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Genética Bacteriana: Mutaciones y Transferencia

La información genética en las bacterias se divide en información genética básica y flexible. La básica está en el cromosoma y contiene genes esenciales para la vida bacteriana. La información flexible incluye genes en plásmidos, transposones e islas genómicas, los cuales confieren características como resistencia a antibióticos. El ADN bacteriano está altamente enrollado para caber en la célula, y las enzimas topoisomerasas regulan este enrollamiento y la expresión génica.

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Genética Bacteriana: Mutaciones y Transferencia

La información genética en las bacterias se divide en información genética básica y flexible. La básica está en el cromosoma y contiene genes esenciales para la vida bacteriana. La información flexible incluye genes en plásmidos, transposones e islas genómicas, los cuales confieren características como resistencia a antibióticos. El ADN bacteriano está altamente enrollado para caber en la célula, y las enzimas topoisomerasas regulan este enrollamiento y la expresión génica.

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.

lo inscrito en el cromosoma, que es parte de la genética


GENÉTICA BACTERIANA: fundamental de la bacteria, se relaciona
MUTACIONES Y específicamente ya sea con vías metabólicas, con
envolturas, con ribosomas, en general con todo lo que
TRANSFERENCIA GENÉTICA tenga que ver con aquellos procesos que son necesarios
y esenciales para la vida microbiana.
MUTACIONES Y TRANSFERENCIA GÉNICA EN Esta información, que PRÁCTICAMENTE ES
BACTERIAS INVARIABLE dentro al interior del cromosoma, puede
alterarse debido a mutaciones que pueden ser
Un individuo de cada especie posee puntuales.
GENOTIPO: es el conjunto de características genéticas
de una bacteria, estas características son particulares en INFORMACIÓN GENÉTICA FLEXIBLE
cada una de ellas. Dará origen a un fenotipo.
Es toda aquella que está inscrita, ya sea en islas
FENOTIPO: es el conjunto de características genéticas genómicas (elementos genéticos móviles que se
que se expresan, esto puede ser a través de las diferentes adquieren a través de la transferencia horizontal de
pruebas bioquímicas que estas bacterias pueden arrojar genes), plásmidos, transposones y también fagos. Esta
en algún tipo de identificación. información tiene que ver con el metabolismo
secundario, con la ganancia de resistencia (p. ej: en el
FILOGENIA: tiene que ver con todas las relaciones de caso de las bacteria a algunos antibióticos ), esta
parentesco entre las especies. Por lo tanto, un individuo información esta generalmente escrita en el material
siempre va a tener una filogenia particular que lo va a genético móvil, también algunos proceso simbióticos o
ligar con un grupo específico de organismos que tiene aquellos que son de transposición, que quieren decir que
características comunes. un elemento genético móvil se puede deslizar o
desplazar al interior de por ejemplo el cromosoma como
En este sentido, cualquier organismo va a estar limitado es en el caso de los transposones, y también información
siempre por su material genético, y este material genética flexible que está dada por las islas de
genético y la interacción que tenga el organismo con el patogenicidad o también en el caso de la virulencia.
medio ambiente van a dar características particulares, Normalmente las islas de patogenicidad contienen lo que
que tienen que ver con: la selección, activación, son los genes de virulencia; la islas de patogenicidad son
represión o cambios en el material genético. islas genómicas que en este caso particular se
denominan islas de patogenicidad.
¿COMO ESTÁ ORGANIZADA LA INFORMACIÓN
GENÉTICA EN BACTERIAS? La información flexible es MUY VARIABLE porque los
microrganismos la adquieren y también pueden
deshacerse de ella puesto que no es esencial. Y en esta
característica de alta variabilidad puede deberse a la
transferencia horizontal de genes y particularmente a la
recombinación génica en el cromosoma.

ADN Y RNA

Hay 2 tipos de información, la que es BÁSICA y la que no La constitución del ADN en los organismos vivos en
es básica y por lo tanto no es elemental, que se le general corresponde a una molécula doble hélice,
denomina información genética FLEXIBLE. helicoidal que tiene cada una de sus hélices un sentido
5’-3’ y la hélice complementaria tiene el sentido inverso
INFORMACIÓN GENÉTICA BÁSICA 3’-5’. También posee desoxirribosas en el caso del ADN,
y bases nitrogenadas ya sea púricas o pirimidínicas.
Al hablar de este tipo de informacion uno se refiere
particularmente a todos aquellos genes que están Cuando se habla de las bases púricas se hace referencia
inscritos en el cromosoma bacteriano, por lo tanto, todo al uracilo, la citocina y timina; sin embargo, en el DNA no

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hay uracilo, por lo tanto, las bases pirimidínicas zona en particular disociada y el resto permanece como
presentes en el ADN corresponden a la timina y citocina. doble hebra.

ENZIMAS ENCARGADAS DE SUPERENROLLAR EL


ADN:

➔ TOPOISOMERASA I: Corta siempre una hebra y


pasa ADN por el nick que se genere en esa hebra rota
➔ TOPOISOMERASA II: Cortan ADN doble hebra y lo
enlazan con otra doble hebra de ADN.

PRINCIPALES FUNCIONES DEL


SUPERENROLLAMIENTO:

Las dimensiones de una molécula de ADN extendida


exceden a las de la célula procariota, es decir, si se
Por otro lado, el RNA es una molécula monohebra y lleva cortara el ADN circular y se extendiera podría llegar a
ribosas en vez de desoxirribosa. No hay presencia de medir 1 mm, en consideración a la bacteria, que puede
timina, sino que presenta uracilo. llegar a medir en promedio 1 micrómetro, o sea, 1 mt
La replicación de los ácidos nucleicos, particularmente dividido 1 millón de veces, lo que da cuenta que 1 mm el
del ADN, es una replicación semiconservativa, es decir, el 1000 veces mayor a un micrómetro y ese contenido de
origen de la molécula nueva estará dado por una hebra ADN debe ser súper enrollado al interior del citoplasma,
parental y una nueva o hija. para lograr que el LAS MOLÉCULAS DE ADN SE
COMPACTEN Y TENGAN UN VOLUMEN INFERIOR
En bacterias o en general en organismos procariotas, el para poder ser contenido al interior del citoplasma.
cromosoma, que es único, rara vez es circular y
covalentemente cerrada. Además, logra ACERCAMIENTO ENTRE PARTES
ALEJADAS DEL ADN EN SU ESTRUCTURA PRIMARIA,
es decir, la secuencia de bases nitrogenadas (estructura
lineal del polímero), lo cual es clave en procesos como la
regulación de la replicación y la transcripción.

