NUCLEOTIDOS Y NUCLEOSIDO

ESTRUCTURA DEL NUCLEOSIDO

La unión covalente (enlace N-glicosídico) entre la base y el azúcar (ribosa o desoxirribosa)
se establece entre el C-1’ (carbono anomérico) del azúcar y el N-1 del anillo pirimidínico o el
N-9 del anillo purínico, con pérdida de una molécula de agua.

ESTRUCTURA DEL NUCLEOTIDO

Nucleótidos sencillos: Se consideran nucleótidos sencillos los que presentan fosfato(s) en
una sola posición del azúcar; esto incluye tanto los que tienen un único fosfato
(monofosfatos) como los que tienen dos o tres fosfatos que están unidos entre sí (difosfatos
y trifosfatos).
Nucleótidos cíclicos y nucleótidos complejos:
En primer lugar, existen nucleótidos cíclicos, que son nucleósidos-monofosfato en los que
un mismo fosfato se une a dos posiciones del azúcar (dos -OH diferentes), generalmente 3’
y 5’. Tienen un papel relevante en la transmisión de señales desde el entorno (por ejemplo,
hormonas o primeros mensajeros) hacia el interior de la célula. Destacan en esta función de
‘‘segundos mensajeros’’ el AMP cíclico (cAMP) y el GMP cíclico (cGMP).

BASES NITROGENADAS
CARACTERÍSTICAS DEL DNA

CONCEPTOS
● La genética estudia la forma como las características de los organismos vivos
(morfológicas, fisiológicas, bioquímicas o conductuales) se generan, se transmiten y
se expresan de una generación a otra.

Dentro de la genética humana y médica hay muchos campos de interés:

● Citogenética: estudia los cromosomas
● Genética molecular y bioquímica: estudia la estructura y funciones de los genes
individuales
● Genómica: estudio del genoma, su organización y sus funciones
● Genética de poblaciones: estudio de la variación genética en las poblaciones
humanas
● Genética del desarrollo: estudio del control genético del desarrollo
● Genética clínica: aplicaciones de la genética para el diagnóstico y cuidado del
paciente

DOGMA CENTRAL
ACIDOS NUCLEICOS
Tradicionalmente se considera que los ácidos nucleicos, como componentes del material
genético, forman parte de los nucleoproteidos, el grupo más importante de heteroproteidos
o ‘‘proteínas conjugadas’

Efectivamente, los nucleoproteidos resultan de la interacción, mediante enlaces

electrostáticos fuertes,
de los residuos básicos (catiónicos) de ciertas proteínas (histonas, protaminas) y los grupos
fosfato (aniónicos) del ácido nucleico.

Por su composición química elemental (C, H, O,N y P), derivada de la presencia exclusiva
de nucleótidos en su estructura, los ácidos nucleicos se diferencian de las proteínas,
esencialmente, en su mayor contenido de fósforo (10%) y en la ausencia total de azufre.

Existen dos tipos de ácidos nucleicos, denominados ribonucleico o RNA y

desoxirribonucleico o DNA.

ESTRUCTURAS DE LOS ÁCIDOS NUCLEICOS

• Primaria: descrita por la unión covalente de numerosos nucleósidos mediante
enlaces fosfodiéster, dando lugar a un polímero lineal

• Secundaria: es la conformación debida a interacciones no covalentes que definen la

conformación local; para el DNA este nivel está definido por los enlaces de hidrógeno de las
dos cadenas polinucleotídicas a través de las bases nitrogenadas. En el RNA solo en
determinadas regiones se presenta esto.

• De orden superior: son las estructuras tridimensionales que surgen a partir de los
niveles primario y secundario. En el DNA viene representado por el superenrrollamiento
dado con la asociación con las proteínas básicas para formar la cromatina
ESTRUCTURA PRIMARIA
La estructura primaria, común para DNA y RNA, consiste en la existencia de cadenas,
generalmente largas, de carácter macromolecular, formadas por la unión de nucleósidos
mediante enlaces covalentes 3’-5’-fosfodiéster. Por tanto, la unidad monomérica es el
nucleótido, o nucleósido-monofosfato (generalmente contemplado).

Un grupo fosfato: comprendiendo 1, 2 ó 3 fosfatos unidos al carbono 5´ del azúcar

• Una molécula compuesta por el azúcar y por la BN se llama nucleósido; si se le
adiciona un fosfato se convierte en un nucleótido
• En un polinucleótido, los nucleótidos simples están unidos por un enlace fosfodiester
entre los carbonos 5´ y 3´
ESTRUCTURA SECUNDARIA DEL B-DNA
En el caso de la forma B del DNA, ambas hebras se enrollan alrededor de un eje común,
longitudinal, formando una doble hélice dextrorsa
Palíndromos
[Link] Concepto y características
Se denominan secuencias palindrómicas, o simplemente palíndromos, aquellas regiones de
un DNA cuya secuencia es la misma en ambas hebras. Son bastante comunes, y tienen un
significado especial por varias razones, principalmente: a) ser dianas de las enzimas de
restricción (herramientas experimentales para escindir ácidos nucleicos en la tecnología del
DNA recombinante); b) intervenir en la regulación de la expresión génica, pues son puntos
de unión de los factores de transcripción, y c) generar estructuras secundarias peculiares en
DNA y RNA (horquillas y cruciformes)
DNA CODIFICANTE: CONCEPTO DE GEN
• GEN: unidad hereditaria constituida por una secuencia nucleotídica (polinucleótidos)
que codifican para un solo producto de RNA y/o para un polipéptido
Contiene una región 5´y 3´no codificantes implicadas en la regulación de la
transcripción y traducción; secuencias codificantes (exones); secuencias no codificantes
dentro de la unidad de transcripción (intrones)

LOS ENLACES FOSFODIESTER SON DE 3´-5-, PERO SE LEEN DE 3´-5´ Y SE

SINTETIZAN DE 5´-3´

DNA REPETITIVO
• Constituye entre un 30-50% del total del genoma humano
• Puede ser disperso o agrupado
– Moderadamente repetitivo: centenas a miles de repeticiones
– Altamente repetitivo: cientos de miles de repeticiones

DNA REPETITIVO CODIFICANTE O FUNCIONAL: 10% del genoma

•Una parte del DNA repetitivo: ES CODIFICANTE: contiene un producto funcional: RNA o
proteína

•Familias génicas clásicas, con genes repetidos en tándem. Contienen secuencias

repetidas que codifican un mismo RNA o proteína, con gran rapidez y gran cantidad.
Muestran alto grado de homología. Ejs: histonas y RNAr

•Familias multigénicas con genes agrupados (alfa y beta globina):

hay 3 tipos

Presentan homología sólo en parte de la secuencia de DNA: origina proteínas con grandes
regiones de secuencia y estructura comunes (dominios)

Familias con homología escasa en las secuencias de DNA, genera proteínas con
pequeños motivos comunes, cada uno con pocos aminoácidos

Grandes superfamilias, con débil homología en la secuencia de DNA, y por lo tanto en las
proteínas. Mantienen cierta misma funcionalidad

•Familias multigénicas de genes dispersos

Familias multigénicas que se localizan dispersamente incluso en distintos cromosomas. Ej

aldolasa

COPIAS DE GENES (VARIANTES)

Con pequeñas diferencias de secuencias, que los hacen generalmente no funcionales

•Pseudogenes: copias inactivas de un gen por acumulación de mutaciones que nunca se

expresan

•No procesados: surgen por duplicación: contoene exones intrones y muchas veces
regiones reguladoreas

•Procesados: copias defectuosas de un gen que contiene solo secuencias exónicas y que
carecen de región promotora e intrónica. Surgen por retrotranscripción

•Genes truncados: copias incompletas de un gen, por pérdida de una región situada en
uno de los extremos (5´o 3´)

•Fragmentos de genes: en este caso se conserva sólo una porción del interior de la
secuencia del gen ( a veces un exón)
DNA REPETITIVO NO CODIFICANTE: 30-40% del
genoma
• Dos formas moderadamente y altamente repetitivo

DNA ALTAMENTE REPETITIVO Y AGRUPADO (en

tándem): DNA SATÉLITE

•Entre un 10-20% del genoma

•Unidades de pequeño tamaño (2-50pb) repetidas en tándem entre miles y un millón de

veces

•Regiones heterocromáticas (centrómero y telómero)

DNA MODERADAMENTE REPETITIVO Y DISPERSO

•Este DNA se distribuye a lo largo de todos los cromosomas en # de repeticiones no muy

elevado (102-104)

•Dos tipos:

•Disperso pero en bloques (15-20% del genoma): devido a su gran variabilidad entre
individuos se puede utilizar como marcador molecular en medicina forense, pruebas de
paternidad y dx de enfermedades moleculares
•DNA minisatélite: repeticiones de 10-65 pb (cientos a miles de repeticiones). Se
caracterizan por una alta variabilidad (DNA minisatélite hipervariable) o polimorfismo. Ejs
huella génica de DNA(una sonda para la secuencia consenso puede hibridar de manera
simultánea con múltiples loci minisatélites diferentes distribuidos en todos los cromosomas,
lo que da lugar a un esquema o patrón de hibridación para cada individuo. Ej DNA
telomérico

•DNA microsatélite: unidad de repetición menor a 7pb, en bloques de hasta 50

repeticiones. Ej huella génica para pruebas de identidad y para estudios familiares

Dispersas: SINE y LINE

SINE (Short Interspersed Nuclear Elements)

• 100-150pb repetidas hasta 20 veces
• Alu: 300pb (5% del genoma). Se repite entre medio y un millón de veces a través del
genoma humano. Originado de retrotransposones

LINE (Long Interspersed Nuclear Elements)

• Varios miles de pb que se repiten hasta 50000 veves en forma dispersa
• Principal familia Kpn (L1)

POLIMORFISMOS

•La diversidad o variabilidad genética se debe a variaciones en la secuencia del

genoma (polimorfismo)

–Afecta a regiones codificantes (polimorfismo génico) y no codificantes

(polimorfismo genético)
–Desde una base (SNP) hasta millones de pb
–Germinal (polimorfismo hereditario) o somático (polimorfismo no hereditario)

•Polimorfismo vs mutación:
–Mutación: asociada a enfermedad; polimorfismo: variante es común en la población
–Polimorfismo: cuando variante se encuentra en menos del 1% de la población
POLIMORFISMO DE UN SÓLO NUCLEÓTIDO -
INDEL

•El 99.5% de la secuencia nuclear del DNA es idéntico entre 2 individuos; esa
pequeña fracción es la responsable de la variabilidad genética y fenotípica en la
población

•Cada 1000pb hay un SNP siendo el polimorfismo más común

•Hay aproximadamente 100000 SNPs exónicos

–La mitad son sinónimos, la otra mitad no sinónimos

•Un millón de indels han sido descritos (cientos a miles en un genoma individual

POLIMORFISMOS MICROSATÉLITES (STR: short

tandem repeat)
•Otros indel son multialélicos debido a números variables en el segmento de DNA
que es insertado en tándem en una localización particular: microsatélites.
•Generalmente 3 o 4 nucleótidos: TGTGTG, CAACAA,AAATAAATAAAT
•Son las huellas génicas

VARIANTES DEL NÚMERO DE COPIAS (CNV) –

POLIMORFISMOS DE INVERSIÓN
•Variación del número de copias de grandes segmentos del genoma (desde 1000pb
hasta cientos de kilo-pares de bases)
•Variantes mayores a 500kb se encuentran en 5-10% de los individuos en la
población general
•El segmento variable puede incluir docenas de genes que pueden involucrar
alteración en la dosis génica
•La diferencia de los alelos para CNV puede ser de riesgo para alguna enfermedad
•Los polimorfismos de inversión va desde unos pocos pb hasta grandes regiones del
genoma (mega pares de bases), por recombinación homóloga desigual causa gane
(duplicación) o pérdida (deleción) de DNA (recombinación desbalanceada). También
recombinación puede ser balanceada

EMPAQUETAMIENTO DEL DNA

COMPOSICIÓN DE LA CROMATINA
•DNA (25%)
•RNA (10%)
•Proteínas
Histonas (25%)
No histonas (40%)

