Manual de Practica de Parasitología

PRACTICA No. 2
MANEJO DE MUESTRAS
OBJETIVO GENERAL:
Los estudiantes de laboratorio aprenderán y pondrán en práctica las técnicas correctas para una
buena extracción, manejo y trasporte de muestras.
OBJETIVOS ESPECÍFICOS:
Los estudiantes serán capaces de:
 Saber qué tipo de muestras es necesario y como de obtiene para el estudio microbiológico
de las distintas patologías.
 Conocer los métodos de obtención de las muestras mas caracterizadas como (orina, heces,
exudados).
 Conocerán como se trasportan las muestras, y los métodos que dispone para ello.
 Indicar que tipo de muestras y sustancias orgánicas pueden ser extraídos para la muestra.
 Referir el tipo de muestras que se solicitan y para que estudios son utilizados.
MATERIAL:

 Dos pares de guantes  Cinta adhesiva (para la muestra de oxiuriasis).

 Jeringas de 5 o 3cc.  Frascos colectores de esputo. Frascos estériles y
 Dos baja lenguas y una linterna. limpios para muestras de orina y heces
 Cuatro hisopos ( cotonetes)  Bisturí. Termo con paquetes fríos
 Un par de porta y cubre objetos ( para la  Algodón e hisopos
muestra de esputo y de heces).  jabón o jaboncillo abundante agua y toallas
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 Torundas secas y con alcohol.

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DEFINICION: La toma de muestra es el conjunto de procedimientos destinados a

obtener una parte representativa cualitativamente y cuantitativamente a partir de un
todo, en nuestro caso, el paciente, es el medio ambiente.
CONSIDERACIONES GENERALES PARA LA TOMA DE MUESTRA:
1. Debemos saber QUE vamos a tomar como muestra (esputo, sangre, etc.)
2. PORQUE vamos a tomar la muestra (con fines de diagnostico, investigación)
3. COMO vamos a tomar la muestra (punción, raspado, etc.)
4. DONDE vamos a tomar la muestra (piel, faringe, etc.)
5. CUANDO vamos a tomar la muestra (ayuno, etc.)
CARACTERÍSTICAS DE UNA MUESTRA:
1. Ser obtenida del lugar donde asiente la patología.
2. Generalmente tomada de los bordes de la lesión.
3. Ser cualitativamente optima para su estudio.
4. Alcanzar cuantitativamente un volumen razonable
5. En la mayoría de los casos ser de emisión reciente.
6. En algunos casos haber sido obtenida cuando el paciente esta atravesando
determinadas instancias evolutivas de su patología.
7. Obtenida siguiendo criterios anatómicos y funcionales.
8. Perfectamente envasada, evitando recipientes que potencialmente puedan
producir contaminaciones accidentales.
9. Enviada inmediatamente al laboratorio para su estudio o si tiene que
transcurrir algún tiempo será enviada en recipientes especiales o en medios
de cultivo de transporte.
10. Obtenida con material esterilizado y en condiciones de asepsia.
PROCEDIMIENTO PARA LA TOMA DE MUESTRAS:
El frasco en el aislamiento de un germen se debe, más a menudo, a una mala toma
de muestras o a deficiencias en el transporte de las mismas que a unos fallos en las
técnicas de cultivo. Por ello, es muy importante la estudiante que vaya a realizar la
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toma de muestras esté bien informado d las normas a seguir.

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Instrucciones generales y específicas a seguir para lograr una buena toma de

muestras.
1. La toma de muestras debe realizarse antes de iniciar el tratamiento con
antimicrobianos, ya que este interfiere en la observación directa del germen, así
como en posterior aislamiento del mismo en los medios de cultivo.
2. La toma de muestras debe realizarse en los lugares donde sea más probable es
encontrar el microorganismo con la menor contaminación externa posible.
3. Recoger la muestra en el estadio de la enfermedad más apropiado.
4. Las muestras deben recoger es cantidades suficientes para permitir un examen
completo; deben colocarse en recipientes estériles y remitirse lo más pronto
posible el laboratorio.
5. Es un requisito indispensable que el laboratorio recibe la suficiente o técnicas
adecuas.
6. El personal debe rechazar las muestras que no se han recogido de forma
adecuada y los especialistas deben apoyar esta actitud.
7. Recordando:
 La toma de muestras debe realizarse antes de iniciar el tratamiento
antimicrobiano.
 Es muy importante seguir las normas necesarias para evitar la
contaminación externa.
 La cantidad debe ser suficiente y es fundamental que se utilice un recipiente.
CLASIFICACION DE LA TOMA DE MUESTRAS:
Se clasifican en:
 MUESTRAS SUPERFICIALES
 MUESTRAS DE CAVIDADES
 MUESTRAS ESPECIALES.

