Enzimas

Viviana Rodriguez
 Introducción
● Las células tienen una vida muy
activa que es sustentada por una gran
cantidad de reacciones químicas.
● Por ejemplo: el movimiento de
solutos y agua a través de su
membrana, que como se representa
en la figura utiliza diferentes
mecanismos moleculares y celulares;
ejemplo: los transportadores de
membrana y diferentes mecanismos
de endocitosis (proceso por el cual la
célula introduce en su interior
moléculas a través de su membrana).
 Introducción
● La célula debe movilizarse, dividirse y realizar
múltiples tareas que permiten el mantenimiento
básico de las funciones celulares, algunas de estas
tareas son: producción de energía, reposición de
proteínas dañadas y la reparación del ADN.
● Para cumplir dichas tareas y actividades la célula
debió evolucionar una maquinaria química que le
permitiera aumentar en gran magnitud la velocidad
de las reacciones químicas con respecto a las
reacciones que ocurren fuera de los organismos
vivos.
● Tanto en células procariotas (células simples),
como en células eucariotas (células complejas), en
todo momento se dan miles de reacciones químicas
por segundo.
● La gran mayoría de las reacciones que tienen lugar
en la célula son catalizadas por enzimas.
 Características
● La enorme mayoría son proteínas.
● Son altamente específicas para la reacción que catalizan.
● Son inhibibles en forma competitiva
● Son regulables.
● Provocan una aceleración de la velocidad de reacción.
● No modifican los productos de reacción con respecto a la
reacción no catalizada.
● No se consumen durante la reacción.
● No modifican el equilibrio de la reacción.
● Son eficaces a muy bajas concentraciones.
● Si la reacción es reversible, catalizan en ambos sentidos.
 Número de recambio
● Cada molécula de enzima puede procesar cientos de miles de millones
de moléculas por segundo.
● Esta medida es conocida como número de recambio.
● En la enzimología, los reactivos de una reacción son conocidos como
sustratos.
● El número de recambio es el número máximo de moléculas de
sustrato que una enzima puede transformar en producto por unidad de
tiempo.
 Número de recambio
● La staphylococcal nuclease es la más lenta de la tabla, en 1
segundo realizó 95 ciclos catalíticos.
● Mientras que la hazaña de la carbonic anhydrase transforma
1 millón de moléculas de sustrato por segundo.
● Según el nº de recambio de una enzima se mide la
aceleración de las reacciones.
● Los catalizadores no biológicos tienden a incrementar la
velocidad de reacción entre 102 a 104 con respecto a la
reacción no catalizada.
● Mientras que los biológicos de 106 a 1017 , por lo que estos
últimos son mucho más eficientes.
 Nomenclatura
● Sufijo: -asa
○ Frecuentemente, se las denomina haciendo referencia al tipo
de reacción que catalizan
■ Peptidasas (catalizan hidrólisis del enlace peptídico)
■ Fosfatasas (hidrolizan los ésteres de fosfato)
■ Sintetasas (intervienen en la síntesis de biomoléculas)
■ En forma particular a las enzimas que catalizan
reacciones específicas se las suele llamar haciendo
alguna mención a la reacción que catalizan.
■ Por ejemplo: la enzima que cataliza la
deshidrogenación del lactato es: lactato
deshidrogenasa.
 Estructura
● Sitio activo: región de las enzimas que realiza interacciones
con el sustrato. En general, recibe el nombre de bolsillo,
tratándose de una especie de hendidura en la superficie de
la estructura proteica. A su vez, el sitio activo se divide en
dos regiones: el sitio de unión y el sitio catalítico.
○ Sitio de unión: establece interacciones débiles con el
sustrato y contribuye a la aproximación de los grupos
químicos que se verán afectados por la reacción con el
sitio catalítico.
○ Sitio catalítico: es donde se produce la reacción, tiene
lugar la catálisis.
 Estructura
● En la imagen se observan algunas de las interacciones con
el sustrato que se pueden dar en el sitio de unión.
● La enzima establece puentes de H y enlaces iónicos con el
S, aunque también se pueden dar interacciones
hidrofóbicas.
● Estas interacciones se encargan de posicionar
adecuadamente al S para la máxima eficiencia de la
reacción.
● La actividad catalítica de las enzimas depende de la
ubicación precisa en el espacio de los grupos químicos que
interactúan con el sustrato, por lo tanto, factores que
provoquen una desnaturalización de la enzima determinan
una pérdida de la actividad enzimática
 Modelo de llave-cerradura
● En 1890, Emil Fisher, a partir de resultados experimentales en
levaduras, propuso que para que las enzimas ejerzan su efecto deben
estar unidas al sustrato, exponiendo así su Modelo de Llave-Cerradura.
● Según este modelo la enzima tiene un sitio de estructura
complementaria a la estructura del sustrato.
● Si bien hoy en día se sabe que esto es más complejo, este modelo
plantea dos conceptos innovadores que hoy en día se mantienen:
○ Las enzimas son específicas. (Otra llave no logra abrir la misma
cerradura)
○ Las enzimas se unen al sustrato formando un complejo
enzima-sustrato.

