TRABAJO PRÁCTICO Nº1
PARTE 1: CRECIMIENTO VEGETAL
Materia: Biotecnología Vegetal
Alumno/a: Cortez, Agostina
Carrera: Licenciatura en Biotecnología
Año: 2023
El desarrollo de una planta comprende dos etapas principales las cuales son el
crecimiento y la diferenciación. En cuanto al crecimiento se puede decir que denota
cambios en tamaño y forma fácilmente detectables y cuantificables; en cuanto a la
diferenciación, los cambios producidos son cualitativos en los que se incluyen los
cambios morfológicos y funcionales.
En el presente trabajo práctico lo que se realizó fue evaluar el crecimiento de una
planta teniendo en cuenta el área foliar de sus hojas utilizando distintos métodos
para cuantificar.
Otro parámetro de crecimiento que se utilizó fue medir según la longitud de una
misma especie en wild type y modificada (var M463), esta especie es conocida
como Cebada cuyo nombre científico corresponde a Hordeum vulgare, se les midió
la longitud cada 7 días un total de 3 veces.
OBJETIVOS
Evaluar el crecimiento de las plantas a través de la utilización de diferentes
parámetros: determinación del área foliar y mediante el uso de plantas enteras,
desde la emergencia.
Ensayo 1: ensayo utilizando plantas enteras
MATERIALES Y MÉTODOS
Materiales: Semillas de Hordeum vulgare (wt) y var M463 (deficiente en
Giberelinas), macetas, sustrato, regla.
Procedimiento:
1) Se toman dos macetas a las cuales se le agrega el sustrato (50% tierra de
jardín y 50% de sustrato inerte)
2) Seleccionar 10 semillas wt y 10 semillas var M463, y sembrarlas en cada
maceta a una cierta profundidad.
3) Regar y dejar a la luz del sol.
4) Luego de que haya emergido la planta medir la longitud de la parte aérea,
repetir esta operación semanalmente y registrarse en la tabla.
TRATAMIENTO DE LOS DATOS Y RESULTADOS
DATOS DE CRECIMIENTO. CEBADA ( Hordeum vulgare) var WILD TYPE.
Tabla Nº 1 (izquierda) registra el crecimiento en longitud a lo largo de 21 días y la tabla Nº2
(derecha) registra la relación ΔLongitud/Δtiempo o crecimiento acumulado.
ΔLongitud/
ΔLongitud Δtiempo Δtiempo
Dia 14-Dia 7 13.47 7 1.92
Dia 21-Dia 14 1.95 7 0.27
Gráfica 1: crecimiento de cebada H. vulgare WT
Gráfica 2: crecimiento acumulado H. vulgareWT
DATOS DE CRECIMIENTO. CEBADA ( Hordeum vulgare) var M463 (deficiente en
Giberelinas)
Tabla Nº 3 (izquierda) registra el crecimiento en longitud a lo largo de 21 días y la tabla Nº 4
(derecha) registra la relación ΔLongitud/Δtiempo o crecimiento acumulado.
ΔLongitud/
ΔLongitud Δtiempo Δtiempo
Dia 14-Dia 7 7.17 7 1.02
Dia 21-Dia 14 4.37 7 0.62
Gráfica 3: crecimiento de cebada H. vulgare M463
Gráfica 4: crecimiento acumulado H. vulgare M463
Ensayo 2: Determinación del área foliar de una planta
MATERIALES Y MÉTODOS
Área foliar
El área foliar es un parámetro muy utilizado en Fisiología Vegetal,
fundamentalmente en lo que se refiere a unidad de medida de intensidad
transpiratoria, actividad fotosintética, análisis de crecimiento, etc.
Este parámetro se puede obtener por los siguientes métodos:
● Método del papel.
● Método de los discos.
● Uso del Foto Planímetro (Image J).
Cabe resaltar que para determinar el área foliar de las hojas de la planta elegida,
éstas se debieron arrancar por lo que teniendo en cuenta esto, los métodos podrían
considerarse semi destructivos. Hoy en día existen dispositivos que permiten
realizar estas mediciones sin la necesidad de arrancar las hojas, pero debido a su
costo no es fácil acceder a los mismos..
1. Método del papel
a. Materiales: hojas frescas de Ombú, hojas de papel blanco, balanza de
precisión, lápiz, tijera y regla.
b. Procedimiento:
1- Se toma una hoja de papel y se traza un cuadrado de superficie de
10 cm2. Se recorta y pesa en balanza de precisión. El peso de este
cuadrado fue de 0.71 g.
2- Las hojas de las plantas seleccionadas se seccionan a nivel de las
láminas (sin pecíolo) y se adosaron sobre una hoja de papel,
marcando su contorno de manera que quede su silueta.
3- Se recortaron con una tijera, perfectamente, las figuras trazadas en
el papel y se pesaron con exactitud. El peso de cada una de estas
hojas de papel fue de 0.208 g.
4- El área foliar de la planta se calculó de acuerdo al siguiente
razonamiento:
100 cm2 ---------- 0.71 g
29.29 cm2 =X---------- 0.208 g
El área foliar de una hoja es de 29.29 cm2.
