Plataformas de descubrimiento de genes para vías de mecanoseñalización de células
endoteliales
La identificación de biomarcadores para la aterosclerosis (por ejemplo, proteínas, lípidos o
ARN) es un área emergente de investigación. Mientras que las técnicas clásicas se centran en
factores individuales o pocos, el desarrollo de estrategias de alto rendimiento, es decir,
enfoques -ómicos, permite comparaciones de patrones de expresión de proteínas o perfiles
lipidómicos a un nivel amplio en un solo experimento.95 Se han realizado estudios ómicos para
caracterizar vías de señalización mecanosensibles directamente en CE de sitios arteriales 33,34
y en muchos experimentos con células cultivadas.10, 96 – 99 En CE cultivadas, 900-1800 genes
fueron regulados por diferentes niveles de flujo de fluido, mientras que los estudios realizados
in vivo muestran un menor número de genes expresados diferencialmente. Los perfiles
genéticos asociados con los genes regulados diferencialmente muestran una alta variabilidad
dependiendo de las condiciones experimentales y, lo que es más importante, de los métodos
bioinformáticos utilizados para analizar los datos.
A pesar de esta alta variabilidad, los conjuntos de datos actuales se pueden resumir con el
concepto de cebado endotelial. En este concepto, la tensión unidireccional de alto
cizallamiento confiere protección mediante una regulación positiva de las firmas genéticas
antiaterogénicas, antitrombóticas y antiinflamatorias, mientras que la tensión de cizallamiento
oscilatorio baja induce genes protrombóticos y proinflamatorios.
En consecuencia, las regiones expuestas a un bajo esfuerzo cortante están predispuestas a la
aterosclerosis y son más sensibles a los niveles altos de colesterol y a los mediadores
inflamatorios, mientras que las regiones expuestas a un alto esfuerzo cortante están
protegidas. Estudios recientes en animales intactos no ateroscleróticos confirmaron estos
estudios in vitro y sugieren que el cebado endotelial ocurre in vivo, y esta podría ser una de las
razones de la presencia de sitios de predilección.100 Se están realizando nuevos estudios
centrados en la obtención de cambios en las redes de genes en los CE durante el desarrollo de
la placa, que arrojarán nueva luz sobre cómo reaccionan los CE a una combinación de
estímulos mecánicos y un subendotelio inflamado.
Progresión y remodelación de la placa
Los sitios arteriales con placas ateroscleróticas en desarrollo se someten a una remodelación
expansiva compensatoria para mantener su diámetro luminal, un proceso que
presumiblemente normaliza el esfuerzo cortante a un nivel constante. Aunque el remodelado
compensatorio se considera como la respuesta de remodelación "clásica" durante el
crecimiento de la placa, el remodelado constrictivo (definido como la contracción del radio del
vaso) y el remodelado compensatorio excesivo (definido como la compensación excesiva que
conduce al aumento del radio) se observan en un pequeño porcentaje de arterias.
En general, la remodelación hacia el exterior conducirá a una persistencia de bajo esfuerzo
cortante, exagerando así la absorción de lípidos y la inflamación. Dado que la inflamación se ha
asociado con una remodelación externa positiva, puede contribuir a un mayor desarrollo de
placas vulnerables. Como resultado, las placas con un gran núcleo necrótico se encuentran en
ubicaciones de bajo esfuerzo cortante. Curiosamente, se han observado diferencias regionales
en las respuestas de remodelación vascular, por ejemplo, hay menos compensación para el
crecimiento de placa en las arterias de las extremidades inferiores.
Evolución de la placa después de la remodelación
Tras una mayor progresión de las placas, la remodelación positiva ya no puede compensar el
crecimiento de la placa, lo que resulta en el estrechamiento de la luz del vaso. En general, el
estrechamiento de la luz se inicia cuando la carga de placa supera el 40%. Si bien se desconoce
el mecanismo preciso que subyace a la limitación en la remodelación externa, el sangrado
intraplaca, las rupturas múltiples de placa y una extensión circunferencial de la disfunción
endotelial en el sitio de la placa se han presentado como posibles explicaciones.
Una vez que las placas ateroscleróticas invaden el lumen, las CE experimentan un cambio en el
esfuerzo cortante local, es decir, un alto esfuerzo cortante en la parte aguas arriba y un bajo
esfuerzo cortante oscilatorio en el lado aguas abajo de la placa, donde inicialmente estaba
presente un bajo esfuerzo cortante. Hay una falta de información detallada sobre si los CE que
cubren la lesión aterosclerótica avanzada siguen respondiendo a los cambios en el esfuerzo
cortante local.
Por un lado, el factor de transcripción dependiente del estrés de cizallamiento KLF2 parece
estar regulado a la baja, la comunicación cruzada entre CE a través de conexinas disminuye y la
expresión de óxido nítrico sintasa endotelial disminuye en las placas.
