CUADERNO

Biología molecular y citogenética

Paula Isabel Galán Ramírez

1º Laboratorio clínico y biomédico
Paula Isabel Galán Ramírez
Biología molecular y citogenética
1º Laboratorio clínico y biomédico

TEMA 1
Laboratorios de biología molecular y citogenética

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Biología molecular y citogenética
1º Laboratorio clínico y biomédico

Tema 1 - Laboratorios de biología molecular y citogenética

22-09-2023

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2- Sobre la electroforesis en gel de ácidos nucleicos, reescribe en tu cuaderno las siguientes afirmaciones
con la opción correcta.
a) Se utilizan geles de agarosa o poliacrilamida.
b) Los geles de poliacrilamida tienen mayor poder de resolución y se utilizan para separar
moléculas de menor tamaño. Los geles de agarosa tienen menor poder de resolución y se
utilizan para separar moléculas de mayor tamaño.
c) Se realiza a un pH cercano a la neutralidad. En esas condiciones, los ácidos nucleicos tienen
carga neta (positiva/negativa), por lo que migran hacia el ánodo.
d) El gel se revela con un agente intercalante fluorescente y se visualiza mediante iluminación
con luz UV para detectar bandas fluorescentes.

25-09-2023

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1- Relaciona en tu cuaderno los aparatos y equipos habituales en un laboratorio de biologia molecular
que se enumeran en la columna de la izquierda con alguna característica y alguna función que se
enumeran en las columnas central y derecha.

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1- E,c 2- D,g 3- A,d 4- F,b 5- B,f 6- G,a 7- C,e

3- Explica el concepto de sala limpia y sala sucia referidos a un laboratorio de biología molecular. ¿Qué
actividades y procedimientos se pueden realizar en ellas?
El área limpia debe estar libre de ADN y el área sucia contiene ADN.
Las actividad y procedimiento que se puede realizar en el área limpia es la preparación de
reactivos. Las actividades y procedimientos que se pueden realizar en el área sucia son la
recepción o pretratamiento de muestras, la extracción y purificación de ADN, las PCR, análisis
de la calidad de PCR (electroforesis), secuenciación, hibridación, análisis forense, etc.

4- Se quiere analizar una muestra de sangre periférica de un paciente para saber si tiene una mutación
en un gen determinado, mediante amplificación por PCR y posterior secuenciación del gen
amplificado.
Dibuja en tu cuaderno un esquema del flujo de trabajo en el laboratorio de biología molecular para
analizar dicha muestra desde su recepción hasta la secuenciación.
El esquema debe incluir los siguientes conceptos (están desordenados):
PCR - Secuenciación - Recepción de la muestra - Electroforesis en gel - Preparación de la mezcla de
reacción PCR - Visualización del gel y obtención de fotografia - Extracción de ADN
¿En qué tipo de sala (limpia o sucia) se realiza cada proceso? ¿Qué equipamiento se utiliza?

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5- Elabora una lista con medidas adecuadas para evitar la contaminación ambiental cruzada y el
carryover en los laboratorios de biología molecular

27-09-2023

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6- Distribuye los aparatos y equipos enumerados en la lista que aparece a continuación en tres salas de
un laboratorio de citogenética y cultivos celulares: sala de cultivos, sala de laboratorio convencional y
sala fría.
Autoclave - Microscopio invertido - Microscopio óptico convencional de fluorescencia - Cabina de
seguridad biológica de clase II - Placa calefactora - Congelador de -80 °C - Incubador de CO2 -
pHmetro - Tanque de nitrógeno líquido - Equipo de análisis de imagen - Equipo de purificación de
agua

Sala de cultivos (limpia) Sala de laboratorio Sala fría (limpia)

convencional (sucia)

