Evaluación de líquidos corporales:
Líquido seminal
T.M. Herbert Herlitz Cifuentes
Líquido Seminal
Proporciona un medio nutritivo, de movilidad y transporte
para los espermatozoides
El análisis de Liquido Seminal, provee información sobre la
actividad funcional de los principales órganos genitales
masculinos
Información acerca de las condiciones mínimas que debe
reunir una esperma para ser considerado fecundante
Anatomía del aparato reproductor masculino
Parénquima testicular
Formación del líquido seminal
Fluido biológico obtenido tras estimulación sexual proveniente de glándulas
bulbouretrales, próstata, vesículas seminales y túbulos seminíferos
Espermatogénesis, ciclo de 72 días aprox. de tres fases:
(1) Mitosis (2) Meiosis (3) Espermiogénesis
Espermatogenesis
Espermatogénesis
Proliferación
Maduración
Meiosis
Citodiferenciación:
1
Espermatozoide maduro
Regulación hormonal de la Espermatogenia
Secreciones de glándulas anexas
Próstata:
• 15 a 30% del volumen del eyaculado
• pH 6,2 – 6,8
• Fosfatasa ácida, LDH, sustancias como espermina, ácido
cítrico, albúmina, Ca++, Zn++ y Mg++
Vesícula Seminal:
• 70 a 85% del volumen del eyaculado
• Aporta fructosa para la nutrición de los
espermatozoides, prostaglandinas, proteínas y potasio.
Composición del Líquido Seminal
pH
Secuencia Glándulas Componentes fundamentales Volumen
Uretrales
(Litré)
1 Mucoproteínas 0.1-0.2 mL -
Bulbouretral
es (Cowper)
Ácido cítrico, Fosfatasas,
0.5-1.0 ml
2 Próstata Inositol, Espermina, Ca+2, Mg+2, Ácido
15-30%
Zn+2, a-amilasa
Epidídimo Glicerilfosforilcolina
deferente Ácido siálico
Lípidos, fosfolípidos, Carnitina, 0.1-0.3 ml -
3
Ácido láctico, Proteínas, 10%
Ampolla
deferente Inositol, Espermatozoides
Vesículas Fructosa, Potasio, Proteínas, 2.0-2.5 ml
4 Prostaglandinas Alcalino
seminales 50-80%
Eyaculado
Pre-eyaculado (10 – 15%)
Secreción de glándulas de Cowper y Littré, lubricante para el canal uretral
Fracción previa (20%)
Secreción prostática, Licuefacción del coágulo
Fracción principal o central (10 – 15%)
Aporte de espermatozoides
Fracción final (50 – 60%)
Aporte de sustratos energéticos (fructosa)
Objetivo clínico del análisis
El análisis de líquido seminal permite evaluar la infertilidad masculina a través del
examen de las características físicas y químicas del semen y de las propiedades
funcionales y estructurales del Espermatozoide
Infertilidad
Imposibilidad de conseguir embarazo
después de 12 meses de relaciones sexuales
sin medios de protección
Primaria (sin embarazos previos)
Secundaria (si existen embarazos previos)
La falta total de posibilidades de concebir
hijos, se denomina Esterilidad
Principales causas de infertilidad masculina
Falla testicular (espermatogénesis, inmadurez testicular, tumor)
Alteraciones endocrinas (hipofisarias, adrenales, tiroideas)
Criptorquidea Obstrucciones
Alteraciones de la eyaculación
(anomalías anatómicas, anaeyaculación, eyaculación retrógrada)
Inflamaciones (prostatitis, uretritis, epididimitis)
Medicamentos, radiaciones, traumatismos, exceso de calor
Espermograma
Espermiograma
Espermatograma
Espermocitograma
Espermocinetograma
Nos informa sobre:
• Producción de espermatozoide
• Función de las glándulas
sexuales accesorias
cópico
xamen Microscópico
Análisis de Líquido SeminalANALISIS DEL LIQUIDO SEMINAL
•Examen Macroscó
Macroscópico
Pruebas Bioquímicas Examen Microscó
Microscópico
Examen Macroscópico
Pruebas Bioquí
Bioquímicas
Pruebas Inmunológicas Pruebas Inmunoló
Inmunológicas
Examen Microscópico
Pruebas Gené
Genéticas
Pruebas De Funció
Función EspermáPruebas Bioquímicas
Espermática
37
Pruebas Genéticas
Pruebas Genéticas
ción Espermática Pruebas de Función Espermática
37
Toma y manejo de la muestra
Abstinencia sexual de 3 a 5 días, la obtención se debe llevar a cabo en el laboratorio.
