad (baños)
Pesar el polvo en una balanza fiable. No dejar el frasco del deshidratado abierto más que
el tiempo indispensable, y una vez pesado el polvo, añadirlo inmediatamente al recipiente que
contiene el agua medida.
Utilizar siempre agua destilada
Remover uniformemente la suspensión con el fin de homogenizar su contenido.
Calentar el recipiente procurando que no contacte con fuego directo (interponer una hoja
de asbesto) y agitar constantemente.
Mantener durante dos minutos la temperatura de ebullición de los medios sólidos. Con
ellos se asegura una completa solubilización y dispersión del agar y del resto de los componentes
.Los caldos solo se calientan hasta solubilizar sus ingredientes.
Esterilizar a 120oC durante 15 min. Como norma general es suficiente y el excederse en
uno u otro límite podría afectar a ciertos constituyentes, sobre todo a los hidratos de carbono.
Comprobar el PH del medio una vez salido del autoclave y enfriado.
Enfriar los medios esterilizados hasta 48oC-50oC antes de añadirles suplementos estériles
y termolábiles. En el momento de la adición los suplementos estarán a temperatura ambiente.

Al igual que en todos los estudios clínicos, en el área microbiológica, la adecuada preparación de
los medios de cultivo tiene una gran importancia y existen varios factores que de no controlarse
pueden afectar de manera sustancial los resultados de este tipo de estudios.

Página
69
Variables que pueden afectar la calidad de los medios de cultivo.

a) Defecto en la medición o peso de los ingredientes.

b) Falta de frescura del medio, lo que genera perdida de humedad, cambios de la
concentración de sus componentes o bien reacciones como oxidaciones, etc.
c) Presencia de residuos de detergentes en el material de vidrio.
d) Efecto germicida en el agua empleada en la preparación de los medios, debido a la
presencia de impurezas incluso en cantidades traza.
e) Cambios de pH.
f) Humedad excesiva en la superficie del medio que favorece la presencia de colonias
extendidas, alterando la morfología colonial.
g) Esterilización inadecuada. Frecuentemente por sobrecalentamiento y con ello
desnaturalización de sustancias nutritivas esenciales.
h) Falta de uniformidad en la mezcla.

Dentro de las medidas de control de calidad para evitar estas fallas están la prueba del primer lote
de medios ya sea comprados o preparados.
La validación de los medios de cultivo es un proceso que implica los siguientes pasos:
a) Preparación de los medios de cultivo.
b) Control de calidad de los medios de cultivo preparados.
c) Proceso de limpieza del material de vidrio empleado en el laboratorio de microbiología.
d) Esterilización del material limpio.
e) Determinación de sustancias inhibidoras o promotoras del crecimiento bacteriano en el
agua empleada en su preparación.
f) Validación del proceso de lavado de material de vidrio.
g) Validación del proceso de esterilización por calor húmedo.

MATERIALES, REACTIVOS Y EQUIPO:

1. Balanza granataria
2. Autoclave validada
3. Incubadora validada
4. Mechero
5. Medios de cultivo
6. Matraz redondo de fondo plano de 500 ml
7. Matraz Erlenmeyer de 250 ml
8. Agitador de vidrio
9. Tubos de 16 x 100
10. Tubos de 13 x 100
11. Pipeta de 10 ml (estéril)
12. Pipeta de 5 ml (estéril)
13. Asa bacteriológica
14. Gradilla
15. Regla
16. Marcador indeleble

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ACTIVIDADES:
Preparación de medios de cultivo.

1. Lee perfectamente las instrucciones de preparación del medio de cultivo que se te

proporcione.
2. Realiza los cálculos de la cantidad exacta que se requiere pesar de acuerdo a los
volúmenes que te indique el profesor.
3. En la balanza granataria pesa la cantidad precisa de medio (inmediatamente tapa el frasco
del medio de cultivo)
4. Se recomienda que la capacidad del recipiente de vidrio que se va a utilizar sea por lo
menos 2.5 veces mayor que el volumen de medio de preparar.
5. Se agrega un poco de solvente (agua destilada o desionizada) y en seguida el polvo del
medio de cultivo y se mezclan al calor del mechero. El medio no debe hervir, el matraz se debe
poner en una posición indicada con respecto al plano de la flama del mechero.
6. Terminar de agregar el solvente y mezclar perfectamente el medio.
7. Esterilización del medio. Para medios que se envasan en tubos, se debe agregar al tubo
indicado el medio de cultivo, taparlos y colocarlos en un recipiente de metal listo para ingresar al
autoclave.
8. Para medios que se vacían en placa el proceso de esterilización se realizara en el mismo
recipiente donde se preparo el medio (matraz). Este deberá estar tapado con gasa y algodón y
posteriormente con papel Kraft.

Cálculos:

I. Realiza un diagrama de flujo que explique la preparación del medio de cultivo.

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Cuestionario

1.- ¿Para qué sirve el proceso de validación de esterilización?

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______________

2.- Explica tres métodos que permitan realizar el proceso de validación de esterilización.
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3.- ¿En qué consiste la prueba de esterilidad de los medios de cultivo?

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4.- ¿A qué se refiere la prueba de promoción del crecimiento de los medios de cultivo?
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_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________
_______________________________________________________________________________

CONCLUSIONES.
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_______________________________________________________________________________
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BIBLIOGRAFÍA

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 PRÁCTICA 14

CONTROL DE CALIDAD EN LAS MUESTRAS BIOLÓGICAS

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.

