UNIVERSIDAD DE GUAYAQUIL
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS
CARRERA: QUÍMICA Y FARMACIA
GUÍA DE PRÁCTICAS DE LABORATORIO
Tema: CURVA ESTANDAR DE CALIBRADO
Practica
N°5 ION (MnO4)- a partir del Permanganato de potasio
Alcivar Cuesta Cira
Choez López Carlos
Integrantes: Cruz Meza Kimberly
Collaguazo Uriña Tatiana
Yagual Vergara Keyla
CURSO: G3
Docente: Q.F. Zoraida Burbano
-GRUPO 1
Objetivos de la práctica de Laboratorio
1. Comprobar el enunciado de la Ley de Lambert-Beer y su aplicación en el laboratorio
Instrucciones o consideraciones previas
La absorbancia está relacionada con la concentración de la sustancia, c, por la ley de Lambert-Beer, que se
resume con la ecuación: A = ε b c , donde c se expresa en mol/L, b es la longitud del camino óptico (anchura de
la célula que contiene la disolución de la sustancia) y se expresa en cm, y ε es la absortividad molar, propiedad
característica de cada sustancia correspondiente a la cantidad de radiación que absorbe a una longitud de onda
determinada por unidad de concentración, siendo sus unidades L mol-1 cm-1.
A medida que la luz atraviesa un medio que la absorbe, la cantidad de luz absorbida en cualquier volumen
corresponde a la intensidad de luz que incide, luego se multiplica por el coeficiente de la absorción.
Frecuentemente la intensidad de un haz de luz incidente declina significativamente a medida que pasa a través
del medio absorbente. Cuando esta relación se expresa como Ley de BOUGUER-LAMBERT-BEER, tenemos
que:
Donde,
T = Transmitancia
ε = Coeficiente molar de extinción
c = Concentración molar del absorbente
d = Recorrido en cm
Para poder aplicar la ley de Lambert-Beer es necesario seleccionar previamente una longitud de onda puesto que
tanto A como ε varían con ella. Para ello se obtiene previamente el espectro de absorción de la sustancia, que
consiste en una representación de los valores de absorbancia frente a la longitud de onda expresada en
nanometros (nm). Del espectro de absorción puede seleccionarse el valor de longitud de onda para el cual la
absorbancia es máxima. (Universidad de Mexico, 2014)
La transmitancia se puede trazar con relación a la concentración, pero esta relación no sería Lineal. Aunque el
logaritmo negativo en base 10 de la transmitancia sí es lineal con la concentración. De esta forma, la absorción
es medida como:
Reactivos de Laboratorio
• KMnO4
• Agua destilada
Materiales (presencial)
• Pipetas volumétricas
• Matraces volumétricos
Equipos de Laboratorio (presencial)
• GENESYS 20
• Balanza analítica
Técnica operatoria
• Preparar 500 ml de una solución estándar de Permanganato de potasio que contenga 500 µg de ION
PERMANGANATO (MnO4)-/ml
• A partir de esta solución tome una alícuota y prepare una DILUCIÓN PRIMARIA de 25 ml
Luego, de esta dilución prepare 5 estándares de trabajo en matraces volumétricos de 10 ml, enrase con
agua destilada
PARTE INSTRUMENTAL:
1. Encienda el instrumento (10 a 15 minutos) antes de ser utilizado.
2. Seleccione la longitud de onda ideal para el Permanganato de potasio.
3. Configure el instrumento utilizando agua destilada como blanco.
4. Coloque en el recipiente de la muestra la cantidad necesaria de cada una de las diluciones preparadas,
lleve a la marcha de los rayos y realice las diferentes lecturas.
Actividades por desarrollar
• Realice los cálculos para la preparación de la solución stock, la dilución primaria y los estándares
de trabajo
Solución Stock
Preparar 500 ml de una solución estándar de Permanganato de potasio que contenga 500 µg de ION
PERMANGANATO (MnO4)-/ml
Concentración ion permanganato: 500µg
Volumen: 500mL
500µg 1mL SPTT
x 500mL
x= 250000µg = 0,25g MnO4-
PM KMnO4 = 158,034g/mol
PM MnO4- = 118,94 g/mol
158,034g/mol KMnO4 118,94g/mol MnO4
x 0,25g MnO4-
x= 0,33g KMnO4/ 500Ml
Para preparar la solución stock se debe pesar 0,33 g de KMnO4 y aforar a un matraz de 500 ml
Dilución primaria
A partir de esta solución tome una alícuota y prepare una DILUCIÓN PRIMARIA de 25 ml
C1= 500µg
V1(Alícuota)= 4mL
V2= 25mL
C1 x V1 = C2 x V2
C1x V1
C2 =
𝑉2
500µ𝑔𝑥 4𝑚𝐿
C2 = = 𝟖𝟎µ𝒈
25𝑚𝐿
De la solución stock debemos tomar 3ml y trasvasarlo a un matraz de 25 ml y aforarlo con agua destilada.
