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TEMA 1: INTRODUCCIÓN A LA BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
1. EL ÁMBITO DE LA BIOTECNOLOGÍA MICROBIANA
La biotecnología es cualquier aplicación tecnológica que utiliza sistemas biológicos, organismos
vivos o derivados de los mismos para generar productos y servicios para usos específicos.
La biotecnología microbiana es cualquier aplicación tecnológica que utiliza sistemas
microbianos, microorganismos vivos o derivados de los mismos para generar productos y
servicios para usos específicos.
1.1. Tipos de procesos de interés en Biotecnología microbiana
Algunos de los procesos en los que participa la biotecnología microbiana son:
1- Procesos de producción: metabolitos primarios (aminoácidos) y secundarios (ej.
Antibióticos), polímeros (bioplásticos), proteínas (lipasas), biomasa microbiana (el
producto es el mismo que el microorganismo pero a gran escala: levadura para
alimentación), y productos complejos (el producto es una mezcla de sustancias:
fermentaciones alimentarias)
2- Procesos de biotransformación o biocatálisis: El sustrato proporcionado para la
obtención del producto es distinto del de crecimiento. Es decir, la diferencias con los
procesos de producción es que se añade, otros sustratos a parte de los nutrientes
necesarios.
3- Procesos de degradación: el objetivo es eliminar sustancias. (ej: tratamiento de aguas
residuales).
4- Otros procesos: como solubilización de metales (biominería), protección frente a plagas
(bioplaguicidas) o a enfermedades ( probióticos), mejora del crecimiento vegetal
(inoculantes fijadores de nitrógeno),detección de contaminantes (biosensores)
1.2. Ámbitos de aplicación de la Biotecnología microbiana
La biotecnología microbiana tiene aplicaciones en biotecnología industrial, sanitaria, ambiental,
alimentaria y agrícola.
• Biotecnología industrial ([Link]., producción de biocombustibles, biocatálisis, biominería)
• Biotecnología sanitaria (p. ej., producción de vacunas y fármacos, probióticos)
• Biotecnología ambiental (p. ej., detección y degradación de contaminantes orgánicos o
metales)
• Biotecnología alimentaria (p. ej., producción de alimentos fermentados)
• Biotecnología agrícola (p. ej., bioplaguicidas, mejora del crecimiento vegetal)
2. MICROORGANISMOS DE INTERÉS BIOTECNOLÓGICO
2.1. Ámbitos de aplicación de la Biotecnología microbiana
El empleo de los microorganismos en biotecnología tiene una serie de ventajas:
• Enorme variedad de actividades y productos de interés.
• Facilidad de manipulación genética.
• Facilidad de cultivo escalable a grandes volúmenes.
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• Crecimiento rápido.
• Posibilidad de usar sustratos baratos para su crecimiento.
• Alta relación superficie/volumen debido a su pequeño tamaño.
2.2. Tipos de microorganismos de interés en Biotecnología
Los microorganismos de interés en biotecnología son aquellos que tienen un potencial
biotecnológico natural o son aptos para la producción heteróloga, pero ambos no son
excluyentes.
1. Microorganismos con potencial biotecnológico natural:
Presentan naturalmente las capacidades metabólicas necesarias para el proceso.
Son Imprescindibles en procesos que requieren transformaciones complejas (p. ej.,
producción de alimentos fermentados.
2. Organismos aptos para la producción heteróloga:
No tienen que presentar naturalmente las capacidades metabólicas necesarias
Sí deben ser buenos hospedadores para la expresión de genes heterólogos, ya que se
introducirán genes no propios del organismo y se deben expresar.
Son Especialmente adecuados para procesos más sencillos (p. ej., producción de
proteínas recombinantes, biocatálisis)
2.3. Algunas bacterias de interés biotecnológico
BACTERIAS LÁCTICAS
Son bacterias Gram positivas, no esporulantes y ácido-tolerantes. Son anaerobias aerotolerantes
y presentan un metabolismo fermentativo (fermentación láctica), fermentan hasta cuando hay
oxígeno.