Cabina de seguridad Microscopio óptico Congelador de -80ºC

biológica de clase II convencional de
fluorescencia

Incubador de CO2 Autoclave Tanque de nitrógeno líquido

Microscopio invertido Equipo de purificación del

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agua

pHmetro

Placa calefactora

Equipo de análisis de imagen

7- En relación con la técnica aséptica en los laboratorios de cultivos celulares para impedir la
contaminación de los cultivos por microorganismos, especifica en tu cuaderno si son verdaderas o falsas
las siguientes afirmaciones. Razona las falsas.
a) Todos los procesos directamente relacionados con los cultivos celulares se realizan en el interior de
cabinas de bioseguridad de clase II.
b) Las cabinas de bioseguridad tienen que estar equipadas con un mechero Bunsen para crear un
ambiente estéril en su interior y para esterilizar el material, flameándolo antes de su uso.
c) Las superficies de las cabinas de bioseguridad se deben limpiar una vez a la semana con etanol al 70%
o con un desinfectante comercial apropiado.
d) Al iniciar la sesión de trabajo en una cabina de bioseguridad se desembala todo el material estéril que
se vaya a usar y se coloca ordenadamente sobre la superficie de trabajo de la cabina.
a) Verdadero.
b) Falso. Nunca se debe introducir mecheros Bunsen en las cabinas por las turbulencias.
c) Falso. La superficie de la cabina de bioseguridad se debe limpiar con etanol al 70% al
finalizar cada sesión de trabajo, inmediatamente después de su uso.
d) Falso. No se debe sacar el material estéril de su embalaje hasta el momento de uso,
evitando tocar con él cualquier superficie.

29-09-2023

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8- Explica cuál es el objetivo de las normas de bioseguridad y de seguridad química implantadas en los
laboratorios de biología molecular y citogenética y cultivos celulares. ¿Qué documento debe recoger
todas esas normas? Explica brevemente su contenido.
Evitar la exposición accidental del personal a agentes biológicos potencialmente peligrosos o
su liberación al medio ambiente, su almacenamiento seguro y la gestión eficiente de los
residuos que generen.
El manual de seguridad:
- Evaluación de los riesgos inherentes a cada puesto de trabajo
- Descripción y normas de utilización del equipamiento de seguridad
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- Hábitos de trabajo para minimizar los riesgos de exposición
- Normas de almacenamiento de productos químicos
- Normas para la eliminación de desechos y gestión de residuos

9- Enumera las distintas categorías de residuos tóxicos y peligrosos que se pueden generar en los
laboratorios de biología molecular y citogenética y cultivos celulares. ¿A qué categoría pertenece cada
uno de los siguientes?
Geles de poliacrilamida - Envase vacío de dATP marcado con 32P - Hoja des bisturí utilizada para
trocear un tejido animal - Placas de cultivo con crecimiento bacteriano - Geles de agarosa con bromuro
de etidio - Envase vacío de hidróxido sódico - Frasco con un cultivo celular contaminado - Filtro de
carbón activo de una cabina de extracción de gases - Envase con restos de bromuro de etidio caducado -
Cubreobjetos de cristal usados en el recuento de células - Filtro de nitrocelulosa de un Southern blot -
Envase vacío de tetrametil-urea - Un envase con carbón activo utilizado para absorber un derrame
químico

Biosanitarios Químicos Citotóxicos Radioactivos

Hoja des bisturí Envase vacío de Geles de Envase vacío de

utilizada para trocear hidróxido sódico poliacrilamida dATP marcado con
un tejido animal (contiene bromuro de 32P
etidio)

Placas de cultivo con Filtro de carbón Geles de agarosa Membrana (no filtro)
crecimiento activo de una cabina con bromuro de etidio de nitrocelulosa de
bacteriano de extracción de un Southern blot
gases

Frasco con un cultivo Un envase con Envase con restos de

celular contaminado carbón activo bromuro de etidio
utilizado para caducado
absorber un derrame
químico

Cubreobjetos de Envase vacío de

cristal usados en el tetrametil-urea
recuento de células