PRÁCTICA No.

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BASES MOLECULARES DE LA HERENCIA. METODOS ESTUDIOS DNA: EXTRACCIÓN
“CASERA”.

Como ya sabemos todas las características Hereditarias se transmiten de una generación a otra
a través de los Genes, o sea a través del ADN, que luego se transcribe a ARN y ambos son
Ácidos Nucleicos.

Los Ácidos Nucleicos son grandes moléculas (Macromoléculas) descubiertos por Friedrich
Miescher, quien en el año 1869 aisló de los núcleos de las células una sustancia ácida, que no
era ni lípido, ni proteína ni carbohidrato, pero tenía una elevada proporción de fósforo a la que
llamó nucleína, nombre que posteriormente, al conocer sus propiedades ácidas, se cambió a
ácido nucleído, constituidos por sub-unidades más pequeñas llamadas Nucleótidos y
Nucleósidos.

Su función biológica no quedó plenamente confirmada hasta que Avery y sus colaboradores
demostraron en 1944 que el ADN era la molécula portadora de la información genética.
Los ácidos nucleicos tienen al menos dos funciones: trasmitir las características hereditarias de
una generación a la siguiente y dirigir la síntesis de proteínas específicas.
Adenia (A)
Púricas o Purinas
Guanina (G)
-Bases Nitrogenadas
Citosina (C)
Pirimidinícas o Pirimidas Timina (T)
Uracilo (U) (ARN)
Nucleótidos -Grupo Fosfato

Desoxirribosa (ADN)
-Azúcar (Pentosa)
Ribosa (ARN)

Base Nitrogenada

Nucleósido

Azúcar (Pentosa)
AYGR15

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ADN: (Ácido Desoxirribonucleico) es un polímero de nucleótidos, una macromolécula,
conocida como la Molécula Fundamental para la Vida, molécula de la Herencia. Está presente
en toda Célula viva, y por medios químicos, transmite todas las características hereditarias.

Está formado por:

➢ Bases Nitrogenadas Púricas (Adenina y Guanina), son anillos dobles de carbono-

nitrógeno, uno hexagonal y otro pentagonal.
➢ Bases Nitrogenadas Pirimidínicas (Timina y Citosina), son anillos simples hexagonales
de carbono-nitrógeno.
➢ Una Pentosa (Azúcar) La Desoxirribosa
➢ Un Grupo Fosfato.

En dos cadenas entrelazadas, las Bases Nitrogenadas se proyectan hacia el centro de la cadena
y éstas se unen, las de un lado con la de otro mediante débiles enlaces de puentes de
Hidrógeno, de un lado una púrica y del otro una pirimidínica y/o viceversa, con Uniones
Obligatorias de A T y C G (COMPLEMENTARIEDAD DE BASES).

En Abril de 1953 James Watson y Francis Crick con la colaboración de Rosalind Franklin y
Maurice Wilkins describen la estructura del ADN, mereciendo el Premio Nobel de Medicina en
1962. Diciendo que sería similar a una escalera en forma de caracol donde los peldaños o
escalones de la escalera hacían referencia a las Bases Nitrogenadas, mientras que los
pasamanos corresponderían a los Grupos fosfatos y el Azúcar, unidos por enlaces fuertes
llamados fosfodiéster y el Azúcar se une a las Bases Nitrogenadas mediante un enlace N-
glucosídico.

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De una hebra a la otra mide 2nm, de una Base a otra 3,4 Å, cada 10 bases, cada 34 Å se produce
una vuelta completa de la doble hélice en 360º, Gira en Dextrógiro (Derecha) y/o Levógiro
(Izquierda) Pero en la conformación más común que adopta el ADN, la doble hélice es
dextrógira, girando cada par de bases respecto al anterior.

Ley de Chargaff

La relación cuantitativa de los Nucleótidos que forman la doble hélice del ADN, establece que la
cantidad de Adenina (A) es igual a la cantidad de Timina (T), y la cantidad de Citosina (C) es igual
a la cantidad de Guanina (G), esto es, por ejemplo 30% A T30% y 20%C G20%.

Características del ADN:

1- Capacidad de Autoduplicación.
2- Complementariedad de Bases.
3- Posee una doble cadena antiparalela.

Clasificación del ADN:

• Nuclear (99.9%):

➢ De Copia única o simple: Su secuencia existe una sola vez en el genoma, constituyendo
un 45% del mismo, incluye el ADN que codifica las Proteínas conocido como Exones,
esto es menos del 10% y los que no codifican se les conoce como Intrones y hasta el
momento se desconoce su función específica.

