LINEA TURBITEST AA
TRF
C Para la determinación de transferrina en suero o plasma
SIGNIFICACION CLINICA les de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
La transferrina (TRF) es la principal proteína plasmática Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
transportadora de hierro. Cada molécula de TRF posee acuerdo a la normativa vigente.
dos sitios de unión para el hierro, el cual se une sólo en su
forma oxidada (Fe3+). Se sintetiza en el hígado y su nivel ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
plasmático es regulado principalmente por la disponibili- ALMACENAMIENTO
dad de hierro. Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10 oC)
La evaluación de los niveles plasmáticos de TRF es útil en hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No con-
el diagnóstico diferencial de anemias y el monitoreo de su gelar.
tratamiento. En casos de anemia hipocrómica por deficien-
cia de hierro los niveles de TRF aumentan debido a un MUESTRA
aumento de su síntesis pero su saturación con hierro es Suero o plasma
baja como consecuencia de los bajos niveles de hierro. a) Recolección: obtener la muestra de la manera habitual.
Por otro lado si la anemia se debe a una falla en la incorpo- b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
ración de hierro a la hemoglobina, los niveles de TRF son plasma se recomienda utilizar heparina como anticoagu-
bajos pero la proteína está altamente saturada con hierro. lante.
Es una proteína de fase aguda, con bajos niveles en proce- c) Sustancias interferentes conocidas: no emplear mues-
sos inflamatorios y tumores malignos. Se encuentra dismi- tras hemolizadas, lipémicas o contaminadas. Las muestras
nuida también en enfermedades hematológicas, cirrosis, que poseen precipitados deben ser centrifugadas previo a su
enfermedades renales y malnutrición. Aumenta durante el ensayo.
embarazo y administración de estrógenos. No se observan interferencias por triglicéridos hasta
1600 mg/dl, hemoglobina hasta 1000 mg/dl, bilirrubina di-
FUNDAMENTO DEL METODO recta hasta 24 mg/dl, bilirrubina total hasta 40 mg/dl y factor
La TRF reacciona con el anticuerpo específico formando reumatoideo hasta 520 UI/ml.
inmunocomplejos insolubles. La turbidez causada por es- d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento:
tos inmunocomplejos es proporcional a la concentración las muestras pueden conservarse hasta 7 días en helade-
de TRF presente en la muestra y puede ser medida espec- ra (2-10oC) o 6 meses congeladas (a -20oC). Evitar conge-
trofotométricamente. lamientos y descongelamientos repetidos.
REACTIVOS PROVISTOS MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
A. Reactivo A: buffer Tris 50 mM, pH 7,5. - Espectrofotómetro
B. Reactivo B: anticuerpos monoespecíficos (cabra) anti- - Cubetas espectrofotométricas de caras paralelas
transferrina humana. - Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indica-
dos
REACTIVOS NO PROVISTOS - Tubos de Kahn o hemólisis
- Solución fisiológica - Baño de agua a 37oC
- Control Inmunológico nivel 1 Turbitest AA y Calibrador - Cronómetro
Proteínas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab.
CONDICIONES DE REACCION
INSTRUCCIONES PARA SU USO - Longitud de onda: 340 nm
Reactivos Provistos: listos para usar. - Temperatura de reacción: 37oC
- Tiempo de reacción: 10 minutos
PRECAUCIONES - Volumen de muestra: 30 ul
Los reactivos son para uso diagnóstico “in vitro”. - Volumen final de reacción: 1230 ul
Todas las muestras de pacientes deben manipularse como Los volúmenes de muestra y reactivos pueden variarse
si fueran capaces de transmitir infección. proporcionalmente, sin que se alteren los factores de cál-
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habitua- culo.
861254900 / 02 p. 1/6
VALORES DE REFERENCIA
PROCEDIMIENTO 200 a 360 mg/dl (2,0 a 3,6 g/l)
Cada laboratorio debe establecer sus propios valores de
CURVA DE CALIBRACION referencia.
En tubos de Khan, realizar las siguientes diluciones en
solución fisiológica del Calibrador Proteínas nivel CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
alto Turbitest AA: 1/10, 1/20, 1/40, 1/80, 1/160, utilizar TRF (mg/dl) x 0,01 = TRF (g/l)
solución fisiológica como punto cero.
Reactivo A 1000 ul LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Calibrador Proteínas diluido 30 ul Se recomienda realizar una recalibración completa, cuan-
do se cambia de lote de reactivo o cuando el control de
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a
calidad así lo determina.
340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua des-
Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse
tilada. Luego agregar:
todo tipo de contaminaciones, empleando para la medición
Reactivo B 200 ul únicamente micropipetas perfectamente limpias y secas.
