UNIVERSIDAD AUTÓNOMA GABRIEL RENÉ MORENO

FACULTAD DE CIENCIAS FARMACÉUTICA Y BIOQUÍMICA

CARRERA DE FARMACIA

EVALUACION DE LA ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA DE LOS

EXTRACTOS DE LA SEMILLA DE FOENICULUM VULGARE MILL A
TRAVÉS DE LOS ENSAYOS IN VITRO QUE VALIDEN SU
ACCIÓN FRENTE A CIERTOS MICROORGANISMOS
DURANTE LOS MESES DE ABRIL A OCTUBRE DEL 2023 EN SANTA
CRUZ

DOCENTE: ING. FELIX TORRICO

GRUPO: DF
INTEGRANTES CÓDIGOS
CANDIA VILLCA DANIELA 214004813
HUAYLLA MEDINA MABEL 221002022
LOPEZ GUTIERREZ VANIA 216164168
LUCANA CHOQUE FABIOLA 212175629
MENDIETA RODRIGUEZ ESTEPHANY 219033196

SANTA CRUZ - BOLIVIA

2023

Contenido
UNIDAD #1..................................................................................................................

1
 INTRODUCCIÓN.........................................................................................................

1.1. ANTECEDENTES...........................................................................................

1.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA............................................................

1.4. OBJETIVOS.........................................................................................................

UNIDAD # 2..............................................................................................................

MARCO TEÓRICO...................................................................................................

2.1. CARACTERÍSTICAS DE FOENICULUM VULGARE MILL.

( HINOJO )..................................................................................................................

2.2 BACTERIAS........................................................................................................

2.2.2. Clasificación de las bacterias.......................................................................

2.3 ESTUDIO FITOQUIMICO....................................................................................

2.3.2. Recolección de la muestra vegetal:..............................................................

2.3.3. Secado de la muestra vegetal......................................................................

2.3.4. Trituración de la muestra..............................................................................

2.3.5. Extracción de la muestra vegetal..................................................................

2.3.6. Secado de los extractos...............................................................................

UNIDAD # 3
HIPÓTESIS Y
VARIABLE ............................................................................................................ 32
3.1. HIPÓTESIS DE
INVESTIGACIÓN ............................................................... 32

3.1.2 Hipótesis
nula .......................................................................................... 32

2
 3.2
VARIABLES ...................................................................................................
32

3.2.1 Variable

dependiente ............................................................................... 32

3.2.2 Variable

independiente ............................................................................ 32

UNIDAD #
4 ................................................................................................................................... 33
DISEÑO
METODOLÓGICO ........................................................................................................ 33
4.1 UNIVERSO DE
ESTUDIO ............................................................................. 33

4.2.MUESTRA .................................................................................................
.... 33

4.3.UNIDAD DE
ANALISIS ................................................................................. 33

4.4 TIPO DE
ESTUDIO ........................................................................................ 33

4.5 PARTE

EXPERIMENTAL .............................................................................. 34

4.5.1.

Trituración ...............................................................................................

36

UNIDAD
#5 .................................................................................................................................... 45
RESULTADOS Y
DISCUSIONES ............................................................................................... 45

3
 5.1
EXTRACTO ...................................................................................................
45

5.1.1. Extracto
etéreo ....................................................................................... 45

5.1.2. Extracto
etanolico ................................................................................... 45

5.1.3. Extracto
acuoso: ..................................................................................... 45

5.2
BACTERIAS ..................................................................................................
45

5.3 ACTIBIDAD ANTIBACTERIANA ..................................................................

46

UNIDAD
#6 .................................................................................................................................... 49
CONCLUCIONES Y
RECOMENDACIONES ............................................................................ 49
6.1

CONCLUCIONES ..........................................................................................

49 6.2

RECOMENDACIONES ..................................................................................

49

UNIDAD #
7 ................................................................................................................................... 50
BIBLIOGRAFÍA ..........................................................................................................................
... 50

……………………………………………………………………………

ANEXOS………………………………………………………………………………
…….

4
UNIDAD #1

INTRODUCCIÓN

1.1. ANTECEDENTES
Las plantas fueron utilizadas desde tiempos históricos como medicinas,
aunque no necesariamente con efectividad. (1)
En el antiguo Egipto, los papiros de Ebers listan más de 800 plantas
medicinales, tales como el aloe, cannabis, ricino, enebro y mandrágora,
descritos por sacerdotes.

En la Edad Media, eran practicados por los monjes. En los países

mediterráneos, donde algunas de las supersticiones medievales aún
siguen practicándose, se seguía una costumbre relacionada con este tipo
de leyendas y cuentos: la víspera del solsticio de verano un manojo de
hinojo era colgado de las puertas de las casas, ya que sus moradores
tenían la convicción de que con este remedio ahuyentaban a los malos
espíritus (2).

En Bolivia desde los periodos de Tiahuanco (400-1145) se describen

hechos de uso de plantas medicinales, descritos por los denominados
Kallawayas conocidos también como los chamanes de la zona andina.
Estos tenían el poder de utilizar la magia y las plantas medicinales para
curar las enfermedades. (3)

5
Actualmente en Bolivia el uso de plantas medicinales a evolucionado
contando con respaldo de Ministerio de salud y deportes de Bolivia quien
cataloga como medico naturista quienes siguen la medicina tradicional
ancestral que elaboran y recetan plantas y productos hechos a base de
elementos obtenidos de la naturaleza. (4)

En Santa Cruz las plantas medicinales se comercializan principalmente

en los mercados. Las plantas medicinales se producen a gran escala por
tener propiedades altamente curativas, dispensados por los naturistas
quienes ofrecen tratamientos naturales para mejorar las distintas
enfermedades que afectan a las personas.

1.2. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1.2.1. Características del problema

El padecimiento de enfermedades infecciosas es muy común en

nuestro medio debido a la exposición constante con diferentes tipos
de bacterias y a la alta humedad que presenta el ambiente. Las
enfermedades infecciosas son causadas por la presencia y
multiplicación de bacterias en el tejido del huésped, siendo mortal
en grupos etarios como: los niños menores a 5 años, adultos de la
tercera edad y personas inmunosuprimidas. Según la OMS un 30%
de niños menores de 5 años mueren a causa de diferentes
infecciones.
Por lo que se cataloga un problema de salud pública.

1.2.2. Pregunta del problema

¿Tendrá actividad antibacteriana los extractos obtenidos de la
semilla de Foeniculum vulgare Mill (Hinojo) ?

1.3.JUSTIFICACIÓN

Entre un 60-70% de los antibióticos que se prescriben de forma

ambulatoria adquieren resistencia. Generalmente es causa del propio

6
paciente, quien llevo un tratamiento incompleto o se automedico, lo que
permite que en un posterior tiempo estas bacterias adquieran resistencia a
los antibióticos y la infección persista. (5) Debido a la presencia de
microorganismos resistentes a tratamientos antimicrobianos y la poca
información que se conoce en nuestro medio sobre las plantas naturales
surge la necesidad de desarrollar nuevos agentes antimicrobianos
(antibióticos) a partir de plantas.

1.4. OBJETIVOS

1.4.1. Objetivo general

Evaluar la actividad antimicrobiana los extractos de la semilla de
Foeniculum vulgare Mill a través de los ensayos in vitro que validen su
acción frente a ciertos microorganismos durante los meses de abril a
octubre del 2023 en Santa Cruz.

