INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

UNIDAD PROFESIONAL
INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGÍA

ACADEMIA DE MÉTODOS ANALÍTICOS

MÉTODOS CUANTITATIVOS

PRÁCTICA 13.

Análisis cualitativo y cuantitativo de uno y multicomponentes

de compuestos orgánicos e inorgánicos mediante
espectrofotometría visible.

INFORME DE PRÁCTICA

Grupo: 2LM3
Equipo: No. 1

Integrantes:

• Báez López María Luisa

• Clavel Martínez Denisse Jaqueline
• Hernández Barrera Diana Paola
• Hernández Garcia Daniela Paola

Profesores:

• Alfonso Hernández Muñoz

• María Teresa López Cárdenas

Fecha de entrega: 09/05/2023

OBJETIVOS

• Obtener el espectro de absorción del verde de bromocresol y el espectro de absorción

del anaranjado de metilo.
• Determinar la longitud de onda de máxima absorción del verde de bromocresol y del
anaranjado de metilo.
• Trazar la curva de calibración del verde de bromocresol y del anaranjado de metilo.
• Determinar el coeficiente de absortividad molar, ε, del verde de bromocresol y del
anaranjado de metilo.
• Realizar un análisis cuantitativo para determinar la concentración de verde de
bromocresol y anaranjado de metilo cuando estos componentes forman parte de una
muestra problema.
INTRODUCCIÓN
Las mediciones basadas en la luz y otras formas de radiación electromagnética son
ampliamente utilizadas en química analítica. Las interacciones de la radiación y la materia
son el objeto de estudio de la ciencia llamada espectroscopia. Los métodos espectroscópicos
analíticos se basan en medir la cantidad de radiación producida o absorbida por las especies
moleculares o atómicas de interés. Podemos clasificar los métodos espectroscópicos de
acuerdo con la región del espectro electromagnético utilizada o producida durante la
medición, entre ellas están las regiones de rayos g, rayos X, ultravioleta (UV), visible,
infrarrojo (IR), microondas y las de radiofrecuencia (RF). Los métodos espectro químicos han
proporcionado herramientas para las determinaciones cuantitativas y cualitativas tanto de
compuestos inorgánicos como orgánicos. (Skoog, 2015).
La radiación electromagnética es una forma de energía transmitida a través del espacio a
grandes velocidades. Se le llama luz a la radiación electromagnética en la región UV/ visible,
dicha radiación se describe como una onda con propiedades de longitud de onda, frecuencia,
velocidad y amplitud y puede ser tratada como paquetes discretos de energía o como
partículas llamadas fotones o cuantos, así mismo la energía de un fotón es directamente
proporcional a su frecuencia. Las interacciones más interesantes y útiles en espectroscopia
son aquellas cuyas transiciones ocurren entre diferentes niveles de energía de las especies
químicas. El espectro electromagnético abarca un gran intervalo de energías (frecuencias) y,
por lo tanto, de longitudes de onda, para la luz visible el rango esta entre 380-780 nm.
Normalmente la muestra es estimulada de alguna manera mediante la aplicación de energía
en forma de calor, energía eléctrica, luz, partículas o de una reacción química. Antes de
aplicar el estímulo, el analito se encuentra predominantemente en su estado de energía más
bajo, o estado basal. El estímulo causa que algunas de las especies del analito experimenten
una transición hacia un estado de mayor energía, o estado excitado. Las moléculas pueden
absorber energía luminosa y almacenarla en forma de energía interna. Los espectros de
absorción se miden mediante un instrumento denominado espectrómetro. Estos instrumentos
constan de una fuente de luz “blanca” caracterizada por un espectro de emisión continuo en
un intervalo amplio de longitudes, este haz de luz traspasa la cubeta de análisis donde se
encuentra la muestra a analizar.
La utilización de la absorbancia al realizar los espectros tiene la ventaja de ser directamente
proporcional a la concentración de moléculas en la muestra. La ley de aditividad de
absorbancias establece que la absorbancia total de varias sustancias en mezcla es la suma
de las absorbancias individuales, siempre y cuando no haya interacciones químicas entre las
moléculas y si los coeficientes de extinción molar en la mezcla coinciden con los coeficientes
determinados en solución individual. (Vargas, 2007).
DIAGRAMA DE BLOQUES

RESULTADOS EXPERIMENTALES

Tabla 1. Datos experimentales para la determinación del espectro

de absorción del anaranjado de metilo.