HISTONAS
Constituyen los elementos estructurales primarios que ayudan a doblar y enrollar al
DNA en el cromosoma
● H1: abundante en lisina
● H2A y H2B: abundantes ligeramente en lisina
● H3 y H4: abundantes en arginina

Proteínas no histónicas
a) Con función estructural
• Proteínas básicas:
– Protaminas: Son proteínas pequeñas (50 aminoácidos, en algún caso) con
elevada proporción de Arg, Ala y Ser, y estructura predominantemente en hélice
alfa. Su menor tamaño permite la compactación del DNA en el espacio mínimo
disponible en el espermatozoide.
• Proteínas ácidas:
– HMG: el grupo llamado HMG (high mobility group), proteínas de alta movilidad
electroforética debido a su carácter ácido. Este grupo incluye también algunos
factores de transcripción.
– Proteínas del esqueleto o matriz nuclear: Esta estructura, que sirve de soporte
o guía en el empaquetamiento de la cromatina, está formada por diversas proteínas,
incluyendo algunas HMG y otras proteínas de carácter ácido.
•Las histonas tienden a agruparse entre sí formando octámeros, constituidos por un
tetrámero de dos moléculas de H3 y H4 y dos heterodímeros de H2A y H2B
•En cada nucleosoma hay casi 1.6 vueltas de DNA (147 pb) enrolladas alrededor del
octámero de proteínas histonas, formando la partícula central o núcleo del
nucleosoma

•Una molécula de H1 se une a cada partícula central, estabilizando el punto por

donde el DNA entra y sale del nucleosoma, completando las dos vueltas del DNA, lo
que resulta en empaquetamiento de 167pb que forman el cromatosoma

•Cada nucleosoma se encuentra separado del siguiente por aproximadamente 8-114

pares de bases de DNA, lo que constituye el DNA de unión, con lo cual se
completan los 200pb que forman el nucleosoma

FIBRA DE 10 nm
los fragmentos de DNA producidos por la DNasa son de tamaños aleatorios.

Esta estructura de nucleosomas espaciados a lo largo de la molécula de DNA se denomina

fibra básica de cromatina o fibra de 10 nm, pues su grosor corresponde al diámetro del
nucleosoma.

El grado de empaquetamiento alcanzado es unas 6 veces superior al de la doble hélice

del DNA extendida. La fibra de 10 nm también se denomina ‘‘estructura en cuentas de
rosario’’.
FIBRA DE 30 nm
En lugar de la fibra de 10 nm se observa una forma más condensada, denominada fibra de
30 nm, que supone un grado de empaquetamiento al menos 40 veces superior al de la
doble hélice original.

El arrollamiento de la fibra de 10 nm sobre sí misma en una espiral o solenoide, de sentido

sinistrorso, con algo más de 6 nucleosomas por cada vuelta y con la histona H1 situada en
el interior del solenoide, acercando los nucleosomas entre sí.

En otros modelos se propone que la cadena de DNA describe un zig-zag para que el DNA
espaciador, que se mantiene rígido, conecte nucleosomas dispuestos en caras opuestas de
la fibra.

Cromatina o cromosoma interfásico o ANDAMIO CROMOSÓMICO

Los bucles o asas radiales, formados por entre 50 y 100 kb de fibra de 30 nm,
emergen de un armazón de proteínas no histónicas denominado andamiaje, matriz
o esqueleto nuclear. Estos bucles sufren superenrollamiento, regulado por
topoisomerasas asociadas al esqueleto.

Parece que, además de contribuir al empaquetamiento del DNA, los bucles

constituyen unidades de transcripción, habiéndose observado la presencia dentro de
un solo bucle de un gen completo o bien de un grupo de genes regulados de forma
conjunta.
COMPLEJO DE COHESINAS
•Las cromátides hermanas están asociados a los centrómeros y a lo largo de la
longitud de la cromátide por un complejo multiproteico llamado cohesina

•La cohesión centromérica es mantenida hasta la transición metafase-anafase

cuando se separan las cromátides hermanas y migran a polos opuestos

COMPLEJOS DE CONDENSINAS
•La condensación cromosómica es mediada por otro complejo multiproteico llamado
condensinas, el cual se relaciona con las cohesinas. También es importante en la
segregación.

•SMC4 y SMC2 son parte de este complejo junto con las proteínas no SMC
(XCAP-D2, XCAP-G y XCAP-H)

ANAPHASE-PROMOTING COMPLEX (APC)

•La separación de las cromátidas hermanas es mediada por un complejo
multiproteico denominado APC

•APC destruye una clase de proteínas llamadas securinas (éstas inhiben la

separación de cromátidas hermanas por interacción con otras proteínas llamadas
separinas)

•Cuando comienza anafase la securina sufre una escisión proteolítica y esto resulta
en la separación de cromátidas por actividad liberada de la separina.
PROTEÍNAS DEL ANDAMIO Y COHESIÓN DEL CENTRÓMERO
•Hay otras proteínas que juegan un papel en la cohesión centromérica incluyendo
INCENP, CENP-E INCENP parece tener 2 funciones: segregación y citoquinesis

TOPOISOMERASA
•Rompen 1 o ambas hebras del DNA, meten o sacan giros en múltiplos de 1 ó 2
para relajar la doble hélice
•Importantes por este mecanismo en la replicación, transcripción, reparación,
segregación y condensación (rol estructural)
HP1 (HETEROCHROMATIN PROTEIN 1)

•Lleva a cabo una función de silenciamiento de genes eucromáticos

(heterocromatina)

•Parece mediar las interacciones proteína-proteína o proteína-DNA

•Actúa como plataforma para que se reúnan más proteínas remodeladoras: HDAC,
histona metiltransferasas

Cromosoma metafásico
Aunque al final de la profase cada cromosoma ya está condensado como
heterocromatina, durante la metafase se condensa aún más, adquiriendo el aspecto
típico de los cromosomas metafásicos, corpúsculos observables al microscopio
óptico que poseen, en general, aspecto de bastoncillos con dos cromátidas más o
menos separadas entre sí.

CÓDIGO DE HISTONAS
•Implica las combinaciones de modificaciones particulares de las histonas que
definen la conformación de la cromatina y por lo tanto del DNA incluido ahí.

EL CROMOSOMA METAFÁSICO
Se llama centrómero, constricción primaria o central a la región más estrecha del
cromosoma metafásico, por la que permanecen unidas las dos cromátidas
hermanas.

El centrómero delimita además los brazos cromosómicos (cuatro antes de la mitosis,

dos tras ella).
Los brazos cortos se designan con la letra p y los largos con q (la p procede del
francés petit, pequeño y la q, dependiendo de las fuentes, de queue, cola, o bien
simplemente por ser la letra siguiente a la p).

Cada brazo se nombra, pues, por el número del cromosoma al que pertenece,
seguido de la letra p o q.
Centrómero
Además de ser el punto de contacto de las dos cromátidas y la frontera que delimita
los dos brazos del cromosoma, funcionalmente la importancia del centrómero radica
en que sobre él se sitúan los cinetocoros, estructuras proteicas en las que se anclan
las fibras que constituyen el huso acromático o huso mitótico

Estas fibras, filamentos contráctiles o microtúbulos, de naturaleza proteica, ejercen

la tracción necesaria para separar las dos cromátidas durante la división celular.

De esta forma se produce la segregación ordenada de los cromosomas y cada

célula hija recibe una cromátida de cada cromosoma, es decir, idéntica dotación
genética.

Telómeros
Telómero son regiones situadas en los extremos de los cromosomas eucarióticos.
Están constituidos por secuencias especializadas de DNA asociado a proteínas, y
con características estructurales y funcionales propias que las diferencian de otras
regiones cromosómicas.

La secuencia telomérica, repetición telomérica o repetición terminal, constituye el

extremo de la cadena de DNA del cromosoma, mediante la repetición en tándem de
un oligonucleótido corto en humanos es TTAGGG).
En general esta secuencia telomérica es más rica en G en una de las hebras, la que
forma el extremo 3’, que sobresale unos 12-16 nucleótidos sobre la hebra que
aporta el extremo 5’.

Ese extremo saliente es reconocido por proteínas ligantes del telómero (TBP,
telomere binding proteins), que actúan a modo de ‘‘caperuza’’ protectora de dicho
DNA terminal.

● Participar en la estabilización y mantenimiento de la integridad estructural del

cromosoma
● La función más importante consiste en asegurar la replicación completa de
los extremos del cromosoma
● Se especula también con la implicación del telómero en la arquitectura
tridimensional del núcleo o la del emparejamiento cromosómico.

CICLO CELULAR
•Es la historia de la vida de una célula, los estadios por los cuales pasa de una
división a la siguiente

•A través de este ciclo las células progenitoras pasan a las células hijas las
instrucciones genéticas para todas las características

•El ciclo celular consta de 2 fases principales: interfase

–Interfase: período entre las divisiones celulares (célula crece, se desarrolla y se

prepara para su división)

–Fase M (el período de división celular activa)

•La progresión a través del ciclo es regulada por los puntos de restricción o
control
PUNTOS DE CONTROL
INTERFASE
•Importancia:
–Síntesis de DNA
–RNA y proteínas
–Puntos de control que permiten o inhiben la división celular: aseguran que
todos los componentes celulares estén presentes y en orden adecuado antes de
que la célula proceda a la próxima etapa
•Son necesarios para evitar que proliferen células con daño: ej células cancerosas
•Tres fases: G1 (Gap 1), S y G2
FASE G1
•La célula crece y duplica su tamaño (duplicación de organelos)

•Se sintetizan las proteínas y RNAs requeridos para la replicación

•Duración 10-12 hrs

•Punto de control G1/S: se detiene la célula en G1 hasta que la célula tenga todas
las enzimas necesarias para la replicación del DNA

–Antes de alcanzar este punto la célula puede salir del ciclo: G0: estado estable

FASE S (síntesis de DNA)

•Duplicación de cromosomas

–Antes de esta fase cada cromosoma es una cromátide; después de esta fase cada
cromosoma esta formado por dos cromátides

–Se duplican los centriolos y se sintetizan las histonas

–Duración 6-8 hrs

FASE G2
•La célula sigue creciendo

•Continua síntesis de proteínas y RNA que serán necesarios para mitosis

•Punto de control G2/M: sólo pasa el DNA que no está dañado (puede haber
reparación post-replicativa

•Duración 2-4 hrs

FASE M (MITOSIS)
•Es la parte del ciclo celular en la cual las copias de los cromosomas celulares (las
cromátidas hermanas) se separan y la célula se divide

•Una célula duplicada da lugar a dos células idénticas

•Duración 30 min – 1 hr

•6 etapas:
–Profase
–Prometafase
–Metafase
–Anafase
–Telofase
–Citocinesis
PROFASE
•Condensación cromosómica
–Debido a la acción de condensina y topoisomerasa
–Cromátidas hermanas se mantienen unidas por las cohesinas

•Formación del huso mitótico

–Formado por los microtúbulos del citoesqueleto interfásico
–Se origina a partir de un par de centrosomas (dentro de c/centrosoma hay un
centriolo, que también esta formado por microtúbulos) que migran a los lados
opuestos de las células
–Los microtúbulos crecen desde el centrosoma hasta pegarse a las cromátides
hermanas (cinetocoro)

•Desaparición de la envoltura nuclear y fragmentación del Ap de Golgi

–Para que los microtúbulos interactúen con los cromosomas

PROMETAFASE
•Los microtúbulos del huso, que hasta ese momento habían permanecido fuera del
núcleo, ingresan en la región nuclear

•Para cada cromosoma un microtúbulo de uno de los centrosomas se ancla al

cinetocoro de una de las cromátides hermanas; luego, un microtúbulo del
centrosoma opuesto se une a la otra cromátide hermana (por lo tanto cada
cromosoma está unido a ambos centrosomas)

•Los microtúbulos se alargan y se acortan, de modo que que empujan y tironean de

los cromosomas
METAFASE
•La condensación cromosómica continúa

•Los cromosomas se colocan en el plano ecuatorial (placa metafásica)