El grado de compactación local regula cómo los genes se


van expresando una vez que puedan ser transcritos
(accesibilidad a información genética), por lo tanto, hay
una REGULACIÓN DE LA EXPRESIÓN GÉNICA en la
transcripción.
En este esquema la primera molécula de RNA está
TIPOS DE SUPERENROLLAMIENTO:
relajada, pero hay una característica que es propia y que
tiene que ver con los super enrollamientos de este SUPERENRROLLAMIENTO NEGATIVO DEL DNA: es
cromosoma. hacia la derecha (dextrorsa). Se encuentra de forma
El cromosoma bacteriano tiene un superenrollamiento natural en las verdaderas bacterias (eubacterias). En
negativo, eso significa que está torcido y altamente eucariotas es más frecuente en las zonas codificantes,
compactado para dejar espacio al interior del citoplasma facilitando la apertura de la doble hebra para la
para que quepan otras estructuras como, por ejemplo, transcripción. En eucariotas, transitoriamente por detrás
los ribosomas o los plásmidos. de la RNApol durante la transcripción (hélice
infraenrollada, desenrollada). Une preferentemente
Este cromosoma súper enrollado sufrirá una disociación intercalantes que desenrollan la doble hélice (por ej.
localizada cuando haya replicación, proceso también Bromuro de etidio y cloroquina).
llamado REPLICACIÓN THETA, donde se observa la

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SUPERENRROLLAMIENTO POSITIVO DEL DNA: es


hacia la izquierda (sinistrorsa). Este es más común en las
arqueobacterias, sin embargo, no es muy frecuente. En
eucariotas, transitoriamente por delante de la RNApol
durante la transcripción (hélice sobreenrollada,
apretada). Une preferentemente ligandos que aprietan
la doble hélice (ej. Netrpsina)

En eucariotas el ADN con un promotor y un gen


estructural van a dar origen a un RNAm que es
El esquema muestra el dogma central de la biología, que
monocistronico y esto dará origen a una sola proteína.
habla de la replicación del ADN, procesos de
Sin embargo, en procariotas, la organización del ADN es
transcripción y de traducción hacia una proteína. Hay
diferente en cuanto a que se producen RNAm
que tener en cuenta la formar particular del ADN en
POLICISTRONICOS durante la transcripción, es decir,
procariotas, que van a dar origen a los RNAm, y estos a
que estos RNAm transcritos darán origen a más de una
las proteínas particulares que contenga el individuo, y
proteína.
esto va a definir el fenotipo de este individuo en
particular. El OPERON se define como grupos de uno o más genes
estructurales que codifican proteínas o enzima de una vía
GENOMA BACTERIANO: específica, y que siempre se van a regular de manera
coordinada.
Contiene las características biológicas de la especie.
PROPUESTA INICIAL DE CRICK
Está compuesto por toda la COLECCIÓN DE GENES
QUE POSEE UNA BACTERIA, incluidos aquellos que se
La propuesta de Watson y Crick dice que el ADN tiene la
encuentran en los elementos genéticos móviles o
particularidad de replicarse antes de que ocurra la
extracrosomales, es decir, genes del material genético
división celular, en el caso de las células procariotas, y
básico y flexible.
posteriormente ser transcrito hacia una RNAm, para que
El GENOTIPO de una bacteria en particular va a estar este posteriormente sea traducido durante el proceso de
referido a las variaciones específicas de los genes que hay traducción y convertido en una proteína.
en un individuo en concreto. A veces hay variaciones en
genes particulares incluso al interior de las especies.

GEN

Corresponde a la unidad informativa discreta, acotada, y


responsable de una característica transmisible. Pero a lo largo del tiempo este dogma ha cambiado, ya
Un gen también corresponde a una secuencia de ADN que hoy se sabe que el ADN es capaz de ser replicado,
con la información necesaria para la síntesis de una pero también se ve que el ARN por medio de la enzima
proteína específica. transcriptasa reversa puede ser convertido en ADN. Por
otro lado, el ARN tiene el potencial de ser
autoreplicativo, donde actúan las ribozimas (ARN con
capacidad autoreplicativa), lo que le da fuerza a la teoría
de la existencia previa del ARN ante el ADN. Además,
también, se descubre que las proteínas pueden dar

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origen a otras proteínas (producción de proteínas sin que Los elementos que producen MUTACIONES al interior
medien ácidos nucleicos de por medio), y en este caso se de un individuo corresponden generalmente a
habla exclusivamente de los priones, que son proteínas elementos genéticos móviles (transposones, plasmidos,
infecciosas. fagos, integrones) y agentes mutágenos, que
normalmente son productos químicos que producen
alteraciones en el ADN.

La RECOMBINACIÓN GENÉTICA tiene procesos de


transferencia génica, como la transformación,
transducción y conjugación, y estos producirán nuevas
combinaciones genéticas a partir de las generadas
Por lo tanto, se dejó de tener el sentido unilateral que inicialmente por la mutación.
había inicialmente.
MUTACIÓN
ESTRUCTURA DEL MATERIAL GENÉTICO
Una mutación corresponde al cambio físico de uno o más
pares de nucleótidos en el ADN de una célula. Este
cambio deberá ser heredado para cada descendiente de
la célula mutante para ser considerada como tal, ya que
si no es una mutación aceptable dentro de los genes el
organismo mutado no será viable y desaparecerá.

➔ Si una mutación ocurre dentro de un gen, este puede


presentar pérdida o ganancia en su función.
➔ Una mutación que produzca la pérdida de la función
de un gen da lugar a que el producto génico no
Generalmente, los procariontes presentan cromosomas funcione.
cerrados, es poco común que los presenten abiertos. ➔ Una mutación que produce ganancia en la función
hará que una característica otorgada por un gen sea
El único origen replicativo de las procariontes
exagerada.
corresponde al Ori C.

