INMUNOLOGÍA P2

TCR Y SEÑALES ACCESORIAS DE COESTIMULACIÓN

El receptor de linfocitos T (TcR), es un complejo glicoproteico transmembrana, que incluye dos

subunidades estructural y funcionalmente distintas (y no covalentemente unidas entre sí).

✓ La primera subunidad es el receptor clonotípico (TcRαβ) o (TcRγδ) responsable del

reconocimiento específico del antígeno (Ag).
✓ La segunda subunidad corresponde al complejo accesorio CD3, responsable del transporte
y expresión del TcR en la membrana y de la transducción de señales de activación, cuando
el TcR se ha unido específicamente al antìgeno.

El receptor clonotípico es un heterodímero Tαβ o Tγδ, que reconoce fundamentalmente fragmentos

peptídicos asociados a una molécula de presentación antigénica (moléculas MHC de clase I o MHC
de clase II), antígenos glicolipídicos asociados a moléculas CD1 o bien reconocen intermediarios
metabólicos de Riboflavina o Acido Fólico unidos a moléculas presentación MR1 (Moléculas MHC-I
Related o MHC-I like)

Mientras el repertorio linfocitario B puede reconocer tanto antígenos solubles como de membrana,
de naturaleza proteica, hidrocarbonada, lipídica, nucleotídica, etc., el repertorio linfocitario T
reconoce fundamentalmente fragmentos peptídicos asociados a molécula MHC de clase I o MHC de
clase II, en la membrana de células presentadoras de Ag (CPA).

En el repertorio linfocitario B (de 10^14 linfocito B distintos), se distinguen dos subpoblaciones

celulares distintas (denominadas B1 y B2) que presentan características estructurales y funcionales
distintas y que se generan a edades distintas durante la ontogenia linfocitaria.

Los linfocitos B1 son los responsables de la generación de los anticuerpos naturales, que se
producen en ausencia de estímulos antigénico conocido y específico y, por ello, se les considera
parte de la inmunidad innata

En el repertorio linfocitario T (10^18 linfocitos T), se distinguen también dos subpoblaciones

linfocitarias (denominadas Tαβ y Tγδ), que presentan receptores TcR estructural y funcionalmente
distintos.
Entre los linfocitos Tαβ se distinguen, además, 3 subpoblaciones celulares distintas denominadas:
TCD4+, TCD8+ y NKT; existen además linfocitos TCD4+/TCD8+ (DP =dobles positivos) y
linfocitos DN (doble negativos, no expresan CD4 y tampoco expresan CD8)

Los linfocitos NKT corresponden a linfocitos Tαβ que presentan moléculas o marcadores propios de
células NK (como, por ejemplo, la molécula NK1.1 o CD161

El 90 a 95% de los linfocitos T corresponden a linfocitos Tαβ, que reconocen fundamentalmente

fragmentos peptídicos unidos a una molécula de presentación MHC, en la membrana de una célula
presentadora de antígeno.

El 5 a 10% restante, corresponden a linfocitos Tγδ, reconocen glicolípidos unidos a moléculas CD1
y, finalmente, linfocito Tγδ que, como los linfocitos B, pueden reconocer directamente diversas
moléculas (particularmente compuestos fosforilados (vitaminas bacterianas como riboflavina y ácido
fólico)).

Los linfocitos Tγδ se encuentran fundamentalmente en piel y mucosas (linfocitos intraepiteliales, que
forman parte de la inmunidad innata) y se generan antes que los linfocitos Tαβ, durante la ontogenia
o diferenciación linfocitaria en el timo.

El receptor clonotípico TcR (propio o característico de cada clon de linfocitos T), es siempre un
heterodímero (Tαβ) o bien (T gamma/delta) formado por dos cadenas glicoproteícas (α y β) o bien
(γ y δ) de 40 a 60 kDa, covalentemente unidas por puentes disulfuro.

En cada cadena del receptor clonotípico Tαβ o Tγδ, se distingue: un dominio (V) aminoterminal de
112 a 119 aminoácidos, un dominio 178 aminoácidos, un dominio hidrofóbico transmembrana de 25
aminoácidos y una pequeña cola citoplasmática de 12 aminoácidos.

• Entre los linfocitos Tαβ se distinguen 4 grupos distintos de linfocitos :

1. Linfocitos Tαβ CD8+, que reconocen

fragmentos peptídicos unidos a moléculas
MHC de clase I
2. Linfocitos Tαβ CD4+, que reconocen
antígenos peptídicos unidos a moléculas
MHC de clase II
3. Linfocitos NKT, que reconocen antígenos
lipídicos unidos a moléculas de presentación
llamadas CD1
4. Linfocitos MAIT (Mucosal Associated
Invariant T cell) que residen en hígado y en el
intestino y reconocen intermedia rios
metabólicos de Riboflavina o Acido Fòlico
unidos a moléculas presentación MR1
(Molèculas MHC-I Related o MHC-I like)
La molécula CD4 actúa como co-receptor linfocitario, transduciendo una señal accesoria de
coestimulación, al reconocer una región conservada de la molécula MHC de clase II.

La molécula CD8 también actúa como co-receptor de linfocitos T, transduciendo una señal accesoria
de coestimulación al reconocer y unir una región conservada de la molécula de presentación MHC
de clase I

Todos los linfocitos T efectores sintetizarán y secretarán, luego de su diferenciación, un grupo

particular de citoquinas, que les permitirá realizar distintas funciones efectoras.

Todos los linfocitos T serán capaces de:

1. Activar distintas poblaciones celulares (función “helper”, de colaboración o ayuda).

2. Inhibir o suprimir otras poblaciones celulares (función supresora o reguladora)
3. Destruir o eliminar un grupo particular de células (función citotóxica)

Aun cuando todos los linfocitos T efectores realizan estas tres funciones, ellos se clasifican en
subpoblaciones distintas según mejor la función efectora (o que realizan con mayor eficiencia):

• Linfocitos Th (T helper): Liberan mayor cantidad de citoquinas de ayuda

• Linfocitos Treg (Treguladores de colaboración o ayuda) o T supresores): Liberan mayor
cantidad de citoquinas reguladoras
• Linfocitos Tc (T citotóxicos): Liberan mayor cantidad de citoquinas citotóxicas

LINFOCITOS T Y SEÑALES DE ACTIVACIÓN

La activación y diferenciación de linfocitos TCD4 requiere el reconocimiento por el TcR del complejo
MHC/Péptido presentado por CPA (CDs, macrófagos, linfocitos B, etc.) y así, el complejo CD3
transducirá la primera señal de activación), Moléculas accesorias de coestimulación (como la
interacción CD28/CD80-86 o CD40L/CD40, transducirán la segunda señal de activación)

Finalmente, receptores que reconocen citoquinas específicas transducirán la tercera señal de

activación, todo lo cual conduce a expansión clonal y la posterior diferenciación de los linfocitos en
linfocitos T efectores (como por ejemplo Th1, Th2, Th17 o Treg). CD40L, CD40 ligand; IL-12,
interleukin-12; IL-12R, IL-12 receptor; PAMP, pathogen-associated molecular pattern; PRR, pattern
recognition receptor.
a) En presencia de IL-12 e IFN-γ, se generan
linfocitos Th1 que secretan IL-2, IFN-γ, TNF y
Linfotoxina.

b) Las citoquinas IL-4, IL-6, e IL-13 inducen la

diferenciación de la subpoblación Th2, que
secreta IL-4, Il-5, IL-6, IL-10 e IL-13.

c) La presencia de IL-1,β, IL-6, IL-23 y de

TGF-β, activa la diferenciación de linfocitos
Th17, que secretan IL-17, IL-21 e IL-22.

d) Finalmente, en presencia de TFG-β, Il-2, IL-

10, IL-35 y ácido retinoico, se induce la
diferenciación de linfocitos T reguladores , que
secretan IL-10 y TGFβ (Transforming Growth
Factor Beta)

ESQUEMA GENERAL DE DIFERENCIACIÓN DE LINFOCITOS CD4

Linfocitos T CD4+ virgenes, luego de Los linfocitosTh17 expresan IL-17, IL-17F, IL-
activación vía TcR y moléculas 21 e IL-22 (además IL-26 en humanos) y
coestimuladoras como CD28 e inducible T- regulan la respuesta inflamatoria.
cell co-stimulator (ICOS), puede
diferenciarse en una de las tres líneas de
linfocitos Th efectores: Th1, Th2 o Th17

Estas células producen distintas citoquinas y CD8

tiene distintas funciones inmuno-reguladoras. E ICOS

Interferon-y (IFN-y) producido por Th1 es

importante en la regulación de la presentación
antigénica y en la inmunidad celular.

