UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

(Universidad del Perú, DECANA DE AMÉRICA)

FACULTAD DE QUÍMICA E INGENIERÍA QUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA

ASIGNATURA DE BIOTECNOLOGÍA

TUTORIAL Nº11

Integrantes:

Carrasco Chuica, Camila.

Martinez Navarro, Darlanne Francheska

Orellana Cuenca, Sebastian Alonso

Ing. Ruben A. Palomino Infante.

Ciudad Universitaria, junio del 2023

 TUTORIAL Nº11

Resolver problemas de Shuler y Kargi 6.1 al 6.15 solo impares.

EJERCICIO 6.1

Una fermentación discontinua simple de una bacteria aeróbica que crece en metanol dio los

resultados que se muestran en la tabla. Calcular:

a. Tasa máxima de crecimiento (μmáx)

b. Rendimiento sobre sustrato (YX/S)

c. Tiempo de duplicación de masa (td)

d. Constante de saturación (KS)

e. Tasa de crecimiento específica (neta) en t = 10 h

Tiempo (h) X (g/l) S (g/l)

0 0.2 9.23
2 0.211 9.21
4 0.308 9.07
8 0.98 8.03
10 1.77 6.8
12 3.2 4.6
14 5.6 0.92
16 6.15 0.077
18 6.2 0

Solución:

a. Calculando velocidad máxima:

1 𝑑𝑥
µ𝑛𝑒𝑡 = 𝑥 𝑑𝑡

Si µ es constantes, entonces:

𝑙𝑛𝑥 − 𝑙𝑛𝑥𝑜 = µ𝑡

Realizamos la siguiente gráfica de logaritmo de la biomasa vs tiempo:

En la gráfica anterior, aplicamos la ecuación de la recta en la región que es más lineal, por lo

cual:

ln𝑙𝑛 3.2 −ln𝑙𝑛 0.98

µ𝑚á𝑥 = 12−8

−1
µ𝑚á𝑥 = 0. 296 ℎ

b. Calculando el rendimiento sobre sustrato (YX/S)

∆𝑋 (7.44−0.24)
𝑌𝑋/𝑆 = ∆𝑆
= (11.07−0)

𝑔 𝑐𝑒𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠
𝑌𝑋/𝑆 = 0. 65 𝑔 𝑠𝑢𝑠𝑡𝑟𝑎𝑡𝑜

c. Calculando el tiempo de duplicación de masa (td)

Se aplica en la fase de crecimiento exponencial, parte de la ecuación:

ln𝑙𝑛 2 ln𝑙𝑛 2
𝑡𝑑 = µ𝑚á𝑥
= 0.296

𝑡𝑑 = 2. 34 ℎ

d. Calculando la constante de saturación (KS)

Esta se calcula cuando se agota el sustrato, lo cual ocurre en los últimos tres puntos de la

tabla.

0+0.92
𝐾𝑆 = 2
 𝐾𝑆 = 0. 46

e. Tasa de crecimiento específica (neta) en t = 10 h

1 𝑑𝑥
µ𝑛𝑒𝑡 = 𝑥 𝑑𝑡

𝑙𝑛𝑥 − 𝑙𝑛𝑥𝑜 = μ𝑡

Para el tiempo de 10 h, se tiene que:

ln𝑙𝑛 1.77 −ln𝑙𝑛 0.2

10
= µ𝑛𝑒𝑡

−1
µ𝑛𝑒𝑡 = 0. 218 ℎ

EJERCICIO 6.3

Se obtuvieron los siguientes datos para el efecto de la temperatura sobre la producción

fermentativa de ácido láctico por una cepa de Lactobacillus delbrueckii. A partir de estos

datos, calcule el valor de la energía de activación para este proceso. ¿El valor de la energía de

activación es típico de este tipo de conversión biológica?

