Bacteriología
Pared Celular La endotoxina es la “venganza final” que este patógeno gram – nos
La tinción gram separara a la gran mayoría de las bacterias en entrega, esta toxina no se presenta si la bacteria tiene su membrana
positivas o negativas, el peptidoglucano en ambas tiene la misma externa intacta, pero en el momento en que el sistema inmune
estructura, en gram positivas esta capa de peptidoglucano es un pelea contra esta bacteria, el patógeno libera la toxina.
colchón muy grande y es la capa externa, en las gram negativas es
muy delgada. Otros componentes externos: Glicocálix
Glicocálix: Capa o cubierta de polisacáridos o polipéptidos.
Algunas bacterias sin importar si son negativas o positivas pueden
tener una siguiente capa externa (fimbrias, cápsula, capa mucoide).
La cápsula inhibe la fagocitosis, lo cual la hace ser más exitosa.
Ácidos Lipoteicoicos y Teicoicos (gram +) La capa mucoide es capaz de neutralizar anticuerpos.
Polisacáridos acídicos presentes sólo en gram positivos.
Ácidos Lipoteicoico: polímero de glicerol fosfato unido (anclado) a Diferencias del Flagelo en Gram (+) y (-)
lípidos de membrana citoplasmática. “llega a tener contacto con los El flagelo está compuesto de un monómero que se llama flagelina.
lípidos de la membrana plasmática. Este también es el que ancla a Se comienza a formar desde dentro hacia afuera (flagelo).
esta pared de peptidoglucano con la membrana plasmática de esa los cuerpos basales son una región de proteína que se ancla a la
bacteria, por eso llega a esta bicapa lipídica. membrana.
Ácido Teicoico: polímero de ribitol fosfato unido de manera En el gancho es donde se genera el movimiento.
covalente al peptidoglucano. “siempre está encima de la capa de Las bacterias sintetizan flagelos cuando el ambiente lo amerita.
peptidoglucano”.
Funciones:
- Estabilización del peptidoglucano.
- Adhesión celular (adhesina).
- Le dan la carga negativa a la envoltura bacteriana.
Membrana Externa: Periplasma (gram -)
• Contiene el peptidoglicano
• Posee consistencia Gel
• Representa entre 20-40% del volumen celular total
• Posee un ambiente ALTAMENTE OXIDANTE (Reacciones S-S intra e Tipos de Flagelo
intermoleculares) Monótrico: un solo flagelo.
Las porinas comunican la zona interna con la zona externa. Perítrico: muchos flagelos alrededor de toda la bacteria, muchos
flagelos por todo el contorno.
Anfítrico: flagelo a ambos polos.
Lofótrico: muchos flagelos multifuncionales una sola región de la
bacteria.
Función del flagelo: Motilidad
Taxia: movimiento dirigido en respuesta a un gradiente
fisicoquímico.
Ejemplos de taxias:
Membrana Externa. Lipopolisacárido (LPS) gram – 1. Quimiotaxia: “una bacteria que le gusta el ácido sulfúrico”.
Molécula compuesta por: Lípido A o “endotoxina” una porción 2. Fototaxia: “busca la luz del sol”.
lipídica anclada en la ME. 3. Aerotaxia: “me gusta o no me gusta el oxígeno”.
Tiene la función de ser una toxina, de arrancarse del sistema Las bacterias “sienten” su ambiente y procesan esa información a
inmune, permite adherirse, y es un excelente antigénico través de una vía de transducción de señales que controla el sentido
Core: Oligosacárido central. y la velocidad de la rotación flagelar.
Antígeno O (región altamente antigénica, antígeno somático): Los procariontes móviles se acomodan a su entorno (físicoquímico) y
unidades repetidas de un monómero compuesto por distintos pueden alejarse o aproximarse a un hábitat en respuesta a diversos
hidratos de carbono. (Ej: eschirichia spp., salmonella spp., shigella estímulos.
spp., klebsiella sp.). Este mecanismo representa un medio de competir con éxito con
otros organismos y lograr supervivencia.