1.4.2. Objetivos específicos

• Extraer los componentes químicos de la muestra vegetal por medio

del uso de solventes como el éter, etanol y agua.
• Evaluar la actividad antimicrobiana frente a las cepas Gram
positivas como Staphylococcus aureus y Staphylococcus
epidermidis
• Evaluar la actividad antimicrobiana frente a las cepas Gram
negativas como: Escherichia coli y Salmonella sp.

7
UNIDAD # 2

MARCO TEÓRICO

2.1. CARACTERÍSTICAS DE FOENICULUM VULGARE MILL.( HINOJO )

2.1.1. Clasificación taxonómica

La clasificación taxonómica es la siguiente:
Nombre científico Foeniculum vulgare
Reino Plantae
Clase Magnoliopsida
Orden Apiales
Familia Apiaceae
Genero Foeniculum
Especie Foeniculum vulgare mill
Nombre común Hinojo

2.1.2. Descripción morfológica

8
El Foeniculum vulgare Mill. conocida con el nombre de Hinojo. Quienes
no la conozcan, pueden confundirla con maleza es una planta perenne,
especialmente porque tiende a crecer de manera silvestre en cunetas,
bordes de caminos, terrenos baldíos y áreas cercanas a la costa, pero
posee características que son fácilmente identificables. Sus hojas se
asemejan a las plumas, sus flores son de un llamativo color amarillo y en
conjunto con su tallo y bulbo, se extiende sobre los suelos secos en forma
de rosetones.

El tallo es largo puede llegar a medir hasta 250 cm y de él se

desprenden ramificaciones de hasta 50 flores, protegidas por
suaves hojas, que albergan pequeñas semillas alargadas y curvas
de donde brota el indiscutible olor anisado del hinojo. (6)

• La raíz: Sirve a la planta para absorber agua del suelo, así

como sustancias nutritivas. Además, sujeta al ejemplar al
lugar donde se encuentra.
• Hojas: Con forma alargada son pecioladas, envainadoras,
presentan extremos divididos en numerosa lacinias que
tienden a endurecerse para evitar la pérdida de humedad.
• Tallo: Es erguido, forme, cilíndrico o tubular ligeramente
surcado, de color verde claro o blanquecino. Sirve
principalmente para transportar el agua y los nutrientes
absorbidos por la raíz hacía las hojas de la planta, por la
forma de su sección pueden ser redondos
• Inflorescencia: Son Umbelas compuestas y largas, flores
pequeñas de color amarillo, con 10 a 40 florecillas.se ubican

9
 en posición terminal sobre un pedúnculo fino y dilatado. (Ver
Figura 1)
Figura1.Inflorescencia del Foeniculum vulgare Mill.

• Fruto: Son diaquenios, de perímetro circular y tamaño

variable según la variedad. La más pequeña mide cerca de
6mm de longitud. Fruto de color pardo oscuro hasta
negruzco, con 5 costillas bien marcadas de color claro.(Ver

figura 2) (7)

Figura 2: Frutos del Foeniculum vulgare Mill

2.1.3. Distribución geográfica

Esta planta crece en los márgenes de los caminos, en campos de
cultivo, lugares húmedos, matorrales y está presente a nivel del mar
y hasta los 1200 metros de altitud. Actualmente se encuentra
distribuido prácticamente por todo el mundo y en algunas zonas
actúa como especie invasiva, desplazando a la flora autóctona. (7)

2.1.4. Formas de cultivo

Las plantas más vigorosas son las que crecen en suelos
permeables y con luz del sol durante todo el día, aunque pueden
adaptarse a otros medios. Suele ser sembrado en primavera. Una
vez recolectadas sus semillas, se dejan secar y se guardan en un
lugar fresco y seco de manera hermética. (7)

10
2.1.5 Componentes químicos
La presencia de compuestos fenólicos es significativa; destacan los
ácidos fenólicos derivados del ácido cinámico, el extracto
metanólico presenta un 15% de ácido rosmarínico y casi 7% de
ácido clorogénico. Los flavonoides también son compuestos
abundantes en el hinojo;isoquercetina y quercetina3-arabinósido;
kaempferol, como kaempferol-3arabinósido y kaempferol-
3glucurónido; e isorhamnetina, sobre todo isorhamnetina-
3glucósido. (7)

2.1.6 Usos medicinales

Los usos del hinojo en fitoterapia, Bruneton indica que las semillas
se emplean de forma tradicional por sus propiedades carminativas
en el tratamiento sintomático de desórdenes digestivos, tales como
flatulencia, digestiones lentas, así como en procesos dolorosos por
trastornos digestivos. Distintos extractos de hinojo, sobre todo
acuoso y metanólico, han demostrado poseer actividad
antimicrobiana y antiviral in vitro, llegando incluso a afirmar que el
consumo de hinojo disminuye el riesgo de paceder enfermedades
como la tuberculosis. Poseen las siguientes propiedades:

• Propiedad carminativa: contribuye a expulsar los gases del

intestino y remedia la sensación de distensión abdominal.
Suele tomarse en infusión de sus semillas después de las
comidas.
• Propiedad diurética: favorece la eliminación de líquidos.
• Propiedad galactógena: estimula la producción de leche
durante la lactancia materna.
• Propiedad emenagoga: el hinojo puede favorecer la
menstruación por el aumento de flujo sanguíneo en la zona
pélvica.

11
 Uso externo: actúa como antiinflamatorio y reepitelizante. Sus hojas
se pueden usar como un antiséptico local o cicatrizante. (7)

2.2 BACTERIAS
Las bacterias son microorganismos unicelulares que se reproducen por
fisión binaria. La mayoría son de vida libre, a excepción de algunas que
son de vida intracelular obligada, como Chlamydias y Rickettsias. Tienen
los mecanismos productores de energía y el material genético necesarios
para su desarrollo y crecimiento. Las bacterias integran el reino procariota
(pro de primitivo y cariota de núcleo). Todos los organismos vivos se
pueden dividir en dos tipos celulares: eucariotas y procariotas. Tienen
estructuras en común como la membrana celular, los ribosomas
encargados de la síntesis proteica y el ácido desoxirribonucleico (ADN)
portador de la información genética.

2.2.1 Clasificación de bacterias

Las bacterias pertenecen al grupo de organismos considerados
como procariotas, carecen de un núcleo limitado por una membrana
y de mitocondrias entre otras características. Sin embargo, tienen
una estructura superficial compleja que rodea a la membrana
celular y le da rigidez, por lo que se le denomina “pared celular
bacteriana”. Su membrana proporciona una barrera osmótica y de
transporte activo que mantiene las concentraciones de iones
apropiadas evitando su rotura con los cambios de iones (cuadro 1-
1). La composición de la pared celular es responsable de
características en las bacterias que son útiles y determinantes para
su taxonomía, clasificación y entendimiento de la fisiopatogenia. (8)

2.2.2. Clasificación de las

bacterias

Se pueden clasificar según:

Bacterias según su forma:

12
 • Cocos (esféricas u ovaladas)
• Bacilos (cilíndrica o de bastones; rectos o curvos)
• Espirilos (espiral); dentro de estas últimas se encuentran:
Treponema, Borrelia y Leptospira.

