Determinación de Colesterol

SEGUNDA PRÁCTICA
METABOLISMO DE LOS LÍPIDOS E IMPORTANCIA CLÍNICA DEL COLESTEROL Y LOS
TRIGLICÉRIDOS
Colcha Valdivieso Mishell, Chasing Ortiz Ana Belén, Manzano Naranjo Christian Xavier, Orozco Delgado
Álvaro Santiago,

OBJETIVOS:

 Describir la clasificación de los lípidos de importancia médica y su metabolismo.

 Conocer la clasificación de las lipoproteínas y su rol en la homeostasis.
 Comprender el metabolismo del colesterol y triglicéridos.
 Determinar la relevancia de los lípidos y su relación con los trastornos clínicos asociados que son
dislipidemias y ateroesclerosis.

INTRODUCCIÓN
Los lípidos son moléculas orgánicas que se obtienen a partir de los macronutrientes de dieta en el ser humano,
denominados grasas. Entre las funciones de los lípidos están; almacenamiento de energía, formación de las
membranas biológicas hidrofóbicas, homeostasis corporal (1–3).
El transporte de los lípidos está determinado por las lipoproteínas, y de importancia clínica destacan la LDL y
HDL, su aumento y disminución están relacionados con el aumento de riesgo de ateroesclerosis. En condiciones
patológicas participan en la patogenia de enfermedades como la ateroesclerosis, diabetes u obesidad (2,4,5).
El colesterol, de igual manera, pertenece a los lípidos, aunque su estructura difiera de éstos. Fisiológicamente,
el colesterol es esencial en la formación de hormonas esteroideas; no obstante, pueden contribuir al daño de las
arterias si existe un consumo excesivo y ocasionar enfermedades con aumento del riesgo cardiovascular (5).

DESARROLLO
BIOQUÍMICA DE LOS LÍPIDOS
Los lípidos están formados por enlaces no polares En los humanos las cadenas varían de 2 a 24
entre carbono-carbono o hidrogeno-carbono, son carbonos:
compuestos insolubles en solventes polares como el
agua (hidrofóbicos), pero son solubles en solventes  Cadena corta: 2 a 6 carbonos
no polares como el éter (3,4).  Cadena mediana: 7 a 12 carbonos
o Son absorbidos directamente en el
Debido a su característica insolubilidad los lípidos intestino delgado y difunden a la
tienden a formar compartimentos, por ejemplo, las matriz mitocondrial (3).
gotas de triglicéridos que se almacenan en los  Cadena larga: 13 a 20 carbonos
adipocitos o ser transportados en las lipoproteínas  Cadena muy larga: más de 20 carbonos.
(1,3,4). o Para pasar a la mitocondria
Los ácidos grasos son los bloques estructurales de necesitan de la lanzadera de
los lípidos y constan de una cadena hidrofóbica de carnitina (3).
hidrocarburos con un grupo carboxilo terminal (- Estas cadenas pueden ser:
COOH) que se ioniza (-COO-). Se clasifican por el
número de carbonos presentes en la molécula (3).

Laboratorio de Bioquímica de Segundo Semestre 1

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 Cadena par: que son los más comunes en la Los lípidos de importancia clínica son:
naturaleza, como el ácido palmítico (4).
 Ácidos Grasos libres
 Cadena impar: como el ácido propiónico
 Triacilglicerol
que es precursor del propionil-CoA (4,6).
 Lípidos estructurales: fosfolípidos,
Y de acuerdo con la capacidad del cuerpo humano esfingolípidos y glucolípidos
para sintetizar a los ácidos grasos se tiene:  Esteroles: colesterol, ácidos biliares,
hormonas esteroideas (2,9,10).
 Esenciales: no pueden ser sintetizados y
deben ser ingeridos, como el ácido linoleico
que es el precursor del ácido araquidónico;
indispensable para la formación de DIGESTIÓN Y ABSORCIÓN DE LOS
prostaglandinas, leucotrienos y LÍPIDOS
tromboxanos; y el α-linoleico que es el Fuentes dietéticas
precursor de los ácidos grasos ω-3 (2,4,6).
 No esenciales como el ácido palmítico, que Los lípidos se encuentran en la dieta en manera de
es usado en la dieta humana (1). grasas. Se obtienen de origen animal y vegetal (2).