Temperatura Constante de velocidad

(˚C) (mol/l-h)

40.4 0.0140

36.8 0.0112

33.1 0.0074

30.0 0.0051

25.1 0.0036

Solución:

De la ecuación de Arrhenius:

𝑙𝑛 ( ) (
𝐾1
𝐾2
=
𝐸
𝑅
1
𝑇2
−
1
𝑇1 )
De donde R es la constante de gases en J/mol.K, E es la energía de activación en J/mol y K es

la constante de velocidad en mol/l-h. Reemplazando datos:

𝑙𝑛 ( 0.0112
0.014 )= 𝐸
8.314
𝐽
𝑚𝑜𝑙.𝐾
( 1
313.55 𝐾
−
1
309.95 𝐾 )
𝐸 = 50082. 99 𝐽/𝑚𝑜𝑙
Aplicando la ecuación anterior para los demás datos, obtenemos la siguiente tabla:

Constant
Temperatu Temperatu e de
E (J/mol) Ln K 1/T
ra (˚C) ra (K) velocidad
(mol/l-h)
40.4 313.55 0.014 50082.99657 -4.268 0.003189284
36.8 309.95 0.0112 88395.70811 -4.491 0.003226327
33.1 306.25 0.0074 92683.9227 -4.906 0.003265306
30 303.15 0.0051 53433.52021 -5.278 0.003298697
25.1 298.25 0.0036 - -5.626 0.003352892

Del gráfico anterior, tenemos que E/R es igual a la pendiente de la recta.

𝐸 = 𝑅×8714. 8
𝐸 = 72454. 85 𝐽/𝑚𝑜𝑙
Por lo tanto, la energía de activación de este sistema es de aprox. 72 kJ/mol, que es un valor

típico para la reacción de fermentación bacteriana.

EJERCICIO 6.5

Una ingeniera bioquímica ha determinado en su laboratorio que la productividad óptima de

un antibiótico valioso se logra cuando el nutriente de carbono, en este caso melaza, se

dosifica en el fermentador a una tasa proporcional a la tasa de crecimiento. Sin embargo, no

puede implementar su descubrimiento en la planta antibiótica, ya que no existe una forma

confiable de medir la tasa de crecimiento (dX/dt) o la concentración de biomasa (X) durante

el curso de la fermentación. Se sugiere instalar un analizador de oxígeno en los fermentadores

de la planta para poder medir la OUR (tasa de consumo de oxígeno, g/l-h).

a. Derive expresiones que puedan usarse para estimar X y dX/dt a partir de OUR y datos de

tiempo, asumiendo que puede usarse un modelo simple de rendimiento y mantenimiento para

describir la tasa de consumo de oxígeno por parte del cultivo.

b. Calcule los valores de los parámetros de rendimiento (YX/O2) y mantenimiento (m O2) a

partir de los siguientes datos:

t (h) OUR (g/h) X (g/l)

0 0.011 0.60

1 0.008 0.63

2 0.084 0.63

3 0.153 0.76

4 0.198 1.06

5 0.273 1.56

6 0.393 2.23

7 0.493 2.85

8 0.642 4.15

9 0.915 5.37

10 1.031 7.59

11 1.12 9.40
 12 1.37 11.40

13 1.58 12.22

14 1.26 13.00

15 1.58 13.37

16 1.26 14.47

17 1.12 15.37

18 1.20 16.12

19 0.99 16.18

20 0.86 16.67

21 0.90 17.01

Solución:
Asumimos rendimiento simple y el modelo de mantenimiento:
µ𝑥
𝑂𝑈𝑅 = 𝑌𝑋/𝑂2
+ 𝑚𝑂2𝑥

1 𝑑𝑥
µ = 𝑥 𝑑𝑡

Reemplazando:

𝑂𝑈𝑅 =
( 1 𝑑𝑥
𝑥 𝑑𝑡 )𝑥 + 𝑚𝑂2𝑥
𝑌𝑋/𝑂2

1 𝑑𝑥
𝑂𝑈𝑅 = 𝑌𝑋/𝑂2 𝑑𝑡
+ 𝑚𝑂2𝑥

Para estimar dX/dt, tomamos la fase de crecimiento exponencial, donde:

1 𝑑𝑥
𝑂𝑈𝑅 = 𝑌𝑋/𝑂2 𝑑𝑡

𝑑𝑥 𝑂𝑈𝑅
𝑑𝑡
= 1
𝑌𝑋/𝑂2

Para estimar X, tomamos la fase estacionaria, donde:

𝑂𝑈𝑅
𝑋= 𝑚𝑂2

b. Realizamos la gráfica de los datos dados:

De la gráfica OUR vs t, la fase exponencial ocurre entre 2-9 horas, durante este periodo

encontramos μmáx ploteando Ln x vs t.

