Genética Bacteriana: Mutaciones y Transferencia
Genética Bacteriana: Mutaciones y Transferencia
ADN Y RNA
Hay 2 tipos de información, la que es BÁSICA y la que no La constitución del ADN en los organismos vivos en
es básica y por lo tanto no es elemental, que se le general corresponde a una molécula doble hélice,
denomina información genética FLEXIBLE. helicoidal que tiene cada una de sus hélices un sentido
5’-3’ y la hélice complementaria tiene el sentido inverso
INFORMACIÓN GENÉTICA BÁSICA 3’-5’. También posee desoxirribosas en el caso del ADN,
y bases nitrogenadas ya sea púricas o pirimidínicas.
Al hablar de este tipo de informacion uno se refiere
particularmente a todos aquellos genes que están Cuando se habla de las bases púricas se hace referencia
inscritos en el cromosoma bacteriano, por lo tanto, todo al uracilo, la citocina y timina; sin embargo, en el DNA no
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hay uracilo, por lo tanto, las bases pirimidínicas zona en particular disociada y el resto permanece como
presentes en el ADN corresponden a la timina y citocina. doble hebra.
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GEN
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origen a otras proteínas (producción de proteínas sin que Los elementos que producen MUTACIONES al interior
medien ácidos nucleicos de por medio), y en este caso se de un individuo corresponden generalmente a
habla exclusivamente de los priones, que son proteínas elementos genéticos móviles (transposones, plasmidos,
infecciosas. fagos, integrones) y agentes mutágenos, que
normalmente son productos químicos que producen
alteraciones en el ADN.
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macconkey, correspondiente a la bacteria eschericcia es que, si el timbre es una réplica de la placa original, el
coli (gram -). Las colonias que se producen deberían ser medio de cultivo rico que es igual al original crezca todo
de color fucsia, porque la bacteria tiene la capacidad de y la ubicación de las colonias sea exactamente la misma,
usar la lactosa que tiene el medio. Por otro lado, está la y por otro lado, en el medio mínimo no pueden crecer las
placa de la derecha, que se ve de un color distinto, ya que BACTERIAS AUXOTROFICAS, que son bacterias que
una mutación le quitó la capacidad de usar la lactosa que tienen alguna necesidad nutricional especial, ya que este
tiene el medio, quedando las colonias de color medio es pobre, y no tiene todos los nutrientes
amarillento. necesarios para que todas las bacterias crezcan. En el
medio pobre crecerán todas las bacterias que NO tienen
ESTUDIO DE LOS ORGANISMOS MUTANTES requerimientos especiales.
Existen diferentes formas para estudiar a los organismos Por lo tanto, si se observa la placa con medio mínimo se
mutantes, una de ellas es el EXPERIMENTO DE observa que en el lugar preciso donde debería haber
LEDERBERG. colonias bacterianas no las hay, y si se comparan las 3
colonias, se puede saber que estas bacterias se
originaron a partir de unidades formadoras de colonias
que eran mutantes y por ende, son carentes de algún gen
que les impide crecer en este medio. Por lo tanto, con
este experimento se determina y se selecciona
solamente a aquellos grupos de bacterias que dan origen
a BACTERIAS PROTOTROFICAS, vale decir, que no
necesitan de nutrientes especiales para crecer en los
medios de cultivo, y además, al ser replicas exactas, se
puede decir cuáles son las que están mutadas.
El TEST DE
SUSCEPTIBILIDAD
ANTIMICROBIANA es una
prueba que se hace en un
medio de cultivo sólido,
donde se coloca en el centro
Este experimento como resultado dio que las mutaciones un disco que tiene un
son independientes del ambiente selectivo, vale decir antibiótico particular. Y este
que EL AMBIENTE NO INDUCE LAS MUTACIONES, disco se pone en contacto
sino que más bien EL AMBIENTE SELECCIONA A LOS con una siembra de
ORGANISMOS MUTADOS. En este experimento de microorganismos que se
Lederberg se les proporciona a las bacterias 2 ambientes supone son sensibles al antibiótico, y por eso se produce
distintos, uno en una placa con un ambiente de cultivo un halo inhibitorio (todo lo que se ve oscuro). Los
rico y otra en uno pobre. Y se tiene una placa original rica microorganismos no crecen en el lugar donde hay
en nutrientes que es donde se tienen muchas colonias en antibiótico. Si los microorganismos crecen en el lugar
crecimiento. Aquí cada una de esas colonias se estudian donde hay antibiótico (al interior del halo) se denominan
haciendo una réplica en placa, la cual se hace con un organismos mutantes (flechas amarillas) porque logran
“tronquito” generando un timbre que tiene terciopelo y resistir la presencia del antibiótico e igualmente
este terciopelo al tener pelitos encima permite que sirva producen la colonia.
para estampar.