Al hablar de enlaces se obtiene: Las grasas saturadas, por lo general, son de origen
animal como la grasa de vacuno, mantequilla y
 Saturados: no tiene enlaces dobles. manteca (11,12).
 Insaturados: que tiene uno o más enlaces
dobles en la cadena de carbono y el ácido Las grasas insaturadas se obtienen principalmente
graso se dobla en esta posición (Figura 1) de aceites vegetales, frutos secos, semillas, pescado
(2). (4).

 ω-3: pescado y aceites de tipo vegetal como

el aceite de oliva, cártamo, maíz, girasol y
soja.
 ω-6: aceites de pescado (salmón, sardinas)
y aceite de soja
 ω-9: aceite de oliva (3,4)
Digestión
La digestión de los lípidos se inicia en la boca por
la lipasa lingual, enzima secretada por la glándula
Figura 1: A. Ácido graso saturado. B. Ácido graso salival parótida de secreción serosa que tiene por
insaturado donde se evidencia doblamientos en las función hidrolizar los ácidos grasos de cadena
posiciones que tienen enlaces dobles. mediana y larga (1,2).
Fuente: Ferrier D. Metabolismo de los lípidos. En: En el estómago se da la secreción de lipasa
Bioquímica. 7a ed. Lippincott. Wolters Kluwer; gástrica, enzima secretada por las células
2018. principales, su función es hidrolizar los triglicéridos
hacia mono y diglicéridos (1,2,8).
Las formas más comunes de lípidos son los aceites,
grasas y las ceras (1). Estas formas comparten las En la segunda porción del duodeno, el páncreas
siguientes similitudes: apoya con la secreción de lipasa, colipasa y
colesterol esterasa, que hidrolizan los lípidos de la
 están formadas por carbono, hidrogeno y dieta en colesterol no esterificado, ácidos grasos y
oxígeno; moléculas de monoglicéridos (1).
 poseen una o más subunidades de ácidos
grasos, y;  La lipasa pancreática hidroliza los
 no poseen estructura de anillo (9,10). triglicéridos y los monoglicéridos hacia
ácidos grasos libres (8).

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Las sales biliares conjugadas (bilis), secreción de la están compuestos por una capa externa
vesícula biliar, junto con la mezcla mecánica que hidrofílica y una capa interna hidrofóbica, esta
ejerce la peristalsis permiten la emulsificación de estructura permite que puedan englobar grasas
los lípidos (1). y vitaminas liposolubles en un paquete que
puede ser absorbido por el enterocito (Figura 2)
La secreción pancreática y biliar está controlada
(3,7,8).
por:

 Colestocinina: hormona secretada por

células de la mucosa de yeyuno e íleon,
promueve la contracción de la vesícula
biliar y la secreción de las células exocrinas
del páncreas, reduce la motilidad del
estómago (3).
Figura 2. Estructura de una micela.
 Secretina: promueve la liberación de
bicarbonato por parte del páncreas, para Fuente: Kaplan Medical. USMLE Step 1 Lecture
una adecuada actividad enzimática por el Notes: Biochemistry and Medical Genetics. 2023.
pH (1,3).
Estos ácidos grasos se acoplan a quilomicrones que
Absorción pasan al sistema linfático por medio del vaso
quilífero central (Figura 3) (3).
Los lípidos de la dieta, que son triacilgliceroles,
fosfolípidos y ésteres de colesterol, no son
absorbidos directamente por el epitelio intestinal,
porque son hidrofóbicos y de gran tamaño
molecular (6).
Los ácidos grasos de cadena corta y mediana entran
al enterocito y luego son transportados, unidos a la
albumina, por la vena porta al hígado para luego
pasar a circulación general (6). Figura 3. Generación y secreción de quilomicrones
en células de la mucosa intestinal.
En cambio, los ácidos grasos de cadena larga al
entrar al entrar al enterocito deben pasar por la Fuente: Ferrier D. Metabolismo de los lípidos. En:
resíntesis de triglicéridos y esteres de colesterol, a Bioquímica. 7a ed. Lippincott. Wolters Kluwer;
través de los siguientes pasos (4,6): 2018.
1. Los lípidos absorbidos migran al retículo Trasporte lipídico
endoplasmático liso, donde se da la
biosíntesis de lípidos complejos (2,4). Los ácidos grasos se transportan en lipoproteínas y
2. Los ácidos grasos de cadena larga mediante los ácidos grasos libres no están unidos a una
la acil coenzima A sintetasa se convierten a lipoproteína sino a la albúmina (1).
su forma activa (2,4). Lipoproteínas: son complejos macromoleculares
3. Se forman nuevos triglicéridos por esféricos de lípidos y proteínas que tiene por
reacilaciones secuenciales mediadas por la función el transporte sanguíneo de los lípidos (1).
monoglicerol transferasa y la acil CoA
diacilglicerol aciltranferasa. El colesterol Respecto a su estructura, consiste en una capa
se acila por la colesterol aciltransferasa hidrofílica (apolipoproteína) y un centro lipídico
(2,4). interno hidrofóbico que contiene ésteres de
colesterol y TG (Figura 4) (2,3).
Los lípidos al ser “procesados” por las enzimas
ya mencionadas permiten la formación de La densidad en inversamente proporcional al
micelas en el aparato de Golgi, que son tamaño de la lipoproteína, por tanto, en orden
agregados coloidales de forma esférica, que creciente de tamaño las lipoproteínas son (3):