Estándares de trabajo
• Estándar 1
C1= 80µg
V1(Alícuota)= 1mL
V2= 10mL
C1 x V1 = C2 x V2
C1x V1
C2 =
𝑉2
80µ𝑔𝑥 1𝑚𝐿
C2 = = 𝟖µ𝒈
10𝑚𝐿
• Estándar 2
C1= 80µg
V1(Alícuota)= 2mL
V2= 10mL
C1 x V1 = C2 x V2
C1x V1
C2 =
𝑉2
80µ𝑔𝑥 2𝑚𝐿
C2 = = 𝟏𝟔µ𝒈
10𝑚𝐿
• Estándar 3
C1= 80µg
V1(Alícuota)= 3mL
V2= 10mL
C1 x V1 = C2 x V2
C1x V1
C2 =
𝑉2
80µ𝑔𝑥 3𝑚𝐿
C2 = = 𝟐𝟒µ𝒈
10𝑚𝐿
• Estándar 4
C1= 80µg
V1(Alícuota)= 4mL
V2= 10mL
C1 x V1 = C2 x V2
C1x V1
C2 =
𝑉2
80µ𝑔𝑥 4𝑚𝐿
C2 = = 𝟑𝟐µ𝒈
10𝑚𝐿
• Estándar 5
C1= 80µg
V1(Alícuota)= 5mL
V2= 10mL
C1 x V1 = C2 x V2
C1x V1
C2 =
𝑉2
80µ𝑔𝑥 5𝑚𝐿
C2 = = 𝟒𝟎µ𝒈
10𝑚𝐿
Resultados obtenidos
Con los datos obtenidos haga el grafico correspondiente utilizando el programa de Excel, recuerde incluir
como primer dato el valor de Cero, tanto para la concentración como para la absorbancia
NIVEL NO CONCENTRACIÓN ABSORBANCIA
0 0µg 0
1 8µg 0,097
2 16µg 0,170
3 24µg 0,249
4 32µg 0,333
5 40µg 0,466
Conclusiones
En la presente practica se construyó una curva de calibrado para el ion permanganato donde se relacionó las dos
variables, la variables independiente concentración que se la obtuvo mediante los cálculos pertinentes a partir de
la soluciones y las diluciones preparadas, y la variables dependiente la absorbancia, dichos datos se obtuvieron
de las lecturas del espectrómetro, ambas variables mantiene una relación directamente proporcional, así mismo
se concluye que las mismas mantienen una relación fuerte ya que el coeficiente de relación es de 0,9903, por lo
tanto se comprueba la ley de Lambert-Beer donde la concentración es directamente proporcional a la absorbancia.
Según el gráfico:
1. ¿Cuál es la relación que existe entre las variables?
Existe una relación directamente proporcional, ya que a medida que la concentración aumenta la absorbancia
también.
2. ¿Detectó alguna desviación?
Existen ligeras desviaciones en la concentración 8, 16 y 24 mientras que la concentración 32 va aumentando
gradualmente, y a la concentración 40 la desviación es mas notable entre todas, aun así dichas desviaciones
permiten tener un relación entre las variables
3. ¿En qué grado afectan a la linealidad fotométrica y como se corrigen?
La linealidad fotométrica nos permite, determinar la proporcionalidad entre la concentración y absorbancia, la cual
nos permite conocer como se relacionan las variables entre sí y para realizar las mediciones de manera correcta.
El grado de afectación lo podemos determinar a través del coeficiente de correlación ya que mediante el mismo se
estable la linealidad de la misma.
Para corregir el grado de afectación de una linealidad se deben volver hacer los cálculos, calibrando el instrumento
con el blanco, antes de su uso y al cambiar las concentraciones de los analitos y realizan las lecturas correctas
4. Según el trabajo realizado. ¿Qué es una curva estándar de calibrado y para qué sirve?
Una curva de calibrado es una grafico en el cual relacionamos dos variables que se implican en el estudio
que se realiza una independiente y otra dependiente en donde se grafican puntos de mediciones que se
obtienen experimentalmente, sirve para conocer la relación que existe entre las variables, el cual debe
tener un coeficiente de correlación lineal entre 0.9 y 1 para concluir que las variables están relacionadas.
Recomendaciones
• Usar correctamente el espectrofotómetro.
• Realizar los cálculos detalladamente para así poder obtener una curva de calibrado sin errores.
Bibliografía
Universidad de Mexico. (mayo de 2014). Obtenido de [Link]
[Link]