La prueba de susceptibilidad microbiana sirve para
En este caso se tiene el timbre y la placa original. El detectar microorganismos mutantes al interior de un
timbre se pone en contacto la placa y así quedan las grupo.
marcas con la ubicación de las colonias en el timbre y
luego con este timbre que contiene la marca de las − BACTERIA MUTANTE: no crece en medios pobres.
colonias se van a timbrar 2 medios, uno pobre o mínimo − BACTERIA SILVESTRE (no tiene mutaciones): si crece
y por otro lado un medio completo. Acá lo que se espera en medio pobre.
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todos los demás tripletes, debido a que se corre el marco ambiguo, ya que VARIOS TRIPLETES PUEDEN
de lectura. CODIFICAR PAR EL MISMO AMINOÁCIDO, sin
embargo, UN TRIPLETE SIEMPRE CODIFICA PARA
SOLO UN AMINOÁCIDO. También aquí se encuentran
los codones de termino que indican que la traducción se
termina al estar presentes y son UAA, UAG y UGA.
EL CODIGO GENETICO
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TIPOS DE TRANSPOSONES
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Estos se caracterizan por darle a la célula más nucleico (plásmidos, transposon o cromosoma) y
posibilidades de adaptación, donde la célula adquiera pueden replicarse y expresar la información que
genes adicionales que contribuyen al aumento de su lleva.
patrimonio genético, pero si estos se pierden no habrá − Pueden replicarse y expresar la información que
alteraciones significativas para la célula. lleva.
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D) ISLAS GENÓMICAS
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porque el fenotipo no estará alterado, en sí sería una a una célula en particular y multiplicarse en su interior.
segunda mutación que recuperaría el fenotipo del Este fago que servirá de medio de transporte para un
organismo. Esta segunda mutación puede ser en el determinado número de genes celulares es capaz de
mismo sitio afectado (RETROMUTACIÓN quedarse con información genética de la bacteria
VERDADERA) o en un sitio distinto del mismo gen o de infectada originalmente, luego de multiplicarse puede
otro (MUTACIÓN SUPRESORA). Produciendo desalojar la célula e ir en reconocimiento de un nuevo
finalmente un cambio compensatorio que restaurará la hospedador, donde inyectará el material genético que
ACTIVIDAD del producto génico alterado, aun así, la puede ser proveniente de la célula infectada
mutación se mantiene, sigue siendo un organismo originalmente y que contenga genes de materia genético
alterado. bacteriano que será recombinado y luego pasará a ser
parte del patrimonio genético de esta célula hospedera.
MECANISMOS DE TRANSFERENCIA GÉNICOS Por lo tanto, la célula donadora es infectada por un fago,
donde el virus por error va a ser capaz de transferir ácido
Estos mecanismos corresponden a la transformación, la nucleico celular a la célula aceptora, la cual va a
transducción y la conjugación bacteriana. recombinar esta información y pasará a ser parte de su
cromosoma.
TRANSFORMACIÓN
CONJUGACIÓN
Una célula que por algún motivo se lisa o muere, puede
liberar parte de su contenido citoplasmático al medio La conjugación tiene que ver con la cercanía e interacción
extracelular, y en este se puede encontrar pequeños que se da entre dos células, una célula dadora de
segmentos de ADN con genes que potencialmente información y otra receptora de información.
pueden salir al medio e ingresar a una nueva batería y ser
recombinados en su interior para posteriormente formar
parte de su patrimonio genético y formar una bacteria
transformada. Se tendrá una célula donadora (que se
lizo) y una célula aceptora del material genético donado
llamado EXOGENOTE, el cual puede ser recombinado.