Este modelo suponía una enzima rígida y ya no es válido.

 Modelo del ajuste inducido
Koshland.
● En este modelo, la estructura del sitio activo no es exactamente
complementaria al sustrato, sino que cuando entra en contacto
con este cambia de conformación y estructura apropiadamente al
sitio activo para formar el complejo enzima-sustrato apropiado
para realizar la catálisis.
 Tipos de mecanismos
catalíticos

Catálisis por iones Catálisis covalente Catálisis

metálicos Se dan enlaces covalentes con el ácido-base
Pueden provenir de Ocurre una transferencia
sustrato. Luego algunos de los
grupos prostéticos o de de protones o hidroxilos
productos se liberan, otros
cofactores, o pueden que provienen, o bien del
pueden quedar unidos a la
asociarse débilmente a la medio acuoso que rodea
enzima, por esto el enlace
enzima. la enzima, o de los grupos
covalente debe escindirse para
funcionales de la propia
liberar los otros productos y
enzima.
volver la enzima a su
conformación inicial.
 Cofactores de enzimas

● Muchas reacciones enzimáticas requieren de grupos químicos extra para

completar sus funciones, en estas situaciones las enzimas recurren a
componentes no proteicos que les aportarán los grupos químicos necesarios.
Al conjunto de estos componentes se lo denomina cofactores.
● Pueden ser iones metálicos (Fe2+, Cu2+, Mn2+ , etc.), o moléculas orgánicas o
metalorgánicas llamadas coenzimas.
● La mayoría de estas últimas son derivadas de las vitaminas.
● Un cofactor puede estar libre en solución, o unido en forma estable a la
enzima.
● Cuando esto último sucede se los denomina grupo prostético.
 Coenzimas