Por otro lado, una ocurrencia preferencial de apoptosis de CE está presente en las regiones
aguas abajo de las lesiones carotídeas humanas avanzadas. Además, los estudios de arterias
con stent sugieren que las CE que se superponen a las placas conservan la capacidad de
responder al flujo. En resumen, mientras que el inicio de la placa ocurre típicamente en
regiones de bajo esfuerzo cortante, la progresión de la placa puede ir acompañada de una
remodelación compensatoria (excesiva), manteniendo así la luz abierta y manteniendo la
exposición al bajo esfuerzo cortante de la placa.
Las placas también pueden invadir la luz, lo que resulta en la exposición a un alto esfuerzo
cortante para los CE en la región aguas arriba de la placa.
LA INFLUENCIA DE LAS FUERZAS BIOMECÁNICAS EN LA DESESTABILIZACIÓN Y RUPTURA DE
LA PLACA
Los estudios patológicos sugieren que un gran núcleo necrótico, alto contenido de macrófagos,
niveles reducidos de colágeno y una capa fibrosa delgada son las características distintivas de
la vulnerabilidad de la placa y, por lo tanto, pueden ser los precursores de la ruptura de la
placa. Sin embargo, un estudio reciente indica que solo el 5% de las placas vulnerables
identificadas (fibroateromas de capa delgada, AGCC) están asociadas con la ruptura de la placa
y sugiere que la morfología de la placa no es suficiente para predecir la ruptura de la placa.
Como los factores biomecánicos están involucrados en la ruptura de la placa, podrían ayudar a
identificar placas vulnerables.
El papel del estrés de la pared en la ruptura de la placa
Una placa se rompe si la tensión de la pared local (es decir, la tensión dentro de una lesión
aterosclerótica) excede la tensión de fractura (fuerza) de la tapa fibrosa. Tenga en cuenta que
la tensión en la pared es causada por una variedad de factores, incluida la presión arterial, la
geometría local y la composición del tejido local y es de 1 × 104 a 2 × 106 veces mayor que la
tensión de cizallamiento en el endotelio.
Además, las tensiones máximas previstas en la placa en pacientes sintomáticos son más altas
que las previstas en pacientes asintomáticos, lo que sugiere que las placas con mayor estrés
pueden ser más propensas a la ruptura y, por lo tanto, provocar eventos cardiovasculares. Por
lo tanto, el estrés biomecánico podría actuar como una herramienta útil para la evaluación del
riesgo de ruptura de placa.
Sin embargo, el valor umbral para la tensión de la pared que se utilizará para la predicción del
riesgo está actualmente en debate.128 La composición de la placa influye en la ruptura, ya que
es un determinante clave de la resistencia de la tapa. La tensión más alta de la pared se
encuentra típicamente en las áreas más delgadas de la capa fibrosa, una región que se
colocaliza con una mayor densidad de macrófagos, hemorragia intraplaca y
microcalcificaciones locales.
El papel del esfuerzo cortante bajo y alto en la desestabilización de la placa
El papel causal del bajo esfuerzo cortante en la formación de placa vulnerable se demostró
elegantemente en varios estudios en animales que imponen un bajo esfuerzo cortante en
regiones arteriales definidas. Aunque estos estudios demuestran claramente que el bajo
esfuerzo cortante modula la inflamación local y, por lo tanto, el grosor y la fuerza de la tapa, la
mayoría de estos estudios se han concentrado en relativamente pocas ubicaciones en arterias
maduras y, por lo tanto, pueden haber introducido una subestimación de la variedad de
factores mecánicos involucrados en el desarrollo de la enfermedad, como fue señalado
elocuentemente por Peiffer et al.
La noción de que las rupturas / ulceraciones de la placa se observan con mayor frecuencia en
el lado aguas arriba de las placas avanzadas ha fortalecido la idea de que el alto esfuerzo
cortante puede estar involucrado en la desestabilización de la placa aguas arriba. Además, la
composición de la placa en el lado aguas arriba de la placa es marcadamente diferente del lado
aguas abajo, es decir, acumulación y apoptosis mejorada de macrófagos, acumulación de
lípidos, hemorragia intraplaca y tapas fibrosas más delgadas.
Como resultado, las regiones de placa aguas arriba que están expuestas a un alto esfuerzo
cortante muestran una mayor tensión, una medida local para la debilidad de la placa, lo que
implica que esas regiones son más propensas a la ruptura. Los estudios in vivo sobre el papel
del esfuerzo cortante en la desestabilización de la placa confirmaron una mayor vulnerabilidad
para las regiones de placa de alto esfuerzo cortante a los 6 meses de seguimiento.
Se sabe que el alto esfuerzo cortante activa las metaloproteinasas de matriz (MMPs),
favoreciendo el adelgazamiento de la pared arterial y la remodelación excéntrica en un
modelo de fístula arteriovenosa in vivo. Si ocurre un proceso similar en la lesión aterosclerótica
avanzada, esto podría explicar una capa fibrosa delgada en las regiones de alto cizallamiento
de la estenosis. Claramente, se necesitan más estudios para investigar el posible papel causal
del alto esfuerzo cortante en la desestabilización de la placa.
