MECANISMOS EFECTORES

DE LA INMUNIDAD INNATA

SISTEMA DEL
COMPLEMENTO
¿Como inicia el
estudio del
sistema del
complemento?

• Década de 1890 -
Jules Bordet - del
Instituto Pasteur
en París
• El antisuero contra
la bacteria Vibrio
cholerae

No contenía
anticuerpos
dirigidos contra la
bacteria
¿Como inicia el
estudio del
sistema del
complemento?
La actividad bacteriolítica requiere:
• Década de 1890 - 1. Anticuerpos específicos no se afectan
Jules Bordet - del por el calor
Instituto Pasteur 2. Segundo componente sensible al calor
en París que causa la actividad lítica
• El antisuero contra
la bacteria Vibrio
cholerae Paul Ehrlich, en Berlín, experimentos
similares e ideó el término complemento
y lo definió como “la actividad del suero
sanguíneo que completa la acción del
anticuerpo”.
FUNCIONES DEL COMPLEMENTO
• Es el principal efector de la rama humoral del sistema
inmunitario, formado por varias proteínas plasmáticas
(>30 prot) plasmáticas o unidas a células.
• Constituyen el 15% de las globulinas séricas.
• Activación en cascada que da lugar a la eliminación
directa (Iisis) a indirecta (fagocitosis) de los
microorganismos
• Fuerte potencial inflamatorio, por lo que requiere control
estricto de mecanismos reguladores presentes en el
plasma y en los líquidos extra vasculares.
• Altamente conservado en los mamíferos.
FUNCIONES DEL COMPLEMENTO

• Lisis de células, bacterias y virus

• Opsonización, que promueve la fagocitosis de antígenos particulados
• Unión a receptores de complemento específicos en células del sistema inmunitario, lo que
desencadena funciones características de dichas células, inflamación y secreción de
moléculas inmunorreguladoras
• Depuración inmunitaria (inmunodepuración), que elimina complejos inmunitarios de la
circulación y los deposita en el bazo y el hígado
COMPONENTES DEL
COMPLEMENTO
COMPONENTES - C OTROS COMPONENTES

C1 a C9 Descriptivos de su función

• Proteasas que • Inhibidor de C1 (C1 INH)

fragmentan la proteína • Inactivadores de C4a Ina, C3a INa y C5a
Ina
• a: pequeños. se
• Factor acelerador del decaimiento (DAF)
difunden y aceleran rxn • Receptores de los fragmentos de algunos
inflamatorias. de los componentes: CR1, CR2, CR3
• b: grandes (exp C2) • Vía alterna: Proteínas llamadas factores
unión al blanco cerca del seguidas por una letra, factor B, factor H,
sitio de activación. factor D, factor I, factor P
• Las letras a y b indican • MASP = serina proteasa asociada a MBL
actividad • MBL = lectina de unión a manosa

En la activación del sistema se forman enzimas y complejos enzimáticos, representados con

una barra sobre el componente a complejo activo
COMPONENTES DEL
COMPLEMENTO
• Se producen principalmente en
hepatocitos. (Mayor parte de C3, C6, C8 y
B)
• También en monocitos sanguíneos,
macrófagos tisulares (C3) y células
epiteliales aparatos digestivo y
genitourinario.
• Circulan en el suero en formas inactivas
como proenzimas, o cimógenos
ACTIVACION DEL COMPLEMENTO

Quimiotaxis
Lisis activa.

Lisis por osmosis

VIA CLÁSICA
• Componente de la inmunidad adaptativa
• Complejos antígeno-anticuerpo. Presencia Ag – Ac – IgM e IgG
(excepto IgG4).
• Componente de reconocimiento (C1): Dos o más fragmentos Fc de
los anticuerpos reaccionan con C1.
• C1q una mol: una mol de IgM o 2 de IgG cercanas
• Enzimas del complemento:
• C1q una mol: adquiere actividad proteasa al unirse a C1r y C1s.
• C1r 2 mol: proenzima
• C1s 2 mol: proenzima
• El complejo de ataque a la membrana - MAC: causa la destrucción
lítica de las células al favorecer la desorganización de los lípidos de la
membrana y al producir en ella poros
VIA CLÁSICA
C4 Y

inactivo

Complejo de ataque a la
membrana - MAC

Opsonización y
endocitosis.
Formación
de poros
 VIA CLASICA
SUERO

FORMA EN LA QUE EL
Ac ESTÁ UNIDO AFECTA
LA ACTIVACÍON
VIA ALTERNA

• Componente de la inmunidad innata

• Incluye cuatro proteínas séricas: C3, factor B, factor D y properdina.
• Activada por constituyentes de superficie celular microbiana que son
extraños al hospedador (PAMS superficiales). Complejo de ataque a la
membrana - MAC

