CICLO DE KREBS

Se denomina ciclo de Krebs o ciclo del acido tricarboxilico porque varios de sus
intermediarios contienen tres grupos carboxilo (citrato, cis-aconitato, isocitrato,
oxaloacetato).
El catabolismo de carbohidratos, aminoácidos, acidos grasos y cuerpos cetónicos,
conlleva a la síntesis de Acetil-CoA, entonces el ciclo de Krebs es un ciclo
oxidativo de la Acetil-CoA y es un sitio de mayor producción de energía a nivel
celular.

La Acetil-CoA (una molecula

de 2 carbonos) proveniente
de cualquiera de los
catabolismos se condensa
con el oxaloacetato, libera la
CoA y se convierte en
citrato. Este citrato
presentará reducciones las
cuales liberan electrones
como fuente de energía,
sumado a eso se dan dos
descarboxilaciones (una
molecula de 6 carbonos se
vuelve a convertir en una
molecula de 4 carbonos). No
se requiere de mucho
oxalacetato para oxidar
grandes cantidades de
Acetil-CoA.
1. La Acetil-CoA (2C) se
condensa con el
oxaloacetato (4C) e
incluye una molecula
de agua para producir
citrato (6C) gracias a
la enzima citrato
sintasa.
 2. Posteriormente hay una reacción de deshidratación para producir cis-
aconitato, mediada por la enzima aconitasa
3. Producción de isocitrato a través de una rehidratación del cis-aconitato por
la misma enzima aconitasa
4. El isocitrato sufrirá una primera descarboxilación y una reducción que libera
dos electrones que son capturados por NAD produciendo NADH,
posteriormente presenta una descarboxilación, pasando de una molécula
de 6 carbonos a una de 5 carbonos llamada A-KG
5. El a-KG presenta otra descarboxilación para convertirse en Succinil-CoA
(4C)
6. El succinil-CoA se convierte en succinato liberando la CoA-SH la cual libera
energía que se usa para una fosforilación directa de ADP + Pi para
producir ATP
7. Este succinato (4C) presenta una oxidación para producir fumarato,
liberando dos electrones los cuales son recibidos por el FAD para producir
FADH2, estos electrones pasan directamente a la cadena respiratoria,
porque la enzima que cataliza esta reducción también es el complejo 2 de
la cadena respiratoria.
8. El fumarato presentará una hidratación convirtiéndose en malato
9. El malato presenta una oxidación para convertirse en oxalacetato y libera 2
electrones reduciendo el NAD que serán incorporados en la cadena de
transporte de electrones.
Los 3 NADH que se producen en 3 reacciones del ciclo, pasan a los complejos de
la cadena respiratoria y finalmente estos electrones se unen a moléculas de
oxigeno y se pegan protones sintetizando moléculas de agua.
La producción de equivalentes reducidos en su forma de NADH o FADH2, la
enzima succinato deshidrogenasa que es el complejo 2 de la cadena respiratoria
que produce FADH2 pasa directamente los electrones a la coenzima Q, sin pasar
por el complejo 1 de la cadena respiratoria. La coenzima Q se los pasa al
complejo 3, el complejo 3 a la citocromo c y la citocromo c al complejo 4 para
donarle estos electrones al oxígeno, donde se unen protones para producir
moléculas de agua, este es un proceso aerobio porque requiere del oxígeno que
proviene de la inspiración.
El Acetil-CoA se oxida para producir dos moléculas de CO2 y agua.
En una explicación más detallada:
 La Acetil-CoA (2C) un carbono metilo (.) y otro oxidado (*), esto se hace
para mostrar que en la descarboxilación los átomos de carbono persisten
en la molécula de oxalosuscciato los dos carbonos del Acetil-CoA, por lo
cual, los carbonos liberados provienen del oxalacetato. La segunda
descarboxilación el carbono liberado también proviene del oxalacetato. En
los siguientes ciclos si se perderán carbonos provenientes del Acetil-CoA.
 La oxidación de la Acetil-CoA mediará la oxidación de los agentes
reducidos (NADH y FADH2) que pasarán directamente a la cadena
respiratoria.
 Cada molécula de NADH produce 2.5 moles de ATP y cada molécula de
FADH2 produce 1.5 moles de ATP.
1. El oxalacetato (4C) se condensa con la Acetil-CoA (2C) y con la adición
de una molécula de agua, liberan la CoA en una hidrolisis de CoA para
producir la molécula de CITRATO, este proceso es catalizado por la citrato
sintasa.
2. La molécula de citrato es una molécula simétrica y su interacción con la
aconitasa no respeta esta simetría, razón por la cual los carbonos que se
pierden no provienen de Acetil-CoA. Este citrato se deshidrata por acción
de la enzima aconitasa para producir CIS-ACONITATO. La aconitasa
puede ser inhibida por el fluoroacetato que se convierte en fluoroacetil-CoA,
que se condensa con el oxalacetato para producir fluorocitrato que inhibe a
la aconitasa.
