PRÁCTICA 3. DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO.
3.1. Objetivo
El alumno al término de esta práctica comprenderá que el valor del hematocrito sirve
para confirma el diagnostico de diferentes enfermedades y patologías, como es el caso de
las anemias y la policitemia.
3.2. Fundamento
El estudio llamado Hematocrito es una determinación que mide el volumen que ocupan
los eritrocitos en muestras de sangre capilar o venosa.
3.3. Material biológico
• Sangre venosa procedente de una punción venosa y tratada con anticoagulante
EDTA o sangre capilar obtenida por punción con lanceta.
3.4. Material por equipo de trabajo
3.4.1. Método de Wintrobe (Macrohematocrito)
• Tubo de Wintrobe graduado de 0-100 mm (0-10 cm)
• Pipetas Pasteur
• Equipo para venopuncion (Tubo lila)
• Centrifuga o soporte Wintrobe
• Gradilla
3.4.2. Microhematocrito
• Lanceta (en caso de obtener sangre capilar)
• Tubos capilares azules o rojos
• Plastilina
• Encendedor o cerillos
• Microcentrifuga
• Lector de microhematocrito (escala estandarizada)
3.5. Reactivos y soluciones
• Alcohol al 70%
3.6. Desarrollo
1
3.6.1. Método de Wintrobe (Macrohematocrito) [14]
Procedimiento:
1. Obtener sangre venosa con EDTA y homogenizar adecuadamente la muestra de
preferencia en un mezclador automático.
2. Utilizando una pipeta Pasteur llenar el Tubo de Wintrobe (Figura 5) hasta la marca
superior de 10 cm o 100 mm que dependerá del tubo que se use. Comenzar desde
el fondo del tubo Wintrobe y a medida que se va llenando de sangre debe irse
elevando la pipeta Pasteur, trate de evitar la formación de burbujas.
A) B)
Figura 5. Material para realizar el Método de Wintrobe. Tubo Wintrobe
marcado de 0 a 10 cm. (A); Soporte Wintrobe (B).
3. Tapar el tubo con un tapón de goma (opcional) para evitar la evaporación duran
te la centrifugación.
4. Centrifugar a 2500-3000 rpm durante 30 minutos.
5. Leer en la escala ascendente del tubo de Wintrobe tomando en cuenta la columna
de eritrocitos, mientras que la capa de plaquetas y leucocitos se excluyen.
6. Leer directamente de la graduación la columna de glóbulos rojos y anotar
resultados, la lectura se debe reportar en porcentaje, que corresponde al volumen
total ocupado por los eritrocitos. Registrar sus resultados en la sección 3.7.
3.6.2. Microhematocrio.
Procedimiento:
2
1. Utilice tubos capilares de 7 cm de largo por 1.1 mm de grosor (Figura 6), llenar las ¾
partes del capilar, con sangre venosa con EDTA bien homogeneizada (capilar azul sin
heparina) o sangre obtenida del talón o del dedo (capilar rojo heparinizado).
Figura 6. Tubos capilares. Vía venosa (capilares azules); vía capilar o
dérmico (capilares rojos).
2. Cerrar la punta del tubo capilar sellando a la llama del mechero o con serillo (evite
quemar el paquete globular) o con plastilina (el sello debe quedar interno y plano en
la punta).
3. Utilizar la microcentrífuga, 5 minutos a 10,000 rpm (Figura 7) o bien colocar en
posición vertical durante una hora.
Figura 7. Microcentrígua para tubos capilares.
4. Los capilares se deben leer uno por uno (si por alguna razón los capilares no se leen
inmediatamente después de la centrifugación, deben colocarse en posición vertical
hasta que se lean). La lectura se hace colocando el tubo capilar utilizando lector de
microhematocrito (Figura 6). Las capas de plaquetas o leucocitos se excluyen tanco
3
como sea posible. Existen disponibles instrumentos especiales para la lectura que tiene
algunos fabricantes de centrífugas.
