A.¿Qué son los biosensores?

Los biosensores son dispositivos que permiten la detección de un

analito, convirtiendo una respuesta biológica en una señal que se puede
medir gracias a procesos fisicoquímicos, que ayudan a controlar ciertos
parámetros biológicos.(Guijarro et al., s/f, p.) Dan información para saber
si el analito está presente o no y como se transduce en una señal
eléctrica que se puede amplificar, mostrar y analizar. (Guijarro et al., s/f,
p.) Combinan un elemento biológico con otro físico químico, aunque no
siempre es así.(Guijarro et al., s/f, p.) Se habla de biosensor cuando el
elemento de reconocimiento es tomado de la naturaleza, como pueden
ser las enzimas. Estas enzimas detectan la reacción en el cuerpo debido
a la capacidad que poseen para reconocer una molécula específica.
(Biosensores electroquímicos de glucosa, 2014).

El primer biosensor fue descrito por Clark y Lyons en 1956(Sciarra Gatti,

2004)y hasta la fecha, se ha avanzado mucho en este campo. Se dio la
oportunidad de incrementar las posibilidades analíticas de los sensores
electroquímicos, mediante la incorporación de una enzima atrapada con
una membrana semipermeable. (Torres, Rámirez, E. 2014) Los
biosensores rastrean automáticamente las sustancias químicas en el
cuerpo sin la necesidad de extraer sangre. Detectan múltiples factores al
mismo tiempo y de forma continua. El desarrollo tecnológico ha hecho
que ya casi pueda medirse cualquier parámetro biológico o químico a
bajas concentraciones y cada vez de forma más fiable.( Torres, Rámirez,
E. 2014)

B.¿Cómo funcionan los biosensores?

Los biosensores se basan en la capacidad de una sonda para unirse a
una sustancia específica, como una proteína, un ácido nucleico, una
enzima o una toxina.(Guijarro et al., s/f, p.) La unión del biosensor a la
sustancia a medir hará cambiar la forma o la función de la sonda.
(Guijarro et al., s/f, p.) Estos cambios se pueden detectar mediante una
variedad de métodos, por ejemplo mediante la luz o movimiento
mecánico.(Guijarro et al., s/f, p.)En general los biosensores funcionan
 gracias a tres partes. Un biosensor está compuesto por una superficie
sensible (biocapa), un transductor y un sistema de señalización. Para
interactuar con el analito en la muestra, la superficie sensible podrá ser
cualquier enzima, proteína o diferentes moléculas. El transductor
convierte la interacción de la reacción en una señal eléctrica medible,
donde el sistema de señalización interpreta y representa los datos.
(Turner, 1987) La sensibilidad de un biosensor depende de la capacidad
del transductor para responder a la interacción. El sistema de
señalización está determinado por la cantidad de analito presente en la
muestra. Los biosensores más utilizados actualmente son los
nanosensores(Turner, 1987).

Figura 1: Esquema típico de un biosensor (Dennise.G.V, 2020)

C. Clasificación de biosensores
Existen cuatro formas de clasificar a los biosensores:

 En función de la naturaleza del elemento de reconocimiento

(enzima, anticuerpo, ácido nucleico) distinguimos entre biosensor
enzimático, inmunosensor, genosensor.(Guijarro et al., s/f, p.)
 Según el método utilizado en la detección del analito , puede
ser directa o indirecta. En el caso de los inmunosensores, el uso
de un método indirecto involucra, a diferencia de los directos, el
empleo de dos anticuerpos que reaccionan con el antígeno, el
primero reacciona como anticuerpo de captura y el segundo irá
marcado y funcionará como anticuerpo de detección.(Guijarro et
al., s/f, p.)
 Los biosensores también se pueden clasificar por el tipo de
material biológico y por su sistema de transducción
empleado. Teniendo en cuenta el sistema de transducción
empleado diferenciamos transductores tradicionales, los cuales
son electroquímicos, ópticos y termométricos, además existen los
másicos, piezoeléctricos y nanomecánicos.

-Dentro de los biosensores electroquímicos, se encuentran cuatro tipos:

potenciométricos (miden la diferencia de potencial generada por algún
componente de la reacción específica entre el analito y el elemento de
reconocimiento manteniendo la corriente constante y utilizando
electrodos selectivos para ciertos iones), conductimétricos (detectan
cambios en la conductividad, asociados con cambios en el contenido
iónico), amperométricos (determinan corrientes eléctricas asociadas a
reacciones de óxido-reducción) y de carga iónica o efecto de campo
(detectan cambios en la densidad de carga-transitor ISFET) .(Guijarro et
al., s/f, p.)