LONGITUD LONGITUD
DE ONDA ABSORBANCIA DE ONDA ABSORBANCIA
(λ - nm) (λ - nm)
400 0.005 580 0.012
405 0.007 585 0.008
410 0.01 590 0.005
415 0.014 595 0.003
420 0.019 600 0.003
425 0.024 605 0.002
430 0.032 610 0.002
435 0.041 615 0.002
440 0.052 620 0.001
445 0.065 625 0.001
450 0.078 630 0.001
455 0.094 635 0.002
460 0.112 640 0.002
465 0.131 645 0.002
470 0.151 650 0.002
475 0.171 655 0.002
480 0.192 660 0.002
485 0.209 665 0.002
490 0.228 670 0.002
 495 0.244 675 0.002
500 0.258 680 0.002
505 0.265 685 0.003
510 0.265 690 0.003
515 0.26 695 0.002
520 0.254 700 0.002
525 0.247 705 0.003
530 0.24 710 0.003
535 0.227 715 0.002
540 0.205 720 0.003
545 0.177 725 0.003
550 0.141 730 0.002
555 0.103 735 0.003
560 0.07 740 0.003
565 0.046 745 0.003
570 0.026 750 0.003
575 0.018

Tabla 2. Datos experimentales para la determinación del espectro de absorción del verde
de bromocresol.
LONGITU LONGITU LONGITU LONGITU
D DE Absorbanc D DE Absorbanc D DE Absorbanc D DE Absorbanc
ONDA ia ONDA ia ONDA ia ONDA ia
(λ – nm) (λ – nm) (λ – nm) (λ – nm)
750 0.03776 662 0.03681 574 0.04711 486 0.21544
748 0.0249 660 0.03336 572 0.04912 484 0.22147
746 0.0371 658 0.03662 570 0.04866 482 0.22872
744 0.03519 656 0.03457 568 0.04866 480 0.23587
742 0.03168 654 0.03436 566 0.05301 478 0.24204
740 0.03747 652 0.03502 564 0.05257 476 0.25014
738 0.02904 650 0.03824 562 0.05455 474 0.25615
736 0.03732 648 0.03594 560 0.05361 472 0.26316
734 0.03594 646 0.03297 558 0.05596 470 0.267
732 0.03622 644 0.03899 556 0.05689 468 0.27385
730 0.03243 642 0.04048 554 0.06358 466 0.27819
728 0.03161 640 0.03764 552 0.06104 464 0.28276
726 0.03431 638 0.03544 550 0.06415 462 0.28799
724 0.04174 636 0.04457 548 0.06714 460 0.29179
722 0.0332 634 0.03718 546 0.06553 458 0.29614
720 0.03126 632 0.03738 544 0.06925 456 0.29965
718 0.03874 630 0.03963 542 0.0726 454 0.30276
716 0.03469 628 0.04109 540 0.07453 452 0.30412
714 0.03373 626 0.03557 538 0.07955 450 0.30683
712 0.02969 624 0.03949 536 0.07965 448 0.30903
710 0.03924 622 0.04217 534 0.08362 446 0.30972
 708 0.03881 620 0.04608 532 0.08685 444 0.31021
706 0.03602 618 0.03987 530 0.09107 442 0.31053
704 0.03124 616 0.03994 528 0.09284 440 0.30992
702 0.03027 614 0.03931 526 0.09825 438 0.30946
700 0.0362 612 0.04187 524 0.10329 436 0.30748
698 0.03611 610 0.04019 522 0.10605 434 0.30625
696 0.03853 608 0.04061 520 0.11301 432 0.3038
694 0.03544 606 0.04413 518 0.11477 430 0.30066
692 0.03327 604 0.04206 516 0.12009 428 0.29781
690 0.03193 602 0.04284 514 0.12459 426 0.29477
688 0.03726 600 0.03894 512 0.13114 424 0.29089
686 0.0311 598 0.04248 510 0.13561 422 0.28666
684 0.03269 596 0.04117 508 0.14219 420 0.2818
682 0.0348 594 0.04225 506 0.14701 418 0.27715
680 0.03793 592 0.04361 504 0.15265 416 0.27266
678 0.03384 590 0.04488 502 0.16048 414 0.2675
676 0.03466 588 0.04727 500 0.16659 412 0.26053
674 0.03189 586 0.04705 498 0.17332 410 0.25653
672 0.03533 584 0.04231 496 0.1806 408 0.25036
670 0.03838 582 0.04048 494 0.18878 406 0.24539
668 0.03529 580 0.04581 492 0.1944 404 0.23924
666 0.03888 578 0.04633 490 0.20182 402 0.23443
664 0.03679 576 0.04753 488 0.2084 400 0.22827

