CAPSULA La cpsula bacteriana es la capa rgida con borde definido formada por una serie de polmeros orgnicos que
en las bacterias se deposita en el exterior de su pared celular. Generalmente contiene glicoprotenas y un gran nmero de polisacridos diferentes, incluyendo polialcoholes y aminoazcares.1 La cpsula es una capa rgida organizada en matriz impermeable que excluye colorantes como la tinta china. En cambio, la capa de material extracelular que se deforma con facilidad, es incapaz de excluir partculas y no tiene un lmite definido, se denomina capa mucosa o glucocalix. Ambas se pueden detectar con mtodos como la tincin negativa o la tincin de Burri. La cpsula les sirve a las bacterias de cubierta protectora resistiendo la fagocitosis. Tambin se utiliza como depsito de alimentos y como lugar de eliminacin de sustancias de desecho. Protege de la desecacin, ya que contiene una gran cantidad de agua disponible en condiciones adversas. Adems, evita el ataque de los bacterifagos y permite la adhesin de la bacteria a las clulas animales del hospedador.
PROCEDIMIENTO TCNICO Mtodo de la tinta china para cpsula En el centro de un portaobjetos se coloca una gota de agua, otra de tinta china y un poco del cultivo de una cepa capsulada. Se mezcla suavemente sin extender. Se coloca un cubreobjetos sobre la suspensin y se presiona suavemente evitando que queden burbujas. Observar inmediatamente al microscopio. Desechar la preparacin en un recipiente con antisptico. La cpsula se observa como una gran estructura alrededor de la clula delimitada por los pequeos fragmentos de carbn de la tinta china. LAS CPSULAS: Son estructuras grueso viscosas gelatinosas que rodean las clulas de algunas especies. Sarcina: Son anaerobios obligados y son extremadamente cido tolerantes que pueden fermentar azcares y crecer a pH inferior a 2.
Este gnero comprende 2 especies de bacterias que se dividen en tres planos perpendiculares para producir paquetes de 8 en una clula. TINCIN NEGATIVA DE CPSULAS Algunas bacterias presentan una capa externa a la pared denominada cpsula. Est compuesta de azcares y protenas. No es una estructura vital para la bacteria, de modo que es posible que bajo determinadas condiciones ambientales o del propio desarrollo genere cpsula y bajo otras no lo haga. Se ha comprobado que la presencia de cpsula dificulta de algn modo la fagocitosis de las bacterias, es decir las cpsulas constituyen un factor de virulencia de los microorganismos. La tincin de cpsula se denomina tincin negativa porque tie el fondo de la preparacin y no el microorganismo. Desde el punto de vista formal no es una tincin propiamente dicha, porque no fija los microorganismos. Se parece ms a una preparacin en fresco. Su realizacin es sencillsima, consiste en colocar la muestra hmeda sobre el porta objetos y mezclarla con tinta china. La tinta cubre toda la preparacin a excepcin de las cpsulas. En el microscopio se observa el fondo negro y los microorganismos con cpsula sin color. La deteccin de cpsulas en las bacterias tambin puede orientarnos en el diagnstico de laboratorio, y es especialmente importante en el diagnstico de meningitis producida por Cryptococcus neoformans.. Se trata de una levadura que provoca graves cuadros de meningitis en personas inmunocomprometidas, y su deteccin en LCR lo ms precozmente posible es vital para la supervivencia del paciente Existen otras tcnicas de tincin que ponen de manifiesto ms estructuras bacterianas. Es el caso por ejemplo de las tinciones de flagelos. No obstante no tienen demasiado inters desde el punto de vista del diagnstico, y suelen realizarse ms a menudo en investigacin bsica. GRANULOS METACROMTICOS Estas inclusiones se tien de rojo con algunos colorantes azules, como el azul de metileno y se conocen tambin como grnulos de volutina. Se trata de una forma de reserva de fosfato inorgnico (polifosfato) que puede utilizarse en la sntesis de ATP. La volutina se forma generalmente en clulas que crecen en ambientes ricos en fosfatos. Los corpsculos metacromticos se encuentran en algas, hongos y protozoos, as como en bacterias. Estos grnulos son bastante grandes y caractersticos en Corynebacierium diphtheriae, el agente etiolgico de la difteria, por lo que tienen valor diagnstico.
Grnulos de polisacridos Estas inclusiones estn formadas tpicamente por glucgeno y almidn y puede demostrarse su presencia al tratar las clulas con yodo. En presencia de yodo los grnulos de glucgeno aparecen marrn rojizo y azules los de almidn. Inclusiones lipdicas Las inclusiones lipdicas aparecen en varias especies de Mycobacierium, Bacillus, Azotobacter, Spirillum y otros gneros. Un lpido hallado corrientemente como material de reserva y exclusivo de las bacterias es el polmero de cido poli--hidroxibutrico. Las inclusiones lipdicas se ponen de manifiesto utilizando colorantes liposolubles, como los colorantes de Sudn. Grnulos de azufre Ciertas bacterias, conocidas como bacterias del azufre, que pertenecen al gnero Thiobacillus, obtienen energa al oxidar azufre y compuestos de azufre. Estas bacterias pueden depositar grnulos de azufre en el interior de la clula, donde le sirven como reserva de energa. Carboxisomas Son inclusiones polidricas o exagonales que contienen la enzima ribulosa-l, 5difosfato carboxilasa. Las bacterias que utilizan dixido de carbono como nica fuente de carbono necesitan esta enzima para la fotosntesis. Entre las bacterias que contienen carboxisomas se encuentran las bacterias nitrificantes, las cianobacterias y las bacterias del azufre.
