Patología y Diagnóstico Oral Clase 1, Dr.
Marcelo Sánchez
II Unidad 11 mayo 2009
ESTUDIOS HISTOPATOLÓGICOS: BIOPSIA
Empezamos con algunas imágenes de algunas lesiones de tipo frecuentes que a uds. les va a
tocar ver. Son casos que hemos tratado en alguna oportunidad. Son lesiones que vemos
frecuentemente y por lo mismo podemos decir a priori que tipo de lesión es, pero si yo tengo
que investigar y poner las manos al fuego y decir que eso es tal cosa, no puedo, por mucho
que me crea, necesito del diagnostico histopatologico para saber que es.
Ejs: eso puede ser una mancha, una tinción o simplemente que se transluce una laguna
vascular.
Esto puede ser simplemente una mordida, puede ser una lesión de tipo herpético o puede ser
un fibroma.
Eso puede ser un cáncer, pude ser una infección, una reacción autoinmune.
Eso puede ser solamente una ulcera, una alteración por un herpes, puede ser una lesión solar
que se llama quielitis actínica que después la van a conocer o puede ser cáncer, pero no lo
puedo decir, necesito la biopsia. Lesiones en el paladar, labio, mejillas, lengua.
Estas lesiones que les mostré no son nada rebuscadas, son súper comunes; ahora, que es lo
que vamos a lograr a este año es que uds. conozcan el diagnóstico, puedan predecir un
pronostico, puedan adelantar un tratamiento y realizar un tratamiento de las enfermedades
más frecuentes para lograr la salud de un paciente.
Ahora, estas son preguntas que se van a hacer ahora por que no tienen el conocimiento y
espero que no se las hagan cuando lleven dos o tres años trabajando en un consultorio: ¿qué
hago? ¿Qué es esto? ¿Por dónde empiezo? A esto responden la Semiología, la Semiotecnia y la
Clínica Semiológica; uno es identificar (semiología), la semiotecnia como técnica me permite
buscar los elementos de la enfermedad y por ultimo la clínica que es el integrador para poder
interpretar y lograr un diagnóstico y para eso tienen:
o La anamnesis
o Examen físico general y segmentario
o Exámenes complementarios
o Epidemiología ( que muchas veces no se toma en cuenta, pero su importancia radica
en que nos va a dar la frecuencia de las enfermedades y tengo que basarme en lo más
frecuente, tengo que saber lo que es común; si las características se escapan a lo
común ahí pienso en otras alternativas)
Dentro de los exámenes complementarios están:
o Estudios de laboratorio
o Estudios bacteriológicos
o Estudios histopatológicos
El examen histopatológico es el examen fundamental del patólogo oral. Para ello debemos
conocer algunas cosas como por ejemplo los tipos de tejidos que vamos a encontrar, por
ejemplo los tipos de tejidos que están conformando la mejilla o la encía, hueso o ganglios.
Los 4 básicos:
1. tejido epitelial
2. tejido conectivo
3. tejido muscular
4. tejido nervioso
Siendo los dos primeros con los que uds. Van a tener mayor contacto ya que la mucosa oral
es un epitelio y el epitelio siempre va a tener contacto con un tejido conectivo que lo
mantiene, que le da firmeza y que le permite la nutrición y que a través de él va a tener toda
la protección por mecanismos de tipo defensivo y desde el conectivo al epitelio que le avisa
al sistema inmune que algo está pasando sobre él.
Ahora, ¿cómo obtengo el material histológico?
o A través de Biopsias ( cuando el paciente esta vivo)
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o Necropsias ( el paciente ha fallecido)
o Estudios experimentales (¿terapia fetal?)
o Cultivo de células o tejidos
o Frotis o extendidos
Principalmente biopsias y frotis son las dos técnicas que más van a conocer y utilizar. Sea
biopsia o frotis UDS. LO PUEDEN REALIZAR ya que estarán capacitados como odontólogo
general para realizarlos (también cultivos). Obviamente la biopsia quirúrgica va a depender
de las capacidades que tengan y lugar donde la puedan realizar, porque algunas pueden ser
de forma ambulatoria y en otras se necesita pabellón. (Acá en la escuela se hace todo en
pabellón) mayor seguridad para el paciente y para los profesionales.