Aplica el Control de Calidad en la toma de muestras biológicas.

FUNDAMENTACIÓN
En el laboratorio clínico se analizan una gran variedad de líquidos biológicos sangre, orina, heces,
líquido sinovial, líquido amniótico, y otros, Cada líquido y cada determinación requieren unas
condiciones precisas de obtención, por lo que es fundamental establecer las condiciones
detalladas. La obtención de los especímenes condiciona que la obtención de las medidas sea
correcta. El área dedicada a la extracción de los especímenes para los laboratorios clínicos debe
tener el tamaño adecuado al número de extracciones diarias que se lleven a cabo, debe ser de
fácil acceso tanto para los pacientes como para el personal de extracción.

INTRODUCCIÓN
La actividad que desarrolla al laboratorio de microbiología está orientada principalmente al
diagnóstico microbiológico de las enfermedades infecciosas. Una parte importante de esa actividad
consiste en el aislamiento, la identificación y la determinación de la sensibilidad a los
antimicrobianos de los microorganismos causales de estas enfermedades .La gran diversidad de
muestras clínicas y de métodos diagnósticos aplicables, son dos aspectos que diferencian el
laboratorio de microbiología de otros laboratorios clínicos.
Toda la información diagnóstica que el laboratorio puede proporcionar, depende de la calidad de la
muestra recibida, por ello una toma mal realizada, pobremente recogida o mal transportada
determinará un posible fallo en la recuperación de los agentes patógenos, que puede inducir a
errores diagnósticos, e incluso a un tratamiento inadecuado del enfermo.
NORMAS BASICAS GENERALES.
Las muestras deben venir acompañadas de su respectiva hoja de pedido donde deben
llenarse todos los datos solicitados por el laboratorio. Imprescindible: 1) nombre completo, 2) No de
registro, 3) edad, 4) sexo, 5) servicio, clínica, 5) tipo de muestra, 6) preguntar al paciente si toma
antibióticos los últimos 7 días; si es así anotar los nombres.
Los viales, tubos o frascos donde se colocan las muestras deben ser estériles con tapón
hermético. Las muestras se deben obtener antes de iniciar el tratamiento antibiótico o antiviral.
Cuando esto no es posible, se obtendrán antes de la administración del medicamento o
después de 48 hrs. de haber terminado el tratamiento.
Hay situaciones en que es conveniente la toma junto a la cama del enfermo, como en
hemocultivo y líquido cefalorraquídeo (LCR), pero en otras es imprescindible realizarla en el propio
laboratorio como en exudados genitales que requieren una observación en fresco al microscopio
y/o siembra inmediata.

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73
 Es necesario que la que la toma se efectúe en el sitio exacto de la lesión con las máximas
condiciones de asepsia que eviten la contaminación con microbios exógenos, que la muestra
nunca se ponga en contacto con desinfectantes y lo más rápido posible.

El análisis general de orina es un estudio de laboratorio cuya utilidad trasciende eb varias aéreas
de la medicina. Es decir además de reflejar el estado funcional del sistema urinario permite evaluar
el estado general metabólico del paciente. Esto es posible debido a que un gran número de
metabolitos (que incluyen productos de excreción o secreción son eliminados a través de la orina).
La determinación cualitativa o cuantitativa de estos compuestos permite identificar patologías
asociadas a otros órganos o sistemas además del urinario.
Al igual que todos los estudios realizados en un laboratorio de análisis clínicos, resulta
trascendental la realización del EGO cuidando todos los parámetros que implica el Control de
Calidad.

FASE PRE-ANALÍTICA EN EL EXAMEN GENERAL DE ORINA.

Ya que el control de calidad en la sección de análisis de orina (o en cualquier otra sección del
laboratorio) es una integración de muchos factores, se describe primeramente para esta fase lo
siguiente:
- Las muestras de orina se toman siguiendo instrucciones estrictas:
i. Los recipientes, además de estar muy limpios, deben cumplir con las siguientes condiciones: ser
de plásticos translúcido y desechable y no volverse a utilizar.
ii. La tapa debe cerrar herméticamente de tal manera que el contenido no se derrame,
independientemente de la posición del recipiente.
iii. En todo estudio microbiológico el recipiente debe haberse esterilizado previamente.
Hay ocasiones en que las muestras se deben estabilizar, debido a que se pretende el análisis de
un componente inestable o bien porque el estudio se va a demorar, en estos casos se debe añadir
algún conservador o estabilizador o bien refrigerar lo más inmediato posible.
Antes de obtener la muestra el paciente debe recibir instrucciones escritas y orales detalladas y
claras acerca del procedimiento. La muestra se toma en un área aislada, de ser posible con
excusado, y el paciente parado o sentado. Para cultivos microbiológicos será necesario que el
paciente se lave cuidadosamente el meato urinario y los genitales con agua. La orina se recoge en
un recipiente estéril descartando la primera orina. La orina de bebés se obtiene con una bolsa de
plástico colocada sobre los genitales y esperando la micción espontánea. Una muestra aleatoria se
obtiene a cualquier hora en un periodo de 24 horas. Dependiendo de las instrucciones del médico
la muestra de orina se puede obtener de:
a) La primera orina matutina.
b) Una muestra programada de orina que se obtiene en un intervalo específico en un periodo
de 24 horas. Obtener las muestras cuidadosamente siguiendo las instrucciones.

FASE ANALÍTICA EN EL EXÁMEN GENERAL DE ORINA.