ANAFASE
•Los centrómeros se escinden permitiendo que cada cromátide migre hacia polos
opuestos

–Anafase A: el complejo APC ubiquitiniza a la segurina marcándola para su

destrucción y libera a la proteína separasa

–La separasa degrada a la cohesina de los centrómeros y con ello las cromátides se
separan y ceden a la fuerzas de los microtúbulos de los cinetocoros

–Anafase B: se alarga el huso mitótico, alejando los polos celulares y los dos juegos
cromosómicos

TELOFASE
•Los microtúbulos cinetocóricos desaparecen y los cromosomas quedan libres en
los polos

•Los cromosomas empiezan a descondensarse

•La envoltura nuclear se reintegra

•Los cromosomas empiezan a transcribir y se restablece el núcleolo

CITOCINESIS
•El citoplasma se divide para dar lugar a dos células hijas

•La citocinesis empieza desde la anafase cuando se forma un cinturón de actina y

miosina que se contrae y da lugar a un surco de división

•La célula de estrangula dando lugar a dos células hijas

MEIOSIS
•Consiste de dos fases: Meiosis I (división reductora)y Meiosis II (división
equilibrada)
•Tiene dos divisiones celulares (mitosis una división celular). Resultado 4 células o
gametos. En mitosis sólo dos células hijas
•El número de cromosomas se reduce a la mitad (en mitosis el número de
cromosomas de la célula hija es la misma que la célula original)
–Su aportación es reducir el contenido de DNA diploide 2N4C (diploide con 4 copias
de DNA) a haploide 1N1C
•Produce células genéticamente variables (en mitosis células genéticamente
iguales)

MEIOSIS I
•Profase I: leptoteno, cigoteno, paquiteno, diploteno y diacinesis
•Leptoteno: Los cromosomas se contraen y se hacen visibles. Los cromosomas
homólogos se comienzan a alinear pero no se aparean.
•Cigoteno: Los cromosomas homólogos se alinean y aparean. Se da la sinapsis (se
conectan ambos cromosomas homólogos). Se forma el bivalente o la tetrada.
–El proceso de recombinación realmente inicia en leptoteno
•Paquiteno: finaliza la sinapsis.
•Diploteno: los cromosomas permanecen unidos por medio de quiasmas (que se
formaron a través de uniones covalentes entre las cromátide de un homólogo y una
cromátide no hermana del otro homólogo) que son evidencia de la recombinación
meiótica
•Diacinesis: Continúa la condensación cromosómica. El huso meiótico se ensambla
y los cromosomas se preparan para su segregación. Finaliza con la desaparición del
nucleolo, la rotura de la envoltura nuclear y el inicio del movimiento de las tetras
hacia la placa metafásica
PROMETAFASE I
•Membrana nuclear desaparece
•Se forma el cinetocoro y una vez que los cromosomas están anclados por
microtúbulos del huso comienzan a moverse
METAFASE I
•Pares de cromosomas homólogos se alinean a lo largo del plano ecuatorial
ANAFASE I
•Ocurre la separación de los cromosomas homólogos (rotura de las moléculas de
cohesina) excepto en el centrómero.
TELOFASE I
•Ocurre la separación completa
INTERCINESIS
•Es la fase entre dos divisiones meióticas. Se forma de nuevo la membrana nuclear

MEIOSIS II
•Se rompe la envoltura nuclear

•Los cromosomas se compactan de nuevo y se alinean en la placa metafásica

(Metafase II)

–La progresión de la meiosis se detiene en metafase II a menos que el ovocito sea

fecundado, debido a la acción de de factores que inhiben la activación del
APC/C-Cdc 20 con lo cual se evita la degradación de la ciclina B (si las
concentraciones de la ciclina B se mantienen elevadas en el ovocito, la célula no
puede pasar a la siguiente fase meiótica. La fertilización induce la entrada de iones
calcio, la activación del APC/C y la degradación de ciclina B

•Anafase II: repartición de cromosomas hacia los polos opuestos

•Telofase II: se reintegra la envoltura nuclear y se obtiene células haploides con su

contenido 1C de DNA
REPLICACION DE DNA
Aunque la replicación constituye el aspecto esencial del metabolismo del DNA,
también se deben considerar como parte del mismo otros procesos relacionados
directa o indirectamente: la recombinación o reordenamiento de la información
genética, la mutación o alteración de la secuencia, y la reparación de las
alteraciones o daños en el DNA.

•Es el proceso conceptualmente sencillo pero molecularmente complejo, mediante el

cual a partir de una molécula de DNA progenitora o parental se sintetiza una nueva,
originándose así 2 moléculas de DNA hijas, de secuencia idéntica a la del DNA
original

•Esto permite el paso de la información genética a la descendencia

•La replicación se produce de forma coordinada con la división celular,

concretamente durante la fase S de la interfase
•Características:
•Semiconservadora
•Realización simultánea en ambas hebras
•De forma secuencial y carácter bidireccional
•Origen: monofocal y multifocal
•Semidiscontínuo
SÍNTESIS SIMULTÁNEA, SECUENCIAL Y BIDIRECCIONAL

•La síntesis no comienza al azar, sino en puntos concretos de la molécula

denominados orígenes de replicación. En cada uno de ellos se produce la apertura
local de la doble hélice y comienza la síntesis simultánea de las 2 nuevas hebras

•Las 2 hebras se van alargando progresivamente, por adición secuencial de

nucleótidos

•La separación de las hebras progenitoras, que comienza en cada origen, progresa
en ambas direcciones, por lo que se dice que la replicación es bidireccional

A los puntos de transición entre doble hebra y hebras sencillas se le llama horquilla
de replicación

INICIO MONOFOCAL O MULTIFOCAL

En eucariotas la replicación es multifocal, pues en cada uno de los cromosomas
existen múltiples orígenes de replicación (centenares o miles), que dan lugar a dos
horquillas cada uno.

ENZIMOLOGÍA DE LA REPLICACIÓN
• Sustratos: se utilizan como sustratos el conjunto de los cuatro
desoxinucleósidos-trifosfato: dATP, dGTP, dCTP y dTTP. De cada uno de ellos
queda incorporado en el nuevo DNA la parte dNMP de la molécula.

• Cofactores: para una actividad óptima se requiere un ion metálico divalente como
cofactor, asociado a los dNTP y a la polimerasa. Aunque in vitro este papel pueden
desempeñarlo tanto Mn2+ como Mg2+, es este último el que actúa in vivo.

• Molde o plantilla: ésta es, quizá, la principal característica de la reacción. El orden

correcto de incorporación de los nucleótidos viene determinado por su
complementariedad de bases con la secuencia de cada hebra de DNA, que actúa
así como molde o plantilla.
• Cebador: la síntesis de una nueva hebra de DNA no puede comenzarse a partir
de dos nucleótidos, sino que requiere un fragmento monocatenario iniciador,
denominado cebador, que aporte un grupo 3’-OH libre.

Se trata de un oligonucleótido, por lo común RNA, que debe estar emparejado con
la hebra progenitora de DNA, de forma complementaria y antiparalela.

Este requisito puede expresarse afirmando que la replicación no es autoiniciadora,

sino que sólo elonga o alarga moléculas preexistentes.

MECANISMO DE LA REACCIÓN
•Se inicia con el apareamiento de un dNTP complementario al nucleótido de la hebra molde
en la posición vecinal al extremo 3´de la hebra en crecimiento (inicialmente RNA cebador;
luego la hebra que se esta sintetizando)

•La reacción consiste en la unión de un dNMP con la liberación de PPi (formación de un

enlace fosfodiéster)

DIRECCIÓN DE LA SÍNTESIS
•Puesto que la adición de nucleótidos se realiza siempre a partir de 5´-trifosfatos y sobre un
extremo 3´-OH libre, la hebra crece por su extremo 3´, se dice que la síntesis transcurre en
dirección 5´ 3´
 Molécula Molécula molde Nombre Ejemplos
sintetizada completo

DNA DNA Polimerasa de DNA

DNA dirigida por polimerasas
DNA

RNA DNA Polimerasa de RNA polimerasas

RNA dirigida por o transcriptasas
DNA primasas

DNA RNA Polimerasa de Transcriptasas

DNA dirigida por inversas;
RNA telomerasas

RNA RNA Polimerasa de RNA replicasas

RNA dirigida por
RNA
REPLICACIÓN DEL DNA
INICIACIÓN DE LA REPLICACIÓN
En eucariotas la enorme longitud de los cromosomas requiere la existencia de
numerosos orígenes de replicación que, aunque se conocen con menos precisión,
también poseen secuencias características.

La definición de los puntos de inicio depende de dos regiones en el DNA: el

replicador, que es la zona que determina la apertura inicial de la doble hebra, y el
origen propiamente dicho, el punto donde comienza la síntesis sobre el molde de la
molécula abierta.

El replicador incluye zonas donde la doble hélice puede desenrollarse con facilidad
(secuencias ricas en pares AT) y otras que interaccionan específicamente con
proteínas iniciadoras.

La unión de estas proteínas provoca la flexión de la cadena de DNA, generando una

tensión superhelicoidal negativa que, sumada a la interacción más débil entre las
bases A y T, contribuye a la separación de las hebras.

•El complejo multiproteico formado por proteínas especializadas y por las DNA polimerasas,
que viaja asociado a cada horquilla y realiza la replicación, se conoce como replisoma

ELONGACION
Una vez formado el complejo de iniciación, la replicación precisa el desenrollamiento
de la doble hélice, a fin de hacer accesibles las bases como molde para formar las
nuevas hebras.

Además, a medida que se van sintetizando las hebras nuevas se debe ir

recuperando el enrollamiento en las dos dobles hélices recién formadas.
HELICASAS
•Se unen al DNA en el origen y actúan separando sus 2 hebras, en un proceso que
requiere la hidrólisis de ATP. Se crean así 2 horquillas de replicación, que
comienzan a avanzar en sentidos opuestos, cada una liderada por una helicasa, que
avanza por la cadena seguida inmediatamente por el resto de componentes del
replisoma o complejo de elongación asociado a la horquilla.
PROTEINA DE REPLICACIÓN A

•Una vez separadas las hebras por la helicasa, intervienen las proteínas de unión al
DNA de hebra sencilla, que evitan el reapareamiento de las hebras. Se les
denomina comúnmente proteínas SSB (single strand binding proteins). En
eucariontas desempeña esta función la proteína de la replicación A

TOPOISOMERASAS

•La separación de hebras ocasionada por la progresión de la helicasa a lo largo de

la cadena de DNA conlleva la aparición de superenrollamientos positivos por delante
de la horquilla.

