UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DEL ESTADO DE MÉXICO

FACULTAD DE QUÍMICA

PROBLEMARIO DE ESPECTROFOTOMETRÍA

ALUMNA: TAPIA ZEPEDA LIDIA LIZET

GRUPO: 52

DR. JORGE JAVIER RAMÍREZ GARCÍA

Espectrofotometría I
1.

a. Indique el valor de absorbancia correspondiente a un valor de T = 45.0 %.

b. Si una disolución de concentración 0.0100 M tiene una T = 45.0 % a una longitud de

onda dada, ¿cuál será el valor de transmitancia que corresponde a una disolución 0.0200
M de la misma sustancia?

Respuesta:

a. 0.347.

b. 20.25 %.

2. Se toman 15 mg de un compuesto cuya masa molar es 384.63 g.mol-1 para formar 5 mL

de disolución. Posteriormente, se toma una alícuota de 1.00 mL de dicha disolución para
diluirla en un matraz aforado de 10 mL hasta el enrase.

a. Halle la concentración de la muestra en el matraz de 5 mL.

b. Determine la concentración de la sustancia en el matraz de 10 mL.

c. La muestra de 10 mL se coloca en una celda de b = 0.5000 cm obteniéndose una

absorbancia de 0.634 a 495 nm. Determine el valor de la absortividad molar de la
sustancia a dicha longitud de onda.
Respuesta:

a. 7.80 x 10-3 M.

b. 7.80 x 10-4 M.

c. 1625.64 M-1 cm-1.

3. Una cantidad de compuesto cuya masa molar es 292.16 g.mol-1 se disuelve en un matraz
aforado de 5 mL. Se toma una alícuota de 1.00 mL de la disolución obtenida, diluyéndola
hasta 10 mL. La absorbancia de esta última disolución medida en una celda de b = 1.00
cm a 340 nm es de 0.427. La absortividad molar del compuesto a esta longitud de onda es
ε = 6130 M-1 cm-1.

a. calcule la concentración de la disolución colocada en la celda.

b. ¿cuál es la concentración de la disolución preparada inicialmente en el matraz de 5 mL?

c. ¿cuántos miligramos de compuesto fueron empleados para preparar la disolución de 5

mL?

Respuesta:
a. 6.97 x 10-5 M.

b. 6.97 x 10-4 M.

c. 1.02 mg.

4. Durante un experimento realizado para determinar la cantidad de tiamina

(vitamina B1) en un preparado farmacéutico, se leyó inadvertidamente en la escala de
transmitancia en lugar de hacerlo en la escala de absorbancia del espectrofotómetro. La
primer muestra da una lectura de T1 = 82.2 % y la segunda T2 = 50.7 % a la longitud de
onda de máxima absorbancia. ¿Cuál es la relación de concentraciones entre las
concentraciones de tiamina en ambas muestras?

Respuesta: 3.47.

5. El amoníaco puede ser determinado espectrofotométricamente mediante su

reacción con fenol en presencia de hipoclorito, dando lugar a una sustancia de color azul
que tiene su absorción máxima a 625 nm. Una muestra de 4.37 mg de proteína se digiere
químicamente para convertir en amoníaco todo el nitrógeno presente, y al final del
tratamiento el volumen de la muestra es de 100.00 mL. Una alícuota de 10.00 mL de esta
disolución se trata con 5.00 mL de fenol y 2 mL de hipoclorito de sodio, y la muestra se
diluye a 50 mL, midiéndose su absorbancia a 625 nm en una celda de 1.00 cm de espesor
después de 30 minutos. Se prepara también una disolución de referencia patrón con 1.00
x 10 -2 g de cloruro de amonio disueltos en un litro de agua; una alícuota de 10 mL de esta
disolución patrón se trata de la misma manera que la disolución problema. El blanco se
prepara usando agua destilada en lugar del problema.

PM (NH4Cl) = 53.50 g.mol-1

PA (N) = 14.006 g.mol-1

Muestra Absorbancia
Blanco 0.140
Referencia 0.308
Problema 0.582
a. Calcule la absortividad molar del producto azul.
b. Calcule el porcentaje en masa de nitrógeno en la proteína.

Respuesta:

a. 4494 M-1.cm-1.

b. 15.76 %.

