UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA
INFORME DE LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA II
NÚMERO DE
PRÁCTICA DETERMINACIÓN DE SALMONELLA SPP
#8
DOCENTE: Q.F. Fernando Morlás

1) Sánchez Pazmiño Nury

2) Verni Apolinario Giorgio
INTEGRANTES: 3) Sailema Zambrano Milena
4) Villagomez García Isis
5) Quinto Chuquiana Jordan

GRUPO: 1B SUB-GRUPO: #2 SEMESTRE: 7

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA DE LABORATORIO
• Describir el procedimiento implementado por el Laboratorio de Microbiología para llevar a cabo la identificación,
aislamiento y detección de Salmonella spp. en muestras de alimentos.
• Entender la apariencia después del periodo de incubación y los matices cromáticos que indican la posible existencia
de Salmonella en ambos tipos de muestras.
• Suministrar información que posibilite la toma de decisiones fundamentadas acerca de la seguridad y calidad de
productos alimenticios, ambientales o farmacéuticos, contribuyendo así a asegurar la salud pública.
INSTRUCCIONES O CONSIDERACIONES PREVIAS
SALMONELLA
Salmonella es una bacteria que provoca la infección llamada salmonelosis, siendo una de las cuatro principales
causas de enfermedades diarreicas a nivel mundial y el segundo agente causal más identificado en gastroenteritis.
Esta bacteria puede encontrarse fácilmente en nuestra cadena alimenticia en varios alimentos, como en carnes de
pollo, res, cerdo, en huevos, frutas, vegetales, y hasta en los
alimentos procesados.
La bacteria también se propaga a través de agua contaminada,
el medioambiente, otras personas y animales. Salmonella en
alimentos (carne, huevos, leche) se multiplica a una velocidad
muy elevada, pudiendo duplicar su número cada 15 ó 20
minutos si la temperatura es alta (superior a 20° C); la
temperatura óptima de crecimiento es de 35-43ºC. Por tanto,
los alimentos frescos deben refrigerarse rápidamente para
evitar que la bacteria se multiplique y contamine los alimentos.
MÉTODOS MICROBIOLÓGICOS TRADICIONALES PARA LA DETECCIÓN DE SALMONELLA
Los métodos microbiológicos tradicionales para la detección de Salmonella no van encaminados al conteo de esta
bacteria, se considera una técnica cuyo resultado se expresa cualitativamente, determinando su presencia o ausencia
en diferentes matrices.

La detección está basada en el empleo de medios de cultivo selectivos y posterior caracterización de las colonias
mediante pruebas bioquímicas y serológicas. El método estándar o prueba de oro en clínica es el coprocultivo, el
cual tiene gran valor en estudios epidemiológicos, pero, por su carga de trabajo, costo y volumen, suele ser de bajo
rendimiento y bajo costo-efectividad, siendo la positividad de 1.8% a 4.4 %, además, el porcentaje de recuperación
de los medios de cultivos (Mac Conkey-Hektoen) es de 4% a 10%, esta baja sensibilidad es debido al número de
microorganismos presentes en las heces, la competencia presente con otros microorganismos y a los cambios físico-
químicos del medio de cultivo y/o del ambiente (pH, temperatura y actividad acuosa). Sin embargo, recientemente
las evaluaciones de riesgos microbiológicos requieren de datos cuantitativos para estimar el riesgo de que una
población contraiga salmonelosis por consumo de un determinado alimento contaminado. La Association of Official
Analytical Chemist (AOAC), describe los pasos a seguir para obtener buenos resultados, los cuales pueden demorar
entre 4 a 5 días.
REACTIVOS DE LABORATORIO
▪ Caldo lactosado o Agua de peptona bufferada
▪ Caldotetra-onato
 ▪ Caldo RappaportVassiliadis
▪ Agar xilosa lisina desoxicolato (XLD
▪ Agar entérico de Hektóen (HE)
▪ Agar sulfito de bismuto (SB)
▪ Agar hierro-triple azúcar (TSI) o agar hierro Kiigler (KIA) solidificado e inclinado
▪ Agar hierro-lisina (LIA) inclinado.
▪ Agar urea
▪ Agar SIM (sulfuro-indol-mo-lidad)
▪ Agar citrato de Simmons inclinado
▪ Caldo rojo de me-lo-VogesProskauer (RM-VP)
▪ Solución de verde brillante al 0.1%
▪ Soluciónyodoyodura de potasio
▪ Reac-vo de Kovac's
▪ Solución de rojo de me-lo.
▪ Solución reac-va de Voges-Proskauer Nº 1 (VP1; solución etanólica de aáa-naàot al 5% PNV)
▪ 18. Solución reac-va de Voges-Proskauer Nº 2 (VP2; hidróxido de potasio al 40% PV).
MATERIALES DE LABORATORIO
▪ Matraz Erlenmeyer de 500 ml de capacidad o frasco de vidrio de 500 ml de capacidad
▪ Funda de stomacher (funda estéril) o un vaso de licuadora estéril
▪ Utensilios necesarios para la manipulación de muestras: cucharas, cuchillos, tenedores, estériles
▪ Tubos de ensayo de 16 x 150 mm.
▪ Cajas de Petri estéril.
▪ Tubos de ensayo de 13 x 100 mm.
▪ Pipetas de vidrio de 1 ml estériles con filtro de algodón
▪ Pipetas de vidrio de 10 ml estériles con filtro de algodón
▪ Auxiliar de pipeta.
▪ Pipetas Pasteur estériles con filtro de algodón
▪ Asa de inoculaciónredonda
▪ Asa de inoculación en punta
▪ Mecheros de Bunsen
EQUIPOS DE LABORATORIO
▪ Balanza de precisión
▪ Stomacher o motor para licuadora
 ▪ Incubadora a 35%C Incubadora a 42º