Bacterias según su agrupación:

Depende de su morfología

• Cocos
• Diplococo
• Cocos en cadenas
• Cocos en racimos
• Cocos en tétradas
• Cocobacilos
• Bacilos
• Bacilos bordes redondeados
• Bacilos bordes rectos
• Bacilos fusiformes
• Bacilos curvos
• Espiroquetas. (8)
Figura 4. Clasificación de bacterias por agrupación según su
forma

13
 Fuente: Pirez M, 2016

Bacterias según su pared celular

A partir de la tinción de Gram:

• Gram positiva: Posee una parde celular gruesa sin una

membrana externa. Se tiñe color purpura.
• Gram negativa: Posee una pared celular delgada con una
membrana externa. Se tiñe color rojo. (9)

Figura 5. Clasificación de las bacteria según la tinción de Gram de

la pared celular

Fuente: A. Villegaz, 2015

2.2.2 Bacterias patógenas

• Streptococcus pyogenes
El género Streptococcus, comprende un grupo de bacterias
grampositivas, muchas de ellas forman parte de la microbiota
normal y otras tantas son patógenas para el humano. S. pyogenes,
es un microorganismo anaerobio facultativo, con forma de coco,
grampositivo, que tiende a agruparse en cadenas.Es una bacteria
que coloniza garganta o piel y es responsable de un amplio
espectro de enfermedades que van desde una faringitis, infecciones

14
 de la piel (impétigo, erisipela, celulitis), escarlatina, hasta poner en
peligro la vida como es el caso de la neumonía,
fascitisnecrotizante, síndrome de choque tóxico
estreptocócico(SST) y de secuelas no supurativas como la fiebre
reumática, artritis reactiva y glomerulonefritis.

Es la causa más frecuente de faringitis, la trasmisión ocurre de

persona a persona por medio de gotitas de saliva emitidas durante
la tos, estornudos o incluso la conversación. Este tipo de trasmisión
es eficaz a distancias cortas (60 a 150 cm), diseminándose
ampliamente en poblaciones cerradas (grupos familiares y
escolares, orfelinatos, campamentos militares, entre otros). La
mayor incidencia de la infección se observa durante los meses de
otoño e invierno. Los portadores asintomáticos (< 1%) también
pueden ser fuente de trasmisión, en particular si se encuentran
colonizando fosas nasales y orofaringe.

Otras bacterias patógenas relevantes:

• Bacillus cereus
Es un agente bacteriano causa importante de enfermedades de
transmisión alimentaria en las personas. Los alimentos asociados a
brotes de intoxicación son carnes y vegetales estofados, cremas,
sopas y brotes de vegetales crudos, y especialmente el arroz
hervido o frito y la pasta. Puede provocar un síndrome emético
causada por la toxina cereulida preformada en el alimento y
relativamente termoresistente o una toxiinfección diarreica causada
por proteínas enterotóxicas.

Es un patógeno esporular ubicuitario en el medio ambiente y se

encuentra en suelos, aguas y habitualmente en una gran variedad
de materias primas y productos tanto de origen vegetal como
animal.

15
• Campylobacter
La campilobacteriosis es una zoonosis causada por la infección de
Campylobacter. Es una enfermedad de transmisión alimentaria que
sufre el ser humano principalmente por la manipulación y el
consumo de pollo contaminado por diferentes especies de
Campylobacter. Sin embargo, la enfermedad también se puede
contraer por contacto con mascotas y animales de granja y por el
consumo de agua contaminada o de leche cruda. En muchos
casos, se contrae en viajes a zonas de prevalencia elevada.
La campilobacteriosis está asociada a gastroenteritis aguda o dolor
abdominal. La aparición de síntomas de la enfermedad en general
se produce de dos a cinco días después de comer un alimento con
estas bacterias, pero puede variar de uno a diez días. Los síntomas
son diarrea (aguada o con sangre), fiebre, malestar general,
náuseas y/o vómitos y dolor abdominal.
• Clostridium
Clostridium es un género de bacterias anaerobias formadoras de
esporas productoras de toxinas. Están ampliamente distribuidas en
la naturaleza, y sus esporas se encuentran habitualmente en
suelos, al polvo, al medio acuático y forman parte de la flora
intestinal de animales y personas, en consecuencia, pueden estar
presente en una amplia gama de alimentos. Alteran un amplio
abanico de alimentos en el que se incluyen los productos lácteos,
los productos cárnicos y derivados de la carne de aves, la fruta y
los vegetales frescos y conservados; con la producción
característica de gas y olor pútrido.
Principal causante de tipos de botulismo.
• Listeria
Listeria monocytogenes es una bacteria que puede causar una
enfermedad transmitida por los alimentos, la listeriosis.

16
 Es una bacteria ampliamente distribuida en la naturaleza. Los
animales y el ser humano actúan, en general, como portadores
subclínicos. Es muy resistente en el medio ambiente y a menudo es
muy difícil de erradicar en establecimientos de fabricación de
productos alimenticios.
Listeria monocytogenes, a diferencia de otras bacterias, es
resistente al frío, se multiplica a temperaturas de refrigeración (de
2ºC a 6ªC) hasta alcanzar cifras significativas. Soporta
temperaturas de pasteurización bajas pero las temperaturas de
cocción, de más de 65ºC, la matan. Es frecuente encontrar L.
monocytogenes en alimentos que han sufrido un tratamiento
térmico y que se vuelven a contaminar posteriormente.
La probabilidad de enfermar por la ingestión de L. monocytogenes
es mayor en los grupos de población vulnerables - personas con
inmunodeficiencia, personas mayores, mujeres embarazadas y
niños recién nacidos - que en la población general.
Las mujeres embarazadas deben evitar comer productos
susceptibles de contener Listeria, porque la Listeria se puede
transmitir al feto por la placenta, o al bebé por el canal del parto,
con consecuencias graves, ya que se ha asociado a meningitis,
parto prematuro, aborto y muerte. (10)

2.2.3 Antibióticos
• El cloranfenicol es una droga bacteriostática que sigue
siendo útil en los tratamientos de enfermedad de Carrión o
bartonelosis (fase aguda), fiebre tifoidea (actualmente se
prefiere a las fluoroquinolonas), meningitis aguda purulenta
(combinado con ampicilina) y para algunas casos de sepsis
abdominal (combinada con otros antibióticos) y peste.
• La clindamicina es útil en el tratamiento del acné; abscesos
(pulmonar, cerebral, pélvico y abdominal), siempre

17
 combinado con otros antibióticos; también en los casos de
toxoplasmosis ocular y cerebral en VIH (combinada con
sulfas), piodermitis mixta por estafilococo y estreptococo, pie
diabético (combinado con ciprofloxacina u otra
fluoroquinolona); malaria por Plasmodium falciparum
(combinado con quinina) y enfermedad inflamatoria pélvica
(combinado con ciprofloxacina u ofloxacina).
• La amoxicilina (antibiótico de amplio espectro) posee mayor
absorción que la ampicilina, y el doble del nivel circulante y
mayor vida media. Por ello se usa cada 8 horas e, incluso,
se puede aumentar la dosis y usarla dos veces al día, con
ello los gérmenes que tienen cierta resistencia
(neumococos, por ejemplo) responden adecuadamente.
• La amoxicilina-ácido clavulánico tiene las mismas
indicaciones que la amoxicilina y es útil para profilaxis en
cirugía y para algunas infecciones

por anaerobios en mordeduras de humanos o animales, en

patología odontoestomatológica y tuberculosis
multidrogorresistente, entre otras.
• La tetraciclina sigue siendo droga de elección en el
tratamiento del acné, cólera aguda, balantidiasis, brucelosis
(combinado con estreptomicina), clamidiasis, linfogranuloma
venéreo, peste, neumonía comunitaria leve a moderada,
enfermedad inflamatoria pélvica (combinada con
metronidazol o clindamicina).
• La rifampicina droga de elección en el tratamiento de la
tuberculosis (junto con otros antibióticos), es útil en la
brucelosis (combinada con tetraciclina), infecciones severas
por Staphylococcus aureus, endocarditis (combinado con
oxacilina), verruga peruana (monoterapia), quimioprofilaxis