La célula dadora posee un plásmido conjugativo que va a
pasar una copia a la célula receptora, que será llamada
célula hembra mientras que la célula dadora pasará a ser
la célula macho. Por lo tanto, existe una diferencia
sustancial con los otros dos procesos, ya que en la
conjugación son dos células vivas las que interactúan y
Se pueden transferir genes que forman parte del esto permite que se transmitan una mayor cantidad de
patrimonio genético básico o genes de información genes posibles y, a la vez, se comprueban los procesos
flexible como la resistencia a los antibióticos sexuales que llevan a cabo las bacterias.
TRANSFORMACIÓN BACTERIANA
TRANSDUCCIÓN
En el caso de la transformación bacteriana explica cómo
el ADN desnudo logra ingresar a la bacteria y generar
células transformantes o transformadas.
Este es un proceso donde interviene un organismo En 1928 Griffith trabajaba con streptococcus
vector, que vendría siendo en este caso un fago o virus. pneumoniae, también llamada neumococo, que posee
Normalmente, estos fagos tienen el potencial de infectar una cápsula polisacárida, la cual es un factor virulento
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que contribuye a la protección de las bacterias frente a colonias R y estas se inyectn al ratón y este no muere, y
la fagocitosis. al hacerle la autopsia al ratón no se recuperan bacterias
vivas. En una tercera fase del experimento se caliente el
Griffith tenía placas de Petri con cultivos de steptococcus cultivo de las bacterias lisas, se hierven, y se le inyecta al
pneumoniae, sin embargo, las características ratón, donde este sobrevive y al hacerle la autopsia al
morfológicas de dichas colonias en algunos casos podían ratón no se recuperan bacterias vivas de tipo S.
variar. Finalmente, cuando se mezclan los cultivos de bacterias
S muertas más las bacterias R vivas, y se le inyecta al
ratón, este muere y en su autopsia se recuperan células
S.
Por lo general estas colonias tienden a ser lisas, bastante La conclusión que obtuvo Griffith de este resultado fue
redondas y mucosas debido a la presencia de su cápsula, que una sustancia presente en las bacterias virulentas
y se les catalogó como bacterias infecciosas virulentas y muertas por acción del calor transformó genéticamente
son colonias S o lisas. Por otro lado, a medida que se las bacterias no virulentas en virulentas y vivas. Por lo
realizan diferentes traspasos de una placa a otra desde la que hay un mecanismo de transferencia que permite que
placa original, se van produciendo colonias bacterianas las bacterias R adquieran esta capacidad virulenta que no
rugosas o R, y estas son colonias mutantes puesto que ya tenían originalmente.
no tienen su cápsula, dejan de ser brillantes y lisas, y son
no virulentas. EXPLICACIÓN MOLECULAR DE LA
TRANSFORMACIÓN BACTERIANA
El experimento de Griffith surge de la pregunta: “¿puede
un extracto de bacterias muertas modificar a un conjunto
de bacterias vivas?”
En primera instancia lo que hace es cultivar las bacterias Las bacterias donantes de un exogenote son las que se
S e inyectárselas a un ratón, donde este muere, puesto lisan y liberan fragmentos al medio extracelular y las
que estas son virulientas. Por otro lado, se cultivan las
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células vivas tienen la capacidad de recibir el material Una vez que ingresa el ADN este no debe ser reconocido
genético de la célula muerta. por las enzimas de restricción ubicadas dentro del
citoplasma para no ser degradado por estas.
Este material genético logra integrarse y recombinarse y
finalmente la célula que capta el material genético queda La fase reversible es cuando la proteína receptora recibe
transformada, ganando nuevos genes que forman parte a la doble hebra de ADN y la fase irreversible es cuando
de su nuevo genoma. la proteína receptora deja pasar al ADN al interior del
citoplasma.
TRANSDUCCIÓN
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CICLO LÍTICO: el fago con capacidad virulenta ingresa a Hay dos tipos de Transducción:
la célula donde logra multiplicarse para luego inducir la
lisis en la célula que lo hospeda, liberándose así al TRANSDUCCIÓN GENERALIZADA: Los fagos trasfieren
exterior y poder infectar un nuevo hospedador. genes con secuencias aleatorias, a causa de un
almacenamiento accidental del ADN del huésped.