Figura 6. Lector de microhematocrito.
5. Registrar sus resultados en la sección 3.7.
3.7. Resultados
3.7.1. Registrar los resultados del Método Macrohematocrito
Fecha:___________________
Estudio realizado a:
Método utilizado:
Resultados:
_______________________% Hto
_______________________________
Responsable
4
3.7.2. Registrar los resultados del Método Microhematocrito
Fecha:___________________
Estudio realizado a:
Método utilizado:
Resultados:
_______________________% Hto
_______________________________
Responsable
VALORES DE REFERENCIA (Adultos entre 20 y 50 años, viviendo al nivel del mar)
HOMBRES 40 – 54 %
MUJERES 37 – 47 %
5
3.8. Cuestionario
I. ¿Cómo se debe reportar en un informe de laboratorio?
II. ¿Cuáles son los valores normales del hematocrito?
III. ¿En qué causas patológicas el hematocrito esta elevado?
IV. ¿En qué causas patológicas el hematocrito esta disminuido?
V. ¿Existen otros métodos para evaluar la velocidad de sedimentación
globular además de los descritos en esta práctica?
VI. Menciona 5 causas de error que se pueden presentar en esta técnica.
VII. Mediante una rigurosa investigación bibliográfica elabora el formato de un
reporte de laboratorio que incluya tus resultados.
6
RÚBRICA DE REVISIÓN DEL REPORTE
PRÁCTICA 6. DETERMINACIÓN DE HEMATOCRITO
Parte I
Carece de algún Carece de algún
Cumple lo requerido, No presenta o es
aspecto requerido, aspecto requerido,
Presentación y ortografía deficiente en
Resumen Presentación y Presentación y
adecuada muchos aspectos
ortografía adecuada ortografía inadecuada
5 3 1 0
Carece de algún Carece de algún
Cumple lo requerido, No presenta o es
aspecto requerido, aspecto requerido,
Presentación y ortografía deficiente en
Introducción Presentación y Presentación y
adecuada muchos aspectos
ortografía adecuada ortografía inadecuada
15 10 5 0
Carece de algún Carece de algún
Cumple lo requerido, No presenta o es
aspecto requerido, aspecto requerido,
Materiales y Presentación y ortografía deficiente en
Presentación y Presentación y
métodos adecuada muchos aspectos
ortografía adecuada ortografía inadecuada
5 3 1 0
Carece de algún Carece de algún
Cumple lo requerido, No presenta o es
aspecto requerido, aspecto requerido,
Presentación y ortografía deficiente en
Resultados Presentación y Presentación y
adecuada muchos aspectos
ortografía adecuada ortografía inadecuada
15 10 5 0
Carece de algún Carece de algún
Cumple lo requerido, No presenta o es
aspecto requerido, aspecto requerido,
Discusión de Presentación y ortografía deficiente en
Presentación y Presentación y
resultados adecuada muchos aspectos
ortografía adecuada ortografía inadecuada
25 20 10 0
Carece de algún Carece de algún
Cumple lo requerido, No presenta o es
aspecto requerido, aspecto requerido,
Presentación y ortografía deficiente en
Conclusión Presentación y Presentación y
adecuada muchos aspectos
ortografía adecuada ortografía inadecuada
5 3 1 0
Carece de algún Carece de algún
Cumple lo requerido, No presenta o es
aspecto requerido, aspecto requerido,
Presentación y ortografía deficiente en
Bibliografía Presentación y Presentación y
adecuada muchos aspectos
ortografía adecuada ortografía inadecuada
5 3 1 0
Parte II
Informe de Carece de algún
Cumple lo requerido Deficiente No entregado
resultados de aspecto requerido
laboratorio 20 10 5 0
Asistió
Asistencia y Regular Deficiente pero no
Buen desempeño 5 3 1 0
participación desempeño desempeño particip
ó
CALIFICACIÓN