18
 del meningococo (en caso de resistencia a las sulfas). Su
uso tópico no se recomienda y se prefiere siempre
combinarla para evitar la resistencia. (11)

2.2.4 Bacterias de prueba

2.2.4.1 Staphylococcus aureus

a) Clasificación taxonómica

Dominio Bacteria

Filo Firmicutes

clase Bacilli

Orden Bacillales

Familia Staphylococcaceae

Genero Staphylococcus

Especie S. aureus

b) Descripción morfológica

Tiene forma de coco y puede aparecer en parejas, en cadenas o en

racimos.(ver figura 6). Su tamaño oscila entre 0,8 y 1,5 micrómetros
(µm) de diámetro, es inmóvil y algunas cepas producen una cápsula
externa mucosidad que aumenta su capacidad para producir
infección.

19
 Figura 6. Staphylococcus aureus

c) Diagnostico

La sospecha del agente etiológico causante de la infección, por lo

que se requiere del aislamiento y la identificación de S. aureus a
partir de muestras clínicas. Entre dichas muestras se encuentra en
la sangre, tejidos, líquidos normalmente estériles, aspirados de
abscesos, las cuales al ser teñidas con la tinción de Gram permiten
observar la forma y agrupación, así como una respuesta
inflamatoria con la presencia de leucocitos polimorfo nucleares d)
Identificación

La identificación de S. aureus se realiza con el empleo de la tinción

de Gram, pruebas bioquímicas como: prueba de la catalasa,
fermentación de glucosa, que permite diferenciar al género
Staphylococcus del género Micrococcus, que también se considera
una catalasa positiva pero no fermenta la glucosa.

d)Enfermedades que ocaciona

Las infecciones causadas por S. aureus se producen por lesiones

cutáneas, traumáticas o quirúrgicas que favorecen la penetración
de la bacteria desde la piel a los tejidos profundos. Las infecciones
por S. aureus son supurativas y tienden a producir abscesos.
Debido a su amplia versatilidad, esta bacteria es capaz de causar

20
 enfermedades de amplio espectro como infecciones menores de la
piel e infecciones invasoras serias como: bacteriemia, infecciones
del sistema nervioso central, osteomielitis, infecciones del tracto
respiratorio, infecciones del tracto urinario y el síndrome de choque
tóxico, así como infecciones gastrointestinales. S. aureus puede ser
la causa de infecciones del sistema nervioso central. La meningitis
piógena estafilocócica.

e) Tratamiento

Actualmente más del 90% de las cepas son resistentes a la

Penicilina, a Ampicilina y Amoxicilina.

La Meticilina fue el primer compuesto de esta serie. Le siguieron la

Oxacilina y la Cloxacilina, y actualmente el más empleado es la
Dicloxacilina. Este fármaco es de elección en infecciones
profundas. A nivel hospitalario algunas cepas han desarrollado
resistencia, pero en la comunidad esto es muy raro. (12)

2.2.4.2 Staphylococcus epidermidis

a) Clasificación taxonomica

Dominio Bacteria

Filo Firmicutes

Clase Basilli

Orden Bacillales

Familia staphylococcaceae

Genero Staphylococcus

Especie S. epidermidis
21
b) Descripción morfológica

Cocos Gram-positivos arreglados en grupos.presentan una forma

esférica, se agrupan en racimos y son inmóviles.

epidermidis

Figura 7. Staphylococcus epidermidis

c) Enfermedades que ocasiona

Debido a la falta de información sobre el ciclo de vida de S.

epidermidis , se han realizado muchos estudios para identificar los
mecanismos de patogénesis y las infecciones relacionadas de este
microorganismo . Esta bacteria se conoce como la principal causa
de infecciones de dispositivos de implantes médicos, como
catéteres intravenosos (CVC) periféricos o centrales .Según
investigaciones realizadas en Estados Unidos, al menos 5 casos de
infecciones del torrente sanguíneo de 1000 CVC en UCI, el 22% de
las infecciones mencionadas están correlacionadas por
Staphylococcus epidermidis . Por otro lado, este microorganismo
puede desempeñar un papel importante en las infecciones de
derivaciones, articulaciones protésicas, injertos vasculares y sitios
quirúrgicos. Queratitis ocular y endoftalmitis por lentes de contacto
contaminadas, infecciones de catéter urinario; La bacteriemia, la

22
 mediastinitis y otras infecciones están asociadas con S.
epidermidis. La presencia de alta frecuencia de S. epidermidis en la
microflora de la piel humana, la colonización extensa de las células
epiteliales y también diversos factores de virulencia pueden
considerarse como las principales razones de estas infecciones.

d)Tratamiento
A pesar del tratamiento con antibióticos y la eliminación de los
factores infecciosos relacionados, las infecciones de los implantes
médicos son extremadamente resistentes a los agentes
antimicrobianos. Aunque la profilaxis antimicrobiana es un remedio
importante para prevenir (BAI), el problema preocupante es la
aparición de resistencia a los antibióticos. El estudio de Archer y
Tenenbaum demostró que el uso generalizado de antibióticos en
pacientes de cirugía cardíaca como profilaxis elevaba el rango de
resistencia de S. epidermidis.a agentes betalactámicos como la
meticilina, sin embargo se requieren nuevas estrategias para
prevenir y tratar las infecciones relacionadas

e) Profilaxis

Manteniendo las zonas críticas desinfectadas, Tanto los familiares,

paciente y el personal médico deben lavarse las manos con
frecuencia sobre todo cuando manipulen material estéril y pacientes
inmunocomprometidos. (13)

2.2.4.3 Escherichia coli

a) Clasificación taxonómica

Dominio Bacteria

Filo Proteobacteria

Clase Gammaproteobacteria

23
Orden Enterobacterales

Familia Enterobacteriaceae

Genero Escherichia

Especie E. coli

Escherichia coli es un bacilo gram negativo, anaerobio facultativo

de la familia Enterobacteriaceae, tribu Escherichia, cuyas
principales características bioquímicas.

Esta bacteria coloniza el intestino del hombre pocas horas después

del nacimiento y se le considera un microorganismo de flora normal,
pero hay cepas que pueden ser patógenas y causar daño
produciendo diferentes cuadros clínicos, entre ellos diarrea. Para
determinar el grupo patógeno al que pertenecen Kauffman
desarrolló un esquema de serotipificación que continuamente varía
y que actualmente tiene 176 antígenos somáticos (O), 112
flagelares (H) y 60 capsulares (K). El antígeno “O” es el
responsable del serogrupo; la determinación del antígeno somático
y flagelar (O:H) indica el serotipo, el cual en ocasiones se asocia
con un cuadro clínico en particular. En la actualidad existen 6
categorías principales de E. coli que ocasionan diarreas:

b) Descripción morfológica

24
 Bacilo Gram negativo. No forma esporas, Móviles (flagelos
perítricos). Miden 0.5 µ de ancho por 3 µ de largo. Catalasa
positivos. Oxidasa negativos. Reducen nitratos a nitritos. , Producen
vitamina B y K.

Figura 8. Escherichia coli

c) Enfermedad que causa

La E. coli productora de diarrea es aquella con características de

virulencia que le permite lesionar las células intestinales o alterar la
función del intestino.