Formación
de poros
VIA ALTERNA
VIA DE LAS LECTINAS
• La lectina son proteínas que reconocen como blancos carbohidratos
específicos que se une a la manosa – MBL - mannose-binding lectine

Complejo de ataque a la
membrana - MAC

Proteasas con serina

conocidas como MASP1
y MASP2
(Mannose Associated Formación
Serine Porteases 1 and
2),
de poros
VIA DE LAS LECTINAS
Proteínas unidoras de manosa +
unión con prot C4
EFECTOS BIOLOGICOS
ADICIONALES
MECANISMOS DE REGULACIÓN

• El sistema del complemento ataca tanto

células del hospedador como células
extrañas y microorganismos.
• Mecanismo pasivo de regulación: Tiempo
de activación de los complejos.
MECANISMOS DE REGULACIÓN
MECANISMOS DE EVASION
CITOQUINAS
Citoquinas o Citocinas
• Del griego cito-, “celula”, y kinein, “moverse”
• Otro nombre Interleuquina "inter"
comunicar "leuco" de leucocitos = IL
• Otro: según su función.
• Proteínas reguladoras de bajo peso molecular o
glucoproteínas
• Secretadas por glóbulos blancos principalmente,
otros tipos de células como células epiteliales,
fibroblastos.
• Forma de comunicación del sistema inmune
Citoquinas o Citocinas -
Funciones
• Regulan y amplifican la respuesta inmune
• Producción en respuesta a presencia de M.O
• Requieren interacción con receptor específico de
membrana.
• Cuando llega el estímulo la célula la puede producir
de novo
Características funcionales
• Pleiotropía: Múltiples efectos sobre una célula.
• Redundancia: varias pueden ejercer el mismo
efecto
• Sinergismo:2 o más citoquinas actúan juntas y
potencializan un efecto ejm IL-4 e IL-5 se unen para
inducir la producción de IgE por el LB.
• Antagonismo: Acciones diferentes por inhibición o
bloqueo
Características funcionales
Características funcionales
la célula que sintetiza y
secreta moléculas, pero
también es la célula blanco

la célula que sintetiza

y secreta moléculas,
para otras células
cercana

la célula que sintetiza

y secreta moléculas,
para otras células
lejanas
TIPOS DE CITOQUINAS
De acuerdo a su origen
• Monoquinas: producidas por
Monocitos/macrófagos
• Linfoquinas: producidas por Linfocitos
• Interleuquinas: Amplia familia, actúan sobre
leucocitos o n hematopoyesis

Aparecen otras que no podían ser descritas acá

De acuerdo a su función

1. Regulan función leucocitaria: Cto y

activación de linfocitos favoreciendo (IL-2, IL-
4) o inhibiendo (IL-10 y TGF-β)
2. Regulando la inflamación (IL-1β, INF-α y β e
IL-6)
3. Activando macrófagos: IL-5, IL-10
(antinflamatorias), INFγ, TNFα y β
(linfotoxinas-proinflamatorias)
De acuerdo a su función

4. Las que activan la migración –

quimiotaxis
5. Hematopoyéticas: IL-3, IL-7, G-CSF,
SCF (steam cell)
De acuerdo a sus receptores
• Constan de proteínas transmembranales
• Porción extracelular: encargada de la unión con la
citoquina.
• Porción intracelular: señalización.
• Una citocina solo puede actuar en una célula que
expresa un receptor para ella
• Normalmente hay 5 familias, sin embargo algunos
libros tiene 6 familias
De acuerdo a sus receptores

Son Son 4 dominios

trímeros diméricos

7 dominios

• IL-2R, la R identifica que es el receptor

De acuerdo a sus receptores

• IL-2R, la R identifica que es el receptor

Interleuquinas
• Interleuquinas: (también linfoquina o monoquina)
sistema de señalización entre linfocitos,
monocitos/macrófagos y demás leucocitos
inflamatorios.
• Son producidos tras su activación por el Ag, y
gobiernan la activación, proliferación y
diferenciación de estas células.
• Proinflamatorias
• Antiinflamatorias
Receptores de citoquinas clase I
Receptores de citoquinas clase II

Actividad antiviral y anticancerígena - proinflamatoria

Receptores de citoquinas clase III

• Inicialmente identificadas con actividad frente a células tumorales

• También tienen actividad pro-inflamatoria
Quemoquinas –quemocinas -
quimioquinas
Quemoquinas –quemocinas -
quimioquinas
Nueva

Migración
Cuales son importantes?
• Veamos algunas

Neutrófilos
Ppal
proinflamatoria

Expansión
clonal
Cuales son importantes?

• Comparte una cadena (CD25) con diferentes interleuquina

 Cuales son importantes?

• Deficiencia del receptor (CD25)

• Más en los hombres
Cuales son importantes?

