ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

VICERRECTORADO ACADÉMICO
DIRECCIÓN DE DESARROLLO ACADÉMICO

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Facultad

FACULTAD DE CIENCIAS

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

BIOLOGIA CELULAR

Profesor: Ing. Verónica Caballero Serrano Ph.D.

PRIMER NIVEL

PRÁCTICA No. 2 “MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO”

1. DATOS GENERALES

NOMBRE: CÓDIGO:

Jessenia Jacqueline Vásquez Castillo 3726

GRUPO N°: 2

FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:

21 de marzo del 2019 28 de marzo del 2019

Riobamba- Ecuador
2019

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 PRÁCTICA No. 2 “MANEJO DEL MICROSCOPIO ÓPTICO”

1. INTRODUCCIÓN

El estudio detallado de los componentes de células y tejidos animales o vegetales,

por el tamaño que poseen, requiere el uso de instrumentos que permitan ampliar
muchas veces más la imagen de las estructuras que los constituyen. El instrumento
que fue empleado por los primeros biólogos para estudiar la célula y los tejidos, es el
microscopio. El nombre deriva etimológicamente de dos raíces griegas: mikrós, que
significa pequeño y skopéoo, que significa observar.
En definitiva un microscopio es “cualquier instrumento que se utiliza para obtener
una imagen aumentada de objetos minúsculos o detalles muy pequeños de los
mismos.”
Así como el telescopio abrió a la humanidad las puertas de lo infinitamente grande,
el microscopio hizo posible conocer los mundos de dimensiones ínfimas, entre ellos la
célula, base de la vida. Se contaban así las bases de las modernas ciencias biológicas
que hasta bien entrada la edad moderna se habían fundado en las observaciones
directas.
Existen dos tipos de microscopios que emplean la luz como fuente de energía
para formar imágenes aumentadas y detalladas de objetos que a simple vista no es
posible observar:
a) Microscopio fotónico simple o lupa: El microscopio simple o lupa es un
instrumento de amplificación de imágenes que consiste en la utilización de una o más
lentes convergentes en un solo sistema óptico. Dependiendo de la curvatura de la
superficie de la(s) lente(s) las lupas pueden ampliar las imágenes de los objetos desde
5, 8,10, 12, 20 y hasta 50 veces. Forman una imagen de mayor tamaño, derecha y
virtual.

b) Microscopio fotónico compuesto: Los microscopios fotónicos compuestos

que se emplean actualmente tienen sus antecesores en los instrumentos ópticos
desarrollados, en el periodo comprendido entre 1590 y 1610, por Hans (padre) y
Zacarías (hijo) Janssen; quienes mediante el tallado cuidadoso de lentes biconvexas
construyeron los primeros microscopios compuestos.

Otros tipos de microscopio más usados:

Microscopio estereoscópico:
Es un tipo de microscopio óptico de bajo nivel de magnificación utilizado principalmente
para disecciones. Cuenta con dos mecanismos ópticos y visuales independientes; uno
para cada extremo de la muestra. Trabaja con luz reflejada sobre la muestra en vez de
a través de esta. Permite visualizar una imagen tridimensional de la muestra en
cuestión.

Microscopio electrónico:
El microscopio electrónico sustituye la utilización de luz visible por electrones como
fuente de iluminación. El uso de electrones genera una imagen digital que permite una
mayor ampliación de la muestra que los componentes ópticos. Sin embargo, grandes
magnificaciones pueden generar una pérdida de fidelidad en la imagen de la muestra.