● A diferencia de las enzimas, las

coenzimas quedan modificadas al final de
la reacción.
● Suelen ser dadores o aceptores de
grupos químicos diversos,
comportándose como transportadores.
● En este esquema se ve como la coenzima
se une al sitio activo y queda modificada
al recibir un grupo químico del sustrato.
● Para regenerar a la coenzima a su estado
original es necesaria una nueva reacción
catalizada por otra enzima, en el caso de
la imagen está representada por “E2”.
 Modificaciones de las
enzimas
● Algunas enzimas pueden sufrir modificaciones covalentes que
cambian su actividad, esto puede suceder, por ejemplo, cuando la
enzima se sintetiza como un precursor inactivo, que se denomina
proenzima, más grande que la enzima activa, y para activarla es
necesaria una reacción. Estas reacciones pueden involucrar otras
enzimas o cambios en el pH que provoquen la hidrólisis de la
enzima en los sitios apropiados y determinen su activación.
 Modificaciones de las
enzimas
● Otra modificación es cuando la enzima normal sufre la adición de
un grupo químico mediante un enlace covalente, esto la puede
activar o inhibir dependiendo de qué enzima sea. Esto sucede muy
frecuentemente con el ATP, que transfiere un grupo fosfato a la
enzima y se transforma en ADP. Este tipo de modificación también
es reversible, en este caso por la enzima E3, que remueve el
grupo químico.
 Isoenzimas
● En un mismo organismo e incluso en una misma célula, puede haber más
de una enzima que catalice la misma reacción, estas formas alternativas
de una misma actividad enzimática reciben el nombre de isoenzimas.
● Debido a que difieren en sus propiedades físicas y químicas es posible
separarlas e identificarlas, frecuentemente tienen una distribución
particular en los tejidos del organismo según las funciones que cumplen.
● Por ejemplo, la lactato deshidrogenasa (LDH) es una enzima oligomérica
que tiene 4 subunidades.
● Estas subunidades se dividen en 2 tipos con distintas propiedades: las H
(heart) y las M (músculo); que se combinan de todas las formas posibles
formando 5 isoenzimas:
 Importancia de las enzimas
en la práctica médica
● Cuando las enzimas o isoenzimas intracelulares están presentes
en la sangre indican destrucción de los tejidos de origen de estas
enzimas.
● Solo resultan de utilidad las que tienen una distribución exclusiva
o predominante en un tejido particular.
● Por ejemplo, en el enzimograma hepático: en este examen se
analiza la presencia de enzimas hepáticas en sangre, sabiendo
que estas aumentan en diversas afecciones en las que hay
destrucción de tejido hepático, tales como la hepatitis o la cirrosis.
● También es utilizado esto para el diagnóstico de infarto de
miocardio, en el que se busca detectar en sangre determinadas
enzimas características del corazón, entre ellas las isoformas
cardíacas del lactato deshidrogenasa.
Deficiencias en las Enzimas
● La carencia o deficiencia de determinadas enzimas provoca
que ciertas reacciones químicas necesarias no tengan lugar,
y esto puede traer consecuencias graves.
● Hay reacciones tan fundamentales para la célula que la
carencia total de la enzima que las cataliza provoca la
muerte en la etapa embrionaria o fetal.
● Mientras que deficiencias donde la carencia no es total,
dependiendo de la enzima en cuestión, generan
enfermedades.
● Solamente conociendo cuál de las enzimas está alterada y
cuáles son las consecuencias de su deficiencia en la
fisiología celular, es posible tratar al paciente para que
pueda sobrellevar la enfermedad.
 Cinética
Enzimática
 Condiciones para que ocurra una
reacción química

● Colisiones: las moléculas deben chocar

● Orientación apropriada
● Energía suficiente
● Una proporción reducida de moléculas cumplirán con estas
condiciones, entonces se dice que si el choque es efectivo o que
la colisión fue exitosa, la reacción tiene lugar.
 Condiciones para que ocurra una
reacción química
● 1. Energía suficiente, pero orientación no apropiada.
Reacción no tiene lugar.
● 2. Orientación apropiada pero no energía suficiente.
Reacción no tiene lugar.
● 3. Moléculas que chocan tienen la orientación y
energía apropiada y logran reaccionar.
 Velocidad de reacción
● El nº de colisiones exitosas determinará la velocidad de
reacción.
● Para cualquier reacción la velocidad es proporcional a la
frecuencia de colisiones exitosas entre las moléculas
reaccionantes.
● A mayor número de colisiones exitosas mayor velocidad.
Hay dos factores que modifican la velocidad de reacción.
A+B ⇾ AB

● 1)Concentración de reactivos: a mayor concentración de

reactivos mayor nº de colisiones exitosas y, por lo tanto,
mayor velocidad.
 Velocidad de reacción

● 2) Temperatura: el aumento de la T provoca un aumento

de la energía cinética de las moléculas y en
consecuencia aumenta el número de choques que tienen
lugar por unidad de tiempo, así como la cantidad de
energía del choque. Como resultado, provoca un
aumento de la velocidad de reacción. En este caso, en
que la reacción es monomolecular, el aumento es lineal.
La concentración de A = 0, la v = 0, entonces la función
matemática es la de una recta que pasa por el origen.
Entonces:
● Reacción de 1er orden: son las reacciones cuya función de
velocidad es una recta determinada, ya que, el exponente de la
concentración de reactivos es 1.
● Reacciones de 2do orden, se pueden de manera que las dos
moléculas sean diferentes; A y B reaccionan para dar C y D, o que
las moléculas sean iguales dando en este caso E y F. Las
ecuaciones de velocidad no son de una recta, la suma de los
exponentes de las concentraciones de reactivos es 2.
 Cuando la reacción alcanza
el equilibrio
● La velocidad de formación de A = velocidad de
formación de B
● Las concentraciones de A y B serán las
concentraciones de equilibrio.
 Ley de Acción de Masas
Principio de Le
Chatelier.