-Los ópticos se basan en detectar la luz como señal de salida traducida,

esta puede ser fluorescente o de difracción óptica, mediante métodos
ópticos como espectroscopía de fluorescencia, interferometría y
espectroscopía de modos guiados, siendo los métodos más utilizados.
(Ortega. F, 2006)
 -Los biosensores termométricos miden el calor de la reacción cuando el
analito de interés interacciona con el bioreceptor, siendo proporcional la
temperatura resultante con la concentración del analito de la muestra,
debido a que el calor total absorbido o producido es proporcional a la
entalpía molar y al número de moléculas totales presentes en la
reacción(Ortega. F, 2006)

 En función del modo en el que interaccionan el elemento de

reconocimiento y el analito:, pueden ser biosensores catalíticos
o biosensores de afinidad. Los primeros se basan en la utilización
de catalizadores biológicos. Finalizada la reacción química
(Guijarro et al., s/f, p.) , el biocatalizador se regenera y puede ser
reutilizado. A este grupo pertenecen los biosensores enzimáticos.
Los segundos se basan en una reacción de afinidad entre el
elemento de reconocimiento y el analito sin que tenga lugar una
transformación catalítica. A este grupo pertenecen los
inmunosensores.(Biosensores electroquímicos de glucosa, 2014).
Este tipo de biosensor es adecuado para la detección de
organismos patógenos que son de interés clínico, así como de
enfermedades genéticas o proteínas características de alguna
enfermedad.

-Y los genosensores que se caracterizan por presentar una alta

sensibilidad y selectividad, estos integran un ácido nucleico (ADN o
ARN), en el elemento de reconocimiento. Su fundamento se basa en
detectar el cambio que ocurre en la señal cuando los pares de bases del
analito de interés son detectados por el bioreceptor.(Dennise.G.V, 2020)

Nanosensores

La nanotecnología está revolucionando el mundo tanto en la industria

como en la medicina.(Landeira, M. 2017) Los nanosensores están
formados por nanopartículas metálicas, aprovechando las propiedades
únicas que otorgan los metales nobles, como el oro, la plata o el platino.
(Landeira, M. 2017)

Estas nanopartículas son muy útiles para diferentes ámbitos, ya que

cuentan con una alta relación de superficie/volumen capaces de
responder óptica y electrónicamente a señales externas.(Landeira, M.
2017) La nanopartícula más utilizada es el oro. Cuando el oro se
encuentra en forma coloidal cambia su color dependiendo del diámetro
de las partículas o de su estado de agregación.
 Es muy utilizado para la creación del transductor, ya que en compañía
de un biosensor óptico, es capaz de captar la señal producida por
radiaciones ultravioleta, visibles o infrarrojas, mediante diferentes
reacciones químicas, físicas o biológicas. De esta forma, el analito podrá
ser detectado por diferentes técnicas.(Landeira, M. 2017)

Los electrones de estas nanopartículas giran gracias a señales

electromagnéticas externas. La oscilación es máxima a una longitud de
onda, la cual se reconoce como plasmón superficial (SPR). El SPR
recoge la absorbancia de luz que incide con una longitud de onda
específica.(Landeira, M. 2017) Este fenómeno se puede detectar con
espectrofotómetro. Si la longitud entre las nanopartículas baja la
actividad del producto de la agregación de las mismas, la longitud de
onda de absorción varía. Así, podemos explicar los biosensores
colorimétricos basados en agregación de nanopartículas de oro. Estos
biosensores pueden ser utilizados para determinar la concentración de
una gran variedad de moléculas presentes en una muestra.(Landeira, M.
2017)

D Utilización de biosensores en diferentes ámbitos

Los biosensores permiten el control de parámetros biológicos sin
necesidad del uso constante de técnicas invasivas o costosos, estudios
de laboratorio(Sciarra Gatti, 2004). Lo más destacable de los
biosensores es la transmisión de información en tiempo real sobre
parámetros clave en procesos de muy distintas áreas.(Sciarra Gatti,
2004)

Los biosensores se utilizan en la actualidad con distintos fines dentro del

campo de la medicina(Turner, 1987), tanto a nivel de screening o
tamizaje, para el seguimiento de pacientes que padecen patologías
crónicas, para el diagnóstico y control de enfermedades como diferentes
tipos de cáncer. (Turner, 1987)Detectan tumores de células germinales,
tumores de próstata e incluso metástasis en edades tempranas. Se ha
creado un sujetador; el sujetador EVA que permite detectar con un
biosensor específico el cáncer de mama en fase temprana. (Ana
Gabriela.R. 2018)

