Fitorremediación:
Historia, Diseño, y Aplicaciones
Pedro J. Alvarez. Ph.D., P.E., DEE
The University of Iowa
Department of Civil & Environmental Engineering
Contaminación de Suelos y de Agua Subterránea
OBJETIVO
Entender y utilizar plantas para limpiar lugares
contaminados con desechos peligrosos
(contaminación superficial de suelos por
metales y sustancias tóxicas orgánicas)
Mecanismos de Remoción
•Extracción/asimilación
•Degradación enzimática por planta
•Volatilización a través de las hojas
•Biodegradación en la rizósfera
Cortesía de Jerry Schnoor
¿Porqué Álamos?
• Son resistentes, perennes, y tolerantes a la sal y a altas
concentraciones de sustancias tóxicas
• Crecen muy rápido y se adaptan fácilmente, se localizan
desde Canadá hasta México
• Son freatófitas, y su raíz penetra hasta el manto freático
para extraer agua contaminada (1,000 galones/año)
• Crecen a partir de estacas, y retoñan si se corta el tronco
Remoción de nitrato en el agua subterránea
a través de las raices de una línea de álamos
VENTAJAS
• Costo de limpieza es relativamente bajo
• Algunos contaminantes son removidos mas rápidamente
que en otros procesos (nutrientes, metales)
• Transformación de orgánicos a productos inocuos
• Menor probabilidad de formar productos tóxicos
• Valor estético y climatico (decarbonización atmosférica)
DESVENTAJAS
• ¿Reintroducción del contaminante a la cadena alimenticia?
• Proceso de limpieza es relativamente lento comparado con
alternativas más agresivas, como excavación
• Dificultad de establecer plantas en lugares altamente
contaminados
• No funciona bien en el invierno, cuando se caen las hojas
Principales Contaminantes Tratados
Por La Fitorremediación
• Orgánicos (BTEX, HPAs, BPCs, TNT, RDX,
disolventes clorados, dioxano, pesticidas)
• Metales (Pb, Cd, Zn, Ni, Cu, As, Cr, Se,
elementos radioactivos)
• Nutrientes (nitrato, amoníaco, fosfato)
APLICACIONES
• Fitotransformación
• Biorremadiación en la rizósfera
• Fitoestabilización
• Fitoextracción
• Rizofiltración
Aplicación Medio Contaminantes
Fitotransformación T, AS, D Orgánicos
Biorremediación en la rizósfera T, D Orgánicos
Fitoestabilización T Metales, Orgánicos
Fitoextración T, D Metales
Rizofiltración D Metales, Orgánicos
T = tierra; AS = agua subterránea; D = descarga municipal ó industrial
Plantas Empleadas en la Fitorremediación
• Familia Sálix (álamos híbridos, sauce, ceiba, y
otros árboles bombáceos)
• Plantas que exudan sustratos fenólicos e inducen
enzimas microbianas (morera, manzanero,
mezquite)
• Gramáceas (cañuela, centeno, sorgo, junco)
• Leguminosas (alfalfa, trébol, caupí)
Plantas que Acumulan Metales*
Girasoles Helianthus annus
Mostaza india Brassica juncea
Crucíferas Thlaspi caerulescens
Thlaspi elegans
Violetas Viola calaminaria
Serpentinas Alyssum bertolonii
Otras: maíz, ortigas, diente de león
*Reeves, Baker, Brooks (1995) Mining Environ. Mngmnt.
