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Recuento de C. perfringens en alimentos

El resumen describe los pasos para realizar el recuento de Clostridium perfringens en alimentos, incluyendo pesar la muestra, agregar diluyente y homogenizar, sembrar diluciones en placas con agar TSC e incubar en condiciones anaeróbicas, contar colonias características, confirmar seleccionando colonias y trasladándolas a caldo, e incubar para confirmación bioquímica mediante pruebas como lactosa-gelatina y hierro leche.

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Recuento de C. perfringens en alimentos

El resumen describe los pasos para realizar el recuento de Clostridium perfringens en alimentos, incluyendo pesar la muestra, agregar diluyente y homogenizar, sembrar diluciones en placas con agar TSC e incubar en condiciones anaeróbicas, contar colonias características, confirmar seleccionando colonias y trasladándolas a caldo, e incubar para confirmación bioquímica mediante pruebas como lactosa-gelatina y hierro leche.

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DIAGRAMA DE FLUJO RECUENTO DE CLOSTRIDIUM PERFRINGENS EN ALIMENTOS

Pesar en un vaso de licuadora estéril 25g


muestra, luego Adicionar 225ml de diluyente

Homogenizar 1-2 min. La dilución 10-2 se obtiene al traspasar con una pipeta
de 1 ml del homogenizado a un tubo que contiene 9 ml del diluyente, preparar
las diluciones decimales consecutivas que sean necesarias. Sembrar a lo
menos 2 diluciones consecutivas.

Colocar 6-7 ml del agar TSC en una placa, cuando el agar haya solidificado,
sembrar en duplicado asépticamente 1 ml de cada dilución del homogenizado.
Colocar 15 ml adicionales de agar TSC en cada placa y mezclar con el inoculo

Incubar las placas en condiciones de


anaerobiosis a 35°C 1ºC x 20h-24h.

Realizar lectura de las placas, y registrar


número de colonias características
(colonias negras)

Confirmación: traspaso de 10 colonias


sospechosas a caldo tioglicolato

Incubar a 35°C 1ºC x 18h-24h.

Realizar confirmación Bioquímica (medios


Lactosa-gelatina, medio Hierro leche, caldo
esporulación y medio nitrato motilidad).

Incubar medio hierro leche a 46°C en baño termorregulado.


Chequear reacción a intervalos de 1h.
Las restantes pruebas bioquímicas deben incubarse a 35ºC
por 24h.

Registrar lecturas, calcular resultados e


informar.

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