 MUESTRA SUPERFICIALES:
Aquí consignamos a las muestras de la piel, pelo, uñas.
1. PIEL:
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Tenemos dos posibilidades de obtener la muestra, ya sea procediendo a alzar a los

gérmenes con el asa bacteriología, por simple raspado ligero o con la ayuda de
bisturí proceder a raspar algo energéticamente los bordes de la lesión, de manera no
solo obtendremos los microorganismos sino también las capas superficiales de la
piel, esto es provechoso en el caso de ciertas determinaciones.
Finalmente puede ser que en determinados casos se pretenden nódulos los cuales
están por debajo de la piel, siendo más palpable que visibles; en este caso
procedemos también a raspar con el bisturí el lugar de la lesión llegando hasta el
nódulo de manera que una vez obtenida la pulpa, esta puede ser procesada y así
llegar a observar al microbio.
2. PELO:
También hay dos posibilidades, la primera cuando los gérmenes se hallan
localizados en el folículo piloso, en este caso será suficiente proceder a raspar la
región con el asa bacteríol6gíca previo de la zona con agua destilada, también se
podrá arrancar el pelo a fin de aislar al germen a partir del folículo piloso.
La segunda posibilidad se vera cuando el tallo del pelo este atacado (micosis) en
esta situación procederá acortar el pelo para su observación o posterior
procesamiento en cultivo.
3. UÑAS:
Se utilizan dos técnicas,
de acuerdo al sitio
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atacado. La primera se

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utiliza cuando la lesión asienta en el lecho ungueal, en esta técnica desplazamos el

asa bacteriológica, previo lavado de la región con agua destilada por el lecho
ungueal con un solo trazo firme y seguro. Si la uña se halla atacada por
microorganismos (hongos) entonces procedemos a cortar ayudados de un bisturí a
fin de continuar luego con el cultivo y el diagnostico a través de la microscopia.

 MUESTRA DE CAVIDADES:
Consignamos las muestras de mucosas, conducto auditivo externo, esputo, orina,
heces fecales.
1. MUCOSAS
El instrumento que sirve de como denominador en la obtención de estas muestras
es el hisopo, es decir un aplicada de madera que posee es uno de sus extremos un
engrosamiento de algodón y que obviamente debe ser esterilizado. Si vamos
describiendo las mucosas de arriba hacia abajo, encontramos lo siguiente:

 MUCOSAS CONJUNTIVAL
Usamos un hiposo estéril
aunque algunas escuelas
prefieren utilizar el asa
bacteriológica, luego
ubicamos la conjuntiva
infectada o aquella que
presente mayor exudado si la muestra a nivel del ángulo interno del ojo afectado. El
hisopado debe ser cuidadoso
y suave para rió producir
mayor traumatismo.
 MUCOSA NASAL
De igual forma utilizamos
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un hisopo si la lesión es

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visible a simple vista procedemos entonces a obtener la muestra, si la lesión es

mucho más interna. Entonces será necesario que un especialista la obtenga con
instrumental que nosotros ya no poseemos. Hay otras oportunidades en que es
preciso utilizar un cincel delgado y largo que podemos fabricar a partir de un
sujetador de papel (clip) el cual es convertido en alambre rectilíneo y
posteriormente aplastando uno de los extremos obtendremos un pequeño cincel,
con el cual y una vez esterilizado procedemos a raspar lesiones sospechosas.
 MUCOSA ORAL
En esta
cavidad es
sencillo
tomar
cualquier
nuestra
pues
tenemos
gran
visibilidad Allí podemos observar donde se localizan una lesión y posteriormente
utilizando el hisopo llevar a cabo la toma de muestra. Por otra parte, para fines de
investigación podemos escoger cualquier segmento de la mucosa oral puesto, que
esta posee una flora variada de microorganismos.
 MUCOSA GENITAL FEMENINA.-
Aun debemos
considerar dos
posibilidades más y son
aquellas que se
presentan en el caso de
una mujer con himen
intacto y otra que haya
tenido contacto sexual.
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En la mujer con himen

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intacto tan solo debemos esperar que las secreciones se viabilicen al exterior para
así ser obtenidas.
En la mujer desflorada utilizaremos el especulo es decir dos valvas que una vez
introducidas en el canal vaginal pueden ser separadas a voluntad, brindándonos de
esta forma un campo de acción y observación ideales luego procederemos a hisopar
las regiones escogidas, haciendo hincapié en las vecindades del orificio cervical
externo, pues allí se acumularan las secreciones.