Es importante señalar la acción de los biosensores en otros campos

como el medioambiental, la industria farmacéutica (para el desarrollo de
nuevos fármacos) (Torrente. R. M, 2016), o para el testeo de alimentos en
la industria alimentaria (para la detección de alérgenos en comida o
tóxicos en el agua)(Landeira, M. 2017) . Incluso el ejército tiene un gran
interés en el desarrollo de biosensores como dispositivos contra el
bioterrorismo, ya que pueden detectar elementos de guerra química y
biológica para evitar una posible exposición o infección.(Cortés, D. 2016)

Algunos de los que más se han utilizado en la práctica médica son los
de tipo inmunológico para la detección de enfermedades infecciosas
 como el VIH, los de tipo enzimático electroquímicos para el seguimiento
de pacientes diabéticos y para la determinación de la hormona
gonadotropina coriónica humana, ya que se produce en grandes
cantidades durante el embarazo.(Belén, D. 2018)

Existen biosensores a escala de chip (wearable) colocados en el cuerpo

humano para controlar los signos vitales, corregir anomalías o incluso
realizar una llamada de ayuda en caso de emergencia. En teoría, las
aplicaciones de los biosensores son ilimitadas.(Cortés, D. 2016)

E. Biosensores aplicados al diabetes

Los biosensores de glucosa son claves para pacientes con problemas
de azúcar en sangre. Se suelen preferir los biosensores electroquímicos
para medir la glucosa, debido a su bajo costo, simplicidad y selectividad.
(Biosensores electroquímicos de glucosa,
2014).

La enzima glucosa oxidasa es utilizada como bioreceptor, en los

biosensores de glucosa(Sciarra Gatti, 2004) . Dicha enzima es la
encargada de catalizar la reacción en la que se transforman la glucosa y
el oxígeno en gluconolactona y peróxido de hidrógeno respectivamente.
La gluconolactona en presencia de agua reacciona para formar ácido
glucónico. Posteriormente, el peróxido de hidrógeno se oxida y se mide
la corriente eléctrica producida durante la reacción.(Biosensores
electroquímicos de glucosa, 2014).

Glucosa + O2 —> ácidoglucónico + H2O2. En la reacción anterior los

productos son el ácido glucónico y el peróxido de hidrógeno.
 los biosensores electroquímicos son capaces de medir la concentración
de la glucosa a través de la corriente

eléctrica

Figura 2. Reacciones llevadas a cabo en un biosensor electroquímico de

glucosa.(Biosensores electroquímicos de glucosa, 2014)

Existen tres tipos de transductores que pueden ser utilizados para medir
la concentración de glucosa:

-Sensores de oxígeno, miden la concentración de oxígeno,

convirtiéndola en una corriente eléctrica.

-Sensores de PH, miden la producción de ácido glucónico, convirtiendo

el cambio de PH en una diferencia de potencial.

-Sensores de peróxido. Estos sensores miden la concentración de

peróxido, convirtiéndo dicha concentración en una corriente eléctrica.
(Sciarra Gatti, 2004)

Requerimientos para un Biosensor de Glucosa

Los requerimientos que debe cumplir un biosensor de glucosa, para que
sea viable su comercialización son: exactitud, buena resolución, rango
dinámico, velocidad de respuesta, compensación de temperatura,
insensibilidad frente a interferencias eléctricas o del medio ambiente,
posibilidad de calibración y testeo. (Torres, Rámirez, E. 2014) Esto se
consiguió con el parche de glucosa.

La mayoría de los biosensores de glucosa usan glucosa oxidasa. La

glucosa oxidasa del biosensor entra en contacto con la glucosa
transformando estas moléculas en ácido glucónico y peróxido de
hidrógeno(Torres, Rámirez, E. 2014). A la vez, se generan electrones, y el
sensor de glucosa los mide; si la concentración de glucosa es elevada,
se detectará un mayor flujo de corriente en el sensor de glucosa. Si la
 concentración de glucosa en sangre es baja, se detectará un menor flujo
de corriente en el sensor de glucosa(Torres, Rámirez, E. 2014). El
problema es que la glucosa oxidasa, será afectada por factores
ambientales como el pH del sudor, la temperatura y hasta la humedad.
El tercer obstáculo es la deformidad. Se analiza el sudor de forma
precisa para calcular la cantidad de glucosa sin error, sobre la piel.

