Trabajo Práctico de Laboratorio
Acción de la enzima catalasa
Biología 4° año – Prof. Leila Derene
Objetivo
Familiarizarse con las propiedades de las enzimas y observar la actividad de la catalasa
Observar la desnaturalización de enzimas.
Descripción de la actividad
El agua oxigenada, que se utiliza para desinfectar heridas y decolorar el pelo –entre otros usos–, se
descompone espontáneamente liberando oxígeno en burbujas. Esta reacción, que en condiciones
normales ocurre lentamente, puede acelerarse agregando un catalizador, es decir, una sustancia
que acelera reacciones químicas. Entre los catalizadores se encuentran compuestos inorgánicos,
como el dióxido de manganeso, y biológicos –las enzimas–, como la catalasa que se obtiene de las
papas y las manzanas. La actividad de las enzimas depende, entre otras cosas, de la acidez –o el
pH– del medio.
Propiedades del agua oxigenada
El agua oxigenada (H2O2) es una sustancia inestable, oxidante y muy tóxica. En las células se
produce agua oxigenada en pequeña cantidad, como un subproducto de las reacciones
bioquímicas del metabolismo. El organismo se defiende de su toxicidad mediante los antioxidantes
naturales que la descomponen en sustancias inocuas.
Espontáneamente, el agua oxigenada se descompone en agua y oxígeno de acuerdo con la
siguiente ecuación:
2H2O2 (ac) → 2H2O (l) + O2 (g)
Durante la reacción se liberan burbujas de oxígeno. En condiciones normales esto ocurre muy
lentamente.
Catalizadores
Los catalizadores disminuyen la energía de activación, que deben superar los reactivos para
transformarse en productos. Cuando la energía de activación es grande la reacción ocurre
lentamente. Un catalizador aumenta la velocidad porque hace que la reacción ocurra mediante un
mecanismo que requiere una energía de activación menor.
Enzimas: catalizadores biológicos
Las enzimas son catalizadores de origen biológico y estructura compleja. La catalasa y la mayoría
de las enzimas son proteínas, caracterizadas por su estructura molecular tridimensional. La
actividad de las enzimas depende de esta estructura, en la cual hay una zona en la que se inserta
una molécula del reactivo (o sustrato) de manera ajustada y específica, como puede hacerlo una
llave en la cerradura. La unión del sustrato a la enzima desencadena la reacción química, se liberan
los productos y el sitio de unión queda libre nuevamente para captar otra molécula de sustrato y
continuar la reacción.
La enzima posee un sitio activo donde se une el sustrato. De esta manera facilita la reacción.
Una característica de las proteínas –y de las enzimas– es que su estructura tridimensional puede
modificarse según la acidez del medio. La estructura que presentan se forma por el plegamiento de
la cadena de aminoácidos de la proteína sobre sí misma. Estos plegamientos se forman por
interacciones de tipo eléctrico que permiten la unión de aminoácidos, alejados entre sí en la
secuencia lineal de la cadena. Las variaciones de la concentración de iones hidrógeno –o el pH–de
la solución alteran la carga eléctrica de algunos grupos funcionales de los aminoácidos y afectan las
interacciones que estos mantienen en la estructura tridimensional. Por este motivo, la actividad
catalítica de una enzima, que requiere una estructura determinada, puede variar con el pH.
Todas las enzimas son proteínas. Por lo tanto, todas las enzimas sufren desnaturalización frente a
un cambio de pH del medio.
El pH óptimo de la catalasa está en torno a 7,5 y cuando el pH de la disolución es muy básico o
muy ácido la proteína pierde su actividad enzimática.
Desarrollo de la práctica
MATERIALES
Peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) – Papa cruda y cocida – Platitos o recipientes similares –
Vasos de precipitados, tubos de ensayo o probetas – Limón o vinagre
PROCEDIMIENTO
Experiencia 1. Reacción de la catalasa ante la presencia de peróxido de hidrógeno
Rotule dos vasos de precipitado como 1 y 2.
En el vaso 1: Cortar la papa en pedazos pequeños e introducirla en el vaso.
En el vaso 2: Triturar/pisar la papa e introducirla en el vaso.
Con un gotero añadir algunas gotas de peróxido de hidrógeno en cada vaso.
Registrar las observaciones.
Experiencia 2. Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas
Introducir la papa previamente cocida en una probeta o vaso de precipitado.
Con un gotero añadir algunas gotas de peróxido de hidrógeno.
Registrar las observaciones.