VARIABILIDAD GENÉTICA DEFINICIÓN DE CONCEPTOS:

ESPECIE BACTERIANA: Colección de cepas que


La variabilidad genética está dada básicamente por la
comparten numerosas propiedades estables y que
tendencia de los genotipos al interior de una especie o
difieren de forma significativa de otros grupos de cepas.
de una población hacia la diferenciación, o sea, cómo
cambian los genotipos al interior de un grupo particular, CEPA BACTERIANA: Población de microorganismos que
que puede ser una especie, un genero o una familia. Esta desciende de un único organismo o de un aislamiento en
tendencia a la diferenciación de los genotipos implica la cultivo puro. Es decir, si se toma una colonia y se siembra
aparición de RESISTENCIAS NUEVAS A LOS en una placa, se obtendrán cepas bacterianas
ANTIBIÓTICOS, de variaciones o adquisición de los correspondientes al primer aislamiento.
FACTORES DE VIRULENCIA del patógeno (una bacteria
que normalmente no era virulenta puede transformarse En esta imagen se ven 2
en un organismo virulento aparte de la adquisición de placas con el mismo medio
nuevos genes). de cultivo y con la misma
especie bacteriana, sin
Por otro lado, la variabilidad genética se produce embargo, la apariencia
particularmente por las mutaciones y también por la fenotípica es diferente(se
recombinación genética. ven de distinto color). Esta
diferencia está dada por una mutación. Lo normal es que
se vea como la placa izquierda, con la técnica agar

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macconkey, correspondiente a la bacteria eschericcia es que, si el timbre es una réplica de la placa original, el
coli (gram -). Las colonias que se producen deberían ser medio de cultivo rico que es igual al original crezca todo
de color fucsia, porque la bacteria tiene la capacidad de y la ubicación de las colonias sea exactamente la misma,
usar la lactosa que tiene el medio. Por otro lado, está la y por otro lado, en el medio mínimo no pueden crecer las
placa de la derecha, que se ve de un color distinto, ya que BACTERIAS AUXOTROFICAS, que son bacterias que
una mutación le quitó la capacidad de usar la lactosa que tienen alguna necesidad nutricional especial, ya que este
tiene el medio, quedando las colonias de color medio es pobre, y no tiene todos los nutrientes
amarillento. necesarios para que todas las bacterias crezcan. En el
medio pobre crecerán todas las bacterias que NO tienen
ESTUDIO DE LOS ORGANISMOS MUTANTES requerimientos especiales.

Existen diferentes formas para estudiar a los organismos Por lo tanto, si se observa la placa con medio mínimo se
mutantes, una de ellas es el EXPERIMENTO DE observa que en el lugar preciso donde debería haber
LEDERBERG. colonias bacterianas no las hay, y si se comparan las 3
colonias, se puede saber que estas bacterias se
originaron a partir de unidades formadoras de colonias
que eran mutantes y por ende, son carentes de algún gen
que les impide crecer en este medio. Por lo tanto, con
este experimento se determina y se selecciona
solamente a aquellos grupos de bacterias que dan origen
a BACTERIAS PROTOTROFICAS, vale decir, que no
necesitan de nutrientes especiales para crecer en los
medios de cultivo, y además, al ser replicas exactas, se
puede decir cuáles son las que están mutadas.

El TEST DE
SUSCEPTIBILIDAD
ANTIMICROBIANA es una
prueba que se hace en un
medio de cultivo sólido,
donde se coloca en el centro
Este experimento como resultado dio que las mutaciones un disco que tiene un
son independientes del ambiente selectivo, vale decir antibiótico particular. Y este
que EL AMBIENTE NO INDUCE LAS MUTACIONES, disco se pone en contacto
sino que más bien EL AMBIENTE SELECCIONA A LOS con una siembra de
ORGANISMOS MUTADOS. En este experimento de microorganismos que se
Lederberg se les proporciona a las bacterias 2 ambientes supone son sensibles al antibiótico, y por eso se produce
distintos, uno en una placa con un ambiente de cultivo un halo inhibitorio (todo lo que se ve oscuro). Los
rico y otra en uno pobre. Y se tiene una placa original rica microorganismos no crecen en el lugar donde hay
en nutrientes que es donde se tienen muchas colonias en antibiótico. Si los microorganismos crecen en el lugar
crecimiento. Aquí cada una de esas colonias se estudian donde hay antibiótico (al interior del halo) se denominan
haciendo una réplica en placa, la cual se hace con un organismos mutantes (flechas amarillas) porque logran
“tronquito” generando un timbre que tiene terciopelo y resistir la presencia del antibiótico e igualmente
este terciopelo al tener pelitos encima permite que sirva producen la colonia.
para estampar.
La prueba de susceptibilidad microbiana sirve para
En este caso se tiene el timbre y la placa original. El detectar microorganismos mutantes al interior de un
timbre se pone en contacto la placa y así quedan las grupo.
marcas con la ubicación de las colonias en el timbre y
luego con este timbre que contiene la marca de las − BACTERIA MUTANTE: no crece en medios pobres.
colonias se van a timbrar 2 medios, uno pobre o mínimo − BACTERIA SILVESTRE (no tiene mutaciones): si crece
y por otro lado un medio completo. Acá lo que se espera en medio pobre.

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

TIPOS DE MUTACIONES EN BACTERIAS También existen microlesiones con pérdida de


nucleótido que son las denominadas DELECIONES.
SEGÚN LA EXTENSIÓN DEL MATERIAL GENÉTICO
Si el RNA se lee en base a tripletes, al tener una secuencia
AFECTADO
primaria con pérdida de un nucleótido en la secuencia
− CROMOSÓMICAS: afectan la disposición de los inicial, se va a alterar también la disposición de los
genes en el cromosoma. tripletes de lectura posteriores en el RNA mensajero. En
− GÉNICA: provocan cambios en la secuencia de la imagen se ve que una guanina es parte del tercer
nucleótidos de un gen. triplete y sufre una deleción, por lo tanto, el triplete
− GENÓMICAS: afectan el número de cromosomas cambia y con eso se produce un triplete de termino. No
típico de la especie. siempre ocurre que se forme un triplete de termino
cuando hay deleciones, pero si se cambia la secuencia
primaria de la proteína, puesto que finalmente ocurre
SEGÚN SU EFECTO
que la secuencia primaria ya no funciona en base a los
→ Perjudiciales tripletes originales por una deleción de un nucleótido lo
→ Neutras cual provoca un MARCO DE LECTURA DIFERENTE AL
→ Beneficiosas ORIGINAL.

Una mutación por sustitución puede tener como


SEGÚN SU ORIGEN consecuencia la producción de un triplete de termino o
un aa distinto al original. Al ocurrir una sustitución
✓ al azar
significa que el DNA original muta, dará origen a un RNA
✓ provocadas por agentes mutagénicos.
mensajero diferente al original y esto significa que se
produce una proteína defectuosa o un triplete de
MUTACIONES: MICROLESIONES Y
termino.
MACROLESIONES.
Ejemplo (imagen): Ocurre una perdida donde un triplete
Las MICROLESIONES son aquellas que producen pasa de GCT secuencia original) a ACT (DNA mutado). Se
variación en UN NUCLEÓTIDO, y estas pueden ser cambia una base púrica por otra púrica, es decir, es una
transiciones o transversiones (mutaciones puntuales) transición, y este cambio produce un triplete de STOP, y,
por ende, se dará origen a una proteína trunca o
− TRANSICIÓN: se reemplaza una base nitrogenada de
defectuosa.
un tipo por una del mismo tipo, es decir, una base
púrica por una púrica, o una pirimidina por otra
pirimidina.
− TRANSVERSIONES: Se reemplaza una base
nitrogenada por una de otro tipo, es decir, una púrica
por una pirimidina o al revés.

