Practica 10
EXTRACCION DEL
A D N
DE LAS FRESAS
Instituto de integración cultural
Asignatura: Biología
Nombre de la maestra: Leticia Jerónimo Amador
Integrantes Del Equipo:
• Andrea Rodríguez Vázquez
• Regina Robellada Nava
• Miriam Roa Sánchez
• José Ramsés Talonea García
5010: Parte B
Objetivos:
❖ Efectuar la técnica de separación de ADN de las fresas, para observar cada
uno de los pasos y documentarlos a través de fotografías.
❖ Mostrar la presencia de ADN (indirectamente) en las fresas, a partir de una
técnica que utiliza materiales que comúnmente encontramos en casa.
❖ Comprender que está técnica es solo el inicio de otras que se aplican en el
ámbito científico para resolver problemas de genética y el mejoramiento de
razas.
Marco teórico:
ADN: El ADN, o ácido desoxirribonucleico, es el material que contiene la información
hereditaria en los humanos y casi todos los demás organismos. Casi todas las células
del cuerpo de una persona tienen el mismo ADN. La mayor parte del ADN se
encuentra en el núcleo celular (o ADN nuclear), pero también se puede encontrar
una pequeña cantidad de ADN en las mitocondrias (ADN mitocondrial o ADNmt).
Las mitocondrias son estructuras dentro de las células que convierten la energía de
los alimentos para que las células la puedan utilizar.
¿Cómo está formado el ADN?: La información en el ADN se almacena como un
código compuesto por cuatro bases químicas, adenina (A), guanina (G), citosina
(C) y timina (T). El ADN humano consta de unos 3 mil millones de bases, y más del
99 por ciento de esas bases son iguales en todas las personas. El orden o secuencia
de estas bases determina la información disponible para construir y mantener un
organismo, similar a la forma en que las letras del alfabeto aparecen en un cierto
orden para formar palabras y oraciones.
Las bases de ADN se emparejan entre sí, adenina (A) con timina (T) y citosina (C)
con guanina (G); para formar unidades llamadas pares de bases. Cada base
también está unida a una molécula de azúcar y una molécula de fosfato. Juntos
(una base, un azúcar y un fosfato) se llaman nucleótidos.
Técnicas de separación de ADN:
❖ Entre las técnicas más utilizadas en la manipulación del DNA se encuentra la
reacción en cadena de la polimerasa (PCR, por sus siglas en inglés), de la cual
existen variantes como la PCR punto final, PCR tiempo real, PCR inversa, PCR
anidada, PCR mutagénica, entre otras. Así mismo, se han reportado diversas
técnicas de extracción con métodos relativamente sencillos y de bajo costo;
una de ellas es el método de extracción con fenol cloroformo-alcohol isoamílico
(FCl), considerado uno de los más eficaces para cualquier tipo de muestra.
❖ Lahiri & Nurnberger (1991) reportaron un método de extracción por gradiente
de sales (MgCl2, KCl, NaCl, EDTA, Tris-HCl) para extraer DNA de suficiente
calidad para el análisis molecular. Los autores señalan que esta técnica es
económica y permite la recuperación de grandes fragmentos de DNA.
❖ Ruptura de células por acción térmica y mecánica, liberación de la
macromolécula y precipitación del ADN
Al elegir el método de extracción del DNA es importante realizar una evaluación
detallada del material genético necesario para la investigación y del
procedimiento que se le aplicará a la muestra, ya que los métodos rápidos y
automatizados generalmente se utilizan para procesar un número pequeño de
muestras que requiere poca cantidad de DNA (ng o pg), mientras que la
generación de bancos genómicos y la obtención de material con suficiente
calidad para clonación requiere de un reservorio que cuente con una gran
cantidad de DNA.
Planteamiento del problema: ¿Será posible extraer el ADN de un fruto mediante una
técnica casera?
Hipótesis: Por medio de la disolución de lisis podremos extraer segmentos de ADN
del fruto.
Procedimiento:
1. Retirar las hojas verdes en la fresa que no se han eliminado todavía.
2. Colocar las fresas en la bolsa de plástico resellable o en un mortero y
suavemente aplastar durante dos minutos.
3. Colocar en un recipiente el líquido para extracción de ADN: mezclar 10 ml de
detergente, 5g de sal y 125 ml de agua.
4. Agregar 30ml de líquido de extracción de ADN en mortero con la fresa.
5. Vuelva a sellar la bolsa o utilice el mismo mortero y aplaste suavemente
durante un minuto.