Por todo esto se diseñó un dispositivo en forma de parche, se adhiere a

la piel y recolecta el sudor de manera eficiente para poder analizarlo con
precisión y así, calcular la concentración de glucosa(Torres, Rámirez, E.
2014). Se administran fármacos para controlar los niveles altos de
glucosa de forma rápida e indolora. Se deben administrar rápidamente
los fármacos ya que los niveles de glucosa pueden subir o bajar en una
hora. Una inyección de insulina es rápida pero dolorosa, en cambio con
el parche transdérmico no hay dolor, pero es lento. Para solucionar este
problema, integraron microagujas en el parche transdérmico. Se pudo
lograr alta sensibilidad usando nanopartículas.(Torres, Rámirez, E. 2014)

Se utiliza grafeno, ya que es altamente conductivo, suave y elástico.

Para mejorar la precisión se usan varios sensores de distinto tipo;
sensor de glucosa, de pH, de temperatura, de humedad y hasta un
extensómetro para maximizar la precisión. Una vez calculada la
concentración de glucosa se administra la dosis adecuada de fármaco a
través de las microagujas usando un calentador.(Torres, Rámirez, E. 2014)
El sistema del parche se conecta a un analizador electroquímico portátil
que proporciona energía al parche, recoge datos y transmite esos datos
inalámbricamente al teléfono del paciente. Se coloca el parche, este da
calor gracias al calentador, y se empieza a producir el sudor. Cuando la
humedad relativa dentro del parche llega al 80% se comienza a hacer
mediciones con otros sensores. La glucosa y el ph se miden
simultáneamente.(Torres, Rámirez, E. 2014)

F. Biosensores aplicados al cáncer

Los biosensores se pueden usar para diagnosticar y monitorear el
cáncer. (CORDIS RESULTADOS DE INVESTIGACIONES DE LA UE. 2016)

Los más adecuados son los biosensores electroquímicos, debido a su

enorme potencial, ya que constituyen un ejemplo de sensor de alta
especificidad para medir niveles extremadamente bajos de marcadores
para detectar las alteraciones en las primeras etapas de la
enfermedad(Mahon Helguero, M. 2019)

El diagnóstico de cáncer en la etapa temprana puede desempeñar un

papel fundamental para que su tratamiento sea eficaz y exitoso. (M.R.
Hasan. 2021) Los métodos de diagnóstico tradicionales para la detección
del cáncer son costosos y requieren de mucho tiempo. (M.R. Hasan. 2021)
Sin embargo, el diagnóstico de cáncer basado en biosensores está
emergiendo como una de las estrategias más prometedoras para el
diagnóstico temprano, esto es muy importante ya que un inconveniente
del diagnóstico del cáncer es la falta de síntomas en los inicios de la
enfermedad.(Mahon Helguero, M. 2019)

En términos de cáncer, el analito que detecta el biosensor, es un

biomarcador tumoral.(Mahon Helguero, M. 2019) Así, midiendo los niveles
de ciertas proteínas expresadas y/o secretadas por las células
tumorales, los biosensores pueden detectar si existe un tumor, si es
benigno o canceroso, y si el tratamiento ha sido eficaz para reducir o
eliminar las células cancerosas. (Mahon Helguero, M. 2019) Los
biosensores que pueden detectar múltiples analitos pueden resultar
particularmente útiles en el diagnóstico y seguimiento del cáncer, ya que
la mayoría de los tipos de cáncer involucran múltiples biomarcadores. La
capacidad de un biosensor para analizar múltiples marcadores a la vez
no solo ayuda con el diagnóstico, sino que también ahorra tiempo y
recursos.(Deniz, S, 2019)

Cáncer oral

Los investigadores de la Universidad Complutense de Madrid han

desarrollado un nuevo biosensor que con tan solo una pequeña muestra
de saliva analiza la presencia de determinados biomarcadores –niveles
que están alterados cuando existe algún tipo de tumor -. (Cortés, D.
2016) De momento, la herramienta se ha probado con personas sanas,
pero los científicos esperan poder contrastar con pacientes que
presentan cáncer oral, es decir, tumores localizados en la boca, lengua,
labios y glándulas salivales.(Cortés, D. 2016)