•Para aliviar esta tensión de torsión se requiere algún tipo de mecanismo giratorio;
de lo contrario, el superenrollamiento acumulado por delante de la horquilla llegaría
a impedir el avance de la replicación

•El problema se resuelve gracias a las topoisomerasas

•Tipo I: introducen un corte en la cadena de polinucleótidos y dejan pasar la otra

hebra por la brecha abierta; vuelven a ligar la primera cadena. Independientes de
ATP. Su forma de actuar consiste en que el número de veces que una cadena cruza
a la otra aumenta en múltiplos de uno

•Tipo II: rompen ambas cadenas de la doble hélice creando una abertura por la que
pasa una segunda sección de la molécula. Este tipo de enzima es dependiente de
ATP e incrementa el número de veces que una cadena cruza a la otra en 2 unidades
cada vez que actúan
COMPLEJO DE DNA POLIMERASA a/PRIMASA

•Es el único capaz de iniciar la síntesis de DNA sintetizando en primer lugar un

cebador de RNA y después extendiéndolo mediante polimerización para producir
una extensión corta de DNA

•P180 y p48: catalizan las funciones de polimerasa y primasa, respectivamente

•P58: necesaria para la estabilidad y actividad de la primasa p48

•P70: posiblemente participa en el ensamblaje del primosoma

•Conceptualmente, el principal problema de la replicación surge al constatarse que

ambas hebras son copiadas simultáneamente, a medida que avanza la horquilla,
mediante enzimas (DNA polimerasas) que solo son capaces de sintetizar en
dirección 5´ _ 3´

•Al abrirse la horquilla una de las hebras progenitoras se va exponiendo en sentido

correcto para actuar de molde, 3´ 5´, por lo que la síntesis de su hebra
complementaria puede transcurrir por simple avance de la polimerasa a lo largo del
molde. A esta hebra se le llama líder o guía (leading strand)

•Por el contrario, la otra hebra progenitora se expone en sentido 5´--> 3´, por lo que
no puede actuar como molde a medida que avanza la horquilla. Requiere un
mecanismo particular y supone un desfase con la hebra conductora, por lo que se le
llama hebra retrasada (lagging strand)

•Fragmentos de Okazaki: cada fragmento corresponde a una fracción de hebra,

cuya síntesis solo comienza cuando el avance de la horquilla ha liberado suficiente
longitud de hebra sencilla como para que la polimerasa la utilice como molde, en
sentido 3´ -->5´

•Se propone como mecanismo para la cadena retrasa que la hebra sencilla forma un
bucle, arrollando la propia enzima, para permitir la síntesis en sentido 5´--> 3´propio
de la polimerasa. De esta forma se dice que la síntesis es semidiscontínua.
FACTOR DE REPLICACIÓN C
•Una de las proteínas clave en el reclutamiento de las polimerasas replicativas para
crear horquillas de replicación es el RFC

•Funciona como ancla de la abrazadera (en forma de anillo)

ANTÍGENO NUCLEAR DE PROLIFERACIÓN CELULAR (PCNA)

•Es la abrazadera deslizante o balero replicativo (sliding clamp) de la polimeraza

•Forma de anillo cerrado con hueco en el centro que encierra al DNA y funciona
como factor accesorio de la DNA polimerasa

•Funciona como factor de progresividad para la polimerasa d durante la replicación

RNAasa H1 Y FEN1
•Su función es remover el cebador de RNA unido al extremo 5´ de cada fragmento
de Okasaki

DNA LIGASAS (I)

•Unen fragmentos de DNA

TERMINACION
Final de la elongación Se puede considerar, conceptualmente, que la terminación
comprende varios aspectos. El primero de ellos es la finalización propiamente dicha
de la elongación por la DNA polimerasa

REPLICACIÓN DE LOS TELÓMEROS

TELOMERASA
•Se trata de una polimerasa de DNA dirigida por RNA, formada por 2 componentes:
● Componente ribonucleotídico o RNA de la telomerasa (TR o TER):
gracias a ella, el TR sirve de molde para la síntesis de nuevas secuencias
teloméricas
 ● Componente proteico: contiene la actividad enzimática o trancriptasa
inversa de la telomerasa (TRT o TERT). Esta es la actividad telomerasa
propiamente dicha, sintetiza el DNA telomérico de novo.

TRANSCRIPCIÓN

•La transcripción es el proceso encargado de la síntesis de una molécula de RNA a

partir de la información genética contenida en la región codificante de un DNA

•Se da lugar a una copia de RNA (con secuencia no idéntica, sino complementaria y
antiparalela) a partir de una secuencia molde de una de las hebras de DNA

•Solo una pequeña porción del DNA de las células eucariontes se transcriben (de
acuerdo a las necesidades de la célula se transcriben diferentes segmentos de
DNA: unidades de transcripción)

•Además solo un segmento pequeño de RNA sintetizado se traduce en polipéptidos

y esto puede ser debido a:
[Link] unidades de transcripción son expresadas para producir una molécula de
RNA diferente a los RNAm y no especifican de manera directa polipéptidos. Esos
productos de RNA constituyen moléculas maduras que pueden servir para
diferentes funciones como en el caso de los RNA ribosomales, de transferencia y las
diferentes moléculas de RNA pequeños nucleares, etc.

[Link] transcrito primario de aquellas unidades que codifican para polipéptidos están
sujetos a eventos de procesamiento. Como resultado, gran parte de la secuencia del
transcrito primario se elimina para producir un RNAm mucho más pequeño

[Link] la parte central de un RNAm maduro se traduce (UTR 5´ y 3´)

•En un gen existen 2 tipos de secuencias con funciones diferentes:

● Estructural
Regiones codificantes

Regiones no codificantes

Reguladora
“Conjunto de secuencias de DNA de todo tipo, estructurales (intrones y exones) y
reguladoras, necesarias para codificar un producto génico, sea éste un RNA maduro
de cualquier tipo o una proteína funcional”

REGIÓN ESTRUCTURAL
Determina la expresión real del gen. Comprende 2 tipos de secuencias, en función
de su capacidad de expresión:

Intrones: o regiones no codificantes presentes en el interior del gen

Exones: incluyen tanto secuencias codificantes como las no codificantes de ambos
extremos el gen

•El conjunto de exones e intrones de la región estructural se transcribe para dar

lugar a un RNA llamado precursor o transcrito primario o heteronuclear. Este
requiere un proceso adicional posterior a la transcripción para dar moléculas
funcionales de RNA (maduración postranscripcional)
REGIÓN REGULADORA
•Sin función codificante, esta situada normalmente corriente arriba (5´) de la región
estructural. Contiene distintas regiones promotoras, encargadas de interaccionar
con los factores de transcripción proteicos para regular positiva o negativamente el
inicio de la transcripción

TERMINOLOGÍA
•De manera habitual, solo una de las dos cadenas del DNA sirve como molde para
la síntesis de RNA. Durante la transcripción, la doble hélice de DNA es abierta y la
cadena molde forma provisionalmente una doble hélice híbrida RNA-DNA con la
cadena creciente de RNA

•Como la cadena de RNA transcrita es complementaria a la cadena molde, el

transcrito tiene la misma dirección 5´ 3´ y la misma secuencia de bases (con
excepción de T por U) que la cadena opuesta (la cadena de DNA que no se emplea
como molde se le denomina cadena sentido y a la cadena molde se le nombra
cadena antisentido)

ORIENTACIÓN DE LA SECUENCIA
•Los nucleótidos en esta hebra se numeran a partir del punto de inicio de la
transcripción, al que se le designa el valor +1 y se denomina origen de transcripción.
No existe el nucleótido cero. Los situados hacia el extremo 5´se dice que están
“corriente arriba” y se indican con números negativos consecutivos (-1, -2, ect).
Los nucleótidos situados en el sentido de la transcripción, hacia el extremo 3´, están
“corriente abajo” y se indican con números positivos (+2, +3, etc).

RNA POLIMERASAS
•La síntesis de RNA es catalizada por RNA polimerasas que utilizan DNA como
molde (cadena antisentido o molde) y ribonucleósidos trifosforilados (ATP, CTP, GTP
y UTP)
•La elongación de la cadena ocurre por adición del residuo de mononucleósido
monofosfato, complementario a la cadena molde de DNA, al grupo 3´OH libre en el
extremo creciente de la molécula de RNA
•En eucariontas existen 3 tipos de RNA polimerasas diferentes (I, II y III), que
sintetizan cada una distintos tipos de RNA

•La RNApol de eucariotas son mucho más complejas, formados entre 10 y 14

subunidades

INICIACIÓN

•Es la etapa más compleja de la transcripción en donde se requiere la separación de

las hebras del DNA en un pequeño tramo cercano a la secuencia promotora, para
permitir que la RNA polimerasa sintetice un fragmento corto de RNA (de unos 10
nucleótidos) por apareamiento con la hebra molde

•La región de DNA que sufre este desenrollamiento parcial se llama burbuja de
transcripción

•Éste se forma en el inicio y posteriormente, durante la elongación, se desplaza a lo

largo del DNA junto con la RNA pol

•Para el inicio de la transcripción también se requiere la unión al DNA de proteínas

llamadas factores de transcripción (FT)
Formación del complejo de iniciación

•Este complejo pluripotencial es imprescindible para que la RNA pol pueda actuar.
Supone la unión de varios TFs a las regiones promotoras del DNA y la incorporación
de la enzima (dominio CTD no fosforilado)

•Se han propuesto 2 modelos para la formación de este complejo:

Modelo del holoenzima: la RNA pol-II se une previamente a los TFs y luego el
conjunto se une al promotor

Modelo escalonado: en el que los TFs se van asociando a la región promotora uno
a continuación del otro y en cierto orden. Es el modelo más aceptado actualmente

Desnaturalización del promotor

•El complejo de iniciación produce en la región de inicio de la transcripción el

desenrollamiento y separación de las 2 hebras (desnaturalización local), esencial para la
exposición de las bases a la RNApol

•Esta zona de hebras separadas, burbuja de transcripción, es el lugar donde va a tener lugar
la síntesis de la cadena de RNA (requiere una actividad helicasa), presencia de 2 TF (TFIIF y
TFIIH), con gasto energético (hidrólisis de ATP). Otro factor, el TFIIE, estabiliza la región
desnaturalizada del promotor (similar al papel de la RPA)

Liberación del promotor: transición de iniciación a

elongación

•En eucariontas, la transición entre las fases de iniciación y elongación esta marcada por la
fosforilación del dominio CTD de la RNA-pol (en la fase de iniciación participó la forma no
fosforilada). Esta fosforilación la lleva a cabo el factor de transcripción TFIIH
ELONGACIÓN DEL RNA

•La RNA polimerasa continúa alargando la cadena de RNA mientras avanza por el
DNA, desplazando junto con ella la burbuja de transcripción

Por delante de la polimerasa se separan las 2 hebras del DNA por ruptura de los
puentes de hidrógeno. La tensión creada por el superenrollamiento debe ser
compensada por topoisomerasas

La polimerasa alarga el RNA añadiendo nucleótidos al extremo 3´ del RNA naciente.

El último tramo permanece dentro de la burbuja, apareado transitoriamente como
híbrido RNA-DNA

Por detrás de la polimerasa, la cadena de RNA nueva se va separando de la hebra

molde de DNA, saliendo de la burbuja y quedando como RNA de hebra sencilla.
En el DNA se vuelven a aparear las 2 hebras y se produce el re-enrollamiento de la
doble hélice, de nuevo asistido por topoisomerasas

Para que la elongación sea eficiente se requiere, además, la ayuda de los llamados
factores de transcripción generales de la elongación (PTE). Se desconoce su
mecanismo exacto de actuación.

Son proteínas que se agrupan en varios tipos:

● PTEFb y SII evitan la terminación prematura de la elongación

● FIIF, SIII (o elonguina) y ELL aumentan la velocidad de la elongación al

suprimir las pausas transitorias
TERMINACIÓN
•El complejo de transcripción responde a señales específicas para finalizar el
proceso, separándose el RNA formado

Terminación en eucariotas

•Al alcanzar determinadas secuencias del DNA eucariótico, aún poco

caracterizadas, se produce la terminación, como consecuencia de la combinación
de 2 factores o mecanismos: la detención o pausa de la RNA polimerasa y la
desestabilización del híbrido RNA/DNA.
El resultado final es la separación de los componentes del complejo de la
transcripción, y en el caso de la RNApol-II, su desfosforilación para que pueda
ensamblarse a un nuevo complejo de iniciación y comenzar otro ciclo de
transcripción

MADURACIÓN DEL RNA

•La transcripción del DNA es un proceso que no difiere, en esencia, entre
procariontas y eucariontas: las RNA polimerasas se unen a secuencias promotoras
específicas y se realiza la síntesis en dirección 5´-->3´ a lo largo del gen.