Las citoquinas Th2: IL-4. IL-5 e IL-13 regulan

la respuesta de linfocitos B, la inmunidad
antiparasitaria y las enfermedades alérgicas
MECANISMO EFECTOR DE LINFOCITOS T CITOTÓXICOS.

Al reconocer la célula blanco que presenta fragmentos antigénicos unidos a moléculas de

presentación, el Linfocito T citotóxico se activa, liberando el contenido de sus gránulos
citoplasmáticos (desgranulación o exocitosis), que incluye, granzimas, perforina y granulisina que
destruirán a la célula blanco del ataque por el linfocito Tc

La perforina liberada de los gránulos de un linfocito T citotóxico, polimeriza sobre la membrana de la

célula blanco, generando poros a través de los cuales ingresarán las granzimas, que inducen
fragmentación del DNA y las granulisinas que inducen apoptosis de la célula blanco.

SEÑALES ACCESORIAS DE COESTIMULACIÓN

Todos los linfocitos, tanto linfocitos B como linfocitos T, requieren de una secuencia ordenada de
eventos o señales de activación para cumplir las distintas etapas de activación, proliferación y
diferenciación, que permitirán l desarrollo de una respuesta inmune humoral (basada en los infocitos
B) y/o una respuesta inmune celular (basada en los linfocitos T).

Esta secuencia ordenada de eventos de activación implica:

✓ Una primera señal activación, transducida a través del complejo accesorio, luego del
reconocimiento antigénico por el receptor linfocitario (BcR o TcR, según corresponda)
✓ Una segunda señal de activación que en realidad corresponde a una secuencia ordenada
de señales, en las que participan distintas moléculas accesorias de coestimulación y una
tercera señal de activación en la que participan diversas citoquinas y de receptores para
estas citoquinas, que son los que finalmente transducen esta tercera señal

1. Los linfocitos T expresan TcR y una serie de moléculas accesorias o proteínas integrales de
membrana que tienen un rol crucial en el desarrollo de una respuesta inmune efectiva a
diversos antígenos.
2. Estas moléculas accesorias se unen a ligandos expresados en la membrana de las células
presentadoras de antígeno, células endotelial les y/o proteínas de la matriz extracelular.
3. Las moléculas accesorias generalmente actúan:
✓ Transduciendo señales de activación
✓ Funcionando como moléculas de adhesión que estabilizan la interacción entre linfocitos
T y APC durante el tiempo necesario para activación celular.
✓ Regulando el reclutamiento, recirculación y “homing” linfocitario

4. Son moléculas no polimórficas e invariantes, de manera que son idénticas en todos los
linfocitos T que expresan un particular fenotipo de “homing” en todos los individuos de una
especie.
 5. Muchas moléculas accesorias y sus ligandos son proteínas que forman parte de la familia
de las Inmunoglobulinas, familia de las Integrinas o de la familia de las Selectinas.
6. Diversas moléculas de adhesión y sus receptores participan en fenómenos biológicos
vitales: embriogénesis, crecimiento y diferenciación celular, reparación de heridas.

ACTIVACIÓN O SINAPSIS INMUNOLÓGICA

MOLÉCULAS ACCESORIAS

1.- Co-receptor CD8 y co-receptor CD4 que se unen y reconocen regiones no polimórficas de
moléculas MHC de clase I y clase II, respectivamente.

Transducen señales de activación

I. (TCD4 =65-75% de linfocitos T)

II. (TCD8 = 25-35% de linfocitos T)
✓ Receptor (TcR), co-receptor de linfocitos T (CD4 o CD8) y moléculas accesorias de co-
estimulación (CD28 en linfocito T y CD80 o CD86), en célula presentadora de antígeno.
✓ En ausencia de la primera señal (reconocimiento antigénico por TcR, no se produce la
activación linfocitaria.
✓ La transducción de la primera señal, en ausencia de señales accesorias de co-estimulación,
se produce la inactivación o anergia de linfocito T
2.- CD28 y CD80/CD86

* CD28 se expresa constitutivamente en 90% linfocitos TCD4+ y en 50% de linfocitos TCD8+

* Sus ligandos son las moléculas CD80 (B7.1) y CD86 (B7.2), cuya expresión se induce en células
presentadoras de antígeno (CPA activadas).

* En linfocitos T activados, las moléculas CD80 y CD86 inducen :

a) expresión de proteínas anti-apoptóticas

b) producción de factores de crecimiento y citoquinas

c) proliferación y diferenciación celular

3.- CD152 y CD80/CD86

* CTLA- 4 (CD152) es homólogo de CD28, pero se expresa en linfocitos T activados y su unión a

CD80 o CD86, inhibe la activación de linfocitos T.

4.- CD40 y CD40L (CD154)

* CD40 se expresa constitutivamente en APC y CD40L (CD154) se expresa sólo en linfocitos T

activados (es por lo tanto, inducible).

* Su interacción activa ambas células.

5.- CD95 y CD95L

* La expresión de FasL (CD95L) en linfocitos T activados y de Fas (CD95) en

APC conduce a apoptosis de APC

* Expresión de Fas y FasL en linfocitos T conduce a apoptosis, del linfocito.

4.- CD45

* Es una fosfatasa (que defosforila proteínas fosforiladas)

* Está involucrada en activación de linfocitos T

* Se expresa en leucocitos maduros e inmaduros (timocitos, linfocitos T y B, fagocitos mononucleares

y granulocitos).

5.- CD2

* Es una glicoproteína presente en 90% de los linfocitos T, en 50-70% de timocitos y en células NK

* Su ligando es LFA-3 (CD58) (Leukocyte Function Associated Antigen-3) y funciona como molécula
de adhesión y como transductor de señales.

SEÑALES COESTIMULADORAS A NIVEL CENTRAL Y A NIVEL PERIFÉRICO

✓ Sólo unas pocas moléculas coestimuladoras expresadas constitutivamente, y sus ligandos,

están involucradas en la activación inicial de linfocitos por APCs.
✓ En estados avanzados de activación un mayor número de moléculas coestimuladoras,
(CD28, ICOS, OX40, 4-1BB, CTLA-4, PD-1) estarán involucradas en la interacción de
linfocitos T con células peresentadoras profesionales
✓ CD28 induce la expresión de ICOS y CD40L (CD154).
✓ ICOS también inducirá la expresión de CD40L (que por sí misma no es una molécula
coestimuladora).
✓ La interacción subsecuente de CD40L con su ligando CD40 constitutivamente expresado en
APC, proporcionará una señal postiva para la expresión B7 (CD80 y CD86) e ICOS-L

SISTEMA DE COMPLEMENTO

El Sistema del Complemento fue originalmente descrito como un conjunto de proteínas solubles
derivadas del hígado e involucradas en la opsonización y destrucción lítica de agentes patógenos y
la iniciación de una respuesta inflamatoria.