De no ser así, debe ser transportada a la brevedad, antes de 30 minutos de colectada y
protegida de temperaturas extremas (<20ºC o >40ºC)
Realizar al menos 2 análisis de líquido seminal
Examen
es de las macroscópico
vías seminales.
uctos eyaculadores. EXAMEN MACROSCOPICO
pogonadismo hipogonadotrópico.
Volumen (cc.) : Aspecto :
pH : Color :
Licuefacción : Olor :
eyaculado (eyaculación
Consistencia retrógrada
: o con
Volumen (conceptos):
Normospermia: 2 – 6 mL
ias Aspermia: Ausencia de semen
Hipospermia: < 1,5 mL
1.5 – 5.0 mL Hiperespermia: > 6 mL
0.2 - 1.0 mL
0.2 mL
0.2 mL
Color
Normal: Gris Amarillento
Apariencia:Verde (pseudomona sp)
Anormal: Pardo (Hematíes, Prostatitis, Vesiculitis).
Normal: homogénea y opalescente a la inspección simple
Rojo (traumatismo, Neoplasias).
Anormal: transparente
APARIENCIA
Color:
Normal: Homogénea y opalescente a Normal:la inspección simple
gris, blanquecino
Anormal: pardo (hematíes, prostatitis, vesiculitis), verde (Pseudomona sp.), rojo
Anormal: Transparente
(traumatismo, neoplasia)
Dependiente de:
ConcentraciónCausas
espermática
de alteraciones en la apariencia:
Detritus celulares Concentración espermática
Células inflamatorias Detritus celulares
Células inflamatorias
Bacterias Bacterias
Eritrocitos Eritrocitos
Substancias excretadas a excretadas
Substancias través del eyaculado
a través del
eyaculado
51
víasagenesia
vías excretoras, excretoras, agenesia
de las mismasdeolas mismasinflamatorios
procesos o procesos inflamatorios
crónicos. crónicos.
> 8.0 puede considerarse
> 8.0 puede considerarse un signo de
un signo de infección infección
seminal si seseminal
asocia asiotros
se asocia a otros
síntomas síntomas y signos
y signos
de sospecha.de sospecha.
procesos inflamatorios agudospHde7,2
procesos inflamatorios – 8,0
agudos
órganos de órganospraccesorios
accesorios óstata vesípróstata vesículas
culas
seminales
seminales y epid ídimo y(ERRORES
epidídimo (ERRORES
TECNICOS). TECNICOS).
EXAMEN MACROSCÓPICO
EXAMEN MACROCOPICO Consistencia
ENCIA O VISCOSIDAD
a: Posible infección
CORRECCION DE LA VISCOSIDAD
erir con la movilidad y •concentración
Jeringa calibre 0.6 mm •Periodos Prolongados de
Abstinencia Sexual
• Agitación < 10 segundos en vortex • Procesos Infecciosos Agudos
pasando el semen a través de una PIPETA dejando
•
48 48
• Mucolíticos alfa-amilasa
ueñas gotas el liquido seminal
Consistencia o Viscosidad* 0,5 – 2,0 cm
FORMACIÓN DE HILO
Normal 0.5-2.0 cm
Disminuida < 0.5 cm
aumentada >2.0 cm
49
50
Alteraciones en el análisis macroscópico y físico
Parámetro Alteración
Aumento: Elución de espermatozoides
Volumen
Disminución: Poca penetración de los espermatozoides
Amarillento: Piospermia, abstinencia prolongada
Color
Rosado, rojizo: Presencia de sangre
Alcalino: Inflamación de glándulas sexuales (prostatitis, vesiculitis,
pH epididimitis)
Acido: Oclusiones del conducto eyaculador o patologías crónicas.
Disminución: Número bajo de espermatozoides
Viscosidad
Incremento: Anulación de la progresión en el moco cervical.
Inflamaciones de la próstata y vesículas seminales
Licuefacción
Impide la fecundación
Examen microscópico
Recuento espermático
Motilidad espermática
Vitalidad espermática
Morfología espermática
Análisis citológico al fresco*
Abundante concentración espermática, la mayoría moviles,
Escasas células redondas, debris (+).