Ahora, cuales son los exámenes histopatológicos:
o En primer lugar la Biopsia
o La citopatología
o La imunohistoquímica
o La identificación por marcadores los dos últimos son casi lo mismo)
Son los medios que tenemos para realizar estudios histológicos.
Ahora, ¿que es una biopsia? R: Es la extracción de un tejido con fines de estudio. Es una
técnica quirúrgica para el estudio para determinar un diagnóstico.
Recordar: técnica quirúrgica, estudio y diagnóstico.
Entonces es una técnica quirúrgica en donde se extrae un tejido para el diagnóstico, o
también, “Rutina quirúrgica en donde se corta un trozo de tejido vivo para ser procesado y
ser estudiado y diagnosticado a través del microscopio”
Por ejemplo, en este caso, es imprescindible saber que tiene esa persona, yo no puedo
pensar que eso es producto de una enfermedad periodontal, este es un ejemplo extremo,
pero yo necesito en este caso tener un diagnóstico, y eso lo hago obteniendo una muestra que
la coloco en este frasco con un fijador, el que va a ser enviado con una historia clínica del
paciente, para obtener esto, que es un corte histológico (un corte de tejido), esa es la clave
para nosotros, y para ver esto es lo que vamos a ver durante toda la clase, esto es lo que nos
permite saber si existen cambios clínicos, y que todos esos cambios clínicos se pueden
traducir en cambios morfológicos tanto a nivel macroscópicos como a nivel clínico, pero a
nivel microscópico nos va a decir por qué, y aquí, para el que tiene experiencia en placas
histológicas esta viendo que hay un epitelio súper desordenado, y con alteraciones como que
halla queratina a nivel del conectivo, ya es algo que no corresponde, porque la queratina
tiene que estar a este nivel, entonces si hay una alteración estructural, aquí hay células
epiteliales, que están metidas en el conectivo y que deberían de estar acá, por lo que esta es
una alteración completa del desarrollo, por lo que corresponde a una neoplasia maligna. Y
todo se traduce en esto que es el Informe Histopatológico, en este caso un Carcinoma
Espinocelular, el nombre del patólogo el Dr. Venegas, y luego la fecha del informe.
Hay muchos tipos de biopsia y que ustedes las van a conocer en la guía de taller, existen
muchos tipos de biopsia, pero fundamentalmente se trabaja con esta, que la divide en dos
tipos: una Excisional y una Incisional, la diferencia en cada una de ellas es la cantidad de
tejido vivo que se extrae.
En la Biopsia Excisional: se retira la lesión completa, generalmente por un asunto de
tamaño, pero también por otras consideraciones como por ejemplo: la sospecha de
malignidad, la incertidumbre en del conocimiento a priori (porque hay algunas veces en la
que no tiene ni idea de lo que se esta viendo), etc.
En la Biopsia Incisional: se extrae solo una parte de la lesión.
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Hay muchas otras clasificaciones de biopsia, pero ustedes las van a ver en la guía, y se
refiere al tiempo de realizar biopsia, el material ocupado, la técnica utilizada, etc.
Hay otro tema, y es que se refiere a la Técnica Histológica, y es lo que sucede después
del acto quirúrgico y sucede en la laboratorio, son el conjunto de operaciones que se realizan
en el laboratorio, de forma organizada, de modo de que sea efectivo su estudio por medio
del microscopio, permitiendo la observación de estructuras no visibles al ojo humano.
Eso, nos permite llegar de un trozo de tejido vivo a una placa histológica, la que ha sido
tratado por diferentes pasos que permite la tinción por diferentes colorantes, de las cuales
hay muchos colorantes, pero la principal es la con Hematoxilina-Eosina, en las que van a dar
colores azules o morados, o colores rosa, dependiendo de las estructuras a las cuales se unan
cada uno de esos elementos, la Hematoxilina es un colorante básico (no precisamente pero
funciona como tal) y que va a ir a unirse a las estructuras ácidas de la célula, precisamente
aquellas que están en el núcleo: los Ácidos Nucleicos, por lo tanto van a dar un color azul o
purpura a nivel del núcleo; la Eosina va a ir a unirse a un componente básico que va a dar un
color rosa, sobretodo en el citoplasma y en la matriz extracelular principalmente por el
colágeno, se tiñen muchas mas estructuras, pero esas son las principales.