La transición y transversión son mutaciones puntuales


por sustitución de un nucleótido por otro.

Si se altera el marco de lectura de la proteína, como sería


al sumar un nucleótido (mutación por adición) se tendrá
una alteración de los tripletes, ya que pasa de un triplete
que era UGC a uno que es UUG y desde aquí cambian

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

todos los demás tripletes, debido a que se corre el marco ambiguo, ya que VARIOS TRIPLETES PUEDEN
de lectura. CODIFICAR PAR EL MISMO AMINOÁCIDO, sin
embargo, UN TRIPLETE SIEMPRE CODIFICA PARA
SOLO UN AMINOÁCIDO. También aquí se encuentran
los codones de termino que indican que la traducción se
termina al estar presentes y son UAA, UAG y UGA.

Las MACROLESIONES son alteraciones de MÁS DE UN


NUCLEÓTIDO, es decir de múltiples nucleótidos y
pueden ser: LAS CONSECUENCIAS LAS MUTACIONES PUEDEN
SER:
− DELECIONES: se pierden nucleótidos.
− DUPLICACIONES: se duplica un grupo particular de SILENCIOSAS: mutación que no provoca alteración en la
nucleótidos dentro del cromosoma. secuencia primaria de la proteína dado que, como el
− INSERCIONES: se inserta un grupo adicional de código genético es ambiguo, si se cambia un nucleótido
nucleótidos en la estructura primaria. por otro puede que ambos tripletes codifiquen para el
− INVERSIONES: un grupo de nucleótidos cambia de mismo aminoácido, por lo tanto, existiría una alteración
sentido. del genotipo, pero no del fenotipo.
− TRANSLOCACIÓN: un grupo de nucleótidos se SIN SENTIDO: Es cuando se produce un codón de
desplaza hacia otro sector del cromosoma. termino y se detiene la producción de la proteína.

CON SENTIDO/CAMBIO DE SENTIDO: Es cuando


realmente ocurre una mutación y se pueden dividir en:

→ CONSERVATIVA: cuando se cambia un nucleótido


por otro, donde el triplete mutado produce un
aminoácido diferente, pero del mismo tipo. En la
imagen se cambia lisina por arginina, que sería
cambiar un aminoácido básico por otro básico.
→ NO CONSERVATIVA: cuando al producirse la
mutación se cambia el aminoácido, pero no es del
mismo tipo que el original, por ejemplo, en la imagen
se cambia una lisina por una treonina, por ende, de
uno básico a uno polar.

EL CODIGO GENETICO

El código genético es universal, es decir, es VÁLIDO


PARA TODOS LOS ORGANISMOS VIVOS, y también es

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

TIPOS DE TRANSPOSONES

TRANSPOSON SIMPLE: corresponde a las secuencias


de inserción (IS), que está constituido por la enzima de
transposición (transposasa) y secuencias repetidas de
orden inverso en los costados del gen de la transposasa.

PSOBILES INDUCTORES DE MUTACIONES

La variabilidad genética se produce con las mutaciones y


las mutaciones se producen por los diferentes elementos TRANSPOSON COMPUESTO: está formado por
genéticos móviles que puedan estar presentes en la secuencias de inserción, vale decir, transposones simples
bacteria. (con el gen para la tranposasa en cada uno) en los lados
de los genes que puedan estar contenido en el
transposón , como por ejemplo genes de resistencia a
A) TRANSPOSONES
antibióticos, normalmente es más de un gen en su
Dentro de los elementos genéticos móviles están los interior. Estas secuencias de inserción pueden ser iguales
TRANSPOSONES, que pueden intercalarse al interior de (de orden directo) o en sentidos opuestos (de orden
un gen, generando una inserción y como la bacteria tiene inverso).
una estructura de operones para la expresión de sus
genes y la traducción, si se tiene un transposón insertado
en el gen A, este gen estará alterado, por ende, no se
expresará ni la proteína A, ni la B ni la C (debido a que
son parte del operón). El Gen X esta comandado por su
propio promotor que es distinto al del gen A y si un
transposón se inserta en este gen X, se tiene la
traducción de los genes A, B, C, pero no de X.

Si un transposón se inserta en una secuencia no B) PLÁSMIDOS


codificante no existirán cambios en la expresión génica.
CARACTERÍSTICAS GENERALES

Son elementos genéticos extracromosómicos, existen de


diferentes tipos, tienen características de replicación
idénticas al del cromosoma bacteriano (circular y
covalentemente cerrado), formado por DNA circular
bicatenario superenrollado.

Contienen genes para su autorreplicación, así como para


propiedades accesorias. Tienen 1 origen replicativo.
Probablemente se unen a un punto de apoyo de la
Los transposones son secuencias que se van a intercalar, membrana celular para su replicación y segregación.
que tienen una enzima que se llama TRANPOSASA y
Al ser elementos genéticos pertenecientes al material
además son elementos genéticos móviles que se
genético flexible, no son esenciales para la célula
movilizan al interior de cromosoma bacteriano. En
(elemento flexible), por ende, la célula puede perder los
general, un transposón, siempre tendrá una enzima o
plásmidos y no sufrir alteración.
proteína de transposición.

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

Estos se caracterizan por darle a la célula más nucleico (plásmidos, transposon o cromosoma) y
posibilidades de adaptación, donde la célula adquiera pueden replicarse y expresar la información que
genes adicionales que contribuyen al aumento de su lleva.
patrimonio genético, pero si estos se pierden no habrá − Pueden replicarse y expresar la información que
alteraciones significativas para la célula. lleva.