El análisis microscópico se debe realizar completada la licuefacción
Aproximación de la concentración espermática
Recuento espermático
EXAMEN MICROSCOPICO Recuento espermático
C á m a r a de N e u b a u e r
Que necesito?
La cuenta
• Cámara de cuenta de Neubauer espermática debe realizarse después de la licuefacción, posterior a la
• estimación
Eosina Amarillenta diluida con Agua de la concentración espermática en fresco y homogenización correcta
destilada (Merck No. 1345)
• Pipetas Automáticas
• Cubreobjetos
• Tubos Normozoospermia: 20 - 250 millones/mL
Azoospermia: 0 millones/mL
Oligozoospermia: < 20 millones/mL
Polizoospermia: > 250 millones/mL
57
Criptozoospermia: < 1 millones/mL
C á m a r a de N e u b a u e r
El cuadro central
contiene 25 cuadros
pequeños de 0.2 x 0.2
mm.
Estos de dividen en 16
pequeños cuadros de
0.05 x 0.05 mm. 62
61 60
Muestra diluida con eosina amarillenta diluida*
Contar en ambos lados de la cámara (diferencia menor al 10%)
Motilidad espermática
Movilidad progresiva (A):
Los espermatozoides se mueven activamente, ya sea de manera lineal o en un gran
círculo, independiente de la velocidad.
No progresiva (B):
Incluye todos los patrones de movilidad pero con ausencia de progresión como el
avance en pequeños círculos.
Inmóviles (C):
Sin movimiento
Motilidad Normal:
Mayor a 32% A
EXAMEN MICROSCOPICO Motilidad Espermática
(OMS)
A Progresivo Rápido Rectilíneo
25 s a 37 C
20 s a 20 C
Tipos de motilidad
B Progresivo Rápido Curvilineal o recto lento EXAMEN MICROSCOPICO Motilidad Espermática
(OMS)
C No Progresiva < 5 s a 37 C
A Progresivo Rápido Rectilíneo
D Inmóviles 25 s a 37 C
20 s a 20 C
B Progresivo Rápido Curvilineal
C No Progresiva
5 s a 37 C
D Inmóviles
AMEN MICROSCOPICO Motilidad Espermática
(OMS)
74
EXAMEN MICROSCOPICO Motilidad Espermática
rogresivo Rápido Rectilíneo (OMS)
25 s a 37 C
20 s a 20 C
A Progresivo Rápido Rectilíneo
rogresivo Rápido Curvilineal 25 s a 37 C
20 s a 20 C
No Progresiva 5 s a 37 C B Progresivo Rápido Curvilineal
75
nmóviles C No Progresiva 5 s a 37 C
D Inmóviles
1 Manual OMS Normal > 60 %
2 Manual OMS Normal > 50 %
Vitalidad espermática
3 Manual OMS Normal > 75 %
VITALIDAD
TEST EOSINA: 1 hr. Post eyaculación (% vivos):
3 hr. Post eyaculación (% vivos):
Normal:
Vitalidad Mayor al 50%
Necrozospermia:
> 30% de espermatozoides muertos
EXAMEN MICROSCÓPICO
OTRAS
OTRAS ESTRUCTURAS
ESTRUCTURAS
OTR
Otras estructuras
Normal < 5% en relación a espermatozoides:
Células epiteliales de la uretra, células espermatogénicas inmaduras de
distintos tipos, leucocitos (< 1.000.000/mL)
88 88
Morfología espermática
Normales (%) : NORMALES (%) :
Microcéfalos (%) : ANORMALES (%) :
Piriformes (%) :
Puntiagudos (%) :
MORFOLOGÍA NORMAL DE LOS ESPERMATOZOIDES
Macrocéfalos (%) :
Bicéfalos (%) : O.M.S > 30 %
Defectos de cabeza (%) : Criterio Estricto > 14% (Kruger)
Amorfos pieza intermedia(%) : Se asocia a alteraciones de la concentración y movilidad.
Defecto de cola (%) :
Teratozoospermia Causas:
Gota citoplasmática (%) :
Varicocele, la sepsis seminal, el estrés y la exposición a agentes externos
nocivos.