ANALISIS

• Trazar el diagrama absorbancia en función de la λ para cada uno de los colorantes.

Absorbancia en funcion de la λ del anaranjado de

0.3 metilo.

0.25

0.2
Absorbancia

0.15

0.1

0.05

0
400 450 500 550 600 650 700 750
λ(nm) - Longitud de onda.
Gráfica 1: Gráfica de Longitud de onda VS. Absorbancia en barrido de Anaranjado de Metilo
en HCL 0.1 N

Absorbancia en funcion de la λ del anaranjado de

metilo.
λ =510
0.3
A = 0.265

0.25

0.2
Absorbancia.

0.15

0.1

0.05

0
445 465 485 505 525 545 565
λ(nm) - Longitud de onda.

Gráfica 2: Gráfica de Longitud de onda VS. Absorbancia en barrido de Anaranjado de Metilo

en HCL 0.1 N

Absorbancia en funcion de la λ del verde de

bromocresol.
0.35

0.3

0.25
Absorbancia.

0.2

0.15

0.1

0.05

0
400 450 500 550 600 650 700 750
λ(nm) - Longitud de onda.

Gráfica 3: Gráfica de Longitud de onda VS. Absorbancia en barrido de Verde de

Bromocresol en HCL 0.1 N
 Absorbancia en funcion de la λ del verde de
bromocresol.
0.35 λ (nm) = 442
A = 0.31053
0.3

0.25
Absorbancia.

0.2

0.15

0.1

0.05

0
400 420 440 460 480 500 520
λ(nm) - Longitud de onda

Gráfica 4: Gráfica de Longitud de onda VS. Absorbancia en barrido de verde de

bromocresol en HCL 0.1 N

• La longitud de onda máxima, λ max, para el indicador de anaranjado de metilo es:

Para el anaranjado de metilo. Para el verde de bromocresol.

λ (nm) = 510 λ (nm) = 442

A = 0.265 A = 0.31053

• Tablas de absorbancia experimentales:

Tabla 4. Absorbancia experimental para Tabla 5. Absorbancia experimental para

una seria de anaranjado de metilo HCl una seria de verde de bromocresol HCl
0.1M 0.1M
ppm A (λ – 442nm) A (λ – 510nm) ppm A (λ – 442nm) A (λ – 510nm)
2 0.057 0.266 10 0.271 0.102
4 0.104 0.491 15 0.404 0.142
6 0.153 0.72 20 0.515 0.177
8 0.194 0.914 25 0.645 0.216
10 0.245 1.154 30 0.794 0.263
 Tabla 6. Absorbancias experimentales para una mezcla de verde de bromocresol y
anaranjado de metilo en HCl 0.1M
[MUESTRA PROBLEMA]

A (λ – 442nm) A (λ – 510nm)
0.746 1.124

• Transformación de ppm a mol/L del anaranjado de metilo:

2𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙

𝑀= = 6.11004𝑥10−6
Tabla 7. Transformación 𝐿 1000𝑚𝑔 327.33𝑔 𝐿
de ppm a mol/L de
anaranjado de metilo. 4𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙
𝑀= = 1.22201𝑥10−5
ppm mol/L 𝐿 1000𝑚𝑔 327.33𝑔 𝐿