Generalmente pueden constituir de un 0,1% hasta un Están constituidos por:


10% del tamaño del cromosoma bacteriano.
✓ El gen para la
En su interior puede contener transposones o islas integrasa (intl)
genómicas, ya sea de patogenicidad o metabólicas. ✓ Un sitio adyacente
de recombinación
Algunos de estos plásmidos pueden transferirse de una (attl) que se va a separar para dejar genes en casete,
célula a otra, o de lo contrario, cuando están integrando entre el gen de la integrasa y el sitio adyacente de
parte del cromosoma bacteriano, cada vez que la célula recombinación
se divida dará origen a una copia del plasmido que está ✓ Tienen promotores (pc, p2), por lo menos dos , que
integrando su cromosoma. van a ser orientados hacia los genes que son
capturados para que estos logren expresarse.
CARACTERÍSTICAS DE VIRULENCIA
INTEGRONES MÓVILES: aquellos asociados a
Hay características importantes de virulencia que están secuencias de inserción, transposones y/o plásmidos
codificadas a nivel plasmidial, donde el traspaso de un conjugativos, los que en su mayoría median mecanismos
plásmido de una célula a otra célula va a modificar su de resistencia.
genoma adquiriendo estas características.
SUPERINTEGRONES: son de localización cromosómica
1. Producción de toxinas; Ej.: enterotoxina de E. coli. y con grandes arreglos de genes en casetes.
2. Síntesis de antígenos de colonización (importante en
el proceso infeccioso); Ej.: factores colonizantes
animales, vegetales o humanos.
3. Producción de hemolisina; Ej.: alfa y beta.
4. Producción de factores de resistencia al suero; Ej.:
proteína traT.
5. Producción de sistemas de transporte y secuestro de
hierro de los organismos; Ej.: organismos invasores.
6. Inducción de tumores en vegales; Ej.: plásmido Diferentes clases de integrones. Se señalan en color las
neoplásico de Agrobacterium tumefaciens. regiones conservadas y en gris las regiones variables.
7. Unión/invasión de células epiteliales; Ej.:
penetración intestinal por Shigella y Salmonella INTEGRÓN DE CLASE 1, en verde se marca la región
typhimurium 5´CS y en naranja la región 3´CS. La región variable quedó
8. Función (es) de supervivencia intracelular; Ej.: constituida por tres genes en casete seleccionados al
capacidad no definida de los plásmidos de Yersinia. azar.
9. Síntesis de antígenos somáticos; Ej.: Shigella sonnei.
INTEGRÓN DE CLASE 2, en rojo se marca la región 5´CS
C) INTEGRONES (el asterisco en intI2* indica que es un pseudogen) y en
azul la región 3´CS. Se respetó la región variable presente
− Son elementos genéticos móviles, que están dentro en el Tn7.
de otros elementos genéticos móviles como los
INTEGRÓN DE INTEGRASA INVERTIDA, en violeta se
transposones o plásmidos.
marca la región 5´CS (la orientación del gen intIes
− Pueden capturar genes de resistencias o virulencia,
opuesta a la observada en los diferentes integrones).
− Los genes pueden estar en “casetes”.
Diferentes orf como genes en casete estarían presentes
− Tienen una enzima que se llama integrasa, que le
downstream del gen de la integrasa.
permite integrarse en un lugar específico del acido

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

D) ISLAS GENÓMICAS

Son una parte del genoma que se origina normalmente


por la transferencia horizontal de genes, y le confiere a
los microorganismos adecuaciones para las distintas
condiciones de vida, por ejemplo, las islas ecológicas,
saprofíticas, simbióticas y de patogenicidad.

Los ANÁLOGOS DE BASES están la 5-bromouracilo y la


2-aminopurina que producen transiciones y actúan
durante el proceso replicativo. Estos producen
transiciones (en timina y adenina respectivamente)
generando mutación aun en cuando en bacterias existen
procesos de reparación de este.
Las islas de patogenicidad (PAI) van a codificar para los Las BASES MODIFICADAS actúan cuando la célula se
distintos factores de virulencia que posean las bacterias. encuentra en reposo, es decir, cuando no hay actividad
Estos factores de virulencia corresponden a las replicativa de ácido nucleico. El óxido nitroso y la
adhesinas, invasivas, capsulas, sistemas de secreción, hidroxilamina producen transiciones y la
toxinas o los sistema de captación de hierro. nitrosoguaninina produce transversión.
Los plásmidos también tienen esta capacidad con estos En los AGENTES INTERCALANTES, estos alteran el
mismos factores de virulencia. marco de lectura, generando pequeñas inserciones o
deleciones a nivel genético, aquí actúan la acridina y el
¿POR QUÉ LOS ELEMENTOS GENÉTICOS MÓVILES compuesto ICR191.
TIENEN UN EFECTO MUTAGÉNICO?
Los AGENTES FÍSICOS, como la acción la acción de la
→ Al insertarse en un gen interrumpen la continuidad radiaciones ultravioletas y ionizantes que producen
del código genético. distintos tipos de mutaciones. En el caso de la luz UV:
→ Algunos transposones provocan mutaciones sin sustitución de bases, alteración del marco de lectura,
sentido ya que son capaces de producir codones de perdida de nucleótidos y rearreglamientos. En el caso de
termino con la capacidad de bloquear la traducción las radiaciones por ionización hay una ruptura de las
de las proteínas. hebras, ya sea de aquellas que son doble hebras o hebra
→ Otros pueden tener promotones, activando genes simple.
que estaban cercanos al punto de inserción,
activándolo, expresando genes que estaban Las mutaciones por los mutágenos son INDUCIDAS
silenciados. cuando se trabajan estos mutágenos en el laboratorio o
también pueden ser ESPONTANEAS cuando hay por
ejemplos rayos UV del sol que actúan sobre las células y
E) MUTÁGENOS
su ADN.
Corresponden a todos aquellos elementos químicos o
fisicoquímicos que producen variaciones en el ADN o la REVERSIÓN DE MUTACIONES
secuencia genómica.
Algunas de estas mutaciones pueden ser revertidas,
como las RETROMUTACIONES, que es cuando un
organismo ya mutado puede volver a recuperar su
fenotipo, aun cuando se mantenga la mutación en el
ADN, donde se tendrá una reversión de esta mutacion