Apéndices Proteícos: Fimbrias y pili
Fimbrias: Apéndices o microfibrillas de naturaleza proteica (pilina).
Función: Asociado a adherencia específica con bacterias y células
eucariontes. No participan en el movimiento. Genoma bacteriano: Plásmidos
• Replicones autónomos, es decir, se replican independiente al
Pili cromosoma bacteriano, y también se “enrrollan o compactan”.
• Apendice retractil de mayor longitd Permite que la bacteria sea resistente a antibióticos, produzcan
• Polímero de proteína retractir (pilina) toxinas, o producir fimbrias, flagelos, etc. permiten que tengan un
• Pili sexual: interviene en la conjugación plus bacteriano.
• Conjugación: Intercambio de material genético entre bacterias Las bacterias sólo se van a quedar con los plásmidos si la presión
ambiental lo amerita.
Son los únicos elementos que se pueden pasar a través de la
conjugación.
• DNA circular doble hebra sobreenrrollado
• De menor tamaño que el DNA genómico
• Cada bacteria puede tener entre 1 o 100 copias de un mismo
Esporas plasmidio, Nº de copias variables (1-100).
Las endosporas son cuerpos de gran resistencia producidas al • Capacidad de transferencia por conjugación
interior de la célula bacteriana, en el proceso de diferenciación • Contiene genes no esenciales, que aportan una ventaja adaptativa:
celular. Resistencia a antibiótico, metales pesados, toxinas y factores de
Está compuesto de ADN muy compactado. virulencia.
Protege de temperatura extremas, agentes químicos, limitaciones de
nutrientes, desecación y radiación.
Los bacilos grampositivos formadores de esporas son de las especies
de Bacillus y Clostridium. Debido a su capacidad para formar Metabolismo Bacteriano
esporas, pueden vivir en el ambiente por varios años. Todo el metabolismo se basa en encontrar un equilibrio, entre lo
que se con sume, la energía que se sintetiza y los elementos que se
deben construir.
Esporulación
Su función es garantizar dejar descendencia.
Corresponde al conjunto de reacciones bioquímicas que se realizan
al interior del
organismo, las que pueden ser:
-Catabólicas: Generan energía
-Anabólicas: Proporcionan componentes estructurales
Mecanismo de acción de las enzimas
Las enzimas son biocatalizadores (proteínas catalíticas) que
Genoma bacteriano: Nucleoide disminuyen la energía de activación requerida para que ocurra la
• Formado por DNA circular de doble hebra sobreenrrollado reacción química
• Tamaño varieable segun la Bacteria (H. influenzae 0.8Mb; E.coli Energía de activación: energía necesaria para unir los sustratos de
4.5Mb, Pseudomonas 8Mb) manera adecuada, para que alcancen la transición.
• Generalmente se posee una copia única
El ADN bacteriano está unido a proteínas y compactado, además,
está constantemente transcribiendo y traduciendo, si no se está
preparando para hacer fisión binaria, siempre estará generando
ARNm, ARNt y ARNr para sintetizar proteínas.
Glucólisis Clasificación bacteriana según fuente de energía
De una molécula de 6 carbonos como la glucosa se gasta ATP, se
transforma y termina generando 2 moléculas de piruvato y con 3
carbonos cada una.
Un organismo anaerobio no
hace ciclo de Krebs, cadena
transportadora de electrones,
si no que hacen fermentación
alcohólica, o fermentación
láctica.
Nosotros como personas sólo podemos hacer fermentación láctica,
en condiciones en los que nuestro tejido la concentración de Clasificación bacteriana según requerimientos de O2
oxígeno es muy baja.
FERMENTACIÓN DEL ÁCIDO PIRÚVICO
Si hay oxígeno y se puede ocupar, entonces se hace el camino largo
del ciclo de Krebs en donde se generan 36 ATP, si no, hay que hacer
glucólisis y fermentación todo el tiempo hasta generar la cantidad
suficiente de energía.