MUESTRAS ESPECIALES
 ESPUTO.-
El esputo es la colección de secreciones patológicas provenientes del árbol
traqueo-bronquial. La muestra podemos obtenerla a través de diferentes técnicas,
entre las cuales citaremos las más importantes:
1. FORMA NATURAL DE ELIMINACIÓN DEL ESPUTO: Esta es la
técnica más utilizada, se aplica a pacientes que pueden entender y aplicar las
instrucciones que se les dé.
Entregamos al paciente un recipiente especial para esta muestra y le indicamos que
al despertara proceda a realizar un enjuague bucal con un antiséptico, luego debe
proceder a expectorar directamente dentro de recipiente, llegando a acumular por lo
menos tres esputos (flemas).
Posteriormente se sierra herméticamente el envase y deberá ser enviado a
laboratorio debidamente rotulado (nombre completo, edad y sexo) además de la
numeración correspondiente y fecha.
2. LAVADO GÁSTRICO.- Esta técnica se práctica en pacientes que no
van ha poder realizar lo anterior, los niños (por que degluten el esputo), ancianos,
enfermos mentales finalmente mujeres (por que también degluten el esputo.
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3. LAVADO TRAQUEAL.- Esta técnica consiste en instalar suero

fisiológico tibia hacia el árbol traqueo- bronquial de manera que provoquemos el
acceso de tos al despertar o excitar ese reflejo, en esa circunstancia debemos estar
bien protegidos con barbijo, gorro, mandil y guantes.
4. FORMA POSTURAL.- Este método también es útil en pacientes que no
pueden eliminar en forma espontánea la muestra.
Procedemos a colocar al paciente en decúbito ventral sobre una camilla (o cualquier
superficial que cumpla la misma función) con una almohada debajo de ala región
abdominal finalmente la cabeza queda colgado en una de los extremos la camilla al
igual que los brazos lateralmente: de esta forma por simple acción de la gravedad la
secreciones se viabilizaran al exterior, directamente al recipiente

 RECOGIDA DE ORINA. –
La toma de muestras se realizará en un frasco estéril que no deberá abrirse antes de
la recogida.
La recogida de orina puede realizarse de tres formas:
1. RECOGIDA DE LA PORCIÓN MEDIA DE LA MICCIÓN.- Es
aconsejable que la orina recogida sea de la primera hora de la mañana. El paciente
debe lavarse meticulosamente los genitales externos con agua y jabón enjugándose
finalmente con agua limpia. Iniciará la micción despreciándose la primera parte. A
continuación, y sin detener la micción, debe recogerse la segunda mitad de la
misma en un frasco estéril de unos 20, 35 m1 evitando tocara el interior o borde de
1 frasco.
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2. SONDAJE VESICAL 0 PUNCIÓN DE SONDA.- El sondaje vesical

debe utilizárselo menos posible ya que con lleva el riesgo de provocar una
infección por introducir microorganismos del exterior. Se efectuara en condiciones
de rigurosa asepsia y por personal cualificado.
El enfermo portadores de sonda permanente debe recogerse la muestra a trabes de
la sonda y nunca directamente de la bolsa.

3. PUNCION SUPRAPÚVICA. - Esta técnica permite extraer la orina

directamente de la vejiga mediante una jeringa con aguja asegurando una muestra
libre de contaminaciones. Este método puede realizarse con muy poco riesgo en
lactantes, niños y adultos con vejiga llena.
Dado que la orina es un excelente medio de cultivo para la mayor parte de las
bacterias, la muestra debe refrigerarse inmediatamente después de la extracción. A
40º C el recuadro de bacterias permanece constante durante 24 horas.
4. TÉCNICA DE RECOLECCIÓN EN 24 HORAS.- Se usa cuando la
patología esta situada en los riñones. Consiste en recolectar durante 24 horas toda la
orina eliminada de manera que aumentemos las posibilidades de coleccionar el
agente etiológico.
Características del recipiente para recolectar orina.
a. La capacidad mínima es de 250 cc.
b. Debe poseer boca ancha.
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c. Debe poseer sistema de rosca y tapa que asegure con este sistema.