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

porque el fenotipo no estará alterado, en sí sería una a una célula en particular y multiplicarse en su interior.
segunda mutación que recuperaría el fenotipo del Este fago que servirá de medio de transporte para un
organismo. Esta segunda mutación puede ser en el determinado número de genes celulares es capaz de
mismo sitio afectado (RETROMUTACIÓN quedarse con información genética de la bacteria
VERDADERA) o en un sitio distinto del mismo gen o de infectada originalmente, luego de multiplicarse puede
otro (MUTACIÓN SUPRESORA). Produciendo desalojar la célula e ir en reconocimiento de un nuevo
finalmente un cambio compensatorio que restaurará la hospedador, donde inyectará el material genético que
ACTIVIDAD del producto génico alterado, aun así, la puede ser proveniente de la célula infectada
mutación se mantiene, sigue siendo un organismo originalmente y que contenga genes de materia genético
alterado. bacteriano que será recombinado y luego pasará a ser
parte del patrimonio genético de esta célula hospedera.
MECANISMOS DE TRANSFERENCIA GÉNICOS Por lo tanto, la célula donadora es infectada por un fago,
donde el virus por error va a ser capaz de transferir ácido
Estos mecanismos corresponden a la transformación, la nucleico celular a la célula aceptora, la cual va a
transducción y la conjugación bacteriana. recombinar esta información y pasará a ser parte de su
cromosoma.
TRANSFORMACIÓN
CONJUGACIÓN
Una célula que por algún motivo se lisa o muere, puede
liberar parte de su contenido citoplasmático al medio La conjugación tiene que ver con la cercanía e interacción
extracelular, y en este se puede encontrar pequeños que se da entre dos células, una célula dadora de
segmentos de ADN con genes que potencialmente información y otra receptora de información.
pueden salir al medio e ingresar a una nueva batería y ser
recombinados en su interior para posteriormente formar
parte de su patrimonio genético y formar una bacteria
transformada. Se tendrá una célula donadora (que se
lizo) y una célula aceptora del material genético donado
llamado EXOGENOTE, el cual puede ser recombinado.
La célula dadora posee un plásmido conjugativo que va a
pasar una copia a la célula receptora, que será llamada
célula hembra mientras que la célula dadora pasará a ser
la célula macho. Por lo tanto, existe una diferencia
sustancial con los otros dos procesos, ya que en la
conjugación son dos células vivas las que interactúan y
Se pueden transferir genes que forman parte del esto permite que se transmitan una mayor cantidad de
patrimonio genético básico o genes de información genes posibles y, a la vez, se comprueban los procesos
flexible como la resistencia a los antibióticos sexuales que llevan a cabo las bacterias.

TRANSFORMACIÓN BACTERIANA
TRANSDUCCIÓN
En el caso de la transformación bacteriana explica cómo
el ADN desnudo logra ingresar a la bacteria y generar
células transformantes o transformadas.

El material genético que ingresa debe tener el potencial


de ser recombinado, pasar a ser parte del patrimonio
genético de la célula y mantenerse ahí.

Este es un proceso donde interviene un organismo En 1928 Griffith trabajaba con streptococcus
vector, que vendría siendo en este caso un fago o virus. pneumoniae, también llamada neumococo, que posee
Normalmente, estos fagos tienen el potencial de infectar una cápsula polisacárida, la cual es un factor virulento

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

que contribuye a la protección de las bacterias frente a colonias R y estas se inyectn al ratón y este no muere, y
la fagocitosis. al hacerle la autopsia al ratón no se recuperan bacterias
vivas. En una tercera fase del experimento se caliente el
Griffith tenía placas de Petri con cultivos de steptococcus cultivo de las bacterias lisas, se hierven, y se le inyecta al
pneumoniae, sin embargo, las características ratón, donde este sobrevive y al hacerle la autopsia al
morfológicas de dichas colonias en algunos casos podían ratón no se recuperan bacterias vivas de tipo S.
variar. Finalmente, cuando se mezclan los cultivos de bacterias
S muertas más las bacterias R vivas, y se le inyecta al
ratón, este muere y en su autopsia se recuperan células
S.

Por lo general estas colonias tienden a ser lisas, bastante La conclusión que obtuvo Griffith de este resultado fue
redondas y mucosas debido a la presencia de su cápsula, que una sustancia presente en las bacterias virulentas
y se les catalogó como bacterias infecciosas virulentas y muertas por acción del calor transformó genéticamente
son colonias S o lisas. Por otro lado, a medida que se las bacterias no virulentas en virulentas y vivas. Por lo
realizan diferentes traspasos de una placa a otra desde la que hay un mecanismo de transferencia que permite que
placa original, se van produciendo colonias bacterianas las bacterias R adquieran esta capacidad virulenta que no
rugosas o R, y estas son colonias mutantes puesto que ya tenían originalmente.
no tienen su cápsula, dejan de ser brillantes y lisas, y son
no virulentas. EXPLICACIÓN MOLECULAR DE LA
TRANSFORMACIÓN BACTERIANA
El experimento de Griffith surge de la pregunta: “¿puede
un extracto de bacterias muertas modificar a un conjunto
de bacterias vivas?”

Para responder la pregunta, Griffith cultiva colonias de


streptococcus pneumoniae en distintos matraces.

La explicación molecular de Avery, MacLeod y McCarty


concluye en 1944 que el ADN es el principio
transformante, es decir, el gestor de la Transformación.
Las células rojas son de una colonia S y las azules de una
colonia R. ¿CÓMO OCURRE ESTO?

En primera instancia lo que hace es cultivar las bacterias Las bacterias donantes de un exogenote son las que se
S e inyectárselas a un ratón, donde este muere, puesto lisan y liberan fragmentos al medio extracelular y las
que estas son virulientas. Por otro lado, se cultivan las

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

células vivas tienen la capacidad de recibir el material Una vez que ingresa el ADN este no debe ser reconocido
genético de la célula muerta. por las enzimas de restricción ubicadas dentro del
citoplasma para no ser degradado por estas.
Este material genético logra integrarse y recombinarse y
finalmente la célula que capta el material genético queda La fase reversible es cuando la proteína receptora recibe
transformada, ganando nuevos genes que forman parte a la doble hebra de ADN y la fase irreversible es cuando
de su nuevo genoma. la proteína receptora deja pasar al ADN al interior del
citoplasma.

COMPETENCA INDUCIDA ARTIFICIALMENTE

Para que la célula tenga la capacidad de recombinar el


ADN nuevo debe ser competente, y la competencia se
puede lograr de dos formas:

PROTOCOLO MANUAL: utiliza iones de calcio para


lograr que el exogenote ingrese al interior del
El ADN exógeno o transformante tiene un tamaño citoplasma. Las células se mantienen en frio y es un
superior a 3 x 105 Dalton y tiene una longitud de entre 5 protocolo de baja eficiencia.
x 106 y 15 x 106 lo que equivale a 200.000 pb, es decir, es
un segmento donde se pueden contener uno o más ELECTROPORACIÓN: se
genes. utiliza un electroporador para
hacer que la célula reciba
TRANSFORMACIÓN NATURAL GRAMM+ Y GRAMM- material exógeno a través de
poros en la superficie celular
En una primera etapa esta transformación es reversible. generados por pequeños
Estas bacterias pueden captar el exogenote desde el pulsos eléctricos.
medioambiente a través de un pilus, que es una
estructura similar a una fimbria capaz de tomar el La transformación se puede inducir en bacterias para que
acepten genes eucariotas divididos que dentro de
exogenote para ingresarlo a través de una proteína
receptora en la superficie de la membrana plásmidos pueden ingresar a las bacterias para
citoplasmática. Para que esto ocurra se necesitan iones transformarlas para que así logren sintetizar proteínas
de potasio, calcio y magnesio al interior de la célula. humanas. La hormona insulina es fabricada a través de
estos procesos.