CICLO LISOGÉNICO: El fago ingresa a la bacteria
infectándola para formar parte de su patrimonio
genético tomando la capacidad de ser heredado.
Pero hay algunas partículas fágicas que son defectivas o El ADN bacteriano es traspasado a otra bacteria por una
defectuosas. Hay una etapa de la multiplicación vírica infección con el fago resultante.
llamada autoensamblaje, donde el fago se arma paso a
paso. En la cabeza de estos fagos se alberga el material
genético, donde normalmente algunos fagos sólo
albergan material fágico, pero hay otros que solo
empaquetan material celular o ambos. Entonces, como
tienen capacidad infecciosa, van a ir a reconocer a un
nuevo hospedador y van a producir un nuevo ciclo
infeccioso inyectando el material genético, por lo tanto,
al inyectar el material genético, este formará parte del
cromosoma, ya sea material genético fagico o celular,
este se recombinará, y se tendrá una célula transducida.
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en el ADN de la bacteria (E. coli), específicamente en un ende, cuando se produce la lisis de la bacteria, el fago
sitio de anclaje entre los genes de la galactosa (gal) y la sale llevándose los genes (C) de la galactosa, y por lo
biotina (bio), finalmente completa su integración. Para tanto los podrá integrar en nuevas células durante la
esta situación en particular, el fago realiza un ciclo infección.
lisogénico puesto que está integrado en el cromosoma
de E. coli.
CONJUGACIÓN BACTERIANA
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cuando se produce un ruptura en una de las hebras y esta En los genes tra se tendrá:
va a comenzar a pasar hacia la célula receptora, una vez
que pasa se va sintetizando la hebra complementaria, y → Sector Dtr: Tiene que ver con la preparación del
de allí que el resultado son 2 células que contienen el plásmido para ser transferido.
plásmido (a través de replicación del circulo rodante), y → Sistema Mpf: Sistema que mantiene unidas a las
además es semiconservativa (ambos plásmidos tendrán células durante el proceso de transferencia. Este
una hebra nueva y una vieja). sistema es el encargado de codificar para el pilus
sexual, que puede ser largo y flexible para la
Una vez producida la replicación de ADN, la célula se transferencia en medio líquido o corto y rígido
desaparea y cada una se ha convertido en una célula cuando la transferencia ocurre en medio sólido.
portadora del plásmido, tanto la original como la
receptora, y esta última pasó a ser F+ (contiene el CONJUGACIÓN DE GRAM POSITIVOS
plásmido).
Es muy similar a la que ocurre en Gram negativo, sin
▪ CÉLULA F+: contiene plásmido, célula donadora, embargo, el sistema Mpf (el que codifica para el pilus
macho sexual) es mucho más simple y se ha estudiado
▪ CÉLULA F-: no contiene plásmido, célula receptora, básicamente en E. faecalis que son los que pueden
hembra generar ciertas feromonas para estimular la expresión de
los genes Tra en las bacterias vecinas.
ESTRUCTURA FÍSICA, ORGANIZACIÓN GENÉTICA Y
FUNCIONAL DEL PLASMIDO F En la imagen se ven varios E.
faecalis que atraen a su célula
vecina a través de feromonas que
también están siendo codificadas
a través del sistema Mpf.
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Puede haber distintos cruces (Ej. una célula F+ con una conteniendo además de los genes plasmidiales, los genes
F), y el resultado final es que la célula F- dará origen a una cromosomales.
célula F+ puesto que adquiere el plásmido conjugativo. A
las células que tienen inserto el PLÁSMIDO COMO UN ❖ Aunque por regla general la conjugación tiene lugar
EPISOMA se les llama CÉLULA HFR (alta frecuencia de entre miembros de la misma especie, también se ha
recombinación), lo cual significa que cada vez que la demostrado que, ocurre entre bacterias y células
célula pueda dividirse dará origen a una copia del vegetales, animales y hongos.
plásmido en forma de episoma. ❖ La conjugación es una herramienta útil para la
elaboración de mapas genéticos bacterianos.
CRUCES: ❖ En el curso de la conjugación, los genes son
transmitidos en forma consecutiva, a velocidad
constante y siempre en el mismo orden relativo.
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