Homogeneizar e incubar 10 minutos a 37oC, leer la ab- PERFORMANCE
sorbancia a 340 nm (DO2) dentro de los diez minutos, a) Reproducibilidad: se evaluó a través de una modifica-
llevando el aparato a cero con agua destilada. ción del protocolo EP5-A del CLSI. Para ellos se procesaron
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) muestras con distintos niveles de TRF. Con los datos obte-
para cada dilución del calibrador, incluyendo el punto nidos se calculó la precisión intraensayo y total.
cero. Representar en papel milimetrado las diferencias
Precisión intraensayo
de absorbancia (∆A) en función de la concentración en
mg/dl de transferrina en el calibrador. Nivel D.S. C.V.
208 mg/dl ± 1,5 mg/dl 0,7%
PROCEDIMIENTO PARAMUESTRAS 238 mg/dl ± 2,0 mg/dl 0,9%
Realizar diluciones 1:10 de las muestras en solución 377 mg/dl ± 2,8 mg/dl 0,7%
fisiológica. En tubos de Kahn debidamente marcados,
Precisión total
colocar:
Nivel D.S. C.V.
Reactivo A 1000 ul 208 mg/dl ± 3,8 mg/dl 1,8%
Muestra diluida 30 ul 238 mg/dl ± 4,6 mg/dl 2,0%
377 mg/dl ± 6,3 mg/dl 1,7%
Homogeneizar y leer la absorbancia de cada dilución a
b) Límite de detección: es la mínima cantidad del analito
340 nm (DO1) llevando el aparato a cero con agua des-
capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero
tilada. Luego agregar:
y corresponde a la concentración de 3,8 mg/dl de TRF.
Reactivo B 200 ul c) Rango de medición: corresponde al intervalo de valores
exactamente cuantificables y se extiende de 30 a 600 mg/dl
o
Homogeneizar e incubar 10 minutos a 37 C, leer la ab- de transferrina.
sorbancia a 340 nm (DO2) dentro de los diez minutos, d) Efecto prozona: no se evidencia efecto prozona hasta
llevando el aparato a cero con agua destilada. 3000 mg/dl de transferrina.
Estos datos de performance fueron obtenidos empleando
analizador automático Konelab 60i, por lo tanto dichos valo-
CALCULO DE RESULTADOS res pueden variar cuando se emplea otro analizador o téc-
Calcular la diferencia de absorbancia (∆A = DO2 - DO1) nica manual.
correspondiente a cada muestra analizada. Interpolar esta
∆A en la curva de calibración para determinar la concen- PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
tración de TRF en mg/dl. Referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
Las muestras con absorbancias superiores a la del Cali-
brador Proteínas nivel alto deben ser diluidas 1:2 con solu- PRESENTACION
ción fisiológica y procesadas nuevamente. Multiplicar el 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
resultado obtenido por dos. - 1 x 10 ml Reactivo B
(Cód. 1999703)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Control Inmunológico nivel 1 o Control Inmunológico 60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. El control es procesado - 1 x 10 ml Reactivo B
de la misma manera que las muestras. (Cód. 1009347)
861254900 / 02 p. 2/6
60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A SIMBOLOS
- 1 x 10 ml Reactivo B Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
(Cód. 1009220) reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
60 ml: - 1 x 50 ml Reactivo A
C
Este producto cumple con los requerimientos previstos
- 1 x 10 ml Reactivo B por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanita-
(Cód. 1009659) rios para el diagnóstico "in vitro"
BIBLIOGRAFIA P Representante autorizado en la Comunidad Europea
- Tietz Fundamentals of clinical chemistry - Burtis, C., Ashwood,
E. (5º Edition) WB Saunders, 2001. V Uso diagnóstico "in vitro"
- Young, DS. - Effects of preanalytical variables on clinical
laboratory test. AACC Press - Third Edition, 2007. X Contenido suficiente para <n> ensayos
- Kasvosve, I; Delanghe, J. 2002 - Clin. Chem. Lab. Med. 40/
H Fecha de caducidad
10:1014, 2002.
- Bandi, ZL; Schoen, I; Bee DE. - Clin Chem. 31/10:1601, l Límite de temperatura (conservar a)
1985.
- EP5-A Vol. 24 Nº 25 del CLSI - Evaluation of precision G No congelar
performance of quantitative measurement methods
(approved guideline - second edition). F Riesgo biológico
- EP17-A2 Vol. 24 Nº 34 del CLSI - Protocols for determination
of limits of detection and limits of quantitation; approved Volumen después de la reconstitución
guideline.
Cont. Contenido
g Número de lote
M Elaborado por:
Xn
Nocivo
Corrosivo / Caústico
Xi
Irritante
i Consultar instrucciones de uso
Calibr. Calibrador
b Control
b Control Positivo
c Control Negativo
h Número de catálogo
M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
Wiener lab.
[Link]
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
PM-1102-39 2000 Rosario - Argentina
861254900 / 02 p. 3/6 UR120903