TRANSDUCCIÓN

La transducción bacteriana es a través de un vector, que


son los fagos. Los fagos, principalmente los temperados,
pueden tener ciclos líticos o lisogénicos.

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

CICLO LÍTICO: el fago con capacidad virulenta ingresa a Hay dos tipos de Transducción:
la célula donde logra multiplicarse para luego inducir la
lisis en la célula que lo hospeda, liberándose así al TRANSDUCCIÓN GENERALIZADA: Los fagos trasfieren
exterior y poder infectar un nuevo hospedador. genes con secuencias aleatorias, a causa de un
almacenamiento accidental del ADN del huésped.
CICLO LISOGÉNICO: El fago ingresa a la bacteria
infectándola para formar parte de su patrimonio
genético tomando la capacidad de ser heredado.

Los fagos son parásitos intracelulares obligados que


necesitan de una célula para reproducirse a través de la
maquinaria celular propia de ésta.

La transducción se conoció en 1951 cuando Lederberg y


Zinder trabajaban en un modelo de salmonela. Durante
su trabajo descubrieron que un fago podría transducir a
la salmonela.

El fago presenta tropismo, es decir, predilección por


cierto tipo de células.

TRANSDUCCIÓN ESPECIALIZADA: El fago transfiere


secuencias específicas a la célula parasitada. El fago
lambda realiza este proceso.

Ocurre cuando un fago temperado (aquel que puede


→ Fago infecta a la bacteria de forma lítica (la bacteria
morirá al terminar el ciclo) hacer tanto ciclo lítico como lisogénico) se escinde en un
→ Fago realiza su proceso vital dentro de la bacteria. evento de recombinación imprecisa e incorpora ADN
→ Fago es liberado al medio ambiente. bacteriano de las regiones flanquantes.

Pero hay algunas partículas fágicas que son defectivas o El ADN bacteriano es traspasado a otra bacteria por una
defectuosas. Hay una etapa de la multiplicación vírica infección con el fago resultante.
llamada autoensamblaje, donde el fago se arma paso a
paso. En la cabeza de estos fagos se alberga el material
genético, donde normalmente algunos fagos sólo
albergan material fágico, pero hay otros que solo
empaquetan material celular o ambos. Entonces, como
tienen capacidad infecciosa, van a ir a reconocer a un
nuevo hospedador y van a producir un nuevo ciclo
infeccioso inyectando el material genético, por lo tanto,
al inyectar el material genético, este formará parte del
cromosoma, ya sea material genético fagico o celular,
este se recombinará, y se tendrá una célula transducida.

Los fagos defectivos también son llamados partículas


transductoras.

Normalmente los fagos temperados tienen la capacidad


de integrarse al cromosoma bacteriano. En la imagen se
puede apreciar al fago λ circularizado, este se integrará

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

en el ADN de la bacteria (E. coli), específicamente en un ende, cuando se produce la lisis de la bacteria, el fago
sitio de anclaje entre los genes de la galactosa (gal) y la sale llevándose los genes (C) de la galactosa, y por lo
biotina (bio), finalmente completa su integración. Para tanto los podrá integrar en nuevas células durante la
esta situación en particular, el fago realiza un ciclo infección.
lisogénico puesto que está integrado en el cromosoma
de E. coli.

Hay 2 clases de eventos que puede realizar el fago λ, uno


de ellos frecuente y otro que es raro. El fago temperado
durante la transducción especializada tiene la capacidad
de realizar la infección de la bacteria integrándose al
cromosoma.

CONJUGACIÓN BACTERIANA

Es el proceso de transferencia génica donde se


transfieren de una bacteria viva a otra, la mayor cantidad
de genes, este proceso fue estudiado en 1946 por
Lederberg y Tatum. Hay un experimento que tiene que
ver con cómo se comprueban los procesos sexuales entre
En A se puede observar que la célula está lisogenada ya las bacterias, y este intentó ver el resultado si se
que el fago λ está integrado al cromosoma, al lado del mezclaban bacterias de tipo A con otras de tipo B,
gen de la galactosa. Cuando un fago se integra al desconociéndose su progenie.
cromosoma de una bacteria, se le denomina profago, por
lo tanto, el virus en A, está en estado de profago en el
cromosoma de la bacteria. En un evento normal, ocurrirá
que por algún tipo de inducción (cuando se dejen de
producir proteínas represoras del ciclo lítico), en la
bacteria el fago λ se liberará del cromosoma y se
recircularizará (B), y finaliza realizando nuevas copias (C)
del fago al interior de la célula que estaba lisogenizada, y
liberando al medioambiente (D) nuevos fagos, realizando
ciclo lítico.

El mismo fago frente a un evento raro, puede ocurrir que


durante el ciclo lítico, se recirculariza y al liberarse del
cromosoma bacteriano puede llevarse los genes de la
galactosa (A), lo cual conlleva a que cuando hace su ciclo
multiplicativo intracelular, cada uno de los fagos va a
multiplicar la presencia del gen (B) de la galactosa, por
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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

Para el experimento, se utilizó un medio mínimo (pobre


en aminoácidos), por otro lado, se utilizaron células
auxotróficas (que requieren de ciertos elementos
nutricionales incorporados en los medios de cultivo) y
células prototróficas (aquellas que no requieren de
elementos especiales nutricionales en el medio).

Se puede identificar un genotipo A y un genotipo B. Las


Se puede observar conjugación bacteriana cuando la
bacterias del genotipo A son met-, bio-, thr+, leu+, thi+.
células están unidas transfiriéndose información
Por otro lado, el genotipo B complementario tiene
genética. Las bacterias macho que tienen la capacidad de
bacterias met+, bio+, thr-, leu-, thi-. A y B son
tener este factor de fertilidad o plásmido conjugativo,
complementarios.
son capaces de presentar un pilus sexual el cual genera
Las que tienen signo – quiere decir que estas bacterias una atracción hacia la bacteria receptora, este es una
requerirán de estos elementos en el medio de cultivo para estructura proteica que servirá para generar proximidad
poder crecer, si no están presentes no podrían formar entre ambas bacterias, esto se logra porque cuando el
colonias. pilus está en estrecho contacto con la célula receptora,
comienza a despolimerizarse hasta producir la cercanía
Cuando se siembran las bacterias del genotipo A en la que se puede apreciar en la imagen de la derecha.
placa, no crece ninguna colonia, porque se trata de un
medio mínimo carente de aminoácidos. Si se siembran ¿CÓMO OCURRE LA CONJUGACIÓN?
las bacterias del medio B ocurre lo mismo, ya que el
medio es mínimo y estas bacterias requieren de los
aminoácidos esenciales en el medio (thr-, leu- y thi-).