Normal:
OMS ≥ 30%
Criterio estricto ≥ 14% (Kruger)
* Se asocia a alteraciones de la concentración y
movilidad
94
Morfología espermática y fertilización in vitro
Normal
≥ 14% formas normales con buena tasa de fertilización
Buen pronostico
4 a 14% de formas normales con una tasa de fertilización regular
Mal pronostico
< 4% formas normales con una tasa de fertilización muy disminuida
102
Son células con 46 cromosomas, cada una de las cuales dará origen a
4 células n (haploide). Son células con 46 cromosomas, cada una de las cuales d
Células de la espermatogénesis 4 células n (haploide).
ESPERMATIDA
Espermatogonias Espermatocitos
16
15
15
Espermatides
Espermatozoides amorfos
113
114
Análisis bioquímico del semen
• Capacidad secretora de la próstata: Acido cítrico, Zinc, Fosfatasa ácida.
• Capacidad secretora de las vesículas seminales: Fructosa
• Función del epidídimo: Carnitina
• Otros:
• Isoenzimas específicas de la deshidrogenasa láctica (LDH)
• Acrosina
• Condensación de la cromatina
• Concentración del ATP
Clasificación semiológica de la patología de infertilidad masculina
ASTENOZOOSPERMIA:
Motilidad espermática, categoría A menor al 25% o categoría A+B menor al 50%
TERATOZOOSPERMIA:
< 30% de los espermatozoides son normales
OLIGOASTENOTERATOZOOSPERMIA:
Alteración en la concentración, motilidad y la morfología espermática (Producida por
desórdenes o falla testicular, anticuerpos)
PIOSPERMIA:
> 1 mill/ml de células redondas en el eyaculado
HEMATOSPERMIA:
Presencia de hematíes en el eyaculado
Alteraciones no espermáticas del eyaculado:
Volumen
• Hipoespermia • Hiperespermia
Indica falta total o parcial de secreción • Se manifiesta por un volumen seminal
vesicular superior a 6 ml
Hipospermia Importante < 1 ml • Se produce una dilución epermática
por:
Hipospermia Moderada 1-2 ml
• Exceso de secreción vesicular
Significancia clínica:
• Disminuye su concentración en el
• Agenesia de la vía seminal cuello uterino
• Obstrucción de conductos
eyaculadores
• Vesiculitis con o sin prostatitis
Viscosidad
ALTERACIONES DE LA VISCOSIDAD:
• Viscosidad Aumentada
• Licuefacción retardada
• La mayoría de las alteraciones de la viscosidad es de origen infeccioso.
• El aumento de la viscosidad produce un atrapamiento de los espermatozoides y una
disminución de su motilidad progresiva.
• Viscosidad aumentada: Cuando la Licuefacción no se produce en 1 hora luego
de la eyaculación
• Licuefacción retardada: El semen pasa de coágulo a líquido en un tiempo mayor
de lo normal.
Alteraciones citológicas
• ALTERACIONES CITOLOGICAS DEL EYACULADO
• Presencia de leucocitos
• Presencia de hematíes
• Leucocitos mayor a 10 por campo indican procesos inflamatorios con o sin infección
de la vía seminal, principalmente a nivel de próstata.
• Procesos obstructivos
• Desarrollo de anticuerpos anti-espermatozoides
• Fenómenos de aglutinación
• Disminución de la motilidad
• Hematíes (Hemaspermia)
• Indica hemorragia a algún nivel de la vía seminal.
RESUMEN:
Pasos básicos en el análisis del semen
• A los 0-5 minutos después de emitida la muestra, se registran los datos del paciente y se
coloca en una incubadora a 37° C hasta que licué.
• A los 20-25 minutos, se evalúa la licuefacción, la apariencia visual y el olor.
• A los 30-60 minutos, se evalúa la viscosidad, la movilidad espermática, la
agregación/aglutinación espermática, otros tipos celulares y el debris. Se realizan los test para
anticuerpos, se evalúa la vitalidad espermática. Se hacen las diluciones para determinar la
concentración espermática, se separan 100 µL de semen para evaluar células inflamatorias, se
tiñen las láminas para evaluar la morfología espermática, se recupera y centrifuga el semen
para el análisis bioquímico posterior si corresponde.
• Mas tarde, se hace el recuento de espermatozoides en una cámara Neubauer. Si hay un
número > 1x106 células redondas/mL en el semen, se hace una evaluación de células
inflamatorias, se tiñen los frotis para evaluación de la morfología espermática y de células
redondas.
• En el mismo día o después si la muestra es congelada, se realiza el análisis bioquímico de las
secreciones de la próstata (zinc), vesícula seminal (fructuosa) y epidídimo (a-glucosidasa).