6. El ión cobre (I) forma un complejo coloreado con la neocupreína el cual presenta un
máximo de absorbancia a 454 nm. Dicho complejo puede extraerse con alcohol isoamílico,
el cual no es soluble en agua. Suponga que aplica el siguiente procedimiento: 1) una roca
que contiene cobre se pulveriza y los metales se extraen con un ácido fuerte. La disolución
ácida se neutraliza con una base, y la disolución resultante se lleva a 250 mL. 2) una
alícuota de 10 mL de la misma se trata con 10 mL de agente reductor para pasar todo el
cobre a ión cuproso, agregándose 10 mL de buffer para mantener el pH en un valor
adecuado para la formación del complejo. 3) Se toman 15 mL de esta disolución, se
agregan 10 mL de neocupreína y 20 mL de alcohol isoamílico. Luego de agitar
fuertemente, las dos fases se separan y el complejo de cobre está en su totalidad en la fase
orgánica. Se mide la absorbancia de la fase orgánica a 454 nm en una celda de
1.00 cm. El blanco preparado presenta una absorbancia de 0.056.
a. Si la muestra de roca tiene un miligramo de cobre, ¿cuál es la concentración del mismo
presente en la fase orgánica?

b. Si ε = 7.90 x 103 M-1 cm-1 para el complejo, ¿cuál será el valor de absorbancia medido?

c. Si se analiza una roca diferente y se obtiene una absorbancia no corregida de 0.874

¿Cuántos miligramos de cobre hay en la roca?

PA (Cu) = 63.546 g.mol-1

Respuesta:

a. 1.57 x 10-5 M.

b. 0.180.

c. 6,58 mg.

7. El ión nitrito se emplea como conservador para el tocino y otros alimentos, generándose
una controversia con relación a su potencial efecto carcinogénico. En una determinación
espectrofotométrica de nitrito, se llevan a cabo una serie de reacciones que concluyen con
la formación de un producto coloreado con absorbancia máxima a 520 nm. El
procedimiento seguido para desarrollar color puede abreviarse de la siguiente manera:

1) a 50.00 mL de la disolución problema que contiene nitrito, se le agrega 1.00 mL de

disolución de ácido sulfamílico (reacción 1:1).

2) luego de 10 minutos, se agregan 2.00 mL de disolución de 1- aminonaftaleno (reacción

1:1) y 1.00 mL de disolución buffer.

3) 15 minutos más tarde, se lee la absorbancia a 520 nm en una celda de b = 5.00 cm.

Con esta técnica se analizan 3 soluciones:

Disolución Volumen y características Absorbancia 520
a nm
50 mL de extracto de
A alimento con cantidad 0.153
despreciable de nitritos
50 mL de extracto de
B alimento del que se 0.622
sospecha tiene nitrito
Idem que B, con el agregado
C de 10 µL de disolución de 0.967
NaNO2 7 x 10-3M

a. Calcule la absortividad molar del producto coloreado.

b. ¿Cuántos microgramos de nitrito están presentes en los 50.0 mL del extracto de

alimento B?

PM (NO2-) = 46.004 g.mol-1

Respuesta:

a. 49701.71 M-1 cm-1.

b. 4.69 μg.

8. El análisis espectrofotométrico de fosfatos puede realizarse mediante el siguiente

procedimiento:

1) se coloca la toma de muestra en un matraz aforado de 5 mL y se agregan 0.500 mL

de disolución de molibdato de sodio y ácido sulfúrico y 0.200 mL de disolución de sulfato
de hidrazina, y se diluye casi hasta el enrase con agua destilada.

2) la disolución diluida se calienta 10 minutos a 100 ºC, formándose un compuesto

azul (ácido 1,2 molibdofosfórico).

3) se enfría el matraz, se enrasa con agua destilada y se mide la absorbancia de la

disolución resultante a 830 nm empleando una celda de 1.00 cm.

a. Al analizar 0.140 mL de disolución patrón de fosfato - KH2PO4 (PM 136.09 g.mol-1)

- preparada por disolución de 81.37 mg del mismo en 500.00 mL de agua, se obtiene una
absorbancia de 0.829. Un blanco preparado en forma idéntica tiene absorbancia 0.017.
Halle la absortividad molar del producto coloreado.

b. 0.300 mL de disolución de ferritina (proteína almacenadora de hierro que contiene

fosfato) obtenidos por digestión de 1.35 mg de proteína en 1.00 mL de solvente se analiza
con este procedimiento, obteniéndose una absorbancia de 0.836. El blanco da una
absorbancia de 0.038. Halle el porcentaje en masa de fosfato en la ferritina. PM (PO 43-) =
94.972 g.mol-1

Respuesta:

a. 24251 M-1cm-1.

b. 1.16 %.
 ESPECTROFOTOMETRÍA II

1. Una toma de 25.00 mL de muestra problema que contiene hierro es analizada

tratándola con ácido nítrico y haciéndola reaccionar con un exceso de cianuro de potasio
para formar un complejo rojo. La disolución se diluye a 100.00 mL y una alícuota de la
misma es colocada en una celda de camino óptico variable. Una muestra de referencia de
10.00 mL cuya [Fe3+] = 6.80 x 10-4 M se trata de la misma forma diluyéndose a 50.00 mL y
colocándose una alícuota de la misma en una celda de 1.00 cm. La disolución problema
da la misma absorbancia que la disolución de referencia cuando se coloca en una celda de
2.48 cm. ¿Cuál es la concentración de hierro en la muestra problema?