Ciclo de Krebs
Sólo va a estar presente en bacterias aerobias.
*todo es correcto menos la B*
*agar inclinado* se toma la muestra de una bacteria
Si a la bacteria le gusta el O2 y es aerobia estricta va a crecer hacia
arriba (a).
Cadena Transportadora de e- y Fosforilación oxidativa Si a la bacteria le gusta el O2, pero a un nivel más bajo como un 12%
Aquí se puede ver la bomba ATP sintasa, un complejo enorme en el o 10% entonces crecerá “debajito” (d).
que, en la mitocondria, NADH y FADH llegaban a la cadena En la (e) es anaerobia, pero soporta el O2.
transportadora de electrones ubicada en la membrana interna de la En la C se tiene la facultad de decidir hacer metabolismo a expensas
mitocondria y los electrones viajaban por los citocromos hasta que de oxígeno o hacerlo sin él.
entre la membrana interna y externa se forma una gradiente de La B está mal porque si fuera una bacteria anaerobia estricta no
protones. crecería absolutamente nada abajo, ya que abajo también hay
¿Dónde se ubica esto en una bacteria (aeróbica)? oxígeno, no es un ambiente libre de O2.
En las bacterias, la membrana citoplasmática que tiene al otro lado
el peptidoglucano o periplasma se pliega y de esa manera queda Clasificación bacteriana según fuente de carbono
espacio entre dos membranas para que entre medio se genere una
gradiente de protones.
Clasificación bacteriana Fijación de CO2
Elementos importantes que permiten clasificar a las bacterias. Todo organismo vivo que sea autótrofo y capaz de fijar el Carbono
desde el CO2 va a tener que generar ese intermediario
(gliceraldehído 3 fosfato).
Fijación de Fósforo
se genera una estructura que se llama septo que es el último trozo
que debe juntarse de un extremo a otro, cuando el septo toma
contacto con la proteína se genera la separación.
Fijación de Azufre
Etapas de la curva de crecimiento bacteriano
Fijación de Nitrógeno
Fase lag: o de latencia; crecimiento lento (etapa de
Es un ejemplo de los microorganismos que a diferencia de los acondicionamiento ambiental).
autótrofos clásicos (los que pueden fijar el carbono desde el CO2 y Fase exponencial o logarítmica: crecimiento bacteriano a máxima
transformarlo en una molécula biológica como por ejemplo el capacidad.
gliceraldehído 3 fosfato), el nitrógeno es captado a través de nitratos Fase estacionaria: detención del crecimiento, no del metabolismo
para formar amoniaco, el cual es recibido y acertado en una reacción (estrés, hambruna).
química por el ácido glutámico para transformarse a glutamina. Fase de decaimiento: muerte celular (agotamiento del cultivo).
Esta es la manera en la que los microorganismos son capaces
absorber el nitrógeno y transformarlo en una molécula netamente Medición del crecimiento bacteriano
biológica. Recuento de células viables: dilución seriada de la muestra en medio
buffer estéril y siembra (“plaqueo”) sobre medio sólido.
División Bacteriana
Crecimiento: incremento del número de individuos (M.O.) en una
población, implica un aumento de la biomasa del M.O.
Es decir, para poder cultivar un microorganismo debemos saber si le
gusta la T° alta o baja, salinidad, si son aerobias o anaerobias, etc.
Velocidad de crecimiento: Tiempo requerido para el crecimiento de
un M.O. por unidad de tiempo. para la duplicación bacteriana es
variable para cada especie. (Ej: 20 min para Escherichia coli, 24 horas
para Mycobacterium tuberculosis).
Tiempo de generación (g): tiempo requerido para que se formen
dos células hijas a partir de una célula parental. Es el tiempo Factores que afectan el crecimiento: Temperatura
necesario para que la población bacteriana se duplique.