2 6.11004𝑥10−6 6𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙

𝑀= = 1.83301𝑥10−5
4 1.22201𝑥10−5 𝐿 1000𝑚𝑔 327.33𝑔 𝐿

6 1.83301𝑥10−5 8𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙

𝑀= = 2.44402𝑥10−5
8 2.44402𝑥10−5 𝐿 1000𝑚𝑔 327.33𝑔 𝐿

10 3.05502𝑥10−5 10𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙

𝑀= = 3.05502𝑥10−5
𝐿 1000𝑚𝑔 327.33𝑔 𝐿

• Transformación de ppm a mol/L del verde de bromocresol:

Tabla 8. Transformación 10𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙

𝑀= = 1.43264𝑥10−5
de ppm a mol/L de verde 𝐿 1000𝑚𝑔 698.01𝑔 𝐿
de bromocresol.
15𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙
ppm mol/L 𝑀= = 2.14897𝑥10−5
𝐿 1000𝑚𝑔 698.01𝑔 𝐿
10 1.43264𝑥10−5
20𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙
15 2.14897𝑥10−5 𝑀= = 2.86529𝑥10−5
𝐿 1000𝑚𝑔 698.01𝑔 𝐿
20 2.86529𝑥10−5
25𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙
25 3.58161𝑥10−5 𝑀= = 3.58161𝑥10−5
𝐿 1000𝑚𝑔 698.01𝑔 𝐿
30 4.29793𝑥10−5
30𝑚𝑔 1𝑔 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙
𝑀= = 4.29793𝑥10−5
𝐿 1000𝑚𝑔 698.01𝑔 𝐿
 • Trazar la curva de calibración usando la concentración en [mol L–1].

Curva de calibracion del anarajado de metilo

1.4

1.2
y = 35990x + 0.0493
R² = 0.9992
1

0.8
A

0.6
y = 7626.8x + 0.0108
0.4
R² = 0.9992
0.2

0
0 0.000005 0.00001 0.000015 0.00002 0.000025 0.00003 0.000035
C (mol/L)

A (λ - 442) A (λ - 510) Lineal (A (λ - 442)) Lineal (A (λ - 510))

Grafica 5. Curva de calibración del anaranjado de metilo.

Curva de calibracion del verde de bromocresol

0.9
y = 17967x + 0.011
0.8 R² = 0.9977
0.7

0.6

0.5
A

0.4
y = 5528.2x + 0.0216
0.3 R² = 0.9974

0.2

0.1

0
0 0.000005 0.00001 0.000015 0.00002 0.000025 0.00003 0.000035 0.00004 0.000045 0.00005
C (mol/L)

A (λ - 442) A (λ - 510) Lineal (A (λ - 442)) Lineal (A (λ - 510))

Grafica 6. Curva de calibración del verde de bromocresol

• Calcular los coeficientes de absortividad molar en [cm–1 L mol–1]

Anaranjado de metilo Verde de bromocresol.

λ = 442 λ = 442
𝐿 𝐿
ε= 7626.8 𝑐𝑚∗𝑚𝑜𝑙 ε =17967
𝑐𝑚∗𝑚𝑜𝑙
λ = 510 λ = 510
𝐿 𝐿
ε =35990 ε = 5528.2 𝑐𝑚∗𝑚𝑜𝑙
𝑐𝑚∗𝑚𝑜𝑙
b = 1cm

• Calcular la concentración la mezcla problema en [mol L–1] y en ppm.

• Ley de las aditividades 𝐴𝑀 = 𝜀𝐴𝑀 ∗ 𝑏 ∗ 𝐶𝐴𝑀 + 𝜀𝑉𝐵 ∗ 𝑏 ∗ 𝐶𝑉𝐵

• Ecuación 1: (λ = 510)
𝐿 𝐿
1.124 = 35990 ∗ 1 𝑐𝑚 ∗ 𝐶1 + 5528.2 ∗ 1 𝑐𝑚 ∗ 𝐶2
𝑐𝑚 ∗ 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙 ∗ 𝑐𝑚