Cuando se mezclan A con B y se cultivan en un medio


mínimo, en este caso sí se producirán colonias, y estas
serán de bacterias prototróficas, lo cual significa que no
requieren de elementos adicionales en el medio (su
genotipo es positivo). Por lo tanto, se pasó de tener
bacterias autotróficas (tanto en A, como en B), a tener
bacterias prototróficas una vez mezcladas. Por lo tanto,
como son organismos vivos, alguna interacción debió
ocurrir entre ella que permitió que el genotipo cambiara,
esta es la conjugación.
Se tiene una célula receptora y una dadora con el
CONJUGACIÓN EN GRAM NEGATIVOS plásmido F (aprox. 100 Kb, kilobases), además se tiene al
pilus sexual el cual producirá cierta conectividad en
Particularmente la conjugación en bacterias Gram
ambas células, una vez producida la proximidad entre las
negativo requiere de 2 células, una dadora y otra
células, poniéndose en contacto las membranas
receptora de información. La célula dadora o macho
celulares, se produce un poro por el cual pasará una de
contiene un plásmido conjugativo el cual se denomina
las hebras de este plásmido F (tiene las mismas
PLÁSMIDO F o factor de fertilidad.
características de los plásmidos conjugativo, posee
La presencia del plásmido F en una bacteria (P.F), le origen conjugativo, replicativo, potencial de autonomía y
confiere la capacidad de donar material genético, por de integrarse al cromosoma, tamaño acorde para
otro lado, se tiene otra célula que no contiene el atravesar membrana y poros originados producto de la
plásmido F, la cual es hembra o receptora (R). conjugación).

El mecanismo de transferencia se denomina


MECANISMO DEL CIRCULO RODANTE, porque este
plásmido transferirá una hebra hacia la célula receptora,
esta se origina durante la replicación del plásmido,

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

cuando se produce un ruptura en una de las hebras y esta En los genes tra se tendrá:
va a comenzar a pasar hacia la célula receptora, una vez
que pasa se va sintetizando la hebra complementaria, y → Sector Dtr: Tiene que ver con la preparación del
de allí que el resultado son 2 células que contienen el plásmido para ser transferido.
plásmido (a través de replicación del circulo rodante), y → Sistema Mpf: Sistema que mantiene unidas a las
además es semiconservativa (ambos plásmidos tendrán células durante el proceso de transferencia. Este
una hebra nueva y una vieja). sistema es el encargado de codificar para el pilus
sexual, que puede ser largo y flexible para la
Una vez producida la replicación de ADN, la célula se transferencia en medio líquido o corto y rígido
desaparea y cada una se ha convertido en una célula cuando la transferencia ocurre en medio sólido.
portadora del plásmido, tanto la original como la
receptora, y esta última pasó a ser F+ (contiene el CONJUGACIÓN DE GRAM POSITIVOS
plásmido).
Es muy similar a la que ocurre en Gram negativo, sin
▪ CÉLULA F+: contiene plásmido, célula donadora, embargo, el sistema Mpf (el que codifica para el pilus
macho sexual) es mucho más simple y se ha estudiado
▪ CÉLULA F-: no contiene plásmido, célula receptora, básicamente en E. faecalis que son los que pueden
hembra generar ciertas feromonas para estimular la expresión de
los genes Tra en las bacterias vecinas.
ESTRUCTURA FÍSICA, ORGANIZACIÓN GENÉTICA Y
FUNCIONAL DEL PLASMIDO F En la imagen se ven varios E.
faecalis que atraen a su célula
vecina a través de feromonas que
también están siendo codificadas
a través del sistema Mpf.

Distintas formas moleculares del plásmido F (es


conjugativo, puede ser transferido), y este puede estar
LIBRE EN EL CITOPLASMA y puede tener sus
capacidades replicativas al igual que el resto de los
plásmidos (con origen, doble hebra, etc.), y a este se le
llama FACTOR F. Por otro lado, puede estar formando
PARTE DEL CROMOSOMA (inscrito en él) a lo cual le
llamamos EPISOMA. Por último, este plásmido tiene la
capacidad de liberarse desde el cromosoma en
diferentes instancias, llevándose consigo un segmento
de él, por lo tanto, queda conformado tanto POR GENES
En la imagen podemos observar las estructuras del PLASMIDIALES, como por GENES CROMOSOMALES,
plásmido F (500 Kb), este tiene una región de a lo anterior se le denomina FACTOR F-PRIMA.
transferencia (región tra), además una región de
replicación denominadas ori-V y ori-T (origen de
transferencia), y además este plásmido está conformado
por transposones que son secuencias de inserción IS2 y
IS3, y un transposón compuesto que es el Tn1000.

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MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA CLASE 3.2

Puede haber distintos cruces (Ej. una célula F+ con una conteniendo además de los genes plasmidiales, los genes
F), y el resultado final es que la célula F- dará origen a una cromosomales.
célula F+ puesto que adquiere el plásmido conjugativo. A
las células que tienen inserto el PLÁSMIDO COMO UN ❖ Aunque por regla general la conjugación tiene lugar
EPISOMA se les llama CÉLULA HFR (alta frecuencia de entre miembros de la misma especie, también se ha
recombinación), lo cual significa que cada vez que la demostrado que, ocurre entre bacterias y células
célula pueda dividirse dará origen a una copia del vegetales, animales y hongos.
plásmido en forma de episoma. ❖ La conjugación es una herramienta útil para la
elaboración de mapas genéticos bacterianos.
CRUCES: ❖ En el curso de la conjugación, los genes son
transmitidos en forma consecutiva, a velocidad
constante y siempre en el mismo orden relativo.

EJEMPLO F+ x F-: El pilus produce el contacto entre


células F+ y F-, y una de las hebras plásmido pasa a través
de los poros que se producen en la superficie de la
membrana citoplasmática, y cuando se desaparean
ambos poseen Factor F+, por lo tanto, resultado final es
célula F+

EJEMPLO HFR x F-: Cuando se tiene una Hfr y un F-


(dadora y receptora), se produce cernía por el pilus
sexual, y pasa parte del cromosoma hacia la otra célula,
por lo tanto, cuando haya un desapareo, la conexión se
rompe antes de que pase el plásmido F, por lo tanto, esta
célula queda como F- puesto que recibió genes celulares,
pero NO el plásmido en su capacidad total

EJEMPLO F-prima x F-: Cuando se tiene una célula F-


prima con una F-, el resultado será una F-prima puesto
que el plásmido está libre en el citoplasma y, por lo tanto,
se transfiere integramente hacia la célula receptora,

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