3. Posteriormente hay una hidratación del cis-aconitato mediado por la
enzima aconitasa, de tal manera que el grupo hidroxilo cambia de posición
dando como resultado un compuesto isómero del citrato, llamado
ISOCITRATO. Una abundante producción de isocitrato se convierte en un
inhibidor de la aconitasa, acumulando el citrato que se desprende de la
citrato sintasa sin ser trasladado a la aconitasa quedando libre en la
mitocondria, el cual puede transportarse al citosol y allí es usado para la
síntesis de ácidos grasos.
4. Entre la citrato sintasa y aconitasa hay una transferencia de
canalización del producto, entonces se produce citrato y no queda libre en
la matriz mitocondrial, si no que directamente se pasa a la aconitasa.
5. El isocitrato en una reacción canalizada por la isocitrato deshidrogenasa,
sufrirá una oxidación que libera dos electrones para reducir un NAD
produciendo NADH + H, en esta reacción se produce el
OXALOSUCCINATO.
6. Posteriormente la isocitrato deshidrogenasa cataliza una
descarboxilación del succinato para convertirlo en a-KG, esta
descarboxilación requiere magnesio o manganeso. Hay 3 isoenzimas de la
isocitrato deshidrogenasa, una que es exclusivamente mitocondrial y usa
NAD, otras dos que pueden usar NADP para recibir electrones y convertirse
en NADPH y estas dos isoenzimas se pueden ser mitocondriales y
citosólicas.
7. El a-KG (5C) presenta una oxidación liberando dos electrones que son
capturados por el NAD para convertirlo en NADH y una descarboxilación
donde libera la CoA, en una reacción catalizada por el complejo a-KG
deshidrogenasa para convertirse en SUCCINIL-CoA (4C). El complejo a-
KG deshidrogenasa estructural y catalíticamente es muy parecido al
complejo piruvato deshidrogenasa que nos convierte piruvato en Acetil-
CoA. Así como los cofactores de la piruvato deshidrogenasa (tiamina [Vit
B1], lipoato, NAD [Vit B3], FAD [Vit B2], CoA que proviene del ácido
 pantoténico [Vit B5]) son factores necesarios para la a-KG deshidrogenasa.
Esta reacción puede ser inhibida por el arsenito.
8. El Succinil-CoA, en una reacción catalizada por la succinato tioquinasa
se convierte en SUCCINATO, esta reacción que libera CoA-SH, usa la
energía para una fosforilación directa de ADP + Pi para producir ATP.
Hay dos isoenzimas en los tejidos que hacen gluconeogénesis (Hígado y
riñón) en los cuales el sustrato puede ser ADP o GDP, el producto puede
ser ATP y GTP. Las enzimas que producen GTP están relacionadas con la
gluconeogénesis y ese GTP producido se usará en la gluconeogénesis
posteriormente para convertir el oxalacetato en fosfoenol piruvato.
9. El succinato (4C) se oxida a FUMARATO, liberando dos electrones los
cuales son recibidos por el FAD para producir FADH2, estos electrones
pasan directamente a la coenzima Q de la cadena respiratoria, esta
reacción es catalizada por la succinato deshidrogenasa que se encuentra
en la membrana interna de la mitocondria que contiene complejo Fe-S y es
el mismo complejo 2 de la cadena respiratoria. Las reacciones para
convertir succinato en fumarato, malato y oxalacetato, son similares a las
de la betaoxidación de las grasas, es decir, hay una deshidrogenación,
hidratación y oxidación. Esta reacción puede estar inhibida por el malonato
que es un inhibidor del ciclo de Krebs y de la cadena respiratoria.
10. El fumarato en una reacción catalizada por la fumarasa presentará una
hidratación convirtiéndose en MALATO.
11. El malato se oxida para convertirse en OXALACETATO y libera 2
electrones reduciendo el NAD+ a NADH que serán incorporados en la
cadena de transporte de electrones.
Otros aspectos del ciclo de Krebs donde nos explica porqué es un ciclo anfibólico,
relación con síntesis de acidos grasos y la regulación del mismo.
El ciclo de Krebs es anfibólico porque a veces sus reacciones participan en
catabolismo y anabolismo. El catabolismo es producto de la degradación de AA,
carbohidratos, cuerpos cetónicos y ácidos grasos para producir Acetil-CoA y
realizar su oxidación en el ciclo de Krebs para producir equivalentes reducidos o
directamente ATP o GTP. Ciertos AA producen piruvato que se convierte en
oxalacetato que será degradado en el ciclo de Krebs. Tirosina y fenilalanina
producen fumarato que se degrada en el ciclo. Isoleucina, metionina y valina
producen Succinil-CoA que puede ser catabolizado en el ciclo. Histidina, prolina,
glutamina y arginina producen glutamato que por transaminación producen a-KG
que puede ser oxidado en el ciclo. Propionato a partir de ácidos grasos de cadena
impar pueden producir propionil-CoA que se convierte en metilmalonil-CoA y