El Sistema del Complemento se encuentra entre los mediadores más antiguos de la defensa
inmunológica y varias de sus más de 50 proteínas que circulan en el torrente sanguíneo y receptores
de superficie celular, funcionan como receptores de patrones moleculares asociados a agentes
patógenos (PRRs: Pathogen Recognition receptors).

Las proteínas del Complemento actúan como sensores y transmisores señales exógenas y
endogenas de peligro o daño (MAMPs, PAMPs, DAMPs)

El reconocimiento de tales patrones moleculares (como hidratos de carbono de bacterias, hongos y

virus) por proteínas solubles del Complemento, desencadena una cascada de eventos proteolíticos
que culminan con la generación de fragmentos proteicos que activan receptores del Complemento
en la superficie de células inmunocompetentes y otras células

Este rol como un sistema de PRRs queda demostrado por el hecho que una gran proporción de las
deficiencias del Complemento, conducen al desarrollo de infecciones recurrentes
El Sistema, está constituido por un conjunto de proteínas que cumplen un importante rol en las
funciones efectoras de la respuesta inmune, actuando de manera accesoria o complementaria a la
respuesta humoral por anticuerpos.

De manera similar a los TLRs y NLRs, los componentes del Complemento pueden detectar y remover
patógenos, inmunocomplejos y productos moleculares de células infectadas, células apoptóticas o
células malignas

Descubrimientos recientes han mostrado que componentes del complemento son secretadas por un
amplio rango de células del sistema inmune y funcionan de manera autocrina.

Además, ellas no se encuentran sólo en el espacio extracelular sino que están presentes en el
compartimiento intracelular (Complomosoma), donde parece regular distintos procesos fisiológicos
básicos, en particular aquellos relacionados con el metabolismo celular.

Si se incluyen las moléculas reguladoras, el complemento resulta constituído por algo más de 50
proteínas, algunas de las cuales tienen el carácter de proenzimas o zimógenos. Estos zimógenos
pueden activarse por un cambio conformacional, por unión a un cofactor o por digestión parcial por
otro componente.

Sus componentes constituyen el 10% de las proteínas plasmàticas y se activan en una cascada de
eventos o reacciones, cada una de las cuales conduce a la activación del siguiente componente

Las proteínas del complemento son componentes esenciales de la inmunidad innata, que participan
no sólo en la inflamación, sino también en la activación de la respuesta adquirida.

La mayoría de las estructuras involucradas en la activación del complemento incluyen anticuerpos,

PRRs como MBL (mannan binding lectins) y ficolinas), Proteína C reactiva (PCR), C1q y anticuerpos
naturales de clase IgM.

La ruta de las lectinas se activa luego del reconocimiento de PAMPs por lectinas (MBL, ficolinas 1,
ficolina 2 y ficolina 3).

Estas proteínas son estructuralmente similares a C1q, pero reconocen residuos hidrocarbonados,
manosa y N-acetil glucosamina.

Ligandos endógenos, como células dañadas, proteínas de la matriz extracelular, pentraxinas,

depósitos de amiloide, priones y DNA, son capaces de unir el componente activador C1q, pero
también interactúan con componentes inhibidores como C4bp y Factor H

El Sistema del Complemento es parte de los mecanismos innatos de defensa inmunológica,

eliminando no sólo agentes infecciosos sino también restos celulares, células propias propias en
apoptosis o necrosis y moléculas no deseadas a través de la fagocitosis y remoción o “clearance” de
complejos inmunes

El Complemento está, además, involucrado en la movilización de células hematopoiéticas

progenitoras (HSPC: hemetopoietic stem progenitor cells), la angiogénesis, la regeneración de
tejidos y en el metabolismo de lípidos.

Este proceso de reconocimiento debe estar finamente regulado para evitar daño inmunopatológico
en células, órganos y tejidos propios. C3 y C5 pueden tambien activarse de manera independiente
de las convertasas por proteasas específicas, la mayoría de las cuales pertenecen al sistema de
coagulación y a la familia de las granzimas y catepsinas, importantes en la respuesta Th1 y en los
casos de traumas y sepsis

Durante la activación del Sistema del Complemento se genera:

• Opsonización de la célula blanco, por C1q y por los fragmentos C4b, C3b e iC3b, que promueven
la fagocitosis mediante el reconocimiento por receptores específicos que existen en la membrana de
fagocitos (CR1 o CD35), CR3 (CD11b-CD18) y CR4 (CD11c-CD18)..

* Anafilotoxinas como C3a, C4a y C5a, que actúan como mediadores proinflama-torios, activando
mastocitos (con receptores para C3a, C4a y C5a), basófilos (con receptores para C3a y C5a) y
neutrófilos (con receptores para C5a).

C2a no es una Anafilotoxina pero si es un péptido pro- inflamatorio. Pertenece al grupo de las
quininas, que son responsables del edema y el dolor (estimulan receptores del dolor).

* Además C3a y C5a inducen la migración, activación y funciones efectoras de células de la

inmunidad innata como neutrófilos, mastocitos y macrófagos y aumentan la permeabilidad capilar a
través de receptores C3aR y C3aR1 (CD88).

* Solubilización y remoción (o “clearance”) de complejos inmunes

* Un Complejo de Ataque a la Membrana (MAC), que conduce a la lisis osmótica de la célula blanco.

Rutas o vías de activación del Complemento

Existen 3 rutas, vías o mecanismos distintos de activación del

Sistema del Complemento:

RUTA ALTERNA

Implica la participación de toxinas o hidratos de carbono de diversos agentes infecciosos. Esta ruta
se inicia con la activación espontánea de C3.

RUTA CLASICA

Requiere de un complejo antígeno-anticuerpo en la membrana dela célula blanco del ataque por
complemento.

RUTA DE LAS LECTINAS

Requiere de una colectina que se une hidratos de carbono en la membrana de la célula blanco
La cascada del Sistema del Complemento puede ser activada por una de las tres rutas conocidas
del complemento la Ruta de las Lectinas (LP), la Ruta Clàsica (CP) y la Ruta Alterna (AP).

El evento central en los tres mecanismos, es la activaciòn de C3 que da origen a la opsonina C3b y
la anafilotoxina C3a, luego de su digestion por C3 convertasas bimoleculares (cascada proximal).

En la Ruta Clàsica, la presencia de reguladores del Complemento con actividad de cofactors, la

proteasa plasmàtica Factor I, inactiva proteolitica mente las moléculas de C3b generando las
opsoninas de la etapa tardìa iC3b y C3dg

Si la inactivaciòn de C3b no progresa a suficiente velocidad, la amplificaciòn de la Ruta Alterna

proporciona un mecanismo de regulaciòn positive. Molèculas de C3b generaràn màs C3
convertasas, seguido por una mayor producciòn de C3b.

Las nuevas molèculas de C3b pueden asociarse con las C3 convertasas bimoleculares de la parte
proximal de la ruta alterna, para formar las C5 convertasas trimoleculares, iniciando la transiciòn a
la fase lìtica terminal

Las C5 convertasas generan la anafilotoxina C5a y C5b que iniciarà la formaciòn del complejo de
ataque a la membrana.
Activación y función de componentes circulantes del Complemento

• Los componentes circulantes del Complemento derivan del hígado y pueden activarse a través de
la ruta clásica, la ruta de las lectinas y la ruta alterna.

A través de la formación de la C3 convertasa clásica (C4bC2b) y alterna (C3bBb), su activación

conduce a la generación de C3a y C3b y luego la generación de las C5 convertasas clásica o de las
lectinas(C4bC2bC3b) y la C5 convertasa (C3bBbC3b), de las rutas de las lectinas y ruta alterna.