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 Apo C-IlI: inhibidor de la LDL.

 Apo E: ligando del receptor de LDL, y
media la entrada de lipoproteínas en el
hígado (2).
Además, desatacan las siguientes enzimas:

 Lipoproteinlipasa (LPL): presente en el

endotelio vascular y tejido adiposo; se
encarga de escindir a los VLDL para
almacenarlos adecuadamente como TG o
Figura 4. Esquema de las lipoproteínas.
liberarlos como ácidos grasos libres.
Fuente: Kaplan Medical. USMLE Step 1 Lecture Su mayor actividad es estimulada por la
Notes: Biochemistry and Medical Genetics. 2023. insulina, que también induce la lipogénesis,
es decir induce síntesis y almacenamiento
Tabla 1: Lipoproteínas (8). de ácidos grasos (9,10).
Lipoproteína Función Apoproteína  Lecitina colesterol aciltransferasa (LCAT):
HDL (high Transporte Apo E está presente en HDL y esterifica el
density inverso de Apo A-I
colesterol libre para transportarlo. Es
lipoprotein) colesterol Apo C-II
activada por Apo-AI (1,4).
LDL (low Transporte de Apo B-100
density colesterol hacia
lipoprotein) los tejidos
IDL Transporte de Apo E SÍNTESIS DE NOVO DE ÁCIDOS GRASOS
(intermediate colesterol y TG Apo B-100
density al hígado Cuando una persona tiene una dieta excesiva en
lipoprotein) carbohidratos, estos tienden a almacenarse como
VLDL (very Transporte de Apo E grasa en el tejido adiposo, y secundariamente en el
ow density colesterol y TG Apo C-II hígado, cerebro, riñón y glándulas mamarias; en el
lipoprotein) del hígado a los Apo B-100 citosol celular (9,10).
tejidos
Quilomicron Transporte de Apo E La síntesis de ácidos grasos se puede dividir en:
lipidos de la Apo C-II 1. Formación del precursor clave malonil-
dieta hacia el Apo B-48 CoA a partir de la acetil-CoA por la acetil-
hígado
Coa Carboxilasa, esta enzima es regulada
Fuente: Kaplan Medical. USMLE Step 1 Lecture
por la insulina. Después estos precursores
Notes: Biochemistry and Medical Genetics. 2023.
por medio de la sintasa de ácidos grasos se
Cada lipoproteína adquiere su función de acuerdo da la elongación de la cadena con 2
con el grupo Apo (apoproteína) que posee en su carbonos (3,6).
membrana. Entre ellas se tiene a: 2. El proceso se repite secuencialmente siete
veces, donde se produce palmitato y sintasa
 Apo A-I y Apo A-II: principal componente de ácidos grasos, finalmente el palmitato
en la formación de HDL, activan a LCAT. actúa como precursor de ácidos grasos (4).
 Apo B-48: es exclusiva de los 3. Desaturación de cadenas por desaturas de
quilomicrones y es su principal acil CoA grasas (3,4).
componente estructural.
El ácido palmítico de 16 carbonos que puede
 Apo B-100: ligando para el receptor de
elongarse hasta formar compuesto de hasta 22 a 24
LDL.
carbonos, especialmente en el cerebro, que
 Apo C-Il: es el cofactor de la LPL, activa a
participan en la mielinización.
esta enzima, permitiendo la hidrolización
de los TG para formar ácidos grasos libres
y glicerol.
β-OXIDACIÓN DE LOS ÁCIDOS GRASOS