•Se llama transcrito primario o precursor del RNA a la molécula de RNA que resulta
directamente del proceso de transcripción (todos estos transcritos tienen la misma
secuencia que el fragmento correspondiente de la hebra no molde -no transcrita- de
DNA, salvo por la presencia de U en lugar de T)

•Los precursores de los 3 tipos de RNA formados en el núcleo no pueden

desempeñar directamente su función, sino que han de convertirse antes en RNA
maduro, funcional, en un proceso llamado modificación o procesamiento
postranscripcional o simplemente maduración del RNA

•Este proceso tiene lugar en el núcleo y solo cuando se han completado pueden las
moléculas de RNA transportarse al citoplasma (a través de los poros nucleares),
donde ejercen su función
CARACTERÍSTICAS DIFERENCIALES DE LA
MADURACIÓN
•Por el contrario, la transcripción de un gen eucarionte genera un preRNAm
(RNAhn) que debe sufrir maduración para transformarse en una molécula funcional
de RNA

•Dentro de las diferencias entre pre-RNAm y RMAm maduro, la más llamativa es

que la secuencia del RNAm no corresponde completamente a la del pre-RNAm, ni a
la del DNA que se ha transcrito. Esto es debido a que grande segmentos internos
del gen desaparecen durante la maduración (intrones)

Intrón: regiones no codificantes situadas en el interior de un gen que se

transcriben pero no se traducen

Las regiones que flanquean a los intrones y que se conservan en el RNA maduro se
denominan a su vez exones. En general, son la parte codificante del gen

PROCESAMIENTO DEL RNA MENSAJERO

•Adición de nucleótidos al extremo 5´y su metilación posterior

•Alargamiento de la cadena en el extremo 3´

•Eliminación de intrones con unión de exones (corte y empalme)

MODIFICACIÓN DEL EXTREMO 5´

•Se trata de una modificación covalente que, globalmente, implica 3 tipos de
enzimas (fosfatasa, guanililtransferasa y metilasas) y conduce a la incorporación
singular de un nucleótido protector sobre el NTP en la posición 5´terminal del RNA
(normalmente purínico, ATP)
Formación de la caperuza o casquete 5´
•Se realiza en 2 etapas: una desfosforilación previa y una guanililación a costa de
GTP

•El resultado conjunto de las 2 reacciones es la incorporación al RNAm de tan solo

un residuo guanosina (guanosilación; RNAm guanosilado en 5´)

•La estructura terminal resultante se conoce como caperuza de guanina, caperuza

5´ ó casquete 5´

Metilación de la caperuza
•Los tres primeros nucleótidos de la estructura 5´-guanosina-trifosfato son
modificados por metiltransferasas
•La metilación puede tener lugar en varias posiciones:

•El N-7 de la guanosina terminal (caperuza tipo 0 o caperuza de

7-metilguanosina-trifosfato)

•2´-OH de la ribosa adyacente (2º de la secuencia actual) (caperuza tipo1)

•También puede metilarse el 2´-OH de la ribosa siguiente (3ª de la secuencia actual)
(caperuza tipo3)

MODIFICACIÓN DEL EXTREMO 3´

•Sobre el extremo 3´-OH resultante del corte por la endonucleasa actúa una RNA
polimerasa especial, que no usa molde y solo acepta como sustrato ATP, llamada
poli (A) polimerasa
•Así se forma la cola de poliadenilato o cola de poli (A), que tiene una longitud entre
40 y 250 nt

ELIMINACIÓN DE INTRONES Y EMPALME DE EXONES

•La etapa esencial de la maduración postranscripcional del transcrito primario hasta
dar el RNAm eucariótico consiste en la eliminación de los intrones y la unión o
empalme de los exones (splicing)

Secuencias que delimitan el intrón

•La eliminación de un intrón está determinada por su secuencia, y no por su tamaño.

•Solo intervienen 2 secuencias específicas, que definen los extremos del intrón, y
otra de su interior, conocidas en su conjunto como sitios o centros de corte y
empalme (centro 5´, centro 3´ y centro de ramificación)

● Una mutación de uno de los nucleótidos consenso daría lugar a un splicing

erróneo, con lo que el intrón o parte de él quedaría incluido en el RNAm; por
lo tanto se sintetizaría un polipéptido alterado, con una inserción grande o
incluso con cambio de toda la secuencia a partir del punto de alteración
debido a un desplazamiento del marco de lectura

● El complejo de corte y empalme es necesario tanto para el reconocimiento de

los puntos de escisión como para la catálisis
La reacción de corte y empalme supone, la ruptura de 2 enlaces fosfodiéster (los
que separan el intrón de ambos exones) y la formación de un nuevo enlace
fosfodiéster entre los 2 exones

REGULACIÓN GENÉTICA DE LA TRANSCRIPCIÓN

•El control de la transcripción debe describirse hoy día en relación con los 2
componentes implicados en la estructura molecular del DNA en organismos
complejos: los 4 nucleótidos que forman la secuencia (regulación genética) y los
grupos metilo incorporados al DNA (regulación epigenética)

•La regulación genética se centra en la interacción de los promotores con los

factores de transcripción (TF)
 ELEMENTOS QUE ACTÚAN EN CIS Y TRANS COMO
REGULADORES DE LA TRANSCRIPCIÓN
•Un promotor o secuencia promotora es una región de DNA que regula el inicio de la
transcripción de un gen (es parte de la región reguladora del gen). Actualmente se
les suele llamar también “factores que actúan en cis o factores cis”, simplemente por
encontrarse en la misma molécula de DNA cuya expresión regulan

•Una característica de la transcripción eucariótica es que su regulación se debe a la

afinidad específica por los promotores de ciertas proteínas denominadas factores de
inicio de transcripción o FT
•A cada promotor se puede unir un número variable de FT, que actúan favoreciendo
o dificultando la unión y la actividad de la RNApol, o de otros factores de
transcripción, y de este modo determinando la posición y eficacia del inicio de la
transcripción

•Los TFs tienen más responsabilidad que la propia RNApol en el reconocimiento de

la secuencia del promotor y se encargan de la regulación de la transcripción

•Los TFs también se denominan “factores que actúan en trans o factores trans”,
pues están en posición alejada y no relacionada con aquella región génica cuya
expresión regulan

•En las células eucariontas se requieren 3 tipos de RNA polimerasas para sintetizar
las diferentes clases de RNA
PROMOTORES DE LOS GENES DE CLASE II

•La regulación de los genes de clase II (transcritos por la RNApol-II) es del máximo
interés por ser responsable de la síntesis de los RNAm y, por lo tanto de todas las
proteínas

•Sus promotores se localizan típicamente en dirección 5´(corriente arriba) del origen

de transcripción

•Los promotores en general, pero de forma característica los de clase II, se pueden
dividir en 3 tipos, de acuerdo con su acción y su ubicación:

● Secuencias o elementos basales del promotor

● Secuencias o elementos proximales

● Secuencias o elementos distales

Secuencias o elementos basales del promotor

•El promotor basal comprende las secuencias que definen el punto de inicio de la
transcripción y son imprescindibles para que ésta comience

•Es una región situada en posición adyacente al origen de transcripción,

comúnmente corriente arriba hasta la posición -30

•Dentro de esta región esta la secuencia TATA, caja TATA o caja de Hogness, (-15 a
-25)
Secuencias o elementos proximales
•Generalmente, el promotor basal no es suficiente por sí mismo para provocar el
inicio de la transcripción, sino que se requiere la intervención adicional de otra
región conocida como promotor proximal

•Éste está cercana al promotor basal, pero más alejado corriente arriba del origen,
comúnmente entre las posiciones -30 y -200

•Los elementos proximales no especifican la posición del inicio, sino que determinan
la frecuencia con la que se produce el inicio de la transcripción

•Esto es posible gracias a que sobre ellos se unen diversos factores de transcripción
que favorecen la interacción de la RNApol-II con el DNA, en el punto de inicio y su
actividad enzimática
•Las 2 secuencias más características son la caja o secuencia CAAT (entre -60 y
-80) y la caja GC, que aparece en copias múltiples y en cualquier orientación a
ambos lados de la caja CAAT
Secuencias o elementos distales

•La expresión de algunos genes sufre una regulación aún más compleja, que
depende de secuencias situadas a gran distancia del punto de inicio, incluso de
varios miles de pb, corriente arriba o abajo

•Esto ocurre especialmente para los genes inducibles, aquellos que no se expresan
continuamente en la célula, sino cuya expresión sufre una regulación amplia y
precisa como respuesta a diversas señales

•Otra particularidad es que actúan tanto activando la transcripción como

reduciéndola. De acuerdo a ello, se clasifican en 2 tipos:

Potenciadores: activadores, intensificadores, amplificadores o estimuladores

(enhancers). Pueden aumentar mucho la velocidad de inicio de la transcripción
conseguida a partir de promotores basales y proximales situados en la misma
molécula de DNA

Silenciadores o inhibidores (silencers): tienen el efecto opuesto, generalmente

porque los FTs que se unen a ellos compiten con la acción de los específicos de los
promotores potenciadores y proximales
FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN DE CLASE II

•La RNApol-II interacciona con gran variedad de factores de transcripción (TFII)

dependiendo del gen, habitualmente con un número considerable de ellos

•Estos factores se pueden clasificar en generales, proximales e inducibles, de

acuerdo con su unión a uno de los 3 tipos de secuencias o elementos promotores.

FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN GENERALES

•Reciben este nombre los TFs que reconocen los elementos basales de un promotor

•Son proteínas conservadas evolutivamente que promueven alrededor del punto de

inicio de un complejo plurimolecular, que incluyen el promotor basal, los propios TF
generales y la RNApol-II

•Se puede decir que al reconocer el promotor basal actúan de mediadores para que
se fije la polimerasa, definiendo así el punto de inicio de la transcripción y activando
a la enzima para que comience a sintetizar el RNA

•Se conocen las funciones de algunos de los factores de transcripción generales

asociados a la RNApol-II:
● TFIID
● TFIIH

TFIID
•Es el único con especificidad por una secuencia de DNA, la de la caja TATA
•Este factor determina que la RNApol-II actúe a cierta distancia del promotor,
definiendo el punto de inicio de la transcripción (nucleótido +1). Esta formado por 2
componentes:
TBP: proteína de unión a TATA (TATA binding protein), que confiere a TFIID la
capacidad de reconocimiento de la secuencia promotora. Su unión a ésta es el
primer paso en la formación del complejo de inicio, se une al surco menor del DNA y
provoca la flexión de la molécula de DNA
TAFs o factores de unión a TBP
TFIIH
•Es particularmente importante por su doble actividad:
Helicasa: esta implicada en la separación de las hebras del DNA en el sitio de
inicio, necesaria para el acceso de la polimerasa a las bases
Cinasa: fosforila el dominio C-terminal de la subunidad mayor de la RNApol-II,
provocando en ésta un cambio conformacional que induce el comienzo de su
desplazamiento a lo largo del DNA y llevando la transición entre el inicio y la
elongación de la transcripción
Este factor también participa en la reparación del DNA: NER

•Para la formación del complejo de inicio se han propuesto 2 mecanismos, cuyo

resultado final es el mismo:
● Ensamblaje consecutivo de los factores de transcripción (modelo escalonado)
● Modelo de la holoenzima

MODELO ESCALONADO
•Según esta hipótesis, los TFs y la RNApol-II se van asociando a la región
promotora en un cierto orden uno tras otro

•La formación del complejo de iniciación comienza con la unión de TFIID al DNA en
la secuencia TATA, y a continuación, se van asociando los factores TFIIA y TFIIB,
que permiten la unión de la polimerasa junto con el factor TFIIF, y finalmente se
incorporan TFIIE y TFIIH

MODELO DE LA HOLOENZIMA
•En esta hipótesis alternativa, apoyada por estudios in vitro, la RNApol-II se asocia
previamente a varios factores de transcripción, formando una enzima activa u
holoenzima, que luego se une al DNA en la secuencia promotora definida por la
unión del TFIID
FACTORES DE TRANCRIPCIÓN PROXIMALES
•También llamados factores de unión corriente arriba, son proteínas que reconocen
específicamente los elementos proximales del promotor, contribuyendo a aumentar
la eficiencia de formación del complejo de inicio o favoreciendo su actividad sobre la
polimerasa

•Como ejemplos, el FT CTF interacciona con la caja CAAT, siendo aparentemente el

responsable de la eficacia del promotor, mientras que el FT SP1 se une a las cajas
GC

•Los promotores que solo contienen elementos reconocibles por TFs generales y
proximales controlan los llamados genes constitutivos, aquéllos que se expresan de
una forma constante, a la misma velocidad en todo momento de la vida celular
FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN INDUCIBLES