Se produce así C5b y C5a de manera tal que C5b unido a la superficie celular iniciará la formación
e inserción del Complejo de Ataque a la membrana (MAC) y la anafilotoxina C5a en fase fluida,
actuará sobre células del sistema aumentando la reacción inflamatoria.

La Properdina es un regulador positivo del complemento y que tiene la capacidad de unirse a ciertos
agentes patógenos y a células apoptóticas y necróticas. Actuando como una molécula que reconoce
patrones moleculares y proporciona una plataforma para el depósito de la C3 convertasa.

• La Properdina es una molécula de 53kDa, que en plasma existe como dímero ( P2), trímero
(P3) o tetrámero (P4) cíclicos, que aumentan de 5 a 10 veces la vida media de las
convertasas (que es de sólo 1,5 minutos.
• La Properdina (fP) es sintetizada por monocitos, hepatocitos, mastocitos, linfocitos T,
neutrófilos y células endoteliales bajo estrés. Los pacientes deficientes en fP son altamente
suceptibles a las infecciones por neumococos.
• El sistema del Complemento es la primera línea de defensa contra patógenos y células
dañadas (apoptótica o necróticas).
• Durante la activación del Complemento se ensamblan las C3 y C5 convertasas, generando
las condiciones para la fagocitosis o lisis del blanco.
• La Properdina es un componente del plasma que puede ser tambièn por neutrófilos. Resulta
fundamental en la estabilización de las convertasas pero es tambien un PRR que puede
unirse a ciertas estructuras de patógenos y células apoptóticas y necróticas, iniciando en
ellas el ensamblaje de las convertasas.
• De esta manera la Properdina se convierte en una nueva vía de activación el Complemento
y a la cual se suma el clivaje de C3 y C5 por proteasas que incluyen aquéllas que generan
kininas, como kalicreina y trombina.

(MBL, mannose-binding lectin; MASP, MBL-associated serine protease; GAG, glycosaminoglycan.)

El reconocimiento de señales de peligro conduce a la activación del Complemento y la generación

de moléculas efectoras como las opsoninas (C3b, C4b) y anafilotoxinas (C3a, C4a y C5a), la lisis de
la célula blanco y el reclutamiento y activación de células inmunocom petentes en el sitio de
inflamación.

Además, las moléculas efectoras ayudan en la activación de linfoci tos T y B y son requeridas en la
generación de linfocitos de memoria y en la generación de tolerancia a antígenos propios (MAC,
membrane attack complex; IR, immune response.)

Funciones de la Properdina (P)

La Properdina estimula la Ruta Alterna del Complemento mediante dos mecanismos distintos.

(1) Iniciando la actividad de la Ruta Alterna actuando como regulador positivo que estabiliza las C3
y C5 convertasas de la Ruta Alterna, aumentando 5 a 10 veces la actividad de las mismas.

(2) Como molécula (PRR), que reconoce patrones moleculares, la < Properdina se une
selectivamente a superficies cekulares, reclutando C3b o C3b(H20), iniciando esta manera la
activación de la ruta alterna..

RUTA CLASICA

La ruta clásica se inicia con la unión de C1 (que está compuesto por C1q, C1r y C1s), a la región Fc
de anticuerpos (IgM o IgG) unidos a antígenos, en la membrana de la célula blanco del ataque. (IgA
que es muy rica en hidratos de carbono, activa el complemento a través de la Ruta de la Lectinas)

La unión de C1q a la región Fc del anticuerpo, induce un cambio conformacional en C1r (zimógeno),
que adquiere la capacidad para digerir parcialmente a C1s (zimógeno), convirtiéndolo en enzima
activa (cuyo sustrato será C4).

La unión del factor o componente C4, al complejo Fc-C1, permitirá la digestión parcial de C4 por
C1s, generando un fragmento mayor (C4b) que se unirá covalentemente a grupos NH2 de proteínas
o bien OH de carbohidratos, en la membrana blanco del ataque (o a la membrana de células vecinas),
y un fragmento menor C4a (liberado en la fase fluída).
El fragmento mayor C4b actuará como opsonina estimulando la fagocitosis, mientras el fragmento
menor C4a actuará como anafilotoxina.

Imagen al microscopio electrónico de transmisión, de IgM soluble, libre en circulación, e IgM unida a
epitopos en la membrana IgM soluble en circulación tiene una IgM unida a antìgeénos en una
membrana “configuració planar” tiene “configuración de corchete.

La unión del cuarto factor C4) del omplemento al complejo Fc-C1, permitirá la digestiòn parcial de
C4 por C1s, generando un fragmento mayor (C4b) y un fragmento menor C4a, que serà liberado en
la fase fluída)

La digestiòn de C4 provoca la ruptura del enlace tioester interno de C4, otorgando asì una elevada
reactividad a C4b que se unirá covalentemente a grupos NH2 de proteínas o bien OH de
carbohidratos, en la membrana blanco del ataque (o a la membrana de células vecinas ), el
fragmento C4a será liberado en la fase fluída.

De esta el fragmento mayor C4b actuará como opsonina estimulando la fagocitosis por cèlulas que
presentan el receptor para C4b (C4bR) en su membrana, mientras el fragmento menos C$a liberado
en la fase fluìda actuarà como anafilotoxina, estimulando una respuesta inflamatoria.

Características moleculares de C3 y C4

C3 es un heterodímero formado por una cadena alfa, unida covalentemente a una cadena beta.

C4 en cambio, es un heterotrìmero formado por cadenas alfa, beta y gamma.

En el centro de la cadena alfa, tanto de C4 como de C3, se encuentra un enlace tioéster interno,
formado por interacción del grupo carboxilo del aminoácido glutamina (Q) y el grupo sulfidrilo de una
cisteína (C) que se encuentra muy próxima a la glutamina.

El clivaje de estas cadenas en C4 o C3, activa o separa este enlace que podrá formar enlaces
covalentes de tipo hidroxiéster o amido éster, con grupos hidroxilos o aminos, presentes en hidratos
de carbono o aminoácidos en las superficies celulares.

El segundo factor del complemento (C2, que es un zimógeno) se unirá ahora al complejo Fc-C1q (o
bien a C4b que está covalentemente unido a la membrana).

C1s realizará la digestión parcial de C2, generando un fragmento mayor (C2b), que actuará como
serinoproteinasa y un fragmento menor C2a liberado en la fase fluída.

Se genera asì el complejo C4bC2b, que actuará como C3 convertasa de la ruta clásica.

La digestión parcial de C3 por la C3 convertasa genera un fragmento mayor C3b que se unirá
covalentemente a la membrana celular (y actuará como opsonina) y un fragmento menor C3a que
actuará como anafilotoxina

Algunos fragmentos de C3b se unirán a la C3 convertasa (C4bC2b), generando la C5 convertasa

(C4bC2bC3b)

C5 se une a la C5 convertasa y será clivado generando un fragmento menor C5a que se libera en la
fase soluble (y actúará como anafilotoxina) y un fragmento mayor C5b que permanecerá unido al
complejo y servirá de anclaje para la uniónde C6 y luego de C7 y C8
La polimerización de C9 sobre C5b/C6/C7C8, generará finalmente el complejo de ataque a la
membrana (MAC).

RUTA ALTERNA

La ruta alterna se inicia con la activación espontánea (hidrólisis) de C3 en fase fluída, convirtiéndose
en C3H2O.

El factor B (Bf) tiene gran afinidad por C3H2O, por lo tanto se unirá a este en fase fluída.

El factor B, cuando está unido a C3H2O en fase fluída o a C3b en fase sólida (generado en la ruta
clásica o alterna) es susceptible al clivaje por el factor D (serinoproteinasa), generando un fragmento
mayor Bb, que es una serinoproteasa que permanecerá unida a C3H2O (generando la C3 convertasa
en fase fluída de la ruta alterna).

