Análisis instrumental
Espectroscopia de
absorción uv visible
integrantes: Angeli León, Gabriela SEGARRA,
Jefferson tucupi , Rony Honores, Maribel Tintin
01 CONCEPTOS GENERALES
ESPECTROSCOPÍA DE RADIACIÓN UV-VIS
La Espectroscopía de Radiación Ultravioleta Visible es una técnica empleada en el análisis farmacéutico, ambiental,
químico y de alimentos entre otros, ya que es una herramienta para la identificación y cuantificación de compuestos y
ampliamente usada por las licenciaturas e ingenierías.
El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la absorción de radiación ultravioleta-visible por una
molécula, causando la promoción de un electrón de un estado basal a un estado excitado. La longitud de onda comprende
entre 160 y 780 [Link] absorción de radiación UV-visible por una especie se da en 2 etapas:
excitación electrónica
Relajación. Puede ser por:
-emisión de calor
-reacción fotoquímica -emisión de fluorescencia / fosforescencia
La espectrofotometría de absorción UV-VIS
se encarga de medir la atenuación de un haz de luz después de su paso a través de una muestra.
detección de grupos funcionales, detección de impurezas, análisis cualitativo y cuantitativo de analitos, medicamentos
con grupos cromofóros entre otras aplicaciones.
LEY DE BEER-LAMBERT
La ley de Beer-Lambert establece que la cantidad de energía que absorbe una solución es
proporcional al paso de luz y a la concentración.
TIPO DE ESPECTROSCOPIA: ABOSRBANCIA UV-VIS
La espectroscopia ultravioleta-visible es un tipo de
espectroscopia de absorción en la que se ilumina una
muestra con rayos electromagnéticos de varias
longitudes de onda en el rango ultravioleta (UV) y
visible (VIS).
Según la sustancia, la muestra absorbe parcialmente
los rayos de luz ultravioleta o visible. El resto de la
luz, es decir, la luz transmitida, se registra como una
función de la longitud de onda mediante un detector
adecuado. El detector produce entonces el espectro
UV-VIS único de la muestra (también conocido como
el “espectro de absorción”).
Para que una sustancia sea activa en el visible debe
ser coloreada: el que una sustancia tenga color es
debido a que absorbe ciertas frecuencias o
longitudes de onda del espectro visible y transmite
otras.
LÁMPARAS ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA/VISIBLE
Las lámparas de deuterio y las lámparas halógenas
de tungsteno (VIS, visible) se emplean en la
espectroscopia ultravioleta/visible. En este proceso
se mide la absorción de luz visible (390 - 800 nm) y
luz ultravioleta (190 – 390 nm).
Las sustancias se miden en solución en una cubeta
de cuarzo. Con un espectrómetro, se radia luz con
una longitud de onda en la gama de 190 a 800 nm a
través de la cubeta y se registran los espectros de
absorción.
También se utilizan lámparas de mercurio que solo
emiten un espectro de línea.
Estado de excitación
Cuando una radiación electromagnética pasa a través de un compuesto
químico, este puede absorber una parte de la radiación. Cada frecuencia de
dicha radiación tiene una energía propia hv. Si el compuesto contiene algún
nivel energético que corresponda exactamente a una frecuencia determinada,
este absorbe radiación pasando de un estado basal a un estado excitado.
COMPONENTES
FUENTE DE RADIACION
LAMPARA DE DEUTERIO:UV
LAMPARA DE TUNGSTENO:VISIBLE
LAMPARA DE XENON:UV-VISIBLE
REGIONES DEL ESPECTRO ELECTROMAGNÉTICO
LONGITUD DE ONDA UV: 200-400 NM
LONGITUD DE ONDA VISIBLE: 400-700 NM
LONGITUD DE ONDA UV-VISIBLE: 160-780 NM
SELECTOR DE LONGITUD DE ONDA
PRISMA O REDES DE DIFRACCION
CUBETA DE MUESTRA O CELDA
CUARZO O SÍLICE FUNDIDO:UV
VIDRIO O PASTICO:VISIBLE
DETECTOR DE RADIACION
FOTOELECTRICOS
DISPOSITIVO DE LECTURA
MEDICIONES QUE SE REGUISTRAN EN MEDIDAS ANALOGICAS,
DIGITALES O SISTEMAS COMPUTACIÓN
CÓMO LUCEN LOS ESPECTROS
DE ABSORCIÓN?
En UV-Vis los espectros que son una representación gráfica de la absorbancia o transmitancia en función de la longitud de
onda de la radiación incidente se caracterizan por mostrar bandas anchas. Cada pico corresponde a una transición
electrónica.
CURVA ESPECTRAL
CURVA DE CALIBRACIÓN VS CURVA ESPECTRAL
FUNCIÓN DEL ESPECTRO UV-
VISIBLE (UV-VIS)
El principio básico de la técnica de UV-VIS es la absorción de radiación de una
frecuencia determinada en el rango de longitudes de onda de UV-VIS, realizada por una
molécula para producir una transición de un nivel de baja energía a un nivel de mayor
energía.
FACTORES QUE PUEDEN AFECTAR EL
ESPECTRO UV-VISIBLE (UV-VIS)
CONCENTRACIÓN DE LA MUESTRA: SOLVENTE
La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia El solvente en el que se disuelve la muestra puede
es directamente proporcional a la concentración de la afectar el espectro UV-Vis.
muestra.
TEMPERATURA INSTRUMENTACIÓN:
A temperaturas elevadas, algunas sustancias pueden La calidad y calibración del espectrofotómetro
experimentar cambios en su estructura molecular también son factores críticos.
que afectan su espectro de absorción.
APLICACIONES
MEDIO AMBIENTE INDUSTRIA
Monitorización de Azufre
Aplicaciones típicas en el medio ambiente Monitorización de gases de escape
Monitorización de gases de escape
Análisis de agua
Medición NOx
SANITARIO
Análisis dermatológico
Análisis de orina
La región UV
01
Se define como el
rango de longitudes de
onda
Región visible
02
El color visible de una solución
y que corresponde a las Carcteristicas
longitudes de onda de luz que
transmite, no que absorbe.
Absorbancia
La absorbancia de una
solución es directamente
proporcional a su
03
concentración –a mayor
número de moléculas mayor
interacción de la luz con ellas
