PRÁCTICA 4.
ÁCIDOS NUCLEICOS
Propósito: Esta práctica la realizamos con el fin de reconocer ácidos nucleicos presentes
en al ADN, utilizando un método cualitativo de identificación.
Competencias
Genérica 8. Participa y colabora de manera efectiva en equipos diversos.
Disciplinar básica 5. Contrasta los resultados obtenidos en una investigación o experimento
con hipótesis previas y comunica sus conclusiones.
Fundamento teórico
Los ácidos nucleico son biomoléculas gigantes que se encuentran dentro de la célula de
los seres orgánicos y son los encargados de transmitir la información genética; así como,
la síntesis de proteinas. Están formadas por por unidades monoméricas llamados
nucleótidos, unidos mediante enlaces fosfodiéster.
El ADN es el encargado de transmitir la información genética. Se encuentra formado por
dos cadenas de nucleótidos en una estructura de alfa hélice; se ubica dentro del núcleo de
las células eucariontas, y para su extracción se utilizan solventes orgánicos como el alcohol
etílico.
La extracción del ADN se establece con el fin de reconocer por métodos cualitativos los
ácidos nucleicos de alguna sustancia. Este experimento está basado en la extracción de
ADN en frutas.
Utilizamos una solución amortiguadora que nos ayudará a evitar los cambios de pH, o la alt
concentración de iones hidrógeno en la disolución; enseguida haremos el debido
procedimiento para el plátano. Esta técnica puede inspirar a los alumnos a orientarse hacia
áreas del conocimiento como Ingeniería bioquímica, Ingeniería ambiental en el desarrollo
de técnicas que propician la innovación en biotecnología y genética.
Investigación previa
1. ¿Las frutas presentan ADN? Si es así, ¿en dónde se encuentra este ácido nucleico
dentro de la fruta?
R= Si, todos los seres vivos tienen ADN. En las frutas los ácidos nucleicos se
encuentran en las membranas celulares.
2. ¿Qué es una solución amortiguadora?
R= Conocida como buffer, sirve para mantener constante el pH en mezclas a las que
se le añadió ácidos o bases fuertes y con ello amortigua los cambios producidos por
estas adiciones.
El funcionamiento de la Solución Amortiguadora también dependerá de la temperatura
a la que se encuentre al momento de ser añadida a una muestra. Adicionalmente,
mientras más concentrada esté esta solución, mayor será su capacidad para amortiguar
o regular el PH de una mezcla, la concentración total de la solución debe ser mayor la
concentración final del ácido o base fuerte que se añada.
Una Solución Amortiguadora está compuesta únicamente por una base y un ácido, que
se mezclan hasta lograr el PH requerido.
3. ¿Qué tipo de biomoléculas forman a las membranas celulares?
R= Principalmente lípidos, proteínas y carbohidratos.
4. ¿Cómo funciona el detergente en las grasas?
R= Este dispone su parte hidrófoba hacia la grasa y su parte hidrófila hacia el agua, de
forma que las moléculas de jabón encapsulan la grasa y la parte cápsula es afín al agua,
así que esta puede arrastrarla.
Procedimiento
Preparar la solución amortiguadora
1. Mide en una probeta de 6 ml detergente
2. Verter el detergente en un vaso de precipitados de 100 ml, y agregar 44 ml de agua
destilada.
3. Pesar 5 g de sal y adicionarlos en el vaso del detergente.
4. Mezclar todo, procurando no hacer demasiadas burbujas.
Para preparar el plátano
1. Coloca en la bolsa ziplock, el plátano sin las semillas, y macéralo hasta hacer un puré.
2. Coloca el plátano macerado en un vaso de precipitados de 250 ml.
3. Agrega 50 ml de la solución amortiguadora y mezcla levemente, sin hacer mucha
espuma.
4. Deja reposar por 10 minutos.
5. Filtra la mezcla en un matraz Erlenmeyer.
6. Toma una alícuota de 3 ml del filtrado y añádelos a los tubos de ensayo.
7. Agrega 6 ml de alcohol etílico frío al filtrado, colócalo en los tubos de ensayo,
LENTAMENTE.
8. Al cabo de pocos minutos se podrán observar tres capas bien diferenciadas. La de arriba
es el alcohol, la de abajo son los restos celulares, y la de en medio contiene el ADN,
Disposición de reactivos
Coloca los residuos en el contenedor que le corresponda
Diagrama de bloques
Colocamos el plátano Agregamos 50 ml de la Filtramos la mezcla en un
macerado en un vaso de solución amortiguadora y matraz Erlenmeyer.
precipitados de 250 ml. mezclamos sin hacer
mucha espuma.
HEBRAS DE ADN DE Agregamos 6 ml de Tomamos una alícuota de
PLÁTANO alcohol etílico frío al 3 ml del filtrado y los
filtrado añadimos a los tubos de
ensayo.
Observaciones
1. La disolución preparada es una solución buffer, se utilizó el agua destilada, la sal y
el detergente para evitar cambios en el pH.
2. La hebra de ADN tuvo parecido a una pelusa blanca.
3. Fue difícil utilizar la balanza.
Resultados
1. Se obtuvo éxito con la hebra de ADN.
2. Se observaron 3 capas. La de arriba fue la del alcohol, la de abajo fueros restos
celulares y la de en medio fue el ADN.
Cuestionario
1. La solución amortiguadora ¿qué función cumple?
R= Para mantener constante el pH en mezclas donde se añadieron ácidos o bases
fuertes.
2. Al aplicarle el alcohol ¿qué aislamos?
R= El jabón ayuda a disolver membranas celulares y se añadió la sal para romper las
cadenas de proteínas que unen los ácidos nucleicos liberando las cadenas de ADN. Se
utiliza el alcohol porque el ADN es insoluble.
3. ¿Para qué dejamos las sustancias en reposo?
R= Para que se logre presentar la reacción y ver el ADN.
4. ¿Cuáles son los componentes del ADN?
R= Los nucleótidos. Adenina (A), Guanina(G), Citosina (C), Timina (T)
5. El azúl de metileno y la luz ultravioleta resaltan el precipitado, permitiéndonos
identificar.
R= Nos permite resaltar la hebra de la molécula de ADN de las frutas.