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Los lípidos son los nutrientes con más aporte

calórico conocido en la naturaleza
LÍPIDOS DE IMPORTANCIA CLÍNICA
(aproximadamente 1 gramo aporta 9 kcal) (4).
Para producir energía se requiere que los ácidos Colesterol
grasos para por la β-oxidación, este proceso ocurre Es un alcohol esteroide policíclico de 27 carbonos,
en la matriz de la mitocondria celular, y la vía consta de 4 anillos hidrocarbonados (núcleos
principal de catabolismo de los ácidos grasos (3). esteroides) y una cadena hidrocarbonada (Figura 5)
(3,4).
Los ácidos grasos deben convertirse en Acil-CoA
previamente para poder producir energía. Esta
molécula produce unidades de Acetil-CoA que
ingresan al ciclo de los ácidos tricarboxilicos (Ciclo
de Krebs) para la producción de energía (1,3).
La producción global de ATP por gramo de ácido
palmítico es el doble de lo producido por gramo de
glucosa (13,14).
Durante el ejercicio prolongado, los músculos
necesitan más disponibilidad de oxígeno y esto es
directamente proporcional al número de Figura 5. Estructura del colesterol.
mitocondria que contiene. Si posee más Fuente: Ferrier D. Metabolismo de los lípidos. En:
mitocondrias, la oxidación de los ácidos grasos Bioquímica. 7a ed. Lippincott. Wolters Kluwer;
resulta ser la mejor forma para proveer de energía 2018.
(14,15).
Se obtiene de la dieta, principalmente de fuentes
animales (fuente exógena), pero también puede ser
FORMACIÓN DE LOS CUERPOS sintetizado de manera endógena por todos los
CETÓNICOS tejidos, pero destacan el hígado, intestino, corteza
suprarrenal y tejidos reproductivos (fuente
En los hepatocitos, las mitocondrias pueden formar endógena) (2).
cuerpos cetónicos a partir de acetil CoA, derivada
de la β-oxidación (3). Se sintetiza a partir de moléculas de acetil-CoA
(Figura 6) que es producto de varias vías
Los cuerpos cetónicos son acetato, β- metabólicas como el ciclo de Krebs, la glucólisis,
hidroxibutirato y acetona (1). beta-oxidación de ácidos grasos (2,3).
Son el combustible alternativo para las células
porque son hidrosolubles, lo que les permite viajar
libremente y porque se producen cuando el acetil
CoA es excesivo, además el músculo esquelético,
músculo cardiaco, mucosa intestinal y la corteza
renal lo usan para cubrir sus necesidades
energéticas (2–4).
En condiciones de ayuno e inanición prolongada
hay un aumento en el metabolismo de los ácidos
grasos, porque se necesita crear energía a partir de Figura 6. Síntesis de colesterol a partir de Acetil
elementos no carbonatados (gluconeogénesis) y CoA. Se observa que los isoprenoides y el colesterol
esto es posible por la activación de hormonas como regulan negativamente la vía (16).
el glucagón. En periodos de estrés participa el
cortisol, elevando los niveles de ácidos grasos en
sangre (3,7).

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Fuente: Arguedas, J. Actualización en

farmacoterapia: la farmacología de las estatinas.
Rev. Costarric. cardiol. [Internet]. 2002
El acetil-CoA se transforma a colesterol, el paso
más importante es catalizado por la enzima HMG-
CoA reductasa, que trasforma el HMG-CoA a
Mevalonato en el citoplasma (4,6).
Entre las diversas funciones que lleva a cabo están:

 Forma parte de la capa bilipídica de la

membrana celular, otorgándole fluidez y
estabilidad (4). Figura 7. Absorción del colesterol hacia el
 Precursor de hormonas esteroideas enterocito.
(andrógenos, estrógenos, coticoides),
Fuente: Lipids and their metabolism. AMBOSS
ácidos biliares (4).
[Internet]. 2022.
 Formación endógena de vitamina D3 (4).
Para ingresar el colesterol al organismo sigue un
proceso metabólico (Figura 7): Triglicéridos o triacilglicerol (TG o TAG)
1. El colesterol dietético se compone de Está compuesto por una molécula de glicerol
colesterol libre y esterificado (unido a (proveniente de la glucosa) y 3 cadenas de ácidos
ácidos grasos) que se descomponen en grasos esterificados (Figura 8). Constituyen el 90%
colesterol y ácidos grasos libres por medio de los lípidos consumidos en la dieta (2,3).
de la enzima colesterol esterasa;
2. El colesterol se combina con los ácidos
biliares para formar micelas;
3. Luego en el citosol de los enterocitos se da
la esterificación;
4. Es transportado junto con los TG dentro de
los quilomicrones;
5. Cuando llega al hígado son traspasados a
las lipoproteínas (VLDL, IDL) para ser
llevado a los tejidos;
6. Las células periféricas usan el colesterol.
7. Para la eliminación es necesario el
transporte inverso, consiste en el transporte
del colesterol desde tejidos periféricos Figura 8. Síntesis de un triglicérido a partir de una
hacia el hígado, unido a HDL e IDL; molécula de glicerol y 3 ácidos grasos. Durante la
8. Finalmente es excretado en forma de sales reacción se liberan 3 moléculas de agua.
biliares por la bilis (1–4,8). Fuente: Baynes J. Metabolismo oxidativo de los
lípidos en el hígado y el músculo. En: Medical
Biochemistry, 5a ed. Elsevier España; 2019.
Son almacenados en el tejido adiposo donde
fácilmente puede ser catabolizados a través de la β-
oxidación, dando como resultado grandes
cantidades de ATP. Son los lípidos usados
principalmente con fines energéticos (6).

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No pueden formar micelas y se almacena en el Hiperlipidemia: niveles elevados de lípidos en

citosol de los adipocitos en su forma anhidra, en el sangre (colesterol total, LDL, triglicéridos) (5,17).
hígado, tejido adiposo, glándulas mamarias
lactantes y células de la mucosa intestinal en forma  Hipercolesterolemia: Elevación de la
de gotas citoplasmáticas, son la principal reserva de concentración de colesterol total.
combustible energético del cuerpo (3,4,6).  Hipertrigliceridemia: niveles de
triglicéridos elevados.
La mayor parte de los triglicéridos permanecen  Hiperlipoproteinemia: niveles elevados
empacados en la VLDL (3). de ciertas lipoproteínas (5,17).
APLICACIÓN CLÍNICA Estas alteraciones pueden deberse a etiologías
primarias de causa genética como
Dislipidemias
hiperlipoproteinemias hereditarias; o ser
Las dislipidemias abarcan una amplia variedad de secundarias (4), causadas por:
trastornos que se caracterizan concentraciones
anormales de los lípidos en sangre, por lo general se  factores ambientales (estilo de vida)
observa concentración elevada de colesterol,  enfermedades adquiridas: Diabetes,
triglicéridos y/o lipoproteínas en la sangre, y HDL Enfermedad renal, alcoholismo,
bajo) (17). hipotiroidismo, uso de fármacos (Tabla 2)
(4,17).

Tabla 2: Asociación entre niveles anormales de lipoproteínas y TG con situaciones clínicas

(3–5,7,8,17)
Elevado en Reducido en Correlación
 Estilo de vida saludable  Hipertrigliceridemia  Los valores elevados tienen
HDL  Consumo moderado de alcohol  Obesidad un efecto protector contra la
 Administración de estrógenos  Fumar aterosclerosis.
 Dieta rica en grasas
 Síndrome nefrótico
 El nivel elevado se
 Hipotiroidismo
LDL correlaciona con el riesgo
 Enfermedad de Cushing
de aterosclerosis
 Diabetes mellitus (I y II)
 Estilo de vida
 Colestasis familiar saludable (restricción
 Consumo de alcohol calórica, actividad  El riesgo
física) de aterosclerosis no ha sido
 Obesidad familiar
completamente
 Síndrome nefrótico
TG determinado.
 Enfermedad de Cushing
 Niveles muy altos están
 Dieta hipercalórica asociados a pancreatitis
 Diabetes mellitus aguda.