•El tercer grupo de factores de transcripción lo constituyen aquéllos que reconocen

los elementos distales del promotor

•Actúan de forma similar a los factores proximales, es decir, facilitando la formación

y actividad del complejo de inicio de la transcripción, o por el contrario,
dificultándolas, regulan, por lo tanto, la transcripción tanto de forma positiva como
negativa (de acuerdo a sus promotores, sean potenciadores o silenciadores)

•Estos FTs no están presentes en la célula de forma contínua, sino que se sintetizan
o se activan en momentos específicos o en tejidos particulares. Se les llama genes
inducibles, regulables o de expresión diferencial

INTERACCIÓN DE LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN

CON LA POLIMERASA
•Algunos TFs no interaccionan directamente con la polimerasa, sino que hacen de
mediadores entre otros TFs. Se han identificado algunas proteínas o complejos de
proteínas que cooperan con los factores activadores, conectándolos con la
maquinaria basal para regular la transcripción (coactivadores o cofactores
generales: p ej TAFs: mediadores en la interacción entre los factores generales por
un lado y los factores proximales y distales por otro

TRADUCCIÓN Y SÍNTESIS DE PROTEÍNAS

ESTRUCTURA PROTEICA
•Un polipéptido es un polímero compuesto por monómeros denominados
aminoácidos. Éstos se ajustan a la siguiente fórmula general:

NH2+C(carbono asimétrico)+COOH-
•La cadena lateral, o grupo R (reactivo), puede ser cualquier grupo desde un átomo
de hidrógeno (p. ej. en el aminoácido glicina) hasta un anillo complejo (como en el
aminoácido triptófano)
•En las proteínas, los AA se mantienen unidos mediante enlaces covalentes
denominados enlaces peptídicos

•El enlace peptídico se produce por una reacción de condensación durante la cual
se elimina una molécula de agua

•Debido al mecanismo de formación del enlace, una cadena polipeptídica siempre

tiene un extremo amino (NH2) y un extremo carboxilo (COOH)

Niveles de organización
•Estructura primaria: secuencia lineal de AA de la cadena polipeptídica
Las proteínas adoptan una forma específica debido al establecimiento de varios
tipos de enlaces débiles (hidrógeno, electrostáticos, de van der Waals) entre los
átomos de una misma cadena polipeptídica, o de cadenas diferentes
•Estructura secundaria: surge de las interacciones entre aminoácidos que se
encuentran próximos en la secuencia lineal, dando lugar a una hélice a en la
mayoría de los casos
•Estructura terciaria: se origina por el plegamiento de la hélice o de otras
estructuras secundarias
•Estructura cuaternaria: en algunas proteínas, se reúnen 2 ó más estructuras
terciarias

•Después del procesamiento postranscripcional, los RNAm maduros transcritos de

genes en el DNA nuclear migran hacia el citoplasma

•Ahí, se acoplan a ribosomas y a otros componentes citoplasmáticos para dirigir la

síntesis de polipéptidos específicos mediante el proceso de traducción

•La información contenida en el RNAm es leída en dirección 5´-->3´ la cadena

polipeptídica crece del extremo amino hacia el carboxilo terminal

CÓDIGO GENÉTICO
•El ensamblado de un nuevo polipéptido a partir de sus aminoácidos, está dirigido
por un código genético que establece la correspondencia entre la secuencia en los 4
nucleótidos de los ácidos nucleicos y la secuencia de los 20 aminoácidos en las
proteínas
•Código de tripletes (3 nucleótidos codifican un aminoácido)
•Potencialmente existen 64 codones diferentes

Características del código genético

•Universal
•Redundante o degenerado: un AA puede ser codificado por más de un triplete

•No existe puntuación: los nucleótidos son leídos de manera subsecuente sin
puntuación entre ellos que los separe o delimite
•Tiene 4 codones de puntuación:
Inicio: AUG
Stop: UAG, UAA, UGA

•Por lo general, los codones redundantes o sinónimos sólo difieren en la 3ª posición

(en todos los casos si ésta es pirimidina especifican el mismo AA; si la 3ª posición
es purina, casi siempre los codones son sinónimos)
•A pesar de que hay 64 codones, el número correspondiente de moléculas de RNAt
con diferentes anticodones es menor, aproximadamente existen de 40 a 60 tipos de
RNAt citoplasmáticos

•La interpretación de los 64 codones, resulta gracias a las reglas normales de

apareamiento de bases (A-U, G-C) se mantienen estrictas en las 2 primeras
posiciones, pero se relajan en el reconocimiento de la 3ª posición entre el codón y
anticodón (HIPOTESIS DE BAMBOLEO):
En 1966 Crick propone esta hipótesis para explicar
como un RNAt puede reconocer 2 codones.
Establece que en la síntesis de proteínas durante el proceso de
reconocimiento codón-anticodón se pueden crear puentes de
hidrógeno alternativos
entre G y U, además de que la presencia de inosina (I) en la primera
posición del anticodón
de RNAt permite su apareamiento con A, U o C en la tercera
posición del RNAm

CARACTERÍSTICAS DE LOS RNAt

•Los RNAt participan en la traducción como las moléculas adaptadoras entre los
RNAm y el polipéptido que se está sintetizando

•Los RNAt se unen al RNAm mediante un apareamiento de bases entre en

anticodón y codón, lo que asegura que el polipéptido en síntesis tenga la secuencia
de AA codificada por la secuencia de nucleótidos en el RNAm

•Además de los nucleótidos comunes, los RNAt contienen nucleótidos modificados

(pseudouridina, inosina, dihidrouridina, 1 metil guanosina, ribotimidina)

AMINOACILACIÓN
•Se refiere a la unión del AA específico al extremo 3´ del RNAt, resultando en
moléculas de aminoacil-RNAt (catalizado: aminoacil-RNAt sintetasas)
RIBOSOMAS
•Son grandes complejos de RNA y proteínas, compuestos por 2 subunidades (60S y
40S)
•Los ribosomas proveen la maquinaria estructural para la síntesis polipeptídica en la
cual los RNA son los principales encargados de la función catalítica del ribosoma;
mientras que los componentes proteicos solo aumentan la función de las moléculas
de RNAr
•60S: contiene 3 tipos de moléculas de RNAr (28S, 5.8S, 5S) y cerca de 50 tipos de
proteínas ribosomales

•Existen 3 sitios de unión para los RNAt en cada ribosoma:

Sitio A o aminoacil: une al aminoacil-RNAt entrante, es decir, el RNAt que lleva el
siguiente AA que se agrega a la cadena polipeptídica en crecimiento
Sitio P o peptidil: al cual se une el RNAt descargado de su AA que saldrá del
ribosoma

SÍNTESIS DE PROTEÍNAS
•INICIACIÓN: implica las reacciones que preceden la formación del enlace peptídico
entre los 2 primeros AA de la proteína
Requiere el ensamblado de un ribosoma a una molécula de RNAm, formando un
complejo de iniciación que contiene el primer aminoacil-RNAt

•ELONGACIÓN: incluye ciclos repetidos de adición de AA, es decir, todas las

reacciones desde la síntesis del primer enlace peptídico hasta la adición del último
AA

•TERMINACIÓN: comprende los pasos requeridos para la liberación de la cadena

polipeptídica recién sintetizada y, al mismo tiempo, la disociación del ribosoma del
RNAm
INICIACIÓN
•En eucariotas, el primer paso del inicio de la traducción incluye:
El ensamblado del complejo de preiniciación, el cual comprende la subunidad 40S
de ribosoma, el RNAtimet, el factor de iniciación eucarióntico eIF-2 y una molécula
GTP

•Una vez ensamblado, el complejo de preiniciación se relaciona con el extremo 5´del

RNAm, resultando en la formación del complejo de iniciación

•El complejo de iniciación avanza sobre el RNAm hasta encontrar el codón de inicio
(AUG), el cual se encuentra contenido dentro de una secuencia consenso corta
5¨-GCCCCAUGG-3´ denominada secuencia Kozak

•Una vez que el complejo de iniciación se posa sobre el codón de inicio, se une la
subunidad 60S

•Esto resulta en el complejo de iniciación 80S, en el cual el RNAtimetocupa el sitio P

del ribosoma

ELONGACIÓN:
esta fase incluye desde la adición del segundo AA hasta el último. Consta de 3
pasos y en ellos intervienen 3 factores proteicos o factores de elongación: eEF-1a,
eEF1bg y eEF-2
•Ubicación del Aminoacil-RNAt en el sitio A
Tras la incorporación del RNAt met al sitio P del ribosoma en el complejo de
iniciación 80S, queda aún vacío el sitio A.
En él se incorporará cada nuevo AA por apareamiento del anticodón con el codón
correspondiente del RNAm

•Transpeptidación: formación del enlace peptídico: enzima: transpeptidasa

(peptidil-transferasa)
•Translocación:
Desplazamiento del ribosoma en un codón
El ribosoma completo se desplaza en sentido 5´-->3´ del RNAm, cada vez un solo
codón, desde su ubicación inicial sobre AUG (eEF-2 o traslocasa)

TERMINACIÓN
•Comprende los pasos necesarios para liberar el polipéptido y al mismo tiempo
disociar el ribosoma del RNAm
•Esto sólo puede ocurrir en respuesta a la presencia en el sitio A de uno de los 3
codones de terminación
•En eucariontas interviene en el proceso un único factor proteico de terminación o
de liberación, eRF (releasing)

•3 pasos:
[Link]ón del factor de liberación
[Link]ólisis del peptidil-RNAt
[Link]ón

BASES MOLECULARES DE LA MUTACIÓN

•Se define a la mutación como una alteración en la secuencia del DNA de un

individuo que se transmite por herencia a sus descendientes

•La forma inalterada del DNA (tipo silvestre), se convierte así en otra forma,
portadora de la mutación o tipo mutante

•Las mutaciones tienen lugar en todo el genoma, incluyendo las secuencias

codificantes o no, genoma nuclear o mitocondrial, en células germinales
(heredables) o somáticas (no heredables). Por lo tanto la mutación es, junto con la
recombinación meiótica, la principal fuente de variabilidad genética en todo tipo de
organismos
Mutaciones inducidas mutágenos:
Agente físico o químico que causa mutaciones

•Físicos

•Químicos

•Biológicos
AGENTES FÍSICOS: Calor -->hidrólisis

RADIACIONES UV: La radiación ultravioleta, componente de la luz solar, provoca la reacción

entre dos residuos de timidina adyacentes en la misma hebra, formando a partir de sus
dobles enlaces anulares un sistema tricíclico con un anillo de ciclobutano, que se conoce
como dímero de timina
•2-amino-purina: actúa en una forma similar, es un análogo de adenina con un
amino-tautómero que aparea con timina (induce una transición (T a C)

–Agentes que provocan deaminación:

•Acido nitroso: deamina A, C y G
•Bisulfito de sodio: deamina C
–Deaminación de A da origen a hipoxantina la cual aparea con C
–Deaminación de C da U el cual aparea con A

–Agentes intercalantes: asociados con inserciones. Son moléculas planas que

pueden deslizarse entre pares de bases en la doble hélice, desenrollan ligeramente
la hélice y por lo tanto incrementan la distancia entre pares de bases adyacentes
•Ej: bromuro de etidio : fluoresce cuando es expuesto a radiación UV y es usado
para revelar las posiciones de bandas de DNA después de la electroforesis de un
gel de agarosa

MUTACIÓN EN CÉLULAS DE LA LÍNEA

GERMINAL
•Se origina en algunas de las divisiones mitóticas o meióticas de la gametogénesis
•La mutación puede no influir en el fenotipo de la célula o individuo que la sufre, ni
en la capacidad reproductiva de este, pero, puesto que el genoma se transmite a la
descendencia, la mutación se hereda, transmitiéndose a todas las células del
organismo hijo y generando alteración o enfermedad hereditaria
MUTACIÓN EN CÉLULAS SOMÁTICAS
•A diferencia de las anteriores, éstas sólo se transmiten a las células hijas (mitosis),
y no a un organismo completo

•Puede afectar a cualquier cromosoma de las células somáticas en cualquier

órgano, tejido o célula aislada durante el desarrollo precoz o final del organismo, o
en su fase adulta