TÉCNICA OPERATORIA O PROCEDIMIENTO (ACTIVIDADES POR DESARROLLAR)

RESULTADOS OBTENIDOS
CONCLUSIONES
▪ Para determinar la presencia de Salmonella se emplea estos métodos en microbiología que constan de agares
que favorecen su crecimiento y suprime el crecimiento de otras bacterias, comenzando inoculando una muestra
previamente preparada y realizando una siembra por agotamiento ya que esto es un método presuntivo para
determinar la salmonella ya que el siguiente paso para la determinación de las mismas serían las pruebas
bioquímicas, estas pruebas son una herramienta muy importante para la detección de este patógeno debido a que
nos permiten llevar un control de los alimentos.
▪ La práctica suministró información pertinente que facilita la toma de decisiones informadas sobre la seguridad
y calidad de productos alimenticios, ambientales o farmacéuticos. Este aspecto adquiere una importancia crucial
en la contribución a la preservación de la salud pública, dado que la información generada en el laboratorio
puede aplicarse para instaurar medidas correctivas y preventivas en la producción y distribución de productos,
garantizando de esta manera niveles sanitarios adecuados.
▪ Se logró una efectiva explicación del procedimiento realizado por el Laboratorio de Microbiología en la
identificación, aislamiento y detección de Salmonella spp. en muestras de alimentos. Esta exposición brinda una
comprensión nítida de las fases implicadas en el análisis microbiológico, siendo un componente esencial para
asegurar la seguridad alimentaria.
RECOMENDACIONES
▪ Asegurarse que no afecte factores externos el periodo de incubación.
▪ Mantener las tecnicas asepticas al momento de realizar la práctica.
▪ Tener en consideración las explicaciones y normativas de la guía práctica.
BIBLIOGRAFÍA:
▪ Gonzalez Pedraza, J., Pereira Sanandres, N., Soto Varela, Z., Hernández Aguirre, E., & Villarreal Camacho, J.
(2014). Aislamiento microbiológico de Salmonella spp. y herramientas moleculares para su detección. Revista
Salud Uninorte, 30(1), 73-94. [Link]
55522014000100009&script=sci_arttext
▪ Pérez, C., Rivera, S., de Vera, A. P., Rincón, H., Mavárez, Y., & Román, R. (2004). Aislamiento de Salmonella
en canales de aves y evaluación de la efectividad de diferentes medios de enriquecimiento y selectivos. Revista
Científica, 14(2), 0. [Link]