finalmente en Succinil-CoA para continuar su oxidación en el ciclo. Estos
intermediarios (a-KG, Succinil-CoA, Fumarato) no se convierten en oxalacetato
para ser directamente oxidados en el ciclo de Krebs sino que para poder ser
oxidados el oxalacetato debe fosforilarse a partir de GTP y convertirse en
fosfoenol piruvato y este convertirse en piruvato (por la piruvato quinasa) y el
piruvato por la piruvato deshidrogenasa convertirse en Acetil-CoA y condensarse
con el oxalacetato para poder ingresar al ciclo de Krebs y producir citrato.
El triptófano se convierte en alanina que por acción de transaminación se
convierte en su cetoácido que es el piruvato y este por acción de la piruvato
carboxilasa se convierte en oxalacetato (sintetizado a partir de a-KG, succinil-CoA,
fumarato) y posteriormente se fosforila a fosfoenol piruvato que sigue la via de la
gluconeogénesis para convertirse en glucosa. Estas reacciones se comportan de
forma anabólica porque llevan a la síntesis de glucosa.
El ciclo de Krebs seria anabólico porque a partir de ciertos intermediarios como a-
KG que por reacciones de transaminación se convierte a glutamato y a partir de
glutamato se sintetizan otros aminoácidos. A partir de succinil-CoA se sintetizan
las porfirinas. A partir de oxalacetato por transaminación (catalizado por
transaminasas) se produce aspartato.
Para evitar los agotamientos de los intermediarios del ciclo, hay unas reacciones
que se consideran anapleróticas que aportan intermediarios al ciclo de Krebs, una
de esas reacciones es catalizada por la piruvato carboxilasa que carboxila el
piruvato para sintetizar oxalacetato. Otra reacción anaplerótica es catalizada por
las transaminasas que convierte el glutamato en a-KG que es un intermediario que
entra a enriquecer los intermediarios del ciclo de Krebs. Las reacciones
anapleróticas llevan a la síntesis de succinil-CoA a partir de aminoácidos o bien
sea a partir de propionil CoA (que proviene de los AG de cadena impar).
El lactato que se produce en los tejidos por metabolismo anaerobio, viaja al hígado
y se convierte en piruvato y oxalacetato para sintetizarse glucosa a partir del
lactato (a nivel hepático).
En relación del ciclo de Krebs y la síntesis de ácidos grasos, principalmente por el
exceso de carbohidratos, la glucolisis termina produciendo piruvato, el piruvato en
una reacción catalizada por la piruvato deshidrogenasa convirtiendo en Acetil-
CoA, como no hay transportador de acetil-CoA en la membrana mitocondrial, este
se debe condensar con el oxalacetato para producir citrato y libera la CoA, este
citrato no se puede canalizar a la aconitasa porque hay un exceso, por lo tanto
queda libre en la matriz mitocondrial, el cual es transportado al citosol y en el
citoplasmas es catalizado por la citrato liasa quien hidroliza la molécula para
convertir oxalacetato y Acetil-CoA, este Acetil-CoA se usa para sintetizar malonil-
CoA y llegar a la síntesis de ácidos grasos por la acción de la ácido graso sintasa.
Este oxalacetato no puede ser transportado directamente a la mitocondria (no hay
transportador) y en una reacción catalizada por la malato deshidrogenasa se
convierte a malato y este malato por descarboxilación por la enzima málica que
utiliza NADP y produce NADPH se utiliza para la síntesis de ácidos grasos (50%
del NADPH se produce por acción de la enzima málica y el resto del NADPH por
el ciclo de las pentosas fosfato), el malato se convierte en piruvato el cual se
transporta al interior de la mitocondria y por catálisis de la piruvato carboxilasa
este piruvato se convierte en oxalacetato, el cual se usa nuevamente para producir
citrato y sacar el citrato al citosol para producir Acetil-CoA y síntesis de ácidos
grasos.

Algunos procesos en la regulación del ciclo de Krebs, por ejemplo:

 La piruvato deshidrogenasa es activada por calcio, CoA, AMP, NAD y es
inhibida por Acetil-CoA, NADH y ATP.
  La citrato sintasa es inhibida por ATP, acidos grasos de cadena larga
unidos a CoA.
 La isocitrato deshidrogenasa es activada por calcio y ADP, y es inhibida por
ATP y NADH.
 La a-KG deshidrogenasa es activada por calcio, AMP, NAD, CoA y es
inhibida por NADH, ATP y succinil CoA.
 La Succinato deshidrogenasa es inhibida por oxalacetato y activada por
calcio.
 La malato deshidrogenasa es activada por calcio.
Para la acción de todas las deshidrogenasas se requieren de los sustratos
oxidados NAD para el caso de la malato deshidrogenasa, FAD para el caso de la
succinato deshidrogenasa, NAD para el caso de a-KG deshidrogenasa y NAD
para le caso de la isocitrato deshidrogenasa.