De la gráfica anterior, obtenemos la ecuación de la recta:

𝑦 = 0. 3192 𝑥 − 1. 1656
Entonces:

−1
µ𝑚á𝑥 = 0. 3192 ℎ

Ahora, graficamos OUR vs t en la región exponencial (t = 2 a 9 h), obtenemos:

De la gráfica anterior, obtenemos la ecuación de la recta:

𝑦 = 0. 1598 𝑥 + 0. 0277
Entonces:

µ
𝑚á𝑥
𝑌𝑋/𝑂2
= 0. 1598

0.1598 0.1598
𝑌𝑋/𝑂2 = µ
= 0.3102
𝑚á𝑥

𝑔 𝑑𝑤
𝑌𝑋/𝑂2 = 0. 501 𝑔 𝑂2

Para calcular mO2, consideramos la fase estacionaria (t = 19 a 21 h):

𝑂𝑈𝑅
𝑚𝑂2 = 𝑋

Tiempo (h) OUR (g/h) X (g/l) mO2

19 0.99 16.18 0.0611867
20 0.86 16.67 0.0515897
21 0.9 17.01 0.0529101

Calculando el promedio de mO2:

𝑔 𝑂2
𝑚𝑂2 = 0. 055 𝑔 𝑑𝑤.ℎ
EJERCICIO 6.7

Los siguientes datos se obtuvieron en un quimiostato para el crecimiento de E. aerogenes en

un medio de crecimiento limitado en glicerol.

D, ℎ
−1 1/D S, 1/S X, ∆S ∆S/X ∆S/X*D
dilution mg/ml, mg/ml,
rate glycerol cell
conc.

0.05 20 0.012 83.3 3.2 9.988 3.12 0.156

0.10 10 0.028 35.7 3.7 9.972 2.7 0.270

0.20 5 0.05 20 4.0 9.95 2.49 0.498

0.40 2.5 0.10 10 4.4 9.90 2.25 0.90

0.60 1.67 0.15 6.67 4.75 9.85 2.075 1.245

0.70 1.43 0.176 5.68 4.9 9.824 2.005 1.405

0.80 1.25 0.80 1.25 4.5 9.20 2.045 1.635

0.84 1.19 9.00 0.11 0.5 - - -

Para este sistema, estimar los valores de:

a. Ks, mg glicerol/ml

b. mm, h-1

c. YX/S, mg células/mg glicerol

d. ms, mg glicerol/mg célula-h

Solución:

Balance de masa celular:

µ = 𝐷 + 𝑘𝑑 (1)

Balance de masa de sustrato:

𝑀
𝐷(𝑆0 − 𝑆) = µ𝑋/𝑌𝑥/𝑠 (2)
Reemplazando (1) en (2):

𝑀
𝐷(𝑆0 − 𝑆) = (𝐷 + 𝑘𝑑)𝑋/𝑌𝑥/𝑠

𝑀
1/𝑌𝑥/𝑠 = 𝑌𝑥/𝑠 + 𝑀𝑠/𝐷

−1 −1
𝑘𝑑. ℎ 1/µ𝑔. ℎ

0.028 12.826 79.45270

0.028 7.814 45.58783

0.028 4.387 22.43243

0.028 2.337 8.58108

0.028 1.592 3.54729

0.028 1.374 2.07432

0.028 1.208 0.95270

0.028 1.152 0.57432

De la gráfica:

y = 0.148x + 1.067
 −1
1/µ𝑚 = 0. 937 ℎ

De la pendiente:

𝐾𝑠 /µ𝑚 = 0. 236 mg glicerol.h / ml

𝐾𝑠 = 0. 221 mg glicerol / ml

Producción:

Producción = − ∆𝑋/∆𝑆

− ∆𝑋 = 3. 2 para 𝑋0 = 0

∆𝑆 = 9. 988

Producción = 0. 32 mg células/mg glicerol

EJERCICIO 6.9

El etanol se utilizará como sustrato para la producción de proteínas unicelulares en un

quimiostato. Los equipos disponibles pueden alcanzar una tasa de transferencia de oxígeno de

10 g O2/l de líquido por hora. Suponga que la cinética del crecimiento celular en etanol es del

tipo Monod, con mm = 0,5 h–1, Ks = 30 mg/l, YX/S = 0,5 células/g de etanol y YO2/S = 2 g

O2/g EtOH. Deseamos operar el quimiostato con una concentración de etanol en la

alimentación de 22 g/L. También deseamos maximizar la

productividad de biomasa y minimizar la pérdida de etanol no utilizado en el efluente.

Determinar la tasa de dilución que se requiere y si se puede proporcionar suficiente oxígeno.

Solución:

Se debe obtener 𝑌𝑋/𝑂 :

2

𝑌𝑋/𝑆
𝑌𝑋/𝑂 = 𝑌
2 𝑂 /𝑆2

0.5
𝑌𝑋/𝑂 = 2
2
 𝑌𝑋/𝑂 = 0.25 g 𝑐é𝑙𝑢𝑙𝑎𝑠/𝑂2
2

Se utiliza:

𝑘𝑠
𝐷ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑜 = µ (1 − 𝑘𝑠+𝑆0
)
𝑚

Se reemplaza:

𝐷ó𝑝𝑡𝑖𝑚𝑜 = 0.481

Se determina la concentración del sustrato:

𝑘𝑠.𝐷
𝑆=
µ𝑚á𝑥− 𝐷

Se reemplaza:

𝑆 = 782. 9 ≈ 783 mg / ml

Se calcula la concentración X:

𝑘𝑠.𝐷
𝑋 = 𝑌𝑥/𝑠(𝑆0 − 𝑆) = 𝑌𝑥/𝑠 (𝑆0 − )
µ𝑚á𝑥− 𝐷

𝑋 =10608.5 mg/ml <> 10.60 g/l

El consumo de oxígeno es mayor a 10, de manera que podemos concluir que no se puede

proporcionar suficiente oxígeno si deseamos maximizar la productividad de biomasa y

reducir las pérdidas de etanol.

EJERCICIO 6.11

Los siguientes datos se obtienen en la oxidación de plaguicidas presentes en aguas residuales

mediante un cultivo mixto de microorganismos en un tanque de aireación en funcionamiento

continuo.

D(ℎ )
−1 S (Pesticides), mg/l X (mg/ml)

0.05 15 162

0.11 25 210

0.24 50 250

0.39 100 235

0.52 140 220

0.7 180 207

0.82 240 170

Suponiendo que la concentración de pesticida en la corriente de agua residual de

𝑀
alimentación es 𝑆0 = 500 𝑚𝑔/𝑚𝑙, determinar: 𝑌𝑥/𝑠, 𝑘𝑑, µ𝑚 y 𝐾𝑠.

Solución:

Se utiliza:

1 1 1
𝐴𝑃 = 𝑀 + 𝑚
𝑌𝑥/𝑠 𝑌𝑥/𝑠 𝐷 𝑠

1/D 𝐴𝑃
𝑌𝑥/𝑠 1 𝑘𝑑 1/(D/𝑘𝑑) 1/S
𝐴𝑃
𝑌𝑥/𝑠

20.000 0.33 2.99 9.653 0.0667

9.091 0.42 2.36 6.112 0.04

 4.167 0.52 1.92 3.406 0.02
0.0536
2.564 0.59 1.70 2.254 0.01

1.923 0.61 1.64 1.743 0.0071

1.429 0.64 1.56 1.327 0.0056

1.220 0.65 1.53 1.145 0.0042

1 1 𝑋
Se grafica 𝐴𝑃 vs 1/D, tomando en cuenta 𝐴𝑃 =
𝑌𝑥/𝑠 𝑌𝑥/𝑠 𝑆0−𝑆

De la gráfica:

1 𝑀
𝑀 = 1.5 → 𝑌𝑥/𝑠 = 0.67 gX/gS
𝑌𝑥/𝑠

𝑚𝑠 = 0. 08

Se obtiene:

𝑘𝑑
𝑚𝑠 = 𝑀
𝑌𝑥/𝑠

𝑘𝑑 = (0. 67)(0. 08)

 −1
𝑘𝑑 = 0. 0536 ℎ

Se sabe que:

1 1 1 𝑘𝑠
= +
𝐷+ 𝑘𝑑 µ𝑚 𝑆 µ𝑚

De la gráfica:

1 −1
= 0.7114 → µ𝑚 = 1. 41 ℎ
µ𝑚

𝑘𝑠
= 135 → 𝑘𝑠 = 154 𝑚𝑔/𝐿
µ𝑚

EJERCICIO 6.13

−1
Pseudomonas putida con µ𝑀 = 0. 5 ℎ se cultiva en un cultivo continuo en condiciones

−1
aerobias donde 𝐷 = 0. 28 ℎ . La fuente de carbono y energía en el alimento es la lactosa

con una concentración de 𝑆0 = 2 𝑔/𝐿. Se desea que la concentración de lactosa del efluente

sea 𝑆 = 0. 1 𝑔/𝐿. Si la tasa de crecimiento está limitada por la transferencia de oxígeno,

utilice la siguiente información:

𝑀 𝑀
𝑌𝑋/𝑆 = 0. 45 𝑔𝑋/𝑔𝑆, 𝑌𝑋/𝑂 = 0. 25 𝑔𝑋/𝑔𝑂2 y 𝐶 *= 8 𝑚𝑔/𝐿
2
(a) Determine la concentración de biomasa en estado estacionario (X) y la tasa específica de

( )
consumo de oxígeno 𝑞𝑂 .
2

( )
(b) Determine el valor del coeficiente de transferencia de oxígeno 𝑘𝐿𝑎 suficiente para

superar la limitación de transferencia de oxígeno (es decir, 𝐶𝐿 = 2 𝑚𝑔/𝐿).

Solución:

(a) Determine la concentración de biomasa en estado estacionario (X)

En estado estacionario:

𝑀
(
𝑋 = 𝑌𝑋/𝑆 𝑆0 − 𝑆 )
𝑋 = 0. 45 𝑔𝑋/𝑔𝑆(2 𝑔/𝐿 − 0. 1 𝑔/𝐿)

𝑋 = 0. 855 𝑔𝑋/𝐿

La concentración de biomasa X es: 0. 855 𝑔𝑋/𝐿.

Ahora, para la tasa específica de consumo de oxígeno 𝑞𝑂 : ( ) 2

µ𝑋
𝑋𝑞𝑂 = 𝑌𝑋/𝑂
2 2

µ
𝑞𝑂 = 𝑌𝑋/𝑂
2 2

Ya que, en estado estacionario 𝐷 = µ, entonces:

−1
𝐷 0.28 ℎ
𝑞𝑂 = 𝑌𝑋/𝑂
= 0.25 𝑔𝑋/𝑔𝑂2
2 2

𝑞𝑂 = 1. 12 𝑔𝑂2/𝑔𝑋. ℎ
2

Ahora, para la tasa específica de consumo de oxígeno 𝑞𝑂 es: 1. 12 𝑔𝑂2/𝑔𝑋. ℎ.

2

(b) Ahora, cuando la transferencia de oxígeno es un paso limitante de la velocidad,

entonces:

𝑇𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑡𝑟𝑎𝑛𝑠𝑓𝑒𝑟𝑒𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑑𝑒 𝑜𝑥í𝑔𝑒𝑛𝑜 (𝑂𝑇𝑅) = 𝑇𝑎𝑠𝑎 𝑑𝑒 𝑐𝑜𝑛𝑠𝑢𝑚𝑜 𝑑𝑒 𝑜𝑥í𝑔𝑒𝑛𝑜 (𝑂𝑈𝑅)

Ahora:

(
𝑂𝑇𝑅 = 𝑘𝐿𝑎 𝐶 *− 𝐶𝐿 ) ∧ 𝑂𝑈𝑅 = 𝑞𝑂 𝑋 =
2
µ𝑋
𝑌𝑋/𝑂
2

Entonces:

( )
𝑘𝐿𝑎 𝐶 *− 𝐶𝐿 =𝑞𝑂 𝑋
2

Reemplazando los datos brindados por el problema:

𝑘𝐿𝑎(8 𝑚𝑔/𝐿 − 2 𝑚𝑔/𝐿) = 1. 12 𝑔𝑂2/𝑔𝑋. ℎ × 0. 855 𝑔𝑋/𝐿

−1
𝑘𝐿𝑎 = 159. 6 ℎ

( )
El valor del coeficiente de transferencia de oxígeno 𝑘𝐿𝑎 suficiente para superar la

−1
limitación de transferencia de oxígeno es: 159. 6 ℎ .

EJERCICIO 6.15

Calcule la productividad (es decir, DP) de un quimiostato en las siguientes condiciones:

1. Suponga que se aplica la cinética de Monod. Asuma que cantidades insignificantes de

biomasa deben convertirse en producto (<1%).

2. Suponga que se aplica la ecuación de Luedeking-Piert para la formación de productos

(ecuación 6.18).

3. Suponga un estado estacionario:

• 𝐷 = 0. 8µ𝑚 •
𝑀
𝑌𝑋/𝑆 = 0. 5 𝑔𝑋/𝑔𝑆

−1
• µ𝑚 = 1. 0 ℎ • 𝑆0 = 1000 𝑚𝑔/𝐿

• 𝐾𝑠 = 10 𝑚𝑔/𝐿 •
−1
β = 0. 5 ℎ 𝑚𝑔𝑃/𝑔𝑋

• α = 0. 4 𝑚𝑔 𝑃/𝑔 𝑋

Solución:
Suponiendo la cinética de Monod en condiciones de estado estacionario, podemos calcular X,

es decir, biomasa/volumen:

𝑀 𝐾𝑠𝐷
𝑋 = 𝑌𝑋/𝑆⎡⎢𝑆0 − µ𝑚−𝐷
⎤
⎥
⎣ ⎦

Reemplazando los datos brindados por el problema:

−1
10 𝑚𝑔/𝐿×(0.8×1.0 ℎ ) ⎤
𝑋 = 0. 5 𝑔𝑋/𝑔𝑆⎡⎢1000 𝑚𝑔/𝐿 −
⎣ (1.0 ℎ−1−(0.8×1.0 ℎ−1)) ⎥⎦
𝑋 = 480 𝑚𝑔/𝐿

Considerando la ecuación de Luedeking-Piert para la formación de productos:

−1
(
𝑞𝑃 = 0. 4 𝑚𝑔 𝑃/𝑔 𝑋 × 0. 8 ℎ ) + 0. 5 ℎ−1𝑚𝑔𝑃/𝑔𝑋
𝑞𝑃 = 0. 82

Así, la productividad DP es:

𝐷𝑃 = 𝑞𝑃𝑋

𝐷𝑃 = 0. 82(480 𝑚𝑔/𝐿)

𝐷𝑃 = 384 𝑚𝑔/𝐿

Por tanto, la productividad de un quimiostato en las condiciones dadas es: 384 𝑚𝑔/𝐿
Poner dos ejemplos de incremento de entropía ambiental debido a causas naturales de

manera gráfica o con imágenes.

Figura 1

Incendio forestal en el centro poblado de Pomachaca.

Figura 2

Volcán Ubinas: albergue de Sirahuaya no estuvo operativo luego de la explosión en 2019