➢ Repetitivo: Son secuencias que se repiten una y otra vez en el genoma, en ocasiones
hasta miles de veces, constituyen el 55% restante, existen dos clasificaciones principales
de este ADN que son:

-Satélite: Son repeticiones en TADEM (secuencia corta de ADN que se repite consecutivamente,
una inmediatamente al final de la otra) en un locus específico de ciertos cromosomas)
Constituye alrededor del 10% del genoma y se subdivide en:
*Alfa-satélite: Con repeticiones de 171pb.
*Mini-Satélites: Con repeticiones de 20-70pb.
*Micro-Satélites: Con repeticiones de 2-4pb.

-Disperso repetitivo: Como su nombre lo dice tiende a estar disperso en todo el genoma,
Constituye alrededor del 15% y se divide en dos Grupos:
*Sines: Elementos dispersos cortos con 90-500pb.
*Lines: Elementos dispersos largos con 7000pb.

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 • Extranuclear - Mitocondrial (0.01%)

Situado en las Mitocondrias, de forma circular, con dos cadenas, una pesada y otra ligera, es
rico en Guanina y Citosina con 16,569pb organizadas en 37 Genes.

**Solo alrededor del 1,5%, menos del 5% del genoma humano consiste en exones, secuencias
de ADN que codifican proteínas (20.000 a 25.000 genes), mientras que más del 90% consiste en
ADN no codificante, denominado ADN BASURA**.

Superenrrollamiento de ADN, Empaquetamiento de ADN

El ADN mide aproximadamente 2 Metros de Longitud y como sabemos se encuentra en el

nucleó de la célula, dentro de unos corpúsculos llamados Cromosomas, para poder llegar ahí
pasa por un proceso de Enrollamiento o Empaquetamiento, pasando por distintos niveles:

1ro: Se enrolla alrededor de un núcleo proteico de unas 8 histonas para formar el

NUCLEOSOMA (Con aproximadamente 146-150pb).
2ro: Los Nucleosomas forman un SOLENOIDE HELICOIDAL (Cada vuelta del Solenoide enrolla
aproximadamente 6 Nucleosomas).
3ro: Esta estructura se pliega para formar ASAS o BUCLES de cromatina, los cuales forman el
Cromosoma.

Otro Ácido Nucleico es el ARN pero en esta ocasión no entraremos en detalles sobre él, solo
citaremos algunas diferencias con relación al ADN:

ADN ARN
*- Doble cadena, Bicatenario *- Una cadena, Monocatenario
*- Bases Nitrogenadas: *- Bases Nitrogenadas:
Adenina, Guanina, Timina y Citosina Adenina, Guanina, Uracilo y Citosina
*- Azúcar Pentosa Desoxirribosa *Azúcar Pentosa Ribosa
*- El ADN siempre se encuentra en el núcleo *- El ARN puede encontrarse tanto en el
núcleo como en el citoplasma
Experimento. Extracción casera de ADN

Materiales:

• Banana (Guineo Maduro). • Papel de Filtro.

• Agua. • 1 Vaso
• 2 pizcas de Sal. • 1 Probeta
• Alcohol Isopropílico Frío. • 1 Baja lengua
• Detergente líquido • 1 Tubo de Ensayo
(TRANSPARENTE). • 1 Gotero
• 1 Vaso de precipitado.

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Procedimiento
- Licuar la banana (Guineo) por 10 segundos en 250ml de agua y filtrarlo en el vaso
precipitado hasta conseguir 15 miligramos del licuado.
- Unir el detergente, la sal y 10ml de agua con el baja lengua sin hacer espuma y se vierte
en el filtrado, se lleva al tubo de ensayo con el gotero y se agrega el alcohol, se deja
reposar 5 minutos y aparecerá el ADN entre la mezcla y el alcohol.

Función de algunos de los Ingredientes:

• Detergente: Rompe/ Degrada la membrana celular para que el ADN quede libre en el
licuado.
• Sal: Evita que el ADN se destruya completamente (Contrarresta el efecto del
detergente).
• Alcohol Isopropílico: Hace que se precipiten las moléculas de ADN.

Extracción de ADN por métodos Profesionales

En los años 70 fueron descritas las enzimas de restricción que cortan el ADN), se clonaron
algunos genes y se iniciaron técnicas de hibridación conocidas como Souther y Northern, entre
otras…

Ya para los 80’s, en 1983 específicamente, Karry B. Mullis desarrollo una nueva técnica que hizo
posible la síntesis de grandes cantidades de ADN sin tener que clonarlo: LA PCR o Reacción en
Cadena de la Polimerasa. Esta se basa en la amplificación y replicación de un pequeño
fragmento de ADN, empleando ciclos de altas y bajas temperaturas alternadas en un aparato
llamado Termociclador.

¿Para qué extraemos ADN?

• Pruebas de paternidad
• Huella Genética
• Identificación, diagnóstico y tratamiento de enfermedades.
• Identificación de criminales
• Ingeniería Genética
• Análisis de ADN en cadáveres para identificación y otros fines