● Si se alteran las concentraciones de los productos o de los reactivos, el

sistema dejará de estar en equilibrio, por lo tanto, las velocidades en
los dos sentidos ya no serán iguales
● Si se aumenta la concentración de reactivos se favorecerá la reacción
directa hasta alcanzar el equilibrio. Reactivo -------- Producto.
● Si se aumenta la concentración de productos se favorecerá la reacción
inversa. Producto-------Reactivo.
 ¿Qué determina que una
reacción química tenga lugar?
● Desde el punto de vista termodinámico se deben cumplir
dos condiciones:
○ 1. La energía de los reactivos debe ser mayor que la
de los productos.
○ 2. Las moléculas logren vencer la energía de
activación.

● Energía de activación: es un nivel de energía superior que

deben alcanzar las moléculas para poder reaccionar.
● En la gráfica se muestra que A se podrá transformar en B, si
la energía del primero es mayor que la energía B.
 ¿Qué determina que una
reacción química tenga lugar?

● ¿Cómo alcanzan las moléculas el estado de activación?

● No todas las moléculas del reactivo tienen la misma energía cinética, las que
tengan mayor energía alcanzarán el estado de activación.
● La cantidad de moléculas que alcancen la activación dependerá, por un lado, de la
energía cinética de todo el conjunto de las moléculas, y por otro, de la magnitud de
la energía de activación; si es muy alta pocas moléculas la alcanzaran.
 Estado activado o de transición

● Ocurre cuando las moléculas alcanzan el nivel

energético de la energía de activación.
● Si alcanza el estado de transición (cima de la
colina), está en una posición más inestable, y
puede caer para cualquiera de los dos lados.
● Puede volver al estado A en donde la reacción
no tendrá lugar, o avanzará al estado B
Considerando una reacción
irreversible
● K2 es la constante de velocidad del pasaje de S
activado (*) a productos.
● Para que S forme los productos, este debe
pasar al estado activado o de transición en una
reacción reversible. S* podrá volver a S o
avanzar hacia los productos.
● De acuerdo a la ley de acción de masas, la
velocidad de generación de productos está
determinada por la [S*].
● A mayor concentración de S* mayor será la
velocidad de formación de productos.
 ¿Cuáles son las formas de
aumentar la concentración de
S* para aumentar la velocidad
de reacción?
● La velocidad de la reacción es proporcional a [S*]
● La [S*] aumenta por:
○ incremento de [S]
○ aumento de la temperatura
○ disminución de la energía de activación: ➢ Esto se logra
mediante catalizadores
 ¿Cuáles son las formas de aumentar la
concentración de S* para aumentar la
velocidad de reacción?
● La adición de un catalizador a la reacción provoca una
disminución de la energía de activación, y, por lo
tanto, habrá mayor número de moléculas con la
energía suficiente para sortear la barrera de
activación, y la velocidad de reacción aumenta.
● Importante: la adición de un catalizador a una
reacción reversible provoca un aumento de la
velocidad de reacción en ambos sentidos. Debido a
que las enzimas no modifican el contenido energético
de S, ni de P, no modifican el equilibrio de la reacción,
y por lo tanto las constantes de equilibrio de la
reacción no catalizada y de la catalizada son iguales.
 Energía de activación
● En la imagen se ve cual es el cambio en la energía de activación
para reacciones catalizadas por catalizadores no biológicos y para
las enzimas:
● En la tabla, la energía de activación baja en presencia de una
enzima con actividad catalítica, por lo que se incrementa la
velocidad de reacción.
 Energía de activación
● Diversos tipos de mecanismo catalíticos
● Efectos por proximidad Refieren a reacciones con más de un
reactivo, cuando se unen los reactivos al sitio activo, se aproximan
entre sí y lo hacen en la orientación correcta (efectos por
orientación). Como consecuencia, la reacción se ve favorecida.