Las E. coli enterotoxigénica, enteropatogénica y con adherencia

difusa producen diarreas acuosas en tanto las E. coli
enteroinvasiva y enterohemorrágica producen diarrea con sangre.

d) Tratamiento

La estrategia de prevención más exitosa debe enfocarse más hacia

la reducción o eliminación de los microorganismos que a la
prevención de su proliferación, como hacen los enfoques más
tradicionales.

25
 La E. coli productora de diarrea es generalmente sensible a los
antimicrobianos específicos contra los gérmenes gramnegativos,
pero no es necesario su uso para la curación pues este agente es
habitualmente autolimitado. Por otra parte se ha probado que la
resistencia a los antibióticos frecuentemente va codificada en los
mismos plásmidos que transmiten las propiedades virulentas.

Entre los antibióticos que se mantienen una alta actividad frente a

E. coli se encuentran las cefalosporinas de segunda y tercera
generación, fosfomicina, aminoglucósidos y amoxicilina-ácido
clavulánico. No obstante, esta última combinación presenta en
algunas áreas porcentajes de resistencia crecientes. (14)

2.2.4.3 Salmonella sp
a) Clasificación

Dominio Bacteria

Filo Proteobacteria

Clase Gammaproteobacteria

Orden Enterobacterales

Familia Entorobacteriaceae

Genero Salmonella sp

b) Descripción morfológica

El género Salmonella pertenece a la familia de las

Enterobacteriaceae, está integrada por bacilos Gram negativos,
anaerobios facultativos, no esporulados, generalmente móviles por

26
flagelos perítricos que utilizan citrato como única fuente de carbono
y poseen metabolismo de tipo oxidativo y fermentativo

Figura 9. Salmonella sp

Fuente: Parra, 2002

c) Vías de transmisión

El principal reservorio de Salmonella es el intestino de humanos y

animales, pero el organismo también se ha identificado en reptiles e
insectos. Existe una amplia gama de fuentes de infección por
Salmonella; los huevos, la carne, los productos lácteos, las
8
verduras y el agua son los más importantes. En los países
desarrollados la fuente más común de infección son los alimentos.

D) Diagnostico

La diarrea, la fiebre y los calambres estomacales severos son

síntomas comunes, en el caso de salmonelosis, estos síntomas se
presentan entre 6 a 72 horas después de haberse ingerido algún
alimento contaminado con la bacteria. La enfermedad dura de 5 a 7
días y la mayoría de las personas afectadas no necesitan
tratamiento, sólo con el tiempo se mejoran.

e) Enfermedad que ocasiona

Las infecciones causadas por Salmonella deben dividirse en
enfermedades menores y mayores. La salmonelosis menor
causada por cepas de

27
Salmonella no tifoideas se caracteriza por diarrea auto limitada, que
rara vez produce bacteriemia o meningitis. La salmonelosis mayor
está representada por la fiebre tifoidea. El cuadro clínico de la fiebre
tifoidea incluye fiebre, dolor de cabeza, malestar general y, en
ocasiones, tos.

Una de las fuentes de infección que se desarrolla con más rapidez

proviene de los huevos contaminados con Salmonella. Un ave de
aspecto sano transmite la infección a sus huevos antes de que se
forme la cáscara. En el noreste de los Estados Unidos, uno de cada
10.000 huevos puede estar contaminado. Esta situación es menos
común en otros estados. Afortunadamente, las instituciones
estatales y la industria de los huevos están trabajando para
identificar las aves infectadas y separarlas de la provisión de
huevos. (15)

f) Tratamiento

El comportamiento de los aislamientos de Salmonella spp. mostró

que el 4.4% fueron resistentes al ácido nalidíxico, 39.6% a
ampicilina, 3.3% a cefalotina, 16.5% a cloramfenicol, 7.7% a
gentamicina, 14.3% a kanamicina,
16.5% a estreptomicina, 37.4% a tetraciclina
y 26.4% a trimetoprimsulfametoxazole.

Puede administrárseles ciprofloxacino, azitromicina o ceftriaxona

durante varios días. A los niños se les administra trimetoprima-
sulfametoxazol. A las personas con bacteriemia se les administran
antibióticos como ciprofloxacina o ceftriaxona aproximadamente
durante 2 semanas. (16)

28
2.3 ESTUDIO FITOQUIMICO

2.3.1 Selección de la muestra vegetal:

Se deben tomar en cuenta ciertos aspectos
-Si es posible que la muestra vegetal sea una planta
silvestre, para que así tenga más producción de principio
activo

-Se debe tomar en cuenta la edad de la planta, debe de tener

una edad intermedia, ni muy vieja , ni muy joven , para que
así el principio activo este en su punto optimo

-Estado vegetativo, dependiendo que tipo de órgano se

requiera de la planta se debe tomar en cuenta las estaciones
del año como por ejemplo las semillas se recolectan cunado
estén los frutos maduros

-Para la selección de la planta se debe tomar en cuenta que

no estén cerca de lugares contaminados como (orillas de

carreteras, lugares cerca de grandes cultivos o próximos a

industrias) -Identificar bien la planta con ayuda de fotografías

o libros

2.3.2. Recolección de la muestra vegetal:

Se debe recolectar dos muestras:

-Muestra científica: Para identificación botánica de la planta

-Muestra de biomasa: Para la investigación fotoquímica.

Durante la recolección se debe tomar en cuenta y registrar los

siguientes datos:

1. Lugar geográfico
2. Medio natural

29
 3. Etapa de desarrollo
4. Edad de la planta

2.3.3. Secado de la muestra vegetal

Una vez recolectada la muestra vegetal se somete a procesos de
desecación por lo que es recomendable secar a temperatura
ambiente y bajo sombra Métodos de secado

a) Secado natural
 Bajo sombra
 Al sol
b) Secado artificial
 Se realiza con calor artificial, se utiliza en lugares
húmedos o a nivel industrial
Equipos de secado

 Estufas o cabinas de desecación

 Estufa al vacio
 Microondas
 Infrarrojo
 Liofilizador
 Tuneles de desecación

2.3.4. Trituración de la muestra

Tiene como finalidad reducir el tamaño de la muestra vegetal en
partículas de menor dimensión, para facilitar la extracción.

Se lleva a cabo mediante diferentes técnicas, en función de las

propiedades físicas de la muestra vegetal, tales como dureza,
adhesividad, elasticidad.

Métodos de trituración

30
 a) Trituración por comprensión:
 Para drogas quebradizas: frutos y semillas
 Mecanismo: por presión
 Equipo: molino de rodillo
b) Trituración por impacto:
 Para drogas quebradizas: frutos y semillas
 Mecanismo: por impacto
 Equipo: molino de martillo
c) Trituración por corte:
 Para drogas fibrosas: cortezas, raíces, tallos, etc.
 Mecanismo: por corte
 Equipo: molino de cuchilla
d) Trituración por fricción:
 Para drogas quebradizas:
 Mecanismo: por fricción
 Equipo: molino de bolas

2.3.5. Extracción de la muestra vegetal

Es sacar o quitar de forma más selectiva y lo más completo posible los
compuestos químicos, que tiene una planta o muestra vegetal.