El fragmento menor Ba, es liberado en la fase fluída y no tiene función conocida hasta ahora

• El factor B que se une a C3b en fase sólida, es también susceptible a la digestión parcial por el
factor D, generando una segunda C3 convertasa (C3bBb) de la ruta alterna, pero en fase sólida.

• Ambas convertasas de la ruta alterna (C3H20Bb) y (C3bBb), pueden unir y digerir C3, generando
C3b y C3a.

• C3b no sólo se puede unir covalentemente a la membrana, sino que también se puede unir a C3bBb
generando la C5 convertasa de la ruta alterna, en fase sólida (C3bBbC3b)

RUTA DE LAS LECTINAS

• La ruta de las lectinas se inicia cuando las serinoproteasas MASP1, MASP2 y MASP3, se unen a
una lectina (MBP o MBL), que se ha unido a hidratos de carbono de la membrana de la célula blanco
del ataque o de un anticuerpo de clase IgA, que se ha unido a un Ag de membrana.

• La lectina (MBL) es homóloga a C1q, mientras MASP1 es homóloga a C1r y MASP2 homóloga a
C1s

• MASP1 degradará C4 y MASP2 degradará a C2

Abrev.: C4BP, C4b-binding protein; FD, Factor D; MAC, membrane attack complex; MASP2,
mannose-binding lectin serine protease 2; P, properdin (C3 convertase stabilizer); PAMP, pathogen-
associated molecular pattern.

Abrev.: C4BP, C4b-binding protein; FD, Factor D; MAC, membrane attack complex; MASP2,
mannose-binding lectin serine protease 2; P, properdin (C3 convertase stabilizer); PAMP, pathogen-
associated molecular pattern.

PROTEINAS REGULADORAS DEL SISTEMA DEL COMPLEMENTO

• a | Las proteínas reguladoras del Complemento pueden encontrarse en fase fluída o unidas a
membrana.

• Los reguladores de fase fluída pueden controlar distintas fases de activación y se encuentran en
distintos compartimientos

• Los reguladores de la ruta alterna, que se encuentran en el plasma y en distintos fluídos son: el
Factor H, Factor H Like Protein 1 (FHL1) y la proteína activadora Properdina.

• La Carboxi-peptidasa N regula clivando las anafilotoxinas en las tres vías de activación del
Complemento.

• Los reguladores de de la ruta clásica y de la ruta de las lectinas incluye el Inhibidor de C1 (C1INH)
y C4b-binding protein (C4BP).

• Los reguladores de la etapa final de activación incluyen Clusterin, Proteína S o Vitronectin y

Cmplement Factor H-related protein 1 (CFHR1).

• Las proteínas reguladoras asociadas a la membrana celular incluye CR1 (también conocido como
CD35), CD46 (también conocido como MCP Membrane Cofactor protein) y CD55 (tambien conocido
comos DAF), CD59 (también conocido como Protectin) y complement receptor of the immunoglobulin
superfamily (CRIg; también conocido como VSIG4).

• Los reguladores del Complemento actúan de distintas maneras Así, C1INH disocia los
componentes de C1,

• CD35, CD55 y C4BP disocian la C3 convertasa de la ruta clásica

• CD59 previene la formación de MAC.

• b | la membrana de las células del hospedero está equipada con receptores del Complemento
incluyendo CR1, que une C3b, iC3b y C4b y

• CR2 (también conocido como CD21), que une C3d y C3dg, CD46, CD55, CD59 (no mostrado) y
CRIg.

• Sin embargo, la distribución y número de los reguladores de membrana en los distintos tipos
celulares y en distintas superficies. En la membrana de linfocitos B, tanto CR1 como CR2 actúan
como coreceptores para Ig, regulan la diferenciación y maduración e intruyen a linfocitos B a
responder a antígenos extraños unidos a C3d

• Así, C3b unido a antígeno interactúa con CR2 y actúa como adyuvante molecular.
• CR3 (también conocido como MAC1, M 2 integrina yd CD11b–CD18) y CR4 (también conocido
como integrina X 2 y CD11c–CD18) son también receptores para integrinas

• CR3 y CR4 unen iC3b, C3dg y C3d y median la fagocitosis de células o partículas opsonizadas con
C3b.

• Además los receptores unen muchos otros ligandos, incluyendo la proteína de la matriz fibrinógenos

• Recientem,ente identificado receptoir CRIg, tiene un rol importante en la remoción de partículas

unidas a C3d y C3b incluyendo micro organismos y células autólogas

• C5L2, C5a receptor-like 2.

REGULACIÓN DEL SISTEMA DE COMPLEMENTO

• a | Las proteínas reguladoras del Complemento pueden encontrarse en fase fluída o unidas a
membrana.

• Los reguladores de fase fluída pueden controlar distintas fases de activación y se encuentran en
distintos compartimientos

• Los reguladores de la ruta alterna, que se encuentran en el plasma y en distintos fluídos son: el
Factor H, Factor H Like Protein 1 (FHL1) y la proteína activadora Properdina.

• La Carboxi-peptidasa N regula clivando las anafilotoxinas en las tres vías de activación del
Complemento.

• Los reguladores de de la ruta clásica y de la ruta de las lectinas incluye el Inhibidor de C1 (C1INH)
y C4b-binding protein (C4BP).

• Los reguladores de la etapa final de activación incluyen Clusterin, Proteína S o Vitronectin y

Cmplement Factor H-related protein 1 (CFHR1).

• Las proteínas reguladoras asociadas a la membrana celular incluye CR1 (también conocido como
CD35), CD46 (también conocido como MCP Membrane Cofactor protein) y CD55 (tambien conocido
comos DAF), CD59 (también conocido como Protectin) y complement receptor of the immunoglobulin
superfamily (CRIg; también conocido como VSIG4).

• Los reguladores del Complemento actúan de distintas maneras Así, C1INH disocia los
componentes de C1, CD35, CD55 y C4BP disocian la C3 convertasa de la ruta clásica

• CD59 previene la formación de MAC.

• a | Las proteínas reguladoras del Complemento pueden encontrarse en fase fluída o unidas a
membrana.

• Los reguladores de fase fluída pueden controlar distintas fases de activación y se encuentran en
distintos compartimientos

• Los reguladores de la ruta alterna, que se encuentran en el plasma y en distintos fluídos son: el
Factor H, Factor H Like Protein 1 (FHL1) y la proteína activadora Properdina.
• La Carboxi-peptidasa N regula clivando las anafilotoxinas en las tres vías de activación del
Complemento.

• Los reguladores de de la ruta clásica y de la ruta de las lectinas incluye el Inhibidor de C1 (C1INH)
y C4b-binding protein (C4BP).

• Los reguladores de la etapa final de activación incluyen Clusterin, Proteína S o Vitronectin y

Cmplement Factor H-related protein 1 (CFHR1).

• Las proteínas reguladoras asociadas a la membrana celular incluye

• CR1 (también conocido como CD35), CD46 (también conocido como MCP Membrane Cofactor
protein) y CD55 (tambien conocido comos DAF), CD59 (también conocido como Protectin) y
complement receptor of the immunoglobulin superfamily (CRIg; también conocido como VSIG4).

• Los reguladores del Complemento actúan de distintas maneras

• Así, C1INH disocia los componentes de C1,

• CD35, CD55 y C4BP disocian la C3 convertasa de la ruta clásica

• CD59 previene la formación de MAC.

• b | la membrana de las células del hospedero está equipada con receptores del Complemento
incluyendo CR1, que une C3b, iC3b y C4b y

• CR2 (también conocido como CD21), que une C3d y C3dg, CD46, CD55, CD59 (no mostrado) y
CRIg.