Respuesta: 2.19 x 10-4 M.

2. La absorbancia de nitrato de cobalto (Co(NO3)2) y nitrato de cromo (Cr(NO3)3) son

aditivas sobre el espectro visible. Se decide analizar una disolución que contiene ambos
compuestos. Para ello se escoge dos longitudes de onda: 400 y 505 nm y se emplea una
celda de 1 cm para el ensayo. Los resultados son los siguientes:

A 400 = 1.167 A
505 = 0.674

Co2+ Cr2+
400 0.530 15.2
500 5.07 5.60

Calcule las concentraciones de cromo y cobalto en la mezcla problema.

Respuesta: [Cr3+] = 7.50 x 10-2 M ; [Co2+] = 5.01 x 10-2 M.

3. Se desea analizar una muestra que contiene los analitos A y B. En el laboratorio se

dispone de disoluciones patrón de ambos analitos de concentraciones exactamente
conocidas. Luego de un proceso de preparación para el análisis en que la muestra es
diluida al décimo, 1 mL de la misma se mide a 425 nm y a 580 nm en una cubeta de 1.00
cm de camino óptico, obteniéndose los datos de la tabla I. Los estándares de laboratorio
se someten al mismo procedimiento. Los resultados obtenidos aparecen en la tabla II.
Determine la concentración de A y B en la muestra.

Tabla 1 (Muestra)
Longitud de onda en nm Absorbancia
425 0.095
580 0.301

Tabla 2 (disoluciones patrón)

Analito Molaridad (M) Longitud de onda Absorbancia
425 nm 0.545
A 0.0992
580 nm 0.125
 425 nm 0.227
B 0.1023
580 nm 0.823

Tenemos la ecuación y valores:

𝑦 = 0.3622𝑥 + 0.0235

𝐶𝐴 = (0.3622 ∗ 0.1023)(10) = 0.3705𝑀

𝐶𝐵 = (0.0235 ∗ 0.0922)(10) = 0.0216

Respuesta: [A] = 2.33 X 10-2 M ; [B] = 3.71 X 10-1 M.

4. La transferrina (PM 81000 g.mol-1) y la desferrioxamina B (PM 650 g.mol-1) son

compuestos incoloros capaces de unirse al Fe3+ formando complejos coloreados en
relación 1:2 y 1:1 con longitudes de onda máximas de absorción a 470 nm y 428 nm
respectivamente. La absortividad molar de estos dos compuestos formando complejos
con hierro viene dada a dos longitudes de onda diferentes:
(M-1 cm-1)

(nm) Transferrina-2 Fe(III) Desferrioxamina-Fe(III)

428 3540 2730
470 4170 2290
a. Una disolución de transferrina presenta absorbancia de 0.463 a 470 nm en una celda
de 1.0 cm. Calcule la concentración de transferrina en mg.mL-1 y la de hierro en μg.mL-1.

b. Poco tiempo después de agregar desferrioxamina (la cual diluye la muestra) la

absorbancia a 470 nm es de 0.424 y a 428 nm es de 0.401. Calcule el porcentaje de hierro
que se halla complejado con transferrina y desferrioxiamina.

PA (Fe) = 55.847 g.mol-1

Respuesta:

a. 8.99 mg.mL-1 ; 12.40 μg.mL-1.

b. 73.65 % complejado con transferrina ; 26.35 % complejado con desferrioxamina.

5. Los espectros mostrados en la figura corresponden a disoluciones de MnO 4- 1.0 x

10-4 M, Cr2O72- 1.00 x 10-4 M y una mezcla de ambos de composición desconocida.
En la tabla se muestran las absorbancias obtenidas a diferentes longitudes de onda, halle
la concentración de cada especie en la mezcla.
(nm) MnO4- patrón Cr2O72- patrón Mezcla
266 0.042 0.410 0.756
288 0.082 0.283 0.571
320 0.168 0.158 0.422
350 0.125 0.318 0.672
360 0.056 0.181 0.366
-Tenemos la ecuación y valores:

𝑦 = 1.7537𝑥 + 0.8873

𝐶𝐴 = (1.7537 ∗ 1.00𝑥10−4𝑀) = 1.7537𝑥10−4𝑀

𝐶𝐵 = (0.8873 ∗ 1.00𝑥10−4𝑀) = 8.873𝑥10−5

Respuesta: [Cr2O72-] = 1.78 x 10-4 M ; [MnO4-] = 8.14 x 10-5 M.