Factores que influyen en la extracción:

a) Tipo de solvente: un solvente ideal, es aquel que es:
-Eficiente
-Selectivo
-Estabilidad química
-Facilidad de eliminación
-No toxico
-Que no contamine el medio ambiente
-Disponible y barato

31
 b) Estado de agregación o tamaño de partícula: Cuanto menor sea
el tamaño de la partícula de la muestra vegetal, mayor es la
eficiencia de la extracción.
c) Agitación: La eficacia de la extracción es función de equilibrio
de saturación del solvente, es decir nos ayuda a extraer en
menor tiempo.
d) Temperatura: A mayor temperatura mayor la solubilidad de la
sustancia, por lo tanto, es la eficacia de extracción. En lo
posible la extracción se debe realizar a temperatura ambiente,
para evitar la degradación de sus principios activos

e) PH: Muchas sustancias que contienen la plantas tienen

propiedades acidas o básicas, por lo tanto, su extracción
también se debe realizar en estos medios.
Métodos de extracción:

a) Extracción mecánica: Es una extracción mediante prensado, se

utiliza principalmente para drogas carnosas como ser frutos
(zumos de cítricos, caña de azúcar, etc.)
b) Extracción con solvente (solido – liquido): Se utiliza un
disolvente para extraer o disolver los compuestos químicos que
tiene la planta. Estos a la vez se clasifica en: Método de
extracción parcial y exhaustiva. b1) Método de extracción
parcial: Son los métodos que extraen de forma incompleta los
compuestos químicos de una planta, entre ellos tenemos:

o Maceración: Es la exposición de la muestra vegetal en

un determinado solvente (remojar) a temperatura
ambiente, durante un periodo de tiempo con agitación
ocasional.

32
 o Re-maceración: Es cuando la operación de la
maceración se repite varias veces, utilizando la misma
muestra vegetal cambiando solo el solvente
o Digestión: Es la maceración a una temperatura

ligeramente superior a la del ambiente 40 – 50 C

o Infusión: Se realiza colocando la muestra vegetal en un
solvente caliente a una temperatura de ebullición del
solvente durante 5 – 10 minutos. o Conocimiento:
Consiste en hacer hervir la muestra vegetal en un
solvente determinado durante 5 – 10 minutos
o Arrastre con vapor de agua: Consiste en disolver y
arrastrar los componentes químicos de una planta
utilizando vapor de agua.
Este método se utiliza para extraer aceites esenciales.

b2) Métodos de extracción exhaustiva:

o Percolación: consiste en un lavado continuo de la
muestra vegetal con un solvente determinado. Su
desventaja es que utiliza grandes cantidades de
disolvente
o Soxhlet: se conoce como una percolación cíclica porque
utiliza el mismo solvente varias veces, por ello utiliza
poca cantidad de solvente. Es utilizada para extraer
sustancias que no son termolábiles, y cuando se quiere
extraer en forma completa.

2.3.6. Secado de los extractos

Es la eliminación completa del solvente, se puede hacer en forma
natural o artificial:

33
 1. Natural: hacer que se seque el solvente del extracto a
temperatura del ambiente
2. Artificial: se utiliza un liofilizador, el secado de los extractos se
realiza a temperaturas bajas, se utiliza para extractos acuosos.

2.3.7. Evaluación de actividad bilógica

2.3.8.

UNIDAD # 3

34
 HIPÓTESIS Y VARIABLE

3.1. HIPÓTESIS DE INVESTIGACIÓN

Los extractos obtenidos de la semilla del Foeniculum vulgare (Hinojo)
poseen actividad antimicrobiana frente a cepas de bacterias gram
positivas y gram negativas

3.1.2 Hipótesis nula

Los extractos obtenidos de la semilla de Foeniculum vulgare
(Hinojo) no poseen actividad antimicrobiana frente a cepas de
bacterias gram positivas y gram negativas.

3.2 VARIABLES

3.2.1 Variable dependiente

 Antibacteriana

3.2.2 Variable independiente

 Tipos de extractos
 Cepas de bacterias gram positivas y gram negativas

UNIDAD # 4

DISEÑO METODOLÓGICO

4.1 UNIVERSO DE ESTUDIO

Son plantas medicinales con actividad antimicrobiana de Santa cruz de la
Sierra

35
4.2.MUESTRA
Es una planta de la familia apiaceas o umbelíferas del cual se selecciono
la semilla
Foeniculum vulgare (Hinojo)

4.3.UNIDAD DE ANALISIS
Identificación de actividad antimicrobiana con los extractos ( etéreo ,
etanólico y acuoso)

4.4 TIPO DE ESTUDIO

Prospectivo : este tipo de estudio posee una característica fundamental
que es la de iniciarse con la exposición de una supuesta causa y luego
seguir a través del tiempo a una población determinada hasta determinar
o no la causa del efecto
El inicio del estudio es anterior a los hechos estudiados
Los datos se recogen a medida que van sucediendo

⮚ Descriptivo : en este estudio los datos son utilizados con la finalidad

descriptiva no busca la relación causa – efecto Genera hipótesis
etiológica

⮚ Transversal : en este tipo de estudio los datos de cada sujeto

representa un momento en el tiempo
No puede establecerse relaciones causales porque el factor se
recoge simultáneamente

⮚ Experimental: en este tipo de estudio el investigador asigna un

factor de estudio y lo controla a lo largo de la investigación Busca
una relación causa – efecto
Evalúan efecto de las intervenciones
4.5 PARTE EXPERIMENTAL

4.5.1. Selección de la muestra vegetal

36
 Se seleccionó a esta planta por su frecuente uso en nuestro medio,
pero al no encontrase muchos estudios científicos sobre su
actividad antimicrobiana, decidimos ponerla en investigación.

4.5.2. Recolección de la muestra vegetal

Una vez seleccionada la planta se continuo con el proceso

de recolección de la muestra vegetal, que ha sido
recolectada de la provincia florida en el municipio de pampa
grande, km 375 de la ciudad de santa cruz.

37
 La muestra vegetal se encontraba plantada en un terreno de
suelo arcilloso y en un clima templado, sin estar próximas a
carreteras ni a industrias que son factores que pueden
contaminar la muestra vegetal,

La muestra vegetal se encontraba en la etapa de

florecimiento y derramado de semillas, lo que fue muy
ventajoso en su recolección, la planta tiene una edad de
aproximadamente 4 años lo cual es una edad intermedia, ni
muy vieja, ni muy joven y así garantizando que su principio
activo se encontraba en su punto óptimo.

4.5.3. secado de la muestra vegetal:

La muestra vegetal recolectada ha sido secada en un

ambiente natural bajo sombra, durante un mes y medio.

4.5.4 Trituración

38
 La trituración se llevo a cabo en nuestras propias casas, se realizo
“el método de trituración por impacto” utilizando como herramienta
un molino de piedra, previamente limpio y desinfectado y así fue
como redujimos la muestra vegetal a las dimensiones más
pequeñas posibles.

4.5.5Extracción de los compuestos químicos

Para la extracción de los compuestos químicos de la muestra

vegetal se utilizó 3 tipos de solventes “etéreo, etanólico y acuoso”, y
se empleó el método por re – maceración.

39
 25 g de droga seca y molida

Extraer con 200 ml de éter

hasta agotamiento

Extracto etéreo

Torta agotada con éter, seco

Extraercon 200 ml de etanol

hasta su agotamiento

Extracto etanólico

Torta agotada con etanol, seco

Extraer con 200 ml de agua hasta

su agotamiento

Extracto acuoso

40
4.5.5.1 Obtención del éter de petróleo a partir de gasolina:

Para la obtención del

éter de petróleo se llevó 5L de gasolina a laboratorio, se
verifico que el equipo de destilación este en perfectas
condiciones y seguidamente se procedió a vaciar la gasolina
al balón el cual estaba sobre un manto calefactor ,
continuando con el trabajo se encendió el equipo y se
empezó a calentar la gasolina, verificando que la
temperatura no exceda de los 60 C y no baje de los 50 C,
posteriormente se puso un matraz en la parte inferior del
equipo de destilación para recoger el éter de petróleo ,el
matraz tenía como base un vaso de precipitado con hielo
picado , esto con el objetivo de enfriar el solvente y evitar
que se evapore, una vez que se llenaba el matraz con el éter
de petróleo recogido se procedía a vaciar a nuestras botellas
de ámbar previamente limpias.

41
 De toda la gasolina destilada se obtuvo 2,4 L de éter de
petróleo, y seguidamente se sellos las botellas y se envolvió
con bolsas negras para evitar que se evapore o pierda
concentración por el contacto directo con la luz.

Fue así como ya teníamos listo nuestro éter para el re –

maceración

4.5.5.2. Extracción con éter:

Con la muestra vegetal ya triturada se

puso 25 gr de esta en un frasco de
vidrio y luego se agregó el éter de
petróleo 2 dedos arribas de la
muestra, y se dejó reposar con el
frasco de vidrio bien cerrado, se dejo
reposar por un tiempo de 2 días con

42
 previa agitación, pasado los 2 días se procedió a filtrar el
macerado obtenido a otro frasco, y al frasco que tenía aun la
muestra vegetal se agrego nuevamente éter de petróleo 2
dedos arriba de la muestra, se dejó reposar nuevamente por
2 días , transcurrido este tiempo se filtró el macerado al
frasco donde ya se encontraba el éter del primer lavado,
seguidamente se sacó la muestra vegetal del frasco y se
dejó secar hasta que se evapore todo el éter que haya
quedado en esta

4.5.5.3. Extracción con alcohol al 96%:

Una vez ya seca la muestra vegetal se

continua con la maceración etanólico , al
igual que con el éter se agrega a un frasco
de vidrio y se agrega etanol 2 dedos arriba
de día muestra, se deja reposar por un
tiempo de 2 días con previa agitación, una
vez que ya paso los 2 días se empieza a
filtrar el macerado en otro frasco, y al
frasco que tenía la muestra vegetal se le
agrega nuevamente etanol 2 dedos
arribas de la muestra vegetal , y se deja
reposar por un tiempo de 2 días ,
terminado este tiempo se procede con la
filtración del macerado al primer frasco
que ya tenia el etanol del primer lavado ,
se saca la muestra vegetal del frasco y se
deja secar sobre una superficie hasta que
se evapore todo el etanol.

43
 En la extracción con
agua se sigue con los
mismos pasos

4.5.6. Secado de los extractos:

El secado de los extractos lo hicimos de forma natural

Secado del extracto etéreo: En el

secado el extracto etéreo fue sencillo
que este se evaporara en el tiempo de

44
 1 semana y media, pero no seco del todo, porque en la superficie
quedo de un aspecto aceitoso

Secado etanólico: En el secado del extracto etanólico de igual

manera se evaporo dentro de un tiempo de unas 3 semanas,
quedando los restos de la muestra vegetal en las paredes del
frasco, del cual tuvimos que raspar los restos para obtenerlo en
forma de polvo y pasarlo a un vial pequeño

Secado acuoso: En el secado del extracto acuoso fue un poco más

moroso, ya que este en el tiempo de 2 semanas no reducía su
volumen ni se evaporaba, entonces
llevamos a baño maria en el cual en el
tiempo de unas 6 horas se redujo y
quedo por las paredes el residuo del
extracto, del cual raspamos de las
paredes el residuo y pasamos a un vial
mucho más pequeño.

4.5.7.Evaluación de actividad
antimicrobiana:
45
Se realizó una valoración de la actividad antibacteriana mediante el
cultivo de los
extractos secos con Agar Mueller Hinton en cepas Gram positivas y
negativas

a) Preparación del material lavar el material del vidrio: cajas Petri,

pipetas, tubo y matraces. Envolver en papel madera la caja Petri y
pipetas, y colocar cinta de control de esterilidad Esterilizar el
material en autoclave (120 C, 1.5 Atm y 15 min.) el material
envuelto en papel madera, frascos con tips, tubos, frascos con agua
destilada y matraz con medio de cultivo.

b). Preparación de la suspensión bacterianas pesar el caldo soya

tripticasa de acuerdo a las instrucciones del frasco, suspender en

agua destilada y esterilizar. Colocar 1 – 3 ml del medio de cultivo en

tubos con tapón de algodón estériles, inocular en cada tubo con

una asada las diferentes bacterias y homogenizar incubar por 8

horas a 35 C, ajustar la población bacteriana de 3x10^6ufc/ml con

agua destilada estéril o solución fisiológica.

c). preparación del extracto presar con precisión en un vial el

extracto crudo de la planta (10mg), luego se solubiliza con 100 ml

de DMSO.

d). preparación del medio de cultivo preparar 10 ml de medio agar

Muller Himton, pesar y disolver en agua destilada, autoclavar a 121
C, 1.5 Atm por 15 minutos, dejar enfriar hasta 45 C, adicionar
asépticamente el extracto preparado, agitando suavemente la
mezcla para homogenizar, posteriormente vaciar en cada caja Petri
(10 cm de diámetro) y esperar hasta que solidifique.

46
 e) Preparación de la caja Petri la base de la cada caja Petri,
con un marcador se divide en 4 – 6 secciones, dependiendo del
numero de bacterias con las que se trabaja, marcando una línea
para delimitar la zona del cultivo de cada microorganismo.

f) inoculación bacteriana en las cajas.

Inocular 10 ul de cada una de las suspensiones bacteriana

preparadas: staphylococcus aureus, Escherichia coli y otros con los
cuales quiere experimentar, en las mismas cajas. El sembrado de
las bacterias se realizará por estrías y no debe ser hasta el centro
de la caja, pues hay peligro de contaminación. Una vez sembrado
con todos los microorganismos, incubar tapa abajo a 35 C por 16
horas. Además, se debe hacer el control de esterilidad, utilizando el
medio de cultivo; control positivo utilizando gentamicina en una
concentración de 10 ug/ml, y control del crecimiento del medio puro,
sembrando con bacterias

g) lecturas de prueba en caja Petri la lectura se realiza por

visualización de inhibición o crecimiento de los microorganismos

comparando con el control de crecimiento, la lectura es

cualitativa
Cepas utilizadas
BACTERIAS GRAM
Staphylococcus aureus (+)
Sthaphylococcus epidermidis (+)
Escherichia coli (-)
Salmonella sp (-)

47
UNIDAD #5

RESULTADOS Y DISCUSIONES

5.1 EXTRACTO

5.1.1. Extracto etéreo

De 25 gr de muestra vegetal se obtuvo 6gr de extracto etéreo, que
equivale a un rendimiento de 24 %

6/25 x 100% = 24%

5.1.2. Extracto etanólico

De 25gr de muestra vegetal se obtuvo 2gr de extracto etanólico,
que equivale a un rendimiento de 8%

48
 2/25 x 100 = 8%

5.1.3. Extracto acuoso:

De 25gr de muestra vegetal se obtuvo 4gr de extracto acuoso, que
equivale a un rendimiento de 16

4/25 x 100% = 16%

5.2 BACTERIAS
Cuadro 1. Extracto sembrado con bacterias Gram positivas y negativas
Extracto acuoso Extracto etanólico Extracto etéreo

1. Staphylococcus aureus.(Gram positivo), son redondas de bordes lisos,

húmedas y brillosas.