Esta es una muestra de una neoplasia de linfocitos, en las que estas células presenta un
núcleo de gran tamaño y poco citoplasma, por lo que ustedes ven puros puntos azules, que
corresponden a los núcleos que están teñidos con la Hematoxilina, y todo lo rosado, que es el
citoplasma y la matriz extracelular (fibras colágeno) de esta neoplasia son teñidos por la
Eosina, pero aquí se nos muestra otro color que es Cafecito, y es para células nevicas? Que
son las células de los lunares y pigmentaciones de la piel, pero que no tiene mucha
importancia.
Y acá un poco más organizado se ve un carcinoma en que ustedes ven muchos puntos
azules que son núcleos y zonas rosadas que son citoplasma, son ejemplos nomás para que
vean lo que es la hematoxilina y eosina. Pero también existen otras tinciones que dan
diferentes colores y son para diferentes tejidos, pero la fundamental es la con hematoxilina-
eosina. Ahora, existe un procedimiento para obtener una biopsia, se va a realizar en un
pabellón, teniendo a la paciente con las técnicas de esterilidad correspondientes en le
pabellón, con delantales, paños, un ambiente apropiado, como el de la escuela, preparación
anestésica y remoción del área afectada, ahí se ve la hoja de bisturí que esta haciendo un
corte a nivel de la mucosa y parte del conectivo para estudiar lo que hay ahí, yo quiero saber,
estoy viendo que en este labio hay lesiones ulceradas, hay un poco de queratina, hay un
epitelio muy delgadito, es una persona mayor, yo quiero saber que hay ahí, entonces tengo
que extraer una pieza, se sutura y esa pieza extraída va en un frasco con formalina y una
historia clínica adecuada hacia el laboratorio. En el laboratorio van a pasar una serie de
eventos que van a permitir que ese tejido que estaba ahí, que es muy disgregable, sea posible
verlo en el microscopio, y se hace con una serie de elementos que van a ocasionar la salida
del agua de esa célula, para deshidratar esa muestra y después se vuelve a hidratar para
generar en esa muestra espacios que después se rellenan con un elemento que se llama
parafina y esto va a permitir la construcción de este molde, este es un cubo de parafina,
como las ceras de las velas qué en su interior tiene integrada la muestra que yo obtuve de la
biopsia y para que necesito secarlo? Para poder por intermedio de este aparato que es el
micrótomo que acá tiene una hoja con filo, permitir hacer cortes como tan pequeñas como 1
micrón, cortes casi trasparentes, que en el microscopio yo casi no voy a ver nada, porque le
falta lo fundamental, que es la tinción, ahí están teñidos y son tan delgados que permiten que
la luz del microscopio que viene de abajo, traspase la muestra y yo la pueda ver en el visor
del microscopio y a través de ella ver lo que ustedes vieron denante, ese es el procedimiento
a grandes rasgos de lo que ocurre en la intervención quirúrgica y en el laboratorio y se llega a
esto que es lo fundamental, obtener el informe histopatológico, ahora, para obtener este
informe histopatológico, hay que tener muchos conocimientos de la histología normal y de la
patológica y la anatomía normal la tienen que asociar con un epitelio de la mucosa oral.
Tratamiento de la muestra: Fijación y Rotulación.
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Procedimientos de laboratorio:
- Deshidratación (alcohol, acetona o propanolol)
- Aclaración o Diafanización (sustituye al deshidratante por xilol, cloroformo,
etc)
- Inclusión (con parafina que permite dar la consistencia para el corte)
- Corte (con un Micrótomo)
- Montaje de corte
- Coloración (hematoxilina-eosina)
Lesiones frecuentes:
Ustedes ubican esa imagen, ¿qué ven ahí? Quien puede decir algo, si ahí dice mucosa
oral… Entonces, ¿qué es eso? Quien me puede describir eso? R: Es una mucosa oral, pero que
hay ahí? Hay un epitelio, ahí. Se ven papilas conjuntivas y epiteliales, fibroblastos, hay poca
unión de las células, de los fibroblastos.
¿Quien más puede decir algo? Si nos afinamos el ojo, hay unos puntitos azules que son
los núcleos, que están teñidos con hematoxilina. Entonces que más vemos? Se ve queratina,
entonces ahí tenemos queratina. Esto de acá que sería entonces? Los estratos del epitelio.