● Catálisis por unión preferencial al estado de transición. Las

enzimas aumentan la velocidad de reacción uniéndose con mayor
afinidad al estado de transición. Los modelos cinéticos muestran
que esta situación determina un aumento de la velocidad de
reacción. Actualmente, se ha comprobado que numerosas
enzimas actúan utilizando este mecanismo.
 Enzimas Michaeleanas
● Analizaremos cómo varía la velocidad de reacción en
función de la [S] en una reacción no catalizada y en
una catalizada.
● Las medias de velocidad deben realizarse en
condiciones iniciales, a esta velocidad se le
denomina Velocidad inicial (𝑽𝟎 ).
● La velocidad de una reacción unimolecular aumenta
linealmente con la concentración del sustrato.
● Cuando la reacción es catalizada por una enzima se
representa en la gráfica como una curva, la cual
corresponde a una hipérbola rectangular.
 Modelo matemático propuesto por
Michaelis y Menten

● La enzima se une al sustrato en una reacción

reversible, para formar el complejo ES.
● El complejo ES puede reaccionar para generar la
enzima libre y el producto, esta última reacción es
irreversible y lenta.
● Paso limitante: la reacción más lenta de una
secuencia de reacciones, que determinará la velocidad
global de toda la secuencia.
 Modelo matemático propuesto por
Michaelis y Menten
● Otra condición del modelo, es que la concentración
total de enzima en el sistema [Et] es menor que la
concentración del sustrato.
● Así mismo, plantean que el valor del Vmax al que
tiende la velocidad, corresponde a la situación en la
cual la enzima se encuentra saturada por el S.
● Al aumentar [S], teniendo en cuenta que la reacción
de formación de P es lenta, la cantidad de S es tal
que ocupa toda la enzima, y la cantidad total de
enzima estará formando el complejo ES. En ese caso,
la [ES] = [Et], y la velocidad de P será la máxima.
Modelo matemático propuesto por
Michaelis y Menten
● En cualquier momento de la reacción, la velocidad de
formación de P es:

● Para solucionar se plantea la Ecuación de conservación

● Despejo y obtengo:
 Modelo matemático propuesto por
Michaelis y Menten
● Km: constante de Michaelis-Menten, corresponde a la
[S] con la cual la velocidad de reacción enzimática
alcanza un valor igual a la mitad de la Vmax.

● La ecuación corresponde a una hipérbola rectangular.

● Si se conoce el valor de Km y Vmax, se conoce el

comportamiento de la enzima y puede construirse la
curva correspondiente.
A partir de esta ecuación se pueden
realizar diversas deducciones:
 Transformación lineal de
Lineweaver-Burk
● Consiste en representar los valores experimentales en un
gráfico llamado de doble recíproca.
● Se grafica la variación de 1/𝑣0 en función de 1/[S]
● El punto de corte de la recta con el eje de las Y = 1/Vmax.
● El punto de corte con el eje de las X = -1/Km.
 Significado del Km para
Michaelis y Menten
● Debido a que se considera que k2 es muy pequeño, el cociente
de constantes es aproximadamente = k-1/k1
● K-1/K1 es la constante de disociación del complejo ES para dar
E+S, es decir, es la inversa de la constante de asociación o de
afinidad de la enzima.
● Para Michaelis y Menten el Km es la inversa de la afinidad que
tiene la enzima por su sustrato.
● Sin embargo, la reacción de ES a E+P no es necesariamente
irreversible, y el Km no es la constante de disociación del
complejo ES.
● Por lo tanto, no es la inversa de la afinidad de la enzima por el
sustrato. Pero sí es un indicador de esta afinidad.
 Significado del Km para
Michaelis y Menten
● Actualmente se considera que K-1/K1 ≠ Km
● El Km como indicador de la afinidad de la enzima.
● En la gráfica se representan 2 enzimas que tienen la misma
Vmax, pero diferentes Km.
● La enzima que tiene > Km necesita una > [S] para alcanzar la
misma velocidad, operativamente tiene menos afinidad
 Significado del Km para
Michaelis y Menten