Implica la duplicación de todos los componentes estructurales de la
célula.
Fisión Binaria
La proteína que
ejecuta la separa
ción se llama FtsZ Psicrófilos: temperatura óptima baja (<1 a 15°C).
Mesófilos: temperatura óptima en rango medio (25 a 42°C).
Termófilos: temperatura óptima alta (50 a 70°C).
Hipertermófilos: temperatura óptima muy alta (80 a >100°C).
Factores que afectan el crecimiento: Salinidad - Medios complejos (indefinidos):
No poseen una formulación precisa. Se preparan en base a
infusiones de digeridos proteicos (carne, soya, caseína, extracto de
levadura). La mayoría de estos medios se venden deshidratados, lo
que facilita su preparación. (no se sabe con precisión cuanto hay de
cada componente).
Según su utilidad:
Corriente (básicos): Contienen sólo los elementos nutritivos
esenciales y permiten el crecimiento de microorganismos que no
tienen requerimientos nutricionales especiales (microorganismos no
No halófilos: no toleran ni siquiera concentraciones moderadas de exigentes). Ej.: Caldo (agar) Luria y caldo (agar) nutritivo (medio
sal. sólido).
Halotolerantes: toleran concentraciones moderadas de sal; crecen Especiales:
mejor sin ella. Mejorados o enriquecidos: Son medios corrientes adicionados de
Halófilos: leves (1 a 6% NaCl) y moderados (6 a 15%). sustancias de alto valor nutritivo (sangre, suero, vitaminas, extractos
Halófilos extremos: 15 a 30% NaCl. de levaduras), que permiten el desarrollo de bacterias más
exigentes. Ej.: Agar sangre, agar chocolate.
Factores que afectan el crecimiento: Acidez (pH). Medios selectivos: Contienen sustancias inhibidoras para
determinadas especies bacterianas, permitiendo el desarrollo (o
selección) de OTRO tipo o especie particular. Agar McConkey inhibe
el crecimientode Gram (+), y solamente permite el crecimiento de
Gram (-).
Medios diferenciales: Permiten visualizar si una bacteria desarrolla
una determinada función metabólica que la distinga de otras
bacterias; normalmente las bacterias que presentan la función en
cuestión se ven de un color distinto a las demás. Ej.: Agar McConkey,
Citrato de Simmons, TSI, MIO, LIA, Caldo urea.
Selectivo y diferencial. Agar MacConkey
Le gusta el ácido: acidófilo, si gusta lo básico: alcanilófilo.
Clasificación de los medios de cultivo
Selectivo: “Selecciona” lo que crece, en este caso sólo Gram (-)
debido a la presencia de cristal violeta y sales biliares que inhiben el
crecimiento de Gram (+).
Diferencial: Dentro de lo que crece, marca diferencias. En este caso
Medio líquido solo se ocupa cuando se quiere hacer un aumento de los que utilizan lactosa como fuente de carbono (lac+) de los que no
número, crecer bacterias. (lac-).
Medio sólido el objetivo es hacer una siembra y “empezar a jugar”
hacer dibujos y en el cuadrante central se espera encontrar colonias Selectivo y diferencial. Agar Manitol Salado
aisladas.
Medio semi sólido se coloca la muestra y se obtienen bacterias que
crecieron, pero son móviles (flageladas) y termina llenando el medio.
Clasificación de los medios de cultivo
Según su presentación
Selectivo: “Selecciona” lo que crece, en este caso bacterias
halotolerantes, debido a su contenido de NaCl.
Diferencial: Aquellos que fermentan el manitol, presentan un halo
amarillo.
Clasificación de los medios de cultivo
según su contenido de nutrientes
- Medios químicamente definidos:
Contienen cantidades precisas y bien formuladas de diversos
componentes inorgánicos y orgánicos. (se prepara y se sabe con
exactitud cuanto hay de cada componente).
-