Fundamental, de los 4 tipos de tejidos que hay en el organismo ustedes van ser
amigos inseparables compañeros del epitelio y del conectivo, ustedes cuando ven la encía,
cuando ven la mucosa del labio, están viendo esto, que es la barrera con queratina y abajo
siempre un conectivo. Y en el conectivo se ven las características, vasos sanguíneos, células
defensivas y conociendo esto podemos ver otras cosas, como esto, si yo veo en la clínica que
en la mejilla tengo una zona blanca, y que la persona se muerde, se mordisquea la mejilla.
Que sucede ahí? si están viendo que hay hiperqueratosis y que habíamos visto que ahí hay
queratina, ¿que sucede ahí entonces? …cualquier cambio clínico, se debe manifestar en
histología, y ahí está,…esa capa tan grande de queratina me impide ver la mucosa y la
mucosa…no solamente el epitelio sino que la parte de abajo, porque si ustedes sacan un poco
de epitelio y lo miran a la luz es transparente…¿por qué se ve rosado o rojo? Porque se
trasluce todo lo que hay en el conectivo que son los vasos sanguíneos, si yo no tengo vasos
sanguíneos mi mucosa se va a ver blanca, y si yo tengo mucha queratina, por lo cual aquí no
alcanzo a traslucir los vasos sanguíneos, voy a ver una zona blanca. También puede haber un
aumento de grosor del epitelio, una hiperplasia.
Y estas son una serie de lesiones que son frecuentes, estos son diagnósticos
histológicos frecuentes. Si yo veo que este señor tiene un Nódulo en la lengua y lo puedo
asociar por ejemplo a que tiene ahí una pieza que se le cayó una restauración y tiene una
zona filuda, que se la pasa a llevar, un trauma constante, yo eso lo llevo a la histología o en
la histología tengo q ver la clínica, y si esto es el epitelio… ¿esto de acá que es? El
conjuntivo… ¿y qué les llama la atención de este conjuntivo? Que está fibrosado, hay muchas
fibras, porque este conectivo reaccionó al trauma que tiene ahí en la lengua, por lo tanto, los
fibroblastos son estimulados con elementos como las citoquinas, de modo que empiezan a
secretar más colágeno y esto se traduce que va a empezar a crecer, a crecer y crecer hasta
formar ese nódulo.
En la clínica veo otro nódulo de mayor tamaño, de un color muy rojo que si yo lo toco
sangra con facilidad y que en el interior tiene algunas características.
Ya, aquí puede que estén más perdidos, pero si yo les digo que la mucosa es
transparente y se ve roja por lo que hay abajo (vasos sanguíneos), y si ahí está mas rojo de lo
normal ¿qué es lo que estará pasando? Hay más vasos sanguíneos, y hay una lesión que se
llama granuloma piogénico, que es una de las lesiones de los diagnósticos diferenciales que
conocerán en el taller. Tiene esa forma, y en la histología yo veo que hay muchos, muchos
vasos sanguíneos y eso es característico de los granulomas piogénico.
Esta es otra lesión frecuente, en la clínica…creanme que en la mejilla aquí se ven
unas líneas blancas, son unas estrías que parecen redes, que para las clínicas, para nosotros
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es muy decidor, es casi patognomónico, el verlo casi nos da el diagnóstico, pero yo no me
puedo quedar con eso, y tengo que ver la histología, y esta histología es muy característica de
lo que es la 61.50
Eso de ahí a lo mejor alguno de ustedes lo ha tenido, y de hecho lo han escuchado, el
Mucosele, es la obstrucción de un conducto salival…y ¿qué sucede con eso? Como la saliva no
tiene por donde salir se empieza a acumular, cuando es mucha la secreción, la mucosa, el
epitelio se comienza a distender, porque la presión de la saliva es muy grande y empieza a
generar un aumento de volumen. Entonces aquí ¿qué es lo que deberíamos ver? Epitelio, más
abajo saliva y también podríamos encontrar las glándulas salivales que generan esa saliva.
Vamos por parte, glándula salival menor del labio, y ¿qué es esto? Es la saliva que se
está acumulando en el tejido conectivo y que tiene una cápsula que la está rodeando y por
acá abajo está el epitelio de la mucosa del labio (está al revés la placa histológica, el epitelio
está allá abajo, está la cantidad de saliva acumulada y ahí está la glándula). Aquí lo mismo,
esta es la bolsita de saliva que estaba generando el aumento de volumen, aquí el mucosele
salió intacto, eso de ahí no es epitelio, es la cápsula de tejido conjuntivo.