En la tabla 2 podemos observar que el nivel elevado de HDL se relaciona como un efecto protector (por lo que
se lo considera “deseable”) y el nivel elevado de LDL es un factor de riesgo (considerado “perjudicial”) (17).
Los valores de corte que se establecen como valores “óptimo” o “deseables” son el resultado de investigaciones
en las cuales se ha logrado observar que a partir de ciertos niveles (sean elevados o disminuidos) los pacientes
empiezan a tener mayor riesgo de enfermedades cardiovasculares y metabólicas, es lo que se conoce como perfil
lipídico (Tabla 3) (4,5,17).

Tabla 3: Parámetros de laboratorio del metabolismo de las grasas (1–4,8)

Parámetro Nivel óptimo Niveles anormales

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Límite: 200–239 mg/dL

Colesterol total < 200 mg/dL
Alto: ≥ 240 mg/dL
Límite: 150–199 mg/dL
Triglicéridos < 150 mg/dL Alto: 200–499 mg/dL
Muy alto: ≥ 500 mg/dL
Casi óptimo: 100–129 mg/dL
Límite alto: 130–159 mg/dL
LDL < 100 mg/dL
Alto: 160–189 mg/dL
Muy alto: ≥ 190 mg/dL
≥ 40 mg/dL en varones
HDL Bajo: < 40 mg/dL
≥ 50 en mujeres

Para obtener una muestra sanguínea de calidad es hiperhomocisteinemia, obesidad y

importante que: alcoholismo (8).
 No modificables: predisposición genética,
1. El paciente mantenga su dieta habitual.
antecedentes familiares de enfermedad
2. El día del examen no debe realizar deporte
cardiaca temprana, edad (hombres: >45
antes de la toma de la muestra.
años; mujeres: >55 años) (8).
3. Evitar situaciones estresantes antes y
después la toma de la muestra. Fisiopatología
4. Debe tener un ayuno estricto de 8 a 12
horas. Las placas de ateromas involucran a la inflamación
5. No haber consumido alcohol durante 24 crónica de bajo nivel en la íntima (endotelio) de la
horas antes del examen (17). arterias, elásticas y musculares principalmente, con
el consiguiente compromiso hemodinámico (Figura
Los trastornos de lípidos no tienen signos o 9) (1).
síntomas específicos, y suelen manifestarse
tardíamente cuando los niveles de lípidos son muy
altos (17).
Los lípidos se acumulan en los tejidos produciendo:

 Xantomas
 Xantelasmas
 Hígado graso
 Pancreatitis
Figura 9. Corte histológico en donde se evidencia
 Ateroesclerosis (17)
plas de ateromas en arterias. Las flechas indican el
depósito hialino que produce la estenosis de la luz
de los vasos sanguíneos.
ATEROESCLEROSIS
Fuente: Bonert, M. Renal arterial hyalinosis.
La aterosclerosis es el tipo más común de
Wikimedia Commons [Internet], 2011.
arteriosclerosis, que cursa con aumento del grosor y
rigidez de la pared arterial (3,4,18). La formación de la placa de ateroma involucra los
siguientes pasos (Figura 10):
La etiología es multifactorial, pero se puede definir
dos grandes grupos de factores de riesgo para su
desarrollo (17,18):

 Modificables: tabaquismo, diabetes,

hipertensión arterial, dislipidemia,

Laboratorio de Bioquímica de Segundo Semestre 8

 Determinación de Colesterol

Las enfermedades asociadas a la aterosclerosis son

producidas bien por la oclusión y disminución del
flujo sanguíneo de manera progresiva, o bien por la
formación de trombos y el consecuente infarto de la
zona ocluida (17). Los vasos más comúnmente
afectados son:

 Arterias coronarias: su oclusión está

vinculado al infarto agudo de miocárdica
(IAM) (5).
 Círculo de Willis y arterias carótidas: su
Figura 10. Formación de la placa de ateroma.
oclusión produce eventos
Fuente: Atheromatous Plaque Formation Artery.
cerebrovasculares (ECV) de tipo isquémico
Dremastime.
(5).
1. Estrés crónico del endotelio niveles  Arterias poplíteas: y consecuente
anormales de lípidos en sangre (5). enfermedad arterial periférica o
2. Disfunción endotelial que permite el tromboembolia pulmonar (5).
depósito de lípidos por parte de LDL en la  Aorta abdominal: que al tener un
túnica íntima (3,4). debilitamiento de la pared vascular tienden
3. Liberación de citocinas inflamatorias que a desarrollarse aneurismas aórticos (5).
estimulan a fibroblastos que depositan
factores de crecimiento y se transforman en
miofibroblastos (3). PREVENCIÓN
4. La respuesta inflamatoria provoca la
quimiotaxis de macrófagos hacia el sitio de La prevención primaria se basa en la evaluación de
inflamación, estos macrófagos fagocitan el los factores de riesgo, cambios en el estilo de vida
LDL oxidado y se transforman en células como reducción de peso, modificación de la dieta,
espumosas (1). evitar el tabaquismo, etc (14,15).
5. Las células espumosas se acumulan en la La prevención secundaria se enfoca en reducir el
capa íntima de la arteria disminuyendo la luz impacto de la enfermedad y para ello se necesita de
del vaso, con formación de la placa de diagnóstico oportuno y tratamiento farmacológico
ateroma, compuesta por un centro necrótico optimo (14,15).
graso envuelta de una capa fibrosa (1).
6. Liberación de enzimas por parte de las Detección oportuna
células inflamatorias que debilita la capa
Las dislipidemias al ser enfermedades silenciosas
superior fibrosa y se generan estrías de grasa
pueden pasar desapercibidas por años. Es necesario
por el daño que generan las
su diagnóstico en grupos poblacionales con factores
metaloproteinasas secretadas por los
de riesgo (14,15).
macrófagos (7,18)
7. La túnica íntima se calcifica, si se produce Indicaciones: se realizará un perfil lipídico a los
una calcificación grande y difusa, la placa se siguientes pacientes:
estabiliza. Una calcificación pequeña y
dispersa sumada a la capa fibrosa superficial  Todas las personas de 40 a 75 años
debilitada aumenta la probabilidad de  Pacientes con antecedentes familiares de
ruptura de la placa, exponiendo material hipercolesterolemia familiar o enfermedad
trombogénico (18). cardiovascular ateroesclerótica prematura
8. La oclusión del vaso sea total o parcial (14,15).
produce la disminución del flujo sanguíneo Según los resultados, podemos intervenir con
a tejidos produciendo enfermedades, terapéuticas que se centren en las modificaciones
dependiendo del lugar de oclusión (18).
del estilo de vida (prevención de factores de riesgo

Laboratorio de Bioquímica de Segundo Semestre 9

 Determinación de Colesterol

modificables) o iniciar la terapia farmacológica con La intensidad de color que produce la quinonimina
el uso de hipolipemiantes como las estatinas. Con el se correlaciona directamente con la con la cantidad
fin de mantener los niveles lipídicos en los niveles de colesterol presente en la muestra (19).
óptimos y prevenir complicaciones (14,15).
Reactivos
1. Una solución de colesterol de
FUNDAMENTOS DE LA PRÁCTICA concentración conocida: 200 mg/dl, a la
que se llama "estándar".
DETERMINACIÓN DE COLESTEROL 2. El reactivo mismo que contiene las enzimas
TOTAL EN PLASMA SANGUÍNEO POR CHE, CHO y POD (6,19).
ESPECTROFOTOMETRÍA
El reactivo está dotado de una sustancia que aclara
Fundamento
la turbidez que se presenta en muestras de plasmas
Se trata de una prueba colorimétrica enzimática lipémicos, esta sustancia se llama "Factor aclarante
(Figura 10). de lípidos"(4).
Equipos y materiales
Espectrofotómetro, Baño de aire caliente, Vortex,
centrífuga clínica, Pipeta automática de 10ul,
microcubeta (individual), punta amarilla individual,
guantes (individual), jeringuilla, tubo de ensayo de
tapa roja (contiene el reactivo). Tubo de ensayo de
tapa lila (contiene el anticoagulante EDTA al 10%),
gradilla y algodón antiséptico (19).
Procedimiento
1. Extraiga 3 ml de sangre venosa del pliegue
del codo.
2. Trasvase cuidadosamente la sangre al tubo
Figura 10. Reacciones para la determinación de
de ensayo de tapa lila - Mezcle suavemente
colesterol total y sus fracciones.
por inversión unas tres veces y lleve el tubo
Fuente: Departamento de Bioquímica y Biología a la centrifugadora.
Molecular. Cuaderno de Prácticas: Bioquímica 3. Centrifugue a 3000 rpm por cinco minutos,
Humana. Universidad Complutense de Madrid retirar el tubo de la centrífuga y colocarlo
[Internet]. 2019. en la gradilla.
4. Acople la punta amarilla a la pipeta
1. Los ésteres del colesterol contenidos en el automática y aspire 10 ul del plasma
plasma sanguíneo son separados en sus dos sobrenadante en el tubo de tapa lila.
componentes Colesterol y Ácidos grasos, 5. Dispense los 10 µl de plasma contenidos en
por la enzima Colesterol Esterasa (CHE). la punta amarilla en el tubo de tapa roja
2. El colesterol en estado libre es oxidado por (contiene el reactivo). Coloque la tapa,
acción de la enzima Colesterol Oxidasa agite el tubo en el Vortex por cinco
(CHO o COD) dando como productos de la segundos.
reacción agua oxigenada (H2O2) y una 6. Colocar el tubo de tapa roja en el baño de
cetona de colesterol. aire caliente a 37° C por 5 minutos.
3. El peróxido de hidrógeno junto con 4- 7. Ajuste el espectrofotómetro para la
aminofenazona y fenol por acción de la determinación a longitud de onda a 500 nm.
Peroxidasa (POD) produce una sustancia 8. Trasvase la muestra (tubo de tapa roja) a su
coloreada que se llama quinonimina (19). microcubeta y mida la absorbancia de la
muestra.
9. Interprete los resultados obtenidos (19)