Se emplean en la producción de lácteos, vegetales y carnes fermentados, ácido láctico, nisina
(antibiótico) y dextrano (polímero).
ACTINOMICETOS
Son bacterias Gram positivas, esporulantes y muchas son filamentosas, con aspecto de hongos.
Predominan en suelos, aunque también están presentes en agua dulce. (el continuo estrés del
suelo marca sus características). Poseen un crecimiento lento, pero muy importante en el
reciclaje del C en suelos gracias a la producción de enzimas lignolíticas y otras hidrolasas. Y
producen una enorme variedad de metabolitos secundarios bioactivos (en fase estacionaria) .
Ejemplo: género Streptomyces, es el principal en producción de antibióticos.
Se emplean en la producción de antibióticos y enzimas hidrolíticas. Fijan nitrógeno mediante
simbiosis con plantas no leguminosas: Frankia.
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CORINEBACTERIAS
Son bacilos Gram positivos, no esporulantes y relacionados con los actinomicetos. Predominan
en suelos, aunque también están presentes en agua dulce. Tienen un papel muy importante en
el reciclaje del C en suelos, dado que son capaces de hidrolizar muchos polímeros inorgánicos
que usan como fuente de materia y energía. Ejemplo: géneros Corynebacterium (produce
metabolitos como aminoácidos y nucleótidos) y Brevibacterium, son los más importantes.
Se emplean básicamente para: producción de aminoácidos (fundamentalmente ácido glutámico
y lisina) y nucleótidos; y la maduración de algunos quesos (como es el caso de Brevibacterium).
OTRAS BACTERIAS
Producción de metabolitos primarios:
- Clostridium: Gram-positivas, anaerobias estrictas y fermentadoras. Se emplean en la
producción de alcoholes y cetonas (acetona).
- Zymomonas: Gram-negativas (etanol, sorbitol).
- Acetobacter y Gluconobacter (vinagre, ácido acético)
Producción de polímeros:
- Azotobacter: (alginato).
- Sphingomonas: (gelano).
- Ralstonia: polihidroxialcanoatos (bioplástico).
- Xanthomonas: (goma xantana).
Producción heteróloga (producen una sustancia introducida por ingeniería genética):
- Escherichia coli: es la bateria mas estudiada y mas fácil de modificar. Gram -
- Bacillus: Gram +
- Streptomyces.
- Lactococcus.
2.4. Algunas levaduras de interés biotecnológico
SACCHAROMYCES CEREVISIAE
Es la levadura industrial más utilizada. Se reproduce por gemación, y es capaz de llevar a cabo
una fermentación alcohólica muy activa. Su ciclo sexual es muy bien conocido, al ser un
microorganismo modelo en genética.
Sus usos se extienden a: la biotecnología de alimentos, para producción de pan, vino y cerveza;
la producción de etanol y el uso como productor heterólogo, quizás el uso más destacado, para
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la síntesis de proteínas de eucariotas superiores que no pueden ser sintetizadas
satisfactoriamente por bacterias como la insulina.
PICHIA, CANDIDA Y KLUYVEROMYCES
Tienen un metabolismo fermentativo menos activo que Saccharomyces, pero su metabolismo
respiratorio es muy eficaz ( siempre que hay oxigeno respiran) y son capaces de emplear fuentes
de carbono muy baratas (como el metanol) o incluso residuos.
Se emplean en: producción de biomasa (los tres géneros), especialmente piensos; producción
de enzimas hidrolíticas (carbohidrasas y lipasas), siendo el caso de Candida y Kluyveromyces y
como productores heterólogos, lo más destacado, empleándose Pichia (produce mucha cantidad
de proteína) y Kluyveromyces (donde se han desarrollado sistemas de expresión basados en la
utilización de lactosa)
2.5. Algunos hongos filamentosos de interés biotecnológico
Constituyen un grupo muy diverso con múltiples aplicaciones, entre las que destacan:
- Producción de biomasa a partir de residuos industriales
- Alimentos y bebidas fermentadas (como el sake o el shoyu), que se basan en la
utilización de Aspergillus.