Pregunta…¿cómo se hace la incisión quirúrgica para que salga intacto? Hay 2 formas,
se puede hacer un ojal o circunferencia, pero ahí generalmente rompes todo y la otra es
hacer una incisión en el medio, empiezas a separar el epitelio y cuando se abre eso, va a
quedar al descubierto una estructura como esa, y empiezas a despegar el epitelio hasta que
logras sacar esto integro…sacar un mucosele así es bien complicado porque basta con pasar el
bisturí y sale todo el contenido.
Y esto es un carcinoma de lengua, ésta es una de las zonas más frecuentes en donde
aparecen los carcinoma, en el cual se ve una desorganización un desorden, estructural en la
placa que no se parece en nada a lo que habíamos visto en mucosa normal. Aquí esta todo
ordenado cada uno con su estrato el estrato basal, el espinoso el granuloso, la capa cornea,
pero acá desorden absoluto ese es un carcinoma. y esta la es una …( no se entiende), es la
foto de un afta, porque hay algunas patologías que si bien, es tanta la clínica que se ve, es
tan frecuente, que después con las características clínicas, va a bastar. Aquí hay un 99% de
que sea un afta, si Uds. Quieren estar en un 100% tienen que hacer una biopsia, pero con una
99% de signos clínicos, más que la persona me diga que lo ha padecido antes, más, que se
sabe que el paciente tiene una prueba de PRECLÍNICO… ya nos basta para decir que eso es un
afta.
Pero hay patologías como el Liquen Plano, que se dijo que es casi verla y decir que es Liquen
Plano… el afta también…
Hay otras técnicas de estudio celular, la biopsia es un estudio histológico que permite ver las
estructuras del tejido completo, la relaciones que hay entre epitelio y conectivo y cada
estrato del epitelio y cada zona del conectivo.
Pero hay otras técnicas que permiten ver citología, estudio de SOLO las células, porque
aparecen en el portaobjetos separadas. Yo no veo los 4 estratos del epitelio, no veo la capa
basal o relación con el conectivo; veo células sueltas, y para qué me sirve? es una técnica
fácil, muy económica que permite ver cambios morfológicos en una célula para ver si tiene
características neoplásicas o normales.
Cómo se realiza la técnica:
Fácil; se necesita, portaobjetos, donde se deposita la muestra; instrumental de examen, un
área estéril, y un instrumento estéril para hacer la remoción de mi muestra, y la muestra es
solamente un raspado, raspo la lengua, paso… y luego deposito lo que saqué en esta paleta,
en el portaobjeto, lo que salga; lo más probable es que salga poco pero en el microscopio, se
ve.
Después, como voy a tener una muestra que se ve poco, yo debo fijarla para que no se escape
del ese lugar, pero principalmente para que los cambios que se producen en la célula, no me
altere la forma de esta y lo mismo ocurre en la biopsia. Uno la fija en formalina que se
produce después la muerte celular, pero ese elemento fijador detiene los cambios químicos.
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Entonces, lo que se está aplicando es alcohol, de 95°-96°, para fijar las pocas células que yo
saqué con el raspado.
Luego, se obtiene una imagen, luego de teñirla.
Los usos de esta prueba, es para ver si hay una infección por Cándida principalmente en la
cavidad oral, y la Cándida, se ve por la coloración especial PAS, y también se ven estructuras
que so formas que adopta el hongo, y corresponden a hifas.
Entonces depende la cantidad de hifas que encuentre, y si encuentro al hongo en estado de
hifa, puedo decir si la persona tienen o no un a infección oral.
Otra técnica es la punción aspirativa, conocida como punción espirativa de aguja fina, el
PAAF, que es muy rápida y sirve mucho en ALGUNAS situaciones.
For example, una pequeña niña viene a nosotros, con un pequeño aumento de volumen e la
región submaxilar; de bastante tiempo algunos meses. Entonces, en ese lugar no podemos
hacer una biopsia, porque habría que hacer una tremenda intervención para hacer una
biopsia, se le pueden pedir exámenes complementarios, como radiografías, TAG, hialografía,
ecografía, etc.