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 Determinación de Colesterol

PERLAS

El metabolismo de los humanos no es capaz de generar dobles enlaces en el carbono 10 hasta el extremo ω;
por ello los alimentos con ácidos ω-6 linoleico y ω-3 linolénico deben formar parte de la dieta (6–8).

la lipasa lingual y gástrica son lipasas acidas que hidrolizan los ácidos grasos de los triglicéridos, en especial
las cadenas cortas y medianas; por ello son de vital importancia en lactantes porque los lípidos de la leche
materna son la principal fuente para producir energía (3).

Los pacientes con trastornos de mala absorción se manifiestan con esteatorrea y pueden tener una nutrición
basada en ácidos grasos de cadena corta y mediana, porque estos son captados por los enterocitos sin necesidad
de micelas (3,4).

La síntesis de colesterol es regulada por la 3-hidroxi-3metilglutaril CoA reductasa (HMG CoA reductasa). La
insulina activa a la HMG CoA reductasa mientras que el glucagón, epinefrina y las estatinas (fármacos) la
inhiben (3,6).

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 Determinación de Colesterol

CASO CLÍNICO

Paciente masculino de 52 años acude a nuestra consulta. Aporta una bioquímica de sangre en ayunas
en la que destaca un colesterol total de 325 mg/dl, HDL: 45 y triglicéridos de 300 mg/dl. Hábitos:
fumador de aproximadamente 15 cigarros/día desde hace 20 años. Antecedentes personales y
familiares normales. Exploración física: TA 140/90, Talla=1,70m Peso 75kg, resto sin alteraciones.
¿Calcule el colesterol LDL?

a. 220 mg/dl
b. 340 mg/dl
c. 230 mg/dl
d. No se puede realizar el cálculo por que los triglicéridos están muy elevados

Rp.: A

PREGUNTAS DE REVISIÓN DE PRÁCTICA

1. Indique lo verdadero con respecto a los quilomicrones:

a. Son partículas muy grandes que llevan lípidos en la dieta.
b. Están asociados con una variedad de apolipoproteínas, que incluyen AI, A-II, A-IV, B48,
CI, C-II, C-III y E.
c. a y b son verdaderas

Rp.: C

2. Son factores de riesgo para aterosclerosis:

a. Edad (hombres >45 años; mujeres >55 años),
b. Fumador(a), hipertensión arterial (TA >140/90 mmHg o estar bajo tratamiento antihipertensivo);
c. Cifras bajas de HDL (<40 mg/dL);
d. Historia familiar de EAC prematura (en parentela masculina de primer grado <55 años en parentela
femenina de primer grado < 65 años).
e. Todas son verdaderas

Rp. E

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Determinación de Colesterol

LABORATORIO DE BIOQUÍMICA
HOJA DE EVALUACIÓN (POSTREQUISITOS)

MATERIA
NOMBRE
PARALELO
TEMA DE LA PRÁCTICA

Laboratorio de Bioquímica de Segundo Semestre 13

 Determinación de Colesterol

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