Figura 1: hojas frescas de Ombú y sus respectivas hojas dibujadas y recortadas en papel blanco.
2. Método de los discos
a. Materiales: hojas frescas de Ombú, Sacabocados, Balanza de
precisión
b. Procedimiento:
1- Se seleccionaron todas las hojas a nivel de las láminas de la planta
en estudio (5 hojas) y se registró el peso total.
2- Con la ayuda de un sacabocados de diámetro de 1.5 cm, se extrajo
de la superficie de las hojas 15 discos (3 discos por hoja), luego se
pesaron y se registraron sus datos, cada disco pesó 0.0426 g y en
total pesaron 0.64 g.
4- Se calculó el área de los discos, (ℼ . r² ) y se expresó en cm2. El
radio de cada disco es de 0.75 cm2.
5- El área foliar total se calculó de acuerdo al siguiente razonamiento:
0.0426 g ---------- 1.766 cm2
0.716 g ---------- X= 29.68 cm2
El área foliar de una hoja es de 29.68 cm2.
Figura 2: discos extraídos con sacabocados de las superficies de las hojas de Ombú.
3. Uso de Software aplicado (Programa IMAGE J)
a. Materiales: hojas frescas de Ombú, cámara de fotos (en este caso de
celulares), hoja de papel blanca, regla y computadora.
b. Procedimiento:
Para determinar el área foliar se colocaron las hojas lo más planas
posibles en un fondo blanco. Se ubicó una regla de referencia y se
tomó una foto con una cámara digital. Luego mediante la utilización del
programa Image J se determinó el área foliar.
Figura 3: imagen utilizada para el análisis de área foliar a través del software “ImageJ”
Los resultados obtenidos pueden observarse en Tabla 1, se incluyen los obtenidos
por el grupo responsable de este informe (Grupo 3) y además los datos obtenidos
por los otros grupos participantes en la realización del trabajo práctico.
Tabla Nº5: valores recolectados de las áreas de cada hoja, calculados por cada grupo.
ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Área foliar
Si bien se mencionaron previamente en la sección “Materiales y métodos” los
resultados en cuanto al área foliar de las hojas analizadas, se vuelven a resumir a
continuación de acuerdo a los tres métodos utilizados:
Método del papel: 29,29 cm2
Métodos de los discos: 29,68 cm2
Uso de software aplicado (Image J): 29,030 cm2*
Como se puede observar, los resultados no difieren significativamente entre sí. No
obstante, cabe resaltar que teniendo en cuenta la precisión, sensibilidad y exactitud,
el método más eficiente es el uso de software aplicado.
*El resultado expresado corresponde al promedio de las hojas que fueron asignadas
al grupo de trabajo número 3, cuyos participantes son responsables del presente
informe.
CONCLUSIÓN
En el presente laboratorio pudimos ponernos en contacto y aprender algunas de las
técnicas rutinarias que se desarrollan en laboratorios de biología vegetal, siendo
estas técnicas muy importantes para nuestro desarrollo si en un futuro nos
dedicamos al trabajo y/o investigación con plantas.
Por medio de la determinación de diferentes parámetros se pudo observar como con
el correr de los días las plantas se desarrollan poniendo en evidencia su
crecimiento, tanto en longitud como en el tamaño de sus hojas.
Uno de los parámetros analizados fue el de crecimiento, dónde se concluye, en el
caso de la cebada wild type, que el crecimiento máximo se alcanza entre los 15 y 17
días de realizado el experimento. A partir del día 17 este crecimiento se vuelve
menos exponencial y comienza a ser más constante. La altura máxima de esta cepa
es de unos 25 cm aproximadamente.
En contraposición con la cepa wild type, la cepa M463, tuvo un crecimiento mucho
menor, ya que la altura máxima alcanzada fue de unos 15 a 16 cm, con la diferencia
de que esta longitud fue registrada al tercer día.
Este análisis puede corroborarse mediante las gráficas de crecimiento acumulado
para ambas cepas de cebada donde, considerando que el pico máximo de
crecimiento está dado y se encuentran ambas en etapa estacionaria, la gráfica
representa la zona descendente de crecimiento, donde no significa que la planta
decrece sino que simplemente se ralentiza la velocidad de crecimiento.
Con respecto a la determinación del área foliar (otro de los parámetros analizados),
se observó que hay una mínima variación en cuanto al área medida con los tres
métodos empleados, siendo el más preciso el método computacional. Sin embargo,
no contar con este último método, si bien sofística y permite tratar un número alto de
resultados dado que estos son más precisos, no es un impedimento para poder
determinar la misma.
BIBLIOGRAFÍA
- Guia de trabajos prácticos - Módulo de fisiología vegetal para la Lic. en
Biotecnologia y Biologia Molecular (2023)
- Complemento teórico. Biotecnología Vegetal (2023)
- Clases teóricas Biotecnología Vegetal para la Lic. en Biotecnología (2023)