Pero también se puede hacer una punción, y n qué consiste esta punción… EN PUNCIONAR…
( CUEK!!!) es decir, en un ambiente estéril, con una aguja y jeringa estéril, con la zona
anestesiada, y lavada con antiséptico, yo introduzco esta aguja, hasta donde yo creo que está
el interior de la lesión; y aspiro la lesión, y dependiendo si en esa lesión hay un contenido
líquido o no, me va a salir algo, en este caso, salio eso…(sopita) es muy viscosa, es saliva
condensada, tiene menos cantidad de agua por lo que se nota ahí un poquito pegajosa, pero
es saliva.
Por lo tanto, esto me dice que la lesión ya era de la Glándula Submaxilar, porque había duda
si era la glándula o era algún ganglio.. u otra… pero con esto podemos decir, que en el
interior de esa lesión hay saliva: por lo cual con eso se nos restringe toda la cantidad de
diagnósticos posibles a algo más seguro
La persona que está acostumbrada a ver saliva verifica que eso es contenido salival. Y que lo
importante es que no se ven células neoplásicas, que se verían como células distintas de lo
normal.
Llevamos Biopsia, citología (frotis) y el PAAF, la primera sirve para ver arquitectura
del tejido y confirmación del diagnóstico, y las dos últimas sirven para ver características
celulares del tejido y aproximación de diagnóstico. Las 3 son biopsias, porque en las 3 estoy
removiendo parte de la lesión de un ser vivo. Por convención el término biopsia se refiere a la
primera. Las 3 responden a la definición básica de biopsia.
Lo anterior es para obtener un diagnóstico de una lesión, y para que quiero el
diagnostico, se acuerdan de la primera Diapo, esa con una flechita, que salían varios
términos; teníamos Diagnóstico, pronóstico y tratamiento. Aparte de saber diagnostico,
tratamiento y pronóstico, me sirve para realizar Diagnóstico Precoz, porqué, una lesión
puede ser una ampolla, un herpes, un cáncer, etc. Con la biopsia este paciente pudo salvar
una serie de tratamientos que involucran perdida del labio y remoción de los linfonodos del
cuello, quimioterapia, etc. Con una cirugía a este nivel él se mantiene.
Pregunta de Zurin: ¿Doc. Ute como sabe que tiene que hacer una biopsia o un frotis?
Porque aquí lo que necesito saber es que hay en el interior (integridad) del epitelio, un
frotis me muestra solamente algunas células aisladas y no su interacción formando el
epitelio como un tejido.
Esta señora, la derivaron, ella tiene úlceras que no cicatrizan hace tiempo, esto llamó
la atención y acá se le diagnostico con una biopsia una queilitis actínica, que es una lesión
producida por la exposición al sol, además de una displasia severa que es un paso previo al
cáncer. Esto se trata con corticoides por harto tiempo.
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Esta persona tenía una lesión en la mejilla, y además un historial de cáncer
prostático; en ese caso uno prende las antenas, entonces biopsia inmediatamente y
diagnóstico precoz, porque esta lesión estaba a un paso de convertirse en cáncer, se eliminó
completamente y control.
Pregunta: ¿En que situación se puede realizar un frotis? Por ejemplo cuando tu
quieres hacer estudios seriados, a una gran cantidad de personas, puedes hacer un frotis en
vez de una biopsia y tratar de buscar células cancerígenas. Si tu quieres hacer un frotis de
diagnóstico de infecciones de la mucosa oral, por ejemplo cándida, si tienes una lesión
vesiculosa y que no cicatriza rápidamente, hay varias posibilidades.
INMUNOHISTOQUIMICA
La inmunohistoquímica es una técnica de mucha utilidad, tiene gran especificidad en
la identificación de ciertos elementos celulares, su coloración es característica y tiene colores
particulares para cada técnica.
Los principales usos de la inmuno histoquímica son:
- identificar elementos celulares
- localización de sustancias por medio de un anticuerpo especifico que se marca con un
colorante fluorescente.
Existe un anticuerpo y un antígeno, el antígeno puede ser cualquier sustancia que
pueda reaccionar con el sistema inmune, en este caso con alguna Ig, en la inmuno
histoquímica se fábrica una Ig para cada antígeno que se quiera estudiar, corresponde a un
anticuerpo monoclonal que es absolutamente específico, la diferencia de esta Ig es que tiene
un elemento de color que al verlo al microscopio va a permitir ver la presencia del antígeno.