Se ha demostrado que los niveles de expresión de la proteína IL-8 y su

mRNA en muestras de saliva están relacionados con la presencia de
cáncer oral.(Turner, 1987) Además, otros estudios han confirmado que
la detección simultánea de estos dos biomarcadores de distinta
naturaleza (uno proteico y otro genético) permite elaborar un diagnóstico
clínico más preciso.(Cortés, D. 2016) Gracias a la detección de dos
biomarcadores se minimiza la existencia de falsos positivos y negativos.
(Cortés, D. 2016) La determinación de uno de ellos genético (el mRNA)
permite, además, un diagnóstico más temprano.(Turner, 1987)

Podría ser útil para otros tipos de tumores. Hasta el momento, ninguna
herramienta había conseguido reunir en un mismo biosensor el análisis
simultáneo de estos marcadores. Este dispositivo se podrá emplear para
detectar cáncer de cabeza y cuello, utilizando también muestras de
saliva.(Cortés, D. 2016) Pero además, los científicos confían en que
pueda utilizarse para diagnosticar otros tipos de cáncer, utilizando en
vez de saliva, otros fluidos biológicos como suero, sangre u orina.
(Cortés, D. 2016)

Un grupo de científicos de Wong ha desarrollado otro biosensor para

identificar a través de la saliva de pacientes, con carcinoma oral de
células escamosas, el ARN asociado al tumor.(Ortega. F, 2006) Este
grupo de investigación descubrió, a través del perfil de expresión del
ARNm de la saliva, que 1.679 genes presentaban diferente expresión
comparada con la correspondiente a individuos sanos.( Ortega. F, 2006)
Muchos de estos genes en la firma de expresión no tienen una relación
directa con la etiología del cáncer, pero son válidos como marcadores
indirectos de la existencia de un carcinoma oral.( Ortega. F, 2006) El
equipo de investigadores se centró en 7 de los biomarcadores
expresados regularmente. La combinación de estos marcadores probó
su eficacia en el 91 por ciento de los casos.( Ortega. F, 2006) No cabe
duda que puede representar un método de diagnóstico temprano frente
a los complejos procedimientos quirúrgicos actualmente empleados.
(Ortega. F, 2006)

Cáncer de mama

Recientemente, un equipo de investigadores españoles ha desarrollado,

a nivel de laboratorio, un prototipo de un nuevo biosensor para ayudar a
detectar el cáncer de mama en sus fases más tempranas.(Iris. G. C,
2021) Actualmente, la mamografía es la técnica estándar más utilizada
para el diagnóstico, pero presenta algunas limitaciones, como la
exposición a la radiación, y una menor sensibilidad y especificidad en
mujeres jóvenes con tejido mamario denso. (Iris. G. C, 2021) Por ello, son
necesarias nuevas herramientas de diagnóstico que ayuden a la
detección temprana del cáncer de mama. Este biosensor va en esta
línea.(Iris. G. C, 2021)

El desarrollo de este prototipo de biosensor para ayudar al diagnóstico

se enmarca en el campo de lo que se conoce como biopsia líquida, que
a través de un análisis de sangre ayuda a detectar la presencia de
cáncer.(Iris. G. C, 2021) En este caso, el biosensor desarrollado por el
equipo de la UPV es sencillo de utilizar, de bajo coste y ofrece los
resultados en 30 y 60 minutos a partir de una muestra de plasma de la
paciente.(Iris. G. C, 2021)

El biosensor está compuesto por un nanomaterial –una alúmina

nanoporosa- que facilita la detección en plasma de microARN miR-99a-
5p asociado al cáncer de mama.(Iris. G. C, 2021) Hasta ahora, esto se
hace con técnicas complejas y que requieren de mucho tiempo, lo que
provoca que no se puedan utilizar como herramienta de diagnóstico en
el ámbito clínico. (Iris. G. C, 2021)

Este biosensor funciona con un sistema de diagnóstico alternativo: los

nanoporos del biosensor se cargan con un colorante –rodamina B- y se
cierran con un oligonucleótido.(Iris. G. C, 2021) Al hacerlo interactuar con
la muestra de plasma, si no detecta la presencia del microARN, las
puertas de los poros siguen cerradas; en cambio, en presencia del miR-
99a-5p, esas puertas se abren y se libera el colorante. (Iris. G. C, 2021) El
 cambio en la liberación del colorante puede correlacionarse con
pacientes sanas o con cáncer de mama.(Iris. G. C, 2021)

En el desarrollo de este biosensor se han realizado los ensayos para la

validación de los nuevos biosensores.(Iris. G. C, 2021)