● Esta ecuación indica que si se

aumenta la [Et], aumenta la Vmax.
● Si se gráfica la Vmax en función de
la [E] se obtendrá una recta que
pasa por el origen.
 Significado del Km para
Michaelis y Menten
● Si se compara la curva de velocidad en función de la [S] para la
misma enzima a 2 concentraciones de enzima diferentes, se
verá que la curva de la enzima que está a mayor concentración
tiene una Vmax mayor.
● Por tratarse de la misma enzima, el Km será el mismo.
 Enzimas Michaeleanas –
Inhibidores
● Inhibidores de la actividad enzimática:
○ Reversibles
○ Irreversibles
 Inhibición reversible
● Ejemplo: Inhibición Competitiva
● El inhibidor es lo suficientemente similar al sustrato
como para unirse al sitio activo de la enzima.
● La competencia es recíproca, el inhibidor compite con el
sustrato y viceversa.
● Por lo tanto, una forma de desinhibir la enzima es
aumentando la [S].
● La competencia recíproca se observa en las curvas de
velocidad en función de la [S].
● La curva en presencia del inhibidor tiene la misma Vmax
que la no inhibida.
● A altas [S] el S está compitiendo y desplazando al
inhibidor.
● Sin embargo, el Km aumenta en presencia del inhibidor,
la enzima tiene menos afinidad por el S.
 Inhibición irreversible
● El inhibidor se une a la enzima en general en forma covalente, e
impide que ésta se una al S.
● La unión de la E al Inhibidor, puede ser en el sitio activo o fuera
del sitio activo.
● En este último caso, la unión del inhibidor provoca un cambio de
conformación del sitio activo que impide su unión con el S.
● Aun cuando el inhibidor se una al sitio activo, este tipo de
inhibición no es desplazable por el S y se comporta como si
provocara una destrucción de la enzima
● Analizando las curvas de velocidad en función de las [S] para
una enzima inhibida en forma irreversible.
● Se observa que:
○ El inhibidor determina una disminución de la Vmax como
si se disminuyera la [S].
○ El Km no se modifica.
 Enzimas Cooperativas
● La cinética cooperativa se caracteriza por
presentar una curva en forma de S.
● K 0,5 es numéricamente = a la [S] necesaria para
obtener la Vmax/2.
● Comparando cómo aumenta la V a medida que
aumenta [S].
● Para la michaeleanas, al inicio la V aumenta
bruscamente a bajas [S], y luego el aumento
disminuye hasta que llega a la Vmax en donde es
independiente de la [S].
● En cambio, las enzimas cooperativas
experimentan poco aumento de V a bajas [S], a
medida que este aumenta, se aumenta
mayormente la V hasta que la velocidad se hace
independiente de la [S].
 Enzimas Cooperativas
● Los cambios de concentración de sustrato a bajas
concentraciones determinan grandes cambios de
velocidad en las enzimas Michaeleanas.
● A rangos medios de concentración de S: rangos en
que se encuentran muchos intermediarios
metabólicos.
● Por ejemplo, entre dos concentraciones (barra roja):
○ Mientras que las enzimas cooperativas
aumentan mucho su velocidad, las
Michaeleanas no.
● Con una enzima Michaeleana no es posible tener
estos cambios de velocidad a rangos medios de [S].
● Ni siquiera con una enzima Michaeleana que tenga un
Km mayor, de manera que tenga la zona con mayor
cambio de velocidad a rango medio de [S].
● Esta propiedad de las enzimas cooperativas es una de
las razones por las cuales estas enzimas catalizan
reacciones claves en el metabolismo.
 Modelo simplificado para explicar
la cooperatividad
● La mayor parte de las enzimas cooperativas tienen estructura
cuaternaria; más de una subunidad y coexisten en dos
conformaciones:
○ T (tensa): tiene poca afinidad por el S
○ R (relajada): alta afinidad por el S.
● Estas dos conformaciones existen en ausencia de sustrato.
● El equilibrio favorece la conformación T (representado con las
flechas).
● Cuando el S se une a la conformación T, le induce la transición
hacia la conformación R.
● En este ejemplo, la conformación R queda con un sitio de alta
afinidad libre con lo cual la siguiente molécula de sustrato se
unirá más fácilmente.
● El S coopera para que la molécula siguiente que se una a la
enzima, lo haga con mayor afinidad.
 Enzimas cooperativas
moduladores alostéricos
● Los moduladores alostéricos son moléculas que tienen las células que
regulan la actividad de las enzimas cooperativas.
● Alos proviene del griego allos = otro; y steros: en química – relativo al
espacio - Alostérico = otro sitio

● Enzimas alostéricas: modifican su actividad por moduladores alostéricos y

tienen otro sitio. En general son varios sitios diferentes al sitio activo.
 Enzimas cooperativas
moduladores alostéricos
● En los otros sitios le ganan a los moduladores alostéricos, que pueden ser:
○ Inhibidores: al unirse favorecen la transición hacia la conformación T. (rojo)
○ Activadores: al unirse favorecen la transición hacia la conformación R. (azul)