• Ecuación 2: (λ = 442)
𝐿 𝐿
0.746 = 7626.8 ∗ 1 𝑐𝑚 ∗ 𝐶1 + 17967 ∗ 1 𝑐𝑚 ∗ 𝐶2
𝑐𝑚 ∗ 𝑚𝑜𝑙 𝑚𝑜𝑙 ∗ 𝑐𝑚

- Despejamos C1 de la primera ecuación

𝐿
1.124 − 5528.2 ∗ 1 𝑐𝑚 ∗ 𝐶2
𝐶1 = 𝑚𝑜𝑙 ∗ 𝑐𝑚 → 𝑒𝑐. 3
𝐿
35990 ∗ 1𝑐𝑚
𝑐𝑚 ∗ 𝑚𝑜𝑙

- Sustituimos la ec.3 en la segunda ecuación.

𝐿
𝐿 (1.124 − 5528.2 ∗ 𝐶2 ) 𝐿
0.746 = 7626.8 ∗( 𝑚𝑜𝑙 ) + 17967 ∗𝐶
𝑚𝑜𝑙 𝐿
35990 𝑐𝑚 𝑚𝑜𝑙 2

8572.5232 − 42162475.76 𝐶2
0.746 = ( ) + 17967 ∗ 𝐶2
35990
0.746 = 0.2381918 − 1171.5053𝐶2 + 17967 ∗ 𝐶2
0.746 − 0.2381918 = −1171.5053𝐶2 + 17967 ∗ 𝐶2
0.5078 = 16795.4947𝐶2
0.5078
= 𝐶2
16795.4947
𝐦𝐨𝐥
- Concentración del verde de bromocresol ( 𝐋
)

𝒎𝒐𝒍
𝑪𝟐 = 𝟑. 𝟎𝟐𝟑𝟒𝟓𝟗𝟖𝟒𝟗𝒙𝟏𝟎−𝟓
𝑳
 - Concentración del verde de bromocresol (ppm):
3.023459849𝑥10−5 𝑚𝑜𝑙 698.01𝑔 1000𝑚𝑔
𝐶2 = ( )( )( ) = 𝟐𝟏. 𝟏𝟎𝟑𝟖𝟒𝟐𝟔𝟗 𝒑𝒑𝒎
𝐿 𝑚𝑜𝑙 1𝑔

- Sustituimos C2 en la segunda ecuación:

0.746 = 7626.8 ∗ 𝐶1 + 17967 ∗ (𝟑. 𝟎𝟐𝟑𝟒𝟓𝟗𝟖𝟒𝟗𝒙𝟏𝟎−𝟓 )

0.746 = 7626.8𝐶1 + 0.543225

0.746 − 0.543225
= 𝐶1
7626.8
𝐦𝐨𝐥
- Concentración del anaranjado de metilo ( 𝐋
)

𝑚𝑜𝑙
𝐶1 = 2.658716631𝑥10−5
𝐿
- Concentración del anaranjado de metilo (ppm):
2.658716631𝑥10−5 𝑚𝑜𝑙 327.33𝑔 1000𝑚𝑔
𝐶2 = ( )( )( ) = 𝟖. 𝟕𝟎𝟐𝟕𝟕𝟕𝟏 𝒑𝒑𝒎
𝐿 𝑚𝑜𝑙 1𝑔

CONCLUSIONES

• Se logró obtener mediante un barrido, el espectro de absorción del verde de

bromocresol y anaranjado de metilo. (longitudes de onda)
• Obtuvimos curvas de calibración del verde de bromocresol y del anaranjado de metilo.
• Se obtuvo como absorbancia máxima 510 nm en el anaranjado de metilo y 442 nm en
el verde de bromocresol.
• Determinamos las concentraciones del verde de bromocresol y el anaranjado de
metilo de acuerdo con los coeficientes de absortividad de la muestra problema.
𝑚𝑜𝑙
• Obtuvimos las siguientes concentraciones: 2.65871 × 10−5 𝐿
(8.7027 ppm) de
𝑚𝑜𝑙
anaranjado de metilo y 3.02345 × 10−5 𝐿 (21.1039 ppm) de verde de bromocresol.

BIBLIOGRAFIA
-Skoog, D. A., West, D. M., Holler, F. J., & Crouch, S. R. (2015). Fundamentos de química
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