•Nunca son heredables

•La tasa de mutación aumenta por exposición a mutágenos, la edad y la alteración

de los mecanismos de reparación del DNA

•El individuo portador de una mutación somática que se produce después del cigoto,
pero antes de alcanzar el desarrollo completo puede considerarse un mosaico,
término genético que define la presencia de 2 o más líneas celulares distintas
derivadas de un mismo cigoto

MUTACIONES A PEQUEÑA ESCALA O PUNTUALES

•El estudio de las mutaciones en función de su magnitud o longitud se pueden
clasificar de pequeña y gran escala.
Las anomalías de gran escala alteran una región de millones de pares de bases y
se reflejan en la estructura del cromosoma: duplicaciones, deleciones, inserciones,
traslocaciones (anomalías cromosómicas)

Las mutaciones puntuales implican normalmente a un solo nucleótido, son tan

representativas que a veces se asumen como el único tipo de mutación existente
MUTACIONES POR EFECTO EN EL NUCLEÓTIDO

SUSTITUCIÓN
•La mutación consiste en la aparición de un nucleótido en una posición de la
secuencia ocupada originalmente por otro; es un cambio de un solo nucleótido.
•Tanto en DNA codificante como no codificante
Transiciones: son sustituciones de una pirimidina por otra pirimidina (C-->T;
T-->C) o una purina por otra purina (A-->G; G-->A)
Tranversiones: son sustituciones de una purina por una pirimidina o viceversa
DELECIÓN
•Consiste en la pérdida de uno o más nucleótidos de una secuencia. Es común en el
DNA no codificante pero infrecuente en el codificante. Pueden originar un cambio en
el marco de lectura
INSERCIÓN
•Aparición de uno o varios nucleótidos adicionales en una secuencia. Rara en DNA
codificante y común en el no codificante. Ej. expansión de tripletes

EFECTO SOBRE LA SECUENCIA DE LA PROTEÍNA

SINTETIZADA
•El cambio de secuencia del DNA que supone la mutación puede tener distintos
efectos sobre la secuencia aminoacídica codificada y, en consecuencia, sobre la
secuencia de la proteína que se sintetice y su función. Se distinguen mutaciones
silenciosas y no silenciosas

MUTACIONES SILENCIOSAS
•Sinónimas, neutrales, asintomáticas o con sentido. Origina lo que se conoce como
polimorfismo genético

•23-25% de todas las mutaciones en DNA codificante

•Se caracterizan porque a pesar de haber un cambio en la secuencia del DNA, no

se altera la secuencia de su producto proteico (debido a la degeneración del código
genético: varios tripletes o codones codifican un mismo aminoácido)

•Normalmente, la mutación es silenciosa porque afecta a la 3ª base de un codón de

tal forma que el nuevo triplete es sinónimo del original, es decir, codifica el mismo
aminoácido
MUTACIONES NO SILENCIOSAS
•La alteración en la secuencia de nucleótidos afecta la secuencia proteica, pues
codifica uno o varios aminoácidos diferentes de la secuencia original
•Por lo general producen efectos perjudiciales
● Mutaciones que alteran el sentido
● Mutaciones que cambian el marco de lectura
● Mutaciones que no cambian el marco
● Mutaciones con terminación prematura de la proteína
● Mutaciones con terminación retrasada

MUTACIONES QUE ALTERAN EL SENTIDO

•Contrariamente a las mutaciones silenciosas donde la sustitución de una base
origina un nuevo triplete que codifica el mismo aminoácido, es más común que
dicho cambio produzca un nuevo codón que codifica un aminoácido diferente

•Se les llama por eso mutaciones no sinónimas, de sentido equivocado (missense
mutation)

•La mayoría de las mutaciones en regiones codificantes son de este tipo (73%)

•Dentro de las mutaciones de sentido equivocado se distinguen 2 tipos:

[Link]ón conservadora: el aminoácido es sustituido por otro con una cadena

lateral químicamente similar, por lo que el efecto sobre la estructura y función de la
proteína puede ser mínimo.
2. Sustitución no conservadora: el aminoácido es sustituido por otro no similar,
diferente en carga polaridad, tamaño de la cadena lateral, etc
Son no conservadas casi todas las sustituciones en 1ª y 2ª posición de un codón
MUTACIONES QUE CAMBIAN EL MARCO DE
LECTURA
•Afectan de manera importante la secuencia del producto proteico
•El desplazamiento, desfase o cambio del marco de lectura (frameshiff mutation)
consiste en que la inserción o deleción de nucleótidos, aún sin afectar en gran
medida a la secuencia de bases, cambia la forma como se leen los tripletes, por lo
que produce una alteración importante en la secuencia de la proteína

•Se produce un cambio en el marco de lectura cuando hay inserciones o deleciones

de uno o más pares de bases, en número no múltiplo de 3.

•El cambio en la secuencia de aminoácidos se produce a partir de la primera

inserción o deleción, hasta el extremo carboxilo-terminal de la proteína

MUTACIONES QUE NO CAMBIAN EL MARCO

•La inserción o deleción de 3pb en el DNA (o múltiplos de 3), aunque añade o
elimina algún aminoácido, no cambia el marco de lectura, por lo que el resto de la
secuencia aminoacídica es normal
•El efecto de estas mutaciones es mucho menor y puede no afectar a la función de
la proteína

MUTACIONES CON TERMINACIÓN PREMATURA DE

LA PROTEÍNA

•Algunas mutaciones no afectan a la secuencia de aminoácidos codificados, sino

que la sustitución, la inserción o la deleción de uno o varios nucleótidos tiene como
efecto la aparición de un codón de terminación o de paro
•Como consecuencia, se provoca el cese prematuro de la traducción del RNAm y se
obtiene una proteína acortada (en su región C-terminal) que afecta su estructura
tridimencional, su estabilidad y función

•Estas mutaciones también denominadas mutaciones sin sentido (nonsense

mutations) son poco frecuentes (4% de las sustituciones en el DNA codificante)
MUTACIONES CON TERMINACIÓN RETRASADA

•De la misma forma que una mutación puntual puede provocar la aparición de un
codón de terminación, también puede eliminar uno existente sustituyéndolo por otro
que codifica un aminoácido

•En ese caso, la traducción del RNAm continúa más allá del extremo 3´codificante
original, hasta que alcance un nuevo codón de terminación; por lo tanto se sintetiza
una proteína de mayor longitud que no tiene significado estructural ni funcional

REPARACIÓN del DNA

•El DNA dentro de las células sufre un amplio rango de daño, particularmente en
respuesta a agentes extracelulares, pero también pueden ser resultado de
mecanismos endógenos

AGENTES EXTRACELULARES QUE CAUSAN DAÑO AL DNA

[Link]ón ionizante
[Link] Uv
[Link]ímicos ambientales: hidrocarburos, algunas plantas, quimioterapia, agentes
alquilantes

MECANISMOS ENDOGENOS QUE CAUSAN DAÑO AL DNA

[Link]ón
[Link]ón
[Link]
[Link] en la replicación del DNA
[Link] en la recombinación

•Todas esas lesiones deben ser reparadas si la células quiere sobrevivir. La

reparación del DNA pocas veces involucra deshacer simplemente el cambio que
causa el daño (REPARACIÓN DIRECTA). Casi siempre comprende la remoción del
nucleótido(s) dañado con la “remoción” de un segmento de DNA
•Para “arreglárselas” de todas esas formas de daño, las células humanas cuentan
con al menos 5 tipos de reparación de DNA

REPARACIÓN DIRECTA
•Los sistemas actúan de manera directa en los nucleótidos dañados

[Link]ón de las roturas de enlaces fosfodiéster en una sola cadena (SSB),

las cuales repara una DNA ligasa, cuando la rotura no ha dañado los grupos
5´fosfato y 3´OH. Ej Radiaciones ionizantes

[Link] MGMT (O6 metil guanina metiltransferasa): capaz de remover grupos

alquilo de la posición 6 de la guanina.

[Link]ón que depende de la luz de onda visible y de una enzima

denominada fotoliasa, corta los enlaces covalentes C-C que forman el anillo de
ciclobutano (dímeros de timina
GAMETOGÉNESIS
Las células germinales humanas primordiales pueden reconocerse hacia la cuarta semana
de desarrollo fuera del embrión propiamente dicho, en el endodermo de la vesícula vitelina.

Desde allí migran, durante la sexta semana, a las crestas genitales, y se asocian con
células somáticas para formar las gónadas primitivas, que al poco tiempo se diferencian en
testículos u ovarios.

La meiosis femenina se inicia en un momento determinado durante la vida fetal incipiente en

un número limitado de células.

Por el contrario, la meiosis masculina se va iniciando de manera continuada en muchas

células de una población celular durante de la vida adulta del varón.
Espermatogénesis
Los espermatozoides se forman en los túbulos seminíferos de los testículos una vez
alcanzada la madurez sexual.

Los túbulos están revestidos con espermatogonias, que se encuentran en diferentes

estados de diferenciación.

Estas células se han desarrollado a partir de células germinales primordiales mediante una
larga serie de mitosis.

El último tipo celular en la secuencia de desarrollo es el espermatocito primario, que sufre

meiosis I para formar dos espermatocitos secundarios haploides.

Los espermatocitos secundarios entran rápidamente en meiosis II y cada uno forma dos
espermátides, que se diferencian sin dividirse más en espermatozoides.

En el ser humano todo el proceso dura 64 días. El enorme número de espermatozoides

formados, alrededor de 200 millones por eyaculación y 1012 en toda la vida, requiere varios
cientos de mitosis sucesivas.

Ovogénesis
Al contrario que la espermatogénesis, que se produce de manera constante durante la vida
adulta, la mayor parte de la ovogénesis se concentra en el período de desarrollo prenatal

Al contrario que la espermatogénesis, que se produce de manera constante durante la vida

adulta, la mayor parte de la ovogénesis se concentra en el período de desarrollo prenatal

Los óvulos se desarrollan a partir de ovogonias, células de la corteza ovárica que

descienden de las células germinales primitivas por una serie de alrededor de 20 mitosis.

Cada ovogonia ocupa el centro de un folículo en desarrollo. Hacia el tercer mes de

gestación las ovogonias del embrión han comenzado a desarrollarse como ovocitos
primarios, la mayoría de los cuales ya han entrado en la profase de la meiosis I.

El proceso de ovogénesis no está sincronizado, de manera que en el ovario fetal coexisten

estadios incipientes y tardíos. En el momento del nacimiento hay varios millones de
ovocitos, pero la mayoría degeneran y, fi nalmente, sólo maduran unos 400, que son
expulsados mediante la ovulación.

En el momento del nacimiento todos los ovocitos primarios han alcanzado la profase I y los
que no han degenerado permanecerán en esta etapa durante años, hasta que se incia la
ovulación como parte del ciclo menstrual de la mujer.
Después de que la mujer alcanza la madurez sexual, cada folículo crece y madura, y unos
pocos son expulsados con la ovulación (en promedio, uno cada mes).

Cada ovocito completa la meiosis I con rapidez inmediatamente antes de la ovulación,

dividiéndose de forma que una célula se convierte en el ovocito secundario (un huevo u
óvulo), que contiene la mayor parte del citoplasma con sus orgánulos, y la otra
se convierte en el primer corpúsculo polar.

La meiosis II comienza inmediatamente y prosigue hasta la etapa de metafase durante la

ovulación, pero sólo se completa si se produce fecundación.
EMBRIOLOGIA
SEGMENTACIÓN DEL CIGOTO (PRIMERA SEMANA)
La segmentación consiste en divisiones mitóticas repetidas del cigoto, que
determinan un rápido aumento en el número de células.

Estas células embrionarias -blastómeros- van reduciendo su tamaño con cada

segmentación sucesiva

La división del cigoto en blastómeros comienza unas 30 horas después de la

fecundación.

Después del estadio de nueve células, los blastómeros modifican su forma y se

pegan unos a otros formando una bola compacta de células.

Este fenómeno, compactación, probablemente está mediado por glucoproteínas

de adhesión a la superficie celular.