• Actividad anti-inflamatoria
Cuales son importantes?

proinflamatoria

proinflamatoria

Antitumoral,
intracelular
Inmunidad innata
Inmunidad adaptativa
Activa Th1=proinf=INF
Activa Th2=antinfl=INF
Antagonistas de citoquinas
• La actividad biológica de las
citoquinas está regulada por dos
tipos de antagonistas:
• Los que provocan el bloqueo del
receptor al unirse a éste
• Los que inhiben la acción de la
citoquina al unirse a ésta.
Técnicas de Dx
inmunológico
Que se busca
• Ag o Acs

Regiones FC – Acs SECUNDARIOS

Regiones FAB -
ESPECIFICAS
Anticuerpos
• Monoclonales (mAb):
• Idénticos en su secuencia de amino ácidos
• Un solo clon de LB
• Reconocen un mismo epítope
• Policlonales: (pAB)
• Acs del suero
• varios clones de LB
• Reconocen varios antígenos.
Mieloma múltiple
• El mieloma múltiple es un cáncer de células
plasmáticas (LB activados).
• En general, cuando las células plasmáticas se
vuelven cancerosas, estas crecen fuera de
control.
• En el lab, tienen la capacidad de que un clon de
LB produzca muchos anticuerpos a grandes
cantidades.
Que son los anticuerpos
monoclonales y como
se producen?
1. Inyectan Ag específico al ratón
2. Toman células del Bazo (LB
esplénicas)
3. 3. Fusión con células de mieloma
(Hibridoma)
4. Se colocan en un medio selectivo
HAT.
5. Se identifican los Acs esperados.
 Que son los anticuerpos policlonales y
como se producen?

1. Inyectan Ag al ratón
2. Toman células del Bazo (LB esplénicas)
3. 3. Fusión con células de mieloma (Hibridoma)
4. Se colocan en un medio selectivo HAT.
5. Se identifican los Acs esperados.
 Reacción cruzada?
Cuando un anticuerpo generado contra un antígeno
específico reconoce dos antígenos que tienen
regiones estructurales similares ejm dos prot
virales iguales que provengan de
microorganismos diferentes
Pruebas Dx Falsos positivos
ELISA

Cual creen que usaron para Dx de la COVID-19

Ensayo de inmunoadsorción
ligado a enzima - ELISA
Utilizan anticuerpos unidos a enzimas para detectar antígenos, y
para detectar y cuantificar anticuerpos.

Conjugado

Acs específicos

• Los Acs secundarios son policlonales

COMPETITIVO
• En los formatos
competitivos, el Ag Muestra más el anticuerpo

en la muestra se
mide por su
capacidad para
competir con un
antígeno marcado De referencia

unido a la placa.
• A> cant de Ag unido a
Ac, menor señal se
tendrá en la prueba
Ensayo de inmunoadsorción
ligado a enzima - ELISA
Utilizan anticuerpos unidos a enzimas para detectar antígenos, y
para detectar y cuantificar anticuerpos.
Ensayo de inmunoadsorción
ligado a enzima - ELISA
Utilizan anticuerpos unidos a enzimas para detectar antígenos, y
para detectar y cuantificar anticuerpos.
 Que es la inmunotransferencia
por western y como funciona?
• Western blot: técnica que detecta una proteína
específica en una muestra de sangre o tejido.
Desnaturalizar las
proteínas con
SDS

Mezcla de prot
Acs

1 1
2

Transferencia
Explique las funciones
efectoras de los anticuerpos
• Neutralización: Bloquear
Anticuerpo neutralizante
Explique las funciones
efectoras de los anticuerpos
• Opsonización: Señalizar, permite una fagocitosis
mucho más eficiente. Isotipos IgG, IgA, IgE

FAB + Ag

FC + RECEPTOR EN FAGOCITO
Explique las funciones
efectoras de los anticuerpos
• Activación por complemento: IgG, IgA e IgM
pueden activar la vía clásica del complemento
Que es la inmunoprecipitación?
como funciona?
• Se usa un anticuerpo específico frente a un antígeno proteínico en una
mezcla de proteínas para identificar este antígeno específico

Diferentes
técnicas
Perlas
magnéticas
Cromatografía
de afinidad
Que son las pruebas de fijación del
complemento y como funcionan
• Mide la cantidad de anticuerpos que se unen a complemento (o que lo fijan) en una muestra.
La prueba incluye la adición de eritrocitos sensibilizados con una hemolisina
• Complemento se une a complejos Ag, Ac
• El complemento puede lisar las células una vez activado.
• Se utilizan Eritrocitos unidos a Ac contra los GR. Si el complemento se une a eritrocitos, estos se destruyen
 Que es una vía de
señalización?
Serie de reacciones químicas en las que un grupo de
moléculas de la célula trabajan juntas para
controlar las funciones celulares, como la
multiplicación o la destrucción celular