A partir de esa época, el microscopio es el instrumento más utilizado en el

estudio de células y tejidos. Se fue perfeccionando, tanto en su parte óptica como en su
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parte microscopios antiguos) o el tornillo micrométrico está incorporado en la
circunferencia del tornillo macrométrico (microscopios actuales). Ambos tornillos
permiten el desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo con la finalidad de
acercar o alejar la preparación hacia los objetivos y así conseguir un enfoque óptimo de
la imagen.
El macrométrico produce desplazamientos evidentes y rápidos de la platina, en
cambio el tornillo micrométrico produce movimientos imperceptibles de la platina y sirve
para efectuar el enfoque fino y definitivo de la imagen. En la actualidad los
microscopios tienen incorporados a los mecanismos de desplazamiento de los tornillos
macro y micrométricos, topes de seguridad que impiden que éstos continúen
descendiendo indefinidamente y así se evita roturas y daños a la laminilla y a las lentes
de los objetivos.
El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que
produce al deslizar el tubo o la platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la
preparación. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones de 0,001 mm que se
utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.
Los objetivos se fabrican para ampliar las imágenes de los objetos observados
en diversos aumentos; así se tienen objetivos con aumentos propios de 3.5 x, 4x, 10x,
25x, 40x, 65x y 100x. Algunos objetivos tienen alrededor de ellos una línea coloreada
que indica a simple vista el aumento propio.
Los objetivos también se clasifican de acuerdo al medio que existe entre el
objeto examinado y la lente frontal del objetivo. De acuerdo a esta característica son
secos o de inmersión. Son objetivos secos aquellos que entre el objeto observado y el
objetivo solamente existe el aire; en cambio se denominan objetivos de inmersión
aquellos que requieren que entre la preparación y la lente frontal del objetivo se
coloque una sustancia líquida, ésta puede ser agua, glicerina o un “aceite de
inmersión”, natural como el “aceite de cedro” o aceites artificiales.
Los objetivos están considerados los elementos más importantes en la formación de
la imagen microscópica, ya que estos sistemas de lentes establecen la calidad de la
imagen en cuanto a su nitidez y la capacidad que tiene para captar los detalles de la
misma (poder de resolución). Están constituidos también por un juego de lentes, en
este caso, convergente y divergente, para eliminar, en la medida de lo posible, una
serie de aberraciones que afectarían la calidad de las imágenes formadas.

- Otras partes de la estructura mecánica del microscopio:

El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general
forma de Y o bien es rectangular
El cabezal o tubo óptico. Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido internamente para
evitar las molestias que ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se
colocan los oculares.
El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los
objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en
posición de trabajo, la cual se nota por el ruido de un piñón que lo fija.
La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior
del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y por el extremo inferior se adapta
al pie.
La platina. Es una pieza metálica plana en la que se coloca la preparación u objeto
que se va a observar. Presenta un orificio en el eje óptico del tubo que permite el paso
de los rayos luminosos a la preparación. La platina puede ser fija, en cuyo caso
permanece inmóvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante tornillos
laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
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La Fuente de Luz: Que puede ser natural (a través de un espejo) o artificial (una
lámpara conectado a una fuente de energía eléctrica).
Condensador. El condensador está formado por un sistema de lentes, cuya finalidad
es concentrar los rayos luminosos sobre el plano de la preparación. El condensador se
halla debajo de la platina. El condensador puede deslizarse sobre un sistema de
cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o
descendente.
Diafragma. Generalmente, el condensador está provisto de un diafragma o iris, que
regula su abertura y controla la calidad de luz que debe pasar a través del
condensador.
Propiedades del Microscopio
Poder separador. También llamado a veces poder de resolución, es una cualidad del
microscopio, y se define como la distancia mínima entre dos puntos próximos que
pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos puntos cuando su
distancia es menor a una décima de milímetro. En el microscopio óptico, el poder
separador máximo conseguido es de 0,2 décimas de micra, y en el microscopio
electrónico, el poder separador llega hasta 10 ángstrom.
Poder de definición. Se refiere a la nitidez de las imágenes obtenidas, sobre todo
respecto a sus contornos. Esta propiedad depende de la calidad y de la corrección de
las aberraciones de las lentes utilizadas.
Poder de aumento. En términos generales se define como la relación entre el diámetro
aparente de la imagen y el diámetro o longitud del objeto.
La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama
microscopía.

2.- OBJETIVOS

General:
o Estudiar el microscopio óptico.

