Material y equipo Reactivos

Marcador indeleble de punta extrafina. Solución de sulfato de sodio al 23 % P/V en

Probetagraduada de 10 mL.
Micropipetas p20. p200, p1000y p5000, microlitros. agua.
Vasos de precipitados de 100 mL.
Pipetasde0.2,1y5mL Eter etílico.
Gradilla.
Puntas nuevas para las micropipetas. NaOH 0.1N
Termómetro.
Pipetas Pasteur. Solución estándar de albúmina 350
Tubo Vacutainer® con anticoagulante (EDTA).
Centrífuga. mg/100mL de NaOH 0.1N.
Aguja para Vacutainer®.
Balanza analítica. NaOH 1 N.
Papel parafilm.
Espectrofotómetro. Reactivo de Biuret.
Tubos de ensayo de 13 X 100.
Parrilla de calentamiento o estufa.

SEPARACIÓN DE
PROTEÍNAS
PLASMÁTICAS

Preparación de
reactivos
1. Obtener una muestra sanguínea (3-5mL)
por venopunción con un sistema i. Realizar la venopunción penetrando la piel con la aguja
Vacutainer® usando como anticoagulante formando un ángulo de 15° con el brazo y con el bisel 2. Centrifugar el tubo a 3000 rpm durante 5
Reactivo de Biuret. (EDTA). minutos y separar con cuidado el plasma.
hacia arriba se sigue la dirección de la vena; introducir la
Pesar 4.5 g de tartrato doble de a. Preparar el material: tubos, ligadura, aguja con suavidad pero con rapidez para reducir las
sodio y potasio, 2.5 g de yoduro torundas, jeringas (cuando sea necesario) aguja molestias. No hay que “enterrar” la aguja. Si se utiliza una
jeringa, se tira hacia atrás del émbolo, con tensión lenta y 3. Colocar 0.25 mL de plasma en un vaso,
estéril y dispositivo Vacutainer® para fijarla uniforme a medida que la sangre va fluyendo en su adicionar 4.75 mL de sulfato de sodio al
de potasio y 1.5 g de sulfato de b. Identificareltubo interior. Si se utiliza un tubo al vacío, en cuanto la aguja 23% P/V. Tapar y mezclar por inversión tres
cobre pentahidratado. Disolver por c. Colocar adecuadamente al donador haya penetrado en la vena se dirigirá el tubo todo lo veces. Tomar 1 mL de la suspensión y
separado en vasos con d. Solicitar al paciente que cierre al puño para posible hacia delante apoyándose en el dispositivo de colocarlo en un tubo, etiquetar como
que las venas resulten más palpables sujeción (de la misma forma en que se introduce el proteínas totales. Agregar 1.5 mL de éter
aproximadamente 50 mL de agua émbolo de una jeringa). Al mismo tiempo mantenga etílico al resto de la suspensión, tapar y
e.Seleccionar la vena adecuada para la
destilada. De ser necesario calentar firmemente la aguja en su lugar.Una vez que se haya mezclar por inversión (sin agitar),
punción llenado el tubo, se retira tomándolo por su extremo y centrifugar a 2000 rpm durante 10 minutos.
para disolver. Una vez disueltos los
tirando suavemente de él. Se mezcla la sangre con el
tres reactivos dejar enfriar. Colocar f. Limpiar la zona de la punción con una torunda anticoagulante por inversión suave. Si la muestra ha sido
en un matraz aforado de 500 mL, humedecida con alcohol isopropílico al 70%, o extraída con jeringa se transferirá a los tubos 4. Después de la centrifugación, tomar 1 mL de
100 mL de NaOH 1N, después yodopovidona al 1%. Se comienza en el punto de la correspondientes después de retirar la aguja. la capa inferior y colocarlos en un tubo,
etiquetar como albúminas.
agregar en orden cada una de las punción y se prosigue la limpieza hacia fuera j. Cuando la sangre comience a fluir se libera el
soluciones (el cobre al final) siguiendo un movimiento en espiral torniquete. Una vez obtenida la muestra, hay que
mezclar cuidadosamente después g. Aplicar si es necesario un torniquete varios indicar al paciente que relaje el puño y que no 5. Preparar 7 tubos y numerarlos de 1 al 6y a
centímetros por encima de la zona de punción. No “bombee” con la mano. otro nombrarlo blanco. Agregar a cada uno
de cada adición y aforar con agua lo indicado en el cuadro1.
destilada. Se conserva en un frasco dejarlo más de un minuto. k. Coloque suavemente una torunda de algodón
h. Fijar la venatanto, por encima como por debajo del estéril sobre el punto de punción. Se extrae la aguja
ámbar.
lugar de punción, con ayuda de los dedos pulgar y (con un movimiento rápido). y a continuación se 6. Leer en el espectrofotómetro a 540 nm
medio o índice y pulgar. ejerce presión sobre la zona. NO aplique masaje.