● Curvas de velocidad en función de la [S] para las

enzimas alostéricas y los efectos provocados por sus
moduladores observamos que:
○ Activadores o moduladores positivos desplazan la
curva hacia la izquierda disminuyendo el K0.5
○ Inhibidores o moduladores alostéricos negativos lo
hacen hacia la derecha, aumentando el K0.5
Resumen
 Efecto del pH

● Debido a la naturaleza proteica de las enzimas, estas son susceptibles

a modificaciones de su estructura por los mismos agentes que
provocan cambios estructurales a las proteínas en general.
● Estas modificaciones estructurales suelen traducirse en alteraciones
en la actividad enzimática.
● Uno de los agentes es el pH. este, al cambiar el estado de ionización
de los grupos R de las proteínas, puede alterar la conformación y
actividad de las enzimas.
● pH óptimo: pH de las enzimas en que su actividad es máxima
 Efecto del pH

● Los cambios de pH pueden modificar la velocidad de reacción por

cambios en el estado de ionización:
○ del sitio catalítico
○ del sitio de unión al sustrato
○ del sitio de unión a la coenzima
○ de grupos funcionales responsables del mantenimiento de la
conformación de la enzima.
○ del sustrato.
 Cambios extremos del pH
pueden desnaturalizar la enzima
● En la gráfica se ven los cambios en la Vmax de las
enzimas en función de los cambios en el pH. Se aprecia
que las 3 enzimas presentan distintos pH óptimos.
● Los pH óptimos de las enzimas suelen estar en el rango
de pH del medio en el que ejercen su acción catalítica.
● Pepsina es una enzima del jugo gástrico, que tiene pH
1.5 y 3.5 (ácido).
● Amilasa en la saliva, pH promedio es 6 (neutro).
● Tripsina enzima del intestino delgado pH entre 7 y 9
(básico).
 Efecto de la temperatura
● La temperatura provoca cambios en la estructura de las
proteínas y, por lo tanto, de la actividad enzimática.
● La temperatura aumenta la energía cinética de las moléculas y
por lo tanto la velocidad de las reacciones químicas
● Pero, el aumento de la T aumenta la agitación térmica de la
cadena polipeptídica desestabilizando las interacciones débiles
que mantienen su conformación y las interacciones con el
sustrato
● Cuando la energía proporcionada por el aumento de la
temperatura es mayor que la energía de las interacciones
atómicas que mantienen las estructuras superiores de las
proteínas, la proteína se desnaturaliza y pierde su actividad.
 Efecto de la temperatura
● Por efecto de la temperatura tienen lugar dos procesos
simultáneos y de efectos opuestos para la actividad
enzimática:
○ Aumento de la velocidad de reacciones
○ Desnaturalización.
● La resultante de estos 2 procesos es la que le da la
forma a la curva de actividad en función de la
temperatura.
● La forma de la curva es asimétrica debido al efecto
abrupto de la desnaturalización
 Utilidad para la práctica médica
● Intoxicación por metanol
● El metanol es utilizado en la industria química en la manufactura de
diversos productos: solventes, productos de limpieza, perfumes, etc.
● Es ilegalmente utilizado para adulterar bebidas alcohólicas: por su
similitud con el etanol, mismo olor, color y sabor.
● La intoxicación es en general muy grave y puede llevar a la muerte,
incluso tras la ingesta de pequeñas dosis.
● 2 mecanismos de toxicidad:
○ Depresión del sistema nervioso
○ Producción de ácido fórmico en el hígado
 Utilidad para la práctica médica
● En el organismo existen enzimas que degradan diversos alcoholes, entre ellos
el metanol.
● La primera de estas enzimas, es la alcohol deshidrogenasa, luego de una
segunda reacción se forma el ácido fórmico altamente tóxico.
● Tratamiento: Inhibición competitiva de la alcohol deshidrogenasa
○ Fomepizol
○ Etanol
● Ofreciéndole a la enzima un inhibidor competitivo a altas concentraciones se
desplaza el metanol de la enzima y se evita que nuevas moléculas puedan
unirse a la misma.
● El metanol desplazado por el inhibidor competitivo debe ser removido de la
circulación por medio de diálisis.
Gracias!