La compactación facilita una mayor interacción entre las células y un requisito

imprescindible para la segregación de las células internas que dan lugar a la masa
celular interna o embrioblasto del blastocisto

Cuando existen entre 12 y 32 blastómeros, el ser humano en desarrollo se

denomina mórula

Las células internas de la mórula (masa celular interna) están rodeadas por una
capa de células que forma la capa celular externa. La mórula esférica se forma unos
3 días después de la fecundación y entra en el útero.
FORMACIÓN DEL BLASTOCISTO
Poco después de que la mórula entre en el útero (aproximadamente 4 días después
de la fecundación), aparece en su interior llena de líquido la cavidad blastocística.

Conforme la cavidad blastocística se llena de líquido, separa los blastómeros en dos

porciones:
•Una capa celular externa y delgada, el trofoblasto (del griego trophe, nutrición),
que da lugar a la porción embrionaria de la placenta.

• Un grupo de blastómeros centrales, la masa celular interna, que da lugar al

embrión; como este es el primordio embrionario, a la masa celular interna se le
llama embrioblasto.

Durante este estadio del desarrollo -blastogenia-, se denomina blastocisto al fruto de

la concepción.

El embrioblasto se proyecta ahora en la cavidad blastocística y el trofoblasto forma

la pared del blastocisto.

Después de que el blastocisto haya flotado en las secreciones uterinas libremente

durante unos 2 días, la zona pelúcida degenera gradualmente y desaparece.

Unos 6 días después de la fecundación (día 20 de un ciclo menstrual de 28 días), el

blastocisto se adhiere al epitelio endometrial, habitualmente cerca del polo
embrionario.

El trofoblasto empieza a proliferar rápidamente, en cuanto el blastocisto se adhiere

al epitelio endometrial, y se diferencia gradualmente en dos capas:

• Una capa interna, el citotrofoblasto.

• Una capa externa, el sincitiotrofoblasto, formada por una masa protoplásmica
multinucleada sin lindes celulares visibles.

Al cabo de irnos 6 días, las prolongaciones digitiformes del sincitiotrofoblasto se

extienden hasta el epitelio endometrial e invaden el tejido conjuntivo.

Al final de la primera semana, el blastocisto se implanta superficialmente en la

capa compacta del endometrio y se nutre de los tejidos maternos erosionados.

El sincitiotrofoblasto produce enzimas que erosionan los tejidos maternos,

permitiendo al blastocisto atravesar el endometrio.

Al cabo de unos 7 días, aparece una capa de células, el hipoblasto (endodermo

primario), en la superficie del embrioblasto que mira hacia la cavidad blastocística
SEGUNDA SEMANA DE GESTACION
A medida que avanza este proceso, los cambios morfológicos del embrioblasto
producen un disco embrionario bilaminar que se compone de epiblasto e hipoblasto

El disco embrionario da origen a las capas germinativas que forman todos los tejidos
y órganos del embrión.

Las estructuras embrionarias que se forman durante la segunda semana son la

cavidad amniótica, el amnios, la vesícula umbilical (saco vitelino), el tallo de
conexión (pedículo de fijación) y el saco coriónico.

La implantación del blastocisto termina hacia finales de la segunda semana y ocurre

en un período restringido de tiempo, entre ó y 10 días después de la ovulación.

A medida que se implanta el blastocisto hay más trofoblasto en contacto con el

endometrio y el trofoblasto se diferencia en:

* El citotrofoblasto, una capa de células con actividad mitotica que origina nuevas
células que, a su vez, emigran hacia la masa creciente del sincitiotrofoblasto, donde
se fusionan y pierden sus membranas celulares.

• El sincitiotrofoblasto, una masa multinucleada, en fase de rápida expansión, sin

claros límites celulares.

El sincitiotrofoblasto erosivo invade el tejido conjuntivo endometrial y el blastocisto

se aloja lentamente dentro del endometrio.

Las células sincitiotrofoblásticas desplazan a las células endometriales en el lugar

de la implantación. Las células endometriales experimentan apoptosis (muerte
celular programada), que facilita la invasión.

El sincitiotrofoblasto engulle estas células degenerativas y proporciona una rica

fuente de nutrición embrionaria.

El sincitiotrofoblasto produce una hormona, la gonadotropina canónica humana

(hCG), que entra en la sangre materna a través de lagunas del sincitiotrofoblasto
FORMACIÓN DE LA CAVIDAD AMNIÓTICA, EL DISCO EMBRIONARIO Y LA
VESÍCULA UMBILICAL

A medida que avanza la implantación del blastocisto aparece un pequeño espacio

en el embrioblasto. Este espacio es el primordio de la cavidad amniótica

Pronto las células amniógenas (formadoras del amnios) -amnioblastos- se separan

del epiblasto y forman el amnios, que encierra la cavidad amniótica.

Al mismo tiempo, ocurren cambios morfológicos del embrioblasto que dan

lugar a que se forme una placa bilaminar y plana, casi circular, de células, el disco
embrionario, compuesto por dos estratos:

• El epiblasto, la capa más gruesa, que se compone de células cilindricas altas

relacionada con la cavidad amniótica.

• El hipoblasto, que consta de pequeñas células cuboideas adyacentes a la

cavidad exocelómica.

El epiblasto crea el suelo de la cavidad amniótica y continúa en la periferia con el

amnios.

El hipoblasto es el techo de la cavidad exocelómica y se prolonga con la delgada

membrana exocelómica

Las células del endodermo vesical forman una capa de tejido conjuntivo, el
mesodermo extraembrionario, que rodea el amnios y la vesícula umbilical.
Este mesodermo continúa formándose a partir de las células provenientes de la
estría primitiva

A medida que se forman el amnios, el disco embrionario y la vesícula umbilical

primaria, aparecen cavidades aisladas -lagunas- en el sincitiotrofoblasto.

La comunicación de los capilares endometriales erosionados con las lagunas

establece la circulación uteroplacentaria primordial.

Cuando la sangre materna fluye hacia las lagunas, proporciona al embrión oxígeno
y sustancias nutritivas.

La sangre oxigenada pasa a las lagunas desde las arterías espirales del
endometrio y la sangre poco oxigenada es eliminada por las venas endometriales.
A medida que se suceden los cambios en el trofoblasto y en el endometrio, el
mesodermo extraembrionario aumenta y aparecen espacios celómicos
extraembrionarios aislados en su interior.

Estos espacios se fusionan enseguida para formar una gran cavidad aislada, el
celoma extraembrionario.

Esta cavidad llena de líquido rodea el amnios y la vesícula umbilical, salvo allí donde
se adhieren al corion a través del tallo de conexión.

DESARROLLO DEL SACO CORIÓNICO

El final de la segunda semana se caracteriza por la aparición de las vellosidades
coriónicas primarias

El crecimiento de estas prolongaciones induce, al parecer, al mesodermo somático

extraembrionario subyacente.

El celoma extraembrionario desdobla el mesodermo extraembrionario

en dos capas:

• El mesodermo somático extraembrionario, que tapiza el trofoblasto y cubre el

amnios.

• El mesodermo esplácnico extraembrionario, que rodea la vesícula umbilical.

El mesodermo somático extraembrionario y las dos capas de trofoblasto forman el

corion.

El celoma extraembrionario se denomina ahora cavidad coriónica.

El saco amniótico y la vesícula umbilical pueden concebirse como dos globos que
se presionan mutuamente (por la zona del disco embrionario) y se encuentran
suspendidos de un cordón (tallo de conexión) proveniente del interior de un globo
mayor (saco coriónico)

El embrión de 14 días sigue teniendo la forma de un disco embrionario bilaminar

plano, pero las células hipoblásticas de una zona localizada son ahora cilindricas y
forman un área circular engrosada, la placa precordal, que indica el lugar futuro de
la boca y representa una guía organizativa importante para la región de la cabeza.
GASTRULACIÓN: FORMACIÓN DE LAS CAPAS GERMINALES

•El endodermo embrionario da lugar a la epidermis, los sistemas nerviosos central

y periférico, los ojos y los oídos internos y, en forma de células de la cresta neural, a
muchos tejidos conjuntivos de la cabeza.

• El endodermo embrionario es el origen de los revestimientos epiteliales de las

vías respiratorias y alimentarias (tubo digestivo), incluidas las glándulas que se
abren al tubo digestivo y las células glandulares de los órganos asociados como el
hígado y el páncreas.

• El mesodermo embrionario da lugar a todos los músculos esqueléticos, las

células sanguíneas y el revestimiento de los vasos sanguíneos, todas las capas
musculares lisas viscerales, los revestimientos sedosos de todas las cavidades
corporales, los conductos y órganos de los aparatos reproductor y excretor, y la
mayor parte del aparato cardiovascular.

En el tronco está el origen de todos los tejidos conjuntivos, incluido el cartílago, los
huesos, los tendones, los ligamentos, la dermis y el estroma de los órganos
internos.
ESTRÍA PRIMITIVA
El primer signo de gastrulación es la aparición de la estría primitiva. A comienzos de
la tercera semana aparece caudalmente, en el plano medio de la cara dorsal del
disco embrionario, una opacidad formada por una banda lineal engrosada del
epiblasto -la estría primitiva.

La estría primitiva se debe a la proliferación y al movimiento de las células del

epiblasto hacia el plano medio del disco embrionario.

Al mismo tiempo, aparece un surco estrecho -surco primitivo- en la estría primitiva,

que continúa con una pequeña depresión del nudo primitivo, la fosita primitiva.

El surco y la fosita primitivos se deben a la invaginación (movimiento interno) de las

células epiblásticas

El mesénquima forma los tejidos de soporte del embrión, como la mayoría de los
tejidos conjuntivos del cuerpo, y el armazón de tejidos conjuntivo de las glándulas.

Parte del mesénquima forma el mesoblasto (mesodermo desdiferenciado), que da

lugar al mesodermo intraembrionario, o embrionario.
PROLONGACIÓN NOTOCORDAL Y NOTOCORDA
La prolongación notocordal crece cranealmente entre el ectodermo y el endodermo
hasta alcanzar la placa precordal, una pequeña zona circular de células
endotérmicas cilindricas donde entablan contacto el ectodermo y el endodermo.

La placa precordal es el primordio de la membrana bucofaríngea, se sitúa en el

futuro lugar de la cavidad bucal y puede también actuar como centro señalizador
para regular el desarrollo de las estructuras craneales.

células mesenquimatosas de la estría primitiva, emigran cranealmente a cada

lado de la prolongación notocordal y alrededor de la placa precordal.

Aquí se reúnen cranealmente para formar el mesodermo cardiógeno en la zona

cardiógena, donde empieza a desarrollarse el primordio cardíaco a finales de la
tercera semana

La notocorda se desarrolla de la siguiente manera:

• La prolongación notocordal se elonga por invaginación de las células de la fosita
primitiva.

• La fosita primitiva se extiende hasta la prolongación notocordal, formando un

conducto notocordal.

• La prolongación notocordal es ahora un tubo celular que se extiende cranealmente

desde el nudo primitivo hasta la placa precordal.

• El suelo de la prolongación notocordal se fusiona con el endodermo embrionario

subyacente.

• Las capas fusionadas experimentan una degeneración gradual que determina la

formación de aberturas en el suelo de la prolongación, por lo que el conducto
notocordal se pone en comunicación con la vesícula umbilical.

• Las aberturas confluyen rápidamente y desaparece el suelo del conducto

notocordal; los restos de la prolongación notocordal forman una placa notocordal
aplanada y surcada.

• Ya en el extremo craneal del embrión, las células notocordales empiezan a

proliferar y la placa notocordal se pliega hacia dentro para formar la notocorda
• La porción proximal del conducto notocordal persiste de forma pasajera como
conducto neuroentéríco, que crea una comunicación transitoria entre las cavidades
amniótica y de la vesícula umbilical.

Cuando termina el desarrollo de la notocorda, se oblitera normalmente el conducto

neuroentérico.

• La notocorda se desprende del endodermo de la vesícula umbilical, que, una vez

más, se transforma en una capa continua.

La notocorda ópera como el inductor primario (centro señalizador) del embrión

primitivo.

La notocorda en desarrollo induce al ectodermo embrionario suprayacente a

engrosarse y formar la placa neural, el primordio del sistema nervioso central (SNC).