- Producción de enzimas hidrolíticas
- Producción de polisacáridos, como el pululano (Aureobasidium pullulans) y el
escleroglucano (Sclerotum rolfsii).
- Producción de ácidos prganicos , sobre todo cítrico, itacónico (Aspergillus) y fumárico.
- En agrobiotecnología, para la producción de giberelinas y micoinsecticidas.
- Síntesis de productos farmacéuticos, fundamentalmente antibióticos (en torno a un 20%
provienen de Penicillium, Acremonium, Aspergillus y Cephalosporium), ciclosporina (un
inmunodepresor fundamental para los transplantes de órganos procedente de
Tolypocladium), alcaloides (metabolitos secundarios con intensos efectos psicoactivos,
que pueden ser obtenidos a partir de Claviceps) y bioconversión en producción de
hormonas esteroides (son moléculas complejas con varios grupo hidroxilo, se usan
hidroxilasas capaces de hidroxilar en posiciones muy concretas).
3. MEJORA GENÉTICA EN MICROORGANISMOS DE INTERÉS BIOTECNOLÓGICO
3.1. Etapas de desarrollo de un proceso biotecnológico basado en microorganismos
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Para que un nuevo microorganismo se pueda emplear industrialmente, en primer lugar debe de
identificar el organismo de interés por su capacidad o el gen de interés luego aislarse del
ambiente, tras lo cual debe purificarse la especie y seleccionarse la estirpe de mayor interés.
Desde este punto, para que pase a formar parte de algún proceso biotecnológico, debe de sufrir
un proceso de mejora genética. Históricamente, este proceso se ha basado en pruebas de acierto
y error, típicamente mediante mutagénesis inducida. Si bien este sistema es muy eficaz, hoy en
día hay sistemas más precisos que permiten introducir genes en distintos tipos de organismos
sin tener que perderse en ensayos de acierto y error.
3.2. Concepto de Ingeniería metabólica
La ingeniería metabólica consiste en la mejora dirigida de las propiedades celulares por
modificación de reacciones bioquímicas concretas o la introducción de otras nuevas utilizando
la tecnología del ADN recombinante.
Entre las estrategias de mejora de organismos tenemos:
- Mutación al azar y selección: se trata de mutaciones indefinidas aleatorias, obteniendo
toda la diversidad de mutaciones posible. Tiene el inconveniente de ser difícil de
seleccionar posteriormente y pueden acumularse mutaciones no deseadas.
- Ingeniería metabólica dirigida: la mutación actúa localmente en una ruta, de la que se
tiene conocimiento previo.
- Ingeniería metabólica de sistemas: supone entender globalmente los procesos
fisiológicos para mejorarlos, por lo que requiere mucho conocimiento.
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3.3. Objetivos de mejora biológica en microorganismos industriales
Los objetivos generales de la ingeniería metabólica son:
1. Relacionados con el producto
o Incremento de la actividad o concentración del producto: mediante la
eliminación de rutas competidoras o la modificación de la regulación de la
ruta.
o Adición de actividades adicionales (generar un producto nuevo a partir del
natural).
o Creación de nuevas rutas metabólicas
2. Relacionados con el sustrato
o Abaratamiento del sustrato: empleo de sustratos abundantes y de bajo coste
(reutilización del suero de leche de queserías para convertir la lactosa en
glucosa y galactosa).
o Mejora de la eficiencia de la utilización del sustrato
3. Relacionados con el catalizador (microorganismo)
o Mejora de la estabilidad genética: se basa en limitar la recombinación
(eliminación de recA en bacterias), evitar el uso de antibióticos, el empleo de
plásmidos estables (por ejemplo, con un sistema veneno -antídoto donde la
célula que carece de plásmido muere ) y mediante la integración de nuevos
genes en el cromosoma.
o Mejora de las características fisiológicas del hospedador, como un crecimiento
más rápido o mayor robustez ante cambios en el medio.