• Sin embargo, la distribución y número de los reguladores de membrana en los distintos tipos
celulares y en distintas superficies. En la membrana de linfocitos B, tanto CR1 como CR2 actúan
como coreceptores para Ig, regulan la diferenciación y maduración e intruyen a linfocitos B a
responder a antígenos extraños unidos a C3d

• Así, C3b unido a antígeno interactúa con CR2 y actúa como adyuvante molecular.

• CR3 (también conocido como MAC1, M 2 integrina yd CD11b–CD18) y CR4 (también conocido
como integrina X 2 y CD11c–CD18) son también receptores para integrinas

• CR3 y CR4 unen iC3b, C3dg y C3d y median la fagocitosis de células o partículas opsonizadas con
C3b.

• Además los receptores unen muchos otros ligandos, incluyendo la proteína de la matriz fibrinógenos

• El recientem,ente identificado receptoir CRIg, tiene un rol importante en la remoción de partículas

unidas a C3d y C3b incluyendo micro organismos y células autólogas

• C5L2, C5a receptor-like 2.

COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOMPATIBILIDAD (MHC) Y PROCESAMIENTO,
PRESENTACION DE ANTIGENOS

• El Complejo Mayor de Histocompatibilidad (MHC: Major Histocompatibility System) fue

originalmente descrito como un complejo genético que codificaba la expresión de moléculas o
antígenos involucrados en el rechazo al trasplante de tejidos entre cepas consanguíneas de ratones
(Sistema o Complejo H-2 del ratón)

• El MHC en humanos (HLA por Human Leukocyte Antigens), fue descrito al analizar anticuerpos
presentes en el suero de pacientes poli transfundidas o en receptores de trasplante de órganos o
tejidos, que desarrollaban una respuesta de rechazo como consecuencia del reconocimiento de
antígenos de histocompatibilidad presentes en el órgano o tejido del donante

Hoy sabemos que el complejo MHC es un complejo génico, que se asocia al desarrollo de la
respuesta inmune, puesto que contiene genes que codifican moléculas de presentación antigénica,
genes que codifican proteínas del

Sistema del Complemento, genes que codifican citoquinas, genes que codifican proteinas
involucradas en el procesamiento, transporte y presentación de fragmentos antigénicos

Como los genes están estrechamente ligados, el complejo tiende a heredarse como una unidad,
como un complejo super génico o haplotipo (desequilibrio de ligamiento: no lo están, pero parecen
estar más juntos).

HAPLOTIPO: se define como una combinación particular de genes en un complejo génico o en un

cromosoma.

Así, en una población de individuos existirán tantos haplotipos MHC distintos, como diferentes
combinaciones de alelos de los distintos genes en un complejo génico o en un cromosoma HLA
(cromosoma 6 humano)

En el complejo MHC se distinguen: A) Genes MHC de Clase I. En este grupo se distinguen, los genes
de Clase Ia, (o clásicos), que codifican las moléculas de presentación antigénica MHC de clase I, y
los genes de Clase Ib (no clásicos), que codifican la expresión de moléculas asociadas a otras
funciones

B) Genes MHC de Clase II que codifican moléculas de presentación antigénica MHC de clase II

C) Genes de Clase III, que codifican la expresión de componentes o moléculas del Sistema del
Complemento (C2, C4 y Bf).

D) Otros genes, entre los que se encuentran:

* Genes que codifican citoquinas (TNF y Linfotoxina)

* El gen que codifica proteína de shock térmico (hsp70) que actúa como chaperonina en células
sometidas a estrés.
En el complejo MHC se distinguen:

A) Genes MHC de Clase I. En este grupo se distinguen, los genes de Clase Ia, (o clásicos), que
codifican las moléculas de presentación antigénica MHC de clase I, y los genes de Clase Ib (no
clásicos), que codifican la expresión de moléculas asociadas a otras funciones

B) Genes MHC de Clase II que codifican moléculas de presentación antigénica MHC de clase II

C) Genes de Clase III, que codifican la expresión de componentes o moléculas del Sistema del
Complemento (C2, C4 y Bf).

D) Otros genes, entre los que se encuentran:

* Genes que codifican citoquinas (TNF y Linfotoxina)

* El gen que codifica proteína de shock térmico (hsp70) que actúa como chaperonina en células
sometidas a estrés.

* Genes que codifican moléculas involucradas en el procesamiento de antígenos como Genes LMP2
y LMP 7, que codifican proteìnas LMP2 y LMP7 que forman parte del Proteasoma y participan en
degradación de proteínas citosólicas)

* Genes TAP1 y TAP2, que codifican las moléculas TAP1 y TAP2 (que forman el heterodìmero
TAP1/TAP2, que actúa como transportador de fragmentos peptídicos, desde el citosol al retículo
retículo endoplásmico rugoso, en las células presentadoras de antìgeno.

* Gen Tps, que codifica la chaperonina Tapasina, que permite la asociación de moléculas MHC de
clase Ia con el transportador peptídico, formando el complejo de carga MHC-I/TAP o PLC (por
peptide loading complex) que facilita la unión de un fragmento peptìdico (generalmente endógeno),
al surco de presentación de la molécula MHC de clase I

* Genes DM-A y DM-B, que codifican las moléculas DMA y DMB, respectivamente, que formarán el
heterodímero DMA/DMB, involucrado en la unión de fragmentos peptídicos exógenos a moléculas
MHC de clase II

COMPLEJO HLA HUMANO.

Los genes de clase I y clase II, codifican la expresión de moléculas de presentación antigénica. Los
genes de clase III codifican la expresión de proteínas que forman parte del Sistema del Complemento
(C2, C4, Bf).

* En el complejo MHC existen distintos genes de clase I y de clase II, cada uno de los cuales presenta
múltiples alelos y, por lo tanto, elevado polimorfismo.

* Los genes y moléculas de clase I, incluyen los denominados genes clásicos Ia (que son altamente
polimórficos y de amplia expresión en distintas células nucleadas) y los genes no clásicos Ib, de
menor polimorfismo y expresión restringida sólo a células de origen linfoide.

* Los distintos genes de clase I (Ia y Ib) y de clase II, codifican la expresión de moléculas distintas y,
por lo tanto, con diferentes capacidades para presentar fragmentos peptídicos a los linfocitos T.

* En los distintos individuos, la expresión de estos genes es codominante y, por lo tanto, los productos
moleculares de cada alelo se expresan y funcionan de manera independiente.
* Los genes y moléculas MHC de clase Ia corresponden a HLA-A, HLA-B HLA-C en humanos.

Elevado polimorfismo (numerosos alelos) en los genes MHC de Clase Ia y de Clase II

Los genes de clase Ia (HLA-A, HLA-B y HLA-C en humanos y H-2K, H-2D y H-2L en el ratón), se
expresan en la mayoría de las células nucleadas y corresponden a moléculas originalmente descritas
como el mayor obstáculo al trasplante de tejidos.

MOLECULA MHC DE CLASE I

* La cadena pesada α contiene aproximadamente 330 aminoácidos y presenta 3 dominios

extramembrana de 90 aminoácidos, (denominados α1, α2 y α3).

* Los dominios α1 y α2 forman el surco de presentación (que aloja un fragmento peptídico de 8-9
amino- ácidos) y el dominio α3 contiene una región conservada que será reconocida por el co-
receptor CD8 de los linfocitos T.

* En el fondo del surco de presentación, existen pequeños bolsillo de anclaje que alojarán
aminoácidos específicos del fragmento peptídico que debe unirse a la molécula de presentación
antigénica
Las moléculas MHC de clase I unen péptidos de 9 aminoácidos en el bolsillo formado por los
dominios a α1 y α2 .

Aminoácidos de anclaje (destacados en color) de péptidos que se unen a diferentes moléculas MHC
de clase I (HLA-A, HLA-B).

GENES Y MOLECULAS DE CLASE II

* Las regiones HLA-DP, HLA-DQ y HLA-DR del complejo HLA humano (y las regiones IA e IE, del
complejo H-2 del ratón), con- tienen genes A y B que codifican las cadenas α y β de la molécula
MHC de clase II, respectivamente.

* Las moléculas MHC de clase II, tienen una expresión restringida a células presentadoras de
antígeno y están constituidas por una cadena α (de 32-34 kDa) y una cadena β (de 28-32 kDa), no
covalentemente unidas entre sí.

* Las cadenas α y β, presentan 2 dominios extracelulares de 90 amionoácidos, denominados α1, α2

y β1 y β 2, respectivamente.

* Los dominios α1 y β1 forman el surco de presentación de la molécula MHC de clase II (que alojará
un péptido de 13-15aác. ) y el dominio β2 contiene una región conservada que será reconocida por
el co-receptor CD4 de los linfocitos T.

* Los dominios α1 y β1 forman el surco de presentación de la molécula MHC de clase II (que alojará
un péptido de 13-15aác. ) y el dominio β2 contiene una región conservada que será reconocida por
el co-receptor CD4 de los linfocitos T.

COMPLEJO HLA HUMANO.

Los genes de clase I y clase II, codifican la expresión de moléculas de presentación antigénica. Los
genes de clase III codifican la expresión de proteínas que forman parte del Sistema del Complemento
(C2, C4, Bf).
Genes de Clase II (región 6 en el cromosoma 6 humano)

PROCESAMIENTO Y PRESENTACION DE ANTIGENOS

* Linfocitos T, reconocen fundamentalmente antígenos proteicos asociados a moléculas de

presentación antigénica (moléculas MHC) o antígenos lipídicos, unidos a moléculas CD1).

* Linfocitos T CD8+ reconocen fragmentos peptídicos presentados en el contexto de moléculas MHC

de clase I

* Linfocitos T CD4+ reconocen fragmentos peptídicos asociados a moléculas MHC de clase II.

* Entre los linfocitos NKT (CD4+, CD8+ y doble negativos) es posible encontrar subpoblaciones
MHC-restringidas y subpoblaciones CD1-restringidas.

* El procesamiento antigénico y la asociación de péptidos a moléculas MHC de clase I o de clase II,

depende del origen endógeno o exógeno del antígeno y del tráfico antigénico a través de distintos
compartimientos celulares.

Relación entre origen del antígeno, lugar y maquinaria enzimática de procesamiento, unión a
molécula MHC y reconocimiento por linfocitos T (Sólo las células presentadora profesionales, son
capaces de procesar y presentar ambos tipos de antigeno)
Procesamiento y Presentación de Antígenos Endógenos

Proteínas endógenas, sintetizadas por la célula (o por agentes infecciosos intracelulares), son
procesadas o degradadas en el citosol por un complejo enzimático denominado Proteasoma o
Macropaína.

El Proteasoma contiene subunidades proteícas de bajo peso molecular (LMP-2 y LMP-7),

codificadas en el complejo MHC.

Los fragmentos peptídicos derivados de antígenos endógenos, son luego transportados al retículo
endoplásmico (RER), donde se sintetizan y ensamblan las moléculas MHC.

Proteínas transportadoras dependientes de ATP (moléculas TAP-1 y TAP-2) se asocian formando

un heterodímero responsable de la unión y translocación de los fragmentos peptídicos endógenos,
desde el citosol al RER.

Chaperonas, como Calnexina, BiP, Erp57 y Calreticulina favorecen el ensamblaje de la molécula

MHC de clase I y, las moléculas accesorias Tapasina y TAP, favorecen la unión del péptido a la
molécula MHC.

El ensamblaje apropiado y estable de las moléculas MHC de clase I, requiere de un fragmento

peptídico y sólo el complejo trimolecular estable (cadena alfa-β2m y péptido) será transportado por
la vía exocítica a la superficie celular.

El proteasoma 20S es un complejo proteico multicatalítico formado por subunidades α y subunidades

β, que forman una estructura en barril, formada por 4 anillos de 7 subunidades cada una.

En células de origen hematopoietico o durante la respuesta inmune en contexto de estimulación con

IFN-γ o de TNF-α, las subunidades catalíticas β1, β2 y β5, son remplazadas por las subunidades
catalíticas LMP2 (β1i), MECL-1 (β2i) y LMP7 (β5i) durante la neosíntesis del inmunoproteasoma.

El inmunoproteasoma está implicado en la generación, a partir de antígenos endógenos, de

fragmentos peptícos que serán presentados por moléculas MHC-Ia linfocitos T citotóxicos TCD8+.

Los beneficios inmunológicos de este nuevo inmunoproteasoma se asocia a cambios estructurales

en los bolsillos de unión a los substratos y en las capacidades de clivaje del complejo multicatalítico,
optimizando así cualita y cuantitativa- mente la capacidad de generación de fragmentos peptídicos
que se presentarán unidos a moléculas MHC de clase I.

De esta manera, debido al importante rol de la presentación antigénico en el timo, el

inumoproteasoma modela el repertorio de linfocitos TCD8 en el timo y de linfocitos T citotóxicos en
la periferia.

Recientemente se ha asociado una nueva función del proteasoma en enfermedades autoinmunes,

neuroinflamación inducida por virus y la expansión de linfocitos T, la diferenciación de linfocitos Th y
la producción de citoquinas

El estudio de péptidos asociados a molécula MHC-I obtenidos de CDs de ratones silvestres o de

ratones deficientes en las subunidades β2 yβ5 (β2i−/−/β5i−/−) ha demostrado un enorme aumento
en la abundancia y diversidad de los péptidos MHC-I. La estructura obtenida por cristalografía del
proteasoma constiutivo (20S) y del inmmuno proteasoma a 2,9 A explica esta diferencia.
El canal β1i de unión al sustrato contiene aminoácidos hidrofóbicos que favorecen la producción de
epitopos MHC-I que terminan en pequeños residuos no polares.

La hidrólisis de enlaces peptídicos por β5i puede estar favorecido por aumento en la hidrofilicidad
del sitio activo y puentes de hidrógeno que determinan la forma de la cavidad

Desde el punto de vista estructural el intercambio de β2/β2i no es obvio y es un enigma por qué los
ratones deficientes en β2i están protegidos de la colitis experimental y por qué β2i tiene efecto en la
proliferación homeostática.

Tratamiento de células con IFN-γ conduce al remplazo de las subunidades β1, β2 y β5 del
proteasoma constitutivo por subunidades inducibles LMP2 (β1i), MECL-1 (β2i) y LMP7 (β5i),
respectivamente, para formar el inmuno proteasoma.

La incorporación de estas subunidades es requerida para la generación de numerosos fragmentos

peptídicos MHC clase I.

El estudio de enfermedades autoinmunes en modelos animales y la predisposición genética

asociada a β5i en enfermedades autoinmunes en humanos, sugiere la participación del
inmunoproteasoma en enfermedades inflamatorias.

Proteasoma es complejo enzimático que procesa antígenos endógenos (citosólicos)

TAP es heterodímero

(TAP1/TAP2) responsable del transporte de péptidos endógenos desde el citosol al retìculo

endoplásmico

El procesamiento antigénico y la presentación en el contexto de moléculas MHC de clase I puede

separarse en 6 etapas

1. Primero: adquisición del antígeno a partir de proteínas con errores en su síntesis por terminación
prematura o incorporación errónea de aminoácidos.