Hiperacumuladoras de Metales
Defn: Acumulan metales en el tejido vegetal en
concentraciones 20-200 veces más altas
que otras plantas que crecen en la misma
tierra contaminada (Reeves et al., 1995)
Zn > 10,000 mg/kg en tejido vegetal
Cd > 100
Pb > 1,000
Se > 100
Asimilación del trazador radioactivo
por las plantas
Modelo de Asimilación
U = (TSCF) (T) (C)
U = Velocidad de asimilación del contaminante, mg/día
TSCF = “Factor de concentración en el flujo de
transpiración”,
una medida de la eficiencia de asimilación
T = Taza de evapotranspiración, L/día
C = Concentración del contaminante en el agua, mg/L
Asimilación de 14C- atrazina en tierra arenosa,
por álamos evapotranspirando 60 ml/día
Asimilación de 14C- atrazina en tierra arcillosa
Metabolitos de 14C- atrazina en tejido vegetal,
Después de 80 días
Efecto de la rizósfera de álamos (de 7 años) en
microorganismos importantes para la biorremediación
a) HETEROTROFOS TOTALES b) DESNITRIFICANTES
8.0E+10 2.0E+10
MPN por gramo de tierra
MPN por gramo de tierra
6.0E+10 1.5E+10
4.0E+10 1.0E+10
2.0E+10 5.0E+09
0.0E+00 0.0E+00
Total Heterotrophs
R S R Denitrifiers S
c) PSEUDOMONADS d) DEGRADADORES DE BTX
1.0E+09 2.0E+03
MPN por gramo de tierra
MPN por gramo de tierra
7.5E+08 1.5E+03
5.0E+08 1.0E+03
2.5E+08 5.0E+02
0.0E+00 0.0E+00
R PseudomonasS R BTX DegradersS
Mineralización de 14C- atrazina por microorganismos
ocurre más rápidamente cuando hay plantas
Estimulación de la Biodegradación del Dioxano
Por Extracto de Raíz de Álamos Híbridos
120
Concentración de Dioxano (mg/L)
100
80
Soil + CB1190
60
40 Soil +
CB1190 +
20 Root Extract
0
0 20 40 60 80 100 120
Tiempo (días)
, Aichison, Schnoor, and Alvarez (2001). Water Research. 35(16):3791-3800.
Cepas Genéticamente Modificadas para Reportar Inducción
PpF1 con fusión tod-lux
(cortesía de J.R. van der Meer)
• Fusión de gene “reportero” (Ej., lux)
con un gene catabólico (Ej., tod)
• Cuando el gene catabólico es inducido,
el gene “reportero” produce una
proteína (Ej., luciferasa) que emite
una señal (Ej., luz)
• La señal (medida con luminómetro) es
proporcional al nivel de inducción
Pseudomonas fluorescens HK44 (con fusión nah:lux)
Inducción de P. fluorescens HK44 por Salicilato
S p e c i fi c L u m i n e s e n c e (R L U / O D -5 4 6 )
25000 Salicylate Induc tion
Control
20000
15000
10000
5000
0
0 1 2 3 4 5
Time (hrs)
Adición de salicilato
Efecto del salicilato sobre bioluminiscencia
Specific luminesence
300
250
(RLU/O D546)
200
150
100
50
0
0 100 200 300
Salicylate Concentration (mg-C/L)
Efectos Negativos Potenciales
Sustratos comunes en el exudado de la
raíz (Ej., azúcar, ácidos grasos) podrian
degradarse preferentemente usando
enzimas constitutivas. Esto reprimiría la
sintesis de enzimas inducibles, que son
necesarias para degradar al
contaminante objetivo.
La represión catabólica ahorra energía
que seria usada para la síntesis de
enzimas que no son necesarias cuando
abundan los sustratos comunes.
Brock Biology of Microorganisms, 10th ed., Prentice Hall, 2002.
Experimentos de represión catabólica de nah
Control
naphthalene
naphthalene + salicylate(100)
naphthalene + acetate
naphthalene + soil Willow Extract
naphthalene + [Link] Extract
0 10,000 20,000 30,000 40,000 50,000
Spe cific lumine sce nce (RLU/OD 546)
CONSIDERACIONES PARA EL DISEÑO
• Selección de Planta(s) Apropiada(s)
• Estudio de Factibilidad en el Laboratorio
• Diseño de Patrón de Siembra
• Sistema de Irrigación, Manutención
• Radio de Captura Hidráulica/Taza de Transpiración
• Velocidad de Asimilación/Tiempo de Limpieza
• Análisis de Riesgo
Criterios para la Fitoextracción de Metales
1) Cosecha 3 toneladas (peso seco)/acre/año
2) Factor de Acumulación (FA) > 100
3) Vida Económica: 30 años
mg / kg planta
FA
mg / kg tierra
Proyectos de Demostración- Metales
Sitio y
Técnica Aplicada Plantas Contaminantes Resultados
Chernobil Girasoles Cs, 90Sr
137
90% remoción
Rizofiltración Helianthus annus en 2 semanas
(Raskin, Rutgers)
Trenton, NJ Mostaza India Pb 700400 mg/kg
Fitoextracción Brassica juncea SITE Program en un año
(Ensley, Phytotech)
Rocky Flats, Lixiviado Girasoles U, NO3- Recién comenzó
Rizofiltración Mostaza India SITE Program (Rock, EPA)
San Francisco, Tierra Mostaza India Se Se volatiza, pero
Fitovolatilización Brassica juncea la tierra sigue
contaminada
(Banuelos, USDA)
Dearing, KS , Tierra Alamos híbridos Pb, Zn, (Cd) 50% sobrevivieron,
Fitoestabilización Populus spp. > 8,000 mg/kg redujeron erosión
(Pierzynski, KSU)
Tratabilidad de Orgánicos
log Kow Mecanismos
< 1.0 Asimilación Posible y Transformación
1.0-3.5 Asimilación, Transformación, Volatización
> 3.5 Bioremediación en la Rizósfera ó
Fitoestabilización
Tasa de Transpiración
3-5 acres-ft/año
36-60 pulgadas/año
600-1000 gal/árbol (adulto)
200 gal/árbol (primeros tres años)
Barrera Hidráulica Para Interceptar La Pluma
Q = B V TCV
Captura de Dirección del flujo
la Pluma del agua subterránea
Proyectos de Demostración- Orgánicos
Sitio Plantas Contaminantes Resultados
Ogden, UT Álamos híbridos TPH, BTEX Tercer año
Tierra contaminada Populus spp. SITE Program (Ferro, Phytokinetics)
con petroquímicos
Carswell AFB, TX Álamos híbridos TCE Tercer año Pluma subterránea
Populus spp. (Harvey, WP AFB)
Milan, TN (TAAP) Alpiste TNT, RDX > 90% remoción
Drenaje plantas de estanques anaerobio/aerobio y humectantes
(Bader, Army APG)
Middletown, IA (IAAP) Plantas de estanques TNT, RDX Recién comenzó
Tierra, drenaje, río cola de gato, (Schnoor, U Iowa)
maranta, álamos
Aberdeen, MD Álamos híbridos TCE, PCA Tercer año
Pluma subterránea Populus spp. (Compton, EPA)
Futuro de la Fitorremediación
• Desechos Peligrosos • Vertederos/Lixiviados
– Pesticidas – Cobertura
– Xenobióticos volátiles – Asimilación y tratamiento de
– Municiones (TNT, RDX) lixiviados
• Drenajes y Descargas Industriales • Incentivos
– Nutrientes (N, P)
– Valor estético
– TDS/Sales
– Bajo costo
– Refinamiento y reducción de la
descarga – Estrategia práctica, robusta
y simple
La Correlación de Briggs
1
Eficiencia de Asimilación 0.8
(e.g., TSCF)
0.6
0.4
0.2
0
-1 0 1 2 3 4 5
Log Kow
PHYTOREMEDIATION
REGULATORY ISSUES
• Can it clean-up the site to below action levels?
• Does it create any toxic products?
• Is it cost-effective?
• Does the public accept the technology?
CHALLENGES AHEAD
• Screening Methodologies
(which plant for which contaminant?)
• Ultimate Fate of Contaminants
• Does it work?
CONCLUSIONS
1. Phytoremediation is an emerging technology
2. It is cost-effective and practical
3. More demonstrations are needed to prove that
it works and to understand its applications better
4. More research is needed to understand
plant/enzyme/chemical systems