2. Staphylococcus epidermidis.(Gram positivo ) colonias medio amarillas

3. Escherichia coli.(Gram negativo ), colonias circulares, opacas de tamaño

pequeños

4. Salmonella.(Gram negativo) colonias opacas, medio trasparentes

Fuente: Elaboración propia

5.3 ACTIBIDAD ANTIBACTERIANA

Cuadro 2. Evaluación de la actividad antimicrobiana del extracto etanólico de
la semilla de Foeniculum vulgare (Hinojo)
Extracto etanólico Resultado

49
 Extracto etanólico = se
observó crecimiento
Control de esterilidad= sin crecimiento
Control de crecimiento= se observó
crecimiento
Control antibiótico= Sin crecimiento

Fuente; elaboración propia

Interpretación: No se observó actividad antimicrobiana en el extracto

etanólico por lo que creció en las placas de DMSO, extracto y control de
crecimiento.

Cuadro 3. Evaluación de la actividad antimicrobiana del extracto acuoso de la

semilla de Foeniculum vulgare (Hinojo)
Extracto Acuoso Resultado

50
 Extracto acuoso= se
observó crecimiento

Control de esterilidad= sin crecimiento

Control de crecimiento= se observó

crecimiento

Control antibiótico= Sin crecimiento

Fuente: elaboración propia

Interpretación: No se observó actividad antimicrobiana en el extracto

acuoso por lo que creció en las placas de DMSO, extracto y control de
crecimiento.

Cuadro 2. Evaluación de la actividad antimicrobiana del extracto etéreo de

la semilla de Foeniculum vulgare (Hinojo)
Extracto Etereo Resultado

Extracto etereo= se
observó crecimiento

Control de esterilidad= sin crecimiento

Control de crecimiento= se observó

crecimiento

Control antibiótico= Sin crecimiento

Fuente: elaboración propia

Interpretación: No se observó actividad antimicrobiana en el extracto
etéreo por lo que creció en las placas de DMSO, extracto y control de
crecimiento.

51
UNIDAD #6

52
 CONCLUCIONES Y RECOMENDACIONES

6.1 CONCLUCIONES
• Se evaluó la actividad antimicrobiana de los extractos (etéreo,
etanólico y acuoso de Foeniculum vulgare (hinojo), el cual no
presento inhibición de crecimiento bacteriano ante ninguna de las
cepas, demostrando que no es recomendable para un tratamiento
infeccioso.
• Se extrajo los compuestos de 25 gr de muestra vegetal por medio
del uso de solventes donde se obtuvo extractos ; etéreo 2g,
etanólico 2g y acuoso 2g.
• Se evaluó la actividad antimicrobiana ante Staphylococcus aureus y
Staphylococcus epidermidis cepas gran positivas, observándose
crecimiento normal de las bacterias por lo que se confirma ausencia
de propiedad antimicrobiana.
• Se evaluó la actividad antimicrobiana ante Escherichia coli y
Salmonella cepas gran negativas, observándose crecimiento
normal de las bacterias por lo que se confirma ausencia de
propiedad antimicrobiana.

6.2 RECOMENDACIONES
• Indicar nuevos métodos de extracción que se puedan aprovechar
para consolidar la información de estudios posteriores
• Realizar estudios con otras partes morfológicas que tiene
Foeniculum vulgare
• Utilizar otras técnicas de extracción, para mayor obtención de
principio activo del Foeniculum vulgare

53
UNIDAD # 7

BIBLIOGRAFÍA

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2OMS. [Online].; 2012 [cited 2023 octubre 12. Available

from:
1https://www.google.com/search?
gs_ssp=eJzj4tDP1TewMDEoV2A0YHRg8OLMz
.
y1WKE7MKU0BAEsWBo4&q=oms+salud&oq=oms+&gs_lcrp=EgZjaHJvb
WUqD
QgCEC4YxwEY0QMYgAQyBggAEEUYOTIMCAEQABgUGIcCGIAEMg0
IAhAuG
McBGNEDGIAEMgcIAxAAGIAEMgcIBBAAGIAEMgcIBRAAGIAEMgcIBh
AAGIA EMgcIBxAAGIAEMg.

56
2clinic M. Mayo Clinic. [Online].; 2018 [cited 2023 octubre 10. Available
from:
2https://www.mayoclinic.org/es/diseases-conditions/
urinary-tract. infection/symptoms-causes/syc-20353447.

ANEXOS

ANEXO 1
PRUEBA MICROBIOLOGICA
1. PREPARACION DE MATERIALES

57
 • Cajas Petri
• Pinzas
• Vaso de precitados
• Pipetas
• Micro pipetas
• Asa de siembra
• Varillas
• Viales
• Indumentaria (bata quirúrgica, barbijo, gorro, propie, guantes).

Todo el material a utilizar debe estar previamente esterilizado.

2. PREPARACION DE LA MUESTRA

Pesar extracto seco en 2

Tarar la balanza
viales estériles, 10mg en
analítica
cada uno

Medir 100 Mezclar por 5 Realizar el proceso

microlitros de minutos hasta con los 3 extractos por
DMSO y agregar al disolver el 2 veces cada uno
extracto extracto

58
 3. PREPARACION DEL MEDIO DE CULTIVO

Calentar a baño Dividir las cajas petri

Agar Mueller
Hinto María a 45° hasta
fundición

Vaciar el AMH y el No tapar completamene

extracto diluido hasta que gelifique

Agitar en
forma de
infinito

4: INOCULACION DE LAS BACTERIAS EN LA CAJA PETRI

1.Sembrar en orden 2.Acondicionar con papel madera

3.Incubar a 35° por 24 horas

Controles de prueba:

59
 1:CONTROL
DELMEDIODECULTIVO

Tubocon de Calentar
a Vaciara cajapetriy agitar Acondici
Agar Mueller 45°hasta enformadeinfinito onaren
Hinton fundición papel
madera
incubar
a 35°
por24horas

2:CONTROL
DELCRECIMIENTO
BACTERIANO
Dividiren4
Calentar
a cuadrantes las
2 Tubosdeagar baño María 2 cajas petri y
MuellerHinton hastafundición señalar con
letrasde
abecedario
VaciarelAMH Sembrar Acondicionar
agitarenform bacteriassegún enpapel
deinfinitoy ordenasignad madera e
esperarque e estríapor incubara 35°
gelifique agotamiento por24horas

3:CONTROL
DELDISOLVENTE

Vaciae AM Sembr
ryDMS l agita
H ar
bacteriasegú
enO forma
r sorden n Acondicionar en
de
infinito asignado
e estría papel madera e
incubar a 35° por 24
yesperqu por
agotamien horas
ar e to
4 CONTRDEANTIBIOTIC
Coloca
: OL
r20 microlitrL O: 2 Tubos Calentaa
0
deos
DMSO de
agar rbaño
en
cada vial con Mueller
Hinto María
hastfundició
la
micropipe n a n
2. tubos de HMGta 3 Calentar a baño María a 45° hasta fundición

60
4. Medir gentamicina en 5.Vaciar el AMH y Gentamicina agitar en forma de un vial
estéril infinito y esperar que gelifique

6.Sembrar bacterias según orden 7.Acondicionar en papel madera

e asignado e estría por agotamiento incubar a 35° por 24
horas

61