2. Segundo, las proteínas mal ensambladas son unidas a ubiquitina para su degradación en el
proteasoma

3. Tercero, el proteasoma degrada la proteína generando péptidos endóigenos

4. Cuarto, los péptidos endógenos son incorporados al RER por el complejo TAP1/TAP2

5. Quinto, los ´péptidos son incorporados en moléculas MHC de clase I, favorecido por el complejo
de unión o carga peptídica que incluye tapasina, calreticulina y ERp57.

6. Sexto, las moléculas MHC de clase I que han incorporado un péptido endógeno, son transportadas
por la vía exocítica hacia el Golgi y de aquí a la membrana celular
Procesamiento y Presentación de Antígenos Exógenos

Proteínas exógenas son capturadas por células presentadoras de antígeno (APC) a través de la vía
endocítica (fagocitosis, endocitosis, y pinocitosis).

Los antígenos exógenos, serán degradados en un compartimiento acídico celular (fagolisosoma,

endolisosoma, MIIC)

La degradación es, por lo tanto, sensible a drogas lisosomotrópicas que aumentan el pH del
compartimiento endocítico (Cloroquina, Primaquina Monosina, Cloruro de amonio) y a inhbidores de
proteasas: Leupeptin, Catepsina D, Antipaína, etc.

Una molécula chaperona DM (heterodímero DMA/DMB), sintetizada en el RER, será transportada

independientemente al compartimiento endocítico y allí favorecerá la salida del fragmento peptídico
CLIP y la entrada de un péptido exógeno, en el surco de presentación de la molécula MHC de clase
II.

MHC II y uniòn de fragmentos peptìdicos en vìa endocìtica

Las molèculas MHC-II α and β se asocian con la cadena invariante ((cadena Ii) en la forma de
trìmeros que por lo tanto daràn origen a un nonàmero

Estos complejos se dirigen al endosoma maduro desde el trans-Golgi (TGN: trans Golgi network), o
por reciclaje desde la membrana plasmàtica.

Dentro de los endosomas, la cadena Ii es secuencialmente degradada para originar un fragmento

residual (pèptido CLIP, que quedarà en el surco de presentaciòn de la molècula MHC-II. (CLIP: class
II-associated invariant chain peptide)

El desplazamiento de CLIP desde el surco MHC-III chain) serà mediado por la molècula chaperona
DM, con la colaboraciòn de la molècula DO.

Los antígenos fagocitados, endocitados, pinocitados o autofagocitados, son dirigi- dos al endosoma
tardío (llamado Compartimiento Endocìtico) donde serán degradados por Catepsinas y la tiol-
oxidoreductasa inducida por IFN γ (GILT:γ-interferon-inducible lysosomal thiol), y la adquisición de
pèptidos de alta afinidad por moléculas MHC clase II, con la participación del heterodímero DM.

El complejo MHC-II/pèptido es transportado luego a la superficie celular para su presentación o

reconocimiento por linfocitos TCD4+

Las cadenas alfa y beta de la molécula MHC de clase II se sintetizan y asocian en el RER y una
glicoproteína denominada cadena invariante (Ii), codificada en el cromosoma 5 humano y 18 del
ratón, se unirá a la molécula MHC-II.

Esta asociación permite bloquear el bolsillo peptídico de la molécula MHC-II, y dirigir su transporte
hacia la ruta endocítica/lisosomal.

En el compartimiento endocítico/lisosomal, rico en proteasas (particularmente cisteín proteasas), se

produce el procesamiento de los antígenos exógenos y la degradación parcial de la cadena Ii por
Catepsina S, dejando un pequeño péptido llamado CLIP, alojado en el surco de presentación de la
molécula MHC de clase II.

En linfocitos B y en células del epitelio tímico (pero no en otras células), una fracción de las moléculas
DM se asocia con la molécula accesoria denominada DO, que parece modular la función de la
molécula DM.

Las moléculas DO maduras se localizan en el compartimiento endocítico/ lisosomal, pero las

moléculas recién sintetizadas son inestables y requieren normalmente su asociación con DM para
abandonar el RER.

La molécula DO, como la molécula DM, es una molécula intracelular no polimórfica y evolutivamente
conservada, que al parecer inhibe la función de DM.

En ratones transgénicos, se ha demostrado que la expresión aumentada de DO, disminuye la

presentación en el contexto MHC de clase II, de fragmentos antigénicos de diversas proteínas.

La expresión de DO en linfocitos B parece favorecer el procesamiento y presentación de los

antígenos internalizados vía unión con BcR

Modelo de acción de la molécula DM

(1) La molécula DM no puede unirse a la molécula MHC de clase II cuando la cadena Ii no ha sido
totalmente digerida dejando sólo el péptido CLIP unido al surco de presentación

(2). La disociación espontánea del extremo amino del péptido, debido al movi- miento continuo del
péptido permite crear un sitio de unión para la molécula DM

(3) La molécula DM induce disociación del péptido CLIP y el complejo resultante

(4), DM/molécula MHC-II vacía, puede unir péptidos nuevos con bastante rapidez

(5) La unión de péptidos de baja afinidad conduce a ciclos de edición de péptidos por la molécula
DM, mientras

6) péptidos de alta afinidad promueven la disociación de DM

(7) Este complejo estable MHC-II/péptido permanecerá por varios días en la membrana de la célula.

MOLECULAS CD1

La presentación de Ags lipídicos a través de moléculas CD1 cumple diversos roles en la respuesta
anti-microbiana, la inmunidad tumoral y el control de la autoinmunidad.

La presentación de Ags lipídicos a través de moléculas CD1 cumple diversos roles en la respuesta
anti-microbiana, la inmunidad tumoral y el control de la autoinmunidad.

Las moléculas CD1 son glicoproteinas compuestas por una cadena pesada no covalentemente
unidas a β 2 microglobulina, de manera similar a moléculas

MHC de clase I
La estructura atómica del complejo CD1-lípido ha definido el modo en que distintas isoformas de
CD1 unen lìpidos de distinta longitud y distinto número de cadenas hidrocarbonadas.

Sin embargo, a diferencia de las moléculas MHC de clase I, las moléculas CD1 poseen canales o
bolsillos hidrofóbicos para unir cadenas hidrocarbonadas alquiladas y una cola citoplasmática que
permite su transporte a distintos compartimientos endocíticos

Las moléculas CD1 se separan en dos grupos:

Las moléculas CD1a, CD1b y CD1c (grupo 1) presentan ácidos grasos bacterianos, glicolípidos,
fosfolípidos y Ags. lipopeptídicos, uniendo la larga cadena hidrocarbonada dentro del bolsillo
hidrofóbico y dejando fuera la cabeza polar hidrofóbica a la entrada del bolsillo.

El TcR de linfocitos Tαβ unirá esta cabeza polar y regiones propias de la molécula CD1.

Las moléculas CD1d (grupo 2) presentan principalmente lìpidos propios, incluyendo esfingolípidos y
diacilglicerol.

Modelo de acción de la molécula DM

(1) La molécula DM no puede unirse a la molécula MHC de clase I cuando el péptido está unido al
surco de presentación

(2). La disociación espontánea del extremo amino del péptido, debido al movimiento continuo del
péptido permite crear un sitio de unión para la molécula DM

(3) La molécula DM induce disociación del péptido CLIP y el complejo resultante

(4), DM/molécula MHC-II vacía, puede unir péptidos nuevos con bastante rapidez

(5) La unión de péptidos de baja afinidad conduce a ciclos de edición de péptidos por la molécula
DM, mientras

6) péptidos de alta afinidad promueven la disociación de la molécula DM.

(7) Este complejo estable MHC-II/péptido permanecerá por varios días en la membrana de la célula.