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d. Debe ser estéril.

e. Debe ser construido de material susceptible de esterilización.
f. De preferencia será transparente a fin de observar ciertas características
macroscópicas.
g. Tiene que consignar el nombre, edad, sexo del paciente, además de la fecha y el
correspondiente número de registro.

 HECES FECALES.-
Tenemos dos posibilidades: heces diarreicas y heces sólidas.
1. HECES DIARREICAS.- En este caso obtenemos un volumen similar al
de una cuchara sopera lo que más o menos viene a ser una cantidad de 10 cc. Estas
muestras deben procesarse dentro de un margen de tiempo prudencial pues al
acidificarse muchos gérmenes patógenos se lisan.
2. HECES SÓLIDAS.- Se toma un volumen similar al de una pepa de
durazno.
Características del recipiente para recolectar heces fecales.
a.La capacidad mínima es de 30 ml
b. Debe poseer sistema de rosca y tapa que asegure con este sistema, o
en su defecto un tapón que asegure herméticamente.
c.En lo posible debe ser estéril, aunque se puede utilizar un envase bien
lavado.
d. Podrá ser construido de material susceptible de esterilización,
(polipropileno, policarbonato, vidrio)
e.No debe ser fabricado de cartón pues deshidrata la muestra. En último
caso se podrá utilizar recipientes de cartón parafinado.
f. Tiene que consignar el nombre, edad, sexo del paciente, además de la
fecha y el correspondiente número de registro.

 MUESTRAS ESPECÍFICAS
1. EXTRACCIÓN DE SANGRE PARA CULTIVOS:
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La técnica de extracción consta

de una serie de pasos que deben
rigurosamente, con objeto de
reducir al máximo el riesgo de
contaminación.
 Colocar una ligadura en
el antebrazo.
 Escoger la vena tocando
la piel antes de la
desinfección.
 Limpiar la piel con
alcohol (70%) sobre el
sitio de la venopuntura en un área se unos 5 cm frotando vigorosamente.
 Aplicar yodo-povidona (2 %) desde el centro hacia afuera, hasta haber
saturado todo el círculo. Se dejara que el yodo se seque, durante un minuto
como mínimo, Este tiempo es fundamental y se debe cronometrar.
 Si después de desinfectada, el flebotomista debe tocar la piel, deberá
desinfectarse los dedos que va a usar para la palpación o bien utilizar
guantes estériles.
 Se insertara la aguja en la vena a y se realizara la extracción. Se cambiaran
las agujas antes de inyectar la sangre en las botellas de cultivo.
 Después e retirar la aguja, la piel del paciente se desinfectara otra ves con
alcohol al 70% , ya que muchos enfermos son sensibles al yodo.
 Una vez inoculadas, las botellas de hemocultivos deben remitirse
inmediatamente al laboratorio para iniciar lo más pronto posible su
procesamiento.
No es aconsejable extraer sangre a través de una derivación 0 catéter, ya que estos
dispositivos pueden estará colonizados por bacterias que no están presentes en la
sangre el paciente por lo tanto, estos hemocultivos podrían dar resultados falsos
positivos.
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También se aconseja realizar la toma por debajo de las tubuladuras intravenosas ya

que la sangre tomada por encima e ella estará diluida por el líquido transfundido.
Se recomienda 3 muestras en 24 h con un intervalo entre ellas superior a 1 h.
Sin embargo se acepta 2 o 3 extracciones separadas 30 min. Cada 24h, para cada
hemocultivo, se extraerán lO ml de sangre y se inoculará a partes iguales en dos
frascos (5ml en cada uno) uno para aislamiento de gérmenes aerobios y otro para
anaerobios.

2. LIQUIDO CEFALORRAQUÍDEO:
Esta muestra se obtiene a partir de una
punción lumbar que se practica entre el
3er. Y 4to. Espacio intervertebral
lumbar.
Esta es una técnica práctica operatoria
y se la debe realizar con todos los
cuidados necesarios teniendo en cuenta
las contraindicaciones.
La cantidad necesaria es de 3 - 5ml. y
siempre se debe realizar un estudio microscópico antes de entrar al estudio
microbiológico. La presión más importante es de procesar el liquido
cefalorraquídeo dentro de un margen de tiempo mínimo desde la toma de muestra,
pues muchos gérmenes se lisan transcurrido cierto tiempo; dándonos de esta
manera un resultado negativo.
2. MUESTRA CAPILAR:
Técnica:
 Realizar la antisepsia del lugar elegido (lóbulo de la oreja, pulpejo del dedo
anular, planta del pie en lactantes.
 Funcionar con rapidez y firmeza de tal manera que ingrese toda la punta de la
lanceta.
 Descartar la primera gota.
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 Recoger la sangre que fluye libremente llenando las tres cuartas partes del
capilar.
 Presionar suavemente el lugar de punción con un algodón empapado en
alcohol.
La punción cutánea o capilar se emplea para:
 Frotis
 Micro hematocrito
 Grupo sanguíneo
 Recuento de lóbulos blancos
 Y otros.

TOMA DE MUESTRA DE SANGRE ARTERIAL

Técnica de punción
La muestra de sangre que se obtiene del paciente para realizar este tipo de
gasometría debe ser tomada directamente de una arteria. La punción se realiza
en arterias fácilmente accesibles y que tengan ramas colaterales para que, si se daña
la arteria al pincharla, se mantenga la vascularización de la zona. Normalmente se
realiza en la arteria radial. En su defecto puede utilizarse la braquial, pedia, tibial
posterior, temporal superficial (en niños) o femoral por orden de preferencia.

Los recursos materiales necesarios para realizar la punción son:

 Antiséptico
 Gasas estériles y esparadrapo
 Anestesia local tipo scandinibsa 2%
 Jeringa de insulina para la infiltración de anestesia local
 Contenedor de objetos punzantes
 Aguja y jeringa especial para gasometría (las convencionales no sirven
porque los gases atraviesan el plástico)

Se debe tomar una serie de precauciones antes de iniciar la

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intervención:

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 En pacientes sometidos a tratamiento anticoagulante, se debe mantener la

presión sobre la punción durante al menos 10 minutos
 Evitar zonas con múltiples punciones y hematomas
 Si se opta por puncionar la arteria radial se debe realizar primero la prueba
o test de Allen para comprobar el riego adecuado de la mano.
El test de Allen es un proceso que dura pocos minutos y que sirve para
comprobar si existe algún problema trombótico en la mano. Consta de los
siguientes pasos:
1. Se le pide al paciente que cierre el puño.
2. Se comprimen simultáneamente las arterias radial y cubital durante unos
segundos. La palma de la mano debe tener un color pálido, al no tener flujo
arterial.
3. Se deja de comprimir la arteria cubital y el color deberá volver a la mano del
paciente en 15 segundos aproximadamente. Si el color de la mano no se
restablece en ese tiempo, se debe elegir otro lugar para realizar la punción.
4. Estos pasos se repiten liberando la arteria radial.
Después de haber tomado las precauciones que previamente se han expuesto,
se procede a realizar la extracción de la muestra de sangre arterial:
1. Se prepara el material y se coloca al paciente en decúbito supino con la
extremidad extendida.
2. Se limpia la zona con un antiséptico y se coloca la mano en posición neutra o
en ligera extensión.
3. Tras la limpieza de la piel y utilizando guantes (no estériles) se infiltra un
mínimo de 0,3 ml del anestésico local por planos, y en la zona periférica a la
localización de la arteria a puncionar.
4. Se localiza la arteria elegida, realizar una ligera presión con el dedo
índice sobre ella que sea suficiente para percibir el latido con claridad
5. Se punciona la arteria con la aguja (unida ya a la jeringuilla) en dirección
cefálica y con una inclinación de 30-45º en relación a la superficie de la piel.
Cuando la aguja punciona la arteria se produce la aparición de sangre de
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forma pulsátil sin necesidad de realizar aspiración.

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6. Se extrae un mínimo de 1-3 ml.

7. Se retira la aguja y se comprime la zona de punción durante 5 minutos. Se
realiza con el objetivo de detener la hemorragia, la compresión no debe
producir la falta de riego.

CONCLUSIÓN. - No solo se puede obtener de los segmentos mencionados, en

determinado momento cualquier región del cuerpo humano se presta a ser tributarla
de este procedimiento.

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