Específicos:
o Conocer las partes del microscopio óptico y su función.
o Describir el uso correcto y cuidado del microscopio óptico.
o Observar los microrganismos existentes en una muestra de agua empozada.
EQUIPOS Y MATERIALES
o 4 Placas portaobjetos
o 4 placas cubreobjetos
o Alcohol
o Agua destilada
o Microscopio
o Agua estancada

3.- INSTRUCCIONES

 Elegir un microscopio óptico para el estudio de sus partes y funcionamiento.

 Describir el principio de funcionamiento del microscopio óptico.
 Describir las partes básicas del microscopio
 Explicar la función de cada una de sus partes
 Explicar el poder de magnificación y resolución del microscopio.
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4.- ACTIVIDADES A DESARROLLAR POR LOS ESTUDIANTES

Manipulación del microscopio óptico

1.- Asegúrese de que el objetivo de menor aumento o lupa esté en el eje óptico del
microscopio. Si no es así, colóquelo en su sitio.
2.- Compruebe el sonido metálico que indica que está en su lugar.
3.- Si el condensador es ajustable, asegúrese de que esté arriba (cercano a 2 mm de la
platina) y con el filtro azul puesto (el filtro azul es un dispositivo que selecciona los
rayos de luz más cercanos al azul).
4.- Encienda el microscopio.
5.- Suba la intensidad de la luz si ésta es regulable y abra el diafragma.
6.- Coloque una gota de agua empozada sobre el portaobjetos y una placa
cubreobjetos sobre la muestra. Sitúe la placa sobre la platina.
7.- Desplácela por la platina y sujétela con la pinza. Si la placa está sucia, límpiela
antes de ponerla. Asegúrese de colocar la muestra con el cubreobjetos hacia arriba
(lámina de vidrio delgada).
8.- Centre la muestra.
9.- Utilice el tornillo macrométrico para acercar la platina hasta casi tocar la preparación
(respetando al menos unos 3mm) o bien hasta que la platina llegue a su tope. Mira a
través del ocular o los oculares. Si es un microscopio binocular y es la primera vez que
miras por él, ajuste la distancia interpupilar (que cada ocular quede alineado con tu
pupila), cuando lo hayas hecho observará un único campo centrado, de lo contrario
observará dos.
10.- Con el tornillo macrométrico aleje lentamente la platina del objetivo. En una
determinada posición, el espécimen aparecerá en foco.
11.- Con movimientos finos del micrométrico ajusta el foco a sus ojos. Utilice para su
observación la parte central del campo visual. Centre el espécimen si es necesario y
ajuste el diafragma (o mueve el condensador) de forma que obtenga una iluminación
adecuada (campo claro con iluminación homogénea, si es una muestra al fresco obtén
el mayor contraste posible).
12.- Para pasar a un aumento mayor, gire el revólver, hasta colocar el siguiente
objetivo en el eje óptico. Realice nuevamente el enfoque fino con el micrométrico. No
utilice el tornillo macrométrico con los objetivos de 10x y 40x, para evitar romper la
muestra o dañar los lentes.
13.- Procure no pasar al objetivo de 100x a menos que lo indique su tutor. El uso de
este objetivo necesita la colocación de una gota de aceite de inmersión y una
manipulación extremadamente cuidadosa para evitar romper la muestra y dañar el
lente.
14.- Al finalizar sus observaciones, apague la luz del microscopio (baja la potencia) y
deje el microscopio en posición de reposo: a. Con el objetivo de menor aumento en el
eje óptico. b. Con el condensador en la posición más alta. c. La platina en su posición
más baja. d. El carro atrás centrado y apegado al brazo del microscopio. e. Si es
oportuno, dejar el microscopio en el centro de la mesa (cuida levantarlo y evitar los
golpes o vibraciones, pues descalibran el instrumento).

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 Registro de datos del procedimiento

5.- RESULTADOS OBTENIDOS

Durante la práctica se realizó la observación de diferentes tipos de organismos hallados

en nuestra muestra de agua estancada. Entre ellos:

Algas: Las algas realizan una de las mayores aportaciones de oxígeno al planeta; se
estima que participan con cerca del 50% de la fotosíntesis global. Actualmente el
término alga se refiere a organismos que tienen células con núcleo (Eucariontes) y se
excluyen las algas-verde azules pertenecientes al reino de las bacterias.
Diatomeas: Las diatomeas son algas unicelulares; constituyen el fitoplancton,
importante en la alimentación de diversos organismos. Algunas de ellas pueden vivir en
colonias formando filamentos o cintas, se hallan rodeadas por una pared celular hecha
de sílice llamada frústula.
Amebas: La ameba es un parásito intestinal del tipo Entamoeba histolytica. Son
pequeños organismos que viven como parásitos intestinales en humanos y perros.
Paramecias: Un paramecio (género Paramecium) es un organismo eucariota
unicelular ciliado que pertenece al reino Protista. Existen muchas especies de
paramecios y todos son protozoos ciliados. Son organismos unicelulares
indiferenciados, no existe diferenciación tisular ni celular y la única célula que
comprende cada organismo realiza todas las funciones del individuo.

Imágenes de lo observado:

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  Las algas se visualizaron alargadas y con presencia de cloroplastos.
 Las diatomeas parecían dos burbujas pegadas.
 Las amebas tenían apariencia de gotas aplastadas.
 Las paramecias se distinguieron por su movimiento.

6.- CUESTIONARIO

¿Cuáles es el principio del funcionamiento del microscopio óptico?

El funcionamiento del microscopio óptico se basa en un sistema de lentes cuyo

esquema puedes ver en la imagen adjunta. El microscopio óptico más común hoy en
día es el microscopio óptico compuesto. Este microscopio combina al menos dos
juegos de lentes, el objetivo y el ocular. Por detrás de la muestra hay una lámpara
cuya luz atraviesa la muestra y forma una imagen en el objetivo que es ampliada y
proyectada hacia el ocular. El funcionamiento del objetivo podría asimilarse al
funcionamiento de la lente de un proyector de cine y la forma en la que se proyecta la
imagen sobre la pantalla.
La imagen que proyecta el objetivo se forma en el aire entre el objetivo y el ocular. Esta
imagen se conoce como imagen primaria o imagen aérea. Esta imagen primaria
alcanza el siguiente juego de lentes, el ocular, que actúa como una lupa ampliando la
imagen primaria.
En el funcionamiento del microscopio óptico se producen dos ampliaciones de la
imagen, una en el objetivo y otra en el ocular, llamadas ampliación primaria y
ampliación secundaria respectivamente. La multiplicación de ambas ampliaciones da
el poder de aumento total del microscopio. El objetivo siempre produce un aumento
mucho mayor que el ocular. Además, el ocular suele ser fijo y los objetivos
intercambiables para conseguir diferentes aumentos según la necesidad. Por ejemplo,
un ocular estándar suele tener 10x aumentos, si se combina con un objetivo de 40x, se
obtendrá un aumento total de 400x.

¿Cuáles son las partes del microscopio y su función?

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-OCULAR: Lente situada cerca del ojo del observador (por donde mira). Su misión es
ampliar la imagen del objetivo. Suelen tener dos oculares, por eso se llaman
binoculares, si solo tiene uno se llama monocular.

-El TUBO: El tubo óptico se puede acercar o alejar de la preparación (lo que se quiere
ver) mediante un TORNILLO MACROMÉTRICO o de grandes movimientos que sirve
para realizar un primer enfoque. El tornillo macrométrico permite hacer un movimiento
rápido hacia arriba o hacia abajo del tubo o la platina, y se utiliza para localizar la
imagen a observar.

-REVÓLVER: Contiene los sistemas de lentes objetivos. Permite, al girar, cambiar los
objetivos. La esfera se suele llamar CABEZAL y contiene los sistemas de lentes
oculares (monoculares o binoculares (2 lentes)).

-BRAZO: Es una pieza metálica de forma curvada que puede girar; sostiene por su
extremo superior al Tubo Óptico y en el inferior lleva varias piezas importantes.

-PLATINA: Lugar donde se deposita la preparación que se quiere observar.

Tiene en su centro una abertura circular por la que pasará la luz del
sistema de iluminación.

-OBJETIVO: Lente situada cerca de la preparación. Amplía la imagen de ésta

determinando las cantidad de aumentos con la que queremos observar.

-PINZAS DE SUJECION: Parte mecánica que sirve para sujetar la preparación. La

mayoría de los microscopios modernos tienen las pinzas adosadas a un carro con dos
tornillos, que permiten un avance longitudinal y transversal de la preparación.

- CONDENSADOR: Lente que concentra los rayos luminosos que inciden sobre la
preparación. El condensador de la parte de abajo también se llama FOCO y es el que
dirige los rayos luminosos hacia el condensador.

-TORNILLOS DE ENFOQUE: Macrométrico que aproxima el enfoque y micrométrico

que consigue el enfoque correcto.

-BASE: Sujeccion de todo el microscopio.

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 Sobre la PLATINA se coloca la preparación que se va a observar con un Orificio
central por el que pasa la Luz procedente del Espejo. El espejo con una cara plana y
otra cóncava, está montado sobre un eje giratorio ubicado en la zona más inferior del
brazo por debajo de la Platina.

¿Cuál es el poder de resolución del microscopio óptico y del microscopio

electrónico?

El microscopio óptico tiene un límite resolución de cerca de 200 nm (0.2 µm). Este
límite se debe a la longitud de onda de la luz (0.4-0.7 µm). Las células observadas
bajo el microscopio óptico pueden estar vivas o fijadas y teñidas.

El microscopio electrónico de transmisión (MET) tiene un límite de resolución de

cerca de 2 nm. Esto es debido a limitaciones del lente usado para enfocar electrones
hacia la muestra. Un MET mira a réplicas de células muertas, después de haber sido
fijadas y teñidas con iones de metales pesados. Los electrones son dispersados
cuando pasan a través de una fina sección del espécimen, y luego detectados y
proyectados hacia una imagen sobre una pantalla fluorescente.

El microscopio electrónico de barrido (MEB) también tiene un límite de 2nm. Al igual

que el MET, el MEB permite mirar a células muertas, después de haber sido fijadas y
teñidas con iones de metales pesados. Con esta técnica los electrones son reflectados
sobre la superficie del espécimen.

7.- CONCLUSIONES

En conclusión, el microscopio es un instrumento que facilita observar estructuras y

organismos microscópicos que no nos son visibles a simple vista, así como células de
los seres vivos, organismos, microorganismos, bacterias, etc. Al ser una herramienta
tan factible, tiene un sistema mecánico está constituido por una serie de piezas en las
que van instaladas las lentes que permiten el movimiento para el enfoque,
dependiendo del tamaño de los organismos, el conjunto de lentes está dispuesto de tal
manera que produce el aumento, según se necesite, de las imágenes que se observan
a través de ellas.

8.- RECOMENDACIONES

 Tener siempre un adecuado uso del microscopio, respetando las normas del
laboratorio. Es conveniente que antes de hacer la práctica se debe leer bien las
instrucciones, para que no se cometa ningún error.
 Disponer de una cantidad mayor de muestras, para así tener un mayor
conocimiento y práctica en el manejo del microscopio.
 Disponer de una mayor cantidad de microscopios, para que todos puedan hacer
la práctica individualmente y sin distracciones.

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9. BIBLIOGRAFIA

Area Ciencias. (2017). Area Ciencias. Obtenido de PARTES DE UN MICROSCOPIO:

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Curiosoando. (s.f.). Curiosoando. Obtenido de ¿Cómo funciona el microscopio óptico?:

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Mundo Microscopio. (s.f.). Mundo Microscopio. Obtenido de Aumento del microscopio:

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Soto, I. (23 de Julio de 2018). [Link]. Obtenido de Diferencia entre

Microscopio Óptico y Electrónico: [Link]
microscopio-optico-y-electronico/

University of Arizona . (28 de Octubre de 1998). El Proyecto Biológico . Obtenido de

Guía del estudio celular:
[Link]

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