Inmunoglobulina + Color + antígeno = Visualización antígeno
El color se puede absorber o emitir, la sustancia que genera luz puede ser
fluorescente, que emite luz especial o una enzima que hace que un elemento que va asociado
a ella al producirse la reacción anticuerpo antígeno cambie de color.
- Sirve para identificación celular, cada célula de cuerpo tiene una proteína o un
antígeno específico, por lo que se pueden conjugar con una inmunoglobulina y
teñirse.
- Sirve para identificar agentes infecciosos como el herpes o el papiloma virus, el
Sida, el Epstein Bahr, bacterias.
- Su principal uso es en el ámbito oncológico para definir marcadores tumorales
propios de cada neoplasia, Ej. antígeno prostático.
Dentro del ciclo celular están las proteínas P53 y la KI67, cuando en un tejido hay una
cantidad alta de estas proteínas indica que ese tejido esta en una proliferación celular muy
activa y hay una posible neoplasia. Cuando se tiene un tejido neoplásico y no se sabe a donde
corresponde, se utilizan anticuerpos específicos de distintos tejidos para identificarlo y se
teñirá con el que corresponde. En el tejido nervioso existen proteínas específicas como la
PS100 o los neurofilamentos.
Cada anticuerpo tiene su color y eso depende del elemento que se utilice, hay café,
hay verde, hay azul, distintos colores, por ejemplo aquí hay en negro y color azul. Miren por
ejemplo aquí hay p53 que esta en la capa basal del epitelio, entonces podemos estar diciendo
que hay mayor proliferación de p53 en ese sector. Siempre hay p53, pero lo habitual es que
yo no lo vea. Al haber una proliferación mayor, eso puede ser de que hay una neoplasia.
Acá son otros ejemplos, por ejemplo la pimentina? que también es conocida, para identificar
si es tejido mesenquimático. Los queratinocitos también tienen Antígenos específicos,
entonces ustedes están viendo cada uno de las características de acá.
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Y sirve para diferenciar, por ejemplo muestra una LISTA, hay diferentes neoplasias, en que
cada uno de ellos tiene diferentes antígenos, y depende de la cantidad de antígemos que
estén positivos en un carcinoma, yo puedo verificar, si viene de un tejido mesenquimático,
nervioso, óseo, medula ósea, hígado, etc…conociendo este cuadro. Y hay muchos otros que se
pueden ocupar para una sola enfermedad, citoqueratina, etc.
Anticuerpo Células / antígenos detectados
CD1a célula de Langerhans
CD4 linfocito T de auxilio
CD8 linfocito T citotóxico
CD30 célula de Reed-Sternberg
CD45 leucocitos
CD68 macrófagos
S100 células de Schwann
HMB-45 melanocitos
AE1 citoqueratinas de bajo peso molecular
AE3 citoqueratinas de alto peso molecular
DESMINA células musculares
GFAP glía
CEA antígeno carcino-embrionario
AFP alfa-fetoproteína
REN receptores nucleares de estrógenos
VIM sarcomas
Ahora los métodos que se ocupan, tenemos directo e indirecto y va a depender de si ocupo 1
o 2 anticuerpos.
METODOS
Histoquímica Directa: Ocupa solo un Ac. Un Anticuerpo marcado con colorante
fluorescente.
Histoquímica Indirecta: Ocupa más de un Ac. Un Anticuerpo Secundario marcado con
colorante fluorescente contra un Anticuerpo Primario de la molécula estudiada.
Cada uno tiene sus aplicaciones, pero la finalidad para identificar es el mismo, mediado por
Anticuerpo.
Cromóforo: Sustancia que lleva el Anticuerpo y que le da el color al examen.
Inmunofluorescencia: Corresponde a una parte de la Inmunohistoquímica, y la gracia que
tiene es que la sustancia que le da el color es inmunofluorescente, y cuando la luz de un
microscopio incide en esta sustancia, la luz que emite se amplifica y se puede ver brillante.
Sirve para identificar proteínas o Ag en ciertas zonas. Por ej: En liquen plano hay depósitos de
ciertas sustancias en la membrana basal. Sirve para confirmar el diagnóstico. Por ej. El
pénfigo deposita mucha IgG, y las células epiteliales se separan.
Cada tumor genera proteínas específicas que se pueden detectar.