Experiencia 3. Efecto del pH sobre el funcionamiento de las enzimas
1. Rotule dos vasos como 1 y 2.
2. Añadir algunos trozos de papa cruda en cada vaso.
3. En el vaso 1: agregar una cucharadita de vinagre o jugo de limón, agite suavemente hasta
mezclar: En el vaso 2: no agregar nada
4. Usando un gotero o algo similar, añadir tres o cuatro gotas de peróxido de hidrógeno en cada
vaso.
5. Registre las observaciones realizadas.
Informe a entregar por plataforma – En grupos de 4/5 personas
Análisis de la acción de la enzima catalasa
Integrantes del grupo:
Fecha de la práctica:
Detallar el procedimiento llevado a cabo en cada una de las experiencias en primera persona.1)
procedimiento
1) Procedimiento 1: En la experiencia número 1 rotulamos 2 tubos de ensayo, el primero lo
llenamos con la papá cruda que antes habíamos cortado en pequeños pedazos y le
agregamos 10 gotas de peróxido de hidrógeno, en el segundo tubo agregamos la papá
cruda que pisamos antes y agregamos 10 gotas de peróxido de hidrógeno.
Ambos tubos lograron tener reacciones, aunque, como se ve en la imagen el tubo 2, donde
pusimos la papa cruda pisada se notó más la reacción de la enzima catalasa con el peróxido de
hidrógeno
Procedimiento 2: En la experiencia número 2 utilizamos 1 tubo de ensayo que llenamos con
pequeños trozos de una papa cocida y vertemos 10 gotas de peróxido de hidrógeno
Procedimiento 3: En la experiencia número 3 utilizamos y rotulamos 3 tubos de ensayo, el primer
tubo de ensayo lo llenamos con papa cruda cortada en pequeños pedazos, vertimos 10 gotas de
limón y 10 gotas de peróxido de hidrógeno, en el segundo tubo agregamos papa cruda cortada en
pequeños trozos, 10 gotas de vinagre y 10 gotas de peróxido de hidrógeno, por último, en el tercer
tuvo agregamos papa cruda cortada en pequeños trozos y 10 gotas de peróxido de hidrógeno
Sólo 2 de los 3 tubos tuvieron reacciones, el primer tubo tuvo una reacción porque el limón no
logró cubrir toda la superficie de la papa por lo que solo reaccionó la parte que no estaba en
contacto con el limón, el segundo tubo no tuvo reacción y el tercer tubo tuvo reacción
Acompañar con una fotografía de cada paso detallado en el ítem anterior.
Analizar teóricamente lo sucedido, indicando:
Sabemos que la enzima analizada es la catalasa, indicar cuál es el sustrato y cuáles los productos
en la reacción llevada a cabo por dicha enzima.
A. Como sabemos el sustracto es el encargado de transformar la enzima por lo que en este
caso el agua oxigenada funcionó como activador de la reacción química produciendo
burbujas en la superficie de la papa, a su vez la catalasa acelera la reacción y oxidación o
descomposición.
En qué casos pudieron ver la acción de la enzima catalasa y qué reacción se estaba llevado a cabo.
Determinar, además, cuando actúo con mayor eficiencia y por qué.
La enzima catalasa se puede observar en casos donde se produce la descomposición del peróxido
de hidrógeno (H2O2) en agua (H2O) y oxígeno (O2). Actúa con mayor eficiencia en condiciones de
pH neutro y temperaturas óptimas, ya que estas condiciones favorecen su actividad enzimática por
lo que los tubos que tuviesen papá cruda tendrían una reacción a diferencia de aquellos tubos con
papa cocida, vinagre y/o limón ya que ninguno de estos cumple con los requisitos para hacer que
la enzima catalasa entre en reacción.
En qué casos no pudieron ver la acción de la catalasa. Justificar.
En los casos de no se pudimos ver las acciones fueron en los tubos de vinagre y limón no hicieron
reacciones uno por el ph y el otro por la temperatura, y en la papa cosida tampoco tuvo reacción
porque se desnaturaliza porque pero en el limón si llego a hacer una reacción pero porque pudo
tocar un poco de la superficie de la papa.
Investigar:
¿En qué otros tejidos podemos encontrar esta enzima? ¿Qué rol cumple?
Nosotros encontramos que en estos otros tejidos podemos encontrar enzimas son: estómago(jugo
gástrico), en la sangre, los líquidos intestinales, en la boca(saliva).
Imágenes extra:
