INTERROGANTES
1. Esquematice las reacciones catalizadas por LDH y Succinato
deshidrogenasa, participando con la cadena respiratoria.
Actividad de la Lactato deshidrogenasa
Actividad de la Succinato deshidrogenasa
Succinato
deshidrogenasa
2. Haga una interpretación desde el punto de vista termodinámico de
los lugares donde se libera suficiente energía para producir la
síntesis oxidativa de ATP
Los lugares donde se libera suficiente energía para producir ATP son:
FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
4 4 2
4
II
I III IV
La oxidación del NADH y la
consiguientes reducción del
1/2 O2 produce -52,581
kcal de energía que es
suficiente para producir 7
ATPs; sin embargo, debido
a la disipación de esta
energía solo produce 2.5
ATPs.
La oxidación del FADH2 y la
consiguientes reducción del
1/2 O2 produce -43,356 kcal
de energía que es suficiente
para producir 6 ATPs; sin
embargo, debido a la
disipación de esta energía
solo produce 1.5 ATPs.
Cabe mencionar que los e- liberados en ambas oxidaciones
pasan por los Complejos III y IV antes de unirse al O2.
3. ¿Qué es un agente desacoplador de la fosforilación oxidativa?,
distinga los tipos de desacopladores y cite al menos dos ejemplos.
Los agente desacopladores son un grupo de sustancias que incluye a los
fenoles sustituidos (pentaclorofenol y dinitrofenol), hormonas tiroideas a dosis
tóxicas, fenilhidrazonas de cianuro de carbonilo (el carbonilcianuro-p-
trifluorometoxi-hidrazona (FCCP) y el carbonilcianuro-m-clorofenilhidrazona
(CCCP)), dicumarol, ácidos grasos de cadena larga y algunos antibióticos (como
valinomincina y gramicidina).
Tienen la propiedad de hacer permeable la membrana mitocondrial a los
protones, desvaneciendo el potencial electroquímico de protones y el
gradiente eléctrico, de esta manera, en las mitocondrias desacopladas la
energía liberada por el transporte de electrones se esparce en forma de calor.
4. Nombre al menos 4 inhibidores del transporte de electrones por la
cadena respiratoria mitocondrial.
Amital, actúa sobre el Complejo I.
Cianuro, actúa sobre el Complejo IV.
Antimicina A, actúa sobre el Complejo III.
Rotenona, actúa sobre el Complejo I.
5. ¿Qué objeto tiene usar parafina liquida en cada tubo, que sucedería
con el azul de metileno de no usar este producto?
La parafina la vaselina que impide la entrada de oxígeno a los tubos, sin la
parafina una vez que el azul de metileno se encuentre en estado reducido,
incoloro, podría volver a oxidarse, tornándose azul al agitar el tubo pues no
habría nada que aislé al oxígeno.
6. ¿Cómo es que actúa el azul de metileno, nombre otro compuesto que
tenga la misma acción?
El azul de metileno actúa como una aceptor artificial de electrones, es decir,
roba los electrones que debían ser transportados, esto es debido a su potencial
redox que lo coloca como un aceptor de H, p+ y e- a nivel de las enzimas
flavoproteícas. Otro compuesto con la misma acción es por ejemplo el 2,6
diclorofenol indofenol.
7. Interprete el esquema del consumo de oxígeno a través de su
electrodo.
D A
C B
Experimento 1:
Tubo 1: Vemos un color muy claro debido a que en este tubo tenemos
tanto sustrato como enzima, por lo que la reacción se realiza con
normalidad hasta que el azul de metileno roba los electrones y se reduce.
Tubo 2: En este tubo debido a que la enzima está desnaturalizada no se
realiza la reacción y por ende el azul de metileno permanece oxidado (azul).
Tubo 3: En este tubo debido a la presencia del alopurinol, que es un
inhibidor de la enzima, no se realiza la reacción y por ende el azul de
metileno permanece oxidado (azul).
Tubo 4: En este tubo debido a la presencia del febuxostat, que es un
inhibidor de la enzima, no se realiza la reacción y por ende el azul de
metileno permanece oxidado (azul).
Tubo 5: En este tubo la coloración es muy clara debido a que tenemos
tanto sustrato como enzima, por lo que la reacción se realiza con
normalidad, pues el cianuro no interfiere en la reacción, hasta que el azul
de metileno roba los electrones y se reduce.
Experimento 2:
Tubo 1: Vemos un color muy claro debido a que en este tubo tenemos
tanto sustrato(lactato) como coenzima (NAD+), por lo que la reacción se
realiza con normalidad hasta que el azul de metileno roba los electrones y
se reduce.
Tubo 2: En este tubo debido a que la coenzima(NAD+) no está presente la
reacción no se realiza y por ende el azul de metileno permanece oxidado
(azul).
Tubo 3: En este tubo debido a que el sustrato(lactato) no está presente la
reacción no se realiza y por ende el azul de metileno permanece oxidado
(azul).
Tubo 4: En este tubo debido a que no hay coenzima ni sustrato no se
realiza ninguna reacción y por ende el azul de metileno permanece oxidado
(azul).
Tubo 5: Vemos un color muy claro debido a que en este tubo tenemos
tanto sustrato como coenzima, por lo que la reacción se realiza con
normalidad hasta que el azul de metileno roba los electrones y se reduce.
Tubo 6: En este tubo debido a la presencia del malonato que es un
inhibidor de la enzima (succionato deshidrogenasa), no se realiza la
reacción y por ende el azul de metileno permanece oxidado (azul).
Tubo 7: En este tubo debido a la presencia del malonato que es un
inhibidor de la enzima (succionato deshidrogenasa), la reacción no debería
realizarse pero debido a que la concentración de sustrato es mayor que en
el tubo anterior se puede apreciar un ligero aclaramiento en su coloración.
Tubo 8: En este tubo debido a la presencia del malonato que es un
inhibidor de la enzima (succionato deshidrogenasa), la reacción no debería
realizarse pero debido a que la concentración de sustrato es mayor que en
el tubo anterior se puede apreciar un aclaramiento en su coloración.