6. Coloque en un recipiente la gasa para el filtrado de la solución de fresa.
7.- A continuación, se vierte en el recipiente la misma cantidad de alcohol que
el líquido de fresa. No mezclar o revolver. El ADN se aislará del resto del material
contenido en las células de la fresa.
8. A los pocos segundos, se observa el desarrollo de una sustancia blanca turbia
(ADN) en la parte superior, por encima de la capa de extracto de fresas.
9. Incline el recipiente y recoja el ADN utilizando un agitador de plástico o palo
de madera.
Resultados:
Aplastando las fresas Mezcla de agua, sal y
detergente
Néctar obtenido
Colación y filtración de la
mezcla
Agregación de Alcohol ADN contenido
Agregación de Alcohol ADN contenido
Extracción de ADN
Extracción de ADN
Observaciones al Microscopio
Análisis de resultados:Durante la realización de esta práctica, tuvimos ciertas
dificultades, ya que en un inicio nos confundió los pasos para la realización de la
extracción del ADN de la fresa, pero logramos resolverlos a tiempo y realizar dicha
extracción lo más favorable posible.
El las imágenes se logra apreciar los pasos realizados, pues primero machacamos
las 4 fresas para después agregarle la mezcla de agua destilada, sal y detergente
líquido, luego de que ambas soluciones estaban mezcladas en la bolsa, llegó el
momento de ser colados y filtrados gracias a un embudo y 2 gasas para de esta
manera tener con mayor exactitud el néctar de la fresa y su pronta extracción de
ADN. Después, el néctar fue vaciado a un tubo de ensayo al que se le agregó
delicadamente alcohol y de esta manera concluimos con los pasos más laboriosos
para la ya mencionada extracción del ADN de este fruto.
Al realizar todos los pasos para la extracción logramos obtener como resultado el
ADN de la fresa, el cual estaba contenido en un tubo de ensayo. Dicho material
de laboratorio nos permitió observar el ADN y a simple vista parecía tener una
apariencia mucosa y babosa, así mismo tenía un color blanco casi llegando a ser
traslúcido, con muchas burbujas y una pequeña porción del néctar de la fresa.
Al extraer esta muestra del tubo de ensayo con ayuda de un agitador se logró
percibir y observar que su consistencia era viscosa, espesa y babosa, esto se realizó
para observar a través del microscopio el ADN y se logró observar múltiples
burbujas, así mismo se observó un tono rojizo y lo que parecían ser pequeños vellos
provenientes del fruto.
Cuestionario:
1.- Describe la estructura general del ADN: Las bases de ADN se emparejan entre
sí, adenina (A) con timina (T) y citosina (C) con guanina (G); para formar unidades
llamadas pares de bases. Cada base también está unida a una molécula de
azúcar y una molécula de fosfato. Juntos (una base, un azúcar y un fosfato) se
llaman nucleótidos.
2.- ¿Qué grado de pureza tiene el ADN que extrajiste de las fresas con esta
técnica casera? No se puede saber con exactitud, pero podríamos decir que un
80%, por que se combino con sustancias como es el jabón líquido.
3.- ¿Cómo se relaciona el proyecto Genoma Humano con el experimento
realizado? ¿Por qué es tan importante? Con la extracción de moléculas de ADN,
para conocer las cadenas de este mismo solo que en este experimento fue de
fresas.
4.- ¿Te pareces a tus padres o familiares? ¿Por qué crees que es así? Si
compartimos el mismos ADN, aunque no exactamente porque ya se combinó
con otras cadenas de ADN
5.- Explica cómo se sintetiza el ADN
Ocurre cuando estas unidades de nucleótidos se unen para formar ADN, esto
puede ocurrir artificialmente o naturalmente. Las unidades de nucleótidos están
formadas por una base nitrogenada (citosina, guanina, adenina o timina), azúcar
pentosa (desoxirribosa) y grupo fosfato
Conclusión: Por medio de este experimentó, llegamos a la conclusión sobre la
facilidad y sencillez de la extracción casera del ADN de un fruto, pues dicha
extracción es posible realizarla con materiales que se tengan en casa y a través de
esto es posible la educación e información sobre temas relacionados sobre el ADN,
ya que hablando desde la experiencia de mi equipo y mía, logramos comprender
y aprender más sobre este tema debido a la investigación realizada y sobre todo
al experimento realizado, así mismo nos ayudó a tener un mayor enfoque y mejor
realización del trabajo en equipo, comunicación y coordinación.
Bibliografía:
1. Catalá, Rosa María. “Extracción del ADN del kiwi”. Revista ¿Cómo ves?
DGDC UNAM. Guía del maestro No. 37. Edición especial sobre las ciencias
del
genoma.[Link]
[Link]
2. [Link]
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