E l análisis de orina de rutina comprende el exámen de las características físicas: color, aspecto y
densidad; las características químicas incluyendo el PH , el contenido de proteínas, glucosa,
cetonas, sangre oculta, nitritos, leucocitos, bilirrubina, urobilinógeno, etc. , y las estructuras
microscópicas presentes en el sedimento.
EXAMEN FÍSICO.
a) COLOR.
La orina normal presenta una amplia gama de colores, por lo cual está determinado por su
concentración. El color puede variar de un amarillo pálido a un ámbar oscuro, según la
concentración de los pigmentos urocrómicos y en menor medida la urobilina y de la uroeritrina.

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b) ASPECTO.
La orina normal habitualmente es clara pero puede tornarse turbia por precipitación de partículas
de fosfato amorfo en orinas alcalinas o urato amorfo en orinas ácidas. Otras causas pueden ser la
presencia de leucocitos o células epiteliales, bacterias (en especial si la muestra queda en el
recipiente a temperatura ambiente), moco, grasa y el quilo también dan un aspecto lechoso.
Existen pocas situaciones donde el olor de la orina tiene importancia clínica una de ellas es en
pacientes diabéticos en donde la presencia de cetonas puede conferir un olor dulce o a frutas.
c) PESO ESPECÍFICO.
El peso especifico es la relación o cociente entre el peso de un volumen de orina y el peso del
mismo volumen de agua destilada medidos a una temperatura constante. Constituye un índice de
la concentración del material disuelto en la orina; sin embargo no solo depende del número de
partículas, sino también del peso de éstas en la solución. El intervalo normal para una muestra
tomada al azar es de 1,003-1,0035. El rango para la muestra de 24 horas es de 1,015 a 1,025.
Para la medición del peso específico se utilizan el urinómetro. El urinómetro es un hodrómetro
calibrado para medir el peso específico de la orina a una temperatura específica, por lo general a
20oC.

Por otro lado el refractómetro es un medidor de sólidos totales (ST) de una solución. El
refractómetro en realidad mide el índice de refracción de la solución, pero algunos modelos poseen
escalas calibradas de modo que pueden obtenerse lecturas para peso específico, proteínas totales
y sólidos totales. En esta practica emplearemos el urinómetro para determinar el peso específico.
EXAMEN QUÍMICO.
El análisis de orina de rutina incluye pruebas químicas para pH, proteínas, glucosa, cetonas y
sangre oculta. Desde la introducción de tiras reactivas simples y múltiples, cintas de prueba y
tabletas, el examen químico de la orina se ha convertido en un procedimiento sensible y rápido.
EXAMEN MICROSCÓPICO.

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75
El exámen microscópico es fundamental en el análisis de orina de rutina. Es una herramienta
diagnóstica valiosa para la detección y evaluación de trastornos renales y del tracto urinario, así
como de lasa enfermedades sistémicas.

FASE POST-ANALÍTICA EN EL EXAMEN GENERAL DE ORINA.

Esta fase involucra los siguientes puntos:
A) Confirmación de los resultados.
Todos los resultados inesperados requieren confirmación, independientemente de si caen dentro o
fuera del intervalo de referencia. Un resultado inesperado puede sospecharse a partir de la
información clínica que tiene el laboratorio acerca de un paciente o de los resultados de otras
cantidades medidas en el mismo paciente en la misma fecha, o el resultado de la misma cantidad
medida en fechas anteriores.
La confirmación de un resultado puede llevarse a cabo por repetición de la medición realizada en la
muestra. Si este método no confirma el resultado, se recomienda usar uno alternativo para la
misma cantidad a partir de la muestra . Si todavía existe duda se procesa una nueva muestra.
B) Reporte.
En la hoja de laboratorio se deben incluir los datos del laboratorio, datos completos del paciente,
resultado y nombre y firma de la persona responsable del análisis.

MATERIAL Y EQUIPO.
1.- Muestra de orina (de acuerdo a las indicaciones del profesor)
2.- Microscopio
3.- Centrífuga
4.- Urinómetro
5.- Tiras reactivas para EGO
6.- Probeta
7.- Tubos de vidrio de 13 x 100
8.- Gradilla
9.- Portaobjetos
10.Cubreobjetos
11.Pipeta Pasteur
12.Material personal de laboratorio (bata, guantes, cofia, cubre bocas)

ACTIVIDADES

Realiza un EGO; considerando la importancia del cuidado de las actividades a realizar en cada una
de las etapas de control de calidad.

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76
1. Iniciar con el examen físico

Resultado Normal/Patológico Posible causa

Color

Aspecto

Peso específico

Olor

2.- Examen Químico.

El procedimiento para usar las tiras reactivas es el siguiente:

a) Sumergir completamente las áreas de prueba de la tira en orina fresco, bien mezclada y
sin centrifugar y retirar la tira en forma inmediata. Debe tenerse cuidado de no tocar las áreas
reactivas.
b) Eliminar el exceso de orina de la tira tocando con el borde de el frasco que contiene la
muestra. Las tiras deben sostenerse en posición horizontal.
c) En el tiempo determinado comparar las áreas reactivas con la correspondiente carta de
colores del envase, la lectura debe hacerse con buena iluminación para lograr una comparación
exacta del color.

Resultado Normal/Patológico Posible causa

pH

Proteínas

Glucosa

Cetonas

Sangre oculta

Bilirrubina

Urobilinógeno

Nitritos

Leucicitos

Hemoglobina

Eritrocitos

Bacterias

3. Examen microscópico.

PREPARACIÓN DEL SEDIMENTO Y USO DEL MICROSCOPIO.

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77
A) Se mezcla la muestra y se colocan aproximadamente 10-15 ml de orina en un tubo de
ensaye.
B) Centrifugar a 2000 r.p.m. durante 5 minutos
C) Eliminar el líquido sobrenadante.
D) Suspender el sedimento en la orina que baja por las caras del tubo (puede ser
exactamente 1 ml de sedimento y de sobrenadante en el tubo).
E) Mezclar el sedimento, colocar una gota de éste en un portaobjeto limpio o en una cámara
de conteo, se cubre con un cubreobjeto y se examina inmediatamente.
F) Primero observar a 10%
G) Se registra el portaobjetos en busca de cilindros, cristales y elementos que se presentan
unos pocos campos. Cuando sea necesario delinear las estructuras se pasa a la lente de mayor
aumento 40X.

CUESTIONARIO

1.- Menciona al menos tres factores no patológicos que pueden alterar el color normal de la orina y
explica porque:

2.- Por que es importante ajustar el pH en orinas donde se requiere evaluar sustancias como beta-
2 microglobulina o catecolaminas.

3.- En el siguiente cuadro ilustra la morfología de algunos de los elementos que puedes encontrar
en el sedimento urinario de un EGO.

Elemento Esquema Elemento Esquema

Células epiteliales Bacterias

Eritrocitos Cristales de oxalato

de calcio

Cristales de colesterol Uratos amorfos

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78
Cristales de ácido Carbonato de calcio
úrico

Cilindros de eritrocitos Fosfato de calcio

Cilindros de células Moco

epiteliales

Espermatozoides Fibras

NOTA: Escribe junto al esquema si el elemento esta presente en orinas normales o patológicas.

CONCLUSIONES
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BIBLIOGRAFÍA.

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79
 PRÁCTICA 15

PREPARACIÓN DE ESTÁNDARES O CALIBRADORES

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO

Prepara estándares o calibradores de analito en el laboratorio clínico

FUNDAMENTACIÓN
Existen una variedad de materiales disponibles para la estandarización .básicamente cada
procedimiento debe tener un calibrador estandarizado , mediante un método de referencia , o un
método definitivo , o bien certificado por una organización como el Instituto Nacional de Estándares
y Tecnología (NIST) de Estados Unidos.

INTRODUCCIÓN

PREPARACIÓN DE ESTANDARES CALIBRADORES

La solución estándar es una solución de fuerza conocida, expresada como concentración de una
cantidad de soluto, contenida en un volumen de solución:

C= n/V

C=Concentración; n= Cantidad de soluto contenida en un volumen= Cantidad de soluto

Un estándar primario es una sustancia de características definidas cuya pureza la hacen confiable
para utilizarla inicialmente en la elaboración de soluciones de concentración conocida. El estándar
primario debe ser sólido, de peso molecular elevado, fácil de pesar, poco higroscópico, estable, de
pureza conocida, soluble en agua, de reacción química perfectamente definida y esquiométrica
respecto a la substancia de la solución que se va a valorar, común en el laboratorio y fácilmente
manejable, como ejemplo: Carbonato Sodio Na2CO3 .

Un estándar secundario (es valorada en un estándar primario): se utiliza para determinar la

concentración de una solución.

Los materiales se clasifican: Materiales puros como la glucosa, su procesamiento es muy caro ya
que debe ser con mucho cuidado y en un laboratorio.

Materiales analizados: Son soluciones acuosas de materiales puros, analizados por un fabricante o
una organización profesional, es estándar secundario.

Sueros analizados: Sueros humanos o suero animal, le agrega varios analitos y luego lo analiza
para saber su concentración real.

Estándares de sueros con valores corregidos. (Controles con valores asignados) Muchos sueros
estandarizados en el comercio tienen valores diferentes según el método o el instrumento.

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Estándares simulados (sustitutos). Cada vez es más frecuente calibrar los instrumentos usando
estándares simulados. Estos no contienen el analito sino una substancia a la cual responde el
instrumento.

MATERIAL

6 Matraces aforados

Pipetas

2 Balanza analítica

Agua Destilada

Gradilla

Espátula Papel encerado

NAOH

NACL

ACTIVIDADES.

1.-Preparar una solución estándar de acuerdo al soluto que el profesor te proporcione.

2.- Preparar 50ml de NAOH al 20%

3.- Preparar 50ml de NACL al 10%

OPERACIONES Y RESULTADOS.

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CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN.

1.- ¿Qué utilidad tiene una solución estándar?

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2.- ¿Qué es una solución estándar primaria?

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3.- ¿Cuál es la función de una solución estándar primaria?

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4.- ¿Qué es una solución estándar secundaria?

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5.- ¿Qué función tiene una solución estándar secundaria?

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CONCLUSIONES

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BIBLIOGRAFÍA.

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 PRÁCTICA 16

LINEALIDAD

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO

Prepara la solución de dicromato de potasio y Verifica la linealidad con el espectrofotómetro
FUNDAMENTACIÓN

Es la capacidad de un instrumento de medición para proporcionar una indicación que tenga una
relación lineal con una magnitud determinada, es ampliamente utilizada en la instrumentación
analítica e industrial, es uno de los procedimientos estadísticos más útiles y provechosos
disponibles para el metrólogo.

La linealidad se sigue analizando mediante métodos de consistencia gráfica, sin embargo el

análisis numérico siempre es necesario cuando se requiere de una evaluación cuantitativa, es una
propiedad importante de los métodos utilizados para efectuar mediciones en un intervalo de
concentraciones. La linealidad de la respuesta a patrones puros (MRC) y a muestras realistas
puede determinarse, generalmente no es cuantificada pero es comprobada mediante inspección o
utilizando pruebas de significancia de la no-linealidad. La no-linealidad significativa es usualmente
corregida mediante el uso de funciones de calibración no-lineal o eliminada seleccionando más
restringido. Cualquier desviación residual de la linealidad normalmente es contabilizada por el
estimado de la precisión global cubriendo varias concentraciones, o dentro de cualquier
incertidumbre asociada a la calibración.

INTRODUCCIÓN

La linealidad se define como la habilidad (dentro de un ámbito dado) del procedimiento analítico de
obtener resultados de prueba que sean directamente proporcionales a la concentración de analito
en la muestra. Esta se evalúa a través de la medición de ls absorbancia de las soluciones de
diferentes concentraciones conocidas de dicromato de potasio o de permanganato de potasio.
El intervalo de linealidad es el ámbito o rango entre la menor y la mayor concentración de analito
en la muestra (incluyendo estas concentraciones) para las cuales se ha demostrado que el
procedimiento analítico tiene el nivel adecuado de precisión, exactitud y muestra que puede ser
cuantitativamente determinada con exactitud aceptable.
El límite de detección es la cantidad más pequeña de analito en una muestra que puede ser
detectada por una única medición, con un nivel de confianza determinado, pero no necesariamente
cuantificada con un valor exacto. Es comúnmente expresado como concentración del analito.
La linealidad es una propiedad importante de los métodos utilizados para efectuar mediciones en
un intervalo de concentraciones. La linealidad de la respuesta a patrones puros (MRC) y a
muestras realistas puede determinarse. La linealidad generalmente no es cuantificada pero es
comprobada mediante inspección o utilizando pruebas de significancia de la no-linealidad. La no-
linealidad significativa es usualmente corregida mediante el uso de funciones de calibración no-
lineal o eliminada seleccionando un intervalo de operación más restringido. Cualquier desviación

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residual de la linealidad normalmente es contabilizada por el estimado de la precisión global
cubriendo varias concentraciones.
Existen diferentes tipos de error:

Error absoluto: diferencia entre el resultado del laboratorio y la media .

Error relativo (%): relación porcentual entre el error absoluto y la media

Error relativo SDI: relación entre el error absoluto y la desviación estándar del grupo (su mismo
método o el global de métodos).

El % indica sólo el tamaño del error, mientras que la SDI proporciona además una indicación de la
posición del laboratorio respecto de los demás.
Ej: un error de +2,7 SDI tiene el mismo significado para cualquier resultado e indica que el valor
obtenido está alejado de los resultados obtenidos por la mayoría de laboratorios.
Ej: un error relativamente importante en su tamaño (p.e. -15%) y, en cambio, cercano a los
resultados de los demás laboratorios (p.e. -1,1 SDI) ocurrirá cuando la dispersión de resultados
entre laboratorios (la SD grupo) sea elevada.

Error tolerable (%): error máximo tolerable (EMT) para cada analito. En general se siguen los
c i e io del CLIA 88 (Clinical Labo a o Imp o emen Ac ).

Los cálculos se realizan solamente cuando el número de laboratorios que han remitido resultados
no aberrantes es superior a 20.
También se proporcionan sendos gráficos de Levey-Jennings en los que se muestra la evolución
del error.
Cada laboratorio remite los resultados en las unidades que normalmente utiliza, la organización de
PREVECAL unifica las unidades para obtener los datos pertinentes y, una vez realizados los
cálculos, vuelve a transformar los datos de forma que cada laboratorio recibe la información en sus
propias unidades.

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84
MATERIALES

Matraz aforado (25ml)

Balanza analítica
Pipetas graduadas (1, 5 y 10 ml)
Agua destilada
Gradilla
Tubos de vidrio de 18x159(12 tubos por equipo)
Vaso de precipitados
Espátulas
Papel encerado
Papel milimétrico (el alumno deberá traerlo)

ACTIVIDADES.
1. Preparación de la solución de dicromato de potasio (K2Cr2O7):
Preparar 25ml de una solución madre de dicromato a una concentración de 530 mg/dl.
2. Procedimiento para verificar la linealidad.
A) Colocar los tubos de 18x150 mm en la gradilla y numerarlos del 1 al 12.
B) Comenzando por el tubo número 1, agregar 0,0.5, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 y 10ml. De la
solución de dicromato de potasio 530mg/dl y 10, 9.5, 9, 8, 6, 5, 4, 3, 2, 1 y 0ml de agua destilada.
C) El volumen final de cada uno de los tubos deberá ser 10ml.
D) La concentración final de dicromato de potasio en cada uno de los tubos será la siguiente:
2.26.5, 53, 106, 159, 212, 256, 318, 371, 424, 477 y 530mg/dl respectivamente.
E) Leer cada dilución a 500nm de longitud de onda, ajustando a cero con agua destilada (tubo
1) y anotar las lecturas correspondientes.
F) Calcular un factor de calibración del resto de los tubos. Esto se hace multiplicando las
absorbancias de cada punto por el factor de calibración que previamente calculaste.
G) Compara las concentraciones esperadas con las obtenidas.
H) Calcula el porcentaje de error en tus determinaciones .
I) Construye una gráfica colocando en el eje de las Y¨ la absorbancia y en el eje de las X la
concentración para cada uno de los puntos analizados

Tubo Sol. Agua Volumen Concentración Absorbancia Concentración % de

No. Dicromato destilada final/ml. final de obtenida por error
de potasio (ml) dicromato de factor de
(ml) potasio concentración
(mg/dl)
1 0 10 10 BLANCO Ajuste a 0
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12

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85
CUESTIONARIO DE INVESTIGACIÓN
1. Describe el procedimiento para la verificación de la calibración del espectrofotómetro con el
dicromato de potasio.
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2.- Investiga la Ley de Lambert-Beer.

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CONCLUSIONES
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BIBLIOGRAFÍA

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86
 PRÁCTICA 17

INTERPRETACIÓN DE LA GRÁFICA DE LINEALIDAD

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO.

Elabora e interpreta la Grafica de linealidad para verificar el correcto funcionamiento del
espectrofotómetro.

FUNDAMENTACIÓN
La adecuada calibración instrumental es uno de los factores claves para lograr la veracidad
(exactitud) en los resultados analíticos.

INTRODUCCIÓN.
Los histogramas de frecuencias son gráficas que representan un conjunto de datos que se
emplean para representar datos de una variable cuantitativa. En el eje horizontal o de las abscisas
se representan los valores tomados por la variable, en el caso de que los valores considerados
sean continuos la forma de representar los valores es mediante intervalos de un mismo tamaño
llamados clases. En el eje vertical se representan los valores de las frecuencias de los datos. Las
barras que se levantan sobre la horizontal y hasta una altura que representa la frecuencia. Un
punto importante en el manejo de la información bajo el uso de histogramas es el hecho de poder
comparar, bajo un proceso en control, que a medida que se crecen las clase tiene
aproximadamente la forma de una campana centrada, que como veremos posteriormente, es la de
una de las distribuciones mas importantes conocidas como frecuencia normal o Gaussiana.

Alternativo al histograma de frecuencias podemos representar la información a través de los

llamados polígonos de frecuencias. Estos se construyen a partir de los puntos medios de cada
clase. La utilización de los puntos medios o marcas de clase son llevados al escenario gráfico
mediante la utilización de los polígonos de frecuencias. Se construye uniendo los puntos medios de
cada clase localizados en las tapas superiores de los rectángulos utilizados en los histogramas de
las gráficas. Su utilidad se hace necesaria cuando desean destacarse las variables de tendencia
central, como son media, modas y medianas.
Este tipo de diagramas puede ser de dos tipo, se puede considerar una figura geométrica en la que
la información se distribuye dentro de la figura como puede ser una dona o un anillo en el que cada
porción dentro de la figura representa la información porcentual del total de datos. La segunda
opción es la utilización de pasteles en los que una porción del pastel determinada por sectores
individuales la información para ese sector especifico.
Son gráficos en los que se puede agrupar para una misma clase diferentes frecuencias, por lo que
se hace apropiado su uso cuando se desea analizar tres diferentes resultados obtenidos, con
diferentes frecuencias pero con una misma clase
Este gráfico se construye utilizando pirámides para construir la representación de los datos bajo
cierta clase, la diferencia de información considerada entre cada clase será dada por el tamaño de
la pirámide. En ocasiones la frecuencia de cada clase se coloca en el extremo superior de cada

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87
clase, sin embargo también, al igual que en las anteriores puede resultar útil colocar información,
como el porcentaje de información en la punta de cada pirámide.
El diagrama lineal representa la información comparando las clases y frecuencias. En cierta forma
el polígono de frecuencias corresponde a un diagrama lineal, esto debido a que se utilizan este tipo
de diagramas para obtener la gráfica de la información. En otras ocasiones la comparación de las
clases son números con respecto a números, como el ejemplo que se muestra a continuación. Los
diagramas lineales suelen utilizarse para destacar la dependencia entre dos variables, como
veremos en le tema de dependencia lineal.
El pictograma consiste en la utilización de símbolos utilizados para representar un conjunto de
datos, en el caso de la representación de datos individuales a través de barras hemos utilizado los
pictogramas, sin embargo en áreas especificas convendría analizar el conjunto de datos.
A) Construye una gráfica colocando en el eje de las Y¨ la absorbancia y en el eje de las X la
concentración para cada uno de los puntos analizados. En una hoja milimétrica con los datos de la
practica que te indique el profesor.
B) Analiza la gráfica y redacta tus resultados

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CONCLUSIONES

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BIBLIOGRAFÍA.

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 PRÁCTICA 18

PRÁCTICA INTEGRADORA DE LAS FASES DE CONTROL DE

CALIDAD

RESULTADO DE APRENDIZAJE PROPUESTO

Aplica las fases Preanalítica, analítica, postanalítica del control de calidad en los
laboratorios clínicos

FUNDAMENTACIÓN

Una tecnología de laboratorio altamente controlada y sofisticada no es efectiva si ocurren errores

en la identificación de las muestras. Una apropiada obtención de la muestra y manipulación de esta
son, por lo tanto, de máxima importancia; la probabilidad de error en esas áreas son posiblemente
mayores que la probabilidad de error que pueda ocurrir durante las determinaciones de laboratorio.

Los errores en la obtención de la muestra abarcan desde la incorrecta identificación de la muestra

hasta la obtención de muestras.

INTRODUCCIÓN.

Las buenas practicas de laboratorio son una serie de lineamientos encaminados a que las
actividades en el laboratorio se realicen adecuadamente para asegurar o garantizar que los
resultados que se obtienen sean confiables. Estas son necesarias ya que sabemos que en la
realización de un análisis están involucradas una serie de variables que pueden deberse a
instrumentos de medición, manipulación del personal (técnicos y químicos), reactivos y sustancias
de referencia utilizadas, metodología aplicada, tipos de muestras que se manejan.

LAS FASES DE CONTROL DE CALIDAD DEL LABORATORIO CLÍNICO

Se refiere a los procedimientos que se han diseñado para realizarse dentro del laboratorio, con el
objetivo de evaluar su funcionalidad.
FASES DEL CONTROL DE CALIDAD
1 FASE PREANALÍTICA
2 FASE ANALÍTICA
3 FASE POSTANALÍTICA

FASE PREANALÍTICA
1.1Solicitud de exámenes
1.2Indicaciones previas al paciente el estrés afecta muchos constituyentes, las hormonas como la
prolactina, cortisol, alteran la concentración de la glucosa.
El alcohol induce la composición de líquidos corporales y enzimas hepáticas.

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 Fumar afecta a la lipasa, amilasa, colesterol, prueba de tolerancia la glucosa.
Postura.
Ingesta de medicamentos.

La identificación completa del paciente debe incluir:

Nombre completo
Sexo
Datos para localización (nombre, o numero de cama)
Dirección
Número de identificación que proporcione una forma única de identificación

El médico solicitante debe identificarse con:

Nombre completo, dirección, número de teléfono o código
El tipo de material biológico, por ejemplo orina, y el uso de cualquier conservador o medio
de transporte se debe especificar junto con la fecha en que se colectó la muestra. El carácter
infeccioso conocido o sospechoso de la muestra debe estar claramente indicado.
Los nombres de las características observables deben apuntarse en una forma aprobada,
basándose en nomenclatura reconocida junto con la propridad(procedimiento de rutina , urgente)
de cada característica observable.
La solicitud debe incluir suficiente información clínica para que permita al laboratorio emita
su propia
opinión de resultados. Los requisitos son distintos para cada características y pueden
incluir:
Diagnóstico y situación clínica del paciente
Ingestion de drogas
Restricciones especiales o procedimientos efectuados previamente o durante la medición,
resultados

En la toma de muestra esto dependerá de que tipo de origen sea la muestra por
Mencionar como:
Sangre
Saliva
Sudor
Muestra de orina para E.G.O, urocultivo, BAAR.
Muestra de heces: coprocultivo, coproparasitoscopico.
Muestra de esputo
Liquido seminal
Liquido cefalorraquídeo
Liquido amniótico
Gases arteriales
La muestra debe tomarse correctamente y bajo las condiciones más favorables para evitar errores
de interpretación.
La identificación correcta del paciente es esencial, sin embargo, no es raro que se cometan
errores, es importante etiquetar cada una de nuestras muestras en presencia del paciente con
información suficiente para evitar confusión con otras muestras.
La etiqueta debe incluir:
La identificación del paciente con su nombre o clave de identificación

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 Hora de la toma de muestra
Característica observable y tipo de muestra

4 Criterios de aceptación o rechazo de muestras, para eso debemos tener mucho en cuenta lo
siguiente:
Identificarla correctamente
El volumen sea el adecuado.
El No asignado por el laboratorio corresponda igualmente a las demás muestras.
El recipiente de recolección es el correcto
Muestras con hemólisis y coaguladas cuando son recolectadas con anticoagulantes.
Presencia de interferencias como fármacos.

Las interferencias se pueden presentar de la siguiente manera:

Turbidez h
hemólisis
Lipemia
Exposición a la luz: algunos analitos se ven afectados por la exposición a la luz.
Evaporación causa pérdidas en algunas pruebas microbiológicas así como analíticas, las
muestras deben ser tapadas para evitar contaminación.

Trasporte y conservación de la muestras

Manejar adecuadamente y trasportar las muestras inmediatamente al laboratorio para llevar a cabo
su
análisis.
Cuando se maneja cualquier muestra de cualquier origen, hay que llevar guantes y los tubos de
centrifugación deben estar tapados o sellados para evitar la transformación de aerosoles.
La muestra de pacientes de orina con SIDA, hepatitis y otras enfermedades contagiosas requerirán
consideración especial
El recipiente de la muestra deberá ser colocado en una bolsa de plástico, sellada y etiquetada de
forma visible con un rótulo.
Las muestras de orina y heces son potencialmente infecciosas y se deben tomar precauciones
para asegurar la seguridad del químico u otro personal y a los pacientes, aún cuando no sean
obvios los riesgos de infección.
Se deberá tomar precauciones para no contaminar el exterior de los recipientes ni el medio
ambiente con alguna muestra.
Si se derrama orina o muestra fecal, deberá limpiarse inmediatamente con un desinfectante
adecuado.
Cuando se detecta un riesgo de infección se detecta un riesgo un riesgo de infección se debe
aislar el recipiente, con etiqueta de alto riesgo.
Es importante que la solicitud no entre el contacto con la muestra y se deban observar
precauciones.

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Almacenamiento:

Uso de conservadores, refrigeración. Congelación.

Criterios de aceptación o rechazo de muestras

Cada laboratorio debe tener su protocolo operativo para aceptar o rechazar muestras basándose
en las consideraciones expuestas en ese documento.
Las muestras que son inadecuadas por falta de información, procedimiento de toma incorrecto,
preparación impropia del paciente, que no se haya preservado correctamente o que se hayan
almacenado y transportadas inadecuadas o por cualquier otra razón válida, deben rechazarse y
tomar medidas para la toma de nuevas muestras bajo en condiciones apropiadas.
FASE ANALÍTICA
Consiste cuando la muestra está preparada para su proceso, hay que tener en cuenta los
siguientes factores:
Reactivos
Material de vidrio
Equipo
Soluciones de control
Métodos de confiabilidad y aplicabilidad.

MÉTODOS OFICIALES:
Son aquellos requeridos por una ley o reglamento sin importar que sean validos.
MÉTODOS DE RUTINA:
Se utilizan con la finalidad de hacer un gran número de determinaciones en condiciones similares.
MÉTODOS ESTANDARIZADOS: son elaborados por organismos o grupos que se hacen estudios
de cobertura y son validos.
MÉTODOS DE REFERENCIA:
Aquellos que utilizan cualquier tipo de laboratorio con fines de calidad interno.
MÉTODOS MODIFICADOS:
Son métodos oficiales o de referencia que han sido modificados o acomodados a muestras
diferentes para los que fueron previstos y principalmente para eliminar la transferencia.
Los criterios que se deben tener para seleccionar un método son:
Necesidades de la población a la cual se presta el servicio y las demandas del personal del
laboratorio.
Recursos disponibles tanto físicos, como de equipo y personal.
Lograr un nivel de calidad mejor en el que nos proporciona los métodos anteriores.
La validación de un método es un proceso mediante el cual se evalúa loa atributos o
meritos.

Es importante valorar un método por que se utilizan estándares primarios de concentración

conocido o materiales de control que son similares a su composición de la muestra como son:
Solución estándar
Solución control.
Solución de referencia.
Solución de calibración

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FASE POSTANALÍTICA
OBTENCIÓN DE LOS VALORES DE REFERENCIA

Para obtenerlos se elige el tamaño de la muestra a procesar la población:

Que porcentaje se va a estudiar.
La población aparentemente sana entre 18-30 años.
Se busca pacientes que tenga criterios de:

INCLUSIÓN

18-30 años.
Aparentemente sanos.
Un muestreo total de 1000 muestras
Proceso de la muestra
Media, desviación estándar, coeficiente de variación.

EXCLUSIÓN:
*Sedentarismo.
*Obesidad.
*Antecedentes hereditarios.
*Embarazadas.
*Periodos de lactancia.
*Pacientes diabéticos.
*Enfermedades cardiopatías.
*Infecciones contagiosas: VIH, VPH, Hepatitis.etc.
*Tratamiento por fármacos.
*Alcohólicos.
*Fumadores.
*Drogadictos.

INFORME DE RESULTADOS

Información mínima del reporte debe estar conformada por:

Identificación completa del laboratorio
Nombre del paciente
Número de identificación de la muestra
Sexo
Localidad del paciente
Fecha y hora de la solicitud
Fecha y hora de obtención de la muestra
Fecha y hora de informe de resultados
Nombre del médico solicitante.
Nombre de la prueba solicitada.
Valor numérico
Unidades de la prueba medible
Valores de referencia
Firma de la persona responsable
Observaciones
Entrega del resultado.

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Los cálculos se realizan solamente cuando el número de laboratorios que han remitido resultados
no aberrantes es superior a 20.
También se proporcionan sendos gráficos de Levey-Jennings en los que se muestra la evolución
del error.
Cada laboratorio remite los resultados en las unidades que normalmente utiliza, la organización de
PREVECAL unifica las unidades para obtener los datos pertinentes y, una vez realizados los
cálculos, vuelve a transformar los datos de forma que cada laboratorio recibe la información en sus
propias unidades.

ACTIVIDAD.

1. A partir de la determinación de glucosa con el aparato ( ) en el cual obtuviste datos de

alguna de tus practicas y aplica un proyecto sintético en donde integres las tres etapas de control
de calidad, de acuerdo a los datos que manejes reportando resultados, cuadros, gráficas,
conclusiones. aplica las tres etapas de calidad integrando.

CONCLUSIONES.

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BIBLIOGRAFÍA

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 BIBLIOGRAFIA

1. Dharan Murali. Control de Calidad en los Laboratorios Clínicos 1ª. Ed. Editorial Reverté. ISBN

2. Jorge Suardiaz, Celso Cruz, Ariel Colina. Laboratorio Clínico. Editorial Ciencias Médicas.

3. 3. Lynch MJ, Raphael SS, Mellor LD. Métodos de Laboratorio. 2a ed. México: Editorial
Interamericana, 1996.

4. Graff SL. Análisis de Orina. Argentina: Editorial Médica Panamericana, 1987.

5. Strasinger SK. Líquidos Corporales y Análisis de Orina. México: Editorial El Manual Moderno,
1991.

6. Sonnenwirth AC, Jarett L. Métodos y Diagnósticos de Laboratorio Clínico 8ª ed. Argentina:

Editorial Médica Panamericana, 1986.

7. Armad V. Feigenbaum. Control Total de la Calidad: 3ª. Edición: México 2005.

8. Peter Jackson-. David Ashton. 1ª Edición. México 1996.

9. Kenneth L. Burdon. Ph. B. Sc., M., D